巨细胞病毒范文

导语：如何才能写好一篇巨细胞病毒，这就需要搜集整理更多的资料和文献，欢迎阅读由公务员之家整理的十篇范文，供你借鉴。

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【关键词】 巨细胞病毒； 尿液巨细胞病毒DNA； 血清巨细胞病毒特异抗体； 诊断价值

【Abstract】 Objective：To study the diagnostic value of exploring the use of CMV DNA in urine and serum of CMV-specific antibody detection in the diagnosis of cytomegalovirus infection in infants， to assess its clinical significance.Method：From February 2014 to May 2015 in our hospital received 90 cases of suspected diagnosis of cytomegalovirus infection in infants for the study，they were given the urine CMV DNA and CMV-specific serum antibody detection in children.The results of a single test and combined two detection methods were compared with treatment of children before and after.Result：The positive rate of CMV DNA detection in urine was 58.89% （53/90），specificity was 62.22% （56/90） and specificity of serum antibody positive rate of CMV was 51.11%（46/90），specificity was 61.11%（55/90） showed no significant difference（P>0.05）.The positive rate of CMV DNA in urine and serum of CMV-specific antibody detection was 78.89% （71/90），and specificity was 91.11%（82/90），compared with two single species detection methods detect，the differences were statistically significant（P

【Key words】 Cytomegalovirus； Urine cytomegalovirus DNA； CMV-specific antibodies in serum； Diagnostic value

First-author’s address：Fanyu District Shawan People’s Hospital of Guangzhou，Guangzhou 511400，China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2016.19.034

巨细胞病毒（CMV）感染是一种人类感染性疾病，在我国感染率在逐年上升。感染主要发生在婴幼儿期，但巨细胞病毒感染的患者无论有无症状都会在其体液中被检测出来[1]。婴幼儿感染时身体系统会发生多处病变，引起严重的并发症，危及患儿的生命。为探索在诊断婴儿巨细胞病毒感染中采用尿液巨细胞病毒DNA联合血清巨细胞病毒特异抗体检测的诊断价值，分析应用价值，本文选取2014年2月-2015年5月收诊的90例疑似巨细胞病毒感染的婴幼儿为研究对象，报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2014年2月-2015年5月本院收诊的90例疑似巨细胞病毒感染的婴幼儿。所有患儿均符合巨细胞病毒感染诊断方案的诊断标准，患儿中男61例，女29例；年龄1～14个月，平均（2.12 ±0.65）个月；本研究经本院伦理委员会批准进行，且家属均已在知情同意书上签字。

1.2 检测方法

1.2.1 尿液巨细胞病毒DNA检测 具体步骤：在灭菌离心管中加入1000μL干净的尿液，并将离心管置于离心机上以50 r/s的速度离心10 min，分离澄清尿液和尿渣后，往尿渣中注入50μL的DNA提取液，手握紧反应管摇动使提取液和尿渣混合均匀，将其放于达到100 ℃的仪器上进行10 min的干浴，干浴结束后进行5 min的离心操作，操作结束取上层清液进行由广州达安基因诊断有限公司生产的DA-7600 PCR仪扩增操作。扩增的靶区域为患儿巨细胞的AD-169基因组中早期转录调节蛋白IE1基因中的高保守非编码区，并在该区域置入特异性的荧光探针和引物。将取好上清液放到DA-7600 PCR仪及配套的试剂盒的反应管中，然后在扩增仪中进行扩增操作，93 ℃下2 min预变性45 s；

55 ℃ 45 s，10个循环左右；93 ℃ 30 s、45 s，30个循环。操作结束后，将数据输入电脑进行计算和分析，将基因拷贝数/mL作为尿液巨细胞病毒DNA的单位，尿液巨细胞病毒DNA拷贝数/mL超过500表示患儿检测结果为阳性。

1.2.2 血清巨细胞病毒特异性抗体检测 具体步骤：真空管中加入从患儿空腹状态下抽取的2 mL的静脉血液，盖上盖子上下倒置使其充分混合，并将其置于离心机上以50 r/s的速度离心5 min，离心结束后放于低温-80 ℃中备测，使用美国雅培公司生产的化学发光仪进行血清巨细胞病毒特异性抗体检测，检测值index大于0.5时表示患儿检测结果为阳性[2]。

1.2.3 两种方法联合检测 将两种单独检测方式联合对患儿的血清和尿液进行检测，具体步骤同上。

1.2.4 阳性结果判断 尿液巨细胞病毒DNA检测操作结束后，将数据输入电脑进行计算和分析，将基因拷贝数/mL作为尿液巨细胞病毒DNA的单位，尿液巨细胞病毒DNA拷贝数/mL超过500表示患儿检测结果为阳性。血清巨细胞病毒特异性抗体检测时，检测值index大于0.5时表示患儿检测结果为阳性。

1.3 治疗方法 通过两种检测方式检测确诊为巨细胞病毒感染的患儿，采用10 mg/（kg・d）剂量的更昔洛韦进行治疗，服用2周。

1.4 观察指标 比较单一检测及联合检测的检查结果，并对比分析治疗前后患儿尿液巨细胞病毒DNA含量、血清巨细胞病毒特异抗体含量。

1.5 统计学处理 采用PEMS 3.1统计学软件对数据进行分析，计量资料以（x±s）表示，比较采用t检验，计数资料的比较采用 字2检验，以P

2 结果

2.1 两种方法单一检测及联合检测结果比较 尿液巨细胞病毒DNA检测的阳性率、特异性与血清巨细胞病毒特异抗体检测阳性率、特异性比较差异无统计学意义（P>0.05）；联合检测的阳性率、特异性与两种单一检测比较差异均有统计学意义（P

2.2 治疗前后患儿检测结果比较 治疗前后患儿尿液巨细胞病毒DNA含量比较差异有统计学意义（P

3 讨论

巨细胞病毒（CMV）感染是在婴幼儿时期没有明显的临床表现的一种人类感染性疾病，我国感染率在逐年上升，特别是在发展中国家最多。感染主要发生在婴幼儿期，巨细胞病毒感染的患者无论有无症状都会在其体液中被检测出来。通过检测血清巨细胞病毒特异抗体和尿液巨细胞病毒DNA能对患儿是否被巨细胞病毒感染起到很好的辅助诊断作用。两种检测方式结合在一起检测阳性率高且检测的特异性强，能极大程度地诊断出被巨细胞感染的患儿，及时给予治疗，减少患儿并发症和后遗症的发生，在临床上逐渐被广泛应用。

本研究显示，两种单一检测及联合检测结果比较，尿液巨细胞病毒DNA检测的阳性率58.89%（53/90）、特异性62.22%（56/90）与血清巨细胞病毒特异抗体检测阳性率51.11%（46/90）、特异性61.11%（55/90）比较差异无统计学意义（P>0.05）；联合检测的阳性率78.89%（71/90）、特异性91.11%（82/90）与两种单一检测比较差异均有统计学意义（P

与治疗前相比，患儿治疗后的血清巨细胞病毒特异抗体含量和尿液巨细胞病毒DNA含量均明显下降，表明通过治疗可以治愈患儿的巨细胞感染，早期诊断和早期对患儿进行治疗对患儿治愈有很重要的作用。分析原因：血清巨细胞病毒特异抗体检测的特点是特异性强、灵敏度高、能快速检测、自动化等优点，尿液巨细胞病毒DNA检测可以快速检测并且能建立扩增曲线，能很好地通过曲线检测DNA等优点，进而两种检测方式结合在一起对患儿进行检测时能提高阳性检测率和特异性。巨细胞感染早期患儿临床症状表现不明显，早期检测早期进行治疗，对治愈患儿的巨细胞感染有很重要的意义与袁浩等[17]研究结果相似。

巨细胞病毒是一种传播途径为胎盘或生殖道进行感染等方式的疱疹病毒，绝大部分患儿感染后身体呈亚临床期或潜伏感染期。并且患儿身体内会产生特异性抗体，当抽取患儿空腹时静脉血清单份稀释达到（1/8）以上，通过化学发光法对血清巨细胞病毒特异抗体进行检测时对诊断患儿是否受巨细胞感染有很重要临床应用价值[20]。但是由于患儿机体的免疫能力较弱因而产生的特异性抗体较弱导致检测过程中检测的阳性率较低并且特异性不够灵敏，进而易出现假阴性，使得少数患儿没有被检测出来，特异性虽较强但敏感程度较弱，易导致后期发现的时候治疗起来棘手。对患儿洁净的尿液进行实时荧光定量PCR法（FQ-PCR）时，能对患儿基因的各种表达进行定量分析，可以进行一个点的突变分析及等位基因进行分析，也可以对单核酸的多态性进行分析，但先要在基团置入特异性荧光探针和引物。因而通过实时荧光定量PCR法检测尿液巨细胞病毒DNA时能很好的通过荧光显示，检测是否患儿被巨细胞病毒感染[20]。因体内免疫能力未受抑制时潜伏的病毒未能活化增殖使得检测的阳性率偏低并特异性较弱进而使得检测存在一定的假阴率，造成少数患儿未能被检测出来，错过患儿的早期治疗，增加后期治疗费用。但相比于血清巨细胞病毒特异性抗体检测，尿液检测具有取样便捷、对患儿没有机体创伤等优点。进而两种检测方式联合进行检测时相比于单一检测能提高检测的阳性率且增强特异性，两种检测方式联合检测是临床上检测巨细胞感染的一种较好的方法，值得推广应用。

综上所述，在诊断婴儿巨细胞病毒感染中采用尿液巨细胞病毒DNA联合血清巨细胞病毒特异抗体检测的临床效果理想，早期诊断出来并进行治疗对治疗巨细胞感染具有重要意义，值得推广应用。

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关键词：巨细胞病毒；更昔洛韦；应用效果

巨细胞病毒（CMV）感染是由于人类巨细胞病毒引起的感染性疾病，是婴幼儿期较为常见的先天性病毒感染，具有发病率高、病死率高的特点。CMV感染会引起小儿先天性畸形、视网膜脉络炎、智力障碍等，因此临床应该及时给予有效治疗[1]。临床常用抗病毒治疗，更昔洛韦属于广谱疱疹类病毒药物，是治疗CMV感染的首选药物，可以降低转氨酶，促进临床治疗效果。本文作者结合2015年3月至2016年3月期间在我院治疗的58例巨细胞病毒感染患儿临床资料，分析患儿巨细胞病毒感染中更昔洛韦的治疗效果。现报告如下：

1资料与方法

1.1一般资料。回顾分析2015年3月至2016年3月期间在我院治疗的58例巨细胞病毒感染患儿临床资料，将其随机分为对照组和观察组，每组29例患儿。对照组29例患儿中男性19例，女性10例；年龄1~2岁，平均年龄（1.52±0.36）岁。病程2~16d，平均病程（8.45±6.35）d。观察组29例患儿中男性20例，女性9例；年龄1~2岁，平均年龄（1.04±0.42）岁。病程2~15d，平均病程（8.10±4.73）d。两组患儿在年龄、性别、病程等基础资料方面差异无统计学意义（P>0.05）。1.2临床表现。均伴有不同程度的黄疸、肝脏肿大症状，并且伴有排便颜色淡或呈白陶土色。1.3方法1.3.1对照组。给予利巴韦林注射液治疗，每1kg给予10mg，分2次给药，静脉滴注时间大于20min，连续治疗14天。1.3.2观察组。给予更昔洛韦注射液治疗，每7.5mg/kg，12h用药1次，每次给药时间约为2h，持续治疗14天。维持期内将5mg/kg加入生理盐水，以10mg/kg给药，每天1次，每次给药时间约为2h，连续治疗7天。1.4疗效评定标准。治愈：患者临床症状消失，肝功能完全恢复，尿液及先天性巨细胞病毒阴性；好转：临床症状消失，肝功能和黄疸显著改善，尿液及先天性巨细胞病毒阳性。无效：临床症状、黄疸。肝功能无变化，并且病情有加重趋势[2]。1.5统计学方法。数据分析使用SPSS20.0统计软件包，计量资料采用（χ—±s）表示，两组间比较采用t检验，计数资料采用相对数表示，两组间比较采用检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2结果

2.1对比两组患儿临床治疗有效率。观察组患儿临床治疗有效率明显高于对照组，差异有统计学意义（P<0.05），见表1。2.2临床黄疸消退时间、TBIL、DBIL水平对比。观察组患儿黄疸消退时间、TBIL、DBIL均小于低于对照组，差异有统计学意义（P<0.05），见表2。2.3临床不良反应发生率对比。观察组不良反应发生率明显低于对照组，差异有统计学意义（P<0.05），见表3。

3讨论

先天性巨细胞毒感染是临床宫内常见感染，更昔洛韦有广谱抗疱疹病毒的活性，可以抑制病毒DNA聚合酶进行选择性抑制，从而抑制巨细胞病毒感染DNA的合成，并可直接渗入病毒DNA，组织病毒DNA的延伸，最终实现病毒复制作用[3]。目前临床无特别有效的、安全的抗CMV药物。但是更昔洛韦对CMV有极强的抗病毒作用，在细胞内更昔洛韦或转化为三磷酸型活性物，在病毒感染细胞内的浓度要高于非感染细胞，但对正常细胞毒性极小，不会到导致病毒抗药性[4]。同时更昔洛韦静脉注射液，会通过血脑屏障，进入眼内局部组织，并广泛的分布于患儿体内，从而发挥良好的药效[5]。本文研究结果显示，观察组患儿临床治疗有效率明显高于对照组，且患儿黄疸消退时间、TBIL、DBIL、不良反应发生率明显低于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）。由此提示，更昔洛韦的治疗可以改善患者肝功能，促进黄疸的消退。但是临床用药期间，患者可能出现恶心、呕吐、腹泻、皮疹等不良反应，因此临床应该注做好预防、观察和及时处理工作[6]。总而言之，更昔洛韦治疗患儿巨细胞病毒感染效果良好，可以有效抑制病毒的复制，缓解患儿临床症状，促进黄疸快速消退，改善患儿临床肝功能，并且无严重不良反应，可以安全的发挥疗效。

参考文献

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【关键词】婴儿；巨细胞病毒肝炎；思美泰

文章编号：1009-5519（2007）10-1433-02 中图分类号：R72 文献标识码：A

在我国婴儿巨细胞病毒(CMV)肝炎感染率较高，约占婴儿肝炎综合征的40%左右。我们应用思美泰联合更昔洛韦治疗婴儿CMV感染性肝炎取得了较好的疗效，现报道如下：

1 资料与方法

1.1 研究对象：2003年7月-2006年7月在我院住院并确诊为CMV肝炎病例38例，均符合中华医学会儿科学会感染消化学组1998年11月制定的巨细胞病毒感染诊断方案。随机分为治疗组与对照组。治疗组20例：男11例，女9例，平均年龄（45.1±21.2）天；对照组18例，男10例，女8例，平均年龄（43.1±20.8）天；两组患儿的年龄、性别差异均无显著性（P＞0.05）；两组治疗前的临床表现、肝、脾B超大小、实验室检查结果差异均无显著性（P＞0.05）。

1.2 治疗方法

1.2.1 两组均给予肝泰乐注射液、维生素C注射液等综合对症治疗，抗病毒采用更昔洛韦7.5 mg/kg，静脉滴注，每12小时1次，滴注时间>1小时，连用14天。治疗组在此基础上加用思美泰50 mg/（kg・d），静脉滴注，1日天1次，连用14天。

1.2.2 药物不良反应监测

1.2.3 观察指标：(1)实验室指标：治疗前后检测谷丙转氨酶(ALT)、总胆红素（TBIL）、直接胆红素（DBIL）、间接胆红素（IBIL）、胆汁酸（TBA）、肝脏B超。（2）临床指标：黄疸开始消退时间、黄疸完全消退时间。

1.3 统计学处理：组间比较，计数资料采用χ2检验，计量资料采用t检验。

2 结果（见表1-3）

不良反应：迄今为止，未出现严重不良反应。

3 讨论

人类巨细胞病毒(human cytomegalovirus，HCMV)感染是新生儿、婴儿的重要病原之一。CMV感染症状最常侵犯肝脏引起巨细胞病毒性肝炎，表现为黄疸、肝大、肝酶增高及胆汁淤积，严重可导致胆汁淤积、肝纤维化甚至胆管闭锁，预后不良[1，2]。严重影响小儿身体健康及人口生存质量。其发病机制复杂，大量研究显示HCMV不仅是常见的抗原，而且是不断利用和操作免疫系统的持续性病毒感染的代表。主要病理改变表现为肝细胞肿胀、胆小管增生、淤胆，部分胆栓形成，肝细胞点状或灶状坏死，肝内见大量多巨细胞[3，4]。临床常以阻塞性黄疸为特征，实验室检查多显示以直接胆红素升高为主，临床显示黄疸持续顽固难退。患儿早期肝功能可正常，肝、脾也无肿大，但后期由于长期的胆汁淤积可致肝功能严重受损。因此，婴儿巨CMV肝炎早期诊断及及时治疗是很重要的。清除病毒、利胆退黄、养肝柔肝是治疗本病的关健。迄今为止尚未有满意的治疗药物。现今国内、外较推荐应用更昔洛韦治疗婴儿先天性CMV感染。更昔洛韦能抑制病毒复制，终止病毒对肝脏的进一步损伤，但对病毒已经引起的胆汁排泄异常无明显治疗作用[5，6]。

思美泰是一种新型的治疗和预防肝内胆汁郁积的药物，是蛋氨酸和三磷酸腺苷在腺苷蛋氨酸作用下产生的化合物，在人体组织代谢过程中发挥重要作用，参与体内重要的生化反应。它在肝细胞内通过使质膜磷脂甲基化而调节肝脏细胞膜的流动性，增加K+、Na+－ATP酶活性，加快胆酸转运，同时，通过转硫作用，可以使硫基化合物（半胱氨酸、谷胱廿肽、牛磺酸）合成增加，牛磺酸可与胆酸结合增加其可溶性，加速其排泄，加速肝细胞解毒作用和防止肝细胞损伤[7]。肝细胞在炎症损害时，腺苷蛋氨酸合成下降，活性下降，使肝内腺苷蛋氨酸合成减少，导致肝细胞膜磷脂甲基化程度下降，K+-Na+－ATP酶泵功能减弱而导致肝细胞摄入和分泌胆红素功能下降，补充外源性腺苷蛋氨酸，增加体内转甲基和转硫基作用，加强利胆作用、减少胆酸肠肝循环，有利于肝细胞功能恢复，促进黄疸消退[8]。

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1．1基本资料

选取2010年1月－2014年12月医院收治的83例CMV感染新生儿为研究对象，CMV感染诊断均符合《巨细胞病毒感染诊断方案》制定的诊断标准，且经病毒学、血清学检查确诊。所有新生儿入组时日龄＜28d，且家长知情同意，签署知情同意书；排除免疫缺陷或者移植新生儿。

1．2方法

1．2．1资料收集

记录新生儿胎龄、出生史、出生体质量、入院日龄、临床表现、体征及合并症等资料。

1．2．2治疗方法

所有新生儿均给予护肝、利胆、退黄、止咳、解痉平喘等对症治疗。在此基础上给予注射用更昔洛韦（武汉海特生物制药股份有限公司；批准文号：国药准字H20053681）静脉注射。给药剂量：诱导期给予5mg／kg，每12h1次，维持期给予5mg／kg，每日1次；治疗4周后判断新生儿转归情况。

1．3统计分析

采用SPSS17．0统计软件进行分析处理；计量资料以均数±标准差表示，采用t检验；计数资料以百分数表示，采用χ2检验，P＜0．05为差异有统计学意义。

2结果

2．1临床表现与影像学检查结果

83例CMV感染新生儿临床表现与影像学检查结果。

2．2治疗有效组与无效组患儿临床特征比较

83例CMV感染新生儿，治愈19例、好转40例、无效24例。根据转归情况分为有效组59例与无效组24例，两组新生儿在男性所占比例，体质量，呼吸系统受累及PLT、T－BILI水平比较差异无统计学意义，在日龄、早产、肝功能异常、脾肿大，WBC、ALT、AST比较差异有统计学意义（P＜0．05）。

3讨论

CMV是一种较弱的致病因子，在免疫力正常人群中多表现为无症状感染，但其存在于感染者的血液、尿液等体液中，通过输血、器官移植、母婴等多种途径传播，其中通过母体血液，甚至乳汁等传播，新生儿成为CMV感染的高发人群。CMV感染是T淋巴细胞介导的免疫反应，新生儿免疫功能发育尚未成熟，CMV感染不仅打破Thl／Th2细胞亚群的平衡，干扰体液中抗体，引起抗体介导的免疫反应降低，几乎可侵犯机体的所有器官，据统计［3］，CMV严重感染儿病死率高达20．00％～30．00％，而约90．00％幸存者将出现智力低下、耳聋、视力障碍等后遗症，严重威胁新生儿生活质量及生命健康，同时增加了社会负担。有文献报道，早期发现、早期诊断和治疗有助于降低病死率［4］，但是目前临床上对于新生儿CMV感染的早期诊断鲜有报道，并且虽然新生儿CMV感染的相关研究已进行多年，但目前仍未找到理想的治疗方法，因此如何早期诊断和遏制新生儿CMV感染的进一步发展，降低病死率，成为临床科研工作者亟待解决的关键问题。文献报道，CMV感染相关症状主要是非特异性症状［5］，研究结果显示，83例CMV感染新生儿，呼吸系统受累者28例占33．73％、视听神经受损23例占27．71％、皮肤黄染者34例占40．96％、肝功能异常者52例占62．65％、脾肿大者40例占48．19％，血小板减少性紫癜、贫血或者粒细胞减少等血液系统疾病者9例占10．84％，合并胆道闭锁、先天性心脏病、脐疝或者先天性喉喘鸣等先天性缺陷26例占31．33％，提示新生儿CMV感染临床表现多样，以皮肤黄染及肝功能异常多见，进一步证实了文献报道。血常规检测发现WBC计数及淋巴细胞百分比升高人数比例较大，PLT减少人数比例较大，提示对于WBC、淋巴细胞百分比升高，PLT减少的新生儿，应考虑到CMV感染的可能性，另外，有文献报道，新生儿高胆红素血症中CMV感染率明显高于无症状的新生儿，本研究中T－BILI＞85．5μmol／L患儿47例占56．53％，进一步为CMV感染诊断奠定了基础［6］。血清CMV－IgM抗体是CMV进入机体后最先产生的抗体，本研究中CMV－IgM检测阳性78例，阳性率达93．98％，提示血CMV－IgM可作为新生儿CMV感染的早期诊断指标。

CMV－IgM阴性5例，占6．02％，提示CMV－IgM阴性不能完全排除CMV感染，可能是由于早期感染期已过，抗体在血中的滴度已下降。此外，文献报道，肝功能指标可作为较敏感的CMV活动性感染及近期感染的指标［7］，本研究中ALT、AST升高例数比例较大，进一步证实了文献报道。更昔洛韦为开环核苷类似物，其三磷酸盐能竞争性抑制病毒DNA聚合酶，具有较广泛的强效抗病毒活性，是治疗CMV感染相关疾病的首选药物，本研究中给予83例CMV感染患儿更昔洛韦治疗，治愈19例，好转40例，无效24例，治疗有效率为71．08％。通过比较有效与无效患者的临床特征发现，两组患儿在日龄、早产、肝功能异常、脾肿大例数，WBC、ALT、AST方面比较差异有统计学意义（P＜0．05），说明CMV感染患儿预后与患儿器官功能障碍有极为密切关系，此外，更昔洛韦具有一定的不良反应，用药期间应监测血常规和肝肾功能。

篇5

【关键词】肾移植；巨细胞；抗体；感染

巨细胞病毒(cytomegalovims，CMV)感染是导致肾移植失败的一个重要原因。CMV活动性感染，尤其是CMV肺炎死亡率极高，且易并发细菌、真菌、原虫等混合感染，甚至诱发排斥反应，直接影响了肾移植术后人／肾的长期存活。因而对肾移植术后CMV感染进行监测和防治尤为重要。为此，我们采用ELISA法对227例长期在我院进行复诊的肾移植患者做了调查，以了解其巨细胞病毒感染率。

1　对象和方法

1.1　研究对象　选取2003年1月～2009年6月在我院行同种肾异体移植术的患者227例，其中男性147例。女性80例；年龄15―73岁，平均年龄39岁。

1.2　标本收集　227名患者均定期在我院进行复诊，对疑似巨细胞病毒感染的患者进行巨细胞病毒抗体检测，采集静脉不抗凝血3 mL。

1.3　测定方法　分离不抗凝血血清，用巨细胞病毒抗体ELISA检测试剂盒(德国HUMAN公司生产)检测CMV IgG、IgM抗体，严格按照试剂盒说明书进行操作，每次实验均设立阳性及阴性对照组。以CMV IgG(+)、IgM(+)为巨细胞病毒活动性感染依据。

2 结果

227例患者中巨细胞病毒抗体IgG(+)、IgM(+)共77例，总感染率为33.92％，其中移植后1个月内感染者14例，占总例数的6.17％；1～2个月感染者10例，占总例数的4.41％；2～4个月感染者24例，占总数的10.57％；移植后4个月内感染发生率为21.15％，4个月～1年发生感染者16例，占7.05％；1年以上感染者13例，占5.73％。

3　讨论

篇6

人巨细胞病毒（HCMV）属疱疹病毒科，为双链DNA病毒，在人群中HCMV大多引起无症状感染。近年来，HCMV感染在性传播疾病中发生率逐渐增高，尤其是年轻女性感染HCMV的比例有所提高。收集了2004年12月～2007年2月在不孕不育门诊就诊的408例女性不孕症患者进行HCMV-IgM检测，现将结果报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料：2004年12月～2007年2月在我站不孕不育门诊就诊的女性不孕患者408例，平均年龄23～41岁，均结婚同居2年以上，性生活正常，未采取任何避孕措施，男方体检及检查无明显不育因素。其中宫颈、子宫因素78例，内分泌因素128例，输卵管因素187例，免疫功能异常12例，其他不明原因3例。

1.2 方法：对本组患者采集静脉血，采用酶联免疫吸附试验（ELISA）进行HCMV-IgM检测。

2 结果

我们用ELISA法共检测了78例宫颈子宫因素不孕，128例内分泌因素不孕，187例输卵管因素不孕，12例免疫功能异常不孕，3例不明原因不孕妇女的HCMV-IgM。在宫颈子宫因素不孕，内分泌因素不孕，输卵管因素不孕，免疫功能异常不孕中，分别检测出HCMV-IgM阳性标本5例，9例，73例，1例。阳性率分别为6.41%，7.03%，39.04%，8.33%。在3例不明原因不孕中未检测出HCMV-IgM阳性标本。

3 讨论

本组病例中，除3例不明原因引起的不孕外，其他都有不同程度的HCMV感染，在输卵管因素不孕（包括输卵管粘连、阻塞、积水等）中HCMV感染率达39.04%，提示不孕症的发生与HCMV感染有较密切的联系。感染HCMV虽然临床症状隐匿，但易引起输卵管粘连、阻塞而导致不孕。

巨细胞病毒是一种在人群中广泛存在的感染因子，感染非常普遍。HCMV感染后以细胞免疫为主，在细胞内复制可引起免疫抑制，天然免疫系统的激活不足以代替受抑制的细胞免疫功能，使组织对感染因子的敏感性增加，很容易发生病毒原发感染或潜伏感染的激活，造成局部组织细胞转化增生[1]。生殖道炎症，多次人流均可诱发病毒上行性感染输卵管，在输卵管黏膜有大量白细胞和巨噬细胞感染浸润，黏膜肿胀造成慢性炎症改变，引起输卵管进行性损害，导致输卵管粘连、阻塞以致不孕[2]。本组病例中输卵管因素不孕患者HCMV感染率达39.04%，也充分说明在HCMV感染是导致输卵管粘连、阻塞的重要因素。因此对不孕症患者常规检测HCMV是非常必要的。

HCMV感染多呈亚临床不显性感染和潜伏感染，多数症状隐匿，因此，HCMV感染主要依靠实验室诊断，其中，病毒分离是诊断HCMV感染最可靠的方法[3]，但需要时间长，条件要求高，影响因素多，不适宜在一般临床实验室开展此项工作，目前临床多采用ELISA法检测HCMV-IgM来判断是否感染HCMV。HCMV-IgM出现早，是诊断HCMV近期活动性感染的可靠指标。ELISA检测血清HCMV-IgM较敏感，操作简便。

参考文献：

[1] 房 昭，杨爱莲.巨细胞病毒抗体测定对盆腔炎性粘连的预测价值探究[J].中国计划生育学杂志，2005，9：547.

[2] 闰风亭.孕期巨细胞病毒感染的免疫学变化[J].国外医学•妇幼保健分册，2000，11：27.

篇7

湖南省儿童医院眼科，湖南长沙 410007

[摘要] 目的 了解婴幼儿感染HCMV后，HCMV对婴幼儿视网膜的影响。方法 收集2013年1—12月，在我院进行广域视网膜筛查（RetCamⅡ）的1500例HCMV阳性患儿的临床资料，对其眼底的检查结果和临床资料进行分析。结果 1500例患儿中，有眼底病变的为307例（20.47%），视网膜渗出样改变的为167例（300眼），视网膜出血88例（172眼），ROP15例（24眼），视网膜全部剥脱1例（1眼），视神经发育不全6例（10眼），视盘水肿30例（60眼）。结论 婴幼儿视网膜病变危害严重， HCMV感染为婴幼儿视网膜病变的高危因素，应重视早期筛查，对病变婴幼儿早发现早诊断早治疗。

[

关键词 ] 婴幼儿；巨细胞病毒；视网膜

[中图分类号] R711　[文献标识码] A　[文章编号] 1672-5654（2014）06（b）-0132-02

[作者简介] 陈瑜 （1975-），女，山东滕州人，湖南省儿童医院，副主任护师，学士，眼科护理，邮箱：1165888734@qq.com。

巨细胞病毒（HCMV）是婴幼儿先天性感染疾病中最常见的病原体，由于人群对HCMV普遍易感，有数据统计成人HCMV抗体阳性率高达90%以上，即90%以上的人感染过HCMV，大多数人为稳定感染，在人群中无明显症状，但对免疫力低下的婴幼儿则多出现严重症状。HCMV常会造成胎儿先天性感染导致畸形发生，母亲孕期感染HCMV可通过胎盘传染给胎儿，对胎儿的多个脏器造成损伤，引起流产、早产或死亡，HCMV 对婴幼儿的视网膜也有较大影响，为探讨HCMV对婴幼儿视网膜的影响，我院眼科使用RetCamⅡ广域视网膜眼底成像系统（简称RetCamⅡ）对HCMV感染患儿眼底进行筛查分析，现将结果报道如下。

1对象与方法

1.1对象

2013年1—12月，我院眼科门诊共完成HCMV感染患儿的视网膜筛查1500例（3000眼），随访3～12个月，对其资料进行回顾性分析。其中男926例，女574例，年龄7 d~14个月，足月876例，早产624例，双胎132例，单胎1107例，难产210例，平产828例，剖腹产462例。1500例患儿为来自眼科门诊和其它临床科室有巨细胞病毒感染或怀疑眼底异常者，检查出异常之前未行TORCH检查的患儿，行TORCH检查为HCMV感染。

1.2方法

采用RetCamⅡ130°（美国Clarity医疗器械有限公司出品）广域视网膜检查仪检查所有患儿。以视和黄斑为中心检查，然后从颞侧开始顺时针（或逆时针）方向依次检查周边部视网膜到锯齿缘，保存病变部位图像于计算机内，检查时依据成像位置和清晰度及时调整检查角度，焦距及光强度，详细记录检查情况，对有病变的患儿进一步随访和指导。受检者于检查前2 h禁食禁饮，严禁服用镇静剂，以免影响扩瞳效果。受检者均采用复方托品卡胺（美多丽）散瞳，5～10 min1次，连续4次扩瞳，60 min后瞳孔散大到7～8 mm。瞳孔散大后，0.4%盐酸奥布卡因滴入患儿结膜囊内1～2次，行表面麻醉。患儿仰卧于检查台，头部固定，用婴幼儿专用开睑器撑开眼睑，暴露眼球，眼球表面涂左氧氟沙星眼用凝胶（迪可罗）来保护角膜。按照先右眼后左眼的顺序对眼底进行彻底检查，检查完成后嘱其家长为患儿双眼滴用左氧氟沙星眼液每天3次，连续3～5 d以预防感染。所有检查患儿均未出现心跳呼吸骤停等严重的并发症。屈光介质，视，黄斑区，视网膜有异常者，要求1个月后复查，直至病变消失或病情稳定的时候，眼底出血者间隔1~2周复查，直至出血吸收为止。

1.3 统计方法

采用spss 17.0统计软件包进行统计学分析：所有数据用表示。组间差异采用one way ANOVA检验。

2 结果

在1500例HCMV感染患儿的眼底筛查中有眼底病变的为307例（20.47%），视网膜周边部（1区）黄白色渗出样改变167例（300眼），眼底表现为视网膜周边黄白色渗出样改变，大小不等，呈点状或片状集中在血管周围，病变处有血管爬过，长至周边，造影检查血管无异常。视网膜出血88例（172眼），眼底出血患儿出生时多有难产胎头吸引史，常合并有颅脑出血，新生儿窒息及新生儿缺血缺氧性脑病。1例（1眼）左眼视网膜全部剥脱，此患儿初次检查时为12月龄，出生时有早产剖腹产病史，眼底表现为网膜呈灰白色隆起，脱离的网膜呈波浪状起伏不平。视盘水肿30例（60眼），其中22例有新生儿窒息及缺血缺氧性脑病。见表1。

表1婴幼儿感染HCMV后的眼底表现[n(%)]

3讨论

由于婴幼儿配合程度差且无明显的临床症状，家长的眼保健意识匮乏，故早期往往忽略视功能的检查。很多早期的病变没有及时发现，等到发现时，已经错过了最佳的治疗时期，给患儿和家庭带来不可挽回的伤痛。从出生到4岁，是儿童视力发育的关键时期，在这一阶段，家庭和社会应提高婴幼儿眼病的保健意识，加强筛查。HCMV对婴幼儿眼部发育有重要影响，在筛查中发现的发育性疾病，视网膜出血、视神经发育不全、早产儿视网膜病变等，是导致儿童低视力和盲的主要原因。我院眼科筛查的HCMV感染婴幼儿多是发现视功能异常或需行高压氧进行康复治疗的患儿。被筛查的患儿中，有184例为语言运动发育落后需行要康复治疗的患儿。早期筛查治疗眼底异常的患儿，进行医疗评估，进而给予恰当的治疗和早期干预[1]，刺激患儿的视觉发育，对患儿的运动，认知和情感发育起着重要作用，对其康复治疗有重要意义。视网膜周边（1区）黄白色渗出样改变167例（300眼），抗病毒治疗后，病变范围缩小或无明显改善，1例2个月大男婴，抗病毒治疗不规律，4W后复查眼底黄白色渗出样改变增宽增厚，复查血HCMV滴度（2251.02IU/mL）较前（336.38IU/mL）明显增高，提示婴幼儿眼底病变的程度与血液中HCMV滴度呈负相关。

HCMV是人类感染中最常见的一种病毒，它具有潜伏-活化的生物学特征，一旦感染，将持续终身。虽然HCMV是弱治病因子，对免疫功能正常的个体并不具有明显致病性，绝大多数表现为无症状性感染；但是HCMV是引起病理性和生理性免疫低下人群，包括发育性免疫缺陷的胎儿和新生儿发生疾病的常见病源[2]。一些学者认为宫内感染CMV的早产儿，早期CMV感染程度与生后脑损伤的发病风险密切相关,是导致神经系统损伤的主要原因[3]，我科门诊检查并随访的184例神经系统损伤的患儿，均为先天性和围生期HCMV感染者。赵巍松等[4]认为进食感染HCMV的母乳和母婴的垂直传播是导致婴幼儿HCMV感染的重要途径。武巧珍等[5]认为母源性HCMVIgG可通过胎盘到达胎儿体内；在HCMV感染的婴幼儿中，大部分原发感染发生在1~3.5个月龄之间。由于婴幼儿免疫力低下，感染后可致多脏器损伤，肝功能损害，心肌酶增高，肾功能不全，听力损伤，智力发育障碍[6]，骨髓造血功能损害和血尿常规改变[7]。HCMV对视网膜的神经细胞有细胞嗜性，在某些情况下可导致有治病意义的细胞病变[2]。在1500例HCMV感染患儿的眼底筛查中，有眼底病变的为20.47%，可见HCMV对婴幼儿眼底发育的危害是不可忽视的。因此，早期对婴幼儿进行广域视网膜筛查是十分必要的 ，越来越多的医务工作者也意识到HCMV感染对婴幼儿眼底的危害，能够配合眼科医生进行广泛的眼底筛查，给婴幼儿的视力发育提供一个健康的指导方向，给孩子有一个光明健康的未来。婴幼儿眼病危害严重，HCMV感染为婴幼儿眼病的高危因素，应重视早期筛查，对病变婴幼儿早发现早诊断早治疗。

[

参考文献]

[1]孙乃学.重视儿童眼病的筛查与评估 [J].中国儿童保健杂志，2012，20（6）：260-263.

[2]方峰.儿童巨细胞病毒性疾病诊断和防治的建议[J].中华儿科杂志，2012，50（4）：290-292.

[3]史学凯，农绍汉，高平阳，等.宫内巨细胞病毒感染DNA定量对早产儿脑损伤发病的影响[J].中国新生儿科杂志，2012（6）：7.

[4]赵巍松,刘伶，杨飞.母乳及婴儿血液、尿液人巨细胞病毒DNA检测在婴儿HCMV感染中的应用[J] 中国实验诊断学 2013，17（6）：1059-1061.

[5]武巧珍，陈洁，林德熙，等 足月新生儿出生至2岁巨细胞病毒抗体的动态变化[J].东南大学学报（医学版，2012，31（6）：688-692.

[6]徐放生.婴儿期巨细胞病毒感染对生长发育影响的前瞻性研究[J].中华儿科杂志，2010，48（5）:385-389.

[7]李呈媚,谷丽.婴幼儿巨细胞病毒感染所致多脏器损害21例临床分析[J].中国医师进修杂志，2011，11（34）:48-49.

（收稿日期：2014-03-18）

关键词

关键词 是为了便于编制文献索引、检索和阅读而选取的能反映文章主题概念的词或词组。本刊所刊发的每篇论文须选取4～8个

关键词 。

关键词 应尽量从美国NLM的MESH数据库（ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgidb=mesh）中选取，其中文译名可参照中国医学科学院医学信息研究所编译的《医学主题词注释字顺表》。未被词表收录的新专业术语（自由词）可直接作为

关键词 使用，建议排在最后。中医药

关键词 应从中国中医科学院中医药信息研究所编写的《中医药主题词表》中选取。有英文摘要的文章，应标注与中文对应的英文

关键词 。应特别注意首标

篇8

【关键词】 间质性肺炎； 护理； 巨细胞病毒

间质性肺病（Interstitial lung Disease， ILD）其基本病理改变为肺泡炎、弥漫性肺实质和间质纤维化，由巨细胞病毒感染性致病源所引起的间质性肺病，对人体的威胁仅次于癌症，其发病率、致残率相对较高，危害性较大，不易治愈[1]，如果不能及早发现、及早救护，其死亡率达85%以上，因此医务工作者必须给予足够重视。

1 资料与方法

1.1 一般资料 本院2000年1月—2011年8月收治了15例巨细胞病毒感染致间质性肺炎患者，其中男10例，女5例，年龄18～49岁，平均年龄34.1岁；体征表现为呼吸急促、面色发绀、双肺中下部可闻及Velcro啰音（连续、高调的爆裂音），X线胸片提示有杵状指，其中Velcro啰音最具特征性。15例患者全部接受X线胸片、动脉血气等检查。

1.2 护理措施

1.2.1 对患者采用氧疗护理 本组15例间质性肺病患者伴有低氧血症，笔者分别给予及时吸氧护理，并严密观察氧疗变化。其中，采用鼻塞、面罩方式吸氧者为10例，吸氧前严格检查鼻塞和面罩是否固定良好，用氧管道是否畅通；利用BiPAP呼吸机配合采用氧袋用氧患者为5例。吸氧后15例患者的低氧血症得到缓解，逐渐趋于正常。在患者吸氧过程中，护理人员要全面观察患者面色、精神状态、呼吸状况和紫绀变化，若发现异常情况向主治医生报告，采取积极有效救护措施[2]。

1.2.2 指导患者有效排痰，维护患者呼吸道畅通 间质性肺炎患者皆伴有呼吸困难，咽喉部常滞留有黏痰，很难排出，加重呼吸窘迫，不利于病情好转。因此，护理人员要及时指导患者进行有效排痰，护士轻拍患者的后背，让患者缩紧嘴唇呼吸进行咳痰；对身体虚弱的患者，采用吸痰器进行人工吸痰，使患者的呼吸道保持畅通，避免因呼吸道堵塞而窒息死亡。同时，要给患者补加湿化水，防止呼吸道变形而出现堵塞状态。必要时可以采用呼吸机进行通过气，缓解患者的呼吸窘迫。

1.2.3 合理用药护理措施 首先，为减少患者肺间质渗出，使患者呼吸通气窘迫得到改善，采用大剂量糖皮质激素进行冲击疗法，如甲基强的松龙静脉滴注，其用量为40～120 mg，3～4次/d。护理人员要全天候监测患者肺间质渗出量，查验血糖检测结果，并对患者的呕吐物、大小便进行认真观察，做好相关记录。其次，在对患者采用三联抗病毒药物进行静脉滴注时，严格控制用药量，如国产更昔洛韦1～2次/d，250 mg/次；采用膦甲酸钠静脉滴注时用量为2次/d，3.0 g/次；静滴时给药要缓慢，每次静滴时间控制在1 h以上，并且两次静滴时间间隔要超过4 h以上，这样能够避免药物对患者肝肾功能造成损害，导致体内电解质不平衡，局部组织受到刺激。

1.2.4 做好患者心理护理，合理营养 患者对自身病情皆伴有紧张、恐惧感，甚至出现抑郁症或死亡感，情绪非常不稳定。护理人员给予体贴入微的关心和护理，叮嘱患者家属隔时探望，及时告知病情好转指标，安慰患者坚定信心战胜疾病，使患者的心理压力得到缓解，可以积极配合医生治疗和接受护士的护理措施。同时，笔者给患者配备流质的富含维生素、高蛋白、少纤维素饮食，禁食辛辣刺激性食物，保证患者机体营养供给，增强抗病能力。

2 结果

9例患者肺间质性病变得到控制，低氧血症得到纠正，呼吸平稳，占60%；2例患者因居住偏远地区没有接受及时有效救护，病情恶化，来院第2天病亡；另4例患者入院接受治疗1周内因呼吸严重衰竭救护无效而死亡，死亡率达40%。

3 讨论

肾移植术后巨细胞病毒（CMV）感染非常容易导致患者发生间质性肺炎，感染率高达60%～80%，患者全身会出现非特异性的发热、关节疼痛、不舒服等临床症状，所产生肺部间质性肺炎患者死亡率非常高，达30%以上，救护非常困难，致使患者机体诸多器官受累，呼吸困难，危及生命安全[3]。因此，一旦发病，要及时送医院进行有效救护，其临床意义非常重要。

本次对15例来院救治的巨细胞病毒感染致间质性肺炎患者的抢救、诊疗、护理上都采取了最有效的救护措施，进行早期细心观察，对患者表现的干咳、身温烧热、呼吸窘迫、胸闷气短等临床症状做详细记录；同时，对患者24 h内血尿化验结果进行密切观测，记录患者水、电解质及酸碱平衡状况；对患者的呕血的有无、大便色黑、腹部痛胀等临床症状要严密观察，并及时向主治医生报告危险病情，采取果断救护措施。2例患者因居住偏远而没有及时就医，延误病情，最终死亡；4例患者接受医院救护1周后，呼吸严重衰竭死亡，这充分证实了巨细胞病毒感染的危害性巨大，患者病死率极高。9例患者通过有效吸氧护理、及时清痰处理、合理用药和科学配餐营养支持，患者的低血氧症渐进恢复正常，呼吸变得通畅平稳，机体水、电解质和酸碱平衡得到控制，病情逐渐好转，给患者和家属带来希望。在临床护理过程中，笔者认真操作，对吸氧者严格检查鼻塞、面罩，确保良好固定；采用药物护理时，严格控制给药量，静脉滴注时速度缓慢，动作轻缓，避免患者用药过量过速而产生副作用，有利机体正常代谢 [4]，这对保证患者有效救护提供有力帮助，从而使大多数患者病情得到控制，脱离生命危险。

综上所述，对于术后患者产生的巨细胞病毒感染致间质性肺炎，要做到早预防、早发现、及时就医诊治，才能早日脱离生命危险，降低死亡率。

参考文献

[1] 曹彬，袁远，刘世超.巨细胞病毒感染致亚急性重型肝炎及间质性肺炎一例[J].肝脏，2008，8（1）：22—22.

[2] 李明，李明霞.面罩压力支持辅助通气对COPD稳定期患者的康复治疗作用[J].四川医学，2000，21（2）：1093—1094.

[3] 谢万灼.骨髓移植后巨细胞病毒感染的防治研究[J].国外医学：输血与血液学分册，2001，24（1）：69—71.

篇9

【关键词】 茵陈；，，抗病毒作用；，，巨细胞病毒，

摘要： 目的：探讨茵陈水溶性提取物溶液体外抗人巨细胞病毒(HCMV AD169)的效应。方法：采用细胞病变（CPE）抑制法观察茵陈水溶性提取物溶液对HCMV AD169 毒株的抑制作用，使用MTT比色法检测细胞的损伤程度，并利用吸光度（A）值评价茵陈水溶性提取物溶液的抗HCMV 的效应。结果：茵陈水溶性提取物溶液半数中毒浓度(TC50)为904.49 mg・L-1 ，半数有效浓度(IC50)为195.11 mg・L-1mg・L-1 ，治疗指数(TI)为4.64 。茵陈水溶性提取物溶液具有抗HCMV 的作用，且其作用随药物浓度的增高而增强。结论：体外实验证实，茵陈水溶性提取物是理想的抗HCMV 中药。

关键词： 茵陈； 抗病毒作用； 巨细胞病毒

巨细胞病毒（cytomegalovirus）是一种疱疹病毒科β属的双螺旋DNA病毒，在自然界广泛存在。正常人中CMV的潜伏感染率很高，血清学检查阳性率达40%~90%。普通人群感染后并不表现出症状，但在免疫缺陷或免疫抑制人群中却有极强的致病性， 肾移植后有症状的临床感染发病率是20%～60%，如果没有有效治疗，死亡率可高达90%。在器官移植术后，尤其在使用免疫抑制剂的情况下，受体感染CMV的机率更高［1］，甚至引起严重的CMV 疾病。CMV病治疗目前国内外都以更昔洛韦作为首选［2］，而目前常用的更昔洛韦等几种西药都存在毒副作用大、价位高、长时间使用耐药等缺点，临床观察表明在更昔洛韦耐药病人中易产生严重的并发症， 包括异体移植物的丧失、持久的视力损害等的发生率高达80%［3］。而传统的中药制剂毒副作用小，价格低廉，服用方便，同时还有其他如抗菌、提高免疫力等效能。本研究所采用CPE和MTT方法观察并测定茵陈水溶性提取物溶液对HCMV AD169 毒株液的抗病毒效用，为发现有效药物应用于临床防治巨细胞病毒感染提供实验依据。

1 材料与方法

11 材料

111 人胚肺成纤维细胞(HEL) 由山东省医学科学院基础研究所微生物研究室提供。实验所用为413代细胞。细胞生长液为RPMI1640溶液加10 %新生小牛血清，200 kU・L-1青霉素，200kU・L-1链霉素。细胞维持液为RPMI1640溶液加2%新生小牛血清，所加抗生素同生长液。

112 病毒 HCMVAD169 由山东医学科学院基础研究所微生物研究室提供，按常规增殖至实验需求量，测定半数组织培养感染数量TCID50 = 10-3.71。

113 药物 注射用更昔洛韦(GCV)购于广东阳江制药有限公司， 批号：国药准字H20033717，粉剂，每支250 mg。将GCV 溶于注射用水中，配制成50 g/L 浓度，临用时用维持液配成不同浓度的溶液。茵陈水溶性提取物由北京师范大学资源学院资源药物工程研究中心提供，临用时用维持液配成不同浓度的溶液。

114 主要试剂 MTT［3(4 ，6二甲基噻唑2xl )2 ，5乙苯基四唑溴盐］、新生小牛血清、胰蛋白酶、Hank氏液、HEPES及二甲基亚砜(DMSO)均购自北京鼎国生物技术公司; RPMI1640粉剂购自GIBCO。

115 主要仪器设备 超级酶标测试仪购自美国，型号规格550;二氧化碳培养箱购自美国，型号规格Nu1700E。

12 方法

121 病毒感染性滴度的测定 取经24小时培养后生长良好的HEL细胞，加入96孔板中，每孔100mL(约1.5×105/孔)，将培养板置于5%CO2培养箱中，37 ℃培养18小时，待细胞长成单层，将病毒原液以10倍递次稀释法［4］稀释成9种不同浓度 (10-1 ，10-2 ，10-3 ，10-4 ，10-5，10-6 ，10-7，10-8，10-9)，每个稀释度设8个孔，将9种不同浓度的病毒液分别接种到长成单层HEL细胞的96孔板，每孔25μL，，置于5 % CO2恒温培养箱内， 37℃吸附1h 后，弃上清，以Hank氏液洗3次，加维持液0.1 mL/孔，同时设细胞对照孔8孔，置37 ℃，5 % CO2培养箱培养，每日检查病毒生长情况，在光学倒置相差显微镜下观察细胞的形态变化并记录特征性细胞病变(CPE) 的孔数，12d 后记录结果。用ReedMuench 法［5］计算病毒的半数感染量(TCID50) 。

ReedMuench 法计算公式：TCID50=10-［（H－R）/（H－L）+E］

注：R为计算的死亡率，H为略高于50%的死亡率，L为略低于50%的死亡率，E为对应H死亡率的负指数。

122 药物细胞毒性试验 取生长良好的HEL细胞，将细胞加入96孔板，每孔100μL(约1.5×105/孔)，待细胞长成单层后，同步化24h，用未含抗生素的维持液将GCV(药物对照组) 稀释成200， 100， 50， 25， 12.5， 6.25，3.2mg・L-1等7个浓度;将茵陈水溶性提取物溶液亦稀释成2000，1000，500，250，125，63，32mg.L-1等7个浓度，将各浓度药物以每孔200μl加入培养板，每个浓度设4孔做实验孔，同时设正常细胞对照组各4孔。细胞MTT比色法：以CPE法观察记录药物对HEL细胞的毒性结果后，每孔加入MTT 染液20μL（5mg/ml） ，置5 % CO2 培养箱中，37 ℃培养4h ，可见细胞内形成甲赘结晶，弃染色液， 每孔加入DMSO 150μL ，振荡10 min ，直至紫蓝色沉淀(甲赘)充分溶解后，在超级酶标仪490 nm波长处测吸光度(A) 值，计算各药物浓度时TC50及细胞的存活率。试验重复3次，取3次平均值作为试验结果。

123 药物体外对病毒增殖的抑制作用 取生长良好的HEL ，以每孔100μL ( 约9.5 ×104个细胞/ 孔)的细胞悬液加入96孔板， 5% CO2培养箱中37 ℃培养24h ，细胞长成单层，同步化24h 后以每孔约100 TCID50攻击量攻击细胞，于5% CO2培养箱中， 37 ℃吸附1h，弃上清;将药液以低于IC50作8个稀释浓度分别加入细胞孔中，每孔150 μL ，每一稀释度设8孔，同时设立细胞对照组、病毒对照组;更换维持液隔天1 次;在5% CO2培养箱中， 37 ℃培养约8 d ，待病毒对照组细胞病变达到70%~80% 时，每孔加入MTT20μL ，继续培养4h ，吸弃上清，每孔加入DMSO150μL ，振荡10 min ，在超级酶标仪490 nm波长下测吸光度(A) 值， 按下列公式计算细胞存活率及治疗指数(TI)并采用用统计学软件SPSS11. 5 的Probit 回归法计算半数有效浓度( IC50) 。试验重复3 次，取平均值作为试验结果。

细胞存活率( %) = (试验组A 值/ 对照组A 值) ×100 %

TI = TC50/ IC50

124 光学倒置相差显微镜观察细胞的形态学变化 细胞培养96h后，IC50下，光学倒置相差显微镜下观察并比较各组的细胞形态。

13 统计分析

使用SPSS11.5 专业统计软件进行数据分析。实验数据以平均数±标准差(±s)表示，各试验组与病毒对照组间差异性采用t检验，P

2 结果

21 药物的细胞毒性

GCV、茵陈水溶性提取物溶液分别在50mg・L-1 ，500 mg・L-1以内均未见明显的细胞毒性作用，但经较高浓度的药物作用后，细胞死亡数增加，药物有明显的细胞毒性作用。GCV 及茵陈水溶性提取物对HEL 细胞毒性作用表现为:细胞变大变圆，颗粒增多，少量细胞聚集成团，培养液混浊，折光性增强以及吸光值明显改变。注射用更昔洛韦200，100，50，25，12.5，6.25，3.2mg・L-1对HEL 细胞的细胞存活率分别为4.15%，66.8%，82.6% ，90.1% ，97.8%，98%，99%；茵陈水溶性提取物溶液不同药物浓度时(2000，1000，500，250，125，63，32mg.L-1) 对HEL 细胞的细胞存活率分别为18.6%，51.7%，81.8%，87.5%，90.8%，98%，100%。用统计学软件SPSS11. 5 的Probit 回归法，计算药物的半数毒性浓度TC50分别为98.8mg・L-1 和904.49 mg・L-1 。

22 GCV 及中药对巨细胞病毒增殖的抑制作用

HCMV 对HEL 的CPE 的表现为细胞肿胀，变大变圆，折光性改变，胞浆内颗粒增多。将GCV 以50， 25， 12.5 ，6.25，3.2mg・L-1 ; 茵陈水溶性提取物溶液以500，250，125，63，32mg.L-1进行抑制HCMV 实验， 大于32mg.L-1浓度的茵陈水溶性提取物溶液均表现出较强的抑制病毒对细胞的病变作用。经统计分析，5种不同浓度下茵陈水溶性提取物溶液均具有抗病毒作用，结果见表1。用统计学软件SPSS11. 5 的Probit 回归法，计算出GCV、茵陈水溶性提取物溶液对HEL细胞的半数有效浓度( IC50 ) 分别为9.6mg・L-1 ， 195.11 mg・L-1 。同时，采用前述的公式可计算出GCV、茵陈水溶性提取物溶液对HEL 细胞的治疗指数(TI) 分别为10.29， 4.64。

表1 GCV和茵陈水溶性提取物溶液抗巨细胞病毒效应（测定OD值）（略）

注：与病毒对照组比较，* P

23 茵陈水溶性提取物溶液及GCV 抗巨细胞病毒作用的比较

在IC50下，检测茵陈水溶性提取物溶液和GCV 抗巨细胞病毒的作用。经比较，发现茵陈水溶性提取物溶液的抗巨细胞病毒作用(A值) 与GCV组比较差异均有显著性(P

病毒抑制率=（药物处理组OD 值-病毒对照组OD 值）/（细胞对照组OD 值- 病毒对照组OD 值）×100 %

24 不同药物致HEL的形态学变化

细胞培养96h后，IC50下，光学倒置相差显微镜下可见：细胞对照组细胞贴壁生长，增殖活跃，细胞成梭型紧密排列，有极少量圆形增殖细胞，见图1；病毒对照组大量细胞变圆并脱离瓶壁，还可见到少量细胞碎片，仅少量细胞贴壁，无增殖细胞，见图2；茵陈水溶性提取物+病毒组大部分细胞贴壁生长，见一些圆型细胞在液体中漂浮，约45%细胞变成圆型或发生肿胀，其余贴壁细胞未见异常变化，见图3；更昔洛韦+病毒组细胞均贴壁生长，约20%细胞变成圆型或发生肿胀，其余细胞未见明显异常变化，见图4。4组细胞的形态学改变形象表明茵陈水溶性提取物具有抗HMCV的效用，其对HMCV的抑制作用较更昔洛韦弱。

图1 细胞对照组(×40)（略）

图2 病毒对照组(×40)（略）

图3 茵陈+病毒组(×40)（略）

图4 更昔洛韦+病毒组(×40)（略）

3 讨论

中药茵陈为菊科植物茵陈蒿(Artemisia capillarisThunb)或猪毛蒿(Artemisia Scoparia Wald st. et Kit. 又名滨蒿) 的干燥地上部分，首载于《神农本草经》，性微寒，味苦、辛。有清热利湿，利胆退黄的功效。主要用于黄疸尿少，湿疮瘙痒，传染性黄疸型肝炎等症，是临床上常用的保肝中药。近年来有关茵陈的化学成分及药理作用的研究报道甚多，一些新的有效成分及药理作用不断被发现，茵陈除具有利胆保肝的作用外，还具有抗病原微生物、抗癌、降血脂、抗动脉粥样硬化(AS) 、兴奋平滑肌等多方面的活性。复方茵陈一直都是解放军302医院乙型肝炎治疗的首选药物。

本研究的体外实验证明， 茵陈水溶性提取物溶液能有效抑制HCMV 在细胞内的繁殖。其半数有效浓度为195.11 mg・L-1，治疗指数为4.64。与病毒组比较，有显著性差异(P

姚艳红等［6］研究表明茵陈可抑制2.2.15细胞HBsAg 和HbeAg的复制和表达，对细胞培养上清和细胞内DNA复制有抑制作用，该药在抗HCMV国内外尚无报道。本研究表明， 茵陈单体溶液能有效抑制HCMV 在细胞内的繁殖。姚艳红等［6］研究认为该药抗乙肝病毒的作用机理可能是抑制细胞内的DNA复制。该药抗HCMV机制可能与之有相似之处，但仍需深入研究。

综上所述，茵陈水溶性提取物溶液抗HCMV的效应尽管比更昔洛韦弱，但其作为中草药提取物有着价位低、毒副作用小、口服方便、长期使用不易耐药等特点，本实验已经证实了茵陈水溶性提取物溶液对HCMV有较明显的抑制作用，待深入研究其抗病毒的作用机理和进行动物实验研究取得疗效后，该药可推广到临床进行预防HCMV感染和治疗CMV病，对肾移植术后巨细胞病毒感染的防治也将取到积极作用。

参考文献

1 Kazory A， Ducloux D， Coaquette A， et al. Cytomegalovirusassociated venous thromboembolism in renal transplant recipients:a report of 7 cases. Transplantation， 2004，77(4) : 597~599.

2 Palmer SM， Grinnan DC， Diane Reams B， et al. Delay of CMV infection in highrisk CMV mismatch lung transplant recipients due to prophylaxis with oral ganciclovir. Clin Transplant， 2004， 18(2) :179~185.

3 Limaye AP ， Corey L ， Koelle DM， et al. Emergence of ganciclovirresistant CMV disease among recipients of solidorgan transplant. Lancet，2000，356(9230):645~649.

4 黄祯祥，主编.医学病毒学基础及实验技术. 科学出版社， 1990，267.

篇10

【关键词】新生儿；血小板减少；巨细胞病毒；酶联免疫吸附法

巨细胞病毒感染(cytomegalovirus infection)是人巨细胞病毒(human cytomegalovirus，HCMV)引起的一种全身性感染综合征。因受染细胞的典型改变是细胞变大，核内和胞浆内出现包涵体，也是引起先天性畸形的重要原因之一。在我国，0~3岁幼儿HCMV感染率高达83.2%[1]，且可长期潜伏在体内形成潜伏感染，当身体免疫功能低下时，HCMV常可活动复制，从而引起严重的疾病[2]。笔者通过检测新生儿血小板减少症(neonatal thrombocytopenia，NTP)患儿的HCMV-IgM，来探讨HCMV感染与新生儿血小板减少的关系，并对其临床特点及治疗方案进行分析，以期有助于临床诊治。

1资料与方法

1.1一般资料2010年2月-2011年2月经本院新生儿科诊治的NTP患儿82例，所有患儿外周血血小板计数均

1.2临床表现82例患儿中58例(70.7%)有出血症状，以皮肤出血(紫癜、出血点、脐带残端渗血等)为主，9例(10.9%)有严重出血症状，其中消化道大出血7例(8.5%)，颅内出血2例(2.4%)。

1.3检测方法采用ELIAS法检测，试剂为德国欧蒙公司生产的原装试剂，操作严格按照说明书进行。

1.4统计学处理采用SPSS 17.0软件进行分析处理，计量资料以(x±s)表示，采用两独立样本t检验，计数资料以百分数表示，采用 字2查验，P

2结果

2.1足月儿与早产儿HCMV的感染率82例NTP患儿中，31例患儿感染HCMV，感染率为37.80%；其中足月儿中HCMV感染19例(19/59)，早产儿中感染12例(12/23)，早产儿与足月儿感染率间差异有统计学意义( 字2=4.95，P

2.2有无合并HCMV感染的患儿血小板计数比较31例合并HCMV感染患儿外周血血小板计数为(0~86)×109/L，平均为(25.32+14.26)×109/L；51例未合并HCMV感染患儿外周血血小板计为(1~91)×109/L，平均为(46.48+17.62)×109/L，两者比较差异有统计学意义(t=4.131，P

2.3治疗与转归所有患儿接受地塞米松(0.5~1 mg/kg)+静脉用人丙种球蛋白(0.25~0.40 g/kg)常规治疗，其中20例HCMV感染患儿加用更昔洛韦(5 mg/kg，1次/12 h)治疗；14 d后，加用更昔洛韦治疗的患儿PLT上升时间为4~8 d，平均(5.3+1.7)d，无一例复发；未应用更昔洛韦的患儿PLT上升时间为5~12 d，平均(7.1+2.2)d，其中3例复发应用更昔洛韦治疗的患儿病程明显缩短(t=6.532，P

3讨论

NTP是新生儿出血的主要原因之一，也是新生儿期常见的危急症，其病因复杂，病情急，早期诊断、寻找病因对减少严重并发症及降低死亡率十分重要。HCMV感染致血小板减少的发病机制尚未完全阐明，其可能的机制包括自身免疫反应及对骨髓的抑制作用。有学者认为两种机制都存在，HCMV感染早期引起血小板减少是骨髓抑制的结果，而感染晚期血小板减少可能是由于免疫机制所介导[5]。林雯等[6]研究发现，血小板患者巨核细胞内存在HCMV复制。HCMV可直接感染巨核系祖细胞，抑制其增殖与分化，从而成为引起血小板减少的原因之一。NTP患儿多以皮肤黏膜出血点为首发症状就诊。HCMV相关性NTP患儿的临床特点包括：可见肝脾肿大、黄疸、瘀斑或紫癜、脉络膜视网膜炎、小头畸形等，血象除PLT降低外可伴Hb及WBC降低，骨髓象多有巨核细胞减少，淋巴细胞比例偏高，异性淋巴易见。ELISA方法测定HCMV-IgM具有特异性强、灵敏度高等特点[7]，无论对活动性HCMV感染或潜在性HCMV感染都有确诊意义，并可进行HCMV感染的动态监测，指导用药疗程。

更昔洛韦(GCV)对HCMV具有极强的抗病毒活性，可终止病毒DNA的复制[8]。因此，对存在HCMV感染的NTP患儿在接受地塞米松(DEX)及静脉用人丙种球蛋白(IVIG)常规治疗基础上加用GCV治疗可缩短病程。对于单纯血小板减少的HCMV感染患儿用足量GCV诱导治疗14 d即可有效清除病毒，但对同时伴有其他脏器损害的严重HCMV感染患儿则不应单纯以血小板上升为治疗目标，应继续坚持维持治疗至其他临床症状及体征消失，脏器功能恢复，达到临床治愈为最终目标。目前HCMV感染越来越受临床医师的重视，对其研究也逐渐深入，HCMV感染是抑制患儿细胞免疫功能，导致病情反复发作的重要原因之一[9]。因此，对血小板减少患儿尤其婴儿应警惕HCMV感染，可进行常规筛查以及早发现，正规治疗，减少HCMV对其他器官的损害，提高患儿生存质量。

参考文献

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[2] 王晓欢，郝国平，常虹，等.婴儿特发性血小板减少性紫癜与巨细胞病毒感染[J].中国小儿血液与肿瘤杂志，2008，13(2)：80-81.

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[4] 段小炼，徐酉华.巨细胞病毒感染与特发性血小板减少性紫癜相关性的研究[J].中国小儿血液与肿瘤杂志，2009，14(2)：85-87.

[5] 过毅.婴儿急性特发性血小板减少性紫癜与巨细胞病毒感染的相关性探讨[J].中国小儿血液与肿瘤杂志，2006，11(4)：207-209.

[6] 林雯，肖燕，刘勤.血小板减少性紫癜患儿巨细胞病毒感染的研究[J].中国小儿血液，2002，7(2)：49-51.

[7] 李连青，朱庆义，周向红，等.荧光定量聚合酶链反应在患儿巨细胞病毒感染快速检测中的应用[J].中华检验医学杂志，2004，27(6)：36-37.

[8] Svetlana F K，Jaroslan P M，Kirsten C，et al.Human cytomegalovirus，persists in myeloid p rogenitors and is passed to the myeloid progeny in a latent form[J].Br J Haemotol，2004，126(1)：140-147.