正交设计法研究人参皂苷的最佳提取工艺

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【摘要】目的研究人参皂苷最佳提取工艺。方法正交设计法，以溶媒用量、乙醇浓度、回流时间、回流次数为因素，每个因素3个水平，人参皂苷含量为评价指标。结果不同条件，人参皂苷含量不一样。结论取人参粗粉，加10倍量75%乙醇，回流提取5次，每次30min。

【关键词】正交设计；人参皂苷；提取工艺

人参为舒脉宁注射液中的贵重药，人参皂苷提取量直接影响注射液的疗效。因此为制备舒脉宁注射液而提取人参皂苷，参考有关资料，用正交设计法研究其最佳提取工艺。

1实验材料

1.1人参符合《中国药典》（1995年版一部有关规定）。

1.2人参皂苷Rb1化学对照品，中国药品生物制品检定所提供，批号703-8802。

1.3高效液相色谱仪HP8810美国惠普公司。

2正交设计

2.1因素水平的确定根据人参皂苷的性质，确定用乙醇回流法提取，自然pH值条件下，本研究重点考察乙醇浓度、乙醇用量、回流时间、回流次数等4个因素，每个因素3个水平，因素水平表见表1。表1人参皂苷提取因素-水平表

2.2正交表的选择本研究选择L9（34）表，正交设计及统计分析见表2。

3实验方法

3.1样品液的提取取人参（粗粉）20g，加表2中规定量的规定浓度的乙醇，回流规定的次数和时间，放置24h以上，滤过，回收乙醇，加水溶解并稀释至100ml，115℃灭菌30min，静置3天以上，滤过，备用。

3.2含量测定参照《中国药典》2000版（一部）新增与修订内容汇编（1999年8月）“人参”项下方法进行。精密样品液1ml，置50ml量瓶中，加50%甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。分别取对照品溶液与供试品溶液20μl，注入高效液相色谱仪，测定，计算，即得。

4结果

测定结果见表2。表2提取工艺正交表及统计分析表

5结果分析

实验结果表明，影响人参皂苷提取的因素大小顺序为B>C>A>D，即乙醇浓度为最重要的因素，溶媒用量、提取次数及提取时间影响不大。各因素最佳水平为A2B1C1D3。

6结论

最佳提取工艺：取人参粗粉，加10倍量75%乙醇，回流提取5次，每次30min。

7讨论

(1)人参为五加科植物人参PanaxginsengC.A.Meg的干燥根。人参具有大补元气、复脉固脱、补脾益肺、生津安神作用。用于体虚欲脱、肢冷脉微、脾虚食少、肺虚喘咳、津伤口渴、内热消渴、久病赢虚、惊悸失眠、阳痿宫冷、心力衰竭、心源性休克。人参皂苷为人参的主要成分，含量约为4%。人参皂苷的提取方法较多。有用甲醇提取，除去甲醇后用水溶解，乙醚脱脂，正丁醇提取，得总皂苷［1］。用95%乙醚回流提取，回收乙醇，加水溶解，石油醚等脱脂，正丁醇提取［2］。用80%甲醇室温提取，回收甲醇，乙醚脱脂，正丁醇提取［3］。对于人参制剂提取工艺，有文献报道，将人参分别进行50%乙醇回流、50%乙醇渗漉及水煎煮3种提取液用正丁醇萃取，丙酮沉淀，沉淀干燥后用甲醇溶解过滤，结果热回流比较好［4］。有人选用乙醇浓度、回流次数、回流时间、pH值的影响4个因素，以比色法测定人参总皂苷含量，结果认为用85%乙醇回流7次，每次回流60min，pH值在原自然状态，以此条件提取人参皂苷为最佳方案［5］。本研究是参考各家报道，应用正交设计法研究其最佳工艺。

(2)本研究设计的依据为人参皂苷的性质，人参皂苷易溶于水、甲醇、乙醇，可溶于正丁醇、醋酸、醋酸乙酯。其次根据前人研究的结果。

(3)本研究中，参照中国药典方法，应用高效液相色谱法测定人参皂苷的含量。其方法学考虑将在其他论文中报告，本文不作赘述。

【参考文献】

1李伯廷.植物药有效成分的提取与分离.太原：山西高校联合出版社，1993，262.

2陆蕴如.中药化学.北京：学苑出版社，1995，303-304.

3王继彦.吉林农业大学学报，1993，15(1):25-30.

4刘健明，宋安全.人参地上部分总苷工业化提取工艺的研究.中国中药杂志，1992，（5）：291.

5姜岚.人参类注射液中人参总皂苷的提取工艺研究.中药通报，1988，（6）：25.