桤叶唐棣组培快繁生产技术分析

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桤叶唐棣是蔷薇科唐棣属一种落叶小乔木或灌木，原产于北美洲从阿拉斯加中部到科罗拉多的落基山脉地区。其果实为浆果状梨果，含有多种营养成分，可称之为高钙植物。果实可加工或鲜食，主要用于酿酒、食品、药品等。其树型美观大方，花、果颇为俏丽，具有一定的观赏价值，可作为园林绿化树种栽培。研究以桤叶唐棣腋芽为外植体，通过组织培养快繁技术，在较短时间内达到了高效诱导外植体分化增殖和高质量保证幼苗成活的目的，并且保存了母体的全部优良性状，遗传性状稳定。

1试验材料与方法

1．1无菌体系建立。以70％乙醇（消毒时间为20s与30s）为表面消毒剂，分别加入5％次氯酸钠（灭菌时间为15min与30min）、10％次氯酸钠（灭菌时间为10min与20min）和0．1％升汞（灭菌时间为6min与10min）为浸泡消毒剂，接种100瓶，共设12个处理（见表1）。采用MS培养基为基础培养基，附加少量植物生长调节剂IBA、6－BA，培养条件为蔗糖3％，琼脂0．65％，温度22～25℃，光强2000lx，光照14h／d。定期观察结果。1．2试管苗初代培养。将切取带腋芽的茎段在无菌条件下接种到以MS为基础培养基，附加0．1～1．0mg／L浓度的6－BA和0．05mg／L浓度的IBA的诱导培养基中，重复100次随机取50次未污染的茎段，共10个处理（见表2），培养条件为蔗糖3％，琼脂0．65％，温度22～25℃，光强2000lx，光照14h／d，定期观察腋芽分化状况。1．3试管苗继代培养。选取腋芽培养分化后的试管苗，在无菌环境下接种到以MS为基础培养基，附加0．2～1．0mg／L浓度的6－BA和0．05～0．1mg／L浓度的IBA的继代培养基中。每种培养基设计接种10瓶，每瓶接种3株试管苗。共10个处理（见表3），培养条件为蔗糖3％，琼脂0．65％，温度22～25℃，光强2000lx，光照14h／d，定期观察腋芽分化状况。1．4试管苗生根培养。选取继代培养中生长健壮芽，在超净台上分离成单芽后，转接到以1／2MS为基础培养基，附加植物激素IBA不同浓度的6种培养基中（见表4）。培养条件为蔗糖2％，琼脂0．65％，温度22～25℃，光强2000lx，光照14h／d。每种培养基接种30个茎段，定期统计试管苗生根情况。

2试验结果与分析

2．1无菌系建立中各消毒剂的用量分析。试验结果表明，70％乙醇处理的时间在20s即可取得较好效果，时间过长则会出现脱水现象。用5％～10％次氯酸钠处理20min以上才能达到消毒目的，但外植体多数出现褐变现象，而使用0．1％升汞处理桤叶唐棣茎段，只需浸泡6min就可能达到消毒目的，但为避免升汞的残留对植物组织造成伤害必须用无菌水清洗5～6次，并用无菌滤纸吸干水分。2．2不同处理对试管苗腋芽萌发的影响。研究表明，0．5mg／L6－BA＋0．05mg／LIBA浓度的培养基诱导出的腋芽普遍生长健壮，叶片嫩绿，腋芽萌发数量和萌发率较高，为最适合的初代培养基（见表2）。2．3不同处理对试管苗继代增殖的影响。当培养基为MS＋0．6mg／L6－BA＋0．1mg／LIBA时，每个芽新增芽数为6．5，芽多，叶片大，生长快，能更好的保持芽增殖数量与生长速度之间的平衡化（见表3）。2．4不同处理对试管苗生根的影响当培养基不加激素IBA时，桤叶唐棣试管苗也能生根，但生根率较低仅为55％，生根数量较少且根纤细易断。当IBA浓度为0．1mg／L时，生根率提高到了98％，每株生根数达到5．5条，平均根长2．3cm，所生根较粗坚韧质量好。当IBA浓度增大到0．2～0．4mg／L时，虽然生根率达到了80～95％，但每株生根数下降到2．8～4．2条，根长度1．6～2．0cm，并且根基部愈伤组织较多。因此，生根培养基中IBA较合适的浓度应为0．1mg／L（见表4）。

3结论

桤叶唐棣的外植体先用70％乙醇处理20s，再使用0．1％升汞浸泡6min可取得较好的消毒效果；初代培养中，添加0．5mg／L6－BA＋0．05mg／LIBA的MS培养基诱导腋芽萌发效果最好；继代培养中，添加0．6mg／L6－BA＋0．1mg／LIBA的MS培养基能更好的保持了芽增殖与生长之间的平衡；在生根试验中，添加0．1mg／LIBA的1／2MS培养基，生根效果最好。

作者:朴凯伟 单位:抚顺市现代农业及扶贫开发促进中心