胃癌患者肿瘤组织管理论文

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［摘要］目的研究血管内皮细胞生长因子（VEGF）在胃癌患者血清及肿瘤组织中的表达情况，探讨其临床意义。方法应用ELISA法对60例非肿瘤疾病手术患者和60例胃癌患者术前、术后血清VEGF水平进行定量测定，并应用免疫组化法测定肿瘤组织的VEGF。结果胃癌患者术前血清VEGF高于对照组（P＞0.05）。两组术后较术前升高，肿瘤组术后较术前升高（P＜0.05）。肿瘤组术前血清VEGF水平、肿瘤组织中的VEGF与浆膜受累、淋巴结转移及临床病理分期有关。肿瘤组术后随访30～36个月中出现复发转移和死亡的患者，术前VEGF表达较其他患者升高（P＜0.05）。结论血清VEGF水平及肿瘤组织中的VEGF与胃癌的浸润、转移有关，检测血清VEGF及肿瘤组织中的VEGF对胃癌浸润、转移程度和预后的判断有重要意义。

［关键词］胃肿瘤；微转移；血管内皮生长因子

ExpressionandsignificanceofVEGFinserumandtumortissueingastriccancer

ZHOUHai-yin，LIJian，QIAOShi-ming，etal.DepartmentofGeneralSurgery，TheCentralHospitalofYangpuDistrict，Shanghai200090，China

［Abstract］ObjectiveToevaluatetheclinicalsignificanceofvascularendothelialgrowthfactor(VEGF)expressioninserumandtumortissueingastriccancerpatients.MethodsThepre-operationalandpost-operationallevelsofserumVEGFweremeasuredbyELISAkitin60casesofgastriccancerand60casesofnon-carcinomaasthecontrolgroup，theexpressionoftumortissueVEGFwasmeasuredbyimmunohistochemicalassay.ResultsThepre-operationallevelofserumVEGFingastriccancerwashigherthanthatinthecontrolgroup(P＞0.05).Thepost-operationallevelofserumVEGFwasincreasedinbothgroups，especiallyinthetumorgroup(P＜0.05).TheexpressionofVEGFinserumandtumortissuewaspositivelycorrelatedwithtumorinvasiondepth，lymph-nodemetastasisandclinicalpathologicalstage.Afollowupof30～36monthsrevealsthepre-operationallevelofserumVEGFoftumorrecurrenceanddeathinpatientswashigherthantheothersinthetumorgroup(P＜0.05).ConclusionTheexpressionofserumVEGFandtumortissueVEGFiscloselycorrelatedwithinvasionandmetastasisofgastriccancer.SerumVEGFandtumortissueVEGFassaymaybeusedtopre-operativelypredictinvasionandmetastasisandusedtoevaluateprognosis.

［Keywords］stomachneoplasm;micrometastasis;vascularendothelialgrowthfactor

肿瘤的增殖和转移是血管新生依赖性的。在肿瘤血管生成过程中，血管内皮细胞生长因子（vascularendothelialgrowthfactor，VEGF）是目前了解的功能最强大的特异性血管生长调节因子，各种转化生长因子、表皮生长因子、IL-6、IL-12、野生型P53及一些原癌基因均可上调VEGF产生促血管活性［1］，故VEGF可能为促血管活性因子的最后共同道路［2］。本研究通过对胃癌患者手术前后血清VEGF的定量测定及肿瘤标本中VEGF表达情况，探讨其与临床病理及肿瘤预后的关系。现分析报告如下。

1资料与方法

1.1一般资料选择我院普外科2002年11月～2003年5月期间住院接受手术治疗的胃癌患者60例，其中男33例，女27例，年龄35～85岁，中位年龄68岁。其中Ⅰ期8例，Ⅱ期15例，Ⅲ期34例，Ⅳ期3例。对照组选择同期住院手术的非肿瘤患者60例。

1.2方法

1.2.1血清标本采集在术前、术后第7天和术后6个月每月1次分别抽取清晨空腹静脉血3ml，离心分离血清，置于-20℃冻存待测。

1.2.2血清VEGF定量检测采用双抗体夹心ELISA法，样本中的VEGF与酶标板上的抗人VEGF单抗结合，再与结合有生物素的抗人VEGF抗体结合，经辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合，与酶底物反应染色，在492nm测定与VEGF浓度相对应的OD值。以标准品的OD值画出标准曲线，根据样品OD值在该曲线图上查出相应的VEGF含量。

1.2.3肿瘤组织VEGF检测肿瘤组织经常规固定、石蜡包埋、切片后，采用Envision二步法染色。一抗采用鼠抗人VEGF单克隆抗体。肿瘤组织VEGF以肿瘤细胞胞质内出现棕黄色颗粒为阳性。VEGF判断标准：（-）为无瘤细胞着色，（+）为着色瘤细胞数＞10%。

1.2.4统计学方法用SPSS11.0软件做统计分析，P＜0.05为差异有显著性。

2结果

2.1围手术期血清VEGF水平比较围手术期两组血清VEGF水平见表1。从表1可见，术前肿瘤组血清VEGF水平虽高于对照组，但差异无显著性（P＞0.05）。术后两组血清VEGF均较术前明显升高（P＜0.05）。肿瘤组术后血清VEGF较对照组明显增加，两组差异有显著性（P＜0.05）。

2.2肿瘤组术前血清VEGF与肿瘤临床病理参数的关系肿瘤组术前血清VEGF与肿瘤临床病理参数的关系见表2。从表2可见，肿瘤组织细胞中的VEGF表达阳性患者的血清VEGF水平虽高于表达阴性者，但差异无显著性（P＞0.05）；有淋巴结转移的患者血清VEGF水平显著高于无淋巴结转移者（P=0.003）；肿瘤侵犯浆膜的患者血清VEGF水平显著高于浆膜未受累者（P=0.037）；临床分期为Ⅲ和Ⅳ期患者血清VEGF水平显著高于Ⅰ和Ⅱ期者（P=0.029）。

注：*TNM分期根据新国际T.N.M胃癌分期转换为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期

2.3随访术后60例均得到随访，5例Ⅰ期和2例Ⅱ期患者术后未化疗而未得到术后随访时的外周血（随访至今均存活），其余53例患者有术后6个月共6次随访的血清检测结果。随访30～36个月，在53例患者中11例死亡，5例出现转移和复发，其余37例无瘤存活，死亡及转移复发的患者术前的血清VEGF水平高于无瘤存活的患者（见表3），且差异有显著性（P＜0.05）。死亡11例中7例术后VEGF持续高水平表达，5例表达量逐渐升高；5例出现复发和转移的患者，其中3例术后血清VEGF水平持续高表达，并且表达量升高；37例无瘤存活者中21例术后VEGF水平持续低表达，6例升高后转低，10例术后VEGF水平出现逐渐升高，目前正密切随访中。

3讨论

VEGF是一种特异的作用于内皮细胞的多功能因子，作为一个重要的促血管生成因子，在原位诱导血管生成的作用十分强大［3］。VEGF作为内皮细胞特异有丝分裂原刺激内皮细胞增生、促使血管渗漏、刺激细胞迁移，导致纤维蛋白原外渗进入肿瘤间质而促成肿瘤浸润组织的血管生成，从而形成肿瘤内部高密度的微血管网。VEGF还能刺激淋巴内皮细胞增生，增加肿瘤高血源性和高淋巴源扩散的风险［4］。VEGF还可通过诱导Bcl-2的表达、激活有丝分裂原活化蛋白激酶（mitogen-activatedproteinkinase，MAPK）和抑制c-JNK(c-jun-NH3-kinase）而抗肿瘤细胞凋亡。

本研究结果显示，肿瘤侵犯浆膜、有淋巴结转移、临床分期较晚的患者血清VEGF水平显著升高，提示血清VEGF水平在一定程度上反映肿瘤进展的程度。Lissoni等研究指出，晚期恶性肿瘤伴有VEGF内源性分泌增加，提示血清VEGF水平升高，则预后较差。Hyodo的研究发现，在胃肠肿瘤中，有远处转移患者的血清VEGF较无远处转移的患者明显增高，且转移患者化疗前VEGF水平低者化疗效果及生存期较升高者好。Kumar等的研究发现，结直肠癌淋巴结阳性患者的血清VEGF比阴性者明显升高。Fujisaki发现血清VEGF水平与Duke’s分期显著相关。Celen等报道诊断结直肠肿瘤VEGF的敏感性高于CEA等肿瘤标志物［5］。

术前肿瘤组血清VEGF水平虽高于对照组，但无统计学意义，术后两组血清VEGF均较术前升高，但肿瘤组较非肿瘤组更为明显，这可能与手术创伤、术后伤口生长及创面修复有关。在随访血清VEGF水平变化中，我们发现出现复发、转移及死亡组术前的血清VEGF较无瘤存活组明显升高，可以反映肿瘤病变的严重程度。复发、转移及死亡组围手术期的血清VEGF水平有升高，但差异无显著性，这可能为术前除原发肿瘤以外，微转移灶分泌入循环血中的VEGF占较大比例，手术清除了原发灶，但对于微转移灶无效，手术创伤及术后修复使VEGF水平升高，又促进了微转移灶的进一步发展，因此我们认为血清VEGF是特异性较高的微转移检测指标。

肿瘤组织中VEGF阳性表达率亦随肿瘤侵犯浆膜、淋巴结转移、临床分期进展而增加。本研究显示，血清VEGF水平和肿瘤组织中VEGF阳性表达率两者之间无显著相关，这可能与血清VEGF反映全身组织的VEGF水平，而肿瘤组织中VEGF阳性表达率仅反映局部肿瘤组织中VEGF有关。尽管如此，无论是术前血清VEGF水平或肿瘤组织中VEGF阳性表达都与肿瘤的转移、分期及预后密切相关。故检测血清VEGF是判断肿瘤分期和预报胃癌术后肿瘤复发及生存的独立指标之一［6］，定期检测血清VEGF水平的变化还可以对肿瘤治疗效果及肿瘤复发转移提供依据。

随着对VEGF研究的深入，可以设想通过VEGF和VEGF受体抗体的功能阻断，阻止肿瘤血管生成，可能成为抑制肿瘤生长和预防肿瘤转移的生物靶点之一。

［参考文献］

1HeerK，KumarH，SpeirsV.Vascularendothelialgrowthfactorinpremeropansalwomen-indicatorofthebesttimeforbreastcancersurgery.BrJCancer，1998，78(9):1203-1207.

2顾斐.血管生长抑制因子在乳腺癌的临床诊治中的应用.国外医学·外科学分册，1999，26（5）：261-264.

3DlateKH，BreierG，WeichHA，etal.Vascularendothelialgrowthfactorisapotentialtumorangiogenesisfactorinhumangliomasinvivo.Nature，1992，359(6398):845-848.

4AriiS，MoriA，UchidaS，etal.Implicationofvascularendothelialgrowthfactorinthedevelopmentandmetastasisofhumancancers.HumCell，1999，12(1):25.

5CelenO，KahramanI，YildirimE，etal.Correlationofvascularendothelialgrowthfactor(VEGF)andCEAwithclinicopathologicalvariablesincolorectalcancerpatients.Neoplasma，2004，51(4):293-299.

6CFondevila，JPMetges，JFuster，etal.p53andVEGFexpressionareindependentpredictorsoftumorrecurrenceandsurvivalfollowingcurativeresectionofgastriccancer.BritishJournalofCancer，2004，90:206-215.