纯化山茶甙的工艺制作论文

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【摘要】［目的］考察大孔树脂对山茶甙的纯化效果，优化其工艺条件。［方法］以吸附率、吸附量和解吸率为依据，筛选最佳大孔树脂。采用正交设计，以转移率为指标，考察pH值、吸附时间、供试液浓度、树脂与供试液体积比等因素对大孔树脂吸附的影响。［结果］YWD01G2为最佳吸附树脂。当pH6-7、时间8h、供试液浓度0.05g/mL、体积比1∶1.5时，大孔树脂对于山茶甙的吸附效果最佳。以50％乙醇洗脱，可以获得产品山茶甙含量为82.3%。［结论］大孔树脂处理可显著提高山茶甙含量，其工艺简便可行。

【关键词】大孔树脂；山茶甙；纯化；工艺条件

山茶甙是自山茶籽中分离的一种三萜皂甙类化合物，它的分子结构中含有亲水性的糖体和疏水性的配基。它不仅是一种天然非离子型表面活性剂，具有乳化、分散、润湿、去污、发泡、稳泡等多种表面活性，而且具有抗菌杀虫、抗渗消炎、化痰止咳、镇痛、抗癌等功效。本实验对山茶甙具吸附性的大孔树脂进行筛选，并通过正交设计，确定了大孔树脂纯化分离山茶甙的最佳工艺。

一、实验材料

药物和试剂：粗山茶甙：浙江中野植物技术公司生产，山茶甙含量为61.5%；大孔树脂：河北沧州化工有限公司生产；甲醇、乙醇、盐酸、氢氧化钠、香草醛、浓硫酸，均为分析纯。仪器：U3010型紫外光谱仪，日本日立有限公司制造。

二、方法

2.1大孔树脂预处理

分别称取各种型号树脂各10g，用50ml95%乙醇浸泡24h，水洗至无醇味，用5%HCl50ml浸泡2-3h后用水冲洗至中性，然后用5%NaOH50mL浸泡2-3h后用水冲洗至中性，备用。

2.2吸附实验

称取14g粗山茶甙，用700mL水溶解为供试液。将处理后的树脂，加入50mL山茶甙供试液，于室温下振荡24h，转速为110r/min，过滤，测定滤液中剩余山茶甙浓度，计算吸附率和吸附量。吸附率（%）=［（吸附前浓度吸附后浓度）／吸附前浓度］×100；吸附量=［（吸附前浓度吸附后浓度）／树脂干质量］×溶液体积。

2.3解吸实验

分别向吸附24h后的树脂中加入100mL80%的乙醇，室温下连续振荡12h，过滤，测定滤液的山茶甙浓度，计算解吸率。解吸率=［（解吸后溶液浓度×解吸后溶液体积）／（吸附前溶液浓度×吸附液体积吸附后溶液浓度×吸附液体积）］×100。

2.4正交设计

选择最佳吸附和解吸能力的大孔树脂，进一步考察其吸附条件。采用L9（34）正交表进行正交试验设计。称10g树脂，按正交试验条件处理，以100mL80%乙醇洗脱的山茶甙转移率（产品山茶甙量与粗山茶甙量的百分比）为指标，考察供试液的pH值（A）、吸附时间（B）、供试液浓度（C）、树脂与供试液体积比（D）4因素对其影响，因素水平见表1。

2.5大孔树脂对山茶甙纯化实验

采用正交优化实验条件，称20g树脂5份，进行山茶甙吸附后，分别以水、30％乙醇、50％乙醇和80％乙醇各100mL解吸，对解吸液进行真空干燥，测定其山茶甙含量。

2.6含量测定方法

按文献方法对山茶甙含量进行比色测定，其标准回归方程为Y=4.85X+0.06，r=0.99304，Y为山茶甙浓度（mg/ml），X为吸光度，样品浓度在0.04-0.2mg/ml范围内呈线性关系。

三、结果

3.1大孔树脂的筛选

通过对12种大孔树脂的吸附和解吸实验，YWD03K、YWD01G2、01G4、D101、YWD03F、HPD100、HPD400的吸附率较高，吸附量则以YWD01G2、D101、AB8、HPD100、YWD03F、YWD03K、01G4较高，YWD01G2、D101、X5、HPD450的解吸率较高。见表2。由此可见，吸附率、吸附量和解吸率均较高的为YWD01G2和D101，YWD01G2为最佳，故选择YWD01G2树脂进行纯化山茶甙的吸附工艺考察。表2大孔树脂的筛选（略）

3.2大孔树脂工艺条件考察

正交实验结果表明，在以山茶甙的转移率为指标考察的4个因素中，各因素作用大小次序为：上样体积比>上样浓度>吸附时间>pH。其结果见表3。本实验的最优提取工艺条件为A3B1C1D1，即pH6-7、时间8h、上样浓度0.05g/mL、上样体积比为1∶1.5条件下大孔树脂吸附山茶甙的转移率最高。

以上述最佳条件，进行了3次试验，分别获得山茶甙的转移率为92.3%、90.4%、91.2%，均处于较高水平，这表明正交试验结果是正确的。公务员之家:

3.3大孔树脂对山茶甙的纯化效果

对吸附后大孔树脂，分别用水、30%、50%、80%乙醇溶液解吸后，所得解吸后产品的山茶甙含量分别为36.2%、72.8%、82.3%、78.7%，转移率分别为25.3％、67.2％、86.9％、91.3％。结果表明，水难以解吸，乙醇有利于解吸。随着乙醇浓度增大，解吸率逐渐升高。而乙醇浓度大于50％时，树脂中吸附的其他杂质也更容易被解吸下来，因此得率虽然增高，但含量有所降低。由此可见，50％乙醇是适合的解吸浓度。

四、讨论

山茶甙是非离子型表面活性剂，极性较小。本实验采用的大孔树脂多为弱极性树脂，对山茶甙均有一定吸附作用。比较而言，YWD01G2的吸附量、吸附率最高，解吸能力也较好，是一种适合山茶甙分离树脂。正交试验表明，采用YWD01G2对山茶甙进行吸附的最适条件为：PH6-7、时间8h、上样浓度0.05g/ml、上样体积比为1∶1.5。这种条件下的山茶甙转移率最高。吸附后树脂采用50％乙醇解吸，得到的产品山茶甙含量为82.3%，较粗山茶甙含量有较大的提高。因此采用大孔树脂纯化山茶甙的方法是可行的。

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