妊娠滋养细胞疾病范文

导语：如何才能写好一篇妊娠滋养细胞疾病，这就需要搜集整理更多的资料和文献，欢迎阅读由公务员之家整理的十篇范文，供你借鉴。

篇1

人绒毛膜促性腺激素（human chorionic gondtrophin，HCG）是一种糖蛋白激素，也是目前公认的妊娠滋养细胞疾病（GTD）最重要的肿瘤标志物。其相关分子组成了HCG分子家族［2］。

业已证实［3］：正常妊娠或患GTD时，血液和尿中可出现多种形式的HCG及其降解代谢产物，合体滋养细胞可直接分泌非缺刻HCG（整分子HCG）、非缺刻游离βHCG（F-βHCG）和大分子游离α亚单位。整分子HCG分泌后被与滋养细胞相关性巨噬细胞分泌的缺刻酶分解成缺刻HCG（nicked HCG，HCGn，指在P47与P48之间缺少肽键）由于HCGn不稳定，很快就被分解成为缺刻游离βHCG和游离α亚单位。缺刻游离βHCG最终在肾脏被代谢为核心片段（HCGβcf）。另外，非缺刻游离β还可以由滋养细胞缓慢分泌或由非缺刻HCG代谢而来。在妊娠及GTD患者的血清中除了HCGβcf的浓度极低外，其他各种分子类型的HCG在血中都有一定浓度。正常妊娠时血F-βHCG的水平很低，约占HCG浓度的0.5%~0.9%，患GTD时，由于非缺刻HCG的降解增强会导致F-βHCG的比例异常升高，据报道其水平较正常妊娠时增加4～100倍。因此，当血中测到高浓度F-βHCG时则高度提示有滋养细胞疾病的存在。此外，F-βHCG还可用于葡萄胎、侵蚀性葡萄胎和绒癌的鉴别。研究表明，F-βHCG/总HCG的比值与GTD的类型有强相关性，主要与滋养细胞分化有关，其比值在葡萄胎最低，在绒癌最高。有研究证实［4］：在15个包括绒癌的肿瘤细胞系体外培养液中检测到核心片段（HCGβcf）证明其可直接由肿瘤细胞产生。在葡萄胎清宫术后监测患者血中HCGβcf的浓度能够早期预测恶性滋养细胞疾病的发生。

高糖基化HCG是HCG的一个相关分子，由未分化或低分化的细胞滋养层细胞分泌产生。与规则HCG相比，高糖基化HCG亚基上修饰的糖基比例显著增多，糖基分化质量更大，结构更为复杂。在妊娠初期、妊娠滋养细胞疾病中，细胞滋养层细胞是主要的滋养层细胞，相应的高糖基化HCG水平分泌增多，揭示高糖基化HCG水平与早期妊娠的发展、滋养细胞疾病的发生发展有密切联系。高糖基化HCG具有特殊的侵袭性，在异位妊娠、Down综合征、先兆子痫中也有异常分泌。

国内外关于HCG的测定方法很多，近年来主要为免疫测定方法，包括放射免疫测定法、免疫放射测定法和酶联免疫测定法。随着实验医学的进步，自动化和超速梯度离心法等技术的发展普及，用单克隆抗体进行免疫荧光标记的分光光度测定法已逐渐得到普及。这不仅使测定方法的灵敏度有了大幅度的提高，而且也大大提高了检测的特异性。目前的技术已可以测定HCG的不同亚单位。晚近研究发现：高糖化HCG（hyper-glycosylated HCG）在GTT患者中含量极高［5］，它是绒癌细胞分泌的主要相关分子，其分子含有两个O键连接的寡糖侧链及1个大的N键连接的寡糖侧链，故又被称为侵蚀性滋养细胞抗原（invasive trophoblast antigen，ITA）其对GTT的诊断具有独特的价值。另外，在唐氏妊娠（Down pregnancy）时，ITA的含量也有所增高，而正常妊娠时其血清含量则很低。因此，ITA可作为鉴别正常与异常妊娠的重要指标，尤其对GTD的诊断具有独特的参考价值［6］。

2 端粒酶与GTD

端粒是位于染色体末端的一段富含C的重复DNA序列，它在维持染色体稳定、调节细胞衰老和死亡中期重要的作用。正常情况下人类细胞中测不到端粒酶（telomerase）的活性。在妊娠滋养细胞增殖和生长过程中，具有不同程度的端粒酶活性表达，研究证实在滋养细胞肿瘤的发生、发展过程中端粒酶起到重要的作用［7］。Amezcua等［8］系统研究了端粒酶反转录酶（hTERT）的表达与持续性滋养细胞疾病的相关性。结果发现在持续性滋养细胞疾病患者中均可测出端粒酶活性及hTERT的表达，而在非持续性的葡萄胎患者中，hTERT表达率仅为54%。hTERT的表达与持续性滋养细胞疾病明显相关。此外，葡萄胎患者在清宫术后，如果葡萄胎组织不表达hTERT，则该患者100%不会发展成为持续性滋养细胞疾病。结果说明，检测葡萄胎患者葡萄胎组织中hTERT的表达，在判定患者能否在清宫术后自发性消退方面有潜在的临床价值。研究表明［9］：在侵蚀性葡萄胎及绒癌组织中端粒酶的活性显著高于正常绒毛及葡萄胎组织从而被认为是葡萄胎早期诊断的重要生物学参数。

3 金属蛋白酶及其抑制物与GTD

金属蛋白酶（matrix metalloproteinase，MMP）及其抑制物（tissue inhibitor of metalloproteinase，TIMP）对肿瘤的发生及转移起到重要的作用［10］。在滋养细胞转变为侵蚀性葡萄胎，进而转变为绒癌的过程中，必须多次溶解血管内皮基膜，MMP能降解基膜的IV型胶原，促进恶变及转移的发生。正常情况下MMP以酶原形式与TIMP结合，TIMP活性受到抑制，故MMP的过度表达可作为预测葡萄胎恶变及早期诊断的重要指标之一。Vegh研究发现：与正常胎盘及葡萄胎妊娠相比，绒癌细胞MMP-1及MMP-2表达明显增强，而TIMP的表达明显减弱。李志英等用反转录多聚酶链反应（RT-PCR）技术检测到22例正常早孕绒毛及37例葡萄胎组织中MMP-9、MMP-2、TIMP-1 mRNA的表达量，结果显示：MMP-9/TIMP-1比值在发生恶变的葡萄胎组织中明显高于未发生恶变的葡萄胎组织，认为MMP-9、TIMP-1表达量的比值可作为葡萄胎恶变的一项监测指标［11］。

4 GTD的分子生物学研究进展

随着对人类疾病病因和发病机制研究的不断深入，学者们越来越认识到绝大多数疾病，甚至所有疾病的发生发展都与患者的遗传背景或其改变有关，只有从基因水平去研究疾病，才能找到致病的根本原因，也才能对疾病进行最有效的防治。分子生物学技术的迅速发展，为GTD的研究奠定了坚实的基础。

4.1 葡萄胎的DNA检测技术 PCR、流式细胞术、DNA指纹图，Southern blot Northern blot、FISH等新兴分子生物学技术在医学领域的应用，使GTD的研究已由细胞水平深入到分子水平［12］。遗传学研究证实［13］：葡萄胎作为一种病理生殖现象在遗传构成上有不同于其他肿瘤的特点;完全性葡萄胎（CHM）其染色体DNA完全来自于父源而无母源成分，是由于卵子发育异常所导致的染色体丢失或失活所形成的“空卵”与一个正常（23X）受精后，核内DNA复制加倍而成，或是染色体正常卵与双受精所形成的;前者称为纯合子（homozygte）葡萄胎，染色体核型为46，XX;后者称为杂合子（heterozygote）葡萄胎，染色体核型为46XY或46，XX；有学者认为：杂合子葡萄胎易发展为持续性葡萄胎或发生恶变［14］，另一类葡萄胎即部分性葡萄胎（PHM）则含有父母双方的DNA成分，其中父源DNA为母源的2倍，认为是由于染色体正常的卵子与双受精所致，为三倍体，大多数核型为69，XXY或69，XXX。鼠配子移植试验成功地揭示了葡萄胎发生的机制［15］：将父源或母源早期生殖细胞核移植至不含卵原核的卵细胞内，当受精卵染色体全部来源于母方时，胚鼠可发育成25个中胚叶节阶段，但无滋养细胞生长。而当受精卵染色体全部来源于父方时，其滋养细胞增生活跃。研究证实：父源性基因成分对控制滋养细胞增生是十分重要的，完全性葡萄胎与部分性葡萄胎均可表现为过多的父源性染色体，以致促使滋养细胞的超常增生。

20世纪90年代后期，更为精细的第二代微卫星DNA分析技术问世，该技术可对微卫星DNA序列进行检测、分析。能够迅速、准确地判定葡萄胎的来源［16］，短串联重复序列（short tandom repeat，STR）亦称微卫星DNA（microsatellite DNA），其广泛分布于人类整个基因组中，约占10%左右。其基本构成单位-核心序列1～6bp，呈串联重复排列而成。按核心序列碱基数不同可分别称为单、二、三、四、五、六-核苷酸。其中以（CA/GT）n简称（CA）n重复序列最多，平均每6~60bp的DNA就存在一个（CA）n，重复次数约15～16次。这类基因顺序多位于基因非编码区以及染色体的近端粒区，其高度多态性主要来源于串联重复的数目不同。与其他DNA多态标记一样，微卫星DNA也呈孟德尔共显性方式遗传。

迄今，此类技术已广泛应用于肿瘤分子遗传学研究领域，有学者报道［17］应用PCR-微卫星多态分析方法鉴定葡萄胎DNA的来源，探讨其遗传构成及其与GTD发生、发展之间的关系。

4.2 基因芯片技术 基因芯片（gene chip）又称DNA芯片或cDNA微阵列（cDNA microarry）技术，它是一项划时代意义的生物技术，它综合了分子生物学、免疫学、生物物理化学、微电子技术等学科的最新技术，具有对生物分子快速处理的能力。其具备了信息量大、处理速度快、所需样本量小、污染少等优点。迄今，此项技术已在妇科肿瘤的研究中得到应用［18］。

国内学者［19］应用基因芯片技术，发现复制因子C（replication factor C，RFC）在葡萄胎组织和绒癌中表达水平显著高于正常胎盘组织和绒毛细胞。结合免疫组化SP法检测正常绒毛、葡萄胎、侵蚀性葡萄胎和绒癌组织中RFC2和PCNA（增殖细胞核抗原）蛋白的表达情况结果：葡萄胎、侵蚀性葡萄胎和绒癌组织中RFC2和PCNA蛋白表达水平显著高于正常绒毛，葡萄胎、侵蚀性葡萄胎和绒癌组织中RFC2的表达水平差异无显著性。PCNA与RFC2的表达呈正相关，RFC和PCNA的过度表达可能与滋养细胞肿瘤的生物学行为有关。

5 GTD与分子免疫学研究

人体的免疫系统是由中枢淋巴器官、外周淋巴器官、免疫细胞和免疫分子组成。免疫应答过程依赖于免疫系统中细胞间的相互作用。其包括细胞间直接接触和通过释放细胞因子或其他介质的相互作用。

T淋巴细胞亚群中的CD3+代表全部T淋巴细胞;CD4+则代表辅T细胞亚群（Ts），它能诱导B细胞产生抗体、协助细胞毒性T细胞（cytotoxic T cell，CTL）和巨噬细胞发挥免疫功能;CD8+代表细胞毒性T细胞和抑制性T细胞（Th），在机体抗肿瘤免疫中发挥重要的作用。CD4+/CD8+比值在一定程度上可以间接反映机体细胞免疫的状态［20］。近年来免疫与滋养细胞肿瘤的关系已受到人们的关注。

滋养细胞能分泌多种细胞因子，分子水平的研究结果表明：滋养细胞具有广泛的免疫调节作用［21］。

细胞因子（cytokine，CK）泛指由任何细胞（包括肿瘤细胞）产生和分泌的能调节细胞生长分化，调节免疫功能的小分子多肽的统称。细胞因子基因可通过激活免疫细胞、诱导细胞因子，以调节增强机体固有的免疫功能和抗病能力，并具有一定程度的直接抑制肿瘤的效应。在妊娠情况下，胎盘滋养细胞可分泌多种细胞因子，如IL-1、IL-6、IL-10、TNF-α、VEGF、EGFR等。

综上所述，经过学者们多年的不懈努力。GTD的研究已取得了可喜的进展，肿瘤标志物在GTD的发生发展、诊断、治疗与随访监测中占有十分重要的地位。这些标志物有选择性地联合检测并结合临床、病理、影像学检查，可帮助临床医师提高对滋养细胞肿瘤诊断的准确性与正确选择合理治疗方案，从而进一步提高滋养细胞肿瘤的治疗效果。

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篇2

[关键词] 葡萄胎；瘦素；妊娠滋养细胞肿瘤；恶变

[中图分类号] R737.33 [文献标识码] A [文章编号] 1674—4721（2012）09（a）—0111—02

葡萄胎是一种来源于胎盘滋养细胞的良性疾病，但具有生长活跃及潜在恶变的特点，能恶变为侵蚀性葡萄胎和绒毛膜癌。目前普遍认为不应将预防性化疗作为常规应用于所有葡萄胎患者，而只对有恶变倾向者给予预防性化疗。因此，需要一种理想的指标来预测葡萄胎的恶变。近年研究发现，瘦素（LEP）除了刺激下丘脑饱食中枢调控动物的摄食行为和脂肪代谢外，还具有促进细胞增殖分化，增加细胞的侵袭性，促进血管形成，调节机体免疫和强大的生殖调节功能，有可能在某种因素影响下刺激滋养细胞过度增生和异常分化，介导血管生成等作用，并参与滋养细胞疾病的发生发展。本研究探讨葡萄胎恶变相关因素及检测LEP在妊娠滋养细胞疾病中表达情况，探讨其在预测葡萄胎恶变中的价值。

1 资料与方法

1.1 一般资料

2000年6月～2011年6月本院收治妊娠滋养细胞疾病患者170例，发病年龄22～46岁。其中，葡萄胎125例（包括部分性葡萄胎32例，完全性葡萄胎93例），侵蚀性葡萄胎30例，绒毛膜癌15例。对葡萄胎患者进行1～2年随访，恶变7例。另选取正常早孕（

1.2 试剂

兔抗人瘦素多克隆抗体 Leptin（BS—0108R）SP 试剂盒、DAB 显色试剂盒、封闭用正常兔血清均购于北京博奥森生物有限公司。

1.3 方法

对170例妊娠滋养细胞疾病组织蜡块切片采用免疫组织化学方法（SP法）检测，观察LEP的表达情况，实验操作步骤按试剂盒说明书进行。并分析7例发生恶变的葡萄胎患者的发病年龄、子宫大小、卵巢黄素囊肿、血β—人绒毛膜促性腺激素（hCG）等因素。

1.4 结果判定

LEP蛋白均为胞浆内充满棕黄色颗粒，判断阳性采用半定量标准，以双盲法进行评分。每张切片随机观察 10 个有代表意义的高倍视野，每个视野计数 100 个细胞中的阳性细胞数，取平均值作为结果。表达阴性和阳性根据细胞染色强度和染色细胞所占面积，即两者积分之和来判断。染色强度分为：不染色为 0，轻度染色为 1，中度染色为 2，强度染色为 3。染色面积分为：无细胞染色为 0，< 25%细胞染色为1，25%～50%细胞染色为2，> 50%细胞染色为 3。二者积分之和为 0～2为表达阴性，两者积分之和 > 2为阳性。

1.5 统计学方法

应用SPSS 10.0软件进行统计分析，等级资料用秩和检验，以P < 0.05为差异有统计学意义。

2 结果

LEP在正常早孕绒毛、部分性葡萄胎、完全性葡萄胎、侵蚀性葡萄胎、绒毛膜癌组织中均有表达，但随着滋养细胞恶性程度的增加，其染色阳性的细胞数量及表达强度（+～+++）均增加，并且其阳性部位有从滋养细胞层逐步转移至合体滋养层的现象，差异有统计学意义（χ2=23.49，P < 0.05）。见表1、2。

7例发生恶变的葡萄胎患者中，年龄40岁4例（57.14%）。β—hCG持续阳性5例（71.43%），持续时间超过14周；β—hCG转阴后又复发阳性2例（28.57%）。子宫明显大于停经月份5例（71.43%）。发生卵巢黄素囊肿6例（85.71%）。病理结果显示，滋养细胞过度增生5例（71.43%）。

3 讨论

滋养细胞是人体极为奇特的细胞，类似于肿瘤细胞，有增殖、分化、侵袭的特点。妊娠滋养细胞疾病，包括葡萄胎及妊娠滋养细胞肿瘤（GTT）。GTT包括侵蚀性葡萄胎、绒毛膜癌及胎盘附着部位滋养细胞肿瘤。形成肿瘤的滋养细胞与正常妊娠的滋养细胞在形态和功能上极为相似。

瘦素（Leptin）是由肥胖基因（ob）编码的调节能量代谢的分泌型蛋白质，由 167个氨基酸残基组成，原来认为主要由白色脂肪组织合成分泌，但随后发现下丘脑、垂体、胃黏膜、骨骼肌、合体滋养细胞、乳腺上皮也可以分泌瘦素，瘦素可以通过内分泌、旁分泌、自分泌的方式作用于多种组织上的特异性受体而发挥作用。瘦素除了刺激下丘脑饱食中枢调控动物的摄食行为和脂肪代谢外，还具有促进细胞增殖分化，增加细胞的侵袭性，促进血管形成，调节机体免疫和强大的生殖调节功能[1—2]，Sierra—Honigmann MR等[3]报道了 Leptin在体外可促进人脐静脉内皮细胞的增殖、迁移和分化，刺激毛细血管芽的形成，在体内可诱导新生血管的形成，证明 Leptin有促进血管生成的作用，以上几点是肿瘤发生发展的必备条件。本免疫组化染色发现，人早孕绒毛组主要在细胞滋养细胞有瘦素表达，随着滋养细胞恶性程度的增加，其阳性部位有从滋养细胞层逐步转移至合体滋养层的现象，提示合体滋养细胞可以产生和分泌瘦素，并与血hCG值存在显著正相关性（r = 0.342，P < 0.05），这与 Senaris R[4]的研究一致。根据当代研究，葡萄胎组，侵蚀性葡萄胎组和绒毛膜癌可能是一种疾病的不同发展阶段，即良性葡萄胎恶变为侵蚀性葡萄胎，而进一步发展为绒毛膜癌[5—6]。本实验发现，瘦素在早孕组、葡萄胎组、侵蚀性葡萄胎组和绒毛膜癌组滋养细胞的表达依次增强，提示这些来源于 GTDs的合体滋养层细胞也能够分泌瘦素，且滋养细胞的恶性生物学行为与瘦素的表达强度之间存在着一定的相关性。本实验有望为滋养细胞疾病的靶向治疗提供新的思路。

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篇3

[关键词]围绝经期妊娠;滋养细胞;肿瘤;临床分析

[中图分类号]R737.3

[文献标识码]B

[文章编号]1006-1959(2009)11-0116-01

1 病例介绍

例,49岁,孕2产1,月经规律,因停经77d,门诊B超提示妊娠滋养细胞疾病可能,故收住院。既往口服避孕药避孕20年,查体:子宫增大如孕60d,表面光滑,活动好,无压痛。尿HCG阳性,血HCG>20万u/l,B超提示宫腔内充满大小不等的蜂窝状回声,胸片未见异常。行清宫术,病理报告为葡萄胎,滋养细胞中度增生。一周后血HCG下降为4000u/l,B超提示子宫、附件未见异常回声。两周后复查血HCG值2万u/l,胸片正常,盆腔B超示:子宫前壁有直径2cm混合回声区。二次清宫术中未刮出组织物,诊断侵蚀性葡萄胎。患者要求保留子宫,故行5-氟尿嘧啶单药化疗三个疗程,定期随访至今。目前血HCG4.5u/l,胸片及盆腔B超均未见异常。

2 讨论

围绝经期GTD十分少见,国内也仅为个案报道,因病例少见,其发生率难以统计。围绝经期妇女卵巢有不同程度退行性变,40岁以上妇女妊娠发生葡萄胎危险性增加,其恶变率可达37%,50岁以上妇女妊娠发生葡萄胎的危险性是20～35岁患者200倍,其恶变率可达56%[1]。当患者出现月经周期延长或不规则时,除进行阴道盆腔检查及B型超声波检查外,要重视血、尿HCG测定,以减少误诊漏诊,防止引起不良后果。清宫时为防止手术的各种并发症,应在配血及开放静脉通道的条件下进行手术。对有高危因素的葡萄胎患者进行预防性化疗可明显降低恶变率,改善预后。

篇4

冯海琪(主持人，主治医师，妇科主任)：今天我们讨论1例葡萄胎后一个月转为绒癌III期的病例，通过病例的回顾性分析，加强滋养细胞疾病的诊断、鉴别诊断及治疗方案的选择原则，审视在该患者诊断和治疗过程中存在的不足，总结经验教训，以提高我们对滋养细胞疾病的诊治水平。首先请住院医生汇报病例。

卢朝霞(住院医师)：患者36岁，因“停经15周，阴道少许流血3 d。”于2010年1月7日入院。患者末次月经2009年9月24日，停经1+月时间有少许阴道流血，无下腹痛，停经后有恶心，无呕吐，未行诊治。1月4日无诱因下出现少许阴道流血，无下腹痛，而来我院门诊，查B超示：考虑葡萄胎超声改变，双附件未见明显异常。患者孕5产3，末次妊娠2008年6月，系人工流产。入院后妇检：外阴已婚已产式，阴道通畅，宫颈肥大，I度糜烂，无接触性出血，未见明显着色，子宫前位，如孕4个月，无压痛，双附件未及明显包块，无压痛。宫高14 cm，未闻及胎心音。查血HCG：≥200000 miu/ml，三大常规、凝血四项：均正常。心电图示：正常心电图。胸片：两肺纹理稍增多。入院后于1月9日在输液情况下行第一次刮宫术，术后病理检查示：水泡状胎块(滋养细胞轻-中度增生)。术后予抗炎、促子宫复旧治疗。1月11日B超示：宫内光团待查：残留物？积血？(33*23 mm)，双附件未见明显异常。于1月13日复查血HCG：25979.41 miu/ml，于1月15日行第二次刮宫术，术后病检示：血凝块纤维素样坏死，蜕膜组织及滋养细胞轻-中度增生。于1月16日自动出院。1月28日门诊复查血HCG：981.62 miu/ml。于2月12日门诊复查B超示：宫内光团(32*21 mm)，行第三次刮宫术，术后病检示：纤维素样坏死，退变的滋养细胞及分泌期宫内膜。胸片示：双肺纹理增多，两下肺斑点状高密度影。2月16日起无诱因下出现干咳，无发热及胸闷等不适。2月20日复查血HCG：1137.76 miu/ml。2月23日门诊CT示：双肺多发性结节，结合病史考虑转移。于2月23日第二次入我科。本次讨论的目的为明确患者的诊断及下一步的治疗及预后估计。

阳清香(主治医师)：滋养细胞疾病(GTD)是一组来源于胎盘滋养细胞的疾病，根据组织学将其分为葡萄胎、侵蚀性葡萄胎、绒毛膜癌(简称绒癌)和胎盘部位滋养细胞肿瘤1。妊娠滋养细胞肿瘤(GTN)与妊娠有关，是指胚胎的滋养细胞发生恶性病而形成的肿瘤(包括侵蚀性葡萄胎、绒癌、胎盘部位滋养肿瘤)，多见于生育期妇女，少数发生于绝经后。一般继发于葡萄胎(60%)，也于发生于流产(30%)或足月分娩后(10%)或异位妊娠。但也有极少数滋养细胞肿瘤来源于卵巢或，称为非妊娠性绒癌。妊娠滋养细胞肿瘤临床诊断主要依靠在葡萄胎清除后或妊娠后的人绒毛膜促性腺激素(HCG)升高或持续不降及影象学检查的转移病灶，组织学仅为诊断侵蚀性葡萄胎或绒癌的客观证据2。患者入院时血HCG：≥200000 miu/ml，系高危人群，第一次出院时血HCG：25979.41 miu/ml，出院后随诊3次血HCG均下降不明显，第四次复查血HCG不降反升高达10%，结合患者干咳及CT结果，考虑绒癌III期的诊断成立。绒癌血行转移多见，肺转移为主，但如此短期内葡萄胎转为绒癌的病例实属罕见，仍考虑为绒癌而非侵蚀性葡萄胎。治疗上可行化疗6~8个疗程，化疗药物可选择MTX+更生霉素+CTX方案(5 d一疗程)，必要时巩固化疗一至两个疗程。

江晓丽副主任医师：侵蚀性葡萄胎只发生于葡萄胎后，而绒癌除继发于葡萄胎外，还可发生于足月产后、流产后(包括宫外孕、自然流产或人工流产)。当葡萄胎排空后出现阴道出血或转移部位的相应症状和体征，同时伴有HCG升高时，可以是侵蚀性葡萄胎，也可能是绒癌。鉴别点有：一、两者在距葡萄胎排空的时间上有差别；二、组织学检查，凡在镜下可找到绒毛结构者为侵蚀性葡萄胎，若只见大量滋养细胞，看不到绒毛结构，即为绒癌3。此患者第一次出院后一直门诊随诊血HCG情况，并于2月12日行第三次刮宫，术后病理提示为退变的滋养细胞，结合出院后4次血HCG呈平台状态，妊娠滋养细胞肿瘤诊断明确，加上CT结果，绒癌III期诊断成立，但如此短期内葡萄胎转为绒癌的病例实属罕见。可建议患者转到上级医院治疗。

冯海琪(主治医师，妇科主任)：妊娠滋养细胞肿瘤包括侵蚀性葡萄胎、绒毛膜癌和胎盘部位滋养细胞肿瘤,并以前两者多见。在化疗药物用于临床治疗前,患者的死亡率极高,尤以绒毛膜癌为甚,凡有转移者几乎全部在短期内死亡,死亡率高达90%左右,是严重威胁妇女生命的妇科恶性肿瘤之一［4］。绒癌的解剖学期分为I期：病变局限于子宫；II期：病变扩散，但仍局限于生殖器官(附件、阴道、阔韧带)；III期：病变转移至肺，有或无生殖系统病变；IV期：所有其他转移。绒癌的分期是了解病情发展、制定治疗方案与评价疗效的重要依据。该患者第一次入院时血HCG：≥200000 miu/ml，不排除第一次入院时已合并是绒癌的可能，故出院随诊极其重要，此患者病情发展极快，绒癌III期诊断明确。化疗是主要治疗方法，目前国内常用的一线化疗药物有MTX(甲氨蝶呤)、放线菌素-D、KSM(更生霉素)、5-FU、CTX(环磷酰胺)、VCR(长春新碱)、VP-16(依托泊苷)等。绒癌III期联合化疗的方案繁多，国内应用较为普遍的方案主要有二联方案(如5-FU+KSM)、三联方案(如5-FU+KSM+MTX)及EMA-Co方案，BEP方案(博来霉素或平阳霉素十足叶乙甙+顺铂或卡铂)等。

容玉凝(副主任医师，原妇产科主任)：葡萄胎的高危因素有：①血HCG：≥100000 miu/ml；②子宫明显大于相应孕周；③卵巢黄素化囊肿直径≥6 cm3。该患者系高危人群，目前的诊断是绒癌III期相对准确，该患者距末次妊娠1+年，第一次入院时血HCG：≥200000 miu/ml，术后第一病理检查结果提示：水泡状胎块(滋养细胞轻-中度增生)。第一次出院时血HCG：25979.41 miu/ml，可行预防性化疗(MTX或5-FU)一个疗程。现患者已有远处转移，系III期，必须行联合化疗。需强调的是化疗的个体化原则，除全面了解其疾病的期别、转移部位、高危因素、并发症、生理状况外，还应充分考虑患者的经济、心理等因素。该患者临床III期，可选择5-FU+KSM联合化疗或BEP方案，但要注意化疗的毒副作用，如MTX可致口腔炎、伪膜性肠炎、血便等，5-FU可致胃肠反应、骨髓抑制等。BEP方案原为治疗卵巢恶性生殖细胞肿瘤(包括卵巢原发性绒癌)的一线方案，在治疗妊娠恶性滋养细胞肿瘤疗效尚不太清楚，据报导对其他药物耐药或复发病例可获得满意的疗效，化疗不良反应轻，患者易接受［5］。另外,可行ER检测，ER表达与GTD恶性程度相关,提示对ER的监测有助于判断疗效及预后,且为GTD的激素治疗提供了可行性的理论依据［6］。临床医生要掌握滋养细胞肿瘤的高危因素，真正减少漏诊、漏检率，为患者的健康保驾护航。

冯海琪(主治医师，妇科主任)：通过对本病例的讨论，使我们对滋养细胞疾病的诊断、鉴别诊断、分期与预后评估、治疗等多方面有了更深入地了解。绒癌是人类最早得以治愈并且可保留器官功能的恶性肿瘤之一。早期诊断和及时化疗是治疗成功的关键，临床上我们见到的绒癌绝大多数是发生在葡萄胎刮宫后，通过这个病例分析，对葡萄胎后短期内恶化为绒癌应引起充分的重视，门诊一定要定期随诊，无随诊条件的可行一次预防性化疗。此患者的诊断：绒癌III期。治疗上行联合化疗，方案为MTX+KSM+5-FU或BEP。

参 考 文 献

［1］ 乐杰.妇产科学.人民卫生出版社，2008:291.

［2］ 向阳.实用妇产科杂志,2009,25(5):257.

［3］ 崔满华.中国实用妇科与产科杂志，2010，1005-2216.

［4］ 赵峻,向阳.实用妇产科杂志,2008,24(09).

篇5

【摘要】 目的 探讨葡萄胎中Mel-CAM与滋养细胞黏附、浸润之间的关系以及Mel-CAM标记中间型滋养细胞(IT)的增殖情况。方法 采用双重免疫组化法，检测Mel-CAM标记IT的Ki-67表达情况。结果 葡萄胎中Mel-CAM表达较正常绒毛明显增高，差异有统计学意义(P

【关键词】 黑素瘤细胞黏附分子；中间型滋养细胞；Ki-67；葡萄胎

ABSTRACT: Objective To explore the relationship between Mel-CAM and adherence and invasion of trophoblastic cells and proliferation of Mel-CAM defined intermediate trophoblast. Methods Double immunohistochemical staining technique was used to detect the expression of Ki-67 in Mel-CAM defined intermediate trophoblast in human villi during the first trimester and hydatidiform mole. Results In this study there was a significantly stronger expression of Mel-CAM in hydatidiform mole than that in first-trimester villi (P

KEY WORDS: melanoma cell adhesion molecule; intermediate trophoblast; Ki-67; hydatidiform mole

中间型滋养细胞(intermediate trophoblast， IT)是正常胎盘和妊娠滋养细胞疾病(gestational trophoblastic disease， GTD)中一类特殊的滋养细胞类型。随着研究的深入，逐渐认识到IT是一类独立的细胞类型，有自身特殊的免疫组织化学和生物学特征，并且IT的独立增生可以形成胎盘部位滋养细胞肿瘤(placental site trophoblastic tumor， PSTT)、超常胎盘部位(exaggerated placental site， EPS)、胎盘部位结节(placental site nodule， PSN)和上皮样滋养细胞肿瘤(epithelioid trophoblastic tumor， ETT)等多种良、恶性疾病。但是，由于IT的细胞形态学特征介于合体滋养细胞(syncytiotrophoblast， ST)和细胞滋养细胞(cytotrophoblast， CT)之间，给研究工作带来了极大的困难。随着IT的特异性标记物Mel-CAM的发现，使得IT的研究跨入了一个新的阶段。因此，本研究中利用Mel-CAM标记IT，研究其在正常绒毛和葡萄胎中的增殖情况，以期对IT与疾病的关系有更进一步的了解。

1 对象与方法

1.1 研究对象

选择1995年1月至2000年12月间西安交通大学医学院第一附属医院的葡萄胎(hydatidiform mole， HM)组织标本30例作为研究组，患者年龄22-50岁，平均32岁。选择2000年门诊正常早期妊娠(6-12周)人流术后绒毛组织标本20例作为对照组。

1.2 主要试剂

鼠抗人Mel-CAM及Ki-67单克隆抗体均为北京中山金桥生物技术有限公司产品。

1.3 标本的制备及免疫组化染色

取上述葡萄胎患者首次清宫组织标本及正常早期妊娠绒毛组织标本，多聚甲醛固定，石蜡包埋，常规切片，切片厚5 μm。用双重免疫组化的方法先进行Ki-67的染色，DAB显色；然后做Mel-CAM染色，AEC显色。阴性对照：用相邻切片对照染色，以PBS代替第一抗体作为阴性对照。阳性对照：用已知阳性绒癌组织切片做Me l-CAM的阳性对照，乳腺癌组织切片做Ki-67的阳性对照。

1.4 结果判断

①Mel-CAM标记IT的比例。每张切片观察10个高倍视野(×400)，每个高倍视野计数100个滋养细胞，计算其中Mel-CAM阳性染色细胞所占的比例。阳性细胞数75%为强阳性()。②Ki-67标记指数。每张切片观察10个高倍视野(×400)，每个高倍视野计数100个中间型滋养细胞，计算其中Ki-67阳性核的IT的百分比。

1.5 统计学方法

所有资料采用SPSS13.0软件分析。资料为等级计数资料，采用Kruskal-Wallis秩和检验，双侧P

2 结果

2.1 Mel-CAM的表达

Mel-CAM表达仅见于IT，表现为均匀一致的线性染色包绕于整个IT表面。ST和CT无表达，蜕膜、内膜腺体和基质炎症细胞对Mel-CAM均为阴性表达。IT的Mel-CAM染色不仅表达在单核IT中，多核IT表面也可见表达，展示了一个IT变化的系列形态(图1、图2)。这可能显示了从CT向ST转变的一个中间阶段。无论在正常绒毛还是葡萄胎组织中，所有的Mel-CAM阳性细胞的染色强度无明显差异。

在正常绒毛表面未见Mel-CAM表达，滋养细胞柱和浸润蜕膜的部分绒毛外IT中可见染色。这种染色模式在一定程度上反映了细胞滋养细胞在绒毛表面和绒毛外的不同分化途径，以及不同类型滋养细胞的生物学特点。

在葡萄胎组织的Mel-CAM阳性染色不仅出现在绒毛外IT，绒毛表面也有滋养细胞的表达(图1-图4)。葡萄胎组织中Mel-CAM染色的阳性细胞比例较正常绒毛组织染色明显增加，二者间差异有统计学意义(P

2.2 Ki-67的表达

Ki-67蛋白着色部位在细胞核中，为棕黄色颗粒状，颗粒颜色深浅不一，大小各异。CT、IT及蜕膜细胞和部分淋巴细胞的细胞核均可见阳性染色，以CT的表达为主，ST中无表达。在正常绒毛中，仅有绒毛内层的部分CT 表达Ki-67，少数IT可见阳性染色，ST均为阴性。葡萄胎中绒毛内层大多数CT均对Ki-67有阳性染色，部分浸润的IT有着色，ST无表达(图1-图4)。

2.3 Mel-CAM标记IT的增殖

正常绒毛中，大部分Mel-CAM标记IT，包括多核IT，不显示Ki-67染色；而葡萄胎中Mel-CAM标记IT的Ki-67染色明显增加，绒毛表面和浸润的IT中均有表达，Ki-67标记指数见表1。与正常绒毛相比，葡萄胎组织中Mel-CAM标记IT的Ki-67标记指数水平较高，二组间差异有统计学意义(P

3 讨论

黑素瘤细胞黏附分子(melanoma cell adhesion molecule， Mel-CAM)又称CD146或MUC18，是一种单链跨膜糖蛋白，属免疫球蛋白超家族(immunoglobulins superfamily， IGSF)的成员。Mel-CAM位于细胞膜表面，包括五个特征性的免疫球蛋白(Ig)样结构域(V-V-C2-C2-C2)，一个跨膜区和一个细胞浆内短尾，与许多细胞黏附分子(cell adhesion molecule， CAM)有同源性［1］。最早发现Mel-CAM在黑素瘤细胞上表达，参与细胞间及细胞-细胞外基质间黏附，在正常组织细胞间的黏附和肿瘤细胞的黏附、浸润和转移中均起到重要的作用［2］。后来发现Mel-CAM是一个高敏感和特异的IT标记物，在绒毛滋养细胞柱和绒毛外中间型滋养细胞的所有亚型中表达，而在CT和ST中则无，为IT代表滋养细胞的一个独特亚群的观点提供了更进一步的证据［3］，并且在绒毛植入、胎盘形成和滋养细胞肿瘤的浸润转移中起到重要作用。因此，在正常胚胎种植和妊娠滋养细胞疾病中得到了广泛的研究。通过我们的研究也发现，Mel-CAM表达仅限于正常绒毛和葡萄胎组织中的IT，故可作为一种标记物以区分起源于不同滋养细胞群的病变，如超常胎盘部位、胎盘部位滋养细胞肿瘤及绒癌等的鉴别诊断，为临床病理学的工作提供了很大地便利条件。

本研究中，正常早孕绒毛组织的Mel-CAM仅表达于滋养细胞柱和浸润蜕膜的绒毛外IT中，而绒毛表面的滋养细胞无表达。该结果与一些学者的研究相一致［4-5］。众所周知，胚胎植入的过程主要是依赖滋养细胞柱及绒毛外滋养细胞对子宫蜕膜的侵袭浸润完成的，说明Mel-CAM与滋养细胞的黏附浸润有关。Shih等［6］认为子宫平滑肌细胞可能表达Mel-CAM受体，该受体与IT表面上的Mel-CAM蛋白相结合，从而参与了种植过程中滋养细胞在子宫内膜和肌层内的浸润，而侵袭性较强的葡萄胎组织中Mel-CAM的表达较正常绒毛明显增加，二者间差异有统计学意义(P

在正常绒毛和葡萄胎组织中，Mel-CAM的免疫染色特征相同，为IT表面均匀一致的线性染色，CT和ST均无表达。但是，二者在绒毛表面的表达模式不同。正常早孕绒毛中，Mel-CAM在绒毛表面无表达，仅见于滋养细胞柱和绒毛外滋养细胞中。这显示了正常早孕绒毛中CT的两个不同的分化方向：绒毛表面的CT直接融合为成熟的ST；而在滋养细胞柱上经过了IT这个中间过渡阶段。而葡萄胎中Mel-CAM的表达既可见于绒毛表面，也可见于浸润的IT中。这说明在葡萄胎组织绒毛表面的CT分化失调，不仅可以直接分化为ST，也可经过IT分化为ST，表现出双重分化途径。这种分化模式与葡萄胎的发病机制间有何关系还有待于进一步的研究。

Ki-67是目前国际上研究非常多的一个细胞增殖标记物。Ki-67蛋白被认为普遍存在于细胞核中，与增生密切相关，可在除G0期外的所有细胞周期中表达，具有许多细胞周期调节蛋白的特征。有学者认为它涉及了细胞周期的检查点控制机制［7］。现在Ki-67已经被广泛用于检测肿瘤组织中细胞的增生情况，在乳腺癌、胃癌、结肠癌、黑色素瘤等多种肿瘤中的表达显著增高，被认为是一个非常有价值的增殖标记物。正常早孕绒毛组织中Ki-67主要在CT中表达，而ST中则无阳性染色［8］。众所周知，正常早孕时，CT为滋养细胞的干细胞，细胞核分裂活跃，随着CT的分化，其浸润能力增高而增殖能力丧失。ST是已经分化成熟的细胞，彻底丧失了增殖能力。因此，CT中可见阳性表达，而ST内未见到阳性染色。这是与滋养细胞的生物学功能相一致的。在葡萄胎中，滋养细胞的增殖分化失控，不仅在绒毛基底部的CT中有Ki-67的表达，浸润的IT中也可见大量阳性染色。提示葡萄胎中，滋养细胞浸润能力增加的同时其增殖能力不仅没有丧失，反而有所提高，导致了疾病的发生。比较正常绒毛和葡萄胎组织中IT的Ki-67标记指数，后者明显增高，二者间差异有统计学意义。说明检测葡萄胎组织中IT的Ki-67指数对于预测葡萄胎的转归有潜在的价值。

综上所述，Mel-CAM是一个非常有价值的标记物。它的发现为研究IT在妊娠滋养细胞疾病中的作用，以及滋养细胞的黏附、浸润和转移有很大的帮助。在正常胚胎着床和妊娠滋养细胞疾病的发生发展中起到了不可替代的作用，具有广泛的应用前景。而异常增殖的IT在妊娠滋养细胞疾病的发生发展以及疾病的特征中担任了重要的角色，仍需要进一步的研究。

参考文献

［1］Yan X， Lin Y， Yang D， et al. A novel anti-CD146 monoclonal antibody， AA98， inhibits angiogenesis and tumor growth ［J］. Blood， 2003， 102(1):184-189.

［2］Satyamoorthy K， Muyrers J， Meier F， et al. Mel-CAM-specific genetic suppressor elements inhibit melanoma growth and invasion through loss of gap junctional communication ［J］. Oncogene， 2001， 20(34):4676-4684.

［3］Kobel M， Pohl G， Schmitt WD， et al. Activation of mitogen-activated protein kinase is required for migration and invasion of placental site trophoblastic tumor ［J］. Am J Pathol， 2005， 167(3):879-885.

［4］Liu Q， Yan X， Li Y， et al. Pre-eclampsia is associated with the failure of melanoma cell adhesion molecule (MCAM/ MEL-CAM) expression by intermediate trophoblast ［J］. Lab Invest， 2004， 84(2):221-228.

［5］Higuchi T， Fujiwara H， Egawa H， et al. Cyclic AMP enhances the expression of an extravillous trophoblast marker， melanoma cell adhesion molecule in choriocarcinoma cell JEG3 and human chorionic villous explant cultures ［J］. Mol Hum Reprod， 2003， 9(6):359-366.

［6］Shih IM. Expression of Mel-CAM is implantation site inter mediate trophoblastic cell line， IST21， limits its migration on uterine smooth muscle cells ［J］. J Cell Sci， 1998， 111(17):2655-2664.

篇6

【关键词】 表皮生长因子；妊娠期高血压疾病；检测价值

妊娠期高血压疾病(HDCP)为产科常见而特有并发症,是导致孕产妇和围产儿疾病及死亡的重要原因,其病因及发病机理仍未明确。近年研究发现,滋养细胞机能紊乱是HDCP发病的中心环节,而表皮生长因子(EGF)为其相关因子之一，EGF是一种在细胞增殖和分化中起重要作用的分子［1］。为了探讨EGF在HDCP发生、发展过程中的作用及其临床检测价值，我们采用ELISA法测定97例HDCP患者(HDCP组)和35例正常妊娠妇女(对照组)血清EGF水平，分析EGF水平变化对HDCP的影响及其检测价值，现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 ①HDCP组：随机选择我院住院的HDCP患者97例，年龄(26.2±3.5)岁，均为单胎、剖宫产分娩，孕周(38.6±2.3)周。HDCP的诊断及分类均符合乐杰主编《妇产科学》第6版标准［2］，其中妊娠期高血压32例、轻度子痫前期31例及重度子痫前期34例；②对照组：随机选择正常晚孕妇女35例，血压

1.2 检测方法 两组均于产前(HDCP组于治疗前)抽取清晨空腹静脉血3 cm，离心15 min，取血清20℃储存待测。血清EGF检测采用ELISA法，450nm酶标仪读取数据。试剂盒由深圳晶美生物工程有限公司提供,酶标仪为芬兰产Multiskan MK3酶标仪、Wellwash 4 MK2洗板机。

1.3 统计学处理 采用SPSS13.0统计软件进行统计学分析。检测数据以(x±s)表示，组间或组内显著性比较采用t检验或方差分析，以P

2 结果

血清EGF检测结果见附表。附表显示:HDCP组患者血清EGF水平显著低于对照组(t=11.905，P

表1

外周血血清EGF检测结果(x±s)

组别例数EGF(pg/L)

HDCP组97392.1±57.2*

妊娠期高血压32428.5±53.9*

轻度子痫前期31389.3±55.2*

重度子痫前期34360.4±50.8*#

对照组35471.6±79.3

注：vs对照组，*P

3 讨论

EGF是由53个氨基酸残基组成的单链多肽，含3个链内二硫键，相对分子质量为6045Da，其存在于人体颌下腺、胃肠道腺体、生殖器官和多种肿瘤组织中。在妊娠期间，还存在于孕妇及胎儿许多组织及血浆、尿、羊水中。EGF只有与其受体(EGFR)结合才能发挥生物学效应，EGFR对EGF有高度特异性和亲和力,当EGF到达靶细胞表面时,很快与细胞膜上EGFR结合,诱导其产生某种变构,形成受体二聚体,激活受体膜内区域的酪氨酸蛋白激酶,使自身的一系列酪氨酸被磷酸化,调节细胞生长与分化。EGF最主要的作用表现为刺激细胞增生和分化，表皮的生长和角化，是一种重要的细胞生长调节因子，EGF和EGFR在正常细胞分裂增殖和恶性转化中具有重要作用［3］。对中、外胚层起源的正常及肿瘤组织均有促进有丝分裂的作用，缺乏时可影响部分细胞的分化及已分化细胞的功能。妊娠期EGF及其受体含量均增加，对胎儿、胎盘的生长发育起着重要作用，其主要作用包括：调控着床(在胚泡植入过程中起调节作用)、影响胎盘功能［4］(促进滋养细胞合成分泌激素、增加胎盘摄取营养等)、促进滋养细胞分化及参与病理妊娠(早期流产、胎盘发育不良、HDCP等)。本研究显示，HDCP患者EGF水平显著低于正常孕妇，提示EGF与HDCP发生、发展有关。低水平的EGF影响了滋养细胞表面整合素的表达，从而影响了滋养细胞的迁移和侵蚀，使滋养细胞分化不良，螺旋动脉重铸受阻，造成了子宫胎盘血流障碍，进而引起了HDCP。低水平的EGF可导致滋养细胞的过度凋亡，进一步导致HDCP时胎盘浅着床［5］。又HDCP患者随病情加重血清EGF水平依次降低，提示EGF为判定病情轻重的重要指标。综上所述，HDCP患者体内存在EGF水平的异常变化，妊娠期高血压、轻度子痫前期及重度子痫前期患者组随病情加重血清EGF水平依次降低，EGF与HDCP发生、发展有关，在HDCP的发生、发展过程中起着重要作用，检测血清EGF水平可作为判定病情的重要指标。

参 考 文 献

［1］ 贺建华.生长因子在消化性溃疡愈合中的作用.国外医学•消化系统分册,2003,23(1)：1213.

［2］ 乐杰.妇产科学.人民卫生出版社,2005，97104.

［3］ 王文奇，徐瀚峰.表皮生长因子及其受体与肝癌的关系.国外医学肿瘤学分册,2005,32(3):212214.

篇7

【关键词】

子痫前期;Ang1;免疫组织化学方法

Expression and significance of Ang-1 in placenta from patients with preeclampsia patients

HOU Xiao-fen，ZHANG Yan-li. Gynecology and Obstetrics of first Clinical Medical College，Taiyuan 030001，China

【Abstract】 Objective To study the expression and clinical significance of Ang-1 in placenta from patients with preeclampsia.Methods The expression of Ang-1 were detected in placental from 30 normal3pregnants women and 60 patients with preeclampsia (30 mild preeclampsia, 30 severe preeclampsia) by immunohistochemistry. Results The expressions of Ang-1 of placenta in normal pregnant, mind preeclampsia and severe preeclampsia groups were gradually increased, there were significant differences among them (P

【Key words】 Preeclampsia；Ang-1；Immunohistochemistry

子痫前期(preeclampsism)是妊娠期特有的疾病,严重威胁母儿安全,是危害孕产妇健康和造成胎儿死亡的重要疾病之一。为此许多学者对其发病机制进行了大量的研究,但具体发病机制至今仍未完全阐明。

Ang-1是一种重要的血管生成调节因子,它与其受体结合通过多种机制影响滋养层细胞浸润能力、影响胎盘发育,这可能是导致子痫前期、胎儿生长受限等疾病的重要原因之一。本研究采用免疫组织化学方法检测子痫前期患者及正常妊娠患者胎盘中Ang-1的表达,以探讨其在子痫前期发病过程中可能的作用及其相互作用机制,为临床寻找子痫前期病因提供理论依据。

1 资料与方法

1.1 实验对象 随机收集我院2009年3月至2010年3月间在山西医科大学第一临床附属医院产科住院分娩的90例产妇的胎盘组织,其中子痫前期患者60例(轻度30例,重度30例),正常孕妇30例(正常妊娠组)。子痫前期的诊断标准参照乐杰主编的《妇产科学》第7版[1]。所有病例均为单胎初产妇,无原发性高血压、糖尿病、心脏病和肝肾疾病史等其他妊娠合并症及并发症。两组孕妇年龄、孕龄及孕次、分娩方式之间比较差异无显著性(P>0.05)(见表1)。

表1

1.2 实验方法

1.2.1 标本采集及处理 所有研究对象于胎盘娩出后,立即取胎盘母体面组织大小约1cm×1cm×1cm,注意避开出血、梗死及钙化区,生理盐水漂洗3次后,置于10%中尔马林溶液中固定24～48h,并用石蜡包埋,制成5μm左右切片,备用。

1.2.2 测定方法 采用免疫组织化学SABC法。特异性兔抗人Ang-1抗体工作浓度为1∶100(由武汉博士德生物工程有限公司提供)。实验步骤按试剂盒说明书严格进行。

1.2.3 结果判定 以细胞膜或细胞浆出现明显的棕黄色颗粒为阳性细胞,无着色或与背景颜色一致的为阴性细胞。由至少两位经验丰富的专业人员独立阅片,将制好的切片置显微镜下观察,每张切片在400倍高倍视野下随机取5个视野,用病理图像分析软件进行半定量分析,计算平均灰度值。

1.3 统计学方法 采用SPSS13.0统计软件处理,所有数据以均值±标准差(x±s)表示,各组间比较采用单因素方差分析,组间两两比较用LSD法,P

2 结果

胎盘组织中Ang-1表达强度的比较免疫组化检测发现Ang-1在孕妇胎盘绒毛间质、滋养叶细胞和血管内皮细胞中均有表达,主要集中在细胞膜及细胞浆中。用病理图像分析软件对Ang-1免疫组织化学染色切片进行灰度测定(见表2)。实验结果发现:正常妊娠组、轻度子痫前期组、重度子痫前期组胎盘组织中Ang-1表达逐渐增强,且各组间差异具有显著性(P

3 讨论

3.1 Ang-1的生物学功能

Ang-1是一类重要的血管生成调节因子,是血管生成素(Angiopoietin,Ang)家族中的成员。Ang家族现包括四个成员:Ang-1,Ang-2,Ang-3,Ang-4,均能识别内皮细胞特异性酪氨酸激酶受体(Tie-2),但效应不同。Ang-1是Tie-2的激动剂,与Tie-2结合启动受体磷酸化,在细胞粘附因子存在时可抑制内皮细胞的凋亡[2,3]、抑制血管渗漏[4]、减少血管炎症[5]从而维持血管的稳定性[6]。

3.2 Ang-1与子痫前期

在正常妊娠中,随着妊娠的进展,滋养层细胞侵入螺旋动脉,子宫胎盘血液循环阻力下降,血流灌注充分;而滋养细胞不能正常侵入子宫内膜,浸润过浅、浸润性滋养细胞数量不足以及螺旋动脉重铸失败等经常可在子痫前期患者的胎盘中观察到[7]。所以滋养细胞的分化、迁移、浸润过程对妊娠发生和维持极其重要。因此凡是影响滋养细胞正常浸润过程的因素都可能导致子痫前期的发生。

Nadar等[8]研究发现,子痫前期的妊娠妇女血清的Ang-1mRNA表达水平明显增加。本实验结果表明,轻度、重度子痫前期患者胎盘组织中Ang-1表达均明显高于正常妊娠组,且重度子痫前期患者Ang-1表达水平显著高于轻度患者,可推测:Ang-1在滋养层细胞、血管内皮细胞和绒毛间质的表达明显增加,可能增加胎盘、滋养细胞血管的稳定性,使形成分支血管发生障碍,致子宫螺旋动脉重建失败,造成胎盘灌注不足,引起胎盘功能不良,从而导致子痫前期的一系列病理改变。对于子痫前期,Ang-1的表达目前国内外尚无统一定论,仍需要进一步的研究。

Ang-1不参与血管的起始,只参与血管的成熟。Ang-1维持血管稳定的作用,可抑制胎盘螺旋小动脉的正常产生,引起胎盘血液供应障碍,使滋养细胞浸润过程减弱,从而导致子痫前期的发生。总之,Ang-1通过多种机制影响子宫-胎盘血管床的发育和重塑,导致胎盘缺血缺氧,胎盘发育不良,引起滋养细胞侵入不足,最终导致子痫前期的发生。

参 考 文 献

［1］ 乐杰.妇产科学.人民卫生出版社，2008：92.

［2］ Kim I, Kim HG, et al. Angiopoietin-1 regulates endothelial cell survival through the phosphatidylinositol 3’-Kinase/Akt signal transduction pathway.Circ Res,2000,86(1):24-29.

［3］ Papapetropoulos A, Fulton D,Angiopoietin-1 inhibits endothelial cell apoptosis via the Akt/survivin pathway. J Biol Chem,2000,275(13):9102-9105.

［4］ Gamble JR, Drew J, et al.Angiopoietin-1 is an antipermeability and anti-inflammatory agent in vitro and targets cell junctions. Circ Res，2000,87(7):603-607.

［5］ Kim I, Moon SO, et al.Angiopoietin-1 reduces VEGF-stimulated leukocyte adhesion to endothelial cells by reducing ICAM-1, VCAM-1, and E-selectin expression.Circ Res，2001,89(6):477-479.

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篇8

病例特点：

患者，女，47 岁，已婚，孕2 产1，人工流产术1次，2013年9月孕40余天于当地行人工流产术，术后宫腔清除物未送病理检。于2013 年12 月11 日 因 人流后三月，阴道不规则出血20余天，前来河南科技大学第一附属医院就诊，查血HCG697925mIU/ml，彩超提示 ：子宫体积增大，大小约12.0*10.0*10.0cm，肌层回声不均，前壁近内膜处可见大小约4.7*2.4cm的非均质包块，宫腔可见大小约9.3*2.7cm的非均质包块，前壁肌层局部血流信号丰富。以妊娠滋养细胞肿瘤收 入 院 治 疗，妇科检查：阴道可见紫蓝色结节，肺部CT：有结节阴影。FIGO分期评分III：7。入院后第二天晚上突发腹痛、恶心，诉坠胀感，查体：神志清精神可，被动，心电监护：心率68次/分，血压120/70mmHg，腹肌紧张，下腹部压痛反跳痛。立即后穹窿穿刺术，抽出不凝血。考虑妊娠滋养细胞肿瘤子宫穿孔可能性大，失血性休克，立即补液输血，行剖腹探查术，必要时切除子宫。术中见子宫增大如孕4月余大小，呈球形增大，质软，后壁有一约5*4cm破口，破口有葡萄样组织自子宫挤出，并可见活动性出血，盆腹腔有大量积血，约3000ml，并可见葡萄样组织混于血块中。遂行全子宫切除术。分离出髂内血管，双侧各注入顺铂10mg。术中输红细胞4u、血浆400ml。盆腔留置引流管1根。结合FIGO分期评分，尽早给化疗药物应用。术后两天查血HCG113398 mIU/ml，经抗感染 纠正贫血，于2013-12-17行EMA-CO方案化疗。症状改善，病情稳定。

讨论 ：

葡萄胎因妊娠后胎盘绒毛滋养细胞增生、间质水肿，而形成大小不一的水泡，水泡间借蒂相连成串，形如葡萄而名之。其侵蚀性葡萄胎子宫穿孔引起急腹症的症状体征与异位妊娠失血性休克相似，因此，在临床上往往误为异位妊娠。因此应受到临床医生的重视。误诊原因有： （1） 临床表现无特异性；（2） 接诊医师经验不足； （3） 不重视 病理检查。本例患者也是在外院被认为子宫肌瘤变性，该患者人工流产后所清除的宫腔内容物未送病理检查，因而未发现葡萄胎，丧失确诊的时机导致误诊，我们应该从中吸取的经验及教训是： 宫腔内容物的检查对于疾病的诊断及预后尤为重要，必须强调凡是离体标本均应送病理检查，临床医师要全面询问病史，将临床症状体征及辅助检查相结合，对患者严密随诊，可减少因漏诊及误诊而导致的不良结局的发生。

滋养细胞肿瘤多经过化疗得以治愈，目前国际上已基本采用2000年颁布的FIGO临床分期及预后评分标准， 滋养细胞的特点是破坏血管，各转移部位症状的共同特点是出血，患者可因大出血休克而致死，因此，应正确认识及时处理妊娠滋养细胞疾病。在制定治疗方案以前，必须在明确临床诊断的基础上，根据病史、体征及各项辅助检查的结果，作出正确的临床分期，并根据预后评分将患者评定为低危无转移、低危转移或高危转移，再结合骨髓功能、肝肾功能及全身情况等评估，制定合适的治疗方案，以达到分层治疗。

参考文献：

篇9

【关键词】 反复自然流产;免疫治疗;细胞因子;凋亡

反复自然流产(recurrent spontaneous abortion,RSA)是指临床上连续发生3 次或3次以上自然流产,妊娠不足20 周或者胎儿体重小于500 g 而终止者,是妊娠期最常见的并发症之一,发生率一般约占生育年龄妇女的0. 8%~1%。引起RSA的病因非常复杂,病因除有染色体、内分泌、感染、内生殖器官解剖异常、胎盘异常,环境因素、电离辐射和精神压力外,还有免疫因素如增长的Th1/Th2比率、NK细胞毒素、NK细胞、B细胞的变化等[1]。流行病学调查一个妇女如果连续发生两次的流产,下一次妊娠流产的发生率大约为24%。连续三次流产下次妊娠流产发生率大约为30%,四次以上连续流产的发生率可能40%[2]。目前认为,正常妊娠中母体能耐受带有1/ 2 父方遗传基因的半同种异体胎儿,依赖免疫系统识别并产生保护性免疫应答,直至胎儿娩出。对于母胎界面这种免疫耐受机制一般有以下几种假说:① HLA-G 抗原(人类淋巴细胞抗原)表达学说;② Fas/ FasL与胎盘凋亡学说;③封闭抗体学说;④ Thl/Th2细胞因子平衡学说。下面对以上学说方面分别加以阐述。

1 细胞凋亡与RSA

Fas及其配体FasL、肿瘤坏死因子(TNF)相关的凋亡诱导配体(TRAL)及其受体(TRAL-R)是体内重要的细胞凋亡信号,FasL和TRAL分别通过与靶细胞上相应受体Fas和TRAL-R结合,介导细胞凋亡。目前认为,胎盘细胞上的TRAL 能产生FasL,提示TRAL与FasL 协同作用,参与杀死活化的淋巴细胞,从而使胎盘具备免疫豁免作用[3]。Manoj kummar pandy等[4]认为妊娠期间Fas/Fasl在母体免疫细胞与滋养层之间的关键性作用是通过使凋亡蛋白酶的活性达到最高水平引发一系列的事件。反复自然流产患者Fas/Fasl系统发生异常, Fasl表达下降,不足以使外周血中的Fas淋巴细胞凋亡,影响母胎免疫耐受,胚胎受到攻击从而导致流产[4]。

2 NK细胞与RSA

一些研究表明,母方的NK细胞的活性诱导一系列正常染色体妇女的流产,其作用机理认 为母方的NK细胞激活Th1细胞因子从而产生对滋养层的毒害,因而认为抑制NK细胞的活性对于孕期维持是非常有帮助。它们的作用机理不是引起滋养层细胞的减少,而是直接导致细胞凋亡。NK细胞组成外周血淋巴细胞的10%~15%,它们的表面抗原是CD16和CD56[5]。NK细胞上存在激活性受体和抑制性受体。当抑制性受体与配体结合时,产生负调节信号,抑制NK细胞的杀伤活性。当激活性受体与配体结合时,可使抑制信号传导受阻,从而使NK细胞具有杀伤功能[3]。研究发现,原因不明难免流产患者与正常妊娠妇女相比,蜕膜中LGL 细胞含量无差异,表明RSA 患者外周血NK细胞处于功能活跃状态[6]。

3 自身抗体与RSA

研究发现,血清中某些自身抗体阳性率增高,是反复自然流产妇女常见的免疫学异常,母亲对胎儿的免疫应答能引起30%反复自然流产妇女的胎儿排斥反应, 主要与抗卵磷脂抗体、抗透明带抗体、抗核抗体及抗甲状腺抗体等有密切关系。抗卵磷脂抗体是针对各种带阴性电荷磷脂抗原的多种抗体的总称,磷脂分子是正常细胞膜的成分,对胎盘的生长与发育有很大关系,而其抗体的产生能影响母体界面胎盘的生长和发育。其中,在临床和研究上最重要的两种是狼疮抗凝物和抗心卵磷脂抗体,并把后者作为抗磷脂抗体的代称。抗心磷脂抗体导致反复自然流产发生的明显机制可能是干扰胎盘合体滋养层形成,可通过阻碍前列腺环素的产生等途径,破坏血管内皮细胞,使血液细胞黏附于破损处并形成凝血块,从而导致胎盘内血小板凝聚、血栓形成及胎盘栓塞而导致流产。

4 HLA 抗原与RSA

一些研究表明同种免疫与父方的HLA有关。HLA 是一类存在于各种组织及有核细胞表面并可引起强烈排斥反应的抗原,主要有HLA-A、HLA-B、HLA-C、HLA-D/ DR。由于HLA 基因的遗传多态性,个体之间细胞膜表面的HLA 抗原分子相容性概率很低,构成了同种免疫。正常妊娠中,夫妇HLA 抗原不相容,胚胎所带的父源性HLA 抗原在滋养细胞表面能刺激母体免疫系统并产生一类封闭因子或封闭抗体,封闭因子既可直接作用于母体淋巴细胞,又可与滋养细胞表面特异性抗原结合,从而阻断母儿之间的免疫识别和免疫反应,封闭母体淋巴细胞对滋养细胞的细胞毒作用。HLA在调节免疫反应中起着重要的作用,其与复发性流产的关系主要集中在3个方面:①夫妻间HLA-Ⅰ、Ⅱ类分子相容性增加,可以导致母体对胎儿半同种抗原的识别和反应降低,从而导致流产的发生;②HLA特别是HLA-Ⅱ类分子的DQ位点与许多疾病的发生有关;③滋养细胞HLA-G表达下降。滋养细胞膜上存在非经典的HLA-Ⅰ类抗原HLA-G,其通过与NK细胞和T细胞上的抑制性受体结合,传导抑制信号阻抑细胞毒效应,保护或阻抑细胞免受蜕膜NK细胞和 T细胞杀伤。滋养细胞HLA-G表达下降,影响了其与NK细胞、T淋巴细胞、巨噬细胞和DC上的抑制性受体[免疫球蛋白样受体(KIR)或C型凝集素家族]的结合,进一步阻碍了抑制性信号的传入,从而激活了蜕膜免疫职能细胞,造成母体对胚胎抗原的免疫攻击。在原因不明复发性流产患者的绒毛滋养细胞上,HLA-G表达水平明显降低。

4.1 Th1/Th2细胞因子及作用机制 细胞因子(cytokine,CK)是由活化的免疫细胞和某些基质细胞分泌的,介导和调节免疫及炎症反应的小分子多肽,是除免疫球蛋白和补体外的另一类非特异性免疫效应物质。细胞因子通过免疫系统在人类繁殖中起主导作用,母体免疫系统的变化是胚胎种植、妊娠维持及及时分娩的动力。

Romagnani发现人类CD+4 T细胞(表达CD+4的T淋巴细胞)主要存在Th1、Th2 两个亚群。主要有Th1 细胞分泌的细胞因子称为Th1型细胞因子。主要有Th2 细胞分泌的细胞因子称为Th2型细胞因子。Th1 细胞主要分泌白介素-2(IL-2)、干扰素-γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-12(IL-12)等,Th1 型细胞因子属于炎症性细胞因子,这些细胞因子及其受体在免疫排斥反应中扮演重要的角色,主要介导细胞免疫和局部炎症反应,表现免疫杀伤。Th2型细胞主要分泌白介素-4(IL-4)、白介素-6(IL-6)、白介素-9(IL-9)、白介素-10(IL-10)和白介素-13(IL-13)等,Th2 细胞因子被认为是免疫调节性因子,促进B细胞增殖和抗体生成,主要介导体液免疫,表现免疫保护。以下简单介绍各个细胞因子作用机理。

IL-2能诱导蜕膜自然杀伤(NK)细胞增殖,并使NK细胞转化为具有杀伤滋养层细胞作用的表型。IL-4在子宫胎盘中可调节细胞的生长分化,并可抑制NK细胞粘附于血管内皮细胞及进一步的聚集和活化。IL-4的早期出现是Th2 分化的最强刺激。其通过与IL-4受体结合,激活信号传导和转录激活蛋白-6(STAT-6),使STAT-6络氨酸快速磷酸化,从而使Th1 快速分化为Th2 细胞。IL-4也抑制IL-2 诱导的NK细胞的lAK活性,防止对滋养层的损伤,抑制蜕膜、羊膜分泌前列腺素E(PGE),从而防止由于子宫收缩引起的流产、早产。IL-10主要来自单核细胞MHC-Ⅱ类抗原等途径,IL-10 能减弱胎儿组织上HLA Ⅰ类和Ⅱ类分子的表达,被认为是免疫抑制和抗炎细胞因子,是Th2型免疫反应的主要调节者,避免淋巴细胞对滋养层细胞的杀伤,使胚胎逃逸母体免疫,保护胎儿免受母体免疫系统排斥,利于妊娠的维持[9]。TNFα是Th1型细胞因子,主要有单核巨噬细胞、自然杀伤细胞及T细胞刺激抗原产生。作为具有多种生物学活性的细胞因子,参与正常妊娠过程。当母体免疫功能异常或某些因素使巨噬细胞等被激活,均可造成TNF-α水平升高。TNF-α与滋养细胞中的TNF-R 结合,限制滋养细胞的生长,导致滋养细胞凋亡; TNF-α可诱导多种细胞因子及有害物质的合成和分泌,激活巨噬细胞中的一氧化氮合酶(NOS),使一氧化氮(NO)生成增加,NO 反过来再激活蜕膜巨噬细胞;TNF-α和NO 可杀伤内皮细胞,抑制蜕膜血管的形成,造成缺血、出血、血栓形成、坏死,最终导致胚胎的供血减少,导致胚胎丢失;TNF-α还与IL-2共同作用可使NK样细胞转化为具有细胞毒性样作用的LAK(淋巴因子激活的杀伤细胞),栓塞胎盘组织。所以,妊娠期适量的TNF-α能促进妇女能量代谢及胚胎发育,提高孕激素及绒毛膜促性腺激素的合成,并且能刺激细胞滋养层生成尿激酶型血浆素原激活剂(uPA),有利于蜕膜细胞外基质降解及胎盘植入,对妊娠维持有重要作用[10]。IFN-γ对妊娠造成损害有以下几方面作用:首先IFN-γ能促进自然杀伤细胞(NK 细胞)的活化和增殖,而活化的NK 细胞损害胎盘组织。另外,由生殖道局部产生的粒单细胞集落刺激因子具有促进胚胎发育的作用,而IFN-γ 能抑制生殖道局部,特别是子宫上皮细胞产生的粒单细胞集落刺激因子并直接损害滋养层组织。IL-12 是IFN-γ 的上位因子,诱导IFN-γ 表达,IFN-γ可促进IL-12 的产生,IL-12 和IFN-γ之间形成正反馈途径,本研究结果显示IL-12 与IFN-γ之间呈正相关关系。IL-6是有合体滋养细胞层产生,具有多种生物学功能如刺激羊膜及蜕膜产生前列腺素E2,引起子宫收缩,诱发分娩。研究发现早期流产患者IL-6的水平高于正常孕妇和非孕妇,其机制可能是流产患者IL-6含量的增加使前列腺素异常升高而导致流产[11]。IL-6调节滋养层不对称抗体的合成,并封闭胎盘抗原和NK细胞。研究认为低剂量的IL-6刺激不对称抗体的合成,而高剂量则降低不对称抗体的合成。

4.2 Th1/Th2平衡状态对妊娠的影响 两者之间的平衡对维持正常妊娠起着重要的作用。Th1 /Th2 细胞因子处于相对平衡状态,既保护母体不受外来微生物的侵犯,又对宫内胚胎移植物不发生免疫排斥反应,并维持妊娠的继续。如果平衡被打破,将导致疾病如反复自然流产的发生。Th1 和 Th2通过各自的细胞因子来相互调节各自的功能,IL-10可抑制Th1细胞分泌IFN-γ、TNF、IL-2; IL-4抑制TH0细胞向TH1细胞分化,IL-4、IL-10是促进TH2细胞分化的重要因子;IFN-γ是Th1细胞因子,促进Th1细胞并抑制Th2 型细胞的分化及分泌功能,降低IL-4、IL-10的活性。机体处于正常状态时,两型细胞因子互为抑制,处于动态平衡,维持正常的细胞免疫和体液免疫功能。然而,RSA 患者蜕膜组织中Th1 型细胞因子的表达明显高于正常对照组,Th2 型细胞因子的表达明显低于常对照组。RSA 患者对滋养细胞抗原产生以Th1 型反应为主的免疫应答。大量体外实验已证实,Th1 型细胞因子具有胚胎毒作用,能妨碍早期胚胎的发育,而Th2 型细胞因子对正常妊娠的维持起重要作用。大量研究已证实,Th1 型细胞因子具有胚胎毒作用,能妨碍早期胚胎的发育,引起妊娠丢失。相反Th2 型细胞对正常妊娠的因子维持起重要作用[12]。在复发自然流产患者中Th1细胞因子的表达远远超过Th2细胞因子的表达,Th1/Th2比例的免疫应答比任一个单一的细胞因子都重要。如何调节Th1/ Th2 细胞因子平衡已成为反复自然流产免疫治疗研究的新热点。

综上所述,生殖免疫仍然是当前研究的热点,探索免疫耐受机制,为原因不明复发性流产提供免疫方面的治疗方法。

参 考 文 献

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篇10

【关键词】Fas蛋白；妊高征；胎盘；滋养层细胞

The expression and significance of Fas in pregnancy-induced hypertension’s placenta QIU shu, LI Qin,WANG jian-jun.Department of Obstetrics and Gynecology, Yangzhou Women and Children’s Healthcare Hospital,Yangzhou 225001,China

【Abstract】 Objective Detection of expression of Fas in placenta explores the pathogenesis of pregnancy-induced hypertension. Methods Immunohistochemical staining method with pathological image analysis technology analysis 10 patients with normal pregnancy group of 30 cases of placental pregnancy induced hypertension group in trophoblast cells' expression. Results expression of Fas mainly lies in placental trophoblast cells' membrane and the cytoplasm. With the normal pregnancy, expression of Fas in placenta increased significantly, mild, moderate, severe pregnancy induced hypertension group, so the difference was significant. ConclusionIncrease of the expression of Fas in trophoblast cells is the pathogenesis of PIH so as to provide a new direction in the clinical treatment of PIH.

【Key words】 Pregnancy-induced hypertension syndrome(PIH); Placenta; Trophoblast cells

本研究采用免疫组织化学法测定了妊高征患者和正常孕妇胎盘Fas蛋白的表达水平，以探讨妊高征患者胎盘Fas蛋白水平的变化及其与妊高征发病的关系。

1 资料与方法

1．1 对象选择 随 机选择2006年1月至2006年9月在扬州市妇幼保健医院产科经剖宫产术分娩的孕妇共40例。年龄在25~39岁，分娩孕周在37~41周。按照妊高征的诊断和分类标准[1]分正常、轻度、中度、重度妊娠各10例。均为单胎妊娠，无其他内科和产科合并症。胎盘娩出后于胎盘中央部分，取大小约1．0 cm3组织块，用生理盐水漂洗去除血液后固定于4%多聚甲醛中, 常规脱水，透明，浸蜡包埋，连续切4 μm厚切片。

1．2 标本收集 孕妇外周血，每次采血2 ml，置于盛于EDTA抗凝剂的无菌试管中，生理盐水等倍稀释后备用。

1．3 实验结果判定 用捷达801形态学图象分析系统测定，以细胞膜或细胞浆出现明显的棕黄色颗粒为阳性细胞。采用Sinicrope[2]等综合计分法并稍加改进进行半定量分析。每例随机选择6个高倍视野［光学显微镜下(×200)］记数1000个细胞中的阳性细胞个数进行阳性细胞数计分，75%为4分。着色强度计分则是以多数阳性细胞数呈现的染色特征计分：淡黄色为1分，黄色为2分，棕黄色为3分。阳性细胞数计分+着色强度计分即为综合得分，0~1分为阴性(±)；2~3分为弱阳性(+)；4~5分为中等阳性(++)；6~7分为强阳性(+++)。

1．4 免疫组织化学染色 鼠抗人Fas(CD95)抗体和免疫组化SP试剂盒均购于北京中山生物技术有限公司，操作方法参芹)；扬州大学医学院形态实验室(王建军)

照说明书。将组织切片与鼠抗人Fas 蛋白抗体共孵过夜，用生物素标记山羊抗小鼠IgG 处理后，滴加辣根酶标记链霉卵白素工作液，用3,3'-二氨基联苯胺显色试剂盒显色，苏木素轻度复染，脱水，封片，显微镜下观察Fas蛋白在胎盘组织中的分布，出现棕黄色染色为阳性判断结果。以PBS代替Fas抗体作为阴性对照，并摄片。

1．5 统计学方法 数据采用SPSS10．0软件进行统计，用卡方检验方法，并进行两两比较，P0．05为差异无统计学意义。

2 实验结果

不同程度妊高征Fas蛋白在孕妇胎盘绒毛滋养细胞的表达显著不同(见表1)。Fas蛋白的棕黄色阳性染色主要位于滋养细胞的细胞膜和细胞浆中，胞核呈浅蓝色。妊高征组胎盘滋养细胞Fas蛋白的表达，高于正常妊娠组，差异有统计学意义(P

从图1，图2中可见Fas蛋白主要定位在滋养细胞的胞膜及胞浆中，胞核呈浅蓝色。妊高征组胎盘滋养细胞Fas蛋白的表达高于正常妊娠组，两者差异有显著性(χ2=15．675,P=0．01)，轻度妊高征组和正常妊娠组胎盘滋养细胞Fas蛋白的表达，两者差异无统计学意义(χ2=1．574,P=0．665)。中度妊高征组和轻度妊高征组胎盘滋养细胞Fas蛋白的表达，两者差异无统计学意义(χ2=6．632, P=0．085)。重度妊高征组和中度妊高征组胎盘滋养细胞Fas蛋白的表达，有显著性差异(χ2 =8．513, P=0．037)。妊高征组中滋养细胞Fas蛋白的表达与妊高征病情轻重有关，病情越重，Fas蛋白的表达越强。妊高征组胎盘滋养细胞表面Fas蛋白表达面积高于正常组，妊高征组胎盘滋养细胞表面Fas蛋白表达强度，也明显高于正常组，两者间差异有统计学意义。

3 讨论

Fas (CD95)是一种48kDa单链穿膜糖蛋白，表达于记忆T细胞、活化的T/B细胞、NK和未分化的胸腺细胞。Fas和Fas-L的细胞分布和表达方式提示两者所形成的复合物在免疫系统的平衡状态中起至关重要的作用。在某些疾病中可溶性Fas蛋白表达增加会阻止由Fas-L所介导的凋亡的发生，本研究Fas在妊高征患者胎盘中的表达，来探讨Fas蛋白与妊高征患者胎盘损伤的相关性。

Fas及Fas配体是目前唯一的通过免疫途径介导细胞凋亡的蛋白分子，他们的发现对细胞凋亡的研究起了很大的促进作用。本实验应用免疫组化的方法对正常孕妇及妊高征患者胎盘的滋养细胞Fas蛋白的表达进行研究，结果表明妊高征组胎盘的滋养细胞表达Fas蛋白的强度显著高于对照组，轻度与中度及重度之间有显著性差异。总之，这种诱导凋亡的平衡机制若一旦发生改变，就会导致胎盘发生一系列免疫病理损害，最终发展为妊高征。胎盘滋养细胞Fas与Fas-L配体表达的平衡失调，导致滋养细胞凋亡增加。影响其分化及浸润，而滋养细胞的功能异常在妊高征胎盘损伤的发生发展中起着重要的作用。这可能是妊高征的发病原因之一[3-5]。深入探索细胞凋亡的分子生物学机制，必将有助于揭示疾病的发病机理，为临床治疗提供新的思路。

综上所述,可以看出Fas/FasL系统的异常表达与PIH发病相关,导致母体对胎儿的免疫耐受减低,滋养细胞和免疫细胞凋亡增加,胎盘浅着床,形成PIH胎盘损伤的病理基础。鉴于Fas蛋白的表达与敏感性并不完全一致,尚需进一步研究体内Fas蛋白的敏感性及细胞凋亡因子之间的平衡问题。

胎盘滋养细胞表面Fas蛋白表达增加,导致母胎间的免疫耐受的破坏,引起异常的免疫反应可能导致胎盘屏障损伤，也可能是妊高征发病的重要机制。诱导Fas蛋白的产生或调节母胎间的免疫耐受,将为临床治疗妊高征提供新的方向。

参考文献

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