薄层液基细胞涂片技术试析论文

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【关键词】薄层液基细胞涂片

脱落细胞学检查是临床病理诊断的重要手段，一张高质量的细胞涂片，能提高恶性病变检出率。本院近年采用薄层液基细胞涂片技术（LPT），改进细胞涂片方法，取得较好的效果。报道如下。

1材料与方法

1.1一般资料

随机取本院2006年1月至2007年1月送检标本痰液、胸腹水、尿液及宫颈涂片计957例份，其中男523例，女434例。每例做常规涂片2张以作对照。

1.2离心机，振荡器。

1.3液基细胞试剂

购自利普公司，由2004年4月通过美国FDA认证。

1.4常规细胞涂片

取宫颈刮片或痰液含血性或灰白粘稠区制成涂片2张；取胸腹水10ml，1000转/min，离心10min，弃上清液，混匀沉淀物后涂片，干燥后95％酒精固定15min，HE染色后镜检。

1.5薄层液基细胞涂片

取宫颈刮出物或痰液含血性及灰白粘稠区入细胞基液，混匀静置30min；取胸腹水、尿液等体液标本50ml，2000转/min，离心10min，弃上清液，混匀沉淀置入细胞基液30min，含血性物较多的可适当延长时间。在备用试管内倒入4ml清洗液，再加入含标本（痰液、胸腹水、尿液等）的细胞基液，缓慢倒入，可见到分层现象。离心2000转/min，10min，弃上清液，振荡器混匀，加入等量的液基细胞涂片液，混匀涂片。干燥后95％酒精固定15min，HE染色后镜检。

2结果

957例液基细胞标本共检出恶性瘤细胞（含可疑）109例，宫颈18例为异常上皮细胞，本组就薄层液基细胞涂片与常规细胞涂片在灵敏度方面和镜下特征进行比较。

2.1胸腹水共检407例，液基涂片检出恶性瘤细胞（含可疑）73例，常规涂片64例，灵敏度提高12.3％；痰液共检164例，液基涂片检出阳性数8例，常规涂片6例，灵敏度提高25％；尿液共检229例，液基涂片检出阳性28例，常规涂片18例，灵敏度提高35.7％；宫颈涂片157例，液基涂片报告鳞状上皮异常18例，常规涂片16例，灵敏度提高11.1％。见表1。表1两种涂片方法对各种脱落细胞标本检测结果比较（略）

2.2镜下特征比较

(1)使用传统方法制作的痰液涂片（宫颈涂片）较厚，粘液、杂质及坏死物含量较多，细胞缺乏完整性，结构模糊不清。浆膜腔积液涂片细胞堆积较厚，分布不均，含较多红细胞，有红染的背景（图1）。(2)用薄层液基制作的涂片细胞面积缩小，涂片背景干净；红细胞大多消失，痰液和宫颈

涂片中粘液溶解；细胞层次分明，胞核胞质结构清晰（图2）。

3讨论

脱落细胞学检查是一项方便简单的检查方法，它有利于癌症筛查、早期发现癌症、指导治疗等。传统的病理细胞学制片均采用直接涂片，推片或离心后涂片，制出的涂片细胞分布不均，重叠，背景含粘液、红细胞、杂质、坏死细胞等，影响镜检，阳性检出率低。本组痰检和尿液检测灵敏度较低，主要是标本取材不正确，痰液内杂质、粘液、炎性细胞过多，过厚而影响诊断；尿液中本身细胞含量较少，离心不彻底，涂片过稀导致细胞很少，缺乏有效的诊断细胞数。目前应用的薄层液基细胞技术，挑取的细胞量较传统细胞多，采取标本后放入保存液中，及时软化粘液和固定以保存细胞，加入清洁液通过分层离心技术去除标本中的粘液、红细胞及其他非细胞碎片，加入细胞后振荡将细胞团块分散，形成单个细胞样本，最后将细胞均匀地涂在载玻片上，进行固定和染色。涂片时用细胞混悬液约30ul在玻片上涂成直径1cm大小圆形分布区域，这样使被检细胞集中，数量多，易于阅片。LPT与常规制片方法比较，改善了样本收集率，并使细胞均匀的分布在载玻片上，提高了检出的阳性率。该技术不仅保存细胞的完整性，还保全了细胞抗原性，由于采集的细胞全部存放于细胞保存液内而不被自溶及污染，可多量涂片进行免疫组化染色及原位分子杂交［1］（图3）。

薄层液基技术制片的优良性，可明显提高癌症确诊率，能为临床提供可靠的诊断依据。在筛查宫颈癌方面，优于传统的巴氏涂片，采用TBS报告系统国际诊断标准，以得到了普遍认可［2］。该技术用于痰液、尿液、浆膜腔积液也能提高恶性细胞检出率,为临床治疗提供可靠的诊断依据。但LPT技术也有不足之处，成本较高，不能在基层医院普及。在技术方面一些问题还有待改进，如细胞固缩等。

【参考文献】

1孙小蓉，朱香芬，李华芬，等.介绍一种低耗高质的液基薄层子宫颈细胞制片新方法.临床与实验病理学杂志，2005，21（2）：232～234.

2顾美皎.TBS系统中异常上皮细胞的诊断和处理.中国实用妇科与产科杂志，2003，19（8）：466.