肝纤维化范文
时间：2023-03-28 02:41:03
导语：如何才能写好一篇肝纤维化，这就需要搜集整理更多的资料和文献，欢迎阅读由公务员之家整理的十篇范文，供你借鉴。
篇1
肝纤维化的治疗分两方面:一是针对原发病的病因治疗,二是特异性抗肝纤维化治疗。目前多数治疗方法仍处于实验研究阶段。
去除病因
针对不同病因,如肝炎病毒、慢性肠道感染、酒精、药物、自身免疫、代谢综合征等进行相应的治疗。非酒精性脂肪肝患者要制定合理的能量摄入以及饮食结构调整,适当的运动与锻练,纠正不良的生活方式,避免加重肝损害的因素,如高脂饮食、肥胖、糖尿病、酒精、药物等。体质指数(BMI)>25的患者应给予控制饮食和减肥措施。由肝炎病毒所致者酌情给予抗病毒治疗。
特异性抗肝纤维化治疗
1.保护肝细胞:包括①抗氧化剂谷胱苷肽、S-腺苷蛋氨酸(思美泰)、水飞蓟素、维生素E和维生素C;②脂氧酶抑制剂前列腺素E1、前列腺素E2和其类似物(米索前列醇、二甲基前列腺素E2);③钙通道阻断剂尼群地平等;④其他如甘草甜素和熊去氧胆酸等。
2.抑制肝脏炎症:体内应用白介素(IL)-1受体拮抗剂、可溶性肿瘤坏死因子(TNF)α抗体、IL-10等,可明显减轻肝内炎症。
3.抑制肝星状细胞(HSC)活化:干扰素(IFN)γ具有比IFNα更大的抗肝纤维化作用。许多试验和临床研究证实氧化苦参碱有抗肝纤维化作用,并已在临床应用。其他包括奥曲肽、C型利钠多肽、雌激素、抗甲状腺功能药物、胰岛素样生长因子-I、前列腺素E2、cAMP、小柴胡汤、己酮可可碱、卤呋酮、多不饱和卵磷脂、甘草甜素、丹参、西利马林、雷帕霉素、核心蛋白聚糖等,但其确切作用有待更大范围的临床研究来证实。
4.促进HSC凋亡:TGFβ1在抑制HSC增殖的同时也抑制HSC凋亡,抗TGFβ1治疗可望使活化的HSC发生凋亡。
5.中医中药:丹参、桃仁、苦参素、冬虫夏草、柴胡、黄芪、葫芦素B、甘草甜酸、苦味叶下珠、水飞蓟等单味中药已被证实具有抗肝纤维化作用。临床上常用的中草药复方制剂有复方861、小柴胡汤、复方鳖甲软肝片、大黄蛰虫丸、强肝软坚汤等。
6.药物靶向治疗和基因治疗:靶向治疗的关键是寻找高选择性的载体,目前已发现几种对肝脏内HSC有高度选择的载体,但仍需进一步验证。
篇2
肝纤维化的发生机制是个复杂的过程，众多因素（外界刺激、紫外线、缺氧等）引起机体释放大量炎性因子（TNF-a、IL-6、IL-1、PDGF等）激活了各种致纤维化通路（TGF-β1、CTGF、MAPK等)活化了肝星状细胞，上调细胞外基质的合成和分泌，并使其降解减少，最终导致ECM积聚而发生肝纤维化乃至肝硬化。有丝分裂原活化蛋白激酶(mitogen activated protein kinase，MAPK)是所有真核生物细胞将信号从感受器传递到细胞的主要信号转导通路。本文就MAPK通路与肝纤维化的发生作一综述。
1 有丝分裂原活化蛋白激酶家族
MAPK是细胞浆内一类高度保守的丝氨酸蛋白激酶［1］，哺乳动物细胞中MAPK主要包括细胞外信号调节激酶(extracellular signal regulated protein kinase，ERK)、C-Jun氨基末端激酶(C-Jun amino-terminal kinase，JNK)、P38MAPK和ERK5／BMK1(big MAPK1)四个亚族。真核细胞内已确定4条MAPK信号转导通路，即细胞外信号调节激酶1／2(ERK1／2)通路、c-Jun氨基末端激酶(JNK)通路、p38MAPK通路以及细胞外信号调节激酶5(BMK1／ERK5)通路［2］。介导细胞生长、发育、增殖、分化、老化及死亡全过程等多种生理过程。MAPK 家族级联反应包括顺序激活的MAPKKK(MAPK Kinase Kinase)，MAPKK(MAPK Kinase)和MAPK。MAPK／ERK信号通路中发挥MAPKKKK作用的H-ras表达始终处于较高水平，A-raf(MAPKKK)、MEK2(MAPKK)、ERK1(MAPK)等上下游激酶的转录也显著上调，相应的抑制因子(ras抑制物)mRNA则大幅度减少。MAPKKK对MAPKK的丝氨酸、苏氨酸双位点磷酸化而将其活化；进而MAPKK对MAPK进行苏氨酸、丝氨酸双位点磷酸化活化，活化后的蛋白激酶转移至核内激活相应的基因受体，进而促进相应基因的表达。
1．1 ERKl／2通路
ERK1／2信号通路(RasRafMEK1∕2ERK1／2)是经典的MAPK信号转导途径，能被生长因子、血清及佛波酯等外界刺激激活。在MAPK／ERK信号通路中，Raf与Ras等上游分子结合，选择性激活MEK。活化的MEK识别“Thr-X-Thr”模序而激活ERK。ERK转入核内，进一步激活核因子NF-KB、c-Myc、c-Jun、c-Fos、Etsl、Elk1、Sap、Tal、CREB和Stat等转录因子，抑制Myb、过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)，催化雌激素受体(ER)、表皮生长因子受体(EGFR)的磷酸化，使细胞从GO期进入G1期，从而调控发育、分化、凋亡及细胞功能同步化，尤其对细胞增殖具有关键意义［3］。
1.2 JNK通路
c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase，JNK)家族，属于进化上保守的丝氨酸／苏氨酸蛋白激酶。以JNK为中心的JNK信号通路可被细胞因子、生长因子、应激(如电离辐射、渗透压、热休克和氧化损伤)等多种因素激活. 激活MAPKKs的MAPKKKs目前确认的有MEKKs，混合连接激酶(mixed lineage kinases，MLKS)，凋亡信号调节激酶(apoptoSis Signa1 regulating kinases，ASKs)和TGF-B激活的蛋白激酶(TGF-B activated protein kinase，TAK)等，其他一些可能与JNK信号通路相关的MAPKKKs及其上游分子仍有待进一步研究证明［4］。JNKs的直接上游激酶MAPKKs目前确认的只有MKK4和MKK7. JNK最初被发现是一种特异性磷酸化核内转录因子c-Jun的激酶，并因此被命名为c-Jun氨基末端激酶，随后发现其他一些核内转录因子也是其下游底物，如Elk-1、ATF2、DPC4、NFAT4以及ets-2等.大量实验提示JNK信号通路在细胞分化、细胞凋亡、应激反应以及多种人类疾病的发生与发展中起着至关重要的作用，因此JNK信号通路是正常与疾病状态时细胞的一个重要调节靶点。
1.3 p38MAPK通路
P38MAPK通路在MAPK信号通路中起着重要作用［5］。 p38MAPK途径由紫外线、渗透压变化、细胞因子和生理应激等激活. P38MAPK上游激活物为MKK3、MKK6。P38 MAPK被磷酸化激活后移位人核，作用于细胞内相应的目标，可激活下游底物诱发特定基因的表达，包括多种前炎性细胞因子、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、E-选择素、血管细胞粘附分子-1等。在细胞的炎症反应、细胞凋亡等各种反应和免疫调节等过程中起重要作用［6］。
1.4 BMK1／ERK5通路
BMK1／ERK5是MAPK家族中最晚发现的信号转导通路。其可被高糖、低氧、血流切应力、活性氧簇(ROS)、渗透压以及各种丝裂原如内皮生长因子、神经生长因子等激活。MAPK 家族级联反应包括3个相应顺序激活的成分：BMK1／ERK5的级联反应同样包含3个相应顺序激活的成分：MEKK2／3 (MAPK／ERK Kinase Kinase 2／3)，MEK5(MAPK／ERK Kinase 5)和BMK1／ERK5。MEKK2／3是MAPKKK家族的成员，它被G-蛋白偶联受体激活后，能够激活MEK5；MEK5属于MAPKK家族的成员，免疫共沉淀法显示，MEK5是BMK1／ERK5唯一且特异性上游激酶［7］。BMK1／ERK5生物学效应使细胞增殖能力增强，凋亡减少，出现增殖与凋亡失平衡现象。
2 肝纤维化的发生机制
肝纤维化和肝硬化是同一病理过程的不同发展阶段，肝纤维化是发展成为肝硬化乃至肝癌的重要中间环节。经过大量的研究证明，肝纤维化是可以逆转的［8］。肝纤维化(hepatic fibrosis)是肝脏对各种慢性肝损伤的代偿反应所形成的一种肝脏疤痕组织，并导致细胞外基质(extracellular matrix，ECM)、细胞群和细胞因子的复杂改变［9］。早在20世纪8O年代，即有体外实验报道肝星状细胞是主要的肝基质胶原生成细胞［10］。其在肝纤维化的发生和发展中起主导作用，在各种致病因素的作用下，静止期HSC被激活并增殖形成的肌成纤维样细胞，肌成纤维样细胞不仅能合成几乎所有的ECM，而且具有多种功能，通过多条途径参与肝纤维化的发生与发展：(1)产生细胞因子和趋化因子：通过自分泌途径促进肌成纤维样细胞增殖及合成ECM，通过旁分泌途径直接激活未活化的HSC，通过进一步损伤肝细胞间接激活HSC。(2)增殖：通过增加肌成纤维样细胞的数量增加肝脏ECM含量。(3)基质金属蛋白酶及其抑制剂合成异常：基质金属蛋白酶合成减少，基质金属蛋白酶抑制剂合成增加，导致ECM 降解下降［11］。最终导致ECM积聚而发生肝纤维化乃至肝硬化。
3 MAPK通路与HSC
肝星状细胞是肝脏的一种间质细胞，位于Disse间隙，肝脏HSC 的数目很少与肝细胞数量之比为1：20．其总体积占肝体积的1．4％。HSC主要具有以下功能：(1)储存和代谢维生素A。(2)合成和分泌少量的ECM。（3）对内皮细胞起支撑作用，并有调节肝窦大小的作用。(4)合成非胶原糖蛋白和蛋白多糖等功能。细胞内、外产生的多种氧化因素(如活性氧)和细胞因子(如PDGF、TGF-b、MMP、TNF-a、ET-1)，可以激活MAPK通路。活化的MAPK将信号转导人HSC核内 ，能使多种转录因子磷酸化，随后发生一系列的细胞反应，包括细胞的增殖、转化以及调节一些特异性的代谢途径［12］。细胞因子PDGF诱导Ras活化，使激活ERK转导入HSC核内，磷酸化转录因子Elk-1和SAP，可能通过调节细胞周期蛋白D1和细胞周期蛋白依赖性激酶(Cyclin dependent kinase，CDK)，使HSC激活、增殖。细胞因子如TNF-a、IL-1、细胞毒性药物以及活性氧都能增加HSC中JNK的活性，活化的JNK进入HSC核内可以和转录因子AP-1复合物c-Jun和转录活化因子-2(Activating transcription factor-2，ATF-2)的氨基末端区域结合，使转录因子的活性区域发生磷酸化。这些转录因子能结合相应基因的启动子启动基因的表达。JNK通路也是促进HSC增殖的重要通道。各种细胞外刺激包括紫外线、热休克、渗透压休克、内毒素、细胞因子如白细胞介素-1(IL-1)、肿瘤坏死因子(TNF)和G蛋白偶联受体等的激活作用下， 相继磷酸化激活TAK/ASK/NLK， MKK3/MKK6， 激活的p38进入HSC核内可磷酸化转录因子ATF-2、Elk-1［13-15］， 导致他们的转录活性的升高， 调节目的基因的表达， 使HSC增殖并活化，从而可能由此参与了大鼠HF形成［16］。
4 MAPK通路与肝纤维化
MAPK信号传导通路是经典的有丝分裂通路， 是信号从细胞表面传导到细胞核内部的重要传递者。 近期的研究表明， MAPK信号通路与人体多种脏器纤维化的发生，发展密切相关［17-19］。 MAPK信号通路可以通过对肝星状细胞活化、增殖、凋亡的调控参与肝纤维化的形成。炎症反应、氧化应激、细胞因子等不同的刺激因素作用于肝星状细胞的相关受体激活了MAPK信号通路中的ERK、JNK两大信号途径，现研究表明它们对HSC的激活是正性调节，但至肝纤维化逆转录过程中，H-ras、A-raf．MAPKK2、ERK1，表达水平明显升高［20］。
5 展 望
肝纤维化是继发于肝脏炎症或损伤后修复过程中的炎症反应，ECM在肝内过量沉积，最终导致肝硬化。肝纤维化的形成机制非常复杂，确切机制尚不清楚。MAPK信号通路是肝纤维化形成的重要通路之一，MAPK信号通路与肝纤维化的发生有着密切的关系， MAPK信号通路中的ERK、JNK、P38MAPK三大信号途径与HSC之间的相互作用关系至今还不明确。ERK、JNK通路倾向是对肝星状细胞的活化和增值为正向调节，加剧了肝纤维化的形成。P38MAPK信号对肝星状细胞的调节还不明确有待进一步证实。随着对MAPK信号通路理解的不断深入， 其在肝纤维化发生的分子机制中的作用会越来越多地引起人们的关注。
参考文献
［1］Zhang Y，Dong C，et al．Regulatory mechanisms of mitogen-activated kinase signaling［J］．Cell Mol Life Sci，2007，64(21)：2771-2789．
［2］Nishimoto S．Nishida E，et al．MAPK signalling ：ERK5 versus ERK1／2［J］．EMB0Rep，2006，7(8)：782-786．
［3］Cao Q，Mak KM，Lieber CS，et al．Leptin enhances alpha1(I) collagen gene expression in LX-2 human hepatic stellate cells through JAK-mediated H2O2-dependent MAPK pathways［J］.Cell Biochem，2006，97(1):188-197.
［4］Liou GY，Zhang H，Miller EM，et al. Induced， selective proteolysis of MLK3 negatively regulates MLK3-JNK signaling［J］.Biochem J，2010 Feb 16.
［5］Deng ZY，Li J，Jin Y，et al. Effect of oxymatrine on the p38 mitogen-activated protein kinases signalling pathway in rats with CCl4 induced hepatic fibrosis［J］.Chin Med J (Engl)，2009，122(12):1449-1454.
［6］Jameel NM ，Thirunaukkarasu C ，Watkins SC，et al. p38-MAPK- and caspase-3-mediated superoxide-induced apoptosis of rat hepatic stellate cells: reversal by retinoic acid ［J］.Cell physiol，2009，218(1):157-166.
［7］McCaw BJ，Chow SY，Wong ES，et al．Identification and characterization of mErk5-T．a novel Erk5／Bmkl splice variant［J］．Gene，2005，345(2)：183-190.
［8］Gressner AM，Bachem MC．Molecular mechanisms of liver fibrogenesis-a homage to the role of activated fat-storing cells［J］．Digestion，1995，56(5)：335-346.
［9］Tsukada S，Parsons C J，Rippe R A ，et al．Mechanisms of liver fibrosis［J］．Clinica Chimica Acta，2006，364(1-2)：33-60.
［10］TAUB R．Liver regeneration：from myth to mechanism［J］．Nat Rev Mol Cell Biol，2004，5(10)：836-847．
［11］ 展玉涛 .肝纤维化的发病机制［J］. 中华肝脏病杂志，2007，15(10):776-777.
［12］Johnson GL，Lapadat R． Mitogen-activated protein kinase pathways mediated by ERK，JNK，and p38 protein kinases［J］．Science，2002，298(5600)：1911-1912．
［13］Raingeaud J， Whitmarsh AJ， Barrett T，et al. MKK3- and MKK6-regulated gene expression is mediated by the p38 mitogen-activated protein kinase signal transduction pathway［J］. Mol Cell Biol， 1996，16: 1247-1255.
［14］Dérijard B， Raingeaud J， Barrett T， et al. Independent human MAP-kinase signal transduction pathways defined by MEK and MKK isoforms［J］. Science，1995，267: 682-685.
［15］Janknecht R， Hunter T. Convergence of MAP kinase pathways on the ternary complex factor Sap-1a［J］. EMBO J，1997， 16: 1620-1627.
［16］吴文娟， 杨妙芳， 许小兵. p38MAPK在大鼠实验性肝纤维化发生中的表达及其意义［J］.世界华人消化杂志，2008，16(34): 3822-3827.
［17］Chopra P， Kanoje V， Semwal A， et al. Therapeutic potential of inhaled p38 mitogen-activated protein kinase inhibitors for inflammatory pulmonary diseases［J］. Expert Opin Investig Drugs，2008，17: 1411-1425.
［18］Schwer CI， Guerrero AM， Humar M，et al. Hemeoxygenase-1 inhibits the proliferation of pancreatic stellate cells by repression of the extracellular signal-regulated kinase1/2 pathway［J］. J Pharmacol Exp Ther，2008，327: 863-871.
篇3
关键词：肝纤维化 恩替卡韦 氧化苦参碱 细胞因子
The therapeutic value of entecavir combined with oxymatrine in the treatment of liver fibrosis and its effect on the expression of cytokines
WANG Guang-na WANG Guang-yu ZHANG Shao-hua
Department of hepatobiliary surgery,the Seventh People's Hospital of Hebei Province; Static distribution center, the Seventh People's Hospital of Hebei Province; Department of internal medicine, the Seventh People's Hospital of Hebei Province of Hebei geriatric hospital;
Abstract：Objective:To explore the therapeutic value of entecavir combined with oxymatrine in patients with liver fibrosis and the effect on the expression of cytokines.Methods:From January 2018 to December 2019, 98 patients with liver fibrosis in the Department of Gastroenterology of our hospital were selected. The patients were divided into the combined treatment group and entecavir group with 49 cases in each group. Both groups were given routine treatment. Entecavir group was treated with entecavir. The combined treatment group was treated with entecavir combined with oxymatrine. The improvement time of liver function, liver fibrosis and inflammation indexes were observed. The levels of IL-6, IL-8, IL-2, IL-10, TGF-β1, IFN-γ and TNF-α were detected by ELISA.Total bilirubin(TBIL), aspartate aminotransferase(ASL), alanine aminotransferase(ALT), albumin/globulin(ALB/GLB) were detected by automatic biochemical analyzer. Procollagen type Ⅲ(PC Ⅲ), collagen type Ⅳ(Ⅳ-C), hyaluronic acid(HA) and laminin(LN) were detected by radioimmunoassay. Statistical treatment effect and adverse reactions were observed. Results:Compared with entecavir group, the improvement time of liver function, liver fibrosis, inflammatory indexes, IL-6, IL-8, IL-10, TGF-β1, IFN-γ,TNF-α, liver function indexes and liver fibrosis indexes in the combined treatment group were significantly lower than those in the entecavir group(P<0.05). Compared with entecavir group, the level of IL-2 in combined treatment group was significantly decreased(P<0.05). Compared with entecavir group, the total effective rate of combined treatment group was higher(P<0.05). Compared with entecavir group, the total adverse reactions of combined treatment group were higher(P>0.05). Conclusion:Entecavir and Oxymatrine can effectively reduce the levels of IL-6, IL-8, and IL-10, and improve liver function and degree of liver fibrosis.
Keyword：entecavir; oxymatrine; hepatic fibrosis; cytokines;
肝纤维化是由于肝细胞坏死和炎症刺激导致，使肝脏内胶原等细胞外基质的增殖和降解失去平衡，导致肝内纤维结缔组织异常沉积的病理过程[1-4]。有研究表明，肝纤维化的病理过程是可逆的，早期诊断和及时有效的治疗可预防肝纤维化的发展，但目前尚无特别有效的药物。我们采用恩替卡韦联合氧化苦参碱治疗慢性乙型肝炎肝纤维化患者，取得较好疗效，现报道如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料
选取2018年1月至2019年12月在我院消化科住院的患者98例，诊断均符合《肝纤维化中西医结合诊疗指南(2019年版)》中慢性乙型肝炎肝纤维化的诊断标准[5],分为恩替卡韦组和联合治疗组各49例。恩替卡韦组患者中男32例，女17例；年龄23～56岁，平均(37.53±15.67)岁。联合治疗组患者中男28例，女21例；年龄26～52岁，平均(37.05±16.15)岁。排除伴有严重心肾功能障碍、失代偿期肝硬化、肝性脑病者、肝癌进展期、其他原因引起肝纤维化者，妊娠及哺乳期妇女。两组患者在性别、年龄、病情等一般资料方面比较差异无统计学意义(P>0.05),有可比性。本研究经我院伦理委员会批准，所有患者及家属对本研究知情，并签署知情同意书。
1.2 治疗方法
两组患者均进行常规保肝对症治疗，恩替卡韦组患者在常规治疗的基础上口服恩替卡韦(苏州工业园区药科大新药开发中心有限公司生产，国药准字：H20133073,规格：0.5 mg/片)治疗， 1片/次， 1次/d。联合治疗组患者在恩替卡韦组治疗的基础上口服氧化苦参碱(正大天晴药业集团股份有限公司生产，国药准字：H20010763,规格：0.1 g/粒),3粒/次，3次/d, 3个月为1疗程。
1.3 观察指标
①观察两组患者治疗前后肝功能的变化，采用全自动生化仪罗氏P800检测。②观察两组患者治疗前后肝纤维化指标(PCⅢ、Ⅳ-C、HA、LN)的变化，采用放射免疫法检测。③观察两组患者治疗前后炎症指标(IL-6、IL-8、IL-2、IL-10、TGF-β1、IFN-γ、TNF-α)的变化，采用酶联免疫吸附试验法(ELISA法)检测。④观察两组患者治疗前后不良反应发生情况。
1.4 临床疗效评价标准
显效：肝纤维化、肝功能指标改善90%以上，患者临床体征完全消失，生活正常。有效：肝纤维化、肝功能指标等改善50%～90%,患者临床体征好转，可以进行日常工作。无效：肝纤维化、肝功能指标改善的幅度低于50%,与治疗前相比，患者临床体征没有改善，甚至加重，生活无法自理。总有效率=(显效数+有效数)/总例数。
1.5 统计学方法
采用spss 20.0统计软件对数据分析处理。计量资料采用均数±标准差(x¯±s)描述，两组间比较采用独立样本t检验，组内比较采用配对t检验；计数资料采用%表示，采用χ2检验。P<0.05为差异具有统计学意义。
2 结果
2.1 两组患者肝功能、肝纤维化、炎症指标好转时间比较
见表1。
表1 两组患者肝功能、肝纤维化、炎症指标好转时间比较(x¯±s,周)
2.2 两组患者治疗前后炎症指标的变化
见表2、3。
2.3 两组患者治疗前后肝功能的变化
见表4。
2.4 两组患者治疗前后血清肝纤维化指标的变化
见表5。
表2 两组患者治疗前后IL-6、IL-8、IL-2、IL-10水平比较(x¯±s,pg/ml)
表3 两组患者治疗前后TGF-β1、IFN-γ、TNF-α水平比较(x¯±s,pg/ml)
表4 两组患者治疗前后肝功能指标比较(x¯±s)
表5 两组患者治疗前后肝纤维化指标比较[x¯±s,(μg/L)]
2.5 两组患者临床疗效比较
见表6。
表6 两组患者临床疗效比较 [n(%)]
2.6 两组患者不良反应发生情况比较
见表7。
表7 两组患者不良反应发生情况比较 [n(%)]
3 讨论
肝纤维化是指肝内结缔组织异常增生，以门管区及肝小叶内纤维组织的异常增生和沉积为特征，导致肝脏结构变形，进一步加重肝功能损害[6]。肝纤维化的形成主要是由胶原蛋白、蛋白多糖、糖胺多糖等细胞外基质的异常增殖引起的，这是许多慢性肝病发展为肝硬化的必要病理过程[7]。肝纤维化是所有慢性肝病的共同病理基础，病毒性肝炎、代谢紊乱和营养紊乱、胆汁淤积、自身免疫性损害等因素可引起肝纤维化。病毒性肝炎在中国比较普遍，是导致肝纤维化的主要疾病。肝纤维化继续发展，25%～40%的患者最终会发展成肝硬化。在肝硬化之前，肝纤维化可以逆转[8,9]。肝纤维化是慢性乙型肝炎、肝硬化和肝癌之间的关键中间环节，是慢性乙型肝炎发展为终末期肝硬化的必要病理过程[10]。本文研究显示，恩替卡韦联合氧化苦参碱可有效降低肝纤维化患者IL-6、IL-8、IL-10、TGF-β1、IFN-γ水平。
恩替卡韦是一种选择性抑制HBV逆转录酶聚合酶的脱氧鸟嘌呤核苷类药物，具有安全、方便、耐药低等优点。口服后可在肝细胞中转化为活性三磷酸盐，通过与天然底物三磷酸脱氧鸟嘌呤竞争，抑制HBV-DNA聚合酶活性，干扰HBV复制过程[11]。恩替卡韦通过抑制HBV复制，降低肝脏炎症程度，逆转假小叶性肝硬化的形成，促进肝功能恢复。氧化苦参碱是以苦参碱和苦参根中提取的苦参次碱-15-酮为基本结构的化合物。苦参碱具有抗过敏作用，能抑制炎症介质的释放，降低毛细血管的通透性，抑制肉芽组织的增殖，其抗炎作用与氢化可的松相似，见效快、作用持久[12]。本文研究显示，与恩替卡韦组相比，联合治疗组患者肝功能、肝纤维化、炎症指标好转时间显著缩短，表明应用恩替卡韦联合氧化苦参碱治疗肝纤维化患者效果更显著。
IL-2是一种重要的细胞因子，在人体免疫系统中起调节作用，具有增强免疫力、抗肿瘤、抗感染等生物活性，可治疗恶性肿瘤、肝炎等疾病[13]。IL-6水平升高可促进肝脏炎症反应，刺激肝纤维化，加重肝硬化[14]。IL-10也称为细胞因子合成抑制因子，是一种多效性细胞因子，在多种类型细胞中发挥免疫抑制或免疫刺激的作用[15]。IL-8是趋化因子家族的一种细胞因子，在参与和调节人类生殖生理和病理过程的作用已得到肯定，其作用机制之一就是与其特异性受体结合而发挥作用[16]。TGF-β1是一种纤维性因子，促进肝细胞损伤、坏死、甚至凋亡。它对肝细胞有影响并促进它们转化为肌成纤维细胞[17]。TNF-α是一种肿瘤坏死因子，是一种能直接杀伤肿瘤细胞而对正常细胞没有明显毒性的细胞因子[18]。本文研究显示，调控IL-2、IL-8、IL-6、IL-10、IFN-γ、TGF-β1、TNF-α的水平，可减轻肝组织的炎性反应，减轻肝脏的毒性损伤。
ALT主要存在于各种细胞中，尤以肝细胞为最多，整个肝脏的转氨酶含量大约是血液中的100倍[19]。TBil是直接胆红素和间接胆红素的总和，间接胆红素是指不与葡糖醛酸结合的胆红素[20]。AST分布在心肌、肝脏、骨骼肌、肾脏中[10]。Alb/Glb在肝脏中产生，当肝功能受损时，白蛋白产生降低，减少程度与肝炎的严重程度平行，白蛋白有滋养细胞和维持血管渗透压的作用。Ⅳ-C、PCⅢ、HA、LN是常见的肝纤维化指标，其表达与肝纤维的程度呈正比，通过检测肝纤维化指标含量，可以准确显示出肝纤维化的严重程度[21]。本次研究显示，与恩替卡韦组患者相比，联合治疗组患者ALT、TBil、AST、Ⅳ-C、PCⅢ、HA、LN水平显著降低，临床可根据ALT、TBil、AST、Ⅳ-C、PCⅢ、HA、LN水平的高低评估肝纤维化患者病情进展情况。
参考文献
[1] Eulenberg VM,Lidbury JA.Hepatic fibrosis in dogs[J].J Vet Intern Med,2018,32(1):26-41.
[2] Ezhilarasan D,Sokal E,Najimi M.Hepatic fibrosis:It is time to go with hepatic stellate cell-specific therapeutic targets[J].Hepatobiliary Pancreat Dis Int,2018,17(3):192-197.
[3] Caballería L,Torán P,Caballería J.Markers of hepatic fibro-sis[J].Med Clin(Barc),2018,150(8):310-316.
[4] Inoue T,Ishizaka Y,Shimoda M,et al.Thioacetamide-induced hepatic fibrosis in the common marmoset[J].Exp Anim,2018,67(3):321-327.
[5] 中国中西医结合学会肝病专业委员会.肝纤维化中西医结合诊疗指南(2019年版)[J].临床肝胆病杂志，2019,35(7):1444-1449.
[6] Xia L,Yang CQ.Research advances in the treatment of hepatic fibrosis[J].Zhonghua Gan Zang Bing Za Zhi,2017 ,25(8):566-570.
[7] 宋征蓉，陈小维，李家琼，等.超声检测肝区域速度指数和肝脏实质回声在乙肝肝纤维化诊断中的应用[J].实用医院临床杂志，2020,17(4):102-106.
[8] 谢爱泽，毛德文，石清兰，等.黄连温胆汤治疗慢性乙型肝炎肝纤维化肝胆湿热证的效果观察[J].临床肝胆病杂志，2020,36(7):1502-1507.
[9] 游茂春，刘广益，程俊，等.脂肪干细胞及其外泌体减轻肝细胞凋亡改善大鼠肝纤维化[J].中国比较医学杂志，2020,30(7):30-37.
[10] 李传元，石益海.多烯磷脂酰胆碱对酒精性脂肪肝肝纤维化及肝功能的影响[J].海南医学，2020,31(13):1649-1651.
[11] 张丽丽，刘涛，马欢，等.恩替卡韦治疗失代偿期乙型肝炎肝硬化[J].西部医学，2020,32(7):999-1002,1006.
[12] 张明发，沈雅琴.氧化苦参碱治疗肝纤维化的临床评价研究进展[J].药物评价研究，2019,42(12):2484-2491.
[13] 李松，张娟.替诺福韦酯对乙型肝炎肝硬化患者肝纤维化状态与Th1/Th2型细胞因子的影响研究[J].肝脏，2020,25(1):54-56.
[14] 张海玲，佟博，张艳敏，等.微生态制剂联合双环醇对非酒精性脂肪肝的临床疗效及对肝纤维化、血脂水平、血清炎症因子、TGF-β1的影响[J].海南医学院学报，2020,26(12):921-924.
[15] 季文媛，卫佳琪.自拟疏肝抑纤经验方联合恩替卡韦片对慢性乙型肝炎肝纤维患者化肝功能、血清肝纤维化标志物及血清TGF-β1、IL-10、MMP-2水平的影响[J].环球中医药，2019,12(4):591-594.
[16] 盛云建，何鸿雁，宋颖，等.白介素-37抗四氯化碳诱导的小鼠肝脏炎症及机制研究[J].四川医学，2019,40(11):1099-1105.
[17] 唐诗慧，张丽，方步武.蒿鳖养阴软坚方对TGF-β1诱导的肝纤维化的作用[J].天津医科大学学报，2018,24(5):381-384.
[18] 宋洁，韩莹波，贾胜男，等.前列地尔干预乙型肝炎肝硬化患者纤维化指标及对IL-6、TNF-α的影响[J].肝脏，2018,23(8):702-705.
[19] 贺尼娅，王琳.慢性乙型肝炎患者血清胆固醇与肝纤维化的相关性研究[J].肝脏，2020,25(6):645-647,654.
篇4
【关键词】 干细胞；肝纤维化
文章编号：1004-7484（2013）-12-7122-02
肝纤维化是各种致病因子所致正常肝结构被破坏，肝结节的再生和细胞外基质（ECM）过度沉积的病理过程。最近的研究成果显示，干细胞可以减少肝纤维化，激活肝前体细胞（HPC），促进肝实质再生[1]，可以在一定程度上可以逆转和延缓肝纤维化并补充纤维化过程中损伤的肝细胞，为临床终末期肝病治疗提供新的思路。
1 干细胞
干细胞是一类具有自我更新、高度增生和多向分化的多潜能的细胞，根据其发生学来源和细胞发育阶段不同，可将干细胞分为胚胎干细胞（embryonic stem cells，ESCs）和成体干细胞（adult stem cells，ASCs），而成体干细胞中的骨髓干细胞又可进一步分为骨髓间充质干细胞（mesenchymal stem cells，MSCs）和造血干细胞（haematopoietic stem cells，HSCs）。
1.1 胚胎干细胞 胚胎干细胞具有自我复制、更新以及产生子代的能力，并能在原始未分化状态无限繁殖，在特定条件下可分化为人体多种细胞类型，并可构建成任何类型的组织和器官。Martin Evans早在1970年就已从小鼠体内分离出胚胎干细胞，并在体外成功培养。但是由于伦理及安全性等问题，ESC在临床应用中很受限。
1.2 成体干细胞 成体干细胞是指存在于各种组织和脏器中的未分化细胞，具有特定的优势：①免疫原性低，避免免疫排斥反应；②成体干细胞的分化潜能相对比较局限，易诱导向特定的组织细胞分化，也可直接用于体内组织的原位修复；③获取、分离、增殖较为容易，无伦理学问题，更易于临床应用。故成体干细胞成为当前该领域主要的研究方向。用于治疗肝脏疾病的成体干细胞主要为骨髓干细胞，而骨髓来源的MSC和HSC在获取、分离、培养方面具有优势，成为当前该领域主要的研究方向。
1.2.1 骨髓间充质干细胞 间充质干细胞一群中胚层来源的具有自我更新和多向分化潜能的多能干细胞，间充质干细胞遗传背景稳定，可体外扩增成肝细胞、成骨细胞、成软骨细胞、脂肪细胞和成肌细胞等。吕素莉[2]等人通过四氯化碳诱导的肝纤维化动物模型研究表明，BMSC移植能抑制大鼠肝纤维化发展，部分逆转肝纤维化进程，有效改善肝脏功能，为临床自体BMSC移植治疗肝脏疾病提供了实验基础。临床研究显示，将骨髓间充质干细胞移植入受损的肝脏后，可以改善肝脏的微环境，在一定程度上预防肝纤维化的发生[3]。以上表明，间充质细胞会非常适合治疗肝脏疾病涉及的纤维化。
1.2.2 造血干细胞 目前研究认为造血干细胞具有自我更新能力，极高的增殖潜能和分化为各系血细胞潜能的组织特异性干细胞，不仅能分化为血液系统细胞，HSC在适当的条件下也能分化成其他非造血组织细胞，如肾脏细胞、肝脏细胞、肺泡细胞等。自体骨髓干细胞（BMSC，包含HSC和MSC）作为一种肝干细胞已用于临床，目前常用的移植方法是经股动脉穿刺插管于肝固有动脉并造影，观察肝内血管情况及有无占位性病变。有研究表明将自体骨髓干细胞从肝动脉注射入患者体内，移植后检测体内白蛋白水平升高，Child-Pugh评分改善。可见骨髓干细胞移植可在一定程度上使肝硬化患者肝功能恢复，提高了患者生存率，但目前对移植细胞在体内的归巢定植、分化过程，功能重建、具体疗效仍然需要更深入的研究分析。
2 干细胞治疗存在的问题
大量实验表明干细胞在肝硬化的治疗中可以减轻肝脏纤维化程。然而有研究表明骨髓干细胞能促进肝星状细胞（hepatic stellate cell，HSC）的形成，而HSC具有瘢痕形成的功能。最近研究显示，BMSCs移植入肝硬化小鼠体内，骨髓源性肝细胞不到肝组织细胞总数的0.006，而骨髓源性肝星状细胞和肌成纤维细胞则分别高达68%和70%。以上研究提示我们在进行骨髓干细胞的临床应用转化时要做更深入的思考与研究。
3 结 论
大量实验表明，功能肝样细胞可以由不同源性干细胞定向分化而来，这就为临床治疗肝脏疾病提供了明确的实验依据。但是，由于肝内微环境会影响干细胞的分化，使分化具有不确定性。我们需要进一步提高分离纯化出高特异性干细胞的方法，进一步完善培养扩增干细胞并保持其特性的方法。在干细胞移植要求的细胞数量、活性以及移植途径选择等应用层面的进一步优化，并需进一步观察研究应用远期的安全性。干细胞治疗对于肝纤维化的患者来说，既令人兴奋也具有挑战性，针对全球普遍存在的人供体器官严重缺乏和免疫排斥的问题，干细胞开辟一种新的研究思路。相信在不久的将来，随着研究的不断深入，干细胞必将在肝纤维化的治疗中发挥更加重要的作用。
参考文献
[1] Kallis YN，Robson AJ，Fallowfield JA，et al.Remodelling of extra-cellular matrix is a requirement for the hepatic progenitor cell response[J].Gut，2011，60（4）：525-533.
篇5
肝纤维化（Hepatic fibrosis，HF）是各种慢性肝病向肝硬化发展的必经阶段，是所有慢性肝病的共同病理基础。正常肝脏细胞含有肝细胞、库普弗细胞、肝窦内皮细胞、肝星形细胞（HSC）。在病毒性肝炎、铁铜代谢异常、自身免疫疾病等因素作用下，相关细胞分泌多种细胞因子，如转化生长因子(transforming growth factor，TGF)、血小板衍生生长因子(platelet derived growth factor，PDGF )、肿瘤坏死因子 -α( tumor necrosis factorα，TNF-α)、白细胞介素-1（interleukin-1，IL-1）、白细胞介素-6(interleukin-6，IL-6)等，这些细胞因子首先与 HSC膜上受体结合 ，然后通过不同或相同的胞内信号转导系统（JNK/MAPK信号通路、JAK/STAT通路、TGF-β和PDGF介导的信号转导通路等）传递，在某些转录因子的作用下，转导信号入核，从而启动 DNA复制、转录及翻译表达过程，实现 HSC活化、增殖、转型并分泌细胞外基质（ECM），最终导致肝纤维化的发生［1，2，3］。其特点表现为：以胶原蛋白为主的细胞外基质各成分合成增多，降解相对不足，过多沉积在肝内。肝纤维化进一步发展引起肝小叶改建、假小叶和结节形成，最终致肝硬化。Safadi等［4］ 研究表明肝纤维化在去除损伤因素后尚有逆转的可能。目前，学者们普遍认为HSC是肝脏合成ECM 的主要细胞［5］，HSC的活化与增殖是肝纤维化形成的中心环节［6，7］，该环节包括细胞增生并合成 ECM、释放胶原酶及其抑制物等过程。
1 HSC的一般性质和功能［8］
1876年德国Von Kupffer首次描述星形细胞，肝星形细胞又称肝贮脂细胞(fat-storing cells，FSCs)、脂细胞(1ipocyte)、维生素A贮存细胞(vitaminA-storing cells)、窦周细胞(pericyte)和伊东细胞(Ito cel1)等，是肝脏的一种非实质细胞，位于肝窦内皮细胞与肝细胞之间的窦周间隙(Disse间隙)内。正常情况下，HSC约占肝细胞总数的8%～13％，占非实质细胞的33％。其形态不规则，胞体呈卵圆形或不规则形，常伸出数个树枝状突起包围窦壁，其星形伪足包绕5～6个肝细胞，因此得名为肝星形细胞。HSC胞质内有 1～14个直径为 1 μm ～2μm的富含维生素 A和三酰甘油的脂滴。
正常情况下，HSC具有以下生理功能：1） 储存脂肪，为肝细胞提供能源；2） 储存和代谢维生素A，储存体内80％左右的维生素A，对体内维生素A的稳定起着重要调节作用；3） 合成和分泌胶原、蛋白多糖、中间丝、结蛋白 、细胞因子和生长因子等成分；4）合成基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase，MMP)及其组织抑制剂(tissue inhibitor of metalloproteinase，TIMP)；5） 调节肝窦内微循环。
2 HSC的活化
正常情况下HSC处于静止状态。在各种肝损伤因素刺激下，HSC可经历从静止HSC到具有增殖性、成纤维性和收缩性的肌成纤维样细胞(MF)的转化过程。当肝脏受到炎症或机械刺激等损伤时，邻近的细胞如肝细胞、库普弗细胞、窦内皮细胞和血小板等通过旁分泌作用可分泌多种细胞因子，如TNF-α、TGF-β、IGF-1 (胰岛素生长因子)、HGF (肝细胞生长因子)、PDGF、ET-1 (内皮素-1)等。使HSC出现肌成纤维母细胞样表型转化，激活并导致细胞增殖、ECM合成增加。激活后的HSC可自分泌TGF、PDGF、ET等细胞因子使活化得以持续，此时即使除去原发因素，其纤维化过程仍会持续。
细胞因子、炎症介质、ECM成分、过氧化物、乙醛等与相应HSC膜受体结合，激活效应细胞内信号传递分子，最终导致基因表达所发生的变化是多条细胞内信号传导通路控制的结果。其中促分裂素原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinases，MAPK)是近年来发现的一类特殊的细胞信号传导蛋白。经上游激酶作用后发生苏氨酸、丝氨酸双位点磷酸化而激活［6，9］ ， MAPK信号传导通路被认为是许多信号通路的共同通道，其活化与HSC的增殖密切相关。PDGF是HSC最强烈的有丝分裂原，通过PDGF受体酪氨酸激酶介导的信号细胞传导作用促进HSC增殖。瘦素（Leptin）能通过激活JAK/STAT通路及H2O2依赖的ERK1/2通路激活HSC，并产生大量TIMP-1，促进纤维化进程。
活化后的HSC其特征发生一系列改变：1) 形态学上表现为脂滴消失，胞体增大，伸出细长的伪足，呈现星形外观。胞质中储存的脂滴和维生素A 减少或消失。胞质内粗面内质网增加、高尔基体发达，具有旺盛的蛋白质合成能力；2) 增生频率增加，细胞大量增生，并且向肝损伤部位迁徙；3) 表达α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、波形蛋白及结蛋白。Niki等［10］采用免疫印迹法研究发现，波形蛋白及结蛋白在HSC原代培养的第2～6d开始表达，α-SMA在原代培养的13 d内其表达持续增加；4) 收缩性增强。HSC收缩与内皮素(ET)和P物质等收缩因子有关，舒张与一氧化氮(NO)、前列腺素E2(PGE2)等舒张因子有关。肝脏损伤时内皮细胞及活化的HSC合成ET增加，作用于HSC表面的特异性内皮素受体(ETR)，引起细胞收缩，使肝窦血管阻力升高，致肝硬化门静脉高压进一步发展； 5) 细胞外基质产生增多。活化的HSC可分泌I、Ⅲ、Ⅳ型胶原，板层素（LM），纤维连接蛋白(FN)，层连蛋白(LN)，腱蛋白(tenascin)和粗纤维调理素（undulin）等糖蛋白成分以及硫酸皮素、硫酸软骨素和透明质酸(HA)等蛋白多糖，这些蛋白多糖是生成ECM 的主要物质；6)分泌趋化因子及细胞因子，参与炎症反应及趋化作用。活化的HSC生成单核细胞趋化蛋白1(monocyte chemoattractantprotein-1，MCP-1)、肝细胞生长因子 (hepatocyte growth factor， HGF)、成纤维细胞生长因子(fibroblast growth factor，FGF)和表皮生长因子(epidermal growth factor，EGF)、结缔组织生长因子 (connective tissue growth factor，CTGF)、胰岛素样生长因子(insulin-1ike growth factor，IGF)及IL-6、IL-10等。同时表达多种受体：如TGF-β及其 I 型受体；PDGF及其受体；内皮素(ET)及其受体等［11］。上述细胞因子和受体构成细胞因子的网络调控(network of cytokines)系统；7) TIMP合成和分泌增加。活化的HSC是MMP及TIMP的主要来源细胞。HSC激活后所分泌的TIMP-1、TIMP-2增加，抑制了MMP对ECM的降解；8) 分泌基质降解素及明胶酶，降解基底膜，破坏肝血窦；同时，肝血窦内皮细胞的窗孔消失，导致肝窦毛细血管化。
3 HSC在HF恢复期的作用
在HF的恢复阶段，活化HSC的数目减少导致TIMP-1、TIMP-2下降［12，13］，从而使MMP的活性恢复，ECM 降解多于沉积。此外，包绕在活化HSC周围的整合素ανβ3配体的降解，可降低与活化HSC表面整合素ανβ3的连结作用，抑制HSC的增殖，促进HSC的凋亡，并诱导一种可溶性的、分泌MMP的HSC表型出现［14］ 。随着活化HSC的凋亡，与活化HSC相关的系列事件也将改善，HF由此逐渐趋向恢复。
4 HSC的凋亡及其调控
在肝纤维化的逆转过程中，随着肝组织结构完整性的恢复，激活的HSC数量会减少。导致HSC数量减少有两种可能：一是由激活表型转化为静止表型。二是发生细胞凋亡而死亡。研究表明［15］ ，在肝纤维化恢复阶段，主要是表现为激活状态的HSC凋亡而不是表型的转化。
4.1 Fas(CD95／Apo-1)／Fas-L(CD95L／Apo-1-L)介导
HSC凋亡主要通过死亡因子(FasL)及其相应的死亡因子受体(Fas，又称CD95)介导的信号传导途径实现。Saile等［16］在对星形细胞的凋亡及其调控的研究中发现，在HSC活化过程中有凋亡出现，并且随着活化过程的进展其表达Fas和FasL的量不断增加。CD95(Fas)拮抗抗体能完全阻断HSC的凋亡；而 CD95(Fas)激动抗体可诱使高达 95％的活化 HSC进入凋亡状态并表达 p53。表明HSC的凋亡是通过Fas／FasL途径启动的。Gong［17］等的体外培养实验表明，外源性FasL可使原代培养晚期或传代培养的HSC发生凋亡。在HSC的活化过程中，凋亡的调控蛋白bcl-2和P53均有升高，此二者启动细胞凋亡信号。
4.2 p75／NGF（神经生长因子）介导
人和大鼠的HSC表达低亲和性的神经生长因子受体p75 (NGF-R)。p75是肿瘤坏死因子(TNF)受体超家族成员，也是神经营养肽家族的一种受体。NGF是它的典型配体。Trim［18］等发现在静止状态下培养的大鼠其HSC不表达 p75，在活化(7 d)和高度活化 (14 d)状态下则能检测到p75的表达，且表达数量呈进行性增加。Oakley等［19］采用原位杂交和免疫组织化学法所进行的研究表明，在四氯化碳(CCL4)诱导肝脏损伤48 h后肝脏表达NGF出现峰值，与HSC出现最大凋亡率的时间相一致，并且HSC的凋亡程度对NGF重组过程呈现剂量依赖性增加。表明肝脏发生纤维化损伤时所表达的NGF通过与位于HSC表面的低亲和力神经生长因子受体(Low affinity nerve growth factor receptor，LNGFR)P75结合，发挥调控活化HSC凋亡数量的功能。
4.3 PBR(外周苯二氮卓类受体)／PBR-L介导
线粒体渗透性转换孔道(permeability transitionlmre，PTP)包括PBR。PBR的相对分子质量为18000，位于线粒体外膜上。静止的HSC不表达PBR，HSC活化后开始表达 PBR，活化第7～9 d表达达到高峰，HSC的凋亡也达到高峰，3w后检测不到 PBR的表达，HSC因凋亡而大量消失。PBR选择性配体 1-(2-chloropheny1)-N-methyl-N(1-methylpropy1)-3-isoquinolinecarboxamide(PKIII-95)和 4'-chlorodiazazepam(Ro5-4864)呈剂量依赖性地诱导 HSC凋亡。Fischer等［20］研究表明，用选择性PBR配体PKIII95和Ro5-4864可竞争性结合PBR。PKIII95可诱导蛋白激酶 B／Akt、Bad的去磷酸化反应，并能下调凋亡抑制基因 Bcl-2水平，促进 HSC凋亡。
4.4 整合素对 HSC凋亡的调控
整合素(integrin)是一类位于细胞表面的糖蛋白受体分子家族，是介导ECM 和HSC相互作用的主要黏附受体。Iwarmto等［21］研究发现，可溶性整合素识别序列五肽GRGt-(Gly-Arg-Gly-asp-Ser)可拮抗整合素调节的原代培养的小鼠H细胞间的黏附作用，从而干扰整合素介导的HSC与ECM的相互作用，使HSC表达D53的量增加，bcl-2／bax的量下降，促使HSC发生凋亡。
4.5 相关蛋白、促凋亡物质和细胞因子对 HSC凋亡的调控［22］
肝脏损伤过程中产生的某些细胞因子参与凋亡的调控，如TNF-α和TGF-β可通过下调CD95L和p53的表达及上调bcl-xL和p21WAF1的表达减少活化星形细胞的凋亡。γ-干扰素(IFN-γ) 可抑制 HSC合成胶原和非胶原基质，还可通过热休克蛋白70(HSP70)依赖通道促进 HSC的凋亡。实验表明，TIMP-1能直接抑制激活的HSC凋亡。此作用是通过抑制MMP实现的。活化的 HSC可通过自分泌IL-10抑制I型胶原转录过程并刺激产生胶原酶而对HF产生负调控作用。此外，IL-10可通过上调 FasL和Bax的表达、下调 Bcl-2的表达促进 HSC的凋亡。肝细胞生长因子(HGF)通过减少胶原蛋白表达抑制HF。其机制可能为 HGF直接作用于HSC，使纤维化肝脏 中 HSC的结蛋白和 α-SMA mRNA表达减少。研究证实［23］，CCAAT增强子结合蛋白(C／EBPs) 与 HSC向脂肪细胞分化及去分化过程关系密切。并且该基因表达的改变与 HSC的激活有因果关系。过氧化物酶体增殖因子活化受体 (PPARγ) 在正常肝脏的静止 HSC中呈高表达，但在体内、外 HSC激活过程中呈低表达。用PPARγ 的特异激动剂(配体)15 脱氧-12，l4前列腺素J2(15 PGJ2)增强 PPARγ 的活性可以抑制体内、外HSC的增殖和 α1 (I)胶原的表达。这种抑制作用可被 PPARγ 的拮抗剂 GW9662所消除。此外，Bcl -2 家族蛋白、cyt-c、凋亡诱导因子(AIF)等都在HSC凋亡和调控中发挥着作用。
Lang等［24］研究显示，核因子κB(NF-κB)只表达于激活的HSC，能够抑制TNF-α 介导的活化 HSC所发生的凋亡， NF-κB的抗凋亡作用可能与其直接上调凋亡抑制因子、肿瘤坏死因子受体相关因子1、2(TRAF1、2)、锌指蛋白A20、超氧化物歧化酶等抗凋亡基因的表达相关。近年来的大量研究发现，活性氧(reactive oxygen species，ROS)与细胞凋亡关系密切。
Thirunavukkarasu等［25］研究发现，过氧化物可诱导大鼠HSC凋亡，并认为这种作用与其促进细胞色素C释放、使bax表达上调及增加细胞凋亡蛋白酶活性相关，其诱导的HSC凋亡可被细胞凋亡蛋白酶抑制剂DEVD-fmk、抗氧化剂维生素E和过氧化物歧化酶等所抑制。
潘勤等［26］采用荧光染色 、流式细胞术 、原位末端标记法、透射电镜技术对原代 HSC的观察表明 ，一定浓度的生长抑素(somatostatin， SST)可促进活化的 HSC凋亡，且呈明显量效关系 。
瘦素基因小干扰RNA（siRNA）表达载体可减少瘦素表达，抑制HSC增殖并诱导其凋亡。
上述各种研究引起的凋亡机制可有效清除活化增殖的HSC，减少ECM合成，有助于肝组织结构恢复到正常状态。
5 目前针对HSC的抗肝纤维化治疗
HSC增殖和凋亡在肝纤维化的形成和逆转过程中起关键作用，抑制 HSC增殖、诱导其凋亡是抗纤维化的重要策略。由于激活的HSC是肝纤维化时ECM的主要来源细胞，以HSC为靶标的治疗措施逐渐成为抗肝纤维化的重要方法，其中主要包括抑制 HSC活化、增殖，诱导 HSC凋亡以及调节胶原合成和降解等方法。目前，抗氧化剂（如半胱氨酸、维生素E、蓬莪术酮、 碘昔芬、S-腺昔甲硫氨酸 、 硫氧还蛋白、卵磷脂等）、TGF-β拮抗剂、信号转导抑制剂、干扰素等可抑制 HSC活化的药物已应用于临床或处于试验阶段。在多靶点抑制 HSC活化的某些抗氧化剂（如腺苷蛋氨酸、小柴胡汤、水飞蓟素、复方861等）可能比单靶点药物更加有效。研究表明，α-干扰素能抑制HSC增殖和胶原合成，下调I、Ⅲ型胶原基因表达，减少I、Ⅲ型胶原沉积，但是其对胶原酶无影响。Lu等［27］的研究表明，α-干扰素可抑制HSC激活，从而达到减轻肝纤维化的目的。卡莫司他甲磺酸盐为一种丝氨酸蛋白酶抑制剂，通过减少潜在TGF-β结合蛋白的连接，促进活性TGF-β的释放，抑制HSC活化与增殖。精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(RGD)能通过抑制酪氨酸磷酸化作用而抑制HSC增殖与胶原合成［6］。
中医中药治疗慢性肝炎、肝纤维化主要以活血化瘀为主，疗效显著，毒性小，显示出良好趋势。草药复方861可呈剂量依赖性地有效抑制人HSC增殖，减少星形细胞中α-SMAmRNA的表达，表明其对肝纤维化具有一定的治疗作用［28］。鳖甲煎口服液亦可通过抑制HSC的增殖达到抗肝纤维化作用［29］。研究已证实“益肝康 ”不仅有抑制HSC活化、增殖及促HSC凋亡的作用，还可通过抑制PDGF、TGF等促纤维化细胞因子的表达和加强抗脂质过氧化、促进胶原降解等作用发挥其抗肝纤维化功效［30］。Zhao等［31］研究表明，粉防己碱可抑制星形细胞激活，减少胶原累积，并可通过诱导细胞凋亡蛋白酶活性增加HSC凋亡数量。银杏叶提取物可通过抑制TIMP-1的表达及促进HSC的凋亡减轻CCl4诱导的大鼠肝纤维化。刘成等［32］研究证实“中药血清”能明显抑制损伤肝库普弗细胞对HSC的增殖与I型胶原产生的影响 。杨玲等［33］采用 RT-PCR法发现“抗纤软肝冲剂药物血清”能显著抑制肝星形细胞的 TGFβ1mRNA的表达。王海南等［34］研究发现，“肝纤维化大鼠药物血清”能降低TGFβ1活性。
虽然研究人员在抗肝纤维化方面做了大量的工作，已经研制了许多抗肝纤维化的药物，但多数药物研究仍局限于动物实验或细胞水平 ，应用于肝纤维化临床治疗依然任重道远。
6 展望
肝纤维化是继发于肝脏炎症或损伤后修复过程中的炎症反应， ECM在肝内过量沉积，最终导致肝硬化。肝纤维化的形成机制非常复杂，确切机制尚不清楚。HSC作为肝纤维化发病的关键环节正在受到广泛关注。随着对肝纤维化细胞分子生物学机制的进一步研究，以HSC为靶标的治疗措施逐渐成为抗肝纤维化的重要方法。作者认为目前HSC活化、增殖引起肝纤维化以及肝纤维化的逆转机理仍未明确。深入开展肝纤维化时细胞因子、趋化因子、转录因子等对HSC调控作用机制的研究，寻找HSC激活过程中的信号转导通路，研制抑制HSC活化促进其凋亡的药物，对于预防、延缓乃至中断肝纤维化的进程具有良好前景 。
【参考文献】
［1］姚希贤，徐克成．肝纤维化的基础与临床［M］． 上海：上海科技教育出版社，2003．9-21
［2］Han YP，Zhou L，Wang JH，et a1．Essential role of matrix metalloproteinases in interleukine-1-induced myofibroblastic activation of hepatic stellate cell in collagen［J］．J Biol Chem， 2004，279(6)：4820-4828
［3］Massimo P，Fabio M．Cytokine receptors and signaling in hepatic stellate cells［J］．Semin Liver Dis，2001，21(3)：397- 416
［4］Safadi R，Friedman SL．Hepatic fibrosis role of hepatic stellate cell activation［J］．Med Gen Med，2002，4(3)：27
［5］Sato M， Suzuki S， Senoo H. Hepatic stellate cells: unique characteristics in cell biology and phenotype［J］．Cell Struct Fun ct，2003，28(2)：105-l12
［6］姜慧卿，张晓岚．肝纤维化的发生机制［J］．世界华人消化杂志， 2000，8(6)：687-689
［7］朱永红，胡大荣，聂青和，等．人肝脏星形细胞培养激活及其C-fos， c-jun的表达［J］．世界华人消化杂志，2000，8(3)：299-302
［8］刘涛，黄 捷， 邓存良.肝星状细胞与肝纤维化［J］．山西医药杂志，2005，34（5）：355-357
［9］Nieto N，Friedman-SL，Cederbaun AI．CYP2E-mediated oxidative Stress induces collagen type I expression in rat hepatic stellate cells ［J］．J Hepatol，1999，30(4)：987-996
［10］Niki T，Pekny M，Hellemans K，et a1．Class VI intermediate filament protein nestin is induced during activation of rat hepatic stellate cells［J］．Hepatology，1999，29(2)：520-527
［11］饶慧瑛，魏来.肝星形细胞的生物学特性及活化调控机制［J］．世界华人消化杂志， 2005 ，13(5)：67 1-674
［12］Iredale JP，Benyon RC，Picketing J，et a1．Mechanisms of spontaneous resolution of rat liver fibrosis［J］．Clin Invest，1998，102(3)：538-549
［13］Yoshiji H，Kuriyama S，Miyamoto Y，et a1．Tissue inhibitor of metalloproteinase-1 promotes liver fibrosis development in a transgenic mouse model［J］．Hepatology，2000，32(6): 1246-1254
［14］Lu G，Shimizu I，Cui X，et a1．Interferon-alpha enhances biologicaldefense activities against oxidative stress in cultured rat hepatocytes and hepatic stellate cells［J］．J Med Invest，2002， 49(3-4)：172-181
［15］Di SarioA， Bendia E， SvegliatiBaroni G， et al. Effect of pirfenidone on rat hepatic stellate cell proliferation and collagen production ［J］. J Hepatol，2002，37 （5） :584 - 91
［16］Saile B，Knittel T，Matthes N，et a1．CD95L mediated apoptosis of the hepatic stellate cell：a mechanism terminating LID．Controlled hepatic stellate cell proliferation during hepatic tissue repair［J］．Am J Pathol，1997，151(5)：1265-1272
［17］Gong W，Pecci A，Roth S，et a1．Transformation．dependent susceptibility of rat hepatic stellate cells to apoptosis induced by mluble Fas ligand［J］. Hepatology，1998，28(2)：492-502
［18］Trimn，Morgans ，Evznsm ， et a1．Hepatic stellate cells express the low affinity nerve growth factor receptor p75 and undergo apoptosis in response to nerve growth factor stimulation ［J］．Am J Phthol，2000，56(4)：1235-1243
［19］Oakley F，Trim N，Constandinou CM， et al . Hepatocytes express nerve growth factor during liver injury：evidence for paracrine regulation of hepatic stellate cell apoptosis．Am J Pathol，2003，163(5)：1849-1858
［20］Fischer R，Schrnitt M，Bode JG，et a1．Expression of the peripheral-type benzodiazepine receptor an d apoptosis induction in hepatic stellate cells［J］．Gastroenterology，2001，120(5)：1212-1226
［21］Iwamoto H， Sakai H， Tada S， et a1．Induction of apoptosis in rat hepatic stellate cells by disruption of integrin-mediated cell adhesion ［J］. Lab Clin Med，1999，134(1)：83-89
［22］夏金荣，刘乃丰.肝星形细胞凋亡及其调控［J］．东南大学学报， 2006 ，25(4)：301-304
［23］Lowell B B. PPAR gamma: an essential regulator of adipogenesis and moulator of fat cell functionJ . Cell ， 1999 ， 99（ 3） : 239 - 242
［24］Lang A，Schoonhoven R，Tuvia S，et al Nuclear factor kappa B inProl feration，activation，and apoptosis in rat hepatic stellate cells［J］． Hepatol，2000，33(1)：49-58
［25］Thirunavukkarasu C，Watkins S，Harvey SA，et a1．Supemxide induced apoptosis of activated rat hepatic stellate cells［J］. Hepatol，2004，41(4)：567-575
［26］潘勤，李定国 ，汪余勤 ，等．生长抑素对肝星形细胞的影响机制［J］．世界华人消化杂志，2002，10(11)：1250-1252
［27］Lu G，Shimizu I，Cui X，et a1．Interferon-alpha enhances biologicaldefense activities against oxidative stress in cultured rat hepa to cytes and hepatic stellate cells［J］． Med Invest，2002，49(3-4)：172-181
［28］Wang L，Wang J，Wang BE，et a1．Effects of herbal Compound 861on human hepatic stellate cell proliferation and activation ［J］. World Gastroenterol，2004，10(19)：2831-2835
［29］Yao L，Yao ZM，Weng H，et a1．Effect of rat SeI'HITI Containing biejiajian oral liquid on proliferation of rat hepatic stellate cells［J］．World Gastroenteml，2004，10(13)：1911-1913
［30］房红梅，姚冬梅，姚希贤，等．益肝康的药物血清对大鼠HSCs增殖及PDGF基因表达的影响［J］．第三军医大学学报， 2004，26：611-612
［31］Zhao YZ，Kim JY，Park EJ，et a1．Tetrandrine induces apoptosis inhepatic stellate cells［J］．Phytother Res，2004，18(4)：306-309
［32］ 刘成 ，姜春萌 ，刘平 ，等 ．扶正化瘀方对大鼠肝星形细胞旁分泌活化途径的抑制作用［J］ ．中华消化杂志 ，2001，21 (6)：367-369
篇6
【血吸虫病，日本；肝硬化；维生素E；氧化性应激；肝星状细胞；胶原I型
日本血吸虫病是我国危害最大的寄生虫病之一，而肝纤维化是日本血吸虫病致死和形成严重并发症最重要的原因.探究表明，在血吸虫病肝纤维化形成过程中，氧化应激发挥重要功能，参和血吸虫对宿主的损伤，自由基可能是血吸虫病主要的致病因素［1］.VitE作为机体防御氧化应激损伤的重要抗氧化剂，已应用于治疗肝纤维化，但有关VitE抗日本血吸虫病肝纤维化功能的探究国内外报道甚少，而VitE治疗血吸虫病肝纤维化的功能机制尚未见文献报道.我们观察VitE抗日本血吸虫病肝纤维化功能，探索其机制如下.
1材料和方法
1.1材料健康雄性昆明小鼠(18～22)g及日本血吸虫尾蚴阳性钉螺(湖北省血吸虫病防治探究所)，皮肤敷贴法感染日本血吸虫尾蚴（20±1）条/只，于感染后8,10,12wk末分别处死6只小鼠后取肝组织进行病理学检查，以肝纤维化达Ⅱ级或Ⅱ级以上作为VitE开始治疗的标志，即在12wk末开始给予VitE治疗.32只感染小鼠分为4组，每组8只摘要：1组，模型组；2组，VitE高剂量组(VitE每日150mg/kg)；3组，中剂量组(50mg/kg)；4组，低剂量组(5mg/kg).VitE胶丸由厦门鱼肝油厂生产，剪破胶丸，用蒸馏水配制所需浓度的混悬液，灌胃给药每日1次，连续8wk.另取同一批健康小鼠10只作为正常对照组.丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶（SOD）测定试剂盒(南京建成生物工程探究所)，免疫组化所用试剂(北京博奥申生物技术有限公司)，TRIzol(美国Invitrogen)，逆转录试剂盒(美国Promega)，Taq酶(Gibco公司).α1(I)型前胶原引物序列参照GenBank，上游序列摘要:5′GAGCGGAGAGTACTGGATCG3′，下游序列摘要:5′TGCTGTAGGTGAAGCGACTG3′，扩增片段为419bp；内参照βactin引物上游序列摘要:5′TGTCACCAACTGGGACGATA3′，下游序列摘要:5′AGGTCTTTACGGATGTCAACG3′，扩增片段为654bp，引物由北京奥科生物技术有限公司合成.
1.2方法断颈处死小鼠，取肝右叶相同部位肝组织2块，1块于-70℃保存，测定肝组织匀浆MDA含量、SOD活性及肝脏α1(I)型前胶原基因表达；1块固定于100mL/L中性甲醛，石蜡包埋，行HE和VG及αSMA免疫组化染色.
1.2.1肝组织病理学及纤维化评分常规行HE和VG染色，光镜下观察肝小叶病理变化及肝纤维化程度分级摘要：0级20=1，正常；Ⅰ级21=2，胶原纤维包绕虫卵肉芽肿四周；Ⅱ级22=4，汇管区有大量纤维，小叶间仅有少量纤维；Ⅲ级23=8，纤维组织大量延伸至肝小叶间.应用HPIAS1000高清楚度彩色病理图文分析系统，每组每次测量20～30个由单个成熟虫卵形成的肉芽肿两个直角相交直径，以(最大横径+最大纵径)/2为平均值，并计算各组均值；测定VG染色切片胶原纤维灰度面积(S)和视野总面积(T)，用S/T比值表示胶原含量.
1.2.2肝组织匀浆MDA含量和SOD活性测定硫代巴比妥酸比色法测定肝脏MDA含量，黄嘌呤氧化法测定SOD活性，按试剂盒说明书要求操作.
1.2.3肝脏αSMA免疫组化采用SP法，兔抗鼠αSMA抗体稀释度1∶100，用已知阳性片做阳性对照，PBS液代替一抗做阴性对照，细胞内出现棕黄色颗粒为阳性细胞.应用HPIAS1000高清楚度彩色病理图文分析系统对αSMA免疫组化切片进行平均吸光度值检测.
1.2.4肝脏α1(I)型前胶原基因表达应用TRIzol试剂盒，参照说明提取肝组织总RNA，逆转录合成cDNA，采用20μL反应体系.PCR反应条件摘要：95℃变性5min,94℃30s,94℃30s,52.7℃退火30s,72℃延伸30s，循环30次，最后72℃终止10min，以βactin为内参照.PCR产物分析摘要：PCR产物经2kg/L琼脂糖凝胶2μL电泳检测，结果照相并存入凝胶分析系统，以βactin光密度值标化α1(I)型前型胶原基因光密度值，得到α1(I)型前胶原基因相对含量.
统计学处理摘要：采用SPSS12.0统计软件对结果进行统计学分析，数据均采用x±s表示，采用方差分析进行比较，P%26lt;0.05为差异有统计学意义.多组均数间的多重比较采用LSD法.
2结果
2.1肝脏病理学变化对照组无明显组织学异常.1组摘要：HE和VG染色示小鼠血吸虫病肝纤维化模型建立成功.血吸虫感染后8wk，虫卵肉芽肿大小和数量达到高峰，大量炎性细胞浸润；随感染时间延长，肉芽肿逐渐缩小，肝细胞变性、坏死和炎性细胞浸润明显减轻，胶原纤维逐渐增多.至20wk，胶原纤维由最初的细线状变为条索状或网状分布在汇管区、虫卵肉芽肿四周并延伸至肝小叶间(图1A，B).VitE组肉芽肿大小和1组比较无显著差异(P%26gt;0.05)，对肝细胞变性、坏死和炎性细胞浸润程度影响不明显；2，3组虽有不同程度肝纤维化，但纤维带变细、窄、短，胶原纤维局限于汇管区和肉芽肿内及四周，肝小叶间很少有胶原沉积(图1C)，和1组比较，肝纤维化程度分级差异有显著性(P%26lt;0.05).4组和1组比较无明显差异(表1).
2.2肝脏MDA含量和SOD活性和对照组比较，1组SOD活性下降(P%26lt;0.05)，MDA含量增多(P%26lt;0.05)，有统计学意义.2,3组SOD活性和1组比较升高(P%26lt;0.05)，但和对照组比较仍相差甚远(P%26lt;0.05)；2,3组MDA含量和1组比较减少(P%26lt;0.05)，2组和对照组比较无显著性差异(P%26gt;0.05)；4组和1组比较无明显差异(表1).
A摘要:模型组×100;B摘要:模型组×200;C摘要:VitE组×100.
图1肝脏胶原纤维分布VG
2.3肝脏αSMA表达对照组肝脏血管壁、胆管壁平滑肌有少许αSMA阳性表达，汇管区及肝窦内基本无αSMA阳性表达；1组汇管区、虫卵肉芽肿内及四周胶原纤维沉积处可见大量索状αSMA阳性表达细胞，肝窦内可见多量αSMA阳性表达细胞(图2A,B)；2,3组αSMA阳性细胞数目减少(P%26lt;0.05)，局限在汇管区、纤细的纤维隔及肉芽肿内及四周，肝窦内表达减少(图2C)；4组和1组比较无明显差异(表1).
A摘要:模型组×100;B摘要:模型组×200;C摘要:VitE组×100.表1VitE对虫卵肉芽肿直径、MAD含量、SOD活性、αSMA平均吸光度值及肝纤维程度的影响
2.4肝脏α1(I)型前胶原基因表达和胶原含量1组(即感染20wk末)α1(I)型前胶原mRNA和胶原含量高于感染12wk时(P%26lt;0.05和P%26lt;0.05)和对照组(P%26lt;0.05和P%26lt;0.05).2,3组α1(I)型前胶原mRNA和胶原含量和1组比较差异有显著性(P%26lt;0.05和P%26lt;0.05)；2组α1(I)型前胶原mRNA和胶原含量和感染12wk时比较有显著性差异(P%26lt;0.05和P%26lt;0.05)，而3组无统计学意义(P%26gt;0.05)；4组和1组比较无明显差异(图3，表2).
M摘要:marker;1摘要:模型组;2摘要:感染12wk;3摘要:VitE高剂量组;4摘要:VitE中剂量组;5摘要:VitE低剂量组.
图3RTPCR分析各组α1(I)型前胶原mRNA表达表2VitE对胶原含量和α1(I)型前胶原基因表达的影响
3讨论
氧化应激是多种病因所致肝纤维化发生发展的重要环节之一［2］.VitE作为体内一个重要的抗氧化剂，有抗肝纤维化［3-5］、抗肿瘤、抗衰老等功能.宗道明等［5］探究表明，VitE可降低血吸虫病肝纤维化患者血清肝纤维化各项指标，对肝纤维化组织形态学的好转有积极功能，治疗血吸虫病肝纤维化疗效显著.但目前有关VitE抗血吸虫病肝纤维化机制少见文献报道.
Chojkier等［6］探究表明，VitE抑制HSCα1(I)型胶原基因表达.我们发现，VitE降低肝脏α1(I)型前胶原基因表达、胶原含量及肝纤维化程度分级；2组α1(I)型前胶原mRNA和胶原含量显著低于感染12wk时.可见VitE可延缓血吸虫病肝纤维化进程，减轻肝纤维化程度.本探究中，1组MDA含量增加，SOD活性下降，说明日本血吸虫病肝纤维化之肝脏发生氧化应激反应，产生脂质过氧化损伤，和文献［1］报道一致，而VitE能够不同程度地逆转这些改变，对此具有一定的治疗功能；并且VitE抑制HSC活化和增殖.VitE可能通过抑制肝脏脂质过氧化功能和由此产生的活性醛，如MDA和4羟化壬烯(4HNE)，从而抑制MDA和4HNE蛋白加合物形成，该加合物是实验性肝损伤和肝纤维化联系的枢纽［7］，进而抑制氧化应激诱导的HSCα1(I)型前型胶原基因表达和蛋白合成［8］.我们发现VitE尚不能完全逆转SOD活性，故对其剂量、疗程以及和其它药物的联合应用有待于进一步的探究.
总之，VitE可延缓血吸虫病肝纤维化进程，减轻肝纤维化程度，其机制和抗脂质过氧化功能、抑制HSC活化和增殖、降低α1(I)型前胶原基因表达和胶原合成有关，适当补充VitE进行抗纤维化治疗是一种可行的手段，有望成为一种廉价、不良反应少、疗效显著的临床用药.
【参考文献
［1］ElSokkaryGH,OmarHM,HassaneinAFMM,etal.MelatoninreducesoxidativedamageandincreasessurvivalofmiceinfectedwithSchistosomamansoni［J］.FreeRadicBiolMed,2002,32(4)摘要:319-332.
［2］ParolaM,RobinoG.Oxidativestressrelatedmoleculesandliverfibrosis［J］.JHeptol,2001,35(2)摘要:297-306.
［3］HouglumK,VenkataramaniA,LycheK,etal.ApilotstudyoftheeffectsofdalphatocopherolonhepaticstellatecellactivationinchronichepatitisC［J］.Gastroenterology,1997,113(4)摘要:1069-1073.
［4］孙军，丁虹，沈志祥.维生素E对小鼠慢性乙醇性肝损害的保护功能［J］.胃肠病学和肝病学杂志，2001,10(1)摘要:47-49.
［5］宗道明，冯韵琴，赵晓贡.维生素E治疗血吸虫病肝纤维化的临床探究［J］.中国寄生虫防治杂志,2005,18(3)摘要:212-213.
［6］ChojkierM,HouglumK,LeeKS,etal.LongandshorttermDαtocopherolsupplementationinhibitslivercollagenα1(Ⅰ)geneexpression［J］.AmJPhysiolGastrointestLiverPhysiol,1998,275(6)摘要:G1480G1485.
篇7
现代医学对肝纤维化发生机理已有更突破性的认识，传统的“肝纤维化不可逆转”的观点已被，可惜目前国际上还没有针对肝纤维化的有效西药应用于肝病临床。在我国，通过长期中医药临床实践尤其是近20多年的中西医结合研究，已证明中医药可有效阻止和逆转肝纤维化，现已有抗肝纤维化的国家中药新药陆续上市，如扶正化瘀胶囊、鳖甲软肝片等。
“双管齐下”的治疗方案
引起慢性肝损伤、肝纤维化的最常见的病因有乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒感染，酗酒，血吸虫感染等。
去除病因具有“釜底抽薪”的积极治疗意义，十分关键。如病毒性肝炎的抗病毒治疗、酗酒者戒酒、血吸虫感染的杀虫治疗。有效的病因治疗，也可减轻肝纤维化的发生和进一步的加重。如临床研究发现，用贺普丁抗病毒治疗后，也有部分患者纤维化程度减轻。但从临床实际看，有半年以上病程的慢性病毒性肝炎患者，肝活检发现大多数有不同程度的肝纤维化存在，甚至有些患者，发现肝病时即被诊断为早期肝硬化。这种情况下，纤维化的病理变化和病因(病毒)共同存在，因此抗肝纤维化治疗和抗病毒治疗“双管齐下”是一合理的治疗方案。
此外，某些情况下，即使去除了病因，如酒精性肝纤维化患者戒了酒，纤维化仍可继续发展，因此，抗肝纤维化治疗也是有积极意义的。
何时进行抗肝纤维化治疗
慢性肝损伤伴有肝纤维化时，应积极进行抗肝损伤和抗肝纤维化治疗。我们曾在“扶正化瘀胶囊抗慢性乙型肝炎肝纤维化的研究”中发现，炎症活动明显的患者，治疗后纤维化发生逆转的概率反而高，提示炎症活动也是抗肝纤维化的有利时机。
临床上，也常有患者问，肝硬化可以或需要抗肝纤维化治疗吗？通常回答是肯定的。现国际公认肝纤维化可以逆转，但纤维化发展形成肝硬化后，则逆转困难。早期肝硬化能否逆转是一个有待科学研究的问题，目前尚无定论。
我们曾在有关临床研究中发现，个别通过肝穿刺病理检查诊断早期肝硬化的患者，在治疗6个月后肝组织病理变化出现改善，但尚不能就此得出结论。总之，进行抗肝纤维化治疗，对肝硬化尤其是早期是有积极意义的。当然，对于失代偿性肝硬化，出现腹水、肝性脑病等并发症时，对症治疗更为重要，这是轻重缓急的辨证问题。
如何运用中医药抗肝纤维化
“肝纤维化”是现代医学的一个病理学名称，虽然传统中医学对其缺乏明确认识，但在长期医疗实践中有较丰富的经验积累和相关理论阐述，认为肝硬化与“血瘀”和“正虚”等有关。近年来的中西医结合研究，发现了一些活血化瘀中药如丹参、桃仁、川芎等，扶正补虚药物虫草、黄芪等及其有效成分有不同程度的抗肝纤维化作用，初步论证了“活血”和“扶正”理论在肝纤维化发生发展中的重要地位。目前上市的抗肝纤维化中成药寓有其基本的治疗原则。也就是说，中成药抗肝纤维化，是“病和证”结合，是针对矛盾的普遍性而言，打个比方说，就像不同企业生产的“均码”服装，不适合全部人群，但能满足大多数人的需要。大家可以注意到，药物说明书中，除注明“抗肝纤维化”外，还有相应的适应“证”。
篇8
近年来对肝炎后肝硬化发病机制的研究有了长足进展，尤其在对肝细胞外基质的研究方面，胶原纤维合成（ fibrogenesis）和纤维溶解（ fibrogenolysis）维持动态平衡，例如对与胶原合成酶相对抗的多种基质金属蛋白酶（ matrixmetalloproteinnase， mMP）以及组织分泌的抑制 mMP的酶金属蛋白酶组织抑制剂（ tIMP）等。这些研究不仅提出了多种检测肝纤维化的方法，还进一步在动物实验中利用胶原合成酶的拮抗物、抗体以及对胶原合成酶的 mRNA进行基因疗法等的探索。然而肝纤维化和体内其他部位的纤维化一样，都被认为是机体对损伤的一种修复作用，即使可以用基因疗法或其他方法可以彻底消除纤维化，但人体对抑制或消除纤维化后将产生何种反应及后果迄今尚无任何实验可以预言，正是在这种情况下近年对肝纤维化的发生机制进行着深入的探讨［1］。
一、肝纤维化时肝内的三个基本现象
肝炎后肝纤维化的病因一般认为是肝细胞坏死及凋亡所引起的，是组织坏死、凋亡时血流中血小板释放对纤维化有促进作用的因子———血小板衍生生长因子（ platetetderivedgrowthfactor， pDGF）所致。然而在其他组织损伤时血流中也出现 pDGF，却未见肝发生纤维化，说明 pDGF可能不是肝纤维化的主要原因。肝脏发生纤维化时有三个基本现象值得重视：（1）肝细胞外基质的增加；（2）星状细胞转变为肌纤维母细胞；（3）星状细胞胞浆内视黄醇减少。这三个现象都与星状细胞有关，因之星状细胞开始被认为是引起肝纤维化的主要细胞［2］。
二、星状细胞
肝星状细胞曾经有过多种不同名称：如储脂细胞、 ito细胞、肝窦周边细胞等。早在1876年德国学者 kupffer即报道在肝窦的内皮细胞近血流侧存在枯否细胞，而在肝窦内皮细胞的近肝细胞一侧即狄氏（ disse）腔有星状或纺锤状细胞，其功能不明，当时就命名之为星状细胞。以后学者们曾给予各种名称，但随着对纤维化机制的认识，1996年为了纪念 kupffer的贡献采用了 sternzellen的英译名即 stellatecells（星状细胞）［3］。静止时或非活化时的星状细胞在其核周围有多数脂滴（即视黄醇脂滴），对脂滴的功能曾有多种推测，近年 okuno等［4］在动物实验中证明，视黄醇是星状细胞未被激活的标志，当星状细胞被激活时视黄醇即行消失而引起转化生长因子β（ tGFβ）的分泌和细胞自身的活化。 tGFβ是使星状细胞转化为肌纤维母细胞并分泌胶原纤维的因子。然而星状细胞首先被激活的因素又是什么呢？分泌的无生物活性的 tGFβ又经什么因子被激活呢？目前尚不十分清楚。
三、转化生长因子β
tGFβ存在于体内多种细胞。在肝内除了前述星状细胞可以分泌 tGFβ外， tGFβ还存在于枯否细胞、肝窦内皮细胞以及肝纤维化附近的炎性细胞中［5］。近年来不少学者，如 friedman、 gressner、 border等先后证明， tGFβ是肝纤维化、肝硬化发生中的主要细胞因子。 tGFβ在合成及分泌时都无生物活性，必需活化并与受体结合后才能发生作用。 tGFβ被活化后可能有三种亚型，即 tGFβ1、 tGFβ2及 tGFβ3，三者性能几乎相同，其中 tGFβ1可能是生理状况下分泌的，而 tGFβ2及 tGFβ3是在紧急状况或病理状态下才发挥作用。激活后的三种 tGFβ都具有使星状细胞转化为肌纤维母细胞并分泌胶原纤维的作用，同时还有抑制星状细胞产生肝细胞生长因子的作用，使肝细胞生长受到抑制［6］。当星状细胞中视黄醇脂滴减少时，肝纤维化即开始出现，但视黄醇脂滴的减少及代谢过程仍不很明了。有人认为，在视黄醇减少前可能尚需要其他因子刺激，视黄醇只不过加速纤维化而已。
星状细胞自身分泌的 tGFβ一方面使星状细胞本身转化为肌纤维母细胞并分泌胶原纤维，另一方面 tGFβ1又和肝细胞膜上 tGFβ受体（ tGFβ r）结合促使肝细胞凋亡，鉴于肝细胞凋亡、坏死和肝纤维化的关系密切，因之 tGFβ对肝纤维化的作用机制成为肝纤维化研究重点之一。
篇9
1整合素的结构与功能（生物学特性）
整合素（integrin）是一类细胞膜表面糖蛋白受体家族分子，主要介导细胞与细胞之间及细胞与ECM之间的黏附。整合素分子是由α（120×103-185×103）和β（90×103-110×103）2个亚单位通过非共价键连接构成的异二聚体分子。目前研究发现受体家族包括至少18个α亚单位和9个β亚单位，共同组成超过25种不同的整合素[3]，两种亚基均由长的胞外段（氨基端）、跨膜段、短的胞内段（竣基端）三部分组成。整合素与配体结合发挥其功能，整合素的配体包括纤维连接蛋白、层粘连蛋白、胶原蛋白、玻璃粘连蛋白等。整合素α亚基的胞外段识别ECM的RGD序列（Arg- Gly Asp，精氨酸-甘氨酸天冬氨酸）介导细胞与ECM之间的黏附，而β亚基的胞内段与细胞骨架相连。
整合素的信号转导特点：作为细胞表面受体，整合素的信号转导通路具有双向信号传导的特点[4]，其内信号传递（outside-insignaling）即为ECM成分通过整合素跨膜向内传递信，调节真核细胞基因的表达。外向信号传递（inside-out signaling）即细胞内信息经整合素调节向外传出，调节细胞与胞外基质粘附的特异性和亲合力。它主要介导细胞与ECM的黏附，使细胞内骨架与细胞外ECM得以整合而形成整体，整合素参与构成的ECM-整合素细胞骨架跨膜复合体，既可诱导细胞骨架重排，加固细胞间的机械联系，同时参与细胞与细胞间的黏附和细胞内外的信息传递，广泛影响细胞的生长、生存、增殖、分化、侵袭和转移等生物学行为。
2整合素与肝纤维化
肝纤维化以肝脏ECM大量增生沉积为特征，是肝脏的一种损伤愈合反应，为一种病因导致慢性肝病所共有的。肝纤维化时，不仅包括明显的ECM增生沉积与重构改建，也有显著的肝脏细胞功能障碍、肝脏细胞病理生理变化影响肝ECM的数量及分布；而肝ECM变化又明显影响肝脏细胞功能两者相互作用， 肝星状细胞是ECM的主要来源，肝窦内皮细胞在肝纤维发生发展过程中具有重要作用，受损的肝细胞再生和胶原纤维的增生往往是并进的，而整合素在其中起重要作用[4]。
2.1整合素与HSC
肝纤维化时， 肝星状细胞是ECM的主要来源，而整合素在各种细胞都有改变，影响细胞功能及胞外基质代谢。研究发现，大鼠肝纤维化早期就有明显的LN窦周沉积，LN与其整合素受体结合后，活化FAK等信号通路，激活HSC，调节其增殖、粘附。HSC和ECM之间的相互作用主要经整合素介导[5]，基础研究表明，整合素与其相应配基结合后，多个粘着斑激酶（FAK）分子聚集在粘着斑（FAP）处，使FAK N-端区的酪氨酸磷酸化而被激活，通过Ras途径，产生级联反应，影响细胞效应。
2.2整合素与肝窦内皮细胞
肝窦内皮细胞在肝纤维发生发展过程中具有重要作用，它主要通过表达相关细胞因子、介导肝脏炎症反应、活化星状细胞、参与细胞外基质的生成与降解、参与肝窦毛细血管化、调节肝脏血管等参与肝纤维化。Anne等[6]报道肝窦毛细血管化与整合素家族表达上升相关。肝窦毛细血管化时LN在内皮下沉积形成基底膜，而LN通过其受体发挥生物学功能，整合素是其最重要的受体与LN结合的整合素大多含β亚基，已确立有4种。α为特异的LN- R正常肝窦内皮细胞上高水平表达。在硬变肝脏中，肝窦发生毛细血管化，除原有内皮细胞上整合素表达增强外，还出现LN受体。α6β1和α2β1的表达，刘小菁等[7]发现肝纤维化大鼠肝窦内皮细胞与正常相比，不但α6β1整合素表达明显增强，而且肝窦内皮细胞内FAK活性亦明显高于正常，推测肝脏整合素及FAK活性增加对肝窦内皮细胞失窗孔化及肝纤维化形成有重要意义。
2.3整合素与肝细胞
正常人肝细胞上有整合素α1β1，整合素α5β1，α9β1，在慢性活动性肝炎和肝硬化中，肝细胞中原有的整合素表达上调，且出现自他整合素受体的诱导表达。肝细胞中整合素表达上调及类型增加不仅是对纤维化时肝脏微环境变化的适应性应答，还可能通过其粘附作用参与肝纤维化发生发展。
综上所述，肝纤维化是肝脏对慢性损伤的动态、可逆性修复反应，肝损伤时发生的早期ECM变化是HSC及其纤维化活动的重要原因，整合素在其中起重要桥梁作用。防治肝损伤时ECM变化及其对HSC激活作用是肝纤维化及慢性肝病防治的重要措施，因此选择性干预病变ECM与受体（整合素）结合及其细胞内信号传递与生物学作用发挥具有极其重要的抗肝纤维化治疗学意义。
参考文献：
[1]GaoR，Brigstock DR.Connective tissue growth factor（CCN2）induces adhesion of rat activated hepatic stellate cells by binding of its C-terminal domain to integrin alpha（v）beta（3）and heparin sulfate proteoglycan.J Biol Chem 2004；279（10）：8848-8855.
[2]Gaca MD，Zhou X，Issa R，et al.Basement membrane-like matrix inhibits proliferation and collagen synthesis by activated rat hepatic stellate cells：evidence for matrix-dependent deactivation of stellate cells.Matrix Biol 2003；22（3）：229-239.
[3] Humphries MJ.Iutegrin struedure[J].Biochem Soc Trans. 2000. 28（4）：311-339.
[4]宣红萍，刘成海，整合素在肝纤维化中的作用[J]，世界最新医学信息文摘，2004.3（1）：964-967.
[5]马进，范志宏，整合素的研究进展[J]，上海第二医科大学学报，2004.24（1）：11-13.
篇10
【关键词】 血吸虫病； 肝纤维化； 吡喹酮
Clinical Research of Praziquantel in the Treatment of Hepatic Fibrosis of Schistosomiasis/LIU Lie-quan，ZHU Li，TIAN Yue-xiao，et al.//Medical Innovation of China，2016，13（27）：123-126
【Abstract】 Objective：To explore the effect of Praziquantel in the treatment of hepatic fibrosis of schistosomiasis.Method：From March 2015 to January 2016，120 patients with hepatic fibrosis of schistosomiasis in our hospital were randomly divided into the treatment group（60 cases）and the control group（60 cases）.Changes of liver B ultrasonic，serum hyaluronic acid（HA），procollagen type Ⅲ（PC-Ⅲ），laminin（LN），collagen type Ⅳ（CL-Ⅳ），matrix metalloproteinases（MMPS），tissue inhibitor of metalloproteinases（TIMPS） and TGF-β1 of two groups were observed.Result：After treatment，HA，CL-Ⅳ，PC-Ⅲ，LN，TIMP1 and TIMP2 and TGF-β1 of the treatment group significantly decreased，MMP2 and MMP9 rose，the differences were statistically significant（P
【Key words】 Schistosomiasis； Hepatic fibrosis； Praziquantel
First-author’s address：The Third People’s Hospital of Jingzhou City，Jingzhou 434000，China
doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2016.27.033
日本血吸虫病是我国危害最大的寄生虫病之一，而肝纤维化是日本血吸虫病致死和形成严重并发症最重要的原因，部分患者经病原学治疗，血吸虫免疫学检查已转阴，但还是不能阻止或逆转了肝纤维化病理过程，如何治愈慢性血吸虫病肝纤维化，目前还没有理想的抗肝纤维化药物。探寻防治血吸虫病肝纤维化的有效药物是医务工作者长期而艰巨的任务。吡喹酮可使虫卵肉芽肿明显变小或直接导致肉芽肿的消退[1]，所以可以认为是吡喹酮直接抑制了虫卵肉芽肿的作用。本院2015年3月-2016年
1月，应用吡奎酮对血吸虫病肝纤维化患者进行了临床研究，取得了较好的效果，现报告如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料 选取本院2015年3月-2016年
1月收治的日本血吸虫病肝纤维化患者120例。按照随机数字表法分为治疗组和对照组，各60例。治疗组男39例，女21例，年龄37～56岁，平均（42.58±6.26）岁，其中血吸虫病肝纤维化Ⅱ级
35例，Ⅲ级25例；对照组男40例，女20例，年龄36～55岁，平均（42.36±6.38）岁，其中血吸虫病肝纤维化Ⅱ级36例，Ⅲ级24例。血吸虫病诊断标准按《中华人民共和国行业标准WS261-206》。血吸虫免疫学检查虫卵抗体及循环抗原均阴性，肝实质受损B超分级达到Ⅱ、Ⅲ级的患者作为研究对象[2-3]。其他原因所致的肝纤维化，心、肝、肾功能明显异常，血吸虫免疫学检查阳性，合并肝炎病毒感染及其他可能影响治疗的疾病除外。研究方案报医院伦理委员会批准并征得患者同意后开始实施。两组患者一般资料比较差异无统计学意义（P>0.05），具有可比性。
1.2 方法 治疗组患者口服肌苷片、维生素E、螺内酯等护肝药治疗70 d，分别于疗程的4～5 d、34～35 d和64～65 d口服吡喹酮3次，每次按总量60 mg/kg，分2 d服完。对照组服用安慰剂、护肝治疗同治疗组。
1.3 观察指标 （1）B超检查采用双盲法观察：选取肝表面平整度、肝脏边缘形态、肝脏回声强度、肝静脉清晰度、脾脏面积（以经过脾门脾脏上下极的最大距离为长径，从脾门垂直于此长径至脾表面的距离为厚度，二者乘积的一半为标准）、门静脉主干内径、门静脉左支矢状部内径、胆囊壁厚度等参数，按表1标准对上述指标进行半定量评分[4]。（2）纤维化指标：各组均在治疗前1 d和疗程结束后1周内检查血清肝纤维化6项指标[血清透明质酸（HA）、Ⅲ型前胶原（PC-Ⅲ）、层黏连蛋白（LN）、Ⅳ型胶原（CL-Ⅳ）、间质金属蛋白酶（MMPS）、间质金属蛋白酶抑制因子（TIMPS）]。（3）转化生长因子β1（TGF-β1）采用酶联免疫吸附测定法检测。（4）常规监测血常规、肝肾功能、心电图等。
1.4 统计学处理 采用SPSS 13.0统计学软件进行数据分析，计量资料以（x±s）表示，比较采用
t检验，计数资料以率（%）表示，比较采用 字2检验，以P
2 结果
2.1 两组B超检查积分比较 治疗组治疗前B超检查积分（8.62±1.21）分，治疗后（7.12±1.1）分；
对照组治疗前（8.59±1.31）分，治疗后（8.38±1.42）分。两组患者治疗前B超检查积分比较差异无统计学意义（P>0.05），治疗后治疗组B超积分下降率明显低于对照组，比较差异有统计学意义（P
2.2 两组血清肝纤维化6项指标比较 治疗前两组比较，差异均无统计学意义（P>0.05）；治疗后治疗组HA、CL-Ⅳ较治疗前显著下降，比较差异均有统计学意义（P
2.3 两组TGF-β1比较 治疗前对照组和治疗组分别为（19.66±3.24）ng/mL和（20.12±3.41）ng/mL，
两组比较差异无统计学意义（P>0.05）；治疗后对照组和治疗组分别为（19.87±3.14）ng/mL和（13.49±2.84）ng/mL，治疗组明显低于对照组，两组比较差异有统计学意义（P
2.4 不良反应 所有患者均无明显肝肾功能变化，心电图无明显异常改变，仅有部分患者出现头晕、乏力、腹胀、恶心及心悸不适，均完成了治疗。
3 讨论
血吸虫病肝纤维化实质是一种由血吸虫虫卵在肝脏沉积引起的慢性肝损伤的伤口愈合反应[5]，其形成的主要原因为宿主机体长期处于对血吸虫虫卵抗原的免疫应答状态，肝星状细胞（HSC）异常激活转化为肌成纤维细胞并大量增殖，产生大量细胞外基质（ECM），超过了机体降解能力，致ECM在肝内过量沉积[6-7]，而肝星状细胞（HSC）的激活在血吸虫病肝纤维化的形成和发展过程中发挥着关键性作用，是主要的促进ECM生成细胞[8]。活化的HSC增生合成ECM，不仅表达多种基质金属蛋白酶（MMPS），还能合成金属蛋白酶抑制因子（TIMPS）和纤溶酶原激活物抑制剂-I等，其中MMPS和TIMPS对于小鼠和人类血吸虫病过程了中纤维组织的重塑发挥了重要作用[9]。肝脏ECM的代谢主要由MMPS及TIPMS调节，MMPS可降解多种ECM成分[10]。当MMPS/TIPMS下降，产生大量细胞外基质（ECM）超过了机体降解能力，致ECM在肝内过量沉积。肝巨噬细胞是另一种参与血吸虫病肝纤维化的细胞替代途径活化巨噬细胞（AAM）。其中AAM与纤维化关系密切.由Th2反应诱导产生。AAM分泌TGF-α、TGF-1和PDGF等成纤维因子，使HSC增值活化，进而合成ECM，TGF-β1是一种多功能细胞因子，其过度表达可激活Smad蛋白，进而促进胶原的合成，导致严重的肝纤维化[11-12]。吡喹酮为广谱抗吸虫和绦虫药物，是临床血吸虫病治疗的常用药物。近年来有研究提出吡喹酮有明显的治疗肝纤维化作用，吡喹酮治疗可改善肝纤维化、脾肿大、肝功能及肝门脉高压，并可抑制肝星状细胞中Col3α1、α-SMA、TGF-β、MMP9和TIMP1 mRNA的表达水平[13]，徐会娟等[14]探讨了日本血吸虫感染宿主不同阶段吡喹酮治疗对肝纤维化的影响，发现吡喹酮在血吸虫感染急性期的疗效优于慢性期和晚期，且有预防肝纤维化形成的作用。吡喹酮对日本血吸虫卵周围的炎细胞反应具有细胞免疫抑制作用，所以可以认为是吡喹酮直接抑制了虫卵肉芽肿，而抑制虫卵肉芽肿的机制很可能是对宿主免疫功能的调控[15]。吡喹酮不仅能降低血吸虫感染宿主血清中和组织表达的MMP-2及TGF-β1[16]，还能抑制肝星状细胞中TGF-β1及MMP9的表达[13]TGF-β1降低可抑制纤维化细胞因子TIMPl表达，促进抗纤维化因子MMP-2表达从而发挥治疗血吸虫肝纤维的作用[17]。在菲律宾莱特（Leyte）血吸虫病专科医院，对102例血吸虫感染患者采用吡喹酮总剂量60 mg/kg治疗后，并对其中的52例患者进行了为期17个月、每3个月一次随访，治疗后
6个月随访调查发现，患者门静脉壁增厚程度改善、回声带密度降低、脾肿大程度下降、血清总胆汁酸含量显著下降，但因长期血吸虫感染而导致患有严重肝纤维化的患者中未能检测到明显超声影像学改变[18-19]。Cai等[20]对经吡喹酮治疗1年后的日本血吸虫病患者肝脏超声图像和2项血清生化指标与治疗前进行比较，发现在吡喹酮治疗1年后，患者肝左叶和脾长度显著缩短，肝门静脉第二分支外、内径比例显著下降，透明质酸（HA）和Ⅲ型前胶原不正常比例显著降低，但门静脉内径未见显著改变；文献[21-22]认为吡喹酮可通过降低血吸虫病肝纤维化小鼠血清TNF-α含量、提高IFN-γ含量和降低肝脏TGF-β1及Ⅰ、Ⅲ型胶原含量，从而发挥抗肝纤维化作用。本文血吸虫肝纤维化患者经吡喹酮治疗后HA、CL-Ⅳ、PC-Ⅲ、LN、TIMP1、TIMP2及TGF-β1明显降低，而MMP2及MMP9上升，B超显示肝纤维化积分降低，临床观察无明显副作用发生，提示吡喹酮治疗血吸虫病肝纤维化安全有效。本研究病例有限，对于吡喹酮的剂量、疗程、给药间期、治疗时机的选择有待进一步研究探索。
参考文献
[1]李欣，夏超明.吡喹酮抗血吸虫作用机制研究进展[J].中国血吸虫病防治杂志，2008，20（1）：78-80.
[2]中华人民共和国卫生部疾病控制司.血吸虫病防治手册[M].上海：上海科学技术出版社，2000：97-113.
[3]施光峰，徐肇h.实用内科学（上册）[M].北京：人民卫生出版社，2013：718.
[4]陈煜，王宝恩，贾继东.慢性乙型肝炎肝纤维化程度的无创性评估[J].中华肝脏病杂志，2003，11（6）：354-357.
[5] Xu J，Liu X，Koyama Y，et al.The types of hepatic myofibroblasts contributing to liver fibrosis of different etiologies[J].Frontiers in Pharmacology，2014，5：167.
[6]景英霞，邵筱.血吸虫病肝纤维化的发病机理及治疗进展[J].热带病与寄生虫学，2010，8（1）：304-306.
[7] Herbert D R，Holscher C，Mohrs M，et al.Mternafive macrophage activation is essential for survival during schistosomiasis and downmodulates Thelper 1 responses and immunopathology[J].Immuairy，2004，20（5）：455.
[8] Takami Y，Uto H，Takeshita M，et al.Proanthocyanidin derived from the leaves of vaceinium virgatum suppresses platelet-derived growth factor-induced proliferation of the human hepatic stellate line LI90[J].Hepatology Research，2010，40（3）：337-345.
[9] Zou W L，Yang z，Zang Y J，et al.Inhibitory effects of prostaglandinEl on activation of hepatic stdhte cells in rabbits witlIschistosomiasis[J].Hepatobiliary & Pancreatic Diseases International Hbpd Int，2007，6（2）：176-181.
[10] Hironaka K，Sakaida L，Matsumura Y，et al.Ennhanced interstitial collagenase（matrix metallopoteinase-13） production of Kupffer cell by gadoliniun chloride prevents pig senim-induced rat liver fibrosis[J].Biochemical & Biophysical Research Communications，2000，267（1）：290-295.
[11] Derynck R，Zhang Y E.Smad-dependent and Smad-independent pathways in TGF-beta family signaling[J].Nature，2003，425，（6958）：577-584.
[12]张彬彬，蔡卫民，陶君，等.Smad蛋白在小鼠感染日本血吸虫形成肝纤维化过程中的表达[J].中国寄生虫学与寄生虫病杂志，2013，31（2）：89-94.
[13] Liang Y J，Luo J，Yuan Q，et al.New insight into the antifibroticeffects of praziquantel on mice in infection with Schistosomajaponicum[J].Plos One，2011，6（5）：e20247.
[14]徐会娟，朱阳泉，帅连云，等.血吸虫感染不同阶段吡喹酮治疗对宿主肝纤维化的影响[J].中国病原生物学杂志，2012，25（8）：599-601.
[15]黄一心.吡喹酮是否具有免疫调节作用[J].中国血吸虫病防治杂志，2007，19（1）：76-77.
[16] EI-Lakkany N M，EI-Maadawy W， Ain-Shoka A，et al.
Potenialantifibrotic effects of AT1 receptor agonist，losartan，and/or praziquantel on acute and chrotic expeximentl liver fibrosis induced by Schistosomamansoni[J].Clinical Experimental Pharmacology Physiology，2011，38（10）：695-704.
[17]蔡文，赵雷，李华蓉，等.山奈酚对感染日本血吸虫小鼠tsf-13-1/smads信号通路的影响[J].中国血吸虫病防治杂志，2014，26（4）：399-404.
[18] Ohmae H，Tanaka M，Hayashi M，et al.Improvement ofultrasonographic and serologic changes in Schistosoma japonicum-infected patients after treatment with praziquantel[J].American Journal of Tropical Medicine Hygiene，1992，46（1）：99-104.
[19] Tanaka M.Mini-review：the ultrasonographical and serologicalchanges and their improvement after praziquanteltreatment in Schistosoma japonicum infected patients in Leyte， Philippines[J].Memórias Do Instituto Oswaldo Cruz，1992，87（4）：277-280.
[20] Cai W M，Chen Z，Chen F，et al.Changes of ultrasonography and two serum biochemical indicesfor hepatic fibrosis in schistosomiasis japonica patients one year after praziquantel treatment[J].Chinese Medical Journal，1997，110（10）：62-65.
[21]熊莉娟，罗端德，曾令兰，等.吡喹酮对血吸虫肝纤维化小鼠肝脏TGF-β1和胶原表达的影响[J].临床内科杂志，2003，20（4）：216-217.