小议猫爪草有效成分的研究

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猫爪草（RadixRanunculiTernati）为毛茛科植物小毛茛的块根，是二十世纪五十年代河南信阳地区新发现的一种治疗结核的新的验方药材，后经信阳专署中医诊所依据其根形及能治疗鼠疮的特点而定名为猫爪草[1]，2005年版《中国药典》将其收载。猫爪草以块根供药用，性温，味甘辛，具有消肿、散结的功能，近年来发现其有较好的抗结核及抗肿瘤效果而成为研究的热点[2]，已成为国家重点发展的三类药材之一。

1中药猫爪草的化学成分

有关猫爪草的化学成分的研究报道不多，它的有效成分至今没有确切报道。经中国医学科学院药物研究所测定，猫爪草根含有氨基酸、有机酸和糖。其全草含糖为16%、油为1.2%、植物碱很少[2]。另有报道，猫爪草根及全草呈氨基酸有机酸及糖的反应[3]。

1.1姚成等[4]对山东、湖北、安徽、新疆及河南5个产地的猫爪草中的氨基酸分析表明，猫爪草所含的氨基酸种类较丰富，达15种之多，其中尤以天冬氨酸、亮氨酸、谷氨酸和精氨酸含量为高。

1.2日本学者从猫爪草根中分离得到了葡萄糖、阿拉伯糖及半乳糖[5,6]，张幸国等[7]从猫爪草中的乙酸乙酯分离得到β-D-葡萄糖。贾慧青等[8]采用比色法测定其可溶性糖含量占10.6%。

1.3全山丛等[9]对猫爪草的块根用原子吸收光谱法测定含有多种人体必需且具有重要生理功能的微量元素，如Zn、Fe、Mn、Cu、Cr等，且以Zn、Fe、Mn含量较高，而肺结核患者头发中锌、铁含量明显比健康人低。因此认为较高的锌含量可能对抗肺结核患者由于锌的降低致机体免疫器官萎缩、免疫细胞受抑制、免疫应答减弱、白细胞杀菌能力下降等的治疗有所帮助。

1.4姜达衢等[10]从其石油醚提取物中分离得到了肉豆蔻酸十八烷基酯、二十烷酸和豆甾醇。郭学敏[11]除分离得到了上述三种化合物外，还分离得到了β-谷甾醇、γ-酮-δ-戊内酯（即小毛茛内酯）以及β-谷甾醇和豆甾醇的D-葡萄糖苷。王爱武等[12]对猫爪草中脂肪酸成分用超临界流体萃取（SFE）法提取并用气相色谱-质谱（GC-MS）法从中鉴定出了12种化合物，其中主要成分为十六烷酸。陈军等[13]对猫爪草进行回流提取，提取液经浓缩后进行甲酯化，并用GC-MS法对其脂肪酸及有机酸的成分进行分析和鉴定，其结果表明，猫爪草乙醚提取物中检测出含有23种物质，鉴定出其中的15种脂肪酸和有机酸。熊英等[14]采用溶剂提取法和柱色谱分离法从醋酸乙酯和正丁醇部位分离鉴定9个化合物，包括粗贝壳杉黄酮-4’-甲醚（I）、榧双黄酮（I）、罗汉松双黄酮A、白果素等。

1.5张海松等[15]对猫爪草的挥发油进行提取并对其进行GC-MS分析，其结果表明，常规水蒸气蒸馏法提取的挥发油共鉴定出61种成分，其主要化合物为酯、烷烃、芳香族化合物，其中以酯类为主，主要有丁二酸二异丁酯、丁二酸甲基二异丁酯；其次是烷烃，主要有二十五烷、四十烷、四十四烷；芳香族化合物主要有1-甲基萘、2-甲基萘等化合物；此外还有少量的酸、酮、醛、醇、烯以及含硫化合物等。而超声萃取法提取的挥发油共鉴定出49种成分，其主要化合物为烷烃及酯类化合物，其中以烷烃为主，主要有二二酸二异丁酯、丁二酸甲基二异丁酯；其次是烷烃，主要有二十五烷、四十烷、四十四烷；芳香族化合物主要有1-甲基萘、2-甲基萘等化合物；此外还有少量的酸、酮、醛、醇、烯以及含硫化合物等。

1.6陈彦等[16]则采用DEAE-Cellulose-52和Superdex200柱色谱得到一种以β-D-葡萄吡喃糖为主的多糖-蛋白复合物，能增强免疫细胞对肿瘤细胞HL260的抑制作用。

2猫爪草抗结核菌的作用机制研究

2.1猫爪草的药理研究证明，猫爪草的三种制剂（煎剂、生药粉末及醇提液）在试管内对强毒人型结核菌均有不同程度的抑制作用，猫爪草煎剂生药粉末的抑菌浓度为1:10，其醇提液的抑菌浓度为1:1000，且抑菌较异烟肼强。田菲菲等[17]发现猫爪草提取物对真菌黄瓜炭疽病菌和白菜黑斑病菌在质量浓度为0.01g/ml的条件下对2种植物病原菌的菌丝生长抑制率超过50%，可作为一种生物农药考虑。猫爪草的煎剂、生药粉末及醇提液在试管内对强毒人型结核菌（H37RV）均有不同程度的抑制作用，且抑菌作用比异烟肼稍强。将猫爪草、青蒿水浸液过滤后以1∶200浓度分别制成改良罗氏中药培养基和对照培养基，经灭菌后分别接种结核菌混悬液，结果对照培养基中结核菌生长良好，而中药培养基无结核菌生长。

2.2有人通过对其进行微量元素分析后认为，结核患者头发中微量元素Zn、Fe、Mn含量明显比正常人低，猫爪草中较高的Zn、Fe、Mn含量对抗了由于Zn降低导致的肌体免疫细胞抑制，从而减弱了对感染的易感性[18]，但这种杀菌机理的理由并不充分。

2.3詹莉等[19，20]采用反转录聚合酶链反应半定量（Qc-RT-PCR）方法及聚合酶链式反应（PCR）方法，对猫爪草有效成分小毛茛内酯（Tern）进行了抗结核菌分子免疫学机制的研究和猫爪草所含的小毛茛内酯对体外诱导结核病人周围血管淋巴裂解肽（GLS）基因表达的作用，Tern是从猫爪草中分离提取的一种δ-内脂类化合物，鉴定为γ-酮-δ-戍内酯。GLS是在细胞毒性淋巴细胞和天然杀伤细胞激活晚期被诱导表达的一种多肽，具广谱抗菌活性，尤其是能杀灭结核菌。因此，GLS基因表达的高低是CTL杀灭胞内细菌分子效能的指标之一，Tern可望作为一种新型的内源性抗生素颗粒裂解肽的诱导剂，治疗耐药结核病。

2.4猫爪草多糖和皂苷可明显增强小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能、促进血清溶血素形成和增加外周血T淋巴细胞数[21]，从而起到抗结核的作用。李君霞[22]则报道以猫爪草多糖对正常小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的提高作用为最好。

3猫爪草制剂及临床应用

由于猫爪草具有消肿、散结等多方面的功效，临床上早有应用。常用的制剂既包括胶囊、丸剂、散剂、合剂、25%酊剂、煎剂等内服制剂，此外尚有注射液，但多数是医院自制剂，仅猫爪草胶囊获得了正式的批准文号并收载在《卫生部药品标准》中，国内主要由河南信阳市固始制药厂生产。猫爪草丸剂、胶囊以及疗肺散、抗痨灵等中成药都可用于治疗肺结核。10%～15%猫爪草煎剂亦可用于肺结核的局部治疗。张志军[23]采用猫爪草胶囊治疗淋巴结结核60例，总有效率98.3%；席秀娥等[24]采用猫爪草胶囊加常规抗结核药物联合治疗110例颈部淋巴结结核患者，临床6个月总有效率87.27%，没有明显的毒副作用，对异烟肼、链霉素耐药的患者也有一定疗效。

4展望

结核病的重新流行使人类健康再次面临严重威胁，作为单一的传染源，结核病是造成死亡人数最多的传染病，而中药治疗结核具有费用低廉、毒副反应少、多靶点等优点，中药单方和复方在治疗结核病中收到了理想的临床效果，对治疗结核病具有较强的应用前景。猫爪草具有较好的抗结核效果，但开发利用度不够，制剂生产未成规模，目前以猫爪草为原料并获批准并生产的仍然仅为猫爪草胶囊一种。因此有必要对猫爪草进行深入研究，针对猫爪草的有效成分和活性部位不明确问题，着重进行其有效部位及有效成分的筛选，为猫爪草的进一步开发利用提供科学依据，从而为开发新型高效的治疗结核病药物打下基础。