荧光范文10篇

【摘要】本文对眼底荧光血管造影检查技术进行了基本介绍，对眼底荧光造影室护士应具有的素质进行综述，通过做好造影前的宣教、明确造影过程中可能出现的各项不良反应及应对措施等一系列方法来提高造影室护理人员的综合素质，以期更好地预防患者造影检查过程中不良反应的发生。

【关键词】眼底荧光造影；不良反应；护理；素质

1眼底荧光血管造影的简介及重要性

眼底荧光血管造影（fundusfluoresceinangiography，FFA）是一项特殊的诊断眼底疾病的检查方法，目前已广泛应用于对眼科疾病患者的诊治中[1]。这项技术的原理是对患者静脉注射荧光造影剂，利用荧光造影剂在眼睛血液循环过程中产生的荧光，采用眼底照相机动态地记录病人眼底血管的结构及异常状况，从而反映病人眼底血管的生理及病理变化[2]。眼底荧光血管造影检查是眼科一种重要的形态检查，可以发现眼底镜难以确定的视网膜脉络膜病变[3]，能够尽快了解到视网膜的血液循环情况及血管状态，为临床提供重要诊断参考[4]。但是荧光素钠注入人体后可能发生一系列不良反应，如恶心、呕吐、皮疹、过敏性休克，严重的甚至威胁生命[5]。因此，在实施FFA前应向病人做好细致的沟通及有效的护理，消除病人的疑虑和紧张心理，医护人员熟悉FFA容易引起的各类不良反应的表现及应对方法，有利于减少不良反应的发生、提高病人的检查配合度，因此提高眼底荧光造影室护士的自身素质有着非常重要的意义。

2眼底荧光造影室护士应具有的素质

眼底荧光造影检查存在一定的潜在风险，荧光造影室护士的技术水平、护理经验及对抢救病人的熟练程度直接关系病人的安危及不良反应的发生几率，为减少不良反应的发生，提高造影检查效果，必须科学、严格、规范地对造影室进行管理，并提高造影室护理人员的专业素质水平。2.1遵循护理原则。造影前应严格遵循“三查七对”制度，检查药液有无破损、变质，有效期，观察药物是否有浑浊或颗粒物。充分告知患者眼底荧光造影检查的意义，不良反应及禁忌症，患者知情同意书上患者及家属双人签字，为患者做造影编号，记录患者电话，疾病种类，住址，对患者基本情况进行造册登记。2.2做好造影前的宣教。2.2.1对患者进行饮食护理。由于空腹患者接受眼底造影检查更易发生呕吐、恶心、晕厥等不良反应，因此造影前应做好充分告知患者不能空腹进行造影检查，鼓励患者正常进食后再进行检查。检查前，嘱咐患者清淡饮食，尽量不要食用刺激、辛辣及易导致腹胀的食物，也不要暴饮暴食，患者应在机体处于正常的状况下接受检查。2.2.2对患者进行常规检查。询问病人既往史、药物过敏史、全身疾病史及家族史，对孕妇及严重过敏体质的患者必须禁止其做造影检查以防止不良事件的发生。2.2.3对患者进行心理护理。造影前向患者及其家属详细介绍检查的流程及造影时需要注意的事项。由于造影是在暗室进行，患者易出现紧张、恐惧、无助的心理，因此应主动与患者进行互动，给予患者鼓励与肯定，让患者情绪稳定，配合医护人员进行造影检查。还应告知患者散瞳后出现视物模糊及畏光属于正常现象，6～8h后症状消失，以消除患者的疑虑、缓解患者的紧张、无助情绪，增强患者的安全感[6]。2.3抢救药物及设备的准备。造影室内要备齐各项抢救物品及抢救器械，如血压计、听诊器、供氧管、输液器、刀片、头皮针、手电筒、电动吸引器、氧气袋、心内注射针等及急救药品，如阿托品、盐酸肾上腺素、异丙肾上腺素、多巴胺、尼克刹米、盐酸洛贝林、地塞米松、25%葡萄糖、0.9%NS等。由造影室护士每天清点、审核并记录，保证抢救仪器设备均处于备用状态，抢救药品无过期情况。造影室门口备用平车，便于转送患者时使用，造影室内有完善的患者过敏性休克抢救操作流程，眼科医护人员要做到全员掌握。2.4明确造影过程中可能出现的不良反应及应对措施。2.4.1胃肠道刺激反应、恶心、呕吐与应对措施。造影过程中常常出现胃肠道刺激反应、恶心、呕吐等一过性的不良反应，一般发生在荧光素钠注入后的30～80秒内，此时嘱咐患者深呼吸数次，精神放松，休息片刻，同时按掐患者的内关穴，数秒后症状即自行缓解。2.4.2皮肤瘙痒、荨麻疹与应对措施。如果遇到病人出现皮肤瘙痒、荨麻疹，若症状较轻可给予患者口服抗过敏药扑尔敏4mg，若症状较为严重，需要给患者注射5mg地塞米松。吸氧对症处理后大多数患者当天瘙痒症状即消失，皮疹逐渐减退[7]。2.4.3呼吸困难、晕厥，胸闷、气促与应对措施极少数患者在造影开始后出现呼吸困难、晕厥，胸闷、气促等不良反应，此时应立即停止检查，医护人员辅助患者取平卧体位，就地抢救，遵医嘱给予患者静脉注射地塞米松、肾上腺素，同时给予氧气吸入5L/min，密切关注患者血压、脉搏的变化情况[8]。必要时给患者建立静脉通道并请急诊内科或麻醉科医师协助抢救。2.5造影结束后的健康宣教。造影检查结束后叮嘱患者在造影室内休息30min以进一步观察病人情况，确定无不良反应后方可让其离去。造影检查完后应注重交代患者因散瞳及注射荧光造影剂会导致暂时的视觉改变，视物模糊，流泪、畏光等现象，叮嘱病人多休息，避免强光，禁止驾车等活动。荧光素钠染料大部分经肾脏代谢随尿液快速排出体外，因此注射荧光素钠数小时后尿会变黄，必须向病人及家属解释这是正常现象，以消除患者的恐惧心理。指导患者检查结束当天大量饮白开水，促进体内的荧光素尽快排出体外，通常24h内造影剂即可从患者体内完全排出。2.6加强责任心。护理职业的高风险性质决定了从业人员必须具备高度的责任心，一个优秀的造影室护士必须具有高稳定性、高自律性、高慎独性，眼睛是一盏明灯，作为一名造影室护士更应具备时刻维护患者生命和安全的责任心。

1常用照明方法与特点

常用的电光源主要有热致发光光源，气体放电发光光源，固体发光光源等三类。

热致发光光源如白炽灯，它利用斯涅藩－波尔兹曼定律，即物体温度越高，它幅射出的能量越大。这可用式（1）表示。

E=μ×ξ×T4（1）

式中：E为物体在温度T时单位面积和单位时间内的红外幅射总能量；

图1

[摘要]在原子荧光的含量分析过程中，由于生物样品成分复杂，对于不同种类的生物样品，其前处理方法的多样性对分析测试的效率和精密度均有影响，并有多种进样技术被用于生物样品的分析测试中。本文归纳总结了目前原子荧光光谱技术中常见的生物样品如绿叶植物、果蔬、粮食制品、酒类、动物源制品等生命应用等领域的常见生物类样品的预处理及仪器进样与联用技术，旨在为与生物样品相关的原子荧光分析提供参考。

[关键词]生物样品；原子荧光；前处理；消解；进样技术

原子荧光光谱分析技术基于不同原子的波长辐射特异性，经荧光强度对样品进行定量分析，具有高效率和高准确率的特点，被广泛应用于污染检测，食品科学，生命科学，地质学等领域[1-3]。目前，我国已将利用原子荧光光谱分析技术检测食品中的重金属含量列为国家检测标准之一。在原子荧光光谱分析领域，所涉及的生物样品种类繁多，且不同种类的样品如植物、肉类、粮食、粮油、毛发等的有机物组成和元素含量有较大差别，在实际测试时，选用有针对性的样品预处理方法与进样预处理联用技术，有利于提高测试效率，降低基体干扰，减少仪器损耗。不同于常规岩石，矿石，沉积物，土壤等固体样品，为了保证样品的代表性和结果的可靠性，在样品消解前，需有针对性地进行选材，干燥，匀浆和研磨等预处理流程。此外，生物样品含有大量有机物，目前采用的前处理消解方法有直接稀释法、萃取法、干灰化法、酸溶法、加压分解法、微波消解法和酶分解法等。其中，低温干灰化法和高温干灰化法中高温或干燥的处理过程，会使微量金属离子损失严重，导致各微量元素的回收率降低。一般采用酸溶法破坏样品中的有机物，释放被测元素，以利于后续测定。常见的酸溶法有敞口酸消解法、加压消解法和微波消解法等。针对不同类型的生物样品，在消解前，需要进行预处理。

1样品预处理

1.1植源性样品

植物根、茎、叶样品经清洗，低温干燥，研磨，过筛后，使用酸溶法溶解。在敞开酸溶法中，一般采用硝酸+高氯酸组合，加热溶解样品。使用微波消解时，一般采用硝酸+过氧化氢溶解样品。陈双等[4]优化了微波消解茶叶的硝酸和过氧化氢最佳含量，提出硝酸8mL和过氧化氢1mL进行消解时，可将0.2000g茶叶完全消解，且荧光强度较好。蔬菜、水果类样品，将样品清洗干净后，将样品分为皮、果肉和种子，果肉可用搅拌机打成糊状并匀浆；或将果皮，果肉，种子分别用烘箱低温烘干至恒重，粉碎研磨后备用。大米，淀粉类粮食样品，直接研磨，过筛后，使用酸溶法溶解。酒类样品，将样品先进行低温消解，挥发酒精，整个过程中应注意防止样品沸腾以致碳化。在样品剩余1~2mL时加入硝酸进行常规酸溶法消解。粮油类样品，可直接称取样品后进行消解处理。沈佳等[1]在使用原子荧光光谱法测定山茶油中的痕量砷时发现，使用湿法消解过程中，样品反应剧烈，易有泡沫溢出且易爆沸，且样品容易发生碳化。经优化后发现消化0.30g样品油，使用硝酸6mL和过氧化氢4mL进行消解时，消解最完全，测定结果的精密度较为理想。开建荣[6]等将大米用粉碎机粉碎，过100目筛，称取适量过筛后的大米粉分别按照10毫升混合酸(硝酸与高氯酸体积比为4︰1)湿法消解和6mL硝酸混合2mL过氧化氢微波消解进行前处理，测试的结果表明，微波消解试剂消耗量少，耗时短，过程繁琐，从可量化的指标来看，微波消解优于湿法消解。此外，对于菌类样品，金针菇等携带培养基质的鲜品，需去除根部培养基；双孢蘑菇、草菇、香菇等鲜品，需将带有培养基质或覆土的菇脚部分去除，并用干净纱布或毛刷轻轻擦去样品表面的附着物。水分含量在15%以上的干制食用菌样品，清洗完后需在60~70℃下烘至适宜粉碎(用于农药残留检测的样品除外)，同时测定烘干前后样品水分。食用菌干品，用干净毛刷或纱布除去表面附着物，不可水洗。经碎样后进行常规酸溶法消解。

摘要：电子镇流器由于具有节能，发光无频闪和易于实现联网控制（如IEC929附录E的有关要求）等一系列优点，而得到了广泛的应用。荧光灯如采用适当的灯丝预热方法，对提高荧光灯的寿命有非常重要的作用。介绍了几种常用的荧光灯灯丝预热方法及特点。

关键词：荧光灯；灯丝电流预热型；灯丝电压预热型

1常用照明方法与特点

常用的电光源主要有热致发光光源，气体放电发光光源，固体发光光源等三类。

热致发光光源如白炽灯，它利用斯涅藩－波尔兹曼定律，即物体温度越高，它幅射出的能量越大。这可用式（1）表示。

E=μ×ξ×T4（1）

［摘要］目的：合成(SA)z(Bio)xPVA(BCPDA)yEu3+复合物，并用于构建妊娠相关血浆蛋白A固相时间分辨免疫荧光试剂。方法：用PVA作为载体结合BCPDAEu3+和生物素亲和素，以双抗体夹心法原理，结合生物素标记抗体和包被抗体建立PAPPA时间分辨免疫荧光试剂，并进行方法学评价。结果：成功的合成了活性的(SA)z(Bio)xPVA(BCPDA)yEu3+复合物，构建PAPPA试剂检测灵敏度为0.7mIU/L；批内变异系数在3.89%～4.96%之间,批间变异系数在7.35%～9.27%之间。结论：合成的(SA)z(Bio)xPVA(BCPDA)yEu3+复合物较高的反应活性，可以用于多种试剂的构建。构建的PAPPA试剂灵敏度高，具有潜在的临床应用价值。

［关键词］妊娠相关血浆蛋白A；固相时间分辨荧光免疫；亲和素—生物素—聚乙烯胺—4,7二氯磺苯基1，10啡罗啉2，9二羧酸—铕复合物；唐氏综合征

DevelopADirectSolidPhaseLanthaneTimeresolvedFluoroimmunoassayReagentofPAPPAutilizingPVA

Abstract:ObjectiveTodevelopadirectsolidphaselanthanetimeresolvedfluoroimmunoassayreagentofPAPPAbysynthesizingacomplexof(SA)z(Bio)xPVA(BCPDA)yEu3+.MethodsPolyvinylamine(PVA)waslabeledwithbiotinstreptavidinandeuropiumchelateof4,7bis(chlorosulfophenyl)1,10phenanthroline2,9dicarboxylicacid(BCPDA).UsinglabeledPVAcomplex,WedesignedtwositesandwichtimeresolvedfluoroimmunoassayofPAPPAandevaluatedassaycharacteristicsofPAPPAkit.ResultsWesuccessedsynthesizingaconjuageteof(SA)z(Bio)xPVA(BCPDA)yEu3+andareagentofPAPPA.Detectionlimitsachievedwere0.7mIU/L.Thecalibrationcurvewaslinear010000mIU/L.Intraandinterassayimprecision(CV)was3.89%4.96%and7.35%9.27%.Recoverywas95.8%104.2%.ConclusionsTheconjugateof(SA)z(Bio)xPVA(BCPDA)yEu3+synthesiziedwasreactive,highlyfouorescent.Asortsofkitcouldbesynthesized,takingadvantageofit.ThereagentofPAPPAwaspotentiallysuitedforuseinclinicalwithhighlyanalyticalsensitivity.

Keywords:PregnancyassociatedplasmaproteinA;Directsolidphaselanthanetimeresolvedfluoroimmunoassay;StreptavidinbiotinPolyvinylamineeuropiumchelateof4,7bis(chlorosulfophenyl)1,10phenanthroline2,9dicarboxylicacid;Down''''sSyndrome

妊娠相关血浆蛋白A(PregnancyassociatedplasmaproteinA，PAPPA)是一种高分子α2糖蛋白，20世纪70年代在孕妇血清中被发现［1］。在孕妇血中主要PAPPA是胎盘滋养层组织分泌，它是一种异源四聚体，由两个分子量为200000~250000亚基构成。PAPPA亚基和两个嗜红细胞主要基础蛋白(Proformofeosinophilmajorbasicprotein)以二硫键结合而成［2］，在孕妇血中只存在微量游离单体PAPPA。PAPPA亚基由1547个多聚核苷酸构成，包括1个拉长的锌指结构，3个Lin—notch重复序列，以及5个短一致重复序列［3］。在体内PAPPA是一种蛋白酶，主要针对胰岛素样生长因子结合蛋白4(IGFBP4)和胰岛素样生长因子结合蛋白5(IGFBP5)起作用。胰岛素样生长因子I(IGFI)在促进细胞分裂和增殖起重要作用，它主要通过IGF1受体起作用，IGFI、II的生物活性受6个高亲和性IDFBP调节［4，5］。PAPPA主要用于产前筛查唐氏综合征(Down''''sSyndrome，DS)，迄今医学上对此病尚无有效的治疗和预防措施，只能通过产前筛查防止DS儿的出生，但目前开展的绒毛活检,羊水穿刺及脐带血穿刺均为侵入性检查,有1%～3%的流产率,且方法繁琐,出报告时间长,不适宜大范围孕妇的普查,仅限于高危人群的诊断。大量报道认为PAPPA可作为DS胎儿产前筛查的的标志物。在15周～20周通过结合孕妇孕周、超声诊断和FreeβHCG可以鉴别65%～75%，但要在3个月～6个月结合AFP、游离E3以及抑制素上述成分可鉴别85%～90%［6］。有文献［7］报道PAPPA在急性冠状动脉综合征(ACS)的早期诊断有一定的意义，PAPPA在ACS患者血清含量＜30mIU/L，同时结构不同于孕妇体内的PAPPA且存在动态变化，必须利用超灵敏的方法进行检测。国内PAPPA的诊断试剂大多为ELISA和PerkinElmer公司生产的解离增强时间分辨荧光免疫分析(dissociatedenhancelanthanetimeresolvedfluoroimmunoassay,DELFIA)试剂，无国产PAPPA时间分辨荧光试剂。我们利用PVA(聚乙烯胺)作为载体结合BCPDA镧系螯合物合成一种高灵敏的固相时间分辨荧光免疫分析(directsolidphaselanthanetimeresolvedfluoroimmunoassay,DSLFIA)试剂。为提高检测灵敏度和克服BCPDA标记抗体使抗体失活的问题，我们引入了生物素亲和素(biotinstreptavidinsystem)系统。

【摘要】目的采用荧光光度法测定加替沙星的含量。方法在pH6.0的Britton-Robinson(B-R)缓冲溶液中,刚果红能与钙黄绿素生成配合物,使钙黄绿素荧光猝灭,加入加替沙星后,加替沙星与刚果红可生成比钙黄绿素-刚果红更稳定的配合物,使钙黄绿素游离重现荧光。结果将该方用于片剂、粉针剂和尿液中加替沙星的测定,结果与文献报道的紫外法一致。结论所用方法简单、快速、准确、灵敏。

【关键词】钙黄绿素;刚果红;加替沙星

Fluorometrydeterminationofgatifloxacinwithcalcein-congored

【Abstract】ObjectiveToestablishamethodfordeterminationofgatifloxacinbyfluorometry.MethodsThecomplexbetweencongored(CR)andcalceininpH6.0Britton-Robinson(B-R)buffersolutionquenchedfluorescenceofcalcein.Thecomplexofgatifloxacin-CRwasmorestablethanthatofcalcein-CR.Whengatifloxacinwasaddedintosystem,thecalceincouldbefreedanditsfluorescenceappearedagain.ResultsThismethodhadbeenappliedtothedeterminationofgatifloxacinintablet,injectionandurine,andtheresultswereveryclosetothoseobtainedbyusingUVmethodthatreported.ConclusionThismethodissimple,rapid,accurateandsensitive.

【Keywords】calcein;congored;gatifloxacin

加替沙星(gatifloxacin,AM-1155,GFLX)是新的第四代喹诺酮类抗生素药物,具有抗菌谱广,抗菌活性强的特点。它对革兰阳性菌、革兰阴性菌、厌氧菌及衣原体均具有强大的抗菌作用[1]。加替沙星的测定方法有高效液相色谱法、荧光光度法、反相离子对色谱法、高效毛细管电泳法和紫外分光光度法[2~6]等。但利用钙黄绿素-刚果红荧光体系来测定加替沙星含量还未见报道。本文经研究发现刚果红能与钙黄绿素生成没有荧光的配合物,使钙黄绿素荧光猝灭,加入加替沙星后,加替沙星与刚果红反应生成比钙黄绿素-刚果红更稳定的配合物,游离出钙黄绿素,释放出荧光。以此为基础,建立了测定加替沙星的新方法。

摘要：荧光PCR定量技术(QuantitativePCR)是一种新兴的基因定位技术。这项技术灵敏、简便、快速、不需使用放射性同位素，PCR完成后，通过测序仪的自动识别即可对待测DNA进行定量分析。在遗传病，特别是一些以大片段缺失为主要突变类型的遗传病诊断中，荧光PCR定量技术发挥了很重要的作用。

关键词：荧光PCR定量技术；基因定位技术；遗传病

在早期的遗传学分子诊断中，主要依赖于SouthernBlotting，寡核苷酸杂交等技术。自1985年Saiki等首次描述聚合酶链反应(polymerasechainreaction，PCR)以来，PCR技术因为其灵敏特异，省时省力等诸多优点而受到了人们的高度重视，已经应用于生物医学和化学等基础研究的各个领域，并且成为医学临床和法医学研究的强有力分析工具之一[1-3]。然而，近几年来，研究者们不再满足于得知某一特异DNA序列的存在与否，他们更着眼于对其进行精确的核酸定量。尽管把PCR作为一种定量的工具，在技术上还面临着一些挑战。荧光PCR基因定位技术是近十余年来兴起的一种分子生物学技术，与其他定量方法相比，具有灵敏、简便、快速、不需使用放射性同位素的特点，在基因表达、传染病和遗传病的诊断等方面迅速得到了广泛应用。

一、荧光PCR基因定位技术的原理

荧光PCR定量技术的主要原理为：在PCR前，通过化学方法在引物的5’端通过共价方式连接一个荧光分子。由于在进行PCR时，引物和待扩增模板端的碱基不需要完全匹配，荧光PCR引物和普通PCR引物一样，能够对待测模板进行指数扩增。扩增完成后，根据PCR的产量，将荧光PCR产物直接或按一定比例稀释后，和内标、载样缓冲液混合，在自动测序仪上进行电泳。在自动测序仪内激光的激发下，PCR产物上的荧光分子发出固定波长的激发光，被仪器内的光电管捕获。根据PCR产物从开始电泳到经过光电管的时间，测序仪自动计算出相应产物的实际碱基数。不同泳道之间电泳速度的差别，通过各产物内混合的内标校正。同时，测序仪也自动标出相应产物的荧光强度，该数值就是荧光PCR定量技术对模板进行定量与定位的基础。与非定量PCR分析方法不同，荧光PCR的操作程序有助于评估污染的情况，即测出污染的程度，即使阴性对照产生了正的信号，只要这些信号比实验样品的低得多，依据这样的结果，至少可以推测出实验中所得出的信号是真实的。在一定程度上，荧光PCR消除了普通PCR过于敏感、假阳性率高的缺点。荧光PCR常用于研究发病机制、估计病毒的负荷量、监测临床治疗进展或用于诊断遗传缺陷等。通过对靶基因量的检测，将其与疾病的临床表现、临床分型以及各种标志酶的值联系起来，为疾病的诊断和药物治疗监测提供科学的依据。目前，该技术已广泛应用于多种遗传病的诊断和产前筛查，如地中海贫血、儿童型脊肌萎缩症、杜氏/贝氏肌营养不良、胖骨肌萎缩症和各种染色体病等。

二、荧光PCR基因定位技术在遗传病诊断中的应用

一、方法

1.材料

实验于2013年4～5月在连云港市第一人民医院麻醉科、疼痛科、病理科、影像科、连云港市临床医学实验中心与神经外科实验室完成。健康清洁级三、四月龄家兔8只，雌雄各半，体重2.5～3.1kg，由徐州医学院动物中心提供[许可证号：SCXX（苏）2003～0003]。动物置于安静、温暖（15～20℃）、避强光的环境下正常喂养48h，禁食24h后进行实验。实验中对动物的处置符合中华人民共和国科学技术部颁布的《关于善待实验动物的指导性意见》的相关要求。仪器与试剂：单层螺旋CT机(SiemensEmotion)、CM1100冰冻切片机(Leica，Germany)、ZX-004荧光显微镜，PM-30照相系统(Olympus，Japan)、丙泊酚（商品名：得普利麻；200mg/支，AstrZeneca，UK）、氯胺酮（0.1g/支，江苏恒瑞医药股份有限公司）、核黄(Sigma，USA)。

2.实验方法

核黄逆行神经追踪8只家兔按随机数字表法分为2组。经耳缘静脉注射丙泊酚(2mg/kg)和氯胺酮(2mg/kg)麻醉家兔后，在CT引导下经双侧C3/4关节突关节分别注射荧光逆行神经追踪剂核黄50ul(1g/L)，进行神经追踪。组织标本制备及形态学观察：分别于术后18、36h再次麻醉家兔，经心脏依次灌注生理盐水300～400ml、20g/L多聚甲醛和12.5g/L戊二醛的0.1mol/L磷酸缓冲液（pH7.3）500～800ml、含50g/L蔗糖的磷酸缓冲液（4℃）500ml。随后分别取双侧颈胸椎脊神经节、双侧颈胸交感神经节、肠系膜下神经节、脊髓、颈椎间盘纤维环、颈椎间盘髓核、颈椎关节突滑膜、肩关节滑膜，在含200g/L蔗糖的磷酸缓冲液（4℃）中过夜后，行连续冰冻切片，分别做成2套，一套20um蒸馏水贴片，直接在OlympusZX-004荧光显微镜下观察，拍摄光学相片。另一套7um行苏木精-伊红染色后置于荧光显微镜下，观察有无新的发现。

3.主要观察指标

县科技有限公司座落在县凤凰工业园区，占地110亩，分二期建设。目前，一期52亩建筑面积11000平方米已全部竣工，办公楼、员工宿舍全部装修完成，拟于12月中旬入驻，四栋厂房正在设备安装，拟于12月底试生产。

一、关于县科技有限公司原材料的来源

该公司生产用的主要原材料是硼废料和荧光粉废料。其中硼废料来源于硼磁材在生产加工中成型、切削、磨床废料，约占硼产量的30%；荧光粉废料来源于稀土三基色制粉、涂料及废管回收环节。该公司大多股东在冶金行业中工作多年，长期与产品上下游的硼和荧光粉生产或需求企业建立了良好的合作关系，公司成立后，与市新世纪材料有限公司、黄山桂明废旧金属回收有限公司、赣州立强新材料有限责任公司、赣州海川工贸有限公司等企业分别签订了每月提供硼废料100吨的长期合作合同（四个公司合计每月400吨）。原材料供应充分。

二、关于县科技有限公司工艺技术

该公司是从事硼废料及荧光粉废料的生产企业，工艺技术采用氧化焙烧、盐酸优溶的硼生产的专有技术，以及低酸低温回收荧光粉废料的专有技术，其中关键设备有内热式回转窑及外热式回转窑、雷蒙磨大型压滤机等，均是硼废料及荧光粉废料综合利用的专用设备。

从上述情况看，该公司是专业从事硼废料及荧光粉废料综合利用的生产企业，建设年处理硼废料5000吨、荧光粉废料10000吨，综合回收生产氧化镨、氧化铽、氧化铕等高纯稀土氧化物1500吨，无论是原料来源，还是工艺技术以及经营管理等方面，都有本身的优势。

急性白血病（acuteleukemia，AL）是造血干细胞恶性克隆性疾病，为发病率占首位的小儿临床恶性血液肿瘤疾病。AL可以分为两大类：急性淋巴细胞白血病（acutelymphoblasticleukemia，ALL）和急性髓细胞白血病（acutemyeloidleukemia，AML）。主要临床症状为贫血、出血、器官浸润和感染等，严重威胁患儿生命安全[1]。国际上一般通过MICM[综合形态学（morphology）、免疫学（immunology）、细胞遗传学（cytogenetics）、分子生物学（moleculebiology）]分型对初诊恶性血液病患者进行准确诊断与规范治疗，以提高患者生存率[2-4]。因此，及时、有效的诊断对于AL患儿的预后和治疗具有十分重要的意义。本研究采用常规染色体核型分析和荧光原位杂交技术对140例AL患儿进行检测，探讨联合检测对提高白血病染色体异常检出率的价值。

1材料和方法

1.1样本收集选取2017年1月—2018年12月上海市儿童医院140例AL患儿，其中ALL患儿99例、AML患儿41例。诊断和分型均符合中华医学会儿科学分会血液学组2014年制订的《儿童急性淋巴细胞白血病诊疗建议（第四次修订）》[5]。抽取患儿3～5mL骨髓，进行常规细胞遗传学（染色体核型分析）和荧光原位杂交检测。1.2试剂与仪器ChangMediumMF/BMC细胞培养试剂（美国irvinescientific公司）、Sigma-AlorichGs500染液（美国Sigma-Alorich公司）、VysisFISH探针（美国Abbott公司）、CX41、BX51、BX61显微镜（日本Olympus公司）、CDS5细胞生成干燥箱（美国Thermotron公司），Thermobrite杂交仪（美国Leica公司）。1.3方法1.3.1染色体核型分析采用直接法和24h法制备染色体标本，根据人类细胞基因组学国际命名体系2016分析二倍体核型20个中期分裂相。1.3.2荧光原位杂交检测探针分别为ETV6/RUNX1、BCR/ABL1、MLL、PBX1/TCF3、PML/RARα、ETO/AML1、CBFβ、MYC、CCND1/IGH、IGH/BCL2，在荧光显微镜下通过DAPI、CY3.5、FITC与三色融合滤光片观察样本的信号，计数300个细胞，如遇信号异常，则加数至500个或更多。

2结果

2.1染色体核型分析结果99例ALL患儿中，20.2%（20/99）染色体核型正常；45.5%（45/99）核型异常，所有核型异常中，单纯数目异常占15.6%（7/45），结构异常占53.3%（24/45），数目及结构均异常占31.1%（14/45）；不完全计数占24.2%（24/99），未见分裂相占10.1%（10/99）。19.5%（8/41）的AML患儿核型正常，核型异常占75.6%（31/41）；结构异常占64.5%（20/41），数目与结构均异常占35.5%（11/41），不完全计数4.9%（2/41）。ALL患儿染色体特异性异常包括der（19）t（1：19）12.5%（3/24）、t（9：22）16.3%（4/24）、t（8：14）8.3%（2/24）、t/del（11）（q23）20.8%（5/24）；高超二倍体占35.6%（16/45），中位染色体数为56（正常为52～67），主要是获得三倍体，其中100%获得X染色体，以下依次为获得21号（93.8%）、18号（68.8%）、6号（62.5%）、14和4号（各56.3%）、8号和10号（各31.3%）、17号（31.3%）。AML患儿染色体特异性异常包括t（15：17）及17号染色体数目异常占25.8%（8/31）。产生ETO-AML1融合蛋白的t（8：21）占16.1%（5/31）（高于文献[6]中12.0%～15.0%的发生率）、t/del（11）（q23）占22.6%（7/31）、inv（16）占9.7%（3/31）。此外，数目与结构均异常占35.5%（11/31），累及染色体X、8、7、21。2.2荧光原位杂交检测结果ALL患儿荧光原位杂交检测异常率为80.7%（113/140）（1例患儿多种探针异常只计数1次）。28例染色体核型正常患儿中，荧光原位杂交检测异常11例（39.3%）；76例核型异常患儿中，荧光原位杂交检测结果正常11例（14.5%）。ALL患儿中出现几种探针同时异常的现象，AML患儿则未发现这一现象。荧光原位杂交检测共检出异常信号151例次，其中ALL124例次，AML27例次。2.2.1ALL患儿荧光原位杂交检测异常特征ALL患儿荧光原位杂交检测异常率为86.9%（86/99）。异常信号共124次，ETV6/RUNX11异常信号占50.0%（62/124），PBX1/TCF3异常信号占23.4%（29/124），BCR/ABL1异常信号占14.5%（18/124），MLL检测t/del（11）（q23）占9.7%（12/124），MYC/IGH占1.6%（2/124），MYC占0.8%（1/124）。2.2.2AML患儿荧光原位杂交检测异常特征AML患儿荧光原位杂交检测异常率为65.9%（27/41），低于ALL患儿，其中ETO/AML1占29.6%（8/27）、PML/RARα占29.6%（8/27）、CBFβ/inv（16）占22.2%（6/27），MLL探针检测t/del（11）（q23）占18.5%（5/27）。2.32种方法联合检测结果染色体核型分析、荧光原位杂交和联合检测结果见表1、表2。

3讨论