抗体范文10篇

论文关键词：卵黄抗体；仔猪腹泻；研究进展

论文摘要：介绍了卵黄体抗研究的历程和较其他抗体的优越性，阐述了卵黄抗体在治疗仔猪腹泻上的研究与应用。

1卵黄抗体研究历程

卵黄抗体的研究始于19世纪末至20世纪初。1889年，Klemperer发现了卵黄中富含抗体。1934年，Jukes的试验证明，母鸡血清中的抗体可以转移到卵黄中，从而为雏鸡提供被动免疫保护。Patterson等（1962）试验证实，相对于别的血浆蛋白，IgG被选择性地转运到卵泡中。1969年，Leslie和Clem将这种抗体命名为IgY。Roth等（1981）和Locken等（1983）提出并证实IgY转运到卵泡的过程是受体依赖性的，认为卵巢的IgY受体使得血液中所有的IgY亚群被选择性转运到卵泡中。存在于禽卵黄中的免疫球蛋白主要是IgY，IgM、IgA和IgD含量极少。

鸡IgY在功能上相当于哺乳动物IgG，但在结构上有所不同。相对于哺乳动物IgG，鸡IgY也是由2条轻链和2条重链组成，但IgY重链没有铰链区，除可变区外，有4个恒定区。Warr等（1995）利用序列比较表明，鸡IgY重链可变区Cv3、Cv4相当于哺乳动物IgG重链可变区Cy2、Cy3，而鸡IgY重链可变区Cv2在哺乳动物IgG重链中被铰链区取代。序列比较分析同样发现，相对于其他免疫球蛋白IgG、IgM和IgA，鸡IgY与哺乳动物IgE在系统发生学上更接近一些。鸡IgY可分为IgY1、IgY2和IgY33个亚类，但卵黄中只有IgY1和IgY22种。

2卵黄抗体的优越性

关键词：单链抗体

单链抗体除本身的治疗作用外，还可作为载体与细胞因子等结合，构建成双功能抗体用于肿瘤的导像治疗。据文献报道［1~3］各衍生因子两个完整基因融合成单一蛋白，经抗肿瘤活性检测发现，融合蛋白具有双重活性，但融合蛋白的亲和性及抗肿瘤活性分别较衍生因子的功能及活性有所变化，可能由于融合蛋白结构变化导致功能及活性的变化。利用生物信息学网络资源分析融合蛋白的二级结构及其理化性质，为进一步探讨单链双功能抗体基因融合蛋白提供依据。

1双功能抗体的研究进展

随着分子生物学的发展，肿瘤的药敏基因治疗成为各国学者研究的热点［3~5］。将目的基因导入靶细胞是基因治疗过程中的一个重要环节，因为目的基因导入靶细胞效率的高低将直接影响基因治疗的效果甚至成败。由逆转录病毒介导的基因转移所面临的最大问题是病毒转导效率较低，原因之一是由于包装后难以得到稳定产生较高滴度感染性逆转录病毒的包装细胞系。单链抗体（ScFv）是由Fv抗体衍生而来，将抗体重链可变区和轻链可变区通过一段连接肽连接而成，ScFv具有天然抗体的亲和力，而分子只有完整抗体的六分之一。具有分子小、穿透力强、容易进入实体瘤周围的血液循环等特点，体内应用具有较大的分布容积和较高的组织分布比例，ScFv是构建双功能抗体，双特异性抗体等多种新功能抗体分子的理想元件。一个蛋白或蛋白片段可以融合到ScFv片段上以配备附加的性质，如免疫毒素的产生，是通过将一个肿瘤特异的ScFv或Fab融合到一个内源化能杀死靶细胞的毒素上。许多细胞特异抗体可将试剂传递到肿瘤部位发挥其细胞毒元件的作用。肿瘤特异性抗体片段已经与细胞因子融合［4~8］。在这种情况下，称免疫细胞因子的分子注射到患者体内，在肿瘤细胞表面积聚，可以激活肿瘤附近的T淋巴细胞。这些融合蛋白内在的肿瘤结合活性允许使用低浓度，没有通常与系统细胞因子注射相关的副作用。

细胞因子融合蛋白均具有衍生因子的双重活性，其中有一些的活性较各自野生型低，或者与野生型因子的相加一致，或者其活性高于衍生因子的相加活性，人工构建的新蛋白可能具有与衍生因子无关的新活性［9~11］。事实证明：具有不同功能域的复合蛋白质以及连接肽的设计是今后寻找新的治疗因子的有效途径和研究方向。生物信息学可以促进药物的发现和开发过程，即充分利用生物信息学的生物学和遗传学信息来寻找和开发以基因为基础的药物。

2双功能抗体的表达及其生物学性质的预测

【摘要】目的探讨酶联免疫吸附试验（ELISA）测定人类免疫缺陷病毒（HIV）抗体对艾滋病（AIDS）的诊断价值。方法选择2019年1月—12月于深圳市龙岗区第三人民医院治疗的AIDS高危人群或疑似HIV感染患者1820例，采集清晨空腹静脉血，采用ELISA、胶体金法检查HIV抗体，并以蛋白印迹诊断HIV抗体结果作为金标准，计算胶体金法、ELISA的敏感度、特异度及准确率、阴性预测值、阳性预测值，以及与蛋白印迹诊断结果的一致性。结果1820例AIDS高危人群或疑似HIV感染患者经蛋白印迹证实阳性、阴性各有21例、1799例；胶体金法诊断HIV抗体阳性、阴性各有372例、1448例，其中漏诊7例，误诊358例；ELISA诊断HIV抗体阳性、阴性各有56例、1764例，其中漏诊1例，误诊36例。以蛋白印迹诊断结果作为金标准，ELISA诊断HIV抗体敏感度（95.24%）、特异度（98.00%）及准确率（97.97%）、阴性预测值（99.94%）、阳性预测值（35.71%）均高于胶体金法（66.67%，80.10%，79.95%，99.52%，3.76%），有统计学差异（P<0.05）；胶体金法诊断HIV抗体结果与蛋白印迹诊断结果的一致性差（Kappa=0.051，P=0.000）；ELISA诊断HIV抗体结果与蛋白印迹诊断结果的一致性较为理想（Kappa=0.511，P<0.001）。结论ELISA用于HIV抗体筛查中敏感度、特异度及准确率、阴性预测值、阳性预测值均较高，且与蛋白印迹诊断结果的一致性较佳，能够提高AIDS检出率，可作为筛查HIV抗体较为准确的方法于临床推广。

【关键词】艾滋病;人类免疫缺陷病毒;酶联免疫吸附试验;胶体金法;蛋白印迹;诊断效能;一致性

艾滋病（AIDS）作为一种免疫性疾病，具有较强的传播性，多由于人类免疫缺陷病毒（humanimmunodeficiencyvirus，HIV）经血液途径、性接触途径及母婴途径等感染所致，若未能及时诊断并治疗会破坏人体免疫系统，造成患者反复感染，威胁生命安全。随着我国AIDS从局部暴发到广泛流行，其防治策略也逐渐从道德宣传和出入境防范转变为主动对公众进行AIDS知识的宣传教育，各级地方政府、人民医院、学校都参与到AIDS防治的宣传教育中。加强HIV抗体检测，有利于及时发现HIV病毒并对其传播进行阻断[1，2]。酶联免疫吸附试验（enzyme-linkedimmunosorbentassay，ELISA）、胶体金法为筛查HIV抗体的重要方法，但目前何种方法检测结果更为准确尚无确切结论[3，4]。本研究探讨ELISA测定HIV抗体对AIDS的诊断价值，并与胶体金法诊断HIV抗体结果进行比较，从而实现AIDS早发现、早诊断、早治疗，现报告如下。

1资料与方法

1.1一般资料

选择2019年1月—12月于深圳市龙岗区第三人民医院治疗的AIDS高危人群或疑似HIV感染患者1820例。其中男943例、女877例；年龄28~59岁，平均年龄（42.19±3.26）岁；体质量指数（bodymassindex，BMI）18.2~29.7kg/m2，平均（23.49±1.56）kg/m2；受教育程度：小学及以下、初中、高中、高中以上各有459例、318例、586例、457例；婚姻状况：未婚、再婚、离异/丧偶各有906例、893例、21例；职业：无工作、有工作各有146例、1674例；性取向：男男性行为、异性性行为各有820例、1000例。

关键词：抗体

天疱疮是累及皮肤黏膜的一种自身免疫性大疱性疾病。目前已证实天疱疮是以患者体内出现针对自身表皮角质形成细胞上的桥粒芯糖蛋白（dcsnoglein,Dsg)的特异性抗体IgG，能与角质形成细胞结合产生棘层松解，导致临床上所见的松弛性水疱和大疱，其中Dsg1、Dsg3及其抗体在天疱疮中发挥极其重要的作用。本文就抗原抗体及其临床意义作一综述。

1抗原抗体

1.1抗原现已明确天疱疮抗原Dsg属于桥粒的跨膜成分,属粘附分子中的钙粘素超家族的成员,其基因位于18q12.1上。Dsg分为Dsg1、Dsg2、Dsg3三类，其中Dsg2表达于所有的桥粒组织中，Dsg1、Dsg3主要限于复层鳞状上皮。Dsg1分子量约160KD，主要分布于表皮上层的角质细胞膜上，以颗粒层和颗粒下层优势表达［1］，为落叶性天疱疮（PF）的靶抗原；Dsg3的分子量约为130KD，主要分布于表皮基底层，在基底层上层的角质形成细胞表面，是寻常性天疱疮（PV）的靶抗原。杨春俊等［2］在天疱疮抗原的定位研究中，用金标记包埋后采用免疫荧光技术，发现PF和PV的靶抗原在角质形成细胞间的部位相同，均位于桥粒复合体上。Dsg1及Dsg3分子同其他钙粘素分子一样具有5个串联重复、大小大致相等的胞外结构域（extracellulardomain,EC)，其中ECⅠ对应胞外氨基端残基，EC5位于羟基端。Dsg1及Dsg3的不同主要在于Dsg1的1～4胞外结构域具有同源性，Dsg3的5个胞外结构域均具有同源性。

天疱疮抗原的5个胞外结构域中，EC0、EC2、EC4之间具有相对较大的同源性，能被天疱疮患者的血浆特异性识别，因此，这些表位被称为“免疫优势表位”或“致病性表位”，特异性的识别该表位的抗体被称为“致病性抗体”，其中EC1-2及EC3-4具有抗原特异性，与天疱疮抗体具有高度的亲和力，从而为天疱疮的血清学诊断与鉴别提供了新的途径［3］。

1.2抗体天疱疮抗体（PAb)是天疱疮发病的关键因素。1964年Beumer等证实在天疱疮病人的血清中存在抗鳞状上皮的细胞间抗体，并且发现在天疱疮皮损的边缘有免疫球蛋白和补体沉积。最近，Amagai［4］用ELISA方法，通过重组Dsg1、Dsg3，发现天疱疮的临床表现是由患者体内抗桥粒芯蛋白自身抗体的类型所决定。且国内外多数研究认为寻常性天疱疮中天疱疮抗体IgG4是其发病中的重要致病性抗体亚类。国内李逾等［5］为研究天疱疮抗体（PAb）各亚类在致病中的作用，在培养的组织中加入纯化的天疱疮抗体IgG1～IgG4，免疫荧光检查发现IgG4的荧光最强，其次为IgG3、IgG1、IgG2，说明IgG4与抗原有较强的亲和力。而当各亚型浓度相同时，致培养表皮细胞棘层松解程度相同。另外，在培养的表皮细胞中加入天疱疮抗体继续培养24h，细胞的整体外观无明显变化，48～72h，细胞间隙渐增宽，细胞出现松解和小水疱。由此奠定了天疱疮抗体在天疱疮发病中的重要地位。

摘要目的：为了制备nNOS特异性抗体。方法：用PCR的方法克隆出nNOS708～881aa片段的编码基因并将之插入pET28a原核表达载体。结果：成功地在大肠杆菌中获得高效表达。经HisTag-Sepharose和电泳回收法得到纯蛋白，将此蛋白免疫兔，制备出nNOS特异性抗体，抗体效价可达1∶8000。利用该抗体成功地检测了正常肌肉和DMD肌肉中nNOS的含量变化，证实DMD肌肉中nNOS的含量明显低于正常肌肉。结论：制备的抗体具有较高的特异性，对nNOS的免疫检测具有重要应用价值。

关键词nNOS特异性抗体重组表达肌肉

RecombinantexpressionofnNOSfragmentinE.coliandpreparationofspecificantibodyagainstnNOS

CHENQiang,ZHUMin-Sheng,SHENYueetal.

NanjingMilitaryInstituteofMedicalScience,Nanjing210002

AbstractObjective：TopreparethespecificantibodyagainstnNOS.Methods：Clonedagenefragmentcoding708to881aaofnNOSwithPCRandinsertedthefragmentintoapET28aexpressionvector.Results:RecombinantproteinwasexpressedeffectivelyinE.coliandpurifiedwithHisTag-Sepharoseandelectrophoresis.Usingthepureproteinasantigen,immunizedrabbitsandobtainedhighspecificandhightiter(1∶8000)antibodyagainstnNOS.WesternblotassayshowedthatnNOSexpressedinnormalskeletalmuscleismuchhigherthanthatinDMDskeletalmuscle.Conclusion:Theanti-nNOSantibodywithagoodspecificitywaspreparedandtheantibodywasusefulforimmunologicaldetecteionofnNOS

摘要：目的观察冬虫夏草对小鼠抗体形成细胞的作用。方法用100%浓度冬虫夏草浸出液定期给小鼠灌胃，然后进行小鼠抗体产生能力检测、特异玫瑰花环结形成细胞检测（SRFC）、血清IgG检测。结果用药组以上3项免疫学指标均增高。结论冬虫夏草有明显促进抗体形成细胞的作用。

关键词：冬虫夏草；免疫功能；小鼠

冬虫夏草，始载于《本草纲目拾遗》。因其冬季为虫，夏季为草，故名。为麦角菌科真菌冬虫夏草Cordycepssinensis(Berk.)Sacc，寄生蝙蝠蛾科昆虫幼虫上的子座及幼虫尸体的复合体。主产于四川阿坝藏族自治州松潘、理县、茂汶羌族自治县、甘孜藏族自治州、德格、道孚、青海玉树、果洛藏族自治州及同德、同仁，云南中甸、德钦、丽江纳西族自治县等地，均为野生。主要功效：益肾补肺，止血化痰，止嗽定喘。本实验主要研究冬虫夏草对抗体形成细胞作用，旨在为冬虫夏草的临床应用提供科学依据。

一、器材与方法

1.1仪器和药物

低温冷冻离心机（Beckman,美国）；美国Multiskan产全自动酶标仪；恒温水浴箱（上海）；电泳仪（上海）；100目不锈钢网。冬虫夏草（购于附属医院中药房），取100g加水1000ml，文火煎煮2h，去渣浓缩为100ml（浓度为100%）备用。

【摘要】目的探讨血清结核抗体测定对活动性肺结核的诊断实用价值。方法对我院2010年3月-9月入院的98例入院考虑肺部感染及结核病倾向的患者进行血清结核抗体测定。结果98例入院患者结核抗体阳性为70例，占71.4%。结论血清结核抗体测定对活动性肺结核的临床诊断具有较高的实用价值。

【关键词】肺结核结核抗体测定诊断

一、资料与方法

1.1一般资料：本组病例98例，患者中男性39例，女性59例.年龄在1岁—80岁间。论文百事通其中：1-10岁5例；10-20岁15例；20-40岁32例；40岁以上46例.1-30岁者多为急性起病，30岁后多为慢性起病。

1.2方法

对入院初诊考虑有结核病倾向的患者，入院后即进行结核抗体测定，对结核中毒症状明显但初次测定结核抗体阴性部分患者，于2周和4周后再次测定结核抗体。该组患者入院初诊考虑：肺部感染18例、支气管扩张症13例、浸润性肺结核20例、结核性胸膜炎33例、结核性脑膜炎10例、脊柱结核3例等。

【关键词】前列腺肿瘤；抗原,CD3；抗体亲和力；四聚体

BiologicalactivityoftetramerofbispecificsinglechainantibodyagainsthumanprostatespecificantigenandCD3molecule

【Abstract】AIM:Tostudythebiologicalactivityoftetramerofbispecificsinglechainantibodyagainsthumanprostatespecificantigen(PSA)andCD3molecule.METHODS:Flowcytometry(FCM)wasusedtodetectthebindingactivityofbispecificsinglechainantibodytoCD3positivecelllineJurkatandprostatecarcinomacelllineLNCaP.Theefficacyoftheantibodiyinmediatingtumorcelllysisinvitrowasdeterminedbyusingthe51Crreleasetest.Forinvivoevaluationoftheantibodysactivity,anudemousemodelwasused.ThemicewereinoculatedwithLNCaPprostatecancercells.RESULTS:ItwasdemonstratedthatthetetramerofbispecificsinglechainantibodycouldbindtotheJurkatandLNCaPcellswithhighspecificity.Thepercentsofthecellsbondbytheantibodywere70.4%and81%,respectively.Invitro,withactivatedCTLsaseffectorcells,aspecificlysisofLNCaPcellsmediatedbytheantibodywasconfirmedby51Crreleaseassay.ThespecificlysisrateofLNCaPcellswaspositivelycorrelatedtotBsAbconcentrationoreffector/targetcellratio.Thehighestspecificlysisrateswere(80.3±5.2)%and(78.6±5.5)%infixedantibodyconcentrationgroupandfixedeffector/targetcellratiogroup,respectively.Invivo,theantibodycouldsuppressthetumorgrowthinnudemicesignificantlyascomparedtothegrouptreatedonlywithCTLsandtheuntreatedcontrolgroup(P<0.0001).CONCLUSION:ThetetramerofbispecificsinglechainantibodyagainsthumanprostatespecificantigenandCD3moleculehasagoodbiologicalactivityinbindingantigens,mediatinglysisofLNCaPcellsandinhibitingtumorgrowth.

【Keywords】prostaticneoplasms;antigens,CD3;antibodyaffinity;tetramer

【摘要】目的：研究抗前列腺特异抗原(PSA)/抗CD3双特异性单链抗体四聚体的生物活性.方法：利用流式细胞仪和51Cr释放试验评价双特异性单链抗体四聚体的抗原亲和活性和体外介导杀伤靶细胞的效果.利用裸鼠前列腺癌模型分析其在体内介导细胞毒T淋巴细胞对肿瘤细胞杀伤的能力.结果：抗PSA/抗CD3双特异性单链抗体四聚体可以特异性结合表达前列腺癌细胞和CD3阳性的淋巴瘤细胞，阳性结合率分别为70.4%和81%.在体外，有细胞毒T淋巴细胞存在时该四聚体可引起前列腺癌细胞的裂解，在抗体浓度固定组和效应细胞/靶细胞比例固定组，靶细胞裂解率分别随着效应细胞/靶细胞比例和抗体浓度的增加而增加，最高裂解率分别可以达到(80.3±5.2)%和(78.6±5.5)%.与对照组比较，接种前列腺癌细胞的裸鼠在体内注射激活的细胞毒T淋巴细胞的同时接受该四聚体的治疗后，肿瘤生长明显受到抑制(P<0.0001).结论：抗PSA/抗CD3双特异性单链抗体四聚体具有良好的生物学活性，具有体外杀伤肿瘤细胞和体内抑制肿瘤生长的作用.

【关键词】前列腺肿瘤；抗原，CD3；抗体亲和力；四聚体

【关键词】信号转导与转录激活因子3；抗体；乳腺肿瘤；组织学分级

PreparationofpolyclonalantibodyagainstStat3anditsapplicationinthediagnosisofbreastcancer

【Abstract】AIM:TopreparerabbitantibodyagainstStat3andanalyzeitsapplicationinthediagnosisofbreastcancer.METHODS:ThemalerabbitswereimmunizedwithrecombinantmouseStat3proteintoprepareantibodyagainstStat3.ThepurityandspecificityoftheantibodywereanalyzedbyWesternBlot.TheexpressionofStat3proteininthe65casesofbreastcancerand30casesofnormalbreasttissuewasdetectedbyimmunohistochemicalstaining.RESULTS:ThetiterofantiStat3antibodyinserumwas>1∶256000(A450=0.40)atthe6thweekaftertheimmunization.BothSDSPAGEandWesternBlotanalysisshowedthattherewasanobviousproteinbandwithMr92000,TheintracytoplasmicexpressionlevelsofStat3proteininthedifferenthistologicalgradingsof65casesofbreastcancershowedsignificantdifference(P<0.05),sodidtheintranuclearexpressionlevels(P<0.05).CONCLUSION:PolyclonalantibodyagainstStat3withhightiterandspecificitycanbepreparedsuccessfully,anditcanbeusedtodetecttheexpressionofStat3proteininbreastcancertissue.

【Keywords】Stat3;antibodies;breastneoplasms;histologicalgrading

【摘要】目的：制备兔抗信号转导与转录激活因子3（Stat3）抗体，分析其在乳腺癌诊断中的价值.方法：应用人工重组小鼠Stat3蛋白，免疫雄性家兔制备抗Stat3抗体；用免疫印迹法分析检测抗Stat3抗体的纯度和特异性；应用免疫组化染色法检测65例乳腺癌和30例正常乳腺组织中Stat3蛋白的表达.结果：用Stat3蛋白免疫家兔被免疫6wk后，其血清中抗Stat3抗体效价>1∶256,000（A450nm=0.40）；SDSPAGE和免疫印迹分析均在分子质量（Mr）92000处有明显的带；65例乳腺癌组织的细胞浆和细胞核中，Stat3蛋白表达量在不同的组织学分级之间有统计学差异(P<0.05).结论：高效价和特异性强的抗Stat3抗体被成功制备.该抗体可用于乳腺癌组织细胞Stat3蛋白表达的检测.

【关键词】信号转导与转录激活因子3；抗体；乳腺肿瘤；组织学分级

摘要目的：进一步探索重组基因工程抗体在原核系统中有效的活性表达途径。方法：在已构建的抗HBx单链抗体(ScFv)的基础上，利用粘粒载体构建了抗HBx单链噬菌体抗体(phageantibody)，并转化大肠杆菌。结果：该噬菌体抗体经辅助噬菌体M13KO7诱导和噬菌体次要衣壳蛋白(PⅢ)融合表达，并组装成噬菌体衣壳蛋白可溶性表达于培养液上清，经ELISA和Western-blot的结果证实可溶性表达产物具有HBx抗原的特异性亲和力。结论：单链噬菌体抗体的构建表达成功，可望成为原核系统中表达筛选特异性抗体可变区及有效制备活性基因工程抗体的简捷途径。

关键词噬菌体展示技术基因工程抗体乙型肝炎X抗原

Expressionofrecombinantanti-HBxsinglechainphageantibody

ZHOUGe,LIUKang-Da,GONGYietal.

ZhongshanHospital,ShanghaiMedicalUniversity，Shanghai200032

QINHui-Lian,HEXi.