音标学习计划范文

导语：如何才能写好一篇音标学习计划，这就需要搜集整理更多的资料和文献，欢迎阅读由公务员之家整理的十篇范文，供你借鉴。

篇1

【关键词】 上消化道出血; 老年人;病因

上消化道出血(upper gastrointestinal hemorrage，UGH)是指屈氏韧带以上的食管、胃、十二指肠和胃空肠吻合术后的空肠上段和胰、胆等病变引起的出血[1]，是消化内科的急症。由于老年患者特有的身体特点，老年上消化道出血的原因、临床表现及预后与青年患者有所不同。回顾性分析本院2007年1月至2009年1月共收治上消化道出血老年患者经胃镜确诊者60例，现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 本组60例患者，男38例，女22例，年龄60~81岁，平均72.6岁。60例患者根据呕血、便血的临床表现，大便潜血试验阳性，全部病例均经胃镜或上消化道钡餐透视检查诊断确诊，全部符合上消化道出血诊断标准，并排除下消化道出血。

1.2 临床症状入院时有呕血、黑粪和(或)便血，大便潜血阳性，排除来自口、鼻、咽部及呼吸道出血，其中黑便34例，呕血8例，黑便+呕血13例，便血7例。估计出血量1000 m12例， 4例患者出现失血性休克。22例在24 h内就诊，其余多在3 d内就诊。

1.3 治疗方法本组主要采用内科保守治疗，患者入院后均绝对卧床休息，通过补充血容量、输全血或红细胞悬液，静脉应用质子泵抑制剂如奥美拉唑等。对于出血量大者可以使用垂体后叶素收缩内脏血管，降低门脉及侧支循环压力，如果有禁忌证可选用生长抑素类药物如醋酸身曲肽注射液(善宁)等。同时对合并慢性疾病者给予相应治疗。经内科治疗48 h后无效而且出血加重的患者可考虑进行手术治疗。

2 结果

本组老年人上消化道出血的病因为十二指肠溃疡18例，胃溃疡16例，肝硬化食管胃底静脉曲张破裂出血7例，复合溃疡6例。肿瘤7例，其他5例，1例未行胃镜检查，自动出院，未能明确诊断。老年组复合溃疡、胃溃疡、肿瘤高于非老年组(P

3 讨论

在老年人上消化道出血的病因中，仍以消化性溃疡占首位、特别是胃溃疡多见，十二指肠溃疡所占比例明显下降;而中青年组十二指肠溃疡明显多于胃溃疡，与文献报道一致[2]。老年人胃溃疡增多的原因可能与老年人胃黏膜呈退行性变，血供不足致营养不良，分泌功能低下，使胃黏膜上皮细胞修复功能受损，胃黏膜屏障功能减退;胃黏膜的营养因子如胃泌素、表皮生长因子等的减少， 胃腔内H+浓度明显增高会使其反弥散增多，胃黏膜屏障功能受损，致其防御能力减退有关[3，4]。同时，老年人动脉硬化等引起胃黏膜血流量减少，影响黏膜的再生修复亦是其原因之一。老年人常因其他疾病长期服用非甾体类药物，对胃黏膜有明显损害，非甾体类药物致胃肠出血可能与以下因素有关:① 抑制环氧化酶-1的活性，减少前列腺素的合成;②抑制血栓素A2的合成，使血小板聚集减少，诱发出血;③ 异常增多的白三烯及氧自由基对黏膜有毒性作用;④削弱胃黏膜屏障，影响上皮细胞的修复功能;所以老年人尤其是有胃肠疾病者应慎用非甾体类药物，必要时可同时服用抑酸类药或胃黏膜保护剂以进行预防，警惕出血情况的出现。

急诊胃镜对上消化道出血的意义重大，不但可确定有无活动性出血，还可对选择处理方法有指导意义[5]。急性胃黏膜病变诊断在急诊胃镜检查前非常困难，因病变浅，能在短时间内愈合，应用常规胃镜检查难以发现这种病变，急诊胃镜开展使急性胃黏膜病变诊断率显著提高。此外，急诊胃镜检查对选择处理上有指导意义，当发现出血病灶为癌肿引起者，需转外科治疗，但对急性胃黏膜病变多数用内科治疗，可镜下止血，如喷洒止血药物凝血酶等，常能很快控制出血。老年人上消化道出血，特别是合并有其他疾病或由其他原发病所致者，故治疗上应采取综合治疗措施，在病因诊断及治疗的同时，应紧急处理上消化道出血。内科治疗主要是补充血容量，控制出血和再出血，及时输血输液，以维持有效血液循环量。凡受体阻滞剂甲氰咪呱和立止血对老年上消化道出血可作为首选药物，胃镜下使用去甲肾上腺素冰盐水灌洗后局部喷洒凝血酶疗效肯定，值得在基层医院推广。

参 考 文 献

[1] 郑芝田.胃肠病学.人民卫生出版社，2006:301-307.

[2] 黎忠信，钟华志.1869例上消化道出血病因及相关因素分析.中华消化内镜杂志，2001，8(1):19.

[3] 叶任高，陆再英，谢毅，等.内科学.人民卫生出版社，2005:480.

篇2

关键词：英语学习两极分化原因对策

义务教育英语课程标准指出：“英语课程要面向全体学生，关注语言学习者的不同特点和个体差异。”这是英语课程标准的基本理念，也是素质教育的出发点。但由于各种原因，学生进入初中后，越来越多的学生开始对英语学习不感兴趣，学习态度不端正，成绩越来越差；而另有少数学生则学习兴趣浓厚，学习轻松且成绩优良，两极分化不断加大。如何处理解决好这一问题，是学生以后能否继续学好英语的关键。

一、两极分化的形成原因

两极分化的现象在七年级的上学期就已经出现了，造成学生学习英语积极性不高，出现两极分化的主要原因大致有以下四种：

1.教材的变化

初一新教材与老教材相比跨度大，语言覆盖面广，词汇量大，练习里常出现许多生词，一些学生在小学基础不好，要想跟上就更难了。

2.学生的学习方法

（1）学习不得法。例如：学生音标不认得，念单词用汉字注音，有些学生仍然是和汉语连在一起，记生词靠死记硬背，学语法死搬硬套，练习句型生吞活剥，写句子逐词对译，始终摆不脱汉语习惯。

（2）缺乏足够的毅力、恒心。很多学生学习英语有很大的盲目性和随意性。他们学英语只是新鲜一阵，觉得这门课好像很有意思，一遇困难挫折就丧失信心和兴趣，逐渐就不学了。

3.教师的教学方法

教师授课时不重视教学内容和形式的设计，采取“满堂灌”的方法，侧重教授学生知识，忽视指导学生掌握学习策略。长期如此，学生对学习失去兴趣，在课堂上由于信心不足而不敢开口说英语，往往又被教师忽视，导致恶性循环。

二、避免两极分化的几点对策

（一）、学生方面

1.培养学习兴趣

（1）兴趣是最好的老师。缺乏兴趣，学生只能被迫去学，根本谈不上创造学习。要把学生从“要我学”转变为“我要学”就需要教师持续不断地激发和培养学生学习英语的兴趣。教师要注意教学的生动性和趣味性，使课堂教学生动活泼，让学生扮演各角色，相互对话，讲故事，表演短剧节目。教师还要善于利用实物、卡片、图表、图片、身势语言，创设生动形象化的情景；播放英语歌、做游戏、猜谜、搞竞赛等活动。通过这些活动激发学生学习热情。时间一久，这些兴趣就会转化为强大内部学习动机。使学生进行自觉、自主、有创造思维的学习。

（2）多为学生创造学习成就感。教师通过各种方式，激励学生的成就感和进取精神，因材施教，因人而异。着重引导学生积极思考，敢回答，对后进生不能回答时应耐心鼓励说“Try again”、“Don’t worry， Take it easy.”、“I think you can do it will next time.”，使不同学生都能体验成功喜悦和自身价值，对学生消极情绪，思想顾虑和精神负担要给予耐心指导帮助。

2.养成良好的学习习惯和科学的学习方法

（1）要养成预复习的习惯。在预复习的过程中，学生要敢于发现问题，并自己努力想办法解决问题。预习新知使学生获得所学知识的心理准备，而复习旧知则能加深学生对重难点的认识，对学生长期的英语学有裨益。

（2）循序渐进，一点一滴积累。在学习过程中不急躁不贪心，掌握一点是一点。

（3）多读，多听，多讲，多写，找内容有知识性，趣味性，娱乐性的英语资料。

（二）、教师方面

1.改进教学方法和手段

（1）改进备课方法。教师的备课应该在认真钻研教材的基础上从学生的实际学情出发，确定符合他们认知特点的教学目标，既包括基础知识和基本技能方面的目标，也包括培养学生综合能力的目标；准确地理解教学的重点和难点；选准课堂教学的切入点。

（2）改进课堂结构。根据教学的实际需要和学生的实际情况合理地、灵活地安排课堂教学的环节，即对各个教学环节及其课堂所用时间进行合理的调整，使课堂结构更合理、更科学。

（3）创造英语语言环境。尽量用英语组织课堂教学，课外开展“英语角”等兴趣小组，加强听、说、读、写四种技能的全面训练，让每一个学生都有充分“表现”自己的机会，从而增强学好英语的信心和勇气。

2.提高教师本身的综合素养

（1）跨文化交际知识与文化修养。教英语离不开英语文化。英语教学的一个重要目标就是培养学习者运用英语进行交际的能力，而培养这种能力，单靠语音、词汇、语法、句子是远远不够的，还要学习了解语言形式之外的更丰富的文化内容。英语教师不仅应该具备跨文化意识，并且在教学中时时向学生渗透这种意识。

（2）人格魅力与师德修养。第一、健康的身心，积极的人生态度。由于多方面因素，农村中学教师都有各种心理问题，这一方面需要全社会对教师和教育事业更多的支持和关注，另一方面也需要教师学习和锻炼，不断提高自身的心理素质和精神境界。第二、永恒的爱心。关爱每个学生是对教师的起码要求。教师对学生应有“赏识教育”和“爱心教育”。第三、开放的心态与创新的意识。知识和信息时代要求教师不断更新自己的知识结构。

总之，在英语教学中避免两极分化的这项工作是一项艰巨而长期的系统工程。教师应该采取一些行之有效的措施，激发学困生的学习兴趣，增强其学习信心，使其成绩稳步上升，并最终达到消除两极分化的目的。

参考文献

篇3

【关键词】 银屑病 Toll样受体2 抗链球菌溶血素 白细胞介素8

［ABSTRACT］ObjectiveTo investigate the expression of tolllike receptor 2 (TLR2) mRNA in monocytes of psoriatic patients’ blood and the serum levels of interleukin8 (IL8) and antistreptolysin O (ASO)， and to explore their relevance to pathogenesis of psoriasis.MethodsExpression of TLR2 mRNA were detected by reverse transcription polymerase chain reaction (RTPCR) method; serum levels of ASO and IL8 were detected by latex agglutination assay and enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) respectively. ResultsExpression of TLR2 mRNA of the patients was higher than that of the controls (t=5.541，P＜0.01). There was no significant difference in the expression of TLR2 mRNA between guttate and plaque psoriatic patients (t=0.318，P＞0.05). The positive rate of ASO in the patients was higher than that of the controls (χ2=8.604，P＜0.01); and the ASO positive rate in guttate patients was higher than that in plaque psoriatic patients (χ2=9.780，P＜0.01). Level of IL8 in psoriatic patients was higher than that controls (t=28.463，P＜0.01); there was no significant difference between guttate and plaque psoriatic patients (t=0.660，P＞0.05). The expression of TLR2 mRNA in psoriatic patients with positive ASO was higher than that in patients with negetive ASO (t=2.407，P＜0.05); the expressions of TLR2 mRNA and IL8 in psoriatic patients had a positive correlation (r=0.637， P＜0.01). ConclusionTLR2 may be involved in the occurence and development of psoriasis by recognizing the invading streptosis and the following generation of cytokines.

［KEY WORDS］psoriasis; tolllike receptor 2; antistreptolysin; interleukin8

银屑病是一种常见的慢性炎症性皮肤病，与遗传和环境因素有关，其病因和发病机制尚未完全明确，目前多认为是一种T细胞介导的免疫失衡性疾病。有研究表明，细菌、真菌、病毒等微生物感染与银屑病的发生和发展有密切关系，并认为银屑病是一种皮肤抵抗病原微生物的防御性表现［1］。近年来，Toll样受体(TLR)在感染性疾病及银屑病中的作用引起国内外有关专家的广泛关注［2，3］；已有研究表明，IL8可促进银屑病的炎症浸润，介导皮损的发生和发展［4］。银屑病病人TLR2基因表达国外多集中于对角质形成细胞（KC）的研究，尚未见银屑病病人外周血单个核细胞TLR2基因表达，以及关于感染与TLR2基因表达及IL8水平关系的相关报道。本文采用逆转录聚合酶链反应（RTPCR）方法检测银屑病病人外周血单个核细胞TLR2基因表达水平，并分别采用胶乳凝集法和酶联免疫吸附（ELISA）法检测血清抗链球菌溶血素“O”（ASO）和白细胞介素8（IL8）水平，探讨其与银屑病发病的关系，从而为阐明感染诱发或加重银屑病提供分子水平的证据。

1 资料和方法

1.1 一般资料

银屑病病人（银屑病组）均为我院门诊皮肤科病人，具有典型皮损，临床诊断明确。其中，点滴型银屑病病人30例，男16例，女14例；年龄17～60岁，平均33.13岁；病程1周～1.5月；发病前1周～1月有发热、咽喉肿痛或其他上呼吸道感染症状。斑块型银屑病病人20例，男9例，女11例；年龄18～63岁，平均34.5岁；病程3月～10年；所有病人观察前1月未接受系统治疗，且不伴有其他急慢性疾病。对照组30例，为来我院体检的健康人，男女各15例；年龄19～64岁，平均36.24岁；近1月内均无发热、咽喉肿痛等明显上呼吸道感染症状，且不伴有其他急慢性疾病。

1.2 标本收集

常规消毒皮肤后，抽取外周静脉血5 mL，其中2 mL枸橼酸钠抗凝，用于TLR2 mRNA的检测；其余3 mL置试管中，待血块收缩后以2 500 r/min离心分离血清，分装后置-20 ℃冰箱保存，分别用于ASO、IL8水平检测。

1.3 TLR2 mRNA表达检测

以小量血液总RNA抽提试剂盒（上海华舜生物工程有限公司）提取外周血中总RNA，紫外分光光度计（DU640，美国Beckman公司）测定其纯度和含量，取RNA样本2 μg采用一步法RTPCR检测TLR2 mRNA表达，以β肌动蛋白（βactin）为内参照。引物（上海生工生物工程技术服务公司合成）序列为：TLR2正义：3′GCCAAAGTCTTGATTGATTGG5′，反义：3′TTGAAGTTCTCCAGCTCCTG5′，产物长度为347 bp；βactin正义：3′ACGTCTGCTGGAAGGTGGAC5′，反义：3′GGTACCACCATGTACCCAGG5′，产物长度为168 bp。

1.4 扩增产物检测

PCR扩增完毕后，每个反应体系取产物2 μL，于20 g/L琼脂糖凝胶中进行电泳，在紫外线透射凝胶成像仪（VilberLourmat，France）中分析电泳带的灰度值，以TLR2/βactin记录结果，作为TLR2 mRNA的相对表达水平。

1.5 ASO检测

采用胶乳凝集法（试剂为北京利德曼生化有限公司生产的ASO胶乳试剂），以ASO＞2×105 kU/L为阳性。

1.6 血清IL8水平测定

采用双抗体夹心ELISA法（试剂盒为Biosource ELISA kit，北京中昊时代生物技术分装）。具体操作严格按试剂盒说明书进行，即刻测量标本在492 nm波长处吸光度值，并根据标准曲线查出其浓度。

2 结

果

银屑病组TLR2 mRNA的表达水平显著高于正常对照组，差异有统计学意义（t＝5.541，P＜0.01）；点滴型组与斑块型组比较差异无显著性（t＝0.318，P＞0.05）。银屑病组ASO阳性率明显高于正常对照组，差异有显著性（χ2=8.604，P＜0.01）；点滴型组明显高于斑块型组，差异亦有显著性（χ2=9.780，P＜0.01）。银屑病组IL8水平显著高于正常对照组，差异有显著性（t＝28.463，P＜0.01）；点滴型组与斑块型组相比差异无显著意义（t＝0.660，P＞0.05）。点滴型银屑病病人ASO阳性者TLR2 mRNA表达水平（1.020±0.152）明显高于ASO阴性者（0.871±0.186），差异有显著意义（t＝2.407，P＜0.05）；银屑病病人外周血单个核细胞TLR2 mRNA表达与血清IL8水平呈正相关（r=0.637，P＜0.01）。见表1。表1 各组TLR2 mRNA表达及ASO、IL8检测结果比较

3 讨

论

3.1 TLR2与银屑病的关系

TLR是一新的蛋白家族，是机体通过感知病原微生物直接做出防御反应的天然免疫受体，可启动天然免疫反应和影响后继的获得性免疫反应［2］，成为天然免疫和获得性免疫之间的桥梁。TLR中与银屑病关系密切的主要是TLR2。以往对TLR2与银屑病关系的研究，主要来自对皮肤KC的观察。

BAKER等［3］采用免疫染色法研究显示，TLR2在正常皮肤表皮基底细胞高度表达，而在银屑病病人皮损处表皮基底细胞中度表达，在表皮上部KC高度表达。已有研究表明，银屑病皮损中细菌、真菌等的定植明显高于正常皮肤，因此，TLR2在表皮上层表达上调可能是角蛋白对病原微生物存在的反应。

已有研究表明，银屑病病人皮损中存在TLR2基因表达上调，但尚未见血液中单个核细胞TLR2基因表达与银屑病关系的相关报道。本实验采用高敏感性的RTPCR方法对银屑病病人外周血单个核细胞TLR2 mRNA表达进行研究，结果显示，银屑病组TLR2 mRNA表达显著高于正常对照组，差异有显著性，提示银屑病的发生、发展过程中也存在外周血单个核细胞TLR2基因表达上调。

3.2 链球菌感染与银屑病的关系

链球菌感染人体后，体内可产生抗ASO抗体。本研究结果显示，银屑病组ASO阳性率明显高于正常对照组，差异有显著性，提示寻常型银屑病的发生或发展与链球菌感染有关；点滴型病人ASO阳性率亦高于斑块型病人，两组之间有显著性差异；点滴型病人ASO阳性者TLR2 mRNA表达水平高于ASO阴性者，提示链球菌感染可能通过诱导TLR2基因表达上调，活化TLR信号转导通路，从而介导银屑病皮损的发生。

点滴型银屑病病人发病前均有不同程度的上呼吸道感染症状，提示可能存在链球菌感染；而斑块型银屑病病人无明显上呼吸道感染史，而统计学分析显示两组间TLR2 mRNA表达无显著性差异［5］。据此我们推测链球菌感染可能在点滴型银屑病的发病过程中起重要作用，而斑块型银屑病可能与其他真菌、细菌、病毒感染的关系更为密切，如马拉色菌及金黄色葡萄球菌、HIV等［6，7］，但确切原因还有待于进一步研究。

3.3 IL8与银屑病的关系

IL8是一种重要的多元性炎症细胞趋化因子，主要来源于活化的单核细胞、巨噬细胞、部分CD+4T淋巴细胞、血管内皮细胞、KC等多种细胞。有研究显示，银屑病病人皮损处KC表达IL8及其受体明显高于正常对照组，并认为这可能与银屑病病人皮损局部表现出的KC高度增殖有关［4］；也有文献认为，血清中IL8水平明显升高［8］。本文结果显示，银屑病病人血清IL8水平明显高于正常对照组，差异有显著性，这与以往研究结果一致；银屑病病人外周血单个核细胞TLR2基因表达与血清IL8水平呈正相关，提示TLR2可能介导了病原微生物诱导的细胞因子IL8分泌，继而IL8通过趋化炎症细胞至皮损局部和促使KC高度增殖而表现出银屑病特有的临床及病理症状。

综上所述，TLR2可能通过识别病原微生物感染参与银屑病皮损的发生，而IL8可能是参与银屑病皮损形成的重要细胞因子。病原微生物可引起外周血单个核细胞TLR2基因表达上调，启动天然免疫应答，进而影响后继的获得性免疫应答，参与银屑病免疫、炎症反应，最终可能导致银屑病皮损的发生和发展。对TLR2的进一步研究，将有助于阐明银屑病的病因和发病机制，从而为临床提供更加积极有效的预防及治疗措施，并将为抗TLR2单克隆抗体的制备及应用提供可能的理论依据。但有关感染与银屑病的关系及TLR在银屑病发病中的作用还有待于进一步研究。

【参考文献】

［1］ROSENBERG E W， NOAH P W， SKINNER R B. Psoriasis is a visible manifestation of the skins defense against microorganisms with ketoconazole[J]. J Dermatol， 1994，21:375379. [2]NETEA M G， VAN D E R， GRAAF C A， et al. The role of tolllike receptor TLR2 and TLR4 in the host defense against disseminated candidiasis[J]. J Infect Dis， 2002，185:14831489.

[3]BAKER B S， OVIGNE J M， POWLES A V， et al. Normal keratinocytes express Tolllike receptors (TLRs) 1，2 and 5:modulation of TLR expression in chronic plaque psoriasis[J]. Br J Dermatol， 2003， 148:670679.

[4]唐玲，于益芝，顾军，等. 白介素8及其受体CXCR2在银屑病角质形成细胞中的表达[J]. 中华皮肤科杂志， 2002，35:105107.

[5]WEISENSEEL P， PRINZ J C. Incidental detection of S pyogenesDNA in psoriatic skin by PCR[J]. Arch Dermatol Res， 2005，296(12):573576.

[6]BARONI A， ORLANDO M， DONNARUMMA G， et al. Tolllike receptor 2 (TLR2) mediates intracellular signaling in human keratinocytes in response to Malassezia furfur[J]. Arch Dermatol Res， 2006， 297(7):280288.

篇4

作者：王莹 杜克莘 施京红 谢雯

【摘要】 目的：观察海洛因暴露对小鼠成瘾和学习记忆相关脑区的磷酸化p38 MAPK（pp38）表达的影响，探讨p38 MAPK细胞信号转导通路是否参与了发育早期海洛因暴露引起子代脑发育损伤的分子机制. 方法： 于胚胎鼠龄9～18 d时给孕鼠皮下注射海洛因10 mg/(kg·d)，建立子宫内海洛因暴露的小鼠模型. 按出生前处理将小鼠分为海洛因和盐水组. 蛋白免疫印迹检测两组小鼠前额叶皮层、海马、伏核、杏仁核脑区pp38的表达改变. 结果： 与盐水组相比，海洛因组小鼠的pp38蛋白表达在前额叶皮层、海马、伏核、杏仁核4个脑区均有明显增加( P< 0.05). 结论： 海洛因暴露可引起小鼠前额叶皮层、海马、伏核、杏仁核脑区的pp38 MAPK蛋白表达上调，提示p38 MAPK信号通路可能参与了海洛因损伤小鼠神经发育的分子机制.

【关键词】 海洛因；p38丝裂原活化蛋白激酶；前额叶皮层；海马；伏核；杏仁核

0引言

近年来，女性滥用者增多，且大多属于育龄期妇女［1-2］. 研究表明，子宫内海洛因暴露不但可引起新生儿宫内窘迫和发育迟缓，还可导致子代成年后长期的认知行为缺陷和社会行为障碍［3-4］，但其细胞、分子机制未完全阐明. p38是MAPK(mitogenacti vated protein kinase) 超家族的重要成员之一，属于应激活化激酶，p38 MAPK不但与其他信号传递途径共同介导细胞应激诱发的基因表达和酶活性的改变，还在细胞凋亡、细胞因子的合成释放、细胞骨架重排等机制中发挥重要作用［5-6］. 本研究旨在探讨p38 MAPK 通路是否参与了海洛因导致后代神经、行为异常的机制.

1材料和方法

1.1材料标准品海洛因（heroin），学名二乙酰吗啡，纯度98.5%，由中国药品生物制品检定所（国家麻醉品实验室）提供，批号171206-200614. 兔抗鼠磷酸化p38 MAPK mAb，山羊抗βactin pAb （美国Cell Signalling 公司）；辣根过氧化物酶(HRP)标记的抗兔或山羊二抗（博奥森公司）；ECL化学发光试剂盒、PVDF 膜及Hyperfilm 胶片（德国Merck 公司）；蛋白质提取及浓度测定试剂盒（美国BioRad 公司）. FS600超声波粉碎仪(上海生析超声仪器有限公司)；离心机（德国Eppendorf公司）；电泳仪（德国Whatman Biometra公司）；紫外成像扫描仪及分析系统（美国BioRad公司）.

1.2方法

1.2.1动物分组及模型建立选健康活泼BALB/c 小鼠60只(第四军医大学实验动物中心)，雌雄各半，2 mo龄，体质量(25±5)g. 自由饮食饮水，昼夜12 h交替光照，室温25℃，湿度60% 左右. 每日21∶00 雌雄合笼，次日晨查精栓或阴道涂片，以精栓或阴道涂片查到做为受精标志，记为E0d. 将体质量相近的实验动物随机分为海洛因组和盐水组. 从E0～E8 各组动物自由进食， E9～E18 d，盐水组于21∶00在小鼠大腿外侧皮下注射生理盐水20 mL/（kg·d），1/d，海洛因组组给予海洛因10 mg/（kg·d） 注射，1/d，将药物溶于生理盐水中，0.5 g/L. 子代分组同亲代孕鼠.

1.2.2蛋白印迹实验仔鼠30 d龄时在各脑区取材，0.16 mol/L戊巴比妥钠腹腔麻醉，速断头、开颅、分离各脑区，即刻入液氮，冻存管分装，-80℃贮存. 用时加入4℃胞质蛋白提取液裂解，20∶1 加入蛋白酶抑制剂PMSF，高速分散器组织匀浆，冰浴1 h，12000 g 4℃离心10 min，沉淀加入4℃预冷核蛋白提取液，震荡混匀，冰浴1 h，再12000 g 4℃离心30 min，取上清为核蛋白，其蛋白浓度经考马斯亮蓝法定量，取上清加等体积2×SDS 样品缓冲液，煮沸5 min 使蛋白变性. 取50 μg待测蛋白加入等体积2×上样缓冲液煮沸5 min，行SDSPAGE 电泳，蛋白半干转至PVDF膜. 100 V 恒压转移2 h后，将PVDF 膜在含5%脱脂奶粉的TBST中室温下封闭1 h，与1∶1000一抗pp38 MAPK 兔多抗4℃孵育过夜，PBST 缓冲液洗膜3次，每次10 min；随后加入羊抗兔 IgGHRP 37℃孵育1 h，洗膜3次，每次10 min. ECL化学发光试剂显影，胶片曝光，UVP 凝胶成像系统扫描目的条带，Labworks 软件测量各阳性条带的光密度，将pp38 MAPK阳性条带与相应的βactin 条带吸光度比值作为其蛋白的相对表达量.

统计学处理：所有数据均采用SPSS12.0进行处理，多样本均数比较采用单因素方差分析.

2结果

分析各组间相应蛋白带的平均吸光度值，以βactin作内参蛋白，调整后进行半定量分析. 与盐水组相比，海洛因组动物的前额叶皮层、海马、伏核和杏仁核4个脑区组织的p38 MAPK磷酸化蛋白表达均明显增加（P< 0.05，图1，2）.

3讨论

MAPK信号系统作为真核细胞内各种信息传递的最后通路和共同通路，能够将细胞外的各种刺激信息转移到细胞核内，是神经细胞发生一系列可塑性变化的分子基础. p38 MAPK 多见于促炎和促凋亡的途径中，它在细胞分化、凋亡、迁移和增殖等基本生理过程中也发挥着不可忽视的作用［5］，许多细胞外刺激如应激刺激、炎性细胞因子、细胞因子、脂多糖、生长因子等通过细胞内信号转导通路激活p38 MAPK，进而磷酸化激活 MAPK APkinase2 等，并最终激活ATF2，Max 和MEF2 等转录因子而产生生物学效应［6］，但其具体调制及与其他信号通路之间的关系尚未明了.

海洛因暴露导致的行为异常与海洛因作用的时间、时程、剂量和给药方式等有密切关系，作用方式不同可导致的行为学损伤不完全相同. 我们采用的模型已报道动物有成年后迷宫学习记忆行为缺陷［7］，海马胆碱能系统及PKC 细胞学定位的改变［8］. 海洛因可迅速通过胎盘和血脑屏障，直接作用于发育中的神经细胞，导致子代成年后的神经行为损伤，但其细胞、分子机制未完全阐明. 我们的结果显示，发育早期海洛因暴露，上调了小鼠前额叶皮层，海马，伏核，杏仁核脑区中p38 MAPK 磷酸化蛋白的表达，提示在这些与成瘾和学习记忆相关的脑区里，存在着p38 MAPK 信号通路可能参与的生理病理学过程的改变，提示海洛因对子代动物成年后神经行为异常的长期影响，至少是部分源于海洛因在动物的神经系统发育早期，作用于神经行为相关的靶区，使该靶区的神经活动异常或作用于相关基因，使海洛因的致畸作用持续到生后，如海马损伤导致海马依赖的空间学习记忆损伤.

p38 MAPK在疾病发展的不同阶段，发挥的作用有所不同. 在细胞应激反应或炎症反应的早期，p38 上调发挥脑保护作用，但随着反应进程的加深，上调的p38 可以通过加强细胞的炎性反应，介导其他胞外信号引起的炎性细胞因子或炎性产物的表达和释放，以介导凋亡性细胞死亡的方式损伤神经细胞［6， 9］. p38 蛋白在成瘾和学习记忆相关脑区的持续表达上调，是损伤神经发育，或是激发了损伤后的神经代偿机制，需要进一步研究.

我们结果的提示，p38 MAPK 通路可能参与了海洛因对胚胎脑发育的毒性作用，进而影响动物成年后的行为，为进一步探讨子代神经行为的损伤机制及后期临床干预中靶蛋白的确定提供了有意义的资料.

【参考文献】

［1］ 杨凤瑞，高伟，顾迎莉，等. 2006年中国禁毒报告［R］. 国家禁毒委员会报告，2007：2-5. ［2］ Nora DV. NIDA Research Report  Heroin Abuse and Addiction: NIH Publication No. 054165，［R］. NIDA 2005:1-2.

［3］ Walhovd KB， Moe V， Slinning K， et al. Volumetric cerebral characteristics of children exposed to opiates and other substances in utero ［J］. Neuroimage，2007， 36 (4): 1331-1344.

［4］ Yanai J， BenShaanan TL， Haimovitch H， et al. Mechanismbased approaches for the reversal of drug neurobehavioral teratogenicity ［J］. Ann N Y Acad Sci， 2006， 1074: 659-671.

［5］ Johnson GL， Lapadat R. Mitogenactivated protein kinase pathways mediated by ERK， JNK， and p38 protein kinases ［J］. Science， 2002， 298 (5600):1911-1912.

［6］ Kumar S， Boehm J， Lee JC， et al. p38 MAP kinases: key signalling molecules as therapeutic targets for inflammatory diseases ［J］. Nat Rev Drug Discov， 2003， 2(9): 717-726.

［7］ Huleihel R， Yanai J. Disruption of the development of cholinergicinduced translocation/activation of PKC isoforms after prenatal heroin exposure ［J］. Brain Res Bull， 2006， 31; 69(2): 174-181.

篇5

【摘要】 目的：研究滑菇多糖（PNP）的抗肿瘤作用及诱导K562细胞凋亡的机制. 方法：采用MTT法检测PNP对K562细胞增殖的抑制作用；绘制生长曲线；Hochest 33258染色计算凋亡率；RTPCR法、Western Blot方法检测凋亡相关基因Caspase3的表达. 结果：MTT分析表明，PNP作用48 h后可明显抑制K562细胞的增殖；Hochest染色结果显示，PNP能诱导K562细胞出现典型的凋亡形态，且凋亡率随多糖浓度增加而增大，经PNP 100，200，400 mg/L的处理后，凋亡率分别是对照组的3.15，6.55和8.62倍. PNP能诱导凋亡相关基因Caspase3在mRNA水平上的表达；Western Blot显示PNP能诱导Caspase3编码蛋白的表达，且随多糖浓度的增加表达量增加. 结论：PNP对K562细胞增殖有抑制作用， 并能促进其凋亡； PNP通过诱导凋亡相关基因Caspase3表达促进细胞凋亡.

【关键词】 滑菇多糖；K562细胞；白血病；增殖；凋亡；Caspase3基因

【Abstract】 AIM: To investigate the antineoplastic effect of pholiota nameko polysaccharides (PNP) and the mechanism of inducing K562 cell apoptosis. METHODS: MTT assay was used to determine the inhibitory rate of PNP with different concentrations on the proliferation of K562 cells， and the cell growth curve was drawn. The cell apoptosis induced by PNP was detected under fluorescence microscope with Hoechst 33258 dye. RTPCR and Western Blot analysis were applied to test the expression of Caspase3 in K562 cells. RESULTS: MTT assay showed that the proliferation of K562 cells was inhibited apparently after treatment with PNP for 48 h; Hoechst staining showed the typical apoptotic features in K562 cells after induced by PNP， and the apoptosis rate increased along with the elevation of PNP concentration. The apoptotic rates of K562 cells treated by 100， 200， 400 μg/mL PNP were 3.15， 6.55 and 8.62 times as much as controls， respectively. PNP could promote the expression of Caspase3 at both mRNA and protein levels， and the gene expression also increased along with the rising of PNP concentration. CONCLUSION: PNP could inhibit the proliferation of K562 cells and induce apoptosis of the cells， maybe by upregulating the expression of Caspase3.

【Keywords】 pholiota nameko polysaccharides; K562 cells; leukemia; proliferation; apoptosis; Caspase3

0引言

近年来的研究发现，一些植物或真菌多糖除具有免疫增强作用外，对癌细胞还有直接抑制和杀灭作用［1］. 筛选具抗癌作用的天然多糖及研究多糖抗癌机制已成为目前肿瘤研究领域的热点之一. 滑菇是一种营养保健价值较高的食用菌. 有研究表明，滑菇多糖(pholiota nameko polysaccharide， PNP)除对小鼠S180细胞具有明显的抑制作用外，对正常以及荷瘤小鼠的免疫功能均有增强作用 ［2］. 但PNP对人白血病细胞K562增殖的抑制作用及诱导细胞凋亡的机制国内外均少见报道. 本研究通过观察PNP对K562细胞增殖的抑制作用和凋亡相关基因Caspase3的表达，旨在进一步探讨PNP的抗肿瘤作用及诱导K562细胞凋亡的机制.

1材料和方法

1.1材料

RPMI1640培养基（美国Gibco公司）；噻唑蓝（MTT）（北京华美公司）；Hoechst 33258，一抗（Caspase3，βactin小鼠抗人抗体），二抗（辣根过氧化物酶标记的山羊抗鼠IG）(美国Santa cruz公司)；PNP（河北师范大学生命科学院生化与分子生物学系王立安教授惠赠)；K562白血病细胞株（引自中国医学科学院血液病研究所）；倒置显微镜，荧光显微镜（日本Olympus公司）；CO2培养箱（日本Hitachi公司）；DYYⅢ 7B型电泳仪（北京六一仪器厂）；读胶仪AlphaImagerTM 1200型（美国ST公司）；PE480型DNA扩增仪（美国PE公司）；酶标仪ELX800（美国BioTek公司）.

1.2方法

1.2.1细胞培养采用含有100 mL/L血清，1×105 U/L青霉素，100 mg/L链霉素的RPMI1640培养基，于37℃，50 mL/L CO2饱和湿度环境下培养K562细胞.

1.2.2MTT检验取对数生长期的细胞，调细胞密度为1×108/L接种于96孔培养板中，每孔加入100 μL细胞悬液，于37℃，50 mL/L CO2饱和湿度环境下培养24 h后，对照组每孔加入100 μL无血清培养基，各实验组每孔加入100 μL用无血清RPMI1640培养基稀释的PNP，使终浓度分别为50，100，200和400 mg/L. 每个处理均做4个复孔. 继续培养48 h后，每孔分别加MTT 20 μL，再培养4 h，2000 r/min离心10 min，弃去上清，每孔加DMSO 150 μL，振荡10 min，用酶标仪测490 nm的A值. 按如下公式计算：细胞增殖抑制率%=［（对照组A-实验组A）/对照组A］×100%.

1.2.3生长曲线的绘制调细胞密度为8×107/L接种于24孔培养板中，每孔加入1 mL细胞悬液，于37℃，50 mL/L CO2饱和湿度环境下培养24 h后，对照组每孔加1 mL无血清培养基，各实验组每孔加入1 mL用无血清RPMI1640培养基稀释的PNP，使终浓度分别为50，100，200和400 mg/L. 每个处理均做4个复孔. 在培养至24，48，72，96和120 h后，台盼蓝拒染. 血细胞计数器计算每毫升溶液中的活细胞数目，绘制生长曲线.

1.2.4Hoechst 33258荧光染色观察细胞凋亡率细胞的前期处理同

1.2.3. 48 h后，用PBS（pH 7.2）漂洗2次，调细胞密度约为1×109/L. 甲醇∶冰乙酸（3∶1） 4℃固定5 min，蒸馏水洗1次. 随后吸取少许滴加至干净载玻片上；室温干燥后，Hoechst 33258（5 g/L）染色. 30 min后蒸馏水漂洗除去染液，荧光显微镜观察照相. 镜下随机计数10个视野，按以下公式计算：细胞凋亡率%＝(凋亡细胞数/总细胞数)×100%.

1.2.5PNP对细胞凋亡相关基因Caspase3表达的诱导作用

1.2.5.1半定量RTPCR检测调细胞密度为1×108/L接种于60 mL培养瓶中，每瓶加入5 mL细胞悬液，于37℃，50 mL/L CO2饱和湿度环境下培养24 h后，对照组加5 mL无血清培养基，各实验组每瓶加入5 mL用无血清RPMI1640培养基稀释的PNP，使终浓度分别为50，100，200和400 mg/L. 继续培养48 h后，PBS洗涤2次. 采用Trizol法提取细胞总RNA，随机引物法合成cDNA. Caspase3基因引物：上游：5′GGAATTGATGCGTGATGT3′；下游：5′ACCAGGTGCTGTGGAGTA3′. βactin引物：上游：5′ACCCCCACTGAAAAAGATGA3′；下游：5′ATCTTCAAACCTCCATGATG3′. 上述引物均由北京赛百胜公司合成. PCR扩增条件：95℃预变性10 min. Caspase3：95℃ 30 s， 50.1℃ 30 s， 72℃ 30 s，40循环，72℃延伸10 min；βactin：95℃ 30 s， 51.5℃ 30 s， 72℃ 30 s，30循环，72℃延伸10 min. 扩增产物经15 g/L琼脂糖凝胶电泳后，读胶仪读取扩增条带的吸光度值进行分析，以目标基因与βactin基因扩增产物的吸光度比值计算表达水平.

1.2.5.2Western印迹分析细胞的前期处理同1.2.5.1. 48 h后，PBS洗涤2次. 按照文献［3］的方法，提取细胞全蛋白，取50 μg进行SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳，转膜，抗原抗体反应， ECL发光、显影. X光胶片扫描后，采用UVP lab work 4.60软件测定条带吸光度值，并分析结果. 以目标基因与βactin蛋白产物的吸光度比值计算表达水平.

统计学处理：实验结果以x±s表示. 数据处理运用SAS 6.12统计软件，所用方法为单因素方差分析，P

2结果

2.1PNP对K562细胞增殖的抑制作用PNP作用K562细胞48 h后， PNP 50 mg/L浓度组抑制率为（9.45±1.76）%，明显高于对照组（P

2.2PNP对K562细胞凋亡的诱导作用对照组细胞细胞核界限清晰，呈圆形或椭圆形，为均匀蓝绿色荧光，染色质分布均匀（图2A）. PNP处理后的细胞，部分细胞细胞核缩小，染色质凝集呈颗粒团状分布，有的核碎裂形成多个球形颗粒（图2B）. 图3显示，经PNP 100 mg/L处理后，凋亡率是对照组的3.15倍，与对照组相比差异具有统计学意义（P

2.3PNP对细胞凋亡相关基因Caspase3的诱导作用

2.3.1PNP对细胞凋亡相关基因Caspase3 mRNA水平的影响不同浓度的PNP作用K562细胞48 h后，βactin基因的RTPCR产物（115 bp带）几乎保持不变，但Caspase3基因的RTPCR产物（350 bp带）随着PNP处理浓度的增大明显增多，电泳条带变宽、变亮（图4）. 计算结果显示，对照组为0.90±0.05，100 mg/L浓度组为1.07±0.04，与对照组相比差异有统计学意义（P

2.3.2PNP对细胞凋亡相关基因Caspase3蛋白表达的影响βactin基因的表达产物经不同浓度PNP处理后几乎保持不变，但Caspase3基因的表达产物随着PNP处理浓度的增大明显增多，电泳条带变宽（图5）. 计算结果显示：对照组为0.040±0.003；100 mg/L浓度组为0.077±0.008，与对照组相比差异有统计学意义（P

3讨论

食用菌多糖的抗肿瘤作用主要是通过两种途径实现的，一是具有细胞毒性的多糖直接杀死了肿瘤细胞，这类多糖有灰树花多糖、姬松茸多糖、正红菇子实体多糖等；二是作为生物免疫反应调节剂通过增强机体的免疫功能而间接抑制或杀死肿瘤细胞，如促进杀伤细胞(LAK)活性、诱导巨噬细胞产生肿瘤坏死因子［6］.

本研究结果表明，PNP对人K562细胞的增殖具有抑制作用并能诱导其凋亡，且抑制率、凋亡率随PNP浓度增加而增大. 可能的原因是通过诱导部分细胞脱离了细胞周期，进入凋亡状态，与肿瘤的发展有密切的关系. Caspases3被激活后可使癌细胞发生凋亡，我们的实验结果表明了PNP能诱导凋亡相关基因Caspase3的表达，且随多糖浓度的增加基因表达量增加. 提示K562细胞凋亡机制的启动与Caspase3的表达密切相关. 与余晓林等［4］报道的Caspases3基因对肝癌细胞等具有明显促凋亡作用，并可诱导成骨肉瘤细胞凋亡；贾林涛等［5］研究报道的Caspases3对HeLa 细胞的凋亡具诱导作用的结论相一致. 这提示PNP可作为治疗白血病的潜力药物. 由于我们的实验结果是在离体的状态下取得的，对其潜在价值的评判还需取决于活体实验的效果，这方面的工作我们正在进行之中.

【参考文献】

［1］李建恒，张杏红. 抗肿瘤中药多糖研究进展［J］. 中医药学报，1998，4:46-48.

［2］宋玉光， 李庆章， 高学军. 滑菇多糖对荷瘤及正常小鼠免疫功能的影响［J］. 食用菌， 2002，6:40-42.

［3］温进坤，韩梅. 医学分子生物学理论与研究技术［M］. 北京：科学出版社， 2002：225-232.

［4］余晓林， 刘红， 陈万平， 等. GFP共表达的重构型Caspase3基因对Hep2细胞的作用［J］. 第四军医大学学报， 2005，26(21):1945-1947.

篇6

【摘要】

目的：观察清胰化积(Qingyi Huaji， QYHJ)方对人胰腺癌CFPAC1细胞系裸小鼠移植瘤的抑瘤作用及血清白细胞介素6（interleukin6，IL6）、白细胞介素8（interleukin8，IL8）和肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factorα，TNFα）表达水平的影响。方法：40只裸小鼠右前肢腋部皮下移植胰腺癌瘤块建立荷瘤模型。造模成功的裸小鼠随机分为模型组、卡培他滨组、低剂量(36 g/kg)清胰化积方组和高剂量(72 g/kg)清胰化积方组，每组10只，分别采用含阿拉伯胶的柠檬酸缓冲液、卡培他滨混悬液及清胰化积方药液灌胃。治疗5周后，眼眶取血，酶联免疫吸附测定法检测血清IL6、IL8和TNFα含量；脱颈椎处死裸小鼠，剥取肿瘤，称取质量，测量肿瘤直径，计算抑瘤率。结果：低剂量清胰化积方组CFPAC1裸小鼠移植瘤质量下降，与模型组比较，差异有统计学意义(P

【关键词】 胰腺癌; 复方; 白细胞介素6; 白细胞介素8; 肿瘤坏死因子α; 裸小鼠

Pancreatic carcinoma is a common malignant tumor in digestive system with rapid progress and high incidence of metastasis. At the time of diagnosis， most patients with pacreatic carcinoma have already been at the advanced stage with a 5year survival rate less than 5%［1］. A study in Cancer Hospital of Fudan University with 134 patients of advanced pancreatic cancer suggested an effective tumor inhibition role of Qingyi Huaji (QYHJ) decoction， a compound traditional herbal medicine. The results showed that the 1， 3 and 5year survival rates were 25.0%， 14.1% and 8.4%， respectively， with a median survival time of 7.6 months. Sixteen patients survived for more than 3 years (5 survived for more than 5 years) ［2， 3］. The survival rates were higher than the results in other similar studies with Western medicine. Although indicated with an effective tumor inhibition function， the mechanism of QYHJ decoction has hot been further explored yet. It has been reported that serum cytokine levels and its immunomodulatory effects are closely related to the development of pancreatic cancer［4］. In this study， we investigated the effects of QYHJ decoction on tumor inhibition and serum levels of interleukin6 (IL6)， interleukin8 (IL8) and tumor necrosis factorα (TNFα) in nude mice with transplanted tumors of human pancreatic cancer.

1 Materials and methods

1.1 Experimental materials

1.1.1 Cell culture and animals

Human pancreatic adenocarcinoma cell line CFPAC1 was purchased from the Institute of Biochemistry and Cell Biology， Shanghai Institute for Biological Sciences， Chinese Academy of Sciences. According to the protocol of American Type Culture Collection (ATCC)［5］， the cell line was cultured in Iscove’s modified Dulbecco’s medium (IMDM) supplemented with 10% fetal bovine serum， sodium pyruvate and 4(2hydroxyethyl)1piperazineethanesulfonic acid (HEPES) in a humidified atmosphere containing 5% CO2 at 37 ℃. Female 5weekold BALB/cnu/nu mice， SPF grade (Certification No. 122)， weighing from 18 to 22 g， were purchased from Shanghai Experimental Animal Center of the Chinese Academy of Sciences.

1.1.2 Therapeutic medication

QYHJ decoction， composed of Baihuasheshecao (Herba Hedyotidis) 30 g， Banzhilian (Herba Scutellariae Barbatae) 30 g， Moyu (Rhizoma Amorphophalli Rivieri) 30 g， Jiaogulan (Herba seu Radix Gynostemmatis) 30 g and Baidoukou (Fructus Amomi Rotundus) 6 g， was provided by Jiangyin Tianjiang Pharmaceutical Co.， Ltd. (Jiangsu， China). According to body surface area conversion table between humans and mice， herb medication were prepared in QYHJ decoction groups at a dose of 36 g/kg or 72 g/kg， which including the crude drug of 1.8 g/mL and 3.6 g/mL， respectively， and oral administration was 0.4 mL/d per 20 g body weight for nude mice. Capecitabine (F. HoVmanLa Roche， Shanghai， 0.5 g/tablet， certification No. H20073024) was crushed and dissolved in 100 mL citrate buffer (pH 6.0， 40 mmol/L) containing 5% (w/v) Arabic gum［6］.

1.1.3 Main reagents and instruments

Sunrise F039300A microplate reader was provided by TECAN， Switzerland; enzymelinked immunosorbent assay (ELISA) kits of IL6， IL8 and TNFα were purchased from Shanghai Senxiong BioTechnology Co.， Ltd.， China; IMDM was purchased from Gibco Company， USA， (lot No. 12200036); fetal bovine serum was provided by PAA Company， Austria (lot No. A151081479).

1.2 Methods

1.2.1 Preparation of mice model

CFPAC1 cells in logarithmic growth phase were prepared as single cell suspension at a concentration of 1×107 cells/mL and were subcutaneously inoculated into the right flank of five nude mice at a dose of 2×106 cells. Three weeks later， mice were sacrificed by cervical dislocation when the xenografts size reached 1 cm in diameter. Tumors were excised from mice， cut into small pieces and transplanted subcutaneously into the right forelimb armpit of another 40 nude mice.

1.2.2 Experimental grouping and medication

Seven days after transplantation， as the mean size of the tumors was about 0.4 cm in diameter， mice were randomly pided into untreated group (Arabic gum)， capecitabine group， lowdose QYHJ decoction group (36 g/kg) and highdose QYHJ decoction group (72 g/kg)， with 10 mice in each group. For untreated group， citrate buffer solution (containing 5% Arabic gum) was administered by gavage， 0.4 mL per mouse， once a day for 5 weeks; for capecitabine group， capecitabine suspension 0.4 mL per mouse by gavage， once a day， 5 days per week， 3 weeks continuously［7］; for lowdose QYHJ decoction group， 1.8 g/mL QYHJ 0.4 mL per mouse (36 g/kg)， once a day for 5 weeks; for highdose QYHJ decoction group， 3.6 g/mL QYHJ 0.4 mL per mouse (72 g/kg)， once a day for 5 weeks［8］.

1.3 Experimental detection

1.3.1 Observation of general condition

Fur color， motility， nutritional status， body weight， mental condition and tumor size of the nude mice were observed and recorded daily.

1.3.2 Tumor volume changes

The maximal and minimal diameters of the tumor were measured by a vernier caliper once a week. Tumor volume and the inhibition rate were calculated according to calculation formula of tumor volume (V): V=1/2 (maximal diameter×minimal diameter2) and inhibition rate of tumor volume=(1－average tumor volume of treatment group/average tumor volume of control group)×100%. The growth curve was drawn according to the tumor volume measured daily.

1.3.3 Tumor inhibition rate

Mice were sacrificed 1 day after the last time of treatment. Tumor weight was estimated and the tumor inhibition rate was calculated. Tumor growth inhibition rate=(1－average tumor weight of treatment group/average tumor weight of control group)×100%。

1.3.4 Detection of serum levels of IL6， IL8 and TNFα Concentrations of serum IL6， IL8 and TNFα were examined by ELISA， using blood sample from eye socket which was stored at room temperature for 30 min， centrifuged (1 000×g) for 15 min， and then cryopreserved at －80 ℃.

1.4 Statistical analysis

Statistical analysis was carried out with STATA software (version 10.0， College Station， Texas， USA). The measurement data were presented as x±s. One way analysis of variance was used to compare the differences between groups (Symmetry transformation was used for nonnormal distribution or variance nonhomogeneity of the data)， and the pairwise comparison was performed with Sidak method. Linear regression analysis was used to evaluate the correlation between cytokine level and tumor weights. Scatterplot graphs were created， and regression equations were built up. For all tests， P values less than 0.05 were considered statistically significant.

2 Results

2.1 General condition of the nude mice

During the first four weeks after successful modeling， nude mice in each group had balanced appearances， agile movements， flexible responses and increased body weights. As the tumor volume increased， life status of the mice worsened gradually， especially for untreated group. Two mice in the untreated group appeared as dark fur， loss of weight and energy at the fifth week. No deaths were observed until the mice were sacrificed. The whole body weight changes of nude mice showed an increasing tendency， however without significant differences between groups at each time point (P>0.05， Table 1).Table 1 Body weight of nude mice in four groups(略)

2.2 Effects of QYHJ decoction on volume of transplanted tumors

Tumor with size of grain rice， could be detected immediately after the tumor pieces were subcutaneously transplanted into the nude mice. Primary tumor mass size was measurable after one week， with 100% successful modeling. At the initial stage， transplanted tumors were characterized with slow growth， spherical or hemispherical appearance， and movable. The tumors became harder gradually， with different inpidual size. After treatment， the average volumes of tumor in the capecitabine group， and lowdose and highdose QYHJ groups were less than that in the untreated group， and the inhibition rates of tumor volume were 38.24%， 16.18% and 13.24% in those three groups respectively. There was no statistical difference for tumor volume between groups (P>0.05， Table 2 and Figure 1). Table 2 Tumor volumes and growthinhibition rates of nude mice in different groups（略）

2.3 Effects of QYHJ decoction on tumor weights

Tumor weight decreased significantly in the capecitabine and lowdose QYHJ groups as compared with the untreated group (P0.05) and between the QYHJ groups and the capecitabine group (P>0.05， Table 3).Table 3 Tumor weights and growthinhibition rates of nude mice in different groups（略）

2.4 Effects of QYHJ decoction on serum levels of IL6， IL8 and TNFα Compared with the untreated group， serum levels of IL6 and TNFα in the high and lowdose QYHJ groups decreased significantly (P

2.5 Correlation of tumor weights and serum levels of IL6， IL8 and TNFα As mentioned above， there were statistical differences in serum levels of IL6， IL8 and TNFα between the QYHJ groups and the untreated group. The relationships between transplanted tumor weight and serum levels of cytokines were further analyzed. The result showed a positive linear correlation between tumor weight and serum level of IL6 in all groups (R2=0.32， P

3 Discussion

QYHJ decoction is a Chinese herbal compound based on the pathological mechanism of “noxious dampness， toxic heat and accumulation of pathogenic dampness， heat and toxin” for pancreatic cancer in traditional Chinese medicine［9］. The product is made from Chinese herbs by using Moyu as monarch drug， which can reduce phlegm and resolve masses， detoxify and relieve swellings， dissipate blood stasis and relieve dyspepsia. Both Baihuasheshecao and Banzhilian are used as ministerial drugs， with the function of heatclearing and detoxifying， removing dampness and deswelling， and activating blood analgesia. Jiaogulan is used as an adjuvant drug of strengthening healthy qi and disintoxication， resolving phlegm and anticancer. Baidoukou is used as the messenger drug for dissipating dampness to normalize stomach and promoting qi circulation to alleviate middle energizer. Clinical studies showed that QYHJ decoction was effective in advanced pancreatic cancer patients by heatclearing and detoxifying， removing dampness and deswelling， regulating qi and dissipating blood stasis［2， 3］. We previously found that QYHJ decoction could inhibit the proliferation of human pancreatic cancer cell line SW1990 in vivo， and tumor weight in QYHJ group was significantly lower than that in the negative control group (P

The results suggested that inhibition rates of tumor weight in the low and highdose QYHJ groups were 34.4% and 32.8% respectively， with statistical significance for the lowdose group when compared with the untreated group (P0.05). Moreover， heterogeneous changes were noticed in the capecitabine group and the QYHJ group with central necrosis， but no obvious tumor necrosis was detected in the untreated group. Therefore， disproportionate relation of tumor volume and weight may be due to internal necrosis in some tumor tissues or the possibility of measurement errors in the body surface.

The results showed that serum levels of IL6， IL8 and TNFα in the QYHJ groups were significantly lower than those in the untreated group (P

TNFα has the function of killing or inhibiting cancer cells， but in current study we observed that the higher the serum TNFα level， the heavier the tumor weight， which indicated an acceleration of TNFα secretion accompanying with the growth of tumor. As the tumor volume increased， serum TNFα level showed an increasing trend accordingly; and the decreased TNFα level revealed that tumor was under control to a certain extent. Serum TNFα level and its relationship with tumor progression remains to be elucidated.

IL6 is a cytokine with the function of multiple immunoregulation. Many tumor cells may produce and secrete IL6. Some studies showed that 174G/C IL6 gene polymorphism influenced circulating IL6 levels. Increased IL6 serum level may be positively correlated with tumor size and the presence of liver metastases in patients with pancreatic adenocarcinoma (P

In the present study， serum IL6 level in untreated group was the highest. No significant difference was found between the capecitabine group and the untreated group， while the difference was statistically significant in the low and highdose QYHJ groups as compared with the untreated group (P

In the process of tumor development， high expression levels of cytokines such as IL6， IL8 and TNFα are usually signals of progression of disease or poor prognosis. They are closely related to the occurrence of cancer cachexia. In the present study， serum IL6， IL8 and TNFα levels in transplanted tumor of human pancreatic cancer cell line CFPAC1 in nude mice were linearly positively correlated with tumor weight. As tumor weights in QYHJ groups were significantly lower than that in the untreated group， cytokine levels were correspondingly lower. The results demonstrated that serum levels of IL6， IL8 and TNFα were important indicators for evaluating the sensitivity of pancreatic cancer to treatment of QYHJ decoction.

In conclusion， conventional dose of QYHJ decoction (36 g/kg) has an obvious antitumor effect on the subcutaneously transplanted tumors of human pancreatic carcinoma in nude mice. The mechanism may be related to downregulation of cytokines such as IL6， IL8 and TNFα.

参考文献

1 Jemal A， Siegel R， Ward E， Hao Y， Xu J， Thun MJ. Cancer statistics， 2009. CA Cancer J Clin. 2009; 59(4): 225249.

2 Shen YH， Liu LM， Meng ZQ， Chen Z， Lin JH， Zhou ZH， Chen H， Wang K， Yu EX. Survival analysis on 64 cases of advanced pancreatic cancer treated by integrated Western and traditional Chinese medicine mainly with Qingyi Huaji Formula. Zhong Yi

Za Zhi. 2009; 50(1): 3942. Chinese with abstract in English.沈晔华， 刘鲁明， 孟志强， 陈震， 林钧华， 周振华， 陈颢， 王琨， 于尔辛. 清胰化积方为主综合治疗晚期胰腺癌64例生存分析. 中医杂志. 2009; 50(1): 3942.

3 Shen YH， Liu LM， Chen Z， Meng ZQ， Song MZ， Yu EX. Study on Chinese medicine combined with chemotherapy for treatment of 32 cases of advanced pancreatic cancer. Zhong Yi Za Zhi. 2006; 47(2): 115117. Chinese with abstract in English.沈晔华， 刘鲁明， 陈震， 孟志强， 宋明志， 于尔辛. 中药联合化疗治疗晚期胰腺癌32例临床研究. 中医杂志. 2006; 47(2): 115117.

4 Ebrahimi B， Tucker SL， Li D， Abbruzzese JL， Kurzrock R. Cytokines in pancreatic carcinoma: correlation with phenotypic characteristics and prognosis. Cancer. 2004; 101(12): 27272736.

5 McIntosh JC， Schoumacher RA， Tiller RE. Pancreatic adenocarcinoma in a patient with cystic fibrosis. Am J Med. 1988; 85(4): 592.

6 FujimotoOuchi K， Onuma E， Shirane M， Mori K， Tanaka Y. Capecitabine improves cancer cachexia and normalizes IL6 and PTHrP levels in mouse cancer cachexia models. Cancer Chemother Pharmacol. 2007; 59(6): 807815.

7 Ninomiya I， Terada I， Yoshizumi T， Takino T， Nagai N， Morita A， Fushida S， Nishimura G， Fujimura T， Ohta T， Miwa K. Antimetastatic effect of capecitabine on human colon cancer xenografts in nude mouse rectum. Int J Cancer. 2004; 112(1): 135142.

8 Shen YH， Liu LM， Shen J， Li DL. Impact of QINGYIXIAOJI Formula on proliferation and cell cycle of experimental pancreatic cancer in vivo. Zhongguo Zhong Yi Ji Chu Yi Xue Za Zhi. 2006; 12(2): 9799. Chinese with abstract in English.沈晔华， 刘鲁明， 沈瑾， 李栋良. 清胰消积方对实验性胰腺癌体内生长和细胞周期的影响. 中国中医基础医学杂志. 2006; 12(2): 9799.

9 Liu LM. On pathological mechanism and diseasebased treatment of pancreatic cancer in traditional Chinese medicine. J Chin Integr Med. 2008; 6(12): 12971299. Chinese.刘鲁明. 胰腺癌的中医病因病机与辨病论治. 中西医结合学报. 2008; 6(12): 12971299.

10 Fu J， Liu LM， Shen J， Li DL. Effects of Qingyi Huaji decoction plus gemcitabine on expression of MDR and antitumor activity in transplantedtumors of pancreatic cancer in nude mice. Zhongguo Zhong Yi Ji Chu Yi Xue Za Zhi. 2007; 13(4): 289291. Chinese.傅洁， 刘鲁明， 沈瑾， 李栋良. 清胰化积方联合健择对SW1990抑瘤及逆转MDR作用观察. 中国中医基础医学杂志. 2007; 13(4): 289291.

11 Shalaby MR， Aggarwal BB， Rinderknecht E， Svedersky LP， Finkle BS， Palladino MA Jr. Activation of human polymorphonuclear neutrophil functions by interferongamma and tumor necrosis factors. J Immunol. 1985; 135(3): 20692073.

12 Tsimberidou AM， Estey E， Wen S， Pierce S， Kantarjian H， Albitar M， Kurzrock R. The prognostic significance of cytokine levels in newly diagnosed acute myeloid leukemia and highrisk myelodysplastic syndromes. Cancer. 2008; 113(7): 16051613.

13 TalarWojnarowska R， Gasiorowska A， Smolarz B， RomanowiczMakowska H， Kulig A， MaleckaPanas E. Tumor necrosis factor alpha and interferon gamma genes polymorphisms and serum levels in pancreatic adenocarcinoma. Neoplasma. 2009; 56(1): 5662.

14 Saif MW， Eloubeidi MA， Russo S， Steg A， Thornton J， Fiveash J， Carpenter M， Blanquicett C， Diasio RB， Johnson MR. Phase Ⅰ study of capecitabine with concomitant radiotherapy for patients with locally advanced pancreatic cancer: expression analysis of genes related to outcome. J Clin Oncol. 2005; 23(34): 86798687.

篇7

1、寒假里我准备每天用(时间)认真完成书面作业。

2、寒假里我要阅读的课外书是：

3、我每天要坚持的体育活动是：

4、我要去游玩的地方是：

5、我要帮妈妈爸爸干的家务活是：

6、我要在寒假中养成的一个好习惯是：

7、我要在假期中改掉的一个坏毛病是：

8、我要在假期中学会的一样小本领是：

一旦制定了计划，就要按计划执行。等到假期结束的时候，请爸爸妈妈检查一下，自己制定的计划都完成了没有。从小养成办事有计划、有条理的好习惯。

一、快乐练字：(写在“超级棒”田字格本中)

从学过的生字表(二)中，每天练习4个，每个生字写4遍，开学评选“小小书法家”。

二、快乐积累：(请家长帮忙抄写在“超级棒”田字格本中，或打印出来贴在本子上)

背诵古诗4首以上。(要求：以描写春天或是新年为主题)

三、快乐阅读：

阅读有益的课外书或文章。放假回来后向大家推荐一本你最喜欢的课外书。

推荐图书：

(1)一类读物：短小易懂——《格林童话》、《安徒生童话》、《成语故事》、《西游记》等

(2)二类读物：篇章略长，理解稍有难度——《中国古代神话故事》、《民间故事》、《寓言故事》《一千零一夜》、《365夜故事》等。

(3)三类读物：情节曲折，故事较长——《木偶奇遇记》、《丁丁历险记》、《尼尔斯骑鹅旅行记》、《绿野仙踪》等。(后面附读书记入表格)

家长对孩子假期生活的评价：

最后祝全体同学寒假快乐!

小学寒假的学习计划【2】

一、时间安排

1、每天的四个"1小时保障"

每天保障做一小时的语文或数学寒假作业;

每天保障一小时的无负担课外阅读;

每天保障一小时的英语自学;

每天保障一小时的户外活动或运动。

2、计划与非计划

如无特殊情况，每天必须完成以上计划;

每天的计划在得到"保障"的前提下，可灵活自由安排;

如果因外出旅游、回乡下度假等意外安排，可临时不予执行;

可以偶尔睡懒觉，但不要影响当日计划的实施。

二、学习计划

1、不参加语文、数学的培优，不请家教，相关课程自己独立完成。

2、语文课程计划

7月份完成暑假作业，8月中旬前检查、改正，查漏补缺;

把自己的藏书系统再读一遍，重点读历史、百科知识大全、漫画、中外名著导读等丛书;

假期可以自己买三本自己喜欢的任何书籍;

把以前稍显薄弱的阅读题的规范回答、错别字系统复习。

3、数学课程计划

7月份完成暑假作业，8月中旬前检查、改正，查漏补缺;

假期完成五年级《奥数提高班》的自学，基本掌握其要领，有选择性挑选典型题目做。

自己注意计算细心化的纠正。

4、英语课程计划

英语学习能力和成绩一般，要重点加强学习兴趣和能力的培养;

把三年级和四年级的学校课本系统复习一遍，每天坚持听剑桥英语的磁带，时间不限;

假期把以前记得的英语单词都记在小本子上，分类汇总;

若有兴趣、有机会，可以把语音和音标接触、巩固一下，尽量保证发音标准。

三、活动安排

1、随父母至少省内出去旅游一次，争取省外旅游去一次;

2、至少去乡下亲戚家2次，体验生活，其中爷爷家族亲戚去一次，外公家族亲戚去一次;

3、每天保障一小时的户外活动或运动，散步、溜冰、找小朋友玩等，要注意安全;

4、每两天至少帮家里做一件家务事(10分钟以上)，洗衣服、择菜、简单做饭等;

5、一个人尝试独立在家呆1-2天;邀请同学或者小朋友在家玩若干次，并独立招待;

6、每周玩电脑2小时左右，重点加强打字能力的提高;

篇8

所有任务表的制定与执行实行全部电子化。

一、寒假计划目标表

2012年寒假战略计划体系

总规划

学广培专德才兼修接轨社会全面提高

项目

大学规划总目标

寒假的项目规划

具体内容

学习方面

注意知识面的广泛性，并逐渐确立专修方向，将学习放在首位，尤其要保证数学与英语的投入与效果，加大计算机的投入力度。

一、专业课“充电计划”

二、英语专项

三、练字专项

a1.建立《会计》、《税法》、《财务管理》三大资料库，梗概知识体系建设

a2.阅读《财务管理》英文版，设立读书笔记

a3会计财报知识应用模拟，《财务、会计、审计一体化模拟教程》、《怎样解读公司财务报表》

a4 bec自学计划

a5英语阅读计划《英美概况》、《题源文章记六级词汇》

a6英语口语训练《音标训练》

a7创业管理资料搜集

a8 stata软件使用

生活方面

搞好时间的统筹规划，训练自己的独立性，学习基本的生活技能，并逐渐掌握理财能力。

日常消费管理

积分绩评系统

时间管理系统

理财训练计划

b1.日常消费管理：财务管理计划子项目，用于绩效评价与预算审核

b2.积分绩评系统：自我管理核心

b3.时间管理系统：自我管理子系统

b4.理财训练计划：解决计划所需资金问题，本寒假主要通过家教。

品德方面

树立诚信为本的理念，提升自身的品德修养，培养扎扎实实的作风，进一步完善性格，加强心理素质的锻炼，确立人格培养目标。

读书计划

c1读书计划：《成功要读心理学》

《中华处世绝学》

《出师》

《财报要向一本故事书》

《管理要像一部好电影》

健身方面

将充分利用大学四年时间，扩展健身项目范围，扭转体弱局面，增强机体适应力。

健身专项

健康计划

d1健身专项：以周为单位执行

通过专业训练、内容扩展方式

d2健康计划：改变不健康的生活方式，通过改善饮食等保证身体健康。

社交方面

搞好宿舍内团结，通过社团活动锻炼，在实践中提高，结交好友，训练口才与礼仪，为日后迈入社会打下坚实基础。

形象塑造计划

其余事务管理

e1形象塑造计划：基于充满朝气、展现更加成熟、更加亲近的对外表现力设计。

e2其余事务管理：效率优先，量力而行。

寒假财务预算

项目

预计金额

备注

房租

-400

食品费用

-300

路费

-130

书费

-100

礼品及其他

-100

家教收入

1000

自有资金补足

篇9

初一学生音标学习策略

一、引言

语音是学习英语的基础，而音标是基础中的基础。扎实的音标知识是进行英语词汇学习的前提，是提高学生英语综合能力和帮助学生建立积极的自我概念以及培养学生自主学习能力的必要条件之一。本文将初一学生英语音标学习策略进行调查与分析，让学生了解自己学习音标存在的不足之处和如何恰当地使用音标学习策略，提高他们学习音标的效率和自主学习的能力。

二、学习策略的运用情况

学习策略是指学生为了有效地学习和发展而采取的各种行动和步骤，英语学习的策略包括认知策略、调控策略、社交情感策略和资源策略。本调查从这四个方面对学生的音标学习策略情况进行探讨，初一学生英语音标学习策略运用的总体水平见表1。

从表1可看到，在初一学生英语音标学习策略使用中，认知策略（M=2.96）、调控策略（M=2.66）和资源策略（M=2.43）的使用频率均小于3，只有社交情感策略（M=3.18）的使用频率大于3，最后，总体运用频率（M=2.81）在2.00-3.00之间，处于“从不使用”和“很少使用”之间，表明初一学生英语音标学习策略运用总体水平偏低。

1.调控策略的使用情况

本文调查了调控策略中的三种具体策略：预习计划、自主学习、自我评价（具体情况见表2）。

从表2可以看到，三种策略的使用水平均小于3，分别为：预习计划（M=2.45）、自主学习（M=2.89）和自我评价（M=2.63）。这表明，中学生在音标学习过程中缺乏使用调控策略的意识和能力。造成上述问题的主要原因，可能与中学英语教学中长期形成的以教师为中心的教学方法和教学模式有关。这样的教学模式使得学生习惯于跟着教师亦步亦趋，缺乏制订音标学习计划、自主学习和自我评价的意识和意愿。作为英语初学者，初中生正处于学习转型期，逐渐从完全依赖教师到独立地安排自己的学习（文秋芳，1995）。

2.认知策略的使用情况

本文调查了认知策略中常用的七项策略：对比、分类、重复、联系（具体情况见表3）。

从表3可以看到，在认知策略中，分类（M=3.04）与重复（M=3.22）的运用频率均大于3，英汉对比（M=2.95）和联系（M=2.09）的运用频率均小于3。在这四项认知策略中，“重复”策略的运用频率最高，“重复记忆”策略依旧备受学生欢迎。这说明多数初一学生在音标学习中仍然习惯于依靠死记硬背式的重复记忆方法。其实，在英语的音标中，元音非常有特点，采用分类学习的方式无疑是其中很重要的一项学习策略。比如说，单元音的发音是根据发音时间的长短分为长元音和短元音，也就是说，在单元音中长元音和短元音是相对应的。若记住长元音的发音，那么说明短元音的发音你基本上能够掌握。如/I/与/i：/，/u：/与/u/，这两组音标的音素的音形相似或相同，发音的唇形基本上相似，发音最大的区别就是发音时间的长短，/i：/与/u：/的发音时间长，/I/与/ u/的发音时间相对比较短。因此，如果你学会了/ i：/与/ u： /的发音，那你就基本上掌握了/I/与/u/的发音。同样，若先学会了短元音的发音，那你就可以很容易学会长元音的发音。但是学生在实际的学习过程中，常常是漫无目的，毫无规划，学得很辛苦，效率低下。

3.社交情感策略的使用情况

本文调查的社交情感策略有两项，它们是合作记忆单词策略与寻求帮助策略（具体使用情况见表4）。

由表4可以看到，在社交情感策略中，合作记忆单词策略（M=3.24）和寻求帮助策略（M=3.12）的运用频率大于3。这表明在合作学习的积极开展下，学生开始普遍使用社交情感策略。在以前，学生们不善于求助于老师和同学，不能经常应用英语和他们交流，英语的应用能力明显不足。随着教育改革的发展，教师与学生，学生与学生之间的关系有了很大的变化，朝着“平等、民主，合作，和谐”的方向发展，这样有助于为学生营造一种开放、包容的学习氛围。在轻松的环境下学习，既可以提高学生的学习效率，又可以增进学生之间的友谊，促进学生之间的共同进步、共同发展。

4.资源策略的使用情况

本文调查的资源策略有四项，它们分别是：磁带、国际音标flash、英文电视节目、用词典（具体使用情况见表5）。

《英语课程标准》（教育部，2001）建议教师积极利用音像、电视、书刊杂志、网络信息等丰富的教学资源，拓展学习和运用英语的渠道。由表5可以看到，在资源策略中，国际音标flash（M=2.58）、英文电视节目（M=1.89）、用词典（M=2.31）这三项策略的使用频率均低于3，磁带（M=2.91）的使用频率接近于3。这表明学生在学习音标时，利用的资源比较匮乏。

三、建议

首先，学生要充分认识到学习策略是学好英语的有效途径，每个学生都应积极参与学习英语学习策略，逐步掌握学习英语的科学方法与策略，最终提高自己综合运用英语语言的能力。

其次，学生在掌握了基本的英语学习策略之后，要利用学校、教师、家长提供的获得成功体验的机会，保持学习英语学习策略的积极性，把学习过程中的心得、体会和创新之处与同学和老师相互沟通和交流，同时，借鉴他人有效的学习策略为己所用，提高自己的学习策略水平。

最后，学生要时时对自己进行英语学习策略的使用情况进行评估，根据学习活动的变化而进行相应的调整，根据自己的学习风格与学习优势，灵活采用适合自己的各种学习策略，达到事半功信的效果。

参考文献：

[1]教育部.义务教育英语课程标准（2011版）[S].北京师范大学出版社.

[2]陈仕清.英语新课程理论与实践[M].上海外语教育出版社，2006.

篇10

1、每天的四个“1小时保障”

每天保障做一小时的语文或数学寒假作业；

每天保障一小时的无负担课外阅读；

每天保障一小时的英语自学；

每天保障一小时的户外活动或运动。

2、计划与非计划

如无特殊情况，每天必须完成以上计划；

每天的计划在得到“保障”的前提下，可灵活自由安排；

如果因外出经济、回乡下度假等意外安排，可临时不予执行；

可以偶尔睡懒觉，但不要影响当日计划的实施。

二、学习计划

1、不参加语文、数学的培优，不请家教，相关课程自己独立完成。

2、语文课程计划

7月份完成暑假作业，8月中旬前检查、改正，查漏补缺；

把自己的藏书系统再读一遍，重点读经济、百科知识大全、漫画、中外名著导读等丛书；

假期可以自己买三本自己喜欢的任何书籍；

把以前稍显薄弱的阅读题的规范回答、错别字系统复习。

3、数学课程计划

7月份完成暑假作业，8月中旬前检查、改正，查漏补缺；

假期完成五年级《奥数提高班》的自学，基本掌握其要领，有选择性挑选典型题目做。

自己注意计算细心化的纠正。

4、英语课程计划

英语学习能力和成绩一般，要重点加强学习兴趣和能力的培养；

把三年级和四年级的学校课本系统复习一遍，每天坚持听剑桥英语的磁带，时间不限；

假期把以前记得的英语单词都记在小本子上，分类汇总；

若有兴趣、有机会，可以把语音和音标接触、巩固一下，尽量保证发音标准。

三、活动安排

1、随父母至少省内出去经济一次，争取省外经济去一次；

2、至少去乡下亲戚家2次，体验生活，其中爷爷家族亲戚去一次，外公家族亲戚去一次；

3、每天保障一小时的户外活动或运动，散步、溜(！)冰、找小朋友玩等，要注意安全；

4、每两天至少帮家里做一件家务事（10分钟以上），洗衣服、择菜、简单做饭等；

5、一个人尝试独立在家呆1-2天；邀请同学或者小朋友在家玩若干次，并独立招待；

6、每周玩电脑2小时左右，重点加强打字能力的提高；