到手香水提液研究论文

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1材料

1.1药材及水提液的制备和挥发油的提取到手香，2001年引种于阳西县原中山医科大学药材基地，在中山大学校园内繁殖。到手香水提液最大浓度浓缩液（稠膏）的制备：取到手香地上部分，晾干剪碎后，精密称取碎叶,加一定体积蒸馏水，浸泡后加热煮沸提取，冷却后用双层纱布过滤，滤渣用蒸馏水清洗3次并过滤，弃去滤渣，合并滤液。滤液再用布氏漏斗垫双层滤纸抽滤，得到滤液为到手香水提液。在温度为70℃、压力为-0.08MPa、转速为60r/min的条件下，减压蒸馏浓缩至最大浓度稠膏，并保证稠膏不会凝结，得到到手香水提液最大浓度浓缩液（稠膏）［3］，浓度为4.706g/ml。供小鼠最大耐受量实验用。挥发油的提取：取到手香地上部分，晾干剪碎后，精密称取碎叶50.0g于1000ml蒸馏瓶中，加入600ml蒸馏水，按《中国药典》规定的方法挥发油测定法［4］提得黄色油状物,出油率为1.2%。取挥发油适量,用食用油稀释至各个浓度，供霍恩氏法LD50测定用。

1.2动物昆明小鼠，体重18～22g，普通级标准，合格证号：粤检证字第2003A030号，由原第一军医大学(现更名为南方医科大学)实验动物中心提供。

2方法

2.1到手香水提液急性毒性实验（最大耐受量测定）选择健康昆明小鼠，体重在18～22g共20只，雌雄各半，按性别分两组，每组10只，称重和标记，分开饲养，实验前和实验的观察期内，均按正常饲料条件饲养。

灌胃给药：灌胃给药小鼠1次，0.8ml/20g（到手香水提液浓度4.706g/ml）。连续观察14d，详细记录动物的反应情况，包括饮食、运动状况、排泄状况等各个指标，计算出总给药量（折合生药量g/kg）。

2.2到手香挥发油急性毒性实验（霍恩氏法LD50测定）选择健康昆明小鼠20只，体重18～22g，称重、标记，随机分4组，每组5只，雌雄分别为2，3只。各组小鼠分别灌胃给药0.4ml/20g（给药前禁食16h，不禁水）。给药后连续观察7d，详细记录动物的反应情况，包括饮食、运动状况、排泄状况、死亡时间及当时状况等各个指标［5］。

到手香挥发油浓度：用食用油将到手香挥发油稀释至各个浓度：0.05，0.1075，4.65，10.0ml/ml，给药剂量递增比为1013=2.15，分别为1.0，2.15，4.62，10.0ml/kg。

3结果

3.1到手香水提液急性毒性实验（最大耐受量测定）小鼠雌雄各10只给药后，蜷缩少动，但很快就恢复正常，小鼠无其它异常行为，7d无小鼠死亡，且各方面状态正常，体重增至24～28g，14d后亦无死亡，且各方面状态正常，体重增至32～37g，将小鼠处死，解剖观察，未见脑、心、肝、肺、脾、肾、胃、肠有肉眼可见的明显异常，毛色正常。结果见表1。表1到手香水提液最大耐受量实验结果（略）

小鼠对到手香水提物（折算为生药量）最大耐受量：4.706g/ml×0.8ml/20g=188.2g/kg。

3.2到手香挥发油急性毒性实验（LD50测定）第1组、第2组各有一只在第2天死亡，其余4只除在前两天活动略为减缓外，各项指标均正常，且7d后亦无死亡；第3组在两天内全部死亡，第4组在3h内全部死亡（结果见表2）。后两组动物在给药后蜷缩少动，进食饮水都大为减少，甚至不进食不饮水，直至死亡未见有挣扎等任何动作，死亡后解剖观察动物，未见脑、心、肝、肺、脾、肾、胃、肠有肉眼可见的明显异常，毛色亦正常。

查霍恩氏法LD50值计算用表（剂量递增法测定LD50值计算用表A1），剂量1＝1.00ml/kg、剂量2＝2.15ml/kg，剂量3＝4.65ml/kg，剂量4＝10.0ml/kg，组1，组2，组3，组4死亡动物数为1，1，5，5，对应的LD50值为2.37ml/kg，可信限为1.42～3.95ml/kg。按到手香挥发油提取率1.2%折算为生药，则小鼠对到手香挥发油（折算为生药）LD50为197.5g/kg，可信限为118.3～329.2g/kg。

4讨论

小鼠对到手香水提液（折算为生药量）最大耐受量：188.2g/kg，对动物无明显急性毒性。按照20g小鼠与70kg人的体表面积之比为：387.9（山东中药学院《中药药理学实验讲义》1994），转换成人对到手香水提物（折算为生药量）最大耐受量：1460.1g/70kg，因此可以初步推断，对人来说到手香水提物无明显急性毒性。

霍恩氏法测定小鼠对到手香挥发油LD50值为：2.37ml/kg，可信限为1.42～3.95ml/kg。转换成人对到手香挥发油（折算为生药量）LD50为：18.39ml/70kg，说明到手香挥发油对人也有一定的毒性。表2到手香挥发油急性毒性正式实验数据（略）

到手香作为一个在国内没有收录而民间有使用的药用植物，对其毒理学研究，包括水提液急性毒性实验（最大耐受量测定）和挥发油急性毒性实验（LD50测定），可为到手香使用提供安全的实验数据，对到手香的实际应用有着重要的意义。同时这是对到手香进行进一步研究与药效学研究提供理论基础和科学依据。

【参考文献】

［1］郭华仁，应绍舜.未见引种记录的东南亚观赏植物种源［J］.台湾之种苗，1995，24（1）：26.

［2］中华人民共和国国家标准.GB：15193.3.

［3］王世清，郑芸.金铁锁的显微和理化鉴定研究［J］.中国民族民间医药杂志，2002，11（6）：351.

［4］国家药典委员会，中国药典［S］.北京：化学工业出版社，2000：64.

［5］宁立人，洪恂.现代中药学大辞典［M］.北京：人民卫生出版社，2001：392.

【摘要】目的对到手香进行毒理学研究，包括到手香水提液急性毒性实验和到手香挥发油急性毒性实验。方法将到手香水提液以最大浓度4.706g/ml，最大剂量0.8ml/20g对小鼠灌胃给药，测定到手香水提液对小鼠的最大耐受量。采用霍恩氏（Horn）法，将小鼠随机分4组，按1.0，2.15，4.62，10.0ml/kg剂量对小鼠灌胃给药，测定到手香挥发油对小鼠半数致死量。结果到手香水提液（折算为生药量）对小鼠最大耐受量：188.2g/kg，到手香挥发油对小鼠LD50为：2.37ml/kg。结论到手香水提液对小鼠无明显急性毒性，到手香挥发油对小鼠有一定的急性毒性。

【关键词】到手香急性毒性最大耐受量半数致死量