儿童清肺糖浆质量标准探究论文

导语：儿童清肺糖浆质量标准探究论文一文来源于网友上传，不代表本站观点，若需要原创文章可咨询客服老师，欢迎参考。

1仪器与试药

1.1仪器

Dionex液相系统，Chromeleon色谱工作站。

1.2试药

薄层色谱用硅胶G板（青岛海洋化工厂）；所有试剂均为分析纯。对照品和对照药材（均购自天津市药品检验所）。高效液相色谱用黄芩苷对照品（中国药品生物制品检定所）；水为纯净水；甲醇为色谱纯；其它试剂为分析纯。儿童清肺糖浆（自制）。

2方法与结果

2.1鉴别

2.1.1麻黄的薄层色谱鉴别

取儿童清肺糖浆100ml，加水50ml稀释，转移至分液漏斗中，用浓氨试液调节pH值至10，用三氯甲烷振摇提取2次，50ml/次，合并三氯甲烷液，水浴蒸干，残渣加甲醇1ml溶解，滤过，滤液作为供试品溶液。另取缺麻黄的阴性制剂同法制备阴性对照液。再取麻黄对照药材粉末1g，加浓氨试液数滴，再加三氯甲烷10ml，加热回流1h，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇2ml溶解，滤过，滤液作为对照药材溶液。又取盐酸麻黄碱对照品，加甲醇制成每毫升含1mg的对照品溶液。照薄层色谱法试验［1］，吸取供试品溶液和阴性对照液各20μl，对照药材溶液10μl，对照品溶液5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷－甲醇－浓氨试液（20∶5∶0.5）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以茚三酮试液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材及对照品色谱相应的位置上，显相同颜色斑点。阴性对照无干扰。结果见图1。

2.1.2浙贝母的薄层色谱鉴别

取麻黄薄层色谱鉴别项下供试品溶液作为供试品溶液。另取缺浙贝母的阴性制剂同法制备阴性对照液。又取浙贝母对照药材粉末5g，加浓氨试液2ml与乙醚20ml，放置过夜，滤过，取滤液8ml，蒸干，残渣加三氯甲烷1ml使溶解，作为对照药材溶液。再取贝母素甲对照品、贝母素乙对照品，加三氯甲烷制成每毫升各含2mg的混合对照品溶液。照薄层色谱法试验［1］，吸取上述供试品溶液和阴性对照液各20μl，对照药材溶液和对照品溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以醋酸乙酯－甲醇－浓氨试液（17∶2∶1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以稀碘化铋钾试液。供试品色谱中，在与对照药材及对照品色谱相应的位置上，显相同颜色斑点。阴性对照无干扰。结果见图2。

2.1.3石菖蒲的薄层色谱鉴别

取儿童清肺糖浆100ml，加水50ml稀释，转移至分液漏斗中，用乙醚振摇提取2次，50ml/次，合并乙醚液，挥干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取缺石菖蒲的阴性制剂同法制备阴性对照液。又取石菖蒲对照药材粉末1g，加石油醚（60～90℃）10ml，超声处理10min，滤过，滤液作为对照药材溶液。照薄层色谱法试验［1］，吸取上述供试品溶液和阴性对照液各10μl，对照药材溶液5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚（60～90℃）－醋酸乙酯（8∶2）为展开剂，展开，取出，晾干，放置约1h，以碘蒸气薰至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色斑点。阴性对照无干扰。结果见图3。

2.1.4黄芩的薄层色谱鉴别

取儿童清肺糖浆30ml，用水30ml稀释，加于AB-8型大孔吸附树脂柱（25ml，内径1.5cm）上，用水100ml洗脱，弃去水液，再用50%乙醇100ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取缺黄芩的阴性制剂同法制备阴性对照液。又取黄芩对照药材粉末1g，加醋酸乙酯-甲醇（3∶1）的混合溶液30ml，加热回流30min，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇5ml使溶解，取上清液作为对照药材溶液。再取黄芩苷对照品，加甲醇制成每毫升含1mg的对照品溶液。照薄层色谱法试验［1］，吸取上述供试品溶液、阴性对照液、对照药材溶液和对照品溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以醋酸乙酯－丁酮－甲酸－水（5∶3∶1∶1）为展开剂，预饱和10min，展开，取出，晾干，喷以1%三氯化铁乙醇试液。供试品色谱中，在与对照药材及对照品色谱相应的位置上，显相同颜色斑点。阴性对照无干扰。结果见图4。

2.1.5橘红的薄层色谱鉴别

取黄芩薄层色谱鉴别项下供试品溶液作为供试品溶液。另取缺橘红的阴性制剂同法制备阴性对照液。又取橘红对照药材粉末0.3g，加甲醇10ml，加热回流20min，滤过，取滤液5ml，浓缩至1ml，作为对照药材溶液。再取橙皮苷对照品，加甲醇制成饱和对照品溶液。照薄层色谱法试验［1］，吸取上述供试品溶液、阴性对照液、对照药材溶液和对照品溶液各5μl，分别点于同一用0.5%氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板上，以醋酸乙酯－甲醇－水（100∶17∶13）为展开剂，展开约3cm，取出，晾干，再以甲苯－醋酸乙酯－甲酸－水（20∶10∶1∶1）的上层溶液为展开剂，展至约8cm，取出，晾干，喷以三氯化铝试液，置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材及对照品色谱相应的位置上，显相同颜色荧光斑点。阴性对照无干扰。结果见图5。

2.2黄芩的含量测定

2.2.1对照品溶液的制备

精密称取黄芩苷对照品适量，加甲醇制成每毫升含60μg的溶液，作为对照品溶液。

2.2.2供试品溶液的制备

精密量取本品2ml，置50ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，经0.45μm微孔滤膜滤过，取续滤液，即得。

2.2.3阴性对照溶液的制备

取按处方量及制法工艺要求制成的不含黄芩的阴性对照品，同法制成阴性对照溶液。

2.2.4色谱条件

色谱柱为DiamonsilC18（4.6mm×250mm，5μm）柱；以甲醇－水－磷酸（44∶56∶0.2）为流动相；检测波长280nm；流速1.0ml/min；柱温30℃；进样量10μl。理论板数按黄芩苷峰计算应不低于2500。

按上述色谱条件，吸取供试品溶液、对照品溶液、阴性对照溶液各10μl，分别注入液相色谱仪测定，测定色谱图见图6～8。从色谱图可见，其它成分对黄芩苷的测定无干扰，符合测定要求。

2.2.5标准曲线制备

分别精密吸取上述对照品溶液1.0，2.5，4.0，5.0，6.0，7.5ml置10ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀。各进样20μl，以色谱峰面积为纵坐标（Y），对照品进样量（μg）为横坐标（X），进行线性回归，得回归方程为Y=30.5618X-0.7087，r=1.0000。结果表明：在0.1304～0.9780μg范围内黄芩苷峰面积与进样量有良好的线性关系。

2.2.6精密度实验

精密吸取上述供试品溶液10μl，重复进样6次，测得黄芩苷峰面积RSD为0.27%，表明进样精密度良好。

2.2.7稳定性实验

取供试品溶液在0，2，4，8，12，24h分别进样10μl，测得黄芩苷峰面积RSD为0.30%，表明样品溶液在24h内稳定。

2.2.8重现性实验

取同一批号样品（050801）按供试品项下的制备方法制备供试品溶液6份，测得黄芩苷峰面积并计算含量，RSD为0.84%，表明该方法的重现性良好。

2.2.9回收率实验

采用加样回收法，精密量取同一批号样品（050801）6份，每份1ml，分别按样品中黄芩苷含量的100%加入黄芩苷对照品溶液，按供试品项下的制备方法制备供试品溶液，按上述色谱条件测定，计算得回收率为99.65%，RSD为1.03%，结果见表1。表1黄芩苷回收率结果（略）

2.2.10样品测定分别取3批样品，按供试品制备方法制成供试品溶液，分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，按上述色谱条件测定（n=3），计算样品中黄芩苷的含量，结果见表2。表2样品中黄芩苷的含量（略）

3讨论

本品处方源于药典方，原剂型为大蜜丸，属儿童口服用药，口感差，且不利于儿童服用。改为糖浆剂型后，改善了口感，便于服用，成为更理想的儿童用药。

本制剂处方由22味中药组成，成分复杂，鉴别易产生干扰。为了更好地控制成品的质量，笔者不同于2005年版《中国药典》，又增加了3种药材的鉴别。经3批样品试验证明，该薄层鉴别方法斑点分离清晰，重复性好，阴性对照无干扰，可作为该制剂的质量控制的方法。

【参考文献】

［1］国家药典委员会．中国药典，Ⅰ部［S］.北京：化学工业出版社，2005.

【摘要】目的建立儿童清肺糖浆的质量标准。方法采用TLC法对儿童清肺糖浆中麻黄、浙贝母、石菖蒲、黄芩、橘红进行了定性鉴别；采用HPLC法测定黄芩苷的含量，为儿童清肺糖浆的质量控制提供依据。结果定性鉴别方法专属性强。在0.1304～0.9780μg范围内黄芩苷峰面积与进样量线性关系良好，r=1.0000；样品平均加样回收率为99.65%（n=6），RSD为1.03%。结论所建立的方法准确可行，重复性好，可有效控制儿童清肺糖浆的质量。

【关键词】儿童清肺糖浆质量标准黄芩苷高效液相色谱法