胆管细胞癌范文
时间：2023-04-09 00:31:10
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篇1
[中图分类号] R445 [文献标识码] A [文章编号] 1674-0742（2016）12（c）-0190-03
[Abstract] Objective To investigate the application effect of CT in the diagnosis of hepatocellular carcinoma and cholangiocarcinoma. Methods Convenient selection 63 cases of hepatocellular carcinoma and 20 cases of hepatocellular carcinoma in our hospital were studied. The diagnostic efficacy of the two methods of dynamic enhanced scan and spiral CT scan in all patients were compared. Results The pathological diagnosis of CT diagnosis of hepatocellular carcinoma with the rate of 92.1%， the pathological diagnosis of hepatobiliary cancer with the rate of 85.0%； B were 77.8% and 55.0%， pathological diagnosis coincidence rate of CT diagnosis of hepatocellular carcinoma and liver and gallbladder carcinoma were significantly higher than the rate of B ultrasound diagnosis. The number of patients with hepatocellular carcinoma complicated with cirrhosis， HBsAg positive， AFP were significantly higher than those in hepatocholangiocarcinoma patients， with stones and lymph node metastasis were significantly less than those of hepatocholangiocarcinoma patients. There is specific differences between CT diagnosis of hepatocellular carcinoma and hepatocholangiocarcinoma. Conclusion Spiral CT scan and delayed scan can effectively improve the diagnosis of hepatocellular carcinoma and hepatocholangiocarcinoma accuracy and examination results， identify hepatocellular carcinoma and hepatocholangiocarcinoma combination of the clinical data and complications of patients， it has a high clinical value.
[Key words] Hepatocellular Carcinoma； Hepatocholangiocarcinoma； CT Diagnosis； Differential Diagnosis
肝细胞癌和肝胆管细胞癌均属于原发性肝癌，其中肝细胞癌发病率占原发性肝癌的90%以上，肝胆管细胞癌则占5%左右[1]。原发性感染、起病隐匿，早期患者多缺乏典型症状，临床确诊困难，多数患者就诊时已处于中晚期。作为两种最为常见的原发性肝癌，肝细胞癌和肝胆管细胞癌具有非常相抵的生物学行为，胆管细胞癌确诊后即使门静脉受到侵犯时仍可通过手术将其肿瘤全部切除，患者预后良好，但肝细胞癌侵犯门静脉时已属于晚期，患者预后极差[2]。因此，提高原发性肝细胞癌诊断的准确率以及明确肝细胞癌和肝胆管细胞癌的鉴别诊断对于患者后续的治疗及预后具有非常重要的作用。超声和螺旋CT都是临床诊断肝内占位性病变的检查方式，其中超声由于具有无创伤、方便、价廉的特点，是首选的检查方法，但其诊断的准确率容易受到操作医师手法和主观经验以及肝脏本身质地变化等因素的影响，而螺旋CT相比较而言则具有对肿瘤组织高敏感性和高精度的特点[3-4]。为了进一步提高原发性肝癌以及肝细胞癌与肝胆管细胞癌的鉴别诊断准确率，对2013年9月―2016年7月该院收治的经手术证实的63例肝细胞癌患者及20例肝胆管细胞癌患者进行研究，对B超和CT诊断对其诊断效能进行比较，以明确CT的诊断价值，现报道如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料
方便选取该院收治的经手术证实的63例肝细胞癌患者及20例肝胆管细胞癌患者进行研究。其中肝细胞癌患者中男54例，女9例，年龄32～83岁，平均年龄（53.1±3.9）岁；肝胆管细胞癌患者中男16例，女4例，年龄33～84岁，平均年龄（62.7±4.5）岁。所有患者均表现出不同程度的腹胀、右上腹隐痛不适、黄疸和乏力等症状。研究对象纳入标准：①肝脏单发病灶，病灶内无出血及坏死；②2 cm≤病灶直径≤6 cm；③临床资料完整；④对增强对比剂无过敏者。
1.2 方法
分别对所有患者行B超检查和螺旋CT动态增强扫描。超声扫描方法：患者常规禁食12 h，采用DU8、GE-LOGIQS6及HD11XE彩色多普勒超声诊断仪常规对肝脏各个切面进行检查，探头频率为3.5 MHz，观察肿瘤形态、大小、位置、边界、内部和边缘回声、包膜；腹腔积液、门静脉有无癌栓、肝内胆管走形、淋巴结肿大；肿块内部及周边的血流动力学变化情况、彩色血流信号显示情况；门静脉及肝动脉的血流频谱变化情况。螺旋CT扫描方法：患者禁食4～6 h，扫描前15 min 10 mg 654-2肌肉注射，5 min饮水1 000 mL。采用GEOptimaCT660螺旋CT检查。扫描范围为膈顶至肝脏下缘或盆腔。平扫和增强扫描均选择层间隔与5 mm准直扫描，层厚0.625 mm，层间隔拆薄；增强扫描所用对比剂为370 mg/mL碘帕醇（进口药品注册证号H20091012）或350 mg/mL碘佛醇（tyco Healthcare，进口药品注册证号H20100546，80～100 mL），对比剂注入后28 s行动脉期扫描，注入后50 s行门脉期扫描，注入后120 s行延迟期扫描。以手术比病理学结果为标准比较B超与CT诊断的准确率，分析所有患者CT诊断的特性，同时比较肝细胞癌与肝胆管细胞癌患者的临床资料及并发症影像学表现情况。
1.3 统计方法
采用SPSS 23.0y计学软件对该研究中记录所获得的数据资料进行统计学处理，计量资料用（x±s）表示，采用t检验进行组间比较；计数资料用[n（%）]表示，行χ2检验，P
2 结果
2.1 CT诊断特性
63例肝细胞癌患者检出瘤体共计92个，肿瘤平均直径为0.8～13.2（7.1±2.5）cm。CT平扫显示低密度瘤灶共计73个，CT值为22～54 Hu；等密度瘤灶13个，高密度出血瘤灶2个，稍高瘤灶4个。CT增强扫描：92个瘤灶在肝动脉期均呈现明显强化，CT值为76～134 Hu，与平扫相比，强化幅度大于20 Hu。其中49个肿瘤显示不均一强化，可见有更低密度无强度坏死区域。
20例肝胆管细胞癌患者检出瘤体共计20个，肿瘤平均直径为1.7～13.5（6.5±3.4）cm。CT平扫：20个瘤灶均呈现稍低密度，CT值为16～34 Hu。其中16例边界不清楚，4例边界清楚。CT增强扫描：2例增强动脉期扫描边缘显示簇状强化，18例边缘呈厚薄不等形强化，CT值为40～69 Hu。
2.2 B超与CT诊断准确率比较
B超和CT分别诊断肝细胞癌与肝胆管细胞癌的准确率情况具体见表1、表2。
根据表1和表2可知，CT诊断肝细胞癌和肝胆管细胞癌的病理诊断符合率均明显高于B超，其漏诊和误诊率均明显低于B超（P
2.3 肝细胞癌与肝胆管细胞癌患者的临床资料及并发生影像学检查结果比较
肝细胞癌与肝胆管细胞癌患者的临床资料及并发生影像学检查结果比较见表3。
根据表3可知，肝细胞癌患者中合并肝硬化、HBsAg阳性、AFP升高等人数明显多于肝胆管细胞癌患者，合并结石及淋巴结转移者明显少于肝胆管细胞癌（P
3 讨论
原发性肝癌是我国高发的且危害极大的恶性肿瘤，包括肝细胞癌和胆管细胞癌两种较为常见的类型，且发病率均呈现不断升高的趋势。肝细胞癌预后极差，其血液供给几乎全部来自于肝动脉，在出现门静脉瘤栓时已属于晚期，治疗方式应以动脉栓塞或插管化疗为主；而肝胆管细胞癌则是起源于二级胆管及其分支上皮的腺癌，肿瘤血供缺乏，单纯的化学药物治疗效果不佳，药物很难在病灶处达到有效浓度，一旦确诊则应立即给予根治性手术切除。因此，肝细胞癌和肝胆管细胞癌的早期鉴别诊断对于明确病情，选择有效的治疗方式极为重要。临床上对肝细胞癌和肝胆管细胞癌的鉴别诊断主要依赖影像学检查手段，B超可显示出肿瘤的征象以及胆管扩张，多数肝细胞癌和肝胆管细胞癌都能经过B超检查而发现，但在实际临床工作中，尽管肝细胞癌与肝胆管细胞癌之间存在一定的病理差异，也很容易发生误诊，主要原因为：①部分肝胆管细胞癌无胆管受侵表现出现，其影像学检查结果与肝细胞癌相似；②肿瘤较小，受检查设备及检查者影响容易发生遗漏；③肝细胞癌发生了胆管远处转移，但因为肿瘤本体处于检查的遗漏区域或盲区，从而造成误诊。近年来越来越多的研究发现CT检查在鉴别肝细胞癌和肝胆管细胞癌方面具有很高的价值，尤其是因为二者病理的差异性，使其在CT动态增强扫描中会有不同的影像学表现，从而提高两者鉴别的诊断率[5]。该研究也进一步对B超和CT在肝细胞癌和肝胆管细胞癌鉴别诊断中的效能进行了分析，结果显示：CT诊断肝细胞癌的病理诊断符合率为92.1%，肝胆管细胞癌的病理诊断符合率为85.0%； B超分别为77.8%和55.0%，CT诊断肝细胞癌和肝胆管细胞癌的病理诊断符合率均明显高于B超。
肝细胞癌具有肝细胞癌肿瘤实质部分存在较多的呈巢状及小梁状排列的肿瘤细胞，肿瘤间质部分纤维少，以毛细血管为主，肿瘤供血血管丰富，其中肝动脉为主要的供血动脉[6]。CT平扫的表现主要根据肿瘤组织成分以及瘤灶内坏死和出血的差异而有所不同，主要呈现为低密度肿块或高密度影；螺旋CT扫描动脉期可表现出明显的增强，增强扫描具有“快进快出”的特征性表现[7]。肝胆管癌则起源于肝门部至末梢胆管上皮细胞，为腺癌，瘤灶中心肿瘤细胞数量少且分散，其多存在于肿瘤的边缘部位；间质部分主要为纤维和黏液成分，中心位置分布最为丰富，肿瘤供血血管少[8]。其CT表现主要为：①肝门部胆管癌CT平扫可见胆管明显扩张，肿瘤和周围的肝实质等密度。早期肿瘤表现出低密度，15 min后表现出高密度，该种动态变化是诊断的重要依据。CT增强扫描只可显示出胆管壁的肥厚。②末梢型胆管癌CT平扫可见边缘呈现不规则的均匀低密度占位性病变，病灶周围可见呈现长管状、圆形、边缘锐利的低密度，显示肝内胆管扩张，边缘不清。对于直径在2 cm以上肿瘤，CT增强扫描早期可见肿瘤边缘表现出轻度环状增强，晚期肿瘤中心表现出高密度，边缘则为低密度环；而直径2 cm以下的肿瘤则仅表现出轻度增强，有时会与肝细胞癌混淆[9-10]。
除了上述肝细胞癌与肝胆管细胞癌由于病理差异而表现出的不同CT影响表现外，肝细胞癌患者多伴随有肝硬化的合并症状，HBsAg阳性，AFP升高；而肝胆管细胞癌患者则多合并出现结石和淋巴结转移，二者的影响学资料也会表现出明显的差异，因此诊断时可参考其综合进行判断。
综上所述，螺旋CT增强扫描与延迟扫描能有效提高肝细胞癌和肝胆管细胞癌的诊断准确率，且可结合患者的临床资料及并发症影像学检查结果对二者进行鉴别，具有较高的临床应用价值。
[参考文献]
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篇2
【关键词】肝内周围性肿块型胆管细胞癌；动态增强；CT；MRI
doi：10.3969/j.issn.1004-7484（s）.2014.04.717文章编号：1004-7484（2014）-04-2371-02肝内周围型胆管细胞癌（Intrahepatic peripheral cholangiocarcinoma，IHPCC）是指发生于末梢肝内小胆管上皮性的腺癌，是肝内一种少见的恶性肿瘤，其发病率仅次于肝细胞型肝癌，居肝原发性恶性肿瘤第二位[1]。其主要临床特征表现为肿块型胆管细胞癌，术前易与肝内其它占位性病变相混淆而误诊率较高，及时诊断并给予治疗具有非常重要的现实意义。本研究通过对我院收治的26例肝内周围性肿块型胆管细胞癌患者行动态增强CT和MRI扫描，取得了满意的诊断效果，现报告如下：1资料与方法
1.1一般资料选取我院2011年1月到2013年6月期间26例肝内周围性肿块型胆管细胞癌患者，男15例，女11例，年龄38-79岁，平均年龄（56±4.3）岁，病程15天-3年。临床表现为上腹胀痛不适、畏寒发热和乏力纳差等。
1.2方法16例患者均行CT平扫和动态增强扫描，采用德国西门子l6层螺旋CT扫描机，管电压120kV，管电流130mAs，矩阵512×512，准直16×0.75mm，层厚2.5mm，间隔1.25mm。患者行平扫后，用高压注射器经手背静脉注射非离子型对比剂碘普胺（1.5ml/kg），注射流率2.5ml/s；开始注射后18-20s、60-65s、240s分别行动脉期、门静脉期和延迟期扫描。
10例患者均行MRI平扫和动态增强扫描，采用德国西门子1.5T超导磁共振MRI扫描仪，扫描层厚6-8mm，间隔lmm，矩阵192×256；使用快速小角度激发横断面和冠状面T1WI，TR130ms、TE4.1ms和T2WI，TR4.4ms、TE64ms。增强扫描时，使用钆喷替酸葡甲胺（Gd-DTPA，0.2mmol/kg）按2.0ml/s流率进行静脉注射，注射后18-20s、60-65s、240s分别行动脉期、门静脉期和延迟期扫描。
1.3影像分析[1]由两名熟悉腹部CT和MRI诊断的专业人员进行影像分析，通过协商取得一致意见并记录相应的结果。观察指标包括病灶的大小、位置、边缘情况、信号特征、伴随表现及动态增强表现等。2结果
影像学上26例患者均为单发病灶，肿块直径为1.7-12cm，平均4.7±1.5cm，病灶位于肝左叶14例（53.85%），右叶12例（46.15%），形态上多数呈圆形或卵圆形。行CT平扫时，肿块表现为稍低密度，与正常肝组织之间界限不清；行MRI平扫时，肿块的T1WI图像呈稍低信号、T2WI图像呈稍高信号，未见明显的病灶出血或坏死症状。动态增强时，13例行动态增强CT患者和8例行动态增强MRI患者动脉期病灶周边出现线样环状强化，中心无明显强化；门静脉期和延迟期病灶呈渐进性、填充式向心性强化，尤其在延迟期更为显著。3讨论
肝内周围型胆管细胞癌严重影响了患者的生活质量，从病理上分型，IHPCC可以分为胆管内型、胆管周围浸润型和肿块型。其中，肿块型是临床最常见的类型，影像学上极易与肝内其它占位性病变相混淆，术前误诊率较高，需要进行准确的鉴别诊断，从而指导临床采取合适的治疗手段。目前CT和MRI是诊断本病最常用和有效的诊断技术[2]。目前，肝内周围性肿块型胆管细胞癌的发病机制还不甚清楚，其致病原因可能与胆道系统长期的慢性炎性刺激或者理化刺激有关[3]。
肝内周围性肿块型胆管细胞癌的影像表现与病灶的病理密切相关，在CT或MRI影像上，病灶往往呈单发肿块，只有少数病灶可见周围的子灶，本研究中所有患者均呈单发肿块。动态增强CT和MRI扫描后，肝内周围性肿块型胆管细胞癌大部分病灶都具有一定的特征性，在动脉期病灶在CT或者MRI图像上呈边缘线状强化，通常不连续且中心不强化；这种强化特征和肝细胞癌及转移瘤的对比剂快速进入病变的强化特征不同，因而是他们之间的鉴别要点之一。在本研究中，CT和MRI在门静脉期和延迟期病灶呈渐进性、填充式向心性强化，这也是和其它肿瘤鉴别的主要依据。
综上所述，动态增强CT和MRI检查，能够反映肝内周围性肿块型胆管细胞癌的影像学特征，在该病的诊断中具有重要的临床价值，值得推广使用。参考文献
[1]吴轶娜，格日丽，王小燕.MRI与CT增强扫描诊断肝细胞癌的临床分析[J].医学影像学杂志，2012，22（9）：1477-1480.
篇3
【摘要】目的：探讨螺旋CT在诊断肝门部胆管细胞癌中的价值。 方法：回顾性分析21例肝门部胆管细胞癌的CT平扫和增强扫描的表现。重点观察肿瘤的形态特征、肝内胆管扩张程度、范围、肝门部血管受侵及实质脏器与周围转移的情况。结论：螺旋CT动脉期、门脉期、延迟期扫描不但有利于观察肝门部胆管癌的强化和形态特点，更有利于观察肿瘤沿周围血管浸润的情况和肝内有无子灶的。
【关键词】癌 肝门部胆管细胞 螺旋CT 延迟扫描重建
Intrahepatic bile duct carcinoma diagnostic CT
【Objective】 to study the spiral CT in diagnosis of liver bile duct carcinoma portal vein of value. Methods: a retrospective analysis of 21 cases of liver portal vein bile duct carcinoma CT scan and enhance the flat esau performance. Key observation tumor in the morphological characteristics, intrahepatic bile ducts dilation degree, limits, liver vascular invasion by the portal vein and parenchymal visceral with surrounding metastases. Conclusion: spiral CT arterial, portal period, delay period scanning is beneficial not only to observe liver lobectomy in strengthening and morphological characteristics, is more advantageous to observe the peripheral vascular tumor inolement situation and intrahepatic without son foci.
【key words】cancer Hepatic portal vein bile duct cells Spiral CT Delay scanning reconstruction
肝门部胆管细胞癌是肝脏的一种原发性肿瘤。起源于左右肝管汇合处胆管的上皮层，占胆管细胞癌的25％ ［1］。与肝癌不同，胆管细胞癌缺乏血液供应，对化疗、放疗不敏感，手术治疗是获得长期生存的最重要因素。手术前能对肝门部病变作出明确诊断并清楚其对肝门部胆管、血管的侵犯程度，区域性淋巴结转移及远处转移情况，对手术方案的制定意义重大［2］。目前螺旋CT检查是临床上诊断本病最常用有效的手段。笔者收集了经手术病理证实的，资料相对完整的21例肝门部胆管细胞癌，探讨螺旋CT检查在其诊断中的价值。资料与方法
1 临床资料：本组21例均经手术病理证实，男9例，女12例，年龄3673岁，其中大于50岁者18例，占85.7％。主要临床症状是中上腹胀痛不适，进行性加重，间歇性皮肤巩膜黄染，黄疸，体重下降，脂肪泻。AFP检查均为阴性。有5例胆道结石手术史，其中2例此次仍见胆管结石。
2 CT扫描方法：21例中均做了CT平扫和增强。使用GE Lightspeed ultra 八排螺旋CT机。空腹于检查前半小时口服清水800ML，一次屏气下先完成全肝CT平扫，再行静脉团注法增强扫描。开始注射造影剂后25S为动脉期，70S为门静脉期扫描。造影剂为优维显300MG/ML，100ML，层厚7MM，螺距1.25，速率3ML/S。扫描范围上界自膈顶起始，下界止于L3椎体下缘（胰头钩突）。部分病例在病变部位又行延迟后局部放大薄层扫描，层厚为3MM。
3 观察内容：螺旋CT检点观察肝门部胆管细胞癌的形态特征，肝内胆管扩张的范围、程度，血管的侵犯情况，肝门部及十二指肠周围区域及后腹膜淋巴结转移、肝脏及远处脏器转移情况。旨在探讨螺旋CT对肝门部胆管细胞癌的临床应用价值和局限性。
结果
1 病理结果：本组21例，组织学分型：腺癌18例，鳞癌3例。左肝内胆管近端6例，左侧肝内胆管扩张明显；右肝内胆管近端2例；肝总管13例，左右肝内胆管均扩张，粗细不均，迂曲不规则。表现为肿块样改变11例，管壁增厚、管腔狭窄8例（如图表一）。
（图表一）
分类组织学分类区域分类病灶改变腺癌腺癌左肝内胆管近端右肝内胆管近端肝总管肿块样改变管壁增厚管腔狭窄
病例18例18例6例2例13例11例8例
2 CT表现：参照病理学分型，笔者根据CT上所见将病灶形态表现分为3种类型。肿块型9例，表现为肝门部孤立的软组织肿块伴管壁增厚，远端胆管扩张；浸润狭窄型5例，肝总管即左右肝内胆管近端管壁不规则增厚，局限性管腔狭窄；腔内生长型4例，表现为管腔内的充盈缺损伴胆管扩张，有3例平扫和增强扫描未见明确肿块。肝门部结构不清、肝十二指肠胰头区淋巴结影6例，后腹膜主动脉旁见淋巴结4例，胆系结石7例，肝脏见转移灶5例，腹水征像4例，右侧肾上腺见结节灶及胰头部低密度影各一例。
CT平扫肿块表现为略低密度，与肝门部门静脉及相邻肝组织分界不清，肿瘤为不规则分叶11例，呈圆形椭圆形7例，9例在扩张的胆管内见到软组织块影。增强扫描8例肿瘤早期无明显强化，7例表现为边缘轻度强化，延迟后强化逐渐明显，呈持续性。7例肿瘤区内见线条状强化影，2例呈均匀一致性强化，1例仅表现为早期的轻中度强化，延迟后无明显强化（如图表二）。
（图表二）
讨论
影像学检查手段的应用，特别是螺旋CT的无间隔扫描使得形态学特点也易于显示，提高了术前诊断的准确性，尤其对肿瘤形态、部位、大小，肝内胆管有无扩张、扩张程度及局部淋巴结和远处转移等方面的显示，占有了极大的优势，同时决定手术可行性或其它治疗方法的运用，具有重要的决策意义。
肝门部胆管细胞癌的CT表现：由于肝总管和左右肝管直径小，根据肿瘤所在的部位不同及病程的长短均可出现不同程度、不同范围的胆管扩张。临床上出现进行性加重的黄疸。
CT对发现转移的意义： CT对于肝脏的侵犯和淋巴结转移显示很清楚，而对于术中所见的肝十二指肠韧带、临近胃肠道的侵犯或小病灶，尤其是腹膜和网膜、盆腔的转移，CT术前诊断则有一定的难度，病变的进展往往比CT表现更进一步。因此，我们应注意从CT检查结果预测实际病程的发展以提供给临床医生以便制定相应的治疗方案。胆管癌的肝浸润较常见，据报道约见于30%的病例。
我们对肿瘤的局部侵犯将淋巴结转移情况进行CT、手术及病理对照分析，发现不管是肿瘤的壁外侵犯或淋巴结转移，CT阳性检出的特异性均较高；另一方面，CT虽对肿瘤壁外侵犯及淋巴结检出的敏感性较低，无法确定肿瘤对肝内胆管的浸润范围，但CT对肿瘤实质性脏器的转移、肿瘤局部侵犯及淋巴结转移的检出具有高特异性，所以一旦CT发现肿瘤这些晚期征像，则阳性可信度极高。
此时常有利于制定合理的治疗方案。
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篇4
福建医科大学附属漳州市医院影像科，福建漳州363000
[摘要]目的探讨肝细胞癌（hepatocellularcarcinoma，HCC）并胆管癌栓的CT及MRI表现特点。方法回顾性分析2007年—2014年收治的48例经手术证实为HCC并胆管癌栓患者的CT及MRI表现特点。结果45例术前CT或/和MRI增强扫描发现胆管癌栓，位于肝左叶16例、右叶20例、尾状叶6例、累及左右肝6例，CT表现为胆管内稍低或等密度软组织影，增强扫描大部分呈“早进早退”的肝细胞癌强化特征，部分不典型表现者呈中等度强化或轻度强化；MRI表现为肝内或/和肝外胆管内结节状或团块状稍长T1稍长T2信号影，DWI上信号不均匀增高，同反相位及STIR上信号未见明显衰减，增强扫描为与原发灶“快进快出”相似的强化特点。梗阻远端胆管膨胀性扩张；胆管壁无增厚或受侵表现且Satoh等2简化临床分型后，Ⅰ型左叶、右叶、尾状叶、左右肝叶分别为6例、7例、2例、2例，Ⅱ型分别为8例、10例、3例、3例，Ⅲ型分别为1例、2例、0例、1例。结论肝细胞肝癌并胆管癌栓CT及MRI表现有一定的特征，可帮助术前明确诊断。
关键词 肝细胞癌；胆管癌栓；CT；MRI
[中图分类号]R735.7[文献标识码]A[文章编号]1674-0742（2014）12（b）－0038-03
[作者简介]黄睿刚（1971-），男，福建漳浦人，本科（学士），主治医师，主要从事体部医学影像诊断工作。
肝细胞癌（hepatocellularcarcinoma，HCC）并胆管癌栓发生率1.9%~9%。该研究回顾性分析该院2007年—2014年经手术确诊的48例HCC并胆管癌栓的CT或/和MRI图像，与病理对照，总结其影像学表现特点。现报道如下。
1资料与方法
1.1一般资料
复习该院经手术病理确诊为HCC并胆道癌栓的48例患者CT或/和MRI影像资料，其中男40例，女8例，年龄37~81岁，平均年龄55岁。入院主诉黄疸12例，腹痛24例，体检或意外发现肝脏占位12例。辅助检查：总胆红素升高36例；血清甲胎蛋白（AFP）升高>400μg/L38例，其中AFP>3000μg/L16例；所有患者HBsAg均阳性，γ-GT不同程度升高，伴慢性胆囊炎、肝硬化等。超声检查显示肝占位或/和伴胆管占位，进一步行CT或/和MRI检查，发现肝内及胆管占位病变；合并门静脉癌栓14例，并胆管结石9例。
1.2手术及预后
3例手术时肝内多发转移灶，行胆囊切除+胆总管切开取癌栓+肝脏肿块活检术；其余45例行肿瘤责任半肝切除+胆管切开取癌栓+胆囊切除+T管引流术，所有病人均行淋巴结切除术。术后部分病人存活至今，生存3~60个月，平均20个月。
1.3检查方法
19例术前行CT平扫及增强扫描，35例行MRI平扫及增强扫描。CT采用GELightSpeedVCT/discoveryCT750HD扫描仪，扫描参数：120kV，450mA，螺距0.984，转速0.8sec，层厚5mm，层距5mm；扫描全肝，平扫+三期增强扫描；高压注射器经肘静脉注入非离子型造影剂碘必乐（300mgI/mL）或碘海醇（350mgI/mL）80~100mL，速率3.0~4.0mL/s，于注射造影剂后25s、50~60s和90~120s分别行动脉期、门静脉期和延时期（平衡期）扫描。MRI采用PHILIPSAchieva1.5超导磁共振扫描仪，相控阵体线圈，行横断面T1WI、T2WI、DWI（b=800）、T2-STIR、同反相位、冠状面T2WI；肘静脉注射钆对比剂GdDTPA，剂量0.1mmol/kg，行肝脏动态增强扫描。扫描序列参数：T1WI：TR400～600ms、TE15～30ms，T2WI：TR3000～4000ms、TE80～150ms，T2-STIR：TR1500～2000ms、TE60～90ms，矩阵256×256，层厚4.0～6.0mm，层距0.4～0.6mm。
1.4影像分析及病理
回顾CT或/和MRI影像，分析：（1）HCC位置、形态、大小、CT密度、MRI信号、边缘、增强表现；（2）胆管癌栓位置、形态、大小、CT密度、MRI信号、边缘、增强表现，与病理对照；（3）受累胆管的扩张情况、癌栓与胆管壁的关系；（4）有否合并门静脉或/和肝静脉癌栓、腹膜后淋巴结转移、肝外转移等情况。
2结果
2.1HCC的CT和MRI表现
48例均在术前彩超、CT、MRI检查中发现HCC病灶，位于肝左叶16例、右叶20例、尾状叶6例、累及左右肝6例。肝脏肿瘤大小在35~150mm。30例肝脏轻或中度肝硬化。CT平扫肿块与周围正常肝实质比较大部分呈低密度影，小部分为等密度影或稍高密度影。增强扫描大部分呈典型“早进早退”表现，小部分不典型表现。肿块大部分边界清楚，部分边界不清，部分可见“假包膜”。
肝内HCC原发灶在MRI上表现为稍长T1稍长T2肿块影，较大的病灶内信号多不均匀，可见更长T1更长T2信号影，DWI上信号不均匀增高，部分病灶与周围肝组织分界清晰，部分分界不清，部分可见“假包膜”征，表现为T1WI上细线状低信号环，增强扫描延迟期可见“假包膜”强化。动态增强扫描病灶呈“快进快出”表现，于动态增强早期即可出现明显不均匀强化，相对肝实质呈高信号，随着时间延长，门脉期强化程度减低，相对周围肝实质呈低信号。
2.2胆管癌栓CT和MRI表现
Ueda1将胆管癌栓分为四型，Satoh等[2]简化了临床分型：I型，癌栓累及胆管一级分支，未到达左右肝管汇合部；Ⅱ型，癌栓延伸超过左右肝管汇合部；Ⅲ型，癌栓游离于原发肿瘤，在胆总管腔内生长。Peng等[3]认为Satoh分型简单实用，更益于指导外科治疗。该组48例中有45例胆管癌栓在CT或/和MRI图像上清楚显示，另3例患者影像检查未发现胆管癌栓，而于术中发现胆管内癌栓。见表1。
胆管癌栓表现为扩张的胆管内软组织肿块，呈圆形或类圆形结节、短柱状或树杈状铸型，远段胆管扩张，癌栓远端呈杯口状或不规则形。癌栓长度、直径不等，该组病例最大者直径约27mm。45例均见受累胆管扩大，该组病例最大胆管直径约28mm。
与正常肝实质比较，胆管癌栓CT平扫呈低或稍低密度影、少数为等密度影；增强扫描不均匀强化，部分均匀强化，大部分表现为“早进早退”的特点。动脉期大部分显著强化、呈高密度影，部分为等密度影或低密度影；门静脉期大部分呈低密度影，部分为高密度影或等密度影；延时期均为低或稍低密度影。受累胆管壁边缘清楚或较清楚，管壁无明显增厚，增强扫描中等度强化，呈完整或不完整的稍高密度线样影。胆管壁内缘与胆管腔内癌栓界限可清楚或不清，部分胆管壁内缘与胆管腔内癌栓间见特征性的裂隙状边缘清楚的低密度影（图1）。胆管癌栓均未见向管壁外浸润征象。癌栓远段胆管腔不同程度膨胀性扩张，呈树枝状或圆形低密度影，近端癌栓边缘呈杯口状（图2）。
图1：尾状叶HCC并胆管癌栓，动脉期肿块边缘及肝总管癌栓（长箭）明显强化，呈高密度影，可见光滑线状肝总管管壁及癌栓与胆管壁间不规则胆汁间隙；门静脉早显，考虑为肝动脉门静脉瘘，并可见强化的门静脉癌栓（短箭）。
胆管癌栓MRI表现为沿胆管管腔生长的软组织影，呈稍长T1稍长T2信号影，DWI上信号不均匀增高，同反相位及STIR上信号未见明显衰减。远端扩张的胆管呈“软藤样”，胆管腔内T1WI上明显低信号，T2WI上为明显高信号，类似“脑脊液”信号。T2WI上能够清晰显示胆管内癌栓，表现为扩张的胆管内明显高信号突然中断，被软组织信号取代。动态增强扫描，胆管内癌栓表现为与原发灶“快进快出”相似的强化特点。癌栓周围胆管壁在动态增强早期显示较清晰，表现为细线状、光滑清晰的高信号影，若癌栓与胆管壁之间存在不强化的胆汁间隙，则更有利于区分上述两者。（图3）
该组中4例Ⅲ型癌栓游离生长于胆总管末端，其余病例癌栓远端均见与肝脏肿瘤相连（图4），并常延伸至肝外胆管。
T2WI上能够清晰显示胆管内癌栓，表现为扩张的胆管内明显高信号突然中断，被软组织信号取代。笔者观察这部分癌栓均为与HCC相连或靠近的病变，病理为HCC细胞癌巢，合并少量红细胞、白细胞、坏死组织。
2.3影像表现与手术结果对照
48例HCC病理低分化30例，中等度分化18例。均行胆总管切开取癌栓术，术中癌栓分布与CT或/和MRI影像表现基本一致，其中1例术前显示Ⅰ型癌栓及1例Ⅱ型癌栓病例术中于胆总管内探及癌栓。3例术前影像未见明显胆管癌栓患者，术中发现2例Ⅰ型癌栓及1例Ⅲ型。手术标本胆管癌栓呈柱状或条索状，浅黑色或棕褐色，或血块中见癌组织；胆管癌栓结构疏松、水肿，见多量坏死组织，部分可见充血、急慢性炎细胞浸润，或伴有结石。
2.4其他情况
14例门静脉肝段或肝叶分支内见癌栓，其余病例均未见合并门静脉癌栓，部分病例可见近肝门部门静脉受扩大的相邻胆管压迫变形。所有病例肝静脉均未见癌栓。9例为肝脏肿瘤直接浸润肝管致癌栓形成并合并胆总管结石。所有病例均行淋巴结切除，部分病例按肝门部胆管癌手术方式行淋巴结清扫，均未发现淋巴结转移。48例术前检查均未发现肝外转移病灶。
3讨论
由以上结果可知，45例术前CT或/和MRI增强扫描发现胆管癌栓，位于肝左叶16例、右叶20例、尾状叶6例、累及左右肝6例，且Satoh等2简化临床分型后，Ⅰ型左叶、右叶、尾状叶、左右肝叶分别为6例、7例、2例、2例，Ⅱ型分别为8例、10例、3例、3例，Ⅲ型分别为1例、2例、0例、1例。该组48例中45例胆管癌栓在CT或/和MRI图像上清楚显示，另3例患者影像检查未发现胆管癌栓，而于术中发现胆管内癌栓。以上结果均与曾弘，文剑明，张锐，等[8]在关于肝细胞癌胆管癌栓的病理学特点及其对手术治疗预后的影响中所研究的结果相一致，具有临床意义，而探究其之间的关系，具体如下。
3.1胆管癌栓与肿瘤的关系
胆管癌栓形成的机制可能是：（1）肿瘤直接侵入薄壁的肝内胆管；（2）肿瘤先侵入门静脉及淋巴管，再侵入胆管；（3）门静脉癌栓侵入邻近的胆管；（4）肿瘤经神经鞘间隙侵入胆管；（5）肿瘤先侵入胆管壁上的滋养血管，再穿破胆管上皮，进入胆管腔内。该组中4例Ⅲ型癌栓游离生长于胆总管末端，其余病例癌栓远端均见与肝脏肿瘤相连，并常延伸至肝外胆管，该研究认为这可能是胆管癌栓的一个特征性表现，这也与癌栓形成的机制相符。该类HCC各肝段均有发生，右肝病例稍多，但仍需较大数量的病例统计验证。邱智泉[4]等认为肝内肿瘤较小可能是该种类型HCC的一个特征，该组病例无明显分布特征，可能与病例数较少有关。癌栓累及的肝段胆管与肿瘤的发生部位肝段一致，但肿瘤与肝门部的距离远近未显示与癌栓的发生明显相关。桂文波[5]等认为胆管癌栓不是原发性肝癌的晚期表现，积极的外科治疗可获得较满意的疗效。胡晓燕[6]等认为对于原发性肝癌患者、即使出现黄疸、辅助检查胆管内癌栓形成，若相关检查未发现远处转移征象，只要能耐受手术，积极行根治性手术治疗仍是有意义的治疗措施并取得较好的效果。
3.2胆管癌栓的CT和MRI诊断
胆管癌栓的CT和MRI表现有一定的特征性。
直接征象：（1）肝脏肿块，增强扫描呈典型或不典型强化。（2）胆管癌栓表现为沿胆管管腔生长的软组织影[7]。CT平扫胆管内稍低或等密度影呈结节状、柱状、条索状或不规则铸型；增强扫描部分病灶呈动脉期高密度、门脉期及平衡期低密度的典型“早进早退”表现。MRI呈稍长T1稍长T2信号影，DWI上信号不均匀增高，同反相位及STIR上信号未见明显衰减。T2WI上能够清晰显示胆管内癌栓，表现为扩张的胆管内明显高信号突然中断，被软组织信号取代。笔者观察这部分癌栓均为与HCC相连或靠近的病变，病理为HCC细胞癌巢，合并少量红细胞、白细胞、坏死组织，这类病例提示癌栓与HCC的组织同源性；另外部分病灶轻度强化或不强化，该部分胆管癌栓常远离HCC，病理以血栓或坏死组织为主，内含肿瘤细胞。（3）胆管壁无明显增厚或仅有轻微增厚，表现为完整或不完整的线样影，可见轻度强化，部分癌栓与胆管壁界限不清，部分癌栓与胆管内缘紧贴而界限可辨认或较清楚。
间接征象：（1）癌栓远端胆管扩张呈“软藤状”，梗阻端呈杯口状或不规则形，扩张的胆管壁光滑；CT上癌栓与胆管壁间可见边缘清楚的不规则形低密度裂隙，暨胆汁间隙，该间隙具有一定的特征性，是胆管癌栓与胆管癌的鉴别点之一[9]。MRI上胆管腔内T1WI上为明显低信号，T2WI上为明显高信号，类似“脑脊液”信号，若癌栓与胆管壁之间存在不强化的胆汁间隙，则更有利于区分上述两者。（2）胆管癌栓较大时可压迫临近门静脉，表现为门静脉变形、局限性变窄，合并门静脉癌栓时可见门静脉充盈缺损。
其他情况：（1）SatohⅡ型及Ⅲ型患者常见梗阻性黄疸，血总胆红素升高；（2）肝癌患者常有乙型肝炎、肝硬化、AFP升高等相关因素。
3.3胆管癌栓的鉴别诊断
主要是HCC并胆管癌栓与胆管细胞癌的鉴别，HCC常有肝硬化、肝实质内肿块、胆管内边界清楚的软组织影；而典型的胆管癌动脉期及门脉期呈低密度，延迟扫描可轻度或明显强化[10-11]。此外胆管癌栓与胆管壁结合疏松或可见低密度胆汁间隙的特征，与胆管癌肿瘤与胆管壁结合紧致、管周浸润生长亦是鉴别特点之一。另外胆管癌栓还需与胆管结石、胆道出血、肝门部淋巴结肿大等鉴别，一般不难。
肝细胞肝癌并胆管癌栓的这些CT和MRI特征性表现，术前检查可帮助明确诊断，并区分黄疸型肝癌的黄疸原因，对提高术前综合判断、指导制定及实行针对性手术计划具有重要的意义。
参考文献
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篇5
【摘要】 目的：探讨TGF-β1与胆囊癌细胞增殖和细胞周期的关系，分析其在胆囊癌发病中的机理，评价其对胆囊癌预后的价值。方法：用免疫组化对原发性胆囊癌及胆囊腺瘤、慢性胆囊炎行TGF-β1、PCNA、Cyclin E检测，对胆囊癌患者进行随访。结果：胆囊癌TGF-β1阳性表达率57.14%，显著高于胆囊腺瘤、胆囊炎（P均
【关键词】 胆囊癌；转化生长因子β1；细胞周期；细胞增殖
[Abstract] Objective: To study the relationship between TGF-β1 and cell proliferation and cell cycle in gallbladder carcinoma，to disclose the mechanism of TGF-β1 in the gallbladder carcinogenesis，and to evaluate the value of it’s prognosis. Methods: Formalin fixed and paraffin embedded sections from gallbladder carcinomas were immunostained with TGF-β1，PCNA and Cyclin E antibodies. Gallbladder adenoma and chronic cholecystitis were collected as non-malignant controls. Results: Positive immunostaining rate of TGF-β1 was 57.14%，which was significantly higher in gallbladder carcinomas than that in gallbladder adenomas and chronic cholecystitis （P
[Key words] Gallbladder carcinoma；Tansforming growth factor-β1；Cell cycle；Cell proliferation
转化生长因子（tansforming growth factor-β1，TGF-β1）是一类具有多种生物学功能的多肽类生长因子，调节细胞的生长、分化和免疫功能，可抑制多种上皮细胞的生长[1]。尽管多种肿瘤中可见TGF-β1过表达[1-2]，但胆囊癌中却鲜见报道。本实验检测TGF-β1、增殖细胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen，PCNA）、cyclin E在原发性胆囊癌及胆囊腺瘤、慢性胆囊炎中的表达情况，探讨TGF-β1与细胞增殖和细胞周期的关系，同时分析了TGF-β1在胆囊癌预后中的价值。
1 材料和方法
1.1 材料 收集常州市第三人民医院和南通大学附属医院原发性胆囊癌35例，胆囊腺瘤10例，慢性胆囊炎10例。所有标本经10％甲醛固定，石蜡包埋，均获常规病理证实。35例原发性胆囊癌中，男14例，女21例，平均年龄57.94±4.61岁，其中腺癌32例，腺鳞癌2例，鳞癌1例。35例原发性胆囊癌患者进行了随访。
1.2 方法 第一抗体为鼠抗PCNA单克隆抗体（PC10）（Zymed），兔抗cyclin E多克隆抗体，兔抗TGF-β1多克隆抗体（Santa Cruz）。所有组织块均重新制备4 μm连续切片备用，具体步骤按说明书进行。每批染色过程均设已知阳性对照及PBS代替一抗的阴性对照。结果判断：PCNA、cyclin E以细胞核内出现棕黄色至深棕色颗粒为阳性，TGF-β1以细胞浆或细胞膜出现棕黄色到深棕色颗粒为阳性。选择PCNA标记良好的区域在400倍高倍显微镜下任意选5个视野，计数超过200个肿瘤细胞，再换算为百分比，即PCNA LI；cyclin E判断标准：阴性（-）：阳性细胞率5%；TGF-β1判断标准，阴性(-)：阳性细胞率10%。
1.3 统计学方法 采用Stata7.0统计软件分析数据，计量资料用x±s表示，两组间均数采用t检验，多组间均数比较采用方差分析；计数资料采用χ2检验。患者生存率分析采用Kaplan—Meier法，logrank分析检验组间生存率差异，等级相关用Spearman法，采用t检验。
2 结
果
2.1 TGF-β1在胆囊良恶性疾病中的表达 TGF-β1染色阳性主要定位于细胞浆或细胞膜，呈棕黄色细颗粒状（见图1，2）。胆囊癌TGF-β1阳性率为57.14%，显著高于胆囊腺瘤和胆囊炎（20%、10%，P均
2.2 TGF-β1与胆囊癌临床病理特征的关系 TGF-β1阳性表达率在Nevin分期中差异有统计学意义（P
2.3 TGF-β1与胆囊癌预后的关系 35例随访资料，2例失随访，3例仍存活，30例在随访期内死亡，平均随访时间19.23±17.63个月。TGF-β1阳性组生存时间11.65±12.55个月，中位生存期9个月；阴性组生存时间29.33±18.69月，中位生存期27个月，TGF-β1表达阳性组预后要比阴性组差（P
2.4 TGF-β1与胆囊癌细胞增殖和细胞周期的关系 见表1。胆囊癌PCNA LI为43.84%±18.53%，cyclin E阳性率为48.57%。TGF-β1阳性表达率与PCNA LI和cyclin E的阳性率均呈正相关（rs=0.5232，P
3 讨
论
体内外研究发现TGF-β1对上皮细胞生长有潜在抑制作用，但许多肿瘤中TGF-β1高表达与癌细胞显著增加的生长率之间的矛盾却提示这些肿瘤细胞已失去了TGF-β1的生长抑制调控，甚至有作者推测TGF-β1还促进肿瘤细胞的生长[1-2]。Tsushima等[3]在结直肠癌肝转移患者中发现，78％的术后TGF-β1血清水平高于临界值。本组研究发现，胆囊癌中TGF-β1的阳性表达率明显高于胆囊良性疾病(P
PCNA是真核细胞DNA合成所必须的一种核蛋白，与细胞增殖周期有关，反映了细胞增殖过程中DNA复制和细胞增殖活性，对判断肿瘤生物学行为有很高价值。本实验发现PCNA LI与胆囊癌分化程度、Nevin分期、淋巴结和远处转移与否均相关，可反映胆囊癌的生物学特征。恶性肿瘤的本质在于细胞周期调节失控，细胞呈现无限制、自由的增殖和分裂， Cyclin E表达在G1/S转换时达高峰，很可能在细胞分裂周期中起中心控制作用，加速细胞进入S期。本实验结果表明cyclin E与胆囊癌分化程度、淋巴结及远处转移与否呈正相关。cyclin E阳性表达率与PCNA LI呈正相关(rs=0.4364，P
TGF-β1和肿瘤的预后密切相关。Tsushima等[3]用Cox多因素风险回归分析表明术后TGF-β1血清水平是结直肠癌肝转移的重要预测因子。术后两周检测TGF-β1血清水平可以预测结直肠癌肝转移。在乳腺癌中高水平血清TGF-β1的患者预后很差[9]。我们研究发现TGF-β1表达阳性者预后要比表达阴性者差好，这表明TGF-β1在胆囊癌中是良好的预后因子。
TGF-β1是反映细胞增殖状态的良好指标。胆囊癌患者中肿瘤细胞逃逸TGF-β1的生长抑制作用，以及TGF-β1的促肿瘤形成作用，可能是胆囊癌变过程中的重要机制，TGF-β1是判断胆囊癌预后的良好指标，对TGF-β1表达阳性者，揭示其预后差，应加强综合治疗和密切随访。
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篇6
【关键词】 细胞周期蛋白D1
【摘要】 目的 研究人食管癌中原癌基因CCND1蛋白产物cyclin D1的表达和临床意义。方法 用免疫组织化学方法（SP）检测了45例食管鳞癌，15例癌旁组织和15例正常粘膜组织中cyclin D1蛋白的表达。结果 45例食管鳞癌cyclin D1蛋白表达阳性率57.8%，明显高于癌旁组织（20%）和食管粘膜组织（13.3%），侵犯粘膜与侵及外膜组相比，有淋巴结转移组与无淋巴结转移组相比差异均有显著性（P<0.05）。结论 cyclin D1蛋白表达可以预测食管癌的预后，有可能作为食管癌临床分期的参考指标。
关键词 细胞周期蛋白D1 基因表达 食管肿瘤
【Abstract】 Objective To study the expression and significance of cyclin D1protein in human squamous carˉcinoma of esophagus.Methods Using sterptavidin peroxidase（SP）method，we detected the expression of cyclin D1protein in 45 squamous carcinoma of esophagus.15Adjacent non-tumorous esophageal specimens and15normal squamous tissues.Results The positive rate of cyclin D1protein in squamous carcinoma of esophagus was57.8%（26/45），much greater than20%（3/15）in adjacent non-tumorous esophageal specimens and13.3%（2/15）in normal squamous mucosa.There was a significant difference of cyclin D1protein between the invasioning mucosa groups and the invasioning advenitia groups，also it correlated with lymph node metastases（P<0.05）.Conclusion The expression of cyclin D1protein would be play an important role in the development of human esophageal cancers，so could suggest the prognostic for cancer of esophagus.
Key words cyclin D1protein expression carcinoma of esophagus
细胞周期素D（cyclin D）是近几年才被确定的原癌基因，它通过促进G 1 S期的转变而促进细胞周期，起到调节组织细胞增殖的作用，已经发现cyclin D1基因在多种肿瘤细胞中存在扩增和过度表达，我们应用S-P免疫组织化学方法研究细胞周期蛋白D1在45例人食管鳞状细胞癌组织中的表达，并与癌旁食管组织及正常食管粘膜组织对比，探讨细胞周期蛋白D1在肿瘤发生中的作用。
1 材料与方法
1.1 材料 45例食管癌组织和15例癌旁食管组织（距离肿瘤超过5cm）均取自第二军医大学附属医院胸心外科经手术切除的食管标本，15例正常食管组织取自湖北省宜昌市第一人民医院胃镜室纤维胃镜活检标本。45例食管癌中，肿瘤浸润粘膜层7例，浸润肌层27例，侵犯全层11例，有淋巴结转移26例。男女之比4.6:1，年龄41～80岁，平均57.6岁。
1.2 方法 标本常规石蜡包埋，4μm切片。采用免疫组织化学SP法检测。鼠抗人细胞周期蛋白D1单克隆抗体（DCS/6）及加强型SP试剂盒购自福州迈新生物技术公司，染色步骤按说明书进行，以PBS缓冲液代替一抗作为阴性对照。
1.3 免疫组化结果判定 cyclin D1染色阳性为细胞核和（或）细胞质呈不均匀棕黄色细颗粒状或棕褐色团块状。按染色强弱分为-（阴性）、±（弱阳性）、+（阳性）、++（强阳性）。
1.4 统计学方法 采用χ 2 检验。
2 结果
2.1 cyclin D1蛋白的表达 45例食管鳞癌cyclin D1蛋白阳性表达为26例，阳性表达率为57.8%;15例癌旁组织cyˉclin D1蛋白阳性表达为3例，阳性表达率为20%;15例正常粘膜cyclin D1蛋白阳性表达为2例，阳性表达率为13.3%。食管鳞癌cyclin D1蛋白的表达明显高于癌旁组织和正常食管组织，差异有显著性（P<0.05），染色强度食管鳞癌细胞高于正常组织和癌旁组织。正常粘膜与食管鳞癌相比，χ 2 =8.93，P<0.01;癌旁组织与食管鳞癌相比，χ 2=6.43，P<0.05。
2.2 cyclin D1蛋白的表达和肿瘤侵犯深度的关系 45例食管鳞癌按肿瘤侵犯的深度分为粘膜层7例，肌层27例，外膜层（全层）11例，cyclin D1蛋白的阳性表达率分别为28.6%、55.6%、81.2%，cyclin D1蛋白在肿瘤侵犯粘膜层中的阳性表达率明显低于侵犯全层组，差异有显著性（P<0.05）。肿瘤侵犯外膜与粘膜层相比，χ 2 =5.1，P<0.05。
2.3 cyclin D1蛋白和淋巴结转移状况的关系 45例食管鳞癌按淋巴结转移状况分为有淋巴结转移26例，无淋巴结转移19例，cyclin D1蛋白的阳性表达率分别为69.2%，31.6%，cyclin D1蛋白在淋巴结转移组中的阳性表达率高于无淋巴结转移组，差异有显著性（P<0.05）。有淋巴结转移与无淋巴转移相比，χ 2 =6.25，P<0.05。
3 讨论
细胞周期蛋白D1是由位于人类第11号染色体短臂11q13上的CCND1基因编码，由292个氨基酸组成，分子量为34kD，其中56-114位氨基酸序列为其结构的主要部分，称为周期素盒子（cyclin box）。Sicinski ［1］ 的研究认为cyclin D1是大多数组织增殖所必需的。其作用机理目前认为与肿瘤抑制性蛋白Rb蛋白有关。cyclin D1与细胞周期依赖性激酶结合后可以使Rb蛋白磷酸化，导致转录因子E 2 F解离发挥效应，从而促进细胞周期。
目前的研究发现在食管癌发生、演变过程中存在着一系列的遗传改变。Jiang ［2］ 在20%的人食管鳞癌中发现了cyclin D1和hst-1基因的联合扩增，这个发现第一次提供了cyclin D1基因在人类食管癌中扩增的依据。随后Tahara ［3］ 、kiriu ［4］ 等也证实了cyclin D1基因在人食管癌中的扩增，同时伴随着cyclin D1蛋白的过度表达。这些都揭示了cyclin D1基因的扩增和过度表达是人类恶性食管癌的一个好的生物学标记，cyclin D1蛋白的检测可以作为食管癌的辅助诊断。关于cyclin D1与食管癌预后的关系Tahara的研究认为cyclin D1基因的扩增与食管癌的发生、发展，肿瘤的侵犯深度和远处的转移密切相关;国内祝淑钗［5］ 等的研究也指出cyclin D1蛋白的表达和不表达相比，生存率差异有显著性。这些结果提示cyclin D1蛋白的表达可以预测食管癌的预后，有可能作为食管癌临床分期的参考指标。
我们通过单克隆抗体免疫组织化学方法研究结果表明，在食管鳞癌组织中cyclin D1蛋白的阳性表达为57.8%，明显高于正常食管粘膜组织（13.3%），表明人类食管癌的发生与细胞周期蛋白D1的存在密切相关，亦说明细胞周期蛋白D1可以作为食管癌诊断的一个分子标记物。食管癌旁组织中cyclin D1蛋白阳性表达率为20%，明显低于食 管癌组织（57.8%），但与正常食管粘膜组织（13.3%）相比差异无显著性，说明距离肿瘤5cm以上的食管癌旁组织可以看作正常食管粘膜组织，这与肿瘤手术切除原则是相吻合的。本研究中正常食管粘膜组织和癌旁组织中有3例出现细胞周期蛋白D1的弱阳性，2例阳性，可能原因:（1）在正常组织的上皮增殖区存在着极低水平的细胞周期蛋白D1;（2）炎性因子的刺激可能使细胞周期蛋白D1的表达略有增高;（3）抗原的修复也可能造成一定的假阳性。
临床资料分析发现，食管癌侵犯全层组中cyclin D1蛋白的阳性表达率为81.2%，明显高于肿瘤侵犯粘膜组（28.6%）;有淋巴结转移组cyclin D1蛋白阳性表达率为69.2%，明显高于无淋巴结转移组（31.2%），这些结果均提示晚期食管癌细胞周期蛋白D1的表达明显高于早期食管癌，因此，细胞周期蛋白D1是食管癌预后的重要标志物。
近几年的研究充分显示细胞周期与细胞癌变不是相互独立的事件。在人类食管癌中发现，细胞周期各个阶段的调节因子都有不同程度的异常，cyclin D1基因（CCND1）就是这样一个已明确的原癌基因。由于细胞癌变是基因连续突变结果，因此细胞周期相关癌基因（如cyclin D1、P16、Rb）与细胞增殖相关基因（如ras、c-myc、c-fos）在食管癌中是否存在协同作用，其确切机制如何有待进一步的研究。
参考文献
1 Sicinsdki P，Joana A，Liu D，et al.cell，1995，82:621-630.
2 Jiang W，Scott M，Tomita N，et al.Amplification and Expression of the human cyclinD Gene in esophageal Cancer.Cancer Res，1992，52:2980-2983.
篇7
[关键词] 超声；胆管癌；诊断；鉴别诊断
[中图分类号] R735.8 [文献标识码] A [文章编号] 1674-0742（2013）07（c）-0173-02
在对胆管癌患者进行疾病诊断时，应及早的对患者采取较为准确、敏感的方式，从而有助于患者的疾病治疗以及预后情况改善，而超声对于疾病诊断有一定的积极临床意义。该研究就此对该院2010年8月―2011年8月期间收治的60例胆管癌患者应用，超声在胆管癌诊断及鉴别诊断中的临床价值进行分析。
1 资料与方法
1.1 一般资料
随机选取胆管癌患者60例，其中男性胆管癌患者有35例，占58.33%，女性胆管癌患者有25例，占41.67%，患者的年龄段在43～80岁之间，平均年龄为（56.7±2.5）岁。其中临床症状出现上腹部不适以及疼痛情况的胆管癌患者有24例，占40.00%，出现乏力以及消瘦情况的患者有14例，占23.33%，出现恶心以及呕吐症状的胆管癌患者有11例，占18.33%，出现巩膜以及皮肤黄染的胆管癌患者有30例，占50.00%，上腹部触及包块的患者有10例，占16.67%，腹水患者有8例，占13.33%，肝硬化患者有5例，占8.33%，肝功能异常的患者有9例，占15.00%。
1.2 方法
对患者进行彩色多普勒超声检查，对患者的影像学特征进行分析，并且将其与患者的病理结果进行比较，从而对超声在胆管癌诊断及鉴别诊断中的临床价值进行分析。其中采取Siemens Sequoia 512彩色多普勒超声诊断仪，其中探头的频率为2.5～5.0MHz之间。而胆管癌患者在进行超声检查前应禁食8～12 h，并且对患者进行常规的胆以及肝系统的扫查，并且对患者的病灶边缘形态以及回升特点等进行重点观察，同时对于患者胆道的管壁、走形、官腔以及周围组织回声等进行观察，并且对于患者胆管梗阻平面以及梗阻原因进行一定的确定。在对胆管癌患者进行超声检查后对患者进行经内镜逆行胰胆管造影（即ERCP）检查，从而明确患者的胆道梗阻部位以及梗阻原因。将患者的影像学检查与患者的病理结果进行比较分析。
1.3 统计方法
将所得到的数据资料输入SPSS 18.0软件包进行统计学分析，计量资料采用均数±标准差（x±s）表示。
2 结果
由本次试验结果可知，超声诊断结果中有13例患者为胆管细胞癌，6例患者为肝细胞癌，3例患者为导尿管结石合并胆管炎，1例患者为肝脓肿。而其中胆管细胞癌患者中有8例患者的影像表现为形状不规则，团块状不均匀的回声，并且边界不清晰，患者病灶内没有出现较为明确的胆管结构，邻近病灶的肝实质有不同程度的肝扩张。而被诊断为肝细胞癌的患者的影像表现为病灶内部以及病灶周围未出现较为明确的胆管结构，不均匀回声肿块等。而3例被诊断为胆管结石合并胆管炎的患者的影像表现为出现强回声结石伴有一定的后方声影，且患者的邻近胆管粗细不均匀，并没有出现较为明确的胆管壁增厚情况。而被误诊为肝脓肿的胆管癌患者则肿块的征象不明显，且可以看见大片状的液性暗区。
经超声检查可知为肝外胆管癌的患者有31例，胆管炎患者3例，胰腺癌患者1例，胆固醇结石患者1例，出现漏诊患者1例。将其与患者的病理结果进行比较，可知肝外胆管癌的超声诊断准确率为83.78%。而肝外胆管癌的超声直接影像征象可知，胆管浸润性患者的影像表现为锥状或鼠尾状狭窄，或胆管移行性狭窄，胆管壁出现不规则的增厚情况，伴有一定的近侧胆管扩张情况。而胆管腔内型的影像表现为胆管中重度扩张，且腔内出现结节状或者息肉状的异常回声情况，部分患者会出现点状血流信号。而肿块型患者的影像表现为壶腹部、肝门部出现强弱不等的团块状回声情况，且边界较清除，邻近患者胆管出现胆管扩张情况，并且出现管壁不同程度的增厚。
由表1中数据可知，肝内胆管癌疾病的超声诊断准确率为56.52%，而肝外胆管癌的超声诊断准确率为83.78%，可知超声在胆管癌诊断及鉴别诊断有一定的积极临床意义。
表1 胆管癌患者的超声诊断准确率情况（%）
3 讨论
胆管癌作为起源于人体胆管上皮细胞的恶性肿瘤疾病之一，疾病可发生于患者胆道系统的任一部位，其中发病部位包括肝门部胆管、肝内胆管、壶腹部以及肝总管等[1]。肝管癌患者中肝门部胆管癌、肝内胆管癌由于缺乏较为典型的体征以及临床症状，易被伴发的胆石症、胆管炎以及肝脓肿的症状的临床症状所掩盖，从而出现临床漏诊或误诊情况[2]。因此，在对胆管癌患者进行疾病诊断时有一定的难度，应采取较为准确且敏感的检查方式及早的对胆管癌患者进行疾病诊断，从而及时的采取相应的疾病治疗以及预后处理。随着现今医疗器械的飞速发展，在对胆管癌患者进行疾病诊断时，采取多普勒超声仪对于患者的疾病诊断有一定的积极临床意义[3]。
肝内胆管癌患者的超声影像图没有较为明确的特征，其影像表现多表现为肝内胆管局限性狭窄或浸润性生长肿块，但是超声诊断常需要接触伴随征象，如肝内胆管结石以及周围胆管扩张等[4]。而其中常被误诊为肝细胞癌的患者的超声影像表现为其肿块周围以及其内部均没有出现较为明确的胆管扩张情况，并且由于胆管细胞癌为一种乏血供肿瘤，不能够看到较为明显的血流信号[5]。被误诊为肝脓肿以及胆管炎的原因一定程度上与其超声检查对于伴有一定胆管炎、肝内胆管结石以及肝脓肿的胆管癌诊断特异性较低有关。
肝外但管作为发生于患者肝外胆管上皮细胞的恶性肿瘤疾病，可发生于患者的肝外胆管任一部位[6]。而肝外胆管癌的生长方式为结节状浸润管壁或弥漫性浸润管壁以及结节状或息肉状肿块突入官腔两种，其超声影像特征为无明显的软组织肿块，扩张胆管远端或可以脏胆管远端软组织肿块突然出现移行性狭窄或截断[7]。
由本次试验所得相关的数据资料可以得知，肝内胆管癌疾病的超声诊断准确率为56.52%，而肝外胆管癌的超声诊断准确率为83.78%，可知超声在胆管癌诊断及鉴别诊断有一定的积极临床意义。
综上所述，在对胆管癌患者进行疾病诊断时，采取超声检查，对于患者的疾病诊断以及鉴别诊断有一定的积极意义，值得推广使用。
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篇8
【关键词】 蛋白激酶
关键词: 蛋白激酶C;同工酶;胃癌;多药耐药
摘 要:目的 观察传统型蛋白激酶C（cPKCs）在胃癌耐药细胞系SGC7901/VCR1.0、耐药亚系SGC7901/VCR0.3，SGC7901/VCR0.7及药敏细胞系SGC7901表达及活性的变化，以及对细胞内药物浓度的影响. 方法 用免疫荧光化学及蛋白印迹方法观察传统型蛋白激酶C在胃癌耐药细胞系及药敏细胞系的表达;竞争蛋白结合法测定PKC的活性;应用流式细胞仪观察细胞内药物浓度的变化. 结果 PKCα，PKCβⅠ ，PKCβ Ⅱ 及PKCγ在胃癌耐药细胞系及药敏细胞系均有表达，PKCα在耐药细胞表达呈强阳性，在药敏细胞表达呈阳性;PKCβⅠ 及PKCβⅡ 在耐药细胞及药敏细胞表达均为阳性;PKCγ在耐药细胞及药敏细胞表达均为强阳性.免疫蛋白印迹实验证实，随耐药指数的增加，PKCα表达呈逐渐增高的趋势，薄层扫描蛋白印迹带的吸光度（A）分别为9584.17，9421.06，8534.64，8088.79，而PKCβⅠ ，PKCβⅡ 及PKCγ在耐药细胞系、耐药亚系及其药敏细胞系表达无明显变化.PKC活性检测结果提示，随耐药指数的增加，PKC活性呈逐渐增高的趋势，以细胞质及细胞核的PKC活性增高为主. 结论 传统型蛋白激酶C在维持胃癌耐药细胞系SGC7901/VCR的多药耐药中起重要作用且具有同工酶特异性.
Keywords:protein kinase C;isoenzyme;gastric cancer;mul-tidrug resistance
Abstract:AIM To observe the expression and activity of classic protein kinase C in gastric cancer cell SGC7901and its drug-resistant sublines SGC7901/VCR slected by vincristine of different concentration（0.3，0.7and1.0μg・mL-1 ）.To explore the effect of classic protein kinase C on drug concen-tration within gastric cancer cells.METHODS The expres-sion of classic protein kinase C in gastric cancer cells was de-termined by immuno-fluorescent method and Western blot.The PKC activity was determined by competed protein bind-ing method.The drug concentration within cells was deter-mined by FACS.RESULTS Both SGC7901and SGC7901/VCR cells exhibited positive staining of PKCα，PKCβⅠ ，PKCβⅡ and PKCγ.The staining of PKCαin SGC7901/VCR was much stronger than that in SGC7901.There were no dif-ferences in the expression of PKCβⅠ ，PKCβⅡ and PKCγbe-tween SGC7901and SGC7901/VCR.By using Western blot，continuous increasing expression of PKCαin SGC7901/VCR was demonstrated along with the increasing resistant index，as well as no differences between SGC7901and its drug-resis-tant sublines.Results of activity assay showed continuous in-creasing activity of PKC in gastric cancer cells along with in-creasing resistant index.CONCLUSION Classic protein ki-nase C plays an important role in multidrug resistance of gas-tric cancer cells with isoenzyme specificity.
0 引言
蛋白激酶C是一类广泛分布的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶家族，目前发现至少有12种同工酶亚型.按其生化性质及结构可分为四大类.由钙、磷酯（PL）、二酰基甘油（DAG）或佛波酯激活的PKC为传统型（cPKCs）;不依赖钙而由PL，DAG或佛波酯活化的PKC类为新型（nPKCs）;仅由PL类物激活的为非典型型（aPKCs）;PKCμ不需钙、DAG激活，而由磷酯酰肌醇-4，5二磷酸激活，但在结构上与前三种部分类似，故称为第四种PKC［1，2］ .PKC具有异质性，不同的PKC亚类位于不同类型的细胞以及同一细胞内的不同部位，因而表现出不同的功能.近期研究提示，cPKCs可能参与了多药耐药的形成且具有同工酶特异性.本研究拟观察cPKCs在胃癌耐药细胞系、耐药亚系和药敏细胞系的表达及活性的变化以及对细胞内药物浓度的影响，以进一步揭示信号转导分子PKC在多药耐药发生中的作用.
1 材料和方法
1.1 材料 SGC7901细胞系由军事医学科学院惠赠，耐药细胞系SGC7901/VCR1.0及其耐药亚系SGC7901/VCR0.3，SGC7901/VCR0.7由本室诱导.兔抗人PKCα，PKCβⅠ ，PKCβⅡ 及PKCγ多克隆抗体购自Santa Cruz Biotechnology公司;羊抗兔IgG-FITC购自中山公司;辣根过氧化物酶标记的羊抗兔IgG购自武汉博士德公司;PKC活性分析试剂盒购自Gibcobrl公司;［γ-32 P］ATP购自北京亚辉公司.细胞生长于含100mL・L-1 已灭活小牛血清的RP-MI1640培养液中，37℃，50mL・L-1 CO2 的条件下培养，耐药细胞培养液中分别加入0.3，0.7和1mg・L-1 长春新碱以维持耐药表型，用于实验前耐药细胞在不加长春新碱的培养液中培养2wk.
1.2 方法
1.2.1 免疫荧光化学 取对数生长期的耐药细胞SGC7901/VCR及药敏细胞SGC7901，用2.5g・L-1 的胰酶消化传代于装有载玻片的培养皿中，培养24h后，用PBS冲洗3次，冷丙酮固定［3，4］ .PBS洗3次，加50mL・L-1 H2 O2 室温15min，水洗3次;3mL・L-1 Triton X-100室温15min，吸去不洗;1∶10的血清封闭30min，吸去不洗;分别加兔抗人多克隆抗体PKCα（2mg・L-1 ），PKCβⅠ （2mg・L-1 ），PKCβⅡ （4mg・L-1 ）及PKCγ（4mg・L-1 ），37℃孵育1h，PBS洗3次;加羊抗兔IgG-FITC（1∶60），37℃孵育1h，PBS洗3次，用500mL・L-1 的缓冲甘油封片.实验同时设PBS或无关抗体为替代一抗的阴性对照.
1.2.2 Western blot 收获对数生长期的细胞并用冷PBS清洗2次，以裂解缓冲液［50mmol・L-1 Tris-Cl（pH7.5），150mmol・L-1 NaCl，0.2mmol・L-1 EDTA，1mmol・L-1 PMSF和10g・L-1 NP-40］裂解细胞制备细胞总蛋白，Bradford法测定蛋白浓度;取150μg总蛋白上样进行SDS-PAGE电泳，通过电转移法将蛋白从聚丙烯酰胺凝胶转移至硝酸纤维素滤膜上，丽春红S染色并标记蛋白分子质量标准;去离子水漂去丽春红后以50g・L-1 脱脂奶粉于室温1h封闭滤膜，常规分别结合兔抗人PKCα，PKCβⅠ ，PKCβⅡ 及PKCγ多克隆抗体、辣根过氧化物 酶标记的羊抗兔IgG，最后以DAB显色目的条带.
1.2.3 PKC活性检测 参照文献［5］并进行改良取对数生长期的耐药细胞系、耐药亚系及药敏细胞系，用2.5g・L-1 的胰酶消化传代于10cm的培养皿中，至对数生长期，冷PBS冲洗2次后，用细胞刮收取细胞，加Buffer A1mL（Tris/EGTA/EDTA，β-巯基乙醇、蛋白酶抑制剂），用超声粉碎机粉碎，每次20s，共3次，然后1000g离心15min，沉淀部分超声粉碎后12000g离心10min，所得上清为细胞核部分;上清100000g4℃离心1h，所得上清为细胞质PKC部分;所得沉淀部分加含10mL・L-1 Triton X-100的BufferA抽提细胞膜PKC30min，每10min震荡1次，然后进行超声粉碎.蛋白定量用Bradford法，活性检测步骤按试剂盒要求进行，所测活性为cPKCs的总活性，PKC比活性用nmol・g-1 ・min-1 表示.
1.2.4 流式细胞仪检测细胞内药物浓度 参照文献［6，7］进行.取对数生长期细胞用2.5g・L-1 胰酶消化成单细胞悬液，接种6孔板并继续培养48h.加阿霉素至终浓度为5mg・L-1 ，继续培养1h，冷PBS洗3次，用细胞刮收获细胞离心，再以冷PBS重新悬浮，保存于4℃，上流式细胞仪检测.激发波长为488nm，接收波长为575nm.
统计学处理:用方差分析.
2 结果
2.1 免疫荧光化学 PKCα在耐药细胞系SGC7901/VCR表达呈强阳性，在药敏细胞系SGC-7901表达呈阳性;PKCβⅠ 及PKCβⅡ 在耐药细胞及药敏细胞表达均呈阳性;PKCγ在耐药细胞及药敏细胞表达均呈强阳性.
2.2 Western blotting PKCα在耐药细胞系及耐药亚系较其药敏细胞系表达明显增加，随耐药指数的增加PKCα表达呈逐渐增加的趋势，薄层扫描蛋白印迹带的吸光度（A）分别为9584.17，9421.06，8534.64和8088.79（Fig1）.PKCβⅠ ，PKCβⅡ 及PKCγ在耐药细胞及药敏细胞无明显差异（Fig1）.
2.3 PKC活性检测结果 胃癌耐药细胞SGC7901/VCR及其耐药亚系与其药敏细胞比PKC活性明显增高，其中以细胞质及细胞核PKC活性增高比较明显（Tab1）.
2.4 细胞内药物浓度 胃癌耐药细胞SGC7901/VCR及其耐药亚系与其药敏细胞系比细胞内药物浓度明显减低，且具有统计学意义（P
图1 略
表1 胃癌耐药细胞系及其药敏细胞PKC活性 略
3 讨论
传统型蛋白激酶C，即钙、磷酯依赖的蛋白激酶C，包括4种同工酶亚型PKCα，PKCβⅠ ，PKCβⅡ 及PKCγ，Mr 80000～90000.cPKCs亚型分布有明显的组织特异性，如胰腺表达PKCα，PKCβⅡ ，而无PKCβⅠ 及PKCγ的表达;肾上腺皮质和髓质细胞表达PKCα，而间质细胞表达PKCβⅠ 和PKCγ;人白血病细胞表达PKCα，PKCβ和PKCγ.不同PKC亚型选择性器官分布提示它们在功能上的差异，多种亚型可在同一组织甚至同一细胞中存在，并介导不同的信号传递功能.我们观察了cPKCs在胃癌耐药细胞系及其药敏细胞系的表达［8］ ，PKCα在耐药细胞表达呈强阳性，在药敏细胞表达呈阳性;PKCβⅠ ，PKCβⅡ 在耐药细胞及药敏细胞表达均呈阳性;PKCγ在耐药细胞及药敏细胞表达均呈强阳性.蛋白印迹实验证实，随耐药指数的增加，PKCα的表达呈逐渐增高的趋势，而PKCβⅠ ，PKCβⅡ 及PKCγ在耐药细胞及药敏细 胞的表达无明显差异.提示PKCα在维持胃癌细胞的耐药表型中可能起重要作用.
有研究表明，在体外建立的耐药细胞株，较相应的敏感株蛋白激酶C活性明显增高［9］ .近年来也有研究表明耐药细胞系PKC的表达及活性较其药敏细胞系减低，但有趣的是这些细胞的基础PKC表达及活性水平与细胞耐药后PKC活性增高的细胞比高出许多倍，提示如果PKC活性的基础水平比较高，MDR表达不一定伴有PKC活性的增高［10］ .上述事实说明，肿瘤细胞获得MDR后，PKC活性的改变可能取决于亲代细胞本身的特性以及所诱导的药物类型.我们检测了胃癌耐药细胞系SGC7901/VCR1.0，SGC7901/VCR0.7及SGC7901/VCR0.3及其药敏细胞SGC7901的PKC活性，提示细胞耐药后PKC总活性、细胞质及细胞核的活性明显增高，随耐药指数的增加呈逐渐增高的趋势，细胞膜的PKC活性无明显改变.可能是因为化疗药物长期诱导耐药细胞导致PKC的表达增加，而PKC通常以无活性的形式存在于细胞质，无化疗药物及其他刺激时细胞质内的PKC含量较多，所以检测到的结果细胞耐药后细胞质内PKC的活性较高而细胞膜的活性无明显变化，细胞核内PKC活性的增高可能与维持MDR表型蛋白的基因转录与表达有关.
MDR经常与PKC的水平和活性有关.从我们的实验结果也可以看出，PKC活性水平的升高与PKCα的表达有明显的相关性，随耐药指数的增加PKC的活性及PKCα的表达呈逐渐增高的趋势，细胞内药物浓度呈逐渐减低的趋势，更进一步说明PKCα在维持胃癌细胞的耐药表型中起重要作用.无论如何，对于PKC不同同工酶亚型与胃癌多药耐药性相关性的研究，为进一步明确胃癌的多药耐药机制以及选择逆转耐药的药物将会提供有益的帮助.
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篇9
【关键词】 肺耐药相关蛋白 癌 非小细胞肺 组织学技术
［ABSTRACT］ObjectiveTo study the expression of lung resistancerelated protein (LRP) in nonsmall cell lung cancer (NSCLC) and its clinical significance. MethodsNSCLC specimens (n=72) were examined by the combined techniques of tissue chip and immunohistochemistry. The expression of LRP was quantitatively assessed by computer image analysis system. Chemotherapy was not performed in all cases before surgery. ResultsExpression of LRP was found mainly in the cytoplasm of NSCLC， few in cellular membrane. The total positive rate of LRP expression was 77.78％. The intensity of LRP immunostaining was related to the tissue type and differentiation of the cancer. The average density and accumulated density of LRP were higher in adenocarcinoma than in squamous cell carcinoma （t=6.977，6.114；P
［KEY WORDS］lung resistancerelated protein; carcinoma， nonsmall cell lung; histological techniques
肺癌是我国最常见的恶性肿瘤之一，其发病率近年来也呈迅速上升趋势。在我国一些大城市，其发病率占成年人恶性肿瘤发病率的第一位，已经成为人类因肿瘤致死的首位病因，其中非小细胞肺癌(NSCLC)占所有肺癌的75%～80%。NSCLC单纯手术治疗效果不佳，5年生存率平均只有50％左右。目前多采用手术与放、化疗结合的综合治疗方案，化疗仍是肺癌主要的治疗手段之一［1］。肿瘤细胞产生的耐药性是影响化疗效果最常见而又最难解决的问题。已有许多研究表明，肺耐药相关蛋白(LRP)过度表达与肺癌化疗耐药密切相关［2］。检测LRP在NSCLC组织中的表达，以往多采用定性的方法，而检测其定量表达目前未见报道。本研究应用组织芯片及免疫组织化学技术结合形态学计量，检测LRP在NSCLC组织中的定量表达，探讨其与NSCLC生物学行为的关系，预测肿瘤对化疗的敏感性，从而指导肿瘤化疗。
1 材料和方法
1.1 标本来源
收集青岛大学医学院附属医院2003～2005年经病理证实的非小细胞肺癌手术标本共72例，均为石蜡包埋标本，术前病人未进行化疗，其中年龄3 cm组42例；鳞癌30例，腺癌42例；淋巴结转移组39例，淋巴结无转移组33例；高分化组16例，中分化组26例，低分化组30例；按临床分期(1997年肺癌国际分期修正系统):Ⅰ期29例，Ⅱ期19例，Ⅲ期24例。复习全部病例的临床病理资料及苏木精伊红染色切片，每例标本选取癌组织典型代表区域，直径约2 mm，制作成2枚组织芯蜡块。
1.2 免疫组织化学染色
鼠抗人LRP单克隆抗体、PV9000检测试剂盒及DAB显色剂均购自北京中杉金桥生物技术有限公司。4 μm厚组织芯石蜡切片脱蜡，系列乙醇水化至蒸馏水，体积分数为0.03的过氧化氢灭活内源性过氧化物酶，微波修复，采用免疫组织化学PV9000二步法染色，用DAB显色。切片不进行复染。用PBS代替一抗作为阴性对照，用已知的阳性切片作为阳性对照。
1.3 结果判定及形态学计量
以肿瘤细胞质和(或)细胞膜出现棕黄色颗粒着色为阳性。应用Simple PCI多功能真彩色病理图像分析系统对免疫组织化学染色后的病理图像进行定量分析。每例标本在400倍视野下随机选取100个阳性肿瘤细胞，测定其阳性颗粒的平均吸光度和积分吸光度，以此代表阳性肿瘤细胞内LRP的相对含量。
2 结
果
2.1 LRP在NSCLC组织中的阳性表达
LRP在多数肿瘤细胞质和(或)细胞膜呈棕黄色颗粒着色，以细胞质着色为主。总阳性表达率为77.78％。
2.2 LRP在NSCLC组织中的表达水平与生物学行为的关系
LRP在NSCLC组织表达水平与组织学类型有关，在腺癌中阳性颗粒的平均吸光度与积分吸光度均高于鳞癌(t=6.977、6.114，P
3 讨
论
化疗在NSCLC的治疗中占有重要地位，但肿瘤细胞对化疗药物产生的耐药性是导致化疗失败的主要原因。已知LRP与NSCLC化疗耐药密切相表1 LRP在NSCLC组织中的表达情况关。LRP作为人体的主要穹隆蛋白，广泛分布于细胞器上。LRP在肿瘤耐药中的作用需依赖ATP提供能量，使肿瘤细胞内药物外排而降低药物浓度引起肿瘤耐药，其主要通过两种机制:一方面是使以细胞核为靶位的化疗药物不能进入细胞核，或把已进入细胞核的药物转运到细胞质;另一方面是把细胞质中的药物转运到囊泡，再经胞吐机制排到胞外［3］。有研究表明，LRP的表达与NSCLC化疗耐药密切相关，其在NSCLC组织中的表达水平可反映肿瘤组织对化疗的敏感性［4］，且其高表达与NSCLC化疗耐药及预后不良密切相关［5］。
本实验研究表明，LRP在NSCLC组织中的表达水平与组织学类型有关，在肺腺癌中的表达强度较鳞癌高，这与临床上肺鳞癌较腺癌对化疗敏感、疗效较好相一致。另外，NSCLC中LRP在高分化组中的表达强度高于中、低分化组，且随着肿瘤细胞分化程度的降低而表达降低，这与以往单纯定性检测耐药蛋白结果不同。以往有学者采用数阳性细胞个数计算阳性率的方法进行研究，发现低分化组LRP表达阳性率高于高、中分化组［6］。而本研究应用图像分析结合组织芯片技术，采用阳性颗粒平均吸光度与积分吸光度代表阳性细胞内LRP的相对含量，发现高分化组LRP表达强度明显高于中、低分化组，这与临床高分化癌对化疗较不敏感相一致，说明蛋白定量分析比计数阳性细胞个数、阳性率能更好 地反映LRP在NSCLC组织中的表达水平。另外，LRP的表达强度与临床分期、有无淋巴结转移、肿瘤大小及年龄无关，说明临床分期、有无淋巴结转移、肿瘤大小及年龄与NSCLC化疗耐药无密切关系。与有关报道一致［7］。
本实验采用组织芯片技术，将数十个微小的NSCLC组织块有序地排列在一张组织芯上制成缩微组织切片，在相同实验条件及相同判断标准下，同时分析多个样本中LRP的表达情况，比传统的免疫组化方法更快速和准确。同时，采用多功能真彩色病理图像分析系统对LRP免疫组化染色后的病理图像进行定量分析，避免了由于人眼对色彩强度的主观感觉所造成的偏差。本研究结果显示，对于同是免疫组化染色阳性的肺癌细胞，一些反映着彩强度的指标，如平均吸光度与积分吸光度在不同组织学类型及不同分化程度之间存在着差别，这种差别单纯应用定性指标无法充分显示。因此，利用组织芯片技术与彩色病理图像分析系统结合来检测NSCLC中LRP的表达强度，能准确了解非小细胞肺癌病人的耐药情况，对于预测化疗效果、选择治疗方案具有重要的临床意义。
参考文献
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篇10
【关键词】 肝脓肿；体层摄影；X线计算机
肝脓肿多见于细菌性。早期及脓肿壁形成初期表现不典型，与肝癌、肝内胆管细胞癌等难以鉴别[1]。本文对我院临床手术证实，CT表现不典型的26例肝脓肿CT资料进行回顾性分析
1 资料与方法
1.1 一般资料 回顾性分析临床手术证实，CT表现不典型的26例肝脓肿CT资料，着重分析CT表现不典型肝脓肿资料。男性19例，女性7例。年龄18-73岁，平均51岁。主要临床症状均有发热，且均有不规则服有抗生素史，不同程度肝区痛、叩痛；其中免疫力低下者4例。血AFP均为阴性。14例手术证实，12例抽脓证实，治疗后好转及缩小。
1.2 CT检查 使用Philips MX8000双排螺旋CT，层厚3.2-6.5mm，层间隔1.6-3.2mm。平扫基础上行动态增强：用碘海醇75－100ml团注，速率2.5-3.5ml/ s，动脉期（30s）、门脉期（60s）、延时期（2-7min）扫描，各期8-15s完成。
2 结果
2.1 单发病灶22例，多发病灶4例。其中免疫力低下者4例，手术史1例。
2.2 CT表现 病灶平扫呈低密度块影。增强表现：（1）、周围一过性强化，8例。见于动脉期，病灶周围组织明显强化，部份呈节段性分布。（2）、内部乏血管征及周围血管丰富征，18例。动脉期病灶内部未坏死区无或缺少强化血管影，而病灶周围见较丰富细小血管，呈包绕状，2例并一过性强化。（3）、肝脓肿缩小6例，表现门脉期或平衡期病灶边缘强化缩小，呈小囊样不强化区。（4）、簇状征，8例；病灶不均匀强化，多个不强化小囊样聚集成团或融合。（5）花瓣征，5例。病灶内分隔样强化。（6）、持续强化征，4例。病灶各期轻中度强化，持续至平衡期；（7）、门脉充盈缺损：病变所在区门脉支与门脉主干长条充盈缺损，2例，增强扫描未见强化。
2.3 诊断结果 5例误诊为肝癌，其中2例门血栓形成者；4例误诊为胆管细胞癌。
3 讨论
3.1 临床及病理 肝脓肿细菌性较多见。临床症状常有发热，肝区痛、叩痛，部份年龄大者临床症状表现不典型。免疫力低下者易并发多脏器感染，临床表现亦越复杂。病理上分炎症期、脓肿初期、脓肿形成期。炎症期肝细胞炎症充血水肿，血液循环障碍，随后病灶内出现坏死。纤维肉芽增生，形成脓肿壁。周围肝组织常伴充血水肿。病变不同阶段，同一病灶不同部位CT表现不一样。同时受致病菌毒力的影响。由于抗生素的广泛应用，肝脓肿表现不典型逐渐增多。
3.2 典型的肝脓CT表现：典型的肝脓见于脓肿壁形成期 ，CT表现为肝实质内囊样低密度影。病灶内出现气体，增强环样强化，与周围水肿形成单环及多环影（靶征），诊断并不困难。
3.3 不典型肝脓肿，常见于脓肿炎症期及脓肿形成初期 CT动态增强扫描一定程度可以反应病变病理变化[2,3]。动脉期病灶周围一过性强化，其机制可能与充血水肿血流增多、肝动脉-门脉短路、门脉分支阻塞血流减少及异常静脉引流等有关，提示炎症早期及脓肿形成初期可能，有助于鉴别诊断。但并非肝脓肿特有征象，研究显示多种病变中均可能出现[4,5]。动脉期病灶内部及周围血管分析上，未见血管伸入病灶未坏死区，而较多量细小血管分布于外周，呈内部乏血管征及周围血管丰富包绕征。考虑内部未坏死区血循环的障碍，外周肉芽组织增生，充血及血供增多，提示脓肿壁形成初期的血供改变。肝脓肿缩小征表现病灶增强后较平扫缩小，形成缩小的低密度不强化灶，主要见于门脉期及平衡期。反映了炎症期或不完全坏死，坏死周围肝组织炎性水肿。“簇状征”及“花瓣征”有相似病理基础，多见于脓肿形成初期。“簇状征”为多个细小脓肿聚集成团或融合。“花瓣征”为多房性肝脓肿。“病灶持续强化征”，表现为各期轻中度强化，持续至平衡期，仍至平衡期表现为稍高密度。报道认为平衡期表现为稍高密度为“延时强化征”[3]。但通过笔者对强化区各期CT值测量，差异并不大，而平衡期肝实质CT值降低较明显，故认为“延时强化征”是由于病灶造影剂外渗减慢，持续强化，肝实质平衡期密度降低造成相对高密度，反映了化脓炎症期或炎症破坏后增生反应。
3.4 不典型肝脓肿的鉴别诊断 不典型肝脓肿、肝细胞肝癌、胆管细胞癌均平扫均匀表现为低密度肿块，易于误诊。增强扫描尤其动态增强扫描，有助于鉴别诊断。肝癌动脉期病灶内易于见到丰富血管（畸形血管），强化呈“快进快出”改变，而坏死区常见于中心区。一般不会出现病灶出缩小、簇状征、花瓣征、持续性强化征。当肝脓肿出现门脉内血栓形成时，栓子强化与否是癌栓与血栓的鉴别点。胆管细胞癌增强扫描呈现渐进性、向心性增强的强化特点和病灶内部呈片状、网格状或线状强化的特点[6]，不典型肝脓肿常易误为胆管细胞癌， 病灶内间隔细窄的更倾向于脓肿。
综上所述，肝脓肿具有炎症的一般规律，不同演变阶段CT表现亦不同。不典型肝脓肿无较特征表现，动态增强扫描有一定特征表现，有助于提高诊断符合率。
参考文献
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[2]张雪琴,陈光文,王映林.不典型肝脓肿的动态增强CT表现及病理基础[J].医学影像学杂志,2010,48:79-80.
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