体液免疫范文
时间：2023-03-15 15:39:54
导语：如何才能写好一篇体液免疫，这就需要搜集整理更多的资料和文献，欢迎阅读由公务员之家整理的十篇范文，供你借鉴。
篇1
关键词： 异体输血；自体输血；肿瘤；免疫
肿瘤患者因其自身疾病的特殊性，围手术期常须输血治疗，而输血对免疫功能的影响在临床上一直颇有争议。现有的自体输血方法可有效的减少围手术期输血量，但其对肿瘤患者的体液免疫功能影响研究较少。本研究通过观察异体和自体输血对肿瘤患者体液免疫功能的影响，旨在进一步探讨自体输血的临床价值及意义，为肿瘤患者围手术期合理用血提供指导。
1资料与方法
1.1一般资料 经医院伦理管理委员会批准，患者及家属知情同意并签署知情同意书后，选择择期行胃肠肿瘤根治术患者80例，男44例，女36例，年龄38 69岁，体重40～78kg，ASA分级为Ⅰ～Ⅱ级，其中胃癌26例，结肠癌24例，直肠癌30例。病例入选标准：术前经胃肠镜检查病理确诊为胃肠道恶性肿瘤患者，患者术前无严重的心、肺、肝、肾及内分泌疾病，无手术治疗、放疗、化疗、近期使用免疫抑制剂、严重感染、血源性传播疾病、凝血功能、血小板功能异常及输血病史，患者术前血红蛋白大于110g/L，红细胞比容不低于0.33。
1.2方法 患者术前禁食12h，禁饮6h。所有患者均不使用术前药，患者入室后常规监测血压（Bp）、心率（HR）、心电图（ECG）、血氧饱和度（SpO2），开放上肢静脉，在局麻下行桡动脉穿刺和颈内静脉穿刺置管行有创检测，常规麻醉诱导：咪唑安定0.05 mg/ kg、芬太尼4～5μg/ kg、丙泊酚1～2 mg/ kg、罗库溴铵0.6mg/ kg，快速诱导插管后接Blease-8500麻醉机行机械通气，吸入氧浓度为100%，氧流量为1.5～2.0L/min，潮气量为8～10ml/kg，呼吸频率为12bpm，吸呼比（I/E）为1：2，保持呼气末CO2（PETCO2）浓度为35～45mHg。术中采用丙泊酚6～8mg·kg-1·h-1、瑞芬太尼0.1～0.25μg·kg-1·h-1，顺式阿曲库铵2～3μg· kg-1·min-1维持麻醉和肌肉松弛。
1.3输血方法 根据术中是否输血及不同血液保护方案将患者分为四组，C组为空白对照组（Control），患者术中出血较少未输血，也未有任何血液保护措施。A组为异体输血组（Allogeneic blood transfusion），视手术出血量和患者身体情况（如术中Hb
1.4监测指标 四组患者分别于入室时（T0）、术毕即刻（T1）、手术后24h（T2）、术后3d（T3）、术后7d（T4）抽取静脉血2ml送生化分析室，以3000r/min离心后取上清液至全自动生化分析仪用免疫透射比浊法检测血清免疫球蛋白IgG、IgA和IgM含量。
1.5统计学方法 所得数据计量资料以均数±标准差（x±s）表示，正态分布采用方差分析，非正态分布资料采用秩和检验，计数资料采用χ2检验，应用SPSS13.0统计分析软件进行数据处理，P
2结果
2.1各组患者一般资料的比较 各组患者性别比、年龄、体重、手术时间及病例构成比组间比较差异无统计学意义（P>0.05）。见表1。
2.2各组患者免疫球蛋白的变化 与T0时比较，四组患者术后T1时IgG、IgA都较术前降低（P0.05）；T2、T3时仅A组患者IgG、IgA降低，差异有统计学意义（P0.05）。组间比较，四组患者T0、T1、T4时IgG、IgA、IgM各组间比较无明显差异（P>0.05），T2、T3时A组IgG、IgA水平较其他三组降低明显（P0.05）。（见表2）。
3讨论
人体免疫球蛋白是B细胞接受抗原刺激后增殖分化为浆细胞所产生的糖蛋白，是介导体液免疫的重要效应分子，其通过与相应抗原特异性结合发挥体液免疫功能。因此，测定肿瘤患者免疫球蛋白水平，可以有效评价其体液免疫功能。
本研究结果显示，术前四组患者术前血浆IgA、IgG、IgM浓度各组间比较并无明显差异，具有可比性，术毕即刻四组患者血浆IgA、IgG浓度都有所下降，分析原因可能是因为术中为了维持有效血容量，大量补充晶体和胶体液，血液中有形成分稀释而引起的；至术后第1d，空白对照组、血液稀释组和联合组血浆IgA、IgG浓度迅速恢复至术前水平，而异体输血组则持续下降，直至术后第7d才恢复，研究结果表明，常规输液和稀释式自体输血对肿瘤患者体液免疫功能影响轻微，而异体红细胞输注可显著抑制肿瘤患者术后免疫球蛋白水平。尽管这种抑制是一过性的，但是对肿瘤患者术后抗感染治疗和预防术后并发症都是十分不利的。本研究中血浆IgM浓度变化不明显可能是IgM本身在血浆中的含量较低，从而统计学上表现为无差异性。邱姬[1]等在观察自体输血和异体输血对骨科患者免疫影响时也发现，异体输血可显著抑制患者术后免疫球蛋白水平，而自体输血则无明显改变，其分析认为可能是血液在保存过程中库血红细胞老化，血细胞产生的各种抗原物质及免疫复合物过多，红细胞负担过重有关系。
结合本研究结果，我们综合分析认为不同输血方法对肿瘤患者术后免疫球蛋白影响可能有以下两个方面原因：一方面可能是异体输血后可降低机体T细胞免疫功能，T细胞可以提供B细胞活化的第二信号，导致B细胞分化成熟障碍[2～4]，从而导致B细胞的终末产物浆细胞产生减少，分泌免疫球蛋白降低，而自体输血对T淋巴细胞的免疫功能影响较小，所以对免疫球蛋白分泌的影响不明显。另一方面异体输血后，异体红细胞及其降解产物可被视作抗原[5，6]，产生抗原-抗体反应，从而大量消耗体内的免疫球蛋白，而自体输血一般存贮时间较短，代谢产物较少，且输入的是自身血，所以对免疫球蛋白分泌的影响轻微。
总之，围术期异体输血可使肿瘤患者术后体液免疫功能紊乱，从而可能导致肿瘤患者预后不良，而自体输血对肿瘤患者免疫功能影响轻微，因此，肿瘤患者围术期应严格限制异体输血，必须输血时应首选自体输血，从而减轻输血对患者术后免疫功能的影响。
参考文献：
[1]邱姬，金阿荣，郭晓秀.围手术期自体输血对血清炎症性因子及免疫球蛋白的影响[J].中国输血杂志，2005，18（1）：39-40.
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篇2
【关键词】 2型糖尿病；免疫球蛋白；补体
近年研究认为,免疫调节异常可能在2型糖尿病(t2dm)的发生发展中起核心作用〔1〕。糖尿病患者在持续的高糖状态下易发生心、脑、肾损伤等多器官并发症和各种感染,诱发酮症酸中毒,增加糖尿病病死率，这些均与糖尿病患者免疫功能低下密切相关。免疫球蛋白（ig）和补体是特异性免疫和非特异性免疫共同的效应分子，可代表机体体液免疫状态，在机体抗感染、免疫调节、免疫监视中发挥重要作用。评价t2dm患者的体液免疫状态,对于临床估计患者接受治疗的可能性、制定治疗策略及判断预后均具有重要意义。
1 资料与方法
1.1 研究对象及分组 选择2007年3月至2008年12月本院内分泌科住院的t2dm患者72例为研究对象。其中男43例，女29例，年龄61～79 岁，平均（69.8±10.5）岁，病程2月～31年，平均（7.7±6.3）年，空腹血糖(fpg)3.12～20.80 mmol/l，平均（10.90±3.20）mmol/l。健康对照组55例，男29例，女26例，年龄 58～78 岁，平均（67.7±11.4）岁,fpg（3.9±1.8）mmol/l，均为我院门诊健康体检者，性别和年龄与患者相匹配。t2dm患者中根据是否患有合并症分为合并感染组12例；合并微血管病变组29例（合并视网膜病变9例，肾脏病变12例，8例同时合并视网膜及肾脏病变）；31例为不合并感染或微血管病变的单纯组。再根据病程分为组1：0～5年病程，33例；组2：6～10年病程，21例；组3：10年以上病程，18例。
1.2 病例排除标准 （1）恶性肿瘤、自身免疫性疾病。（2）其他肾脏疾病如高血压肾病、肾小球肾炎。（3） 各种外伤、手术等应激情况。（4）糖尿病组和对照组1月内均未用过抗生素和免疫抑制剂。
1.3 检测方法 空腹8 h以上采肘静脉血，分离血清后分装待用。（1）采用葡萄糖氧化酶法测量空腹血糖（fpg）及餐后2 h血糖（pbg2 h）。（2）iga、igg、igm及补体c3、c4均采用美国beckman coulter immage 800免疫浓度分析仪利用速率散射免疫比浊法测定。
1.4 统计学方法 使用ssps13.0软件分析，计量资料用x±s表示，采用t检验分析。
2 结果
2.1 t2dm组与健康对照组免疫指标比较 与健康对照组比较，t2dm组血清igg水平明显下降（p<0.05）,iga、补体c3、c4水平明显升高（p<0.01，p<0.05）。血清igm水平无显著变化（p>0.05）。见表1。
2.2 单纯组、感染组及微血管病变组免疫指标比较 与单纯组比较，感染组血清iga、补体c3水平明显升高(p<0.01，p<0.05)。igg，igm，c4水平变化无统计学意义(p>0.05)。微血管病变组血清igg水平明显下降（p<0.05）。iga，补体c3、c4水平明显升高（p<0.01，p<0.05）。igm水平变化无统计学意义（p>0.05）。见表2。
表1 t2dm组与对照组免疫指标测定值的比较（略）
与对照组比较：1）p＜0.05，2）p＜0.01
2.3 不同病程t2dm患者免疫指标比较 t2dm不同病程组比较，病程6～10年组患者血清igg水平较0～5年组明显下降(p<0.05)。补体c3水平明显升高(p<0.05)。iga、igm、c4水平变化无统计学意义(p>0.05)。病程10年以上组患者血清igg水平较0～5年组明显下降(p<0.01)，iga、补体c3、c4水平升高(p<0.05，p<0.01），igm水平变化无统计学意义(p>0.05)。病程10年以上组患者与病程6～10年组患者5项免疫指标比较均无统计学差异(p>0.05)。见表3。
表2 感染组、微血管病变组与单纯组免疫指标测定值的比较（略）
与单纯组比较：1）p<0.05，2）p<0.01
表3 t2dm不同病程组免疫指标比较（略）
与组1比较：1）p<0.05，2）p<0.01
3 讨论
通过对t2dm患者体液中ig分子水平的研究可测评其体液免疫系统的状态。本研究中t2dm组较对照组、合并微血管病变组较单纯糖尿病组血清igg水平均下降，iga水平升高，而血清igm水平无显著变化。t2dm患者免疫功能的改变，考虑可能因患者处于长期高血糖状态，白细胞的趋化性、吞噬作用以及杀菌能力降低，以致免疫力下降〔1〕。微血管病变组igg显著下降可能是糖尿病患者发生微血管病变后，引起血液循环障碍，血流量减少，白细胞代谢减弱，抗体产生减少所致〔2〕。感染组iga明显升高,说明了t2dm患者存在黏膜局部免疫系统的增强(由于黏膜的长期亚临床感染)或可能是一种代偿性增高而致〔3〕。而spooren等〔4〕认为iga升高是由于高糖、感染等因素使大量淋巴细胞长期处于有丝分裂期所致。t2dm患者的免疫功能失衡，与长期高血糖状态下多形核白细胞和b淋巴细胞功能受损有关〔5〕，与血管病变和感染的关系是互动式的。
补体活化产物是特异性免疫和非特异性免疫共同的效应分子，在机体抗感染、免疫调节、免疫监视中发挥重要作用，特定情况下也可以导致组织损伤。补体成分c3、c4与免疫复合物的共价结合能抑制免疫复合物相互结合形成大的网格而易于在组织中沉积，组织免疫复合物激活补体而诱发一系列的病理损伤，也可破坏免疫复合物的空间结构而使其溶解。本研究中，t2dm组较对照组，微血管病变组较单纯糖尿病组c3、c4水平显著升高，感染组中c3水平较单纯糖尿病组明显升高。补体水平变化的机制考虑与胰岛素抵抗(ir)、t2dm患者脂代谢异常有关。yang等〔6〕研究认为，单纯糖尿病会导致c3水平升高，而且c3参与了ir，以致最终引起t2dm的整个过程是一个慢性炎症的发展过程，它刺激先天免疫系统产生免疫应答,引起炎性细胞释放包括c3在内的炎性因子。 fernandereal 等〔7〕的实验结果证实，在t2dm患者的体内c3 、tnfα、il6 及crp水平均增高。目前已经证实了c3 mrna表达因 tnfα及 il6 而上调，这 3 种因素均参与了ir的形成，且产生的c3可直接或间接影响胰岛素信号的级联传递最终导致ir，但c3与胰岛功能之间的关系还需进一步深入研究。koistinen等〔8〕认为脂代谢紊乱肥胖是t2dm c3、c4升高的重要原因：基础研究发现，乳糜微粒可刺激脂肪细胞分泌c3，c3的裂解片段乙酞化刺激蛋白(acylation stimulating protein，asp)能加强脂肪酸的再酯化，促进脂肪细胞、成纤维细胞合成tg，清除血液中的自由脂肪酸，使肝脏 vldl生成减少而降低血脂。因此,c3的升高可能是机体对异常血脂的一种自我调节反应。糖尿病微血管损伤的病理过程是微血栓形成、白细胞淤滞及血管细胞的加速凋亡，补体活化后的级联反应可以伴随并加剧上述的病理过程。一方面，微血栓和白细胞淤滞可引起缺血再灌注损伤，通过补体经典途径活化补体，凋亡的内皮细胞也能启动补体替代途径；另一方面，补体活化后具有促凝、促炎和促凋亡作用，从而形成恶性循环，加速微血管病变的发展。
本组研究中，不同病程体液免疫变化以10年以上组与0～5年组差异性最大，6～10年组与0～5年组igg、c3的变化有意义，其余指标两组间变化不明显。提示病程与糖尿病患者的ig及补体水平相关，总体趋势是随着病程延长，各指标变化更显著。考虑随着病程的延长，除长期高血糖因素外，患者合并血管病变、感染的几率亦相应增加，势必会加重体液免疫失衡。
【参考文献】
1 张 丹，宫晓红，韩美君.niddm合并肺部感染患者的免疫功能变化研究〔j〕.大连大学学报，2003；24(6)：924.
2 潘继豹，卢学勉，叶家鹤,等.2型糖尿病患者血清免疫球蛋白及igg亚类的观察〔j〕.浙江医学，2000；22(3)：1489.
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5 alexiewicz jm，smogorzewski m，klin m,et al.effect of treatment of hemodialysis patients with nifedipine on metabolism and function of polymor phonuclear leukocytes〔j〕.am j kidey dis，1995；25(3):4404.
6 yang y，lu hl，zhang j,et al.relationships among acylation stimulating protein，adiponectin and complement c3 in lean vs obese type 2 diabetes〔j〕.int j obes，2006；30(3):43946.
篇3
[关键词] 体液免疫；病情转归；手足口病；T细胞亚群
[中图分类号] R725.1 [文献标识码] A [文章编号] 1674-0742（2014）10（a）-0108-03
手足口病（HFMD）是临床常见的婴幼儿传染性疾病[1]。发病人群多为5岁以下儿童，临床症状主要有手、足、口腔等部位的疱疹或者是破溃性溃疡等，少数患儿可引发脑膜炎、心肌炎以及肺水肿等并发症。近几年来，HFMD的发病率逐年升高，如何在发病早期进行有效评估并对重症患儿危险性给予及时干预，改善患儿病情预后，一直的临床研究的重点[2]。目前实验室T细胞亚群及免疫球蛋白等免疫学检测指标，在一定程度上可有效反映HFMD患儿的机体免疫状态[3]。该次研究抽选2010年7月―2014年5月175例HFMD患儿，对其不同病程患儿血清免疫球蛋白指标及T细胞亚群相关指标进行分析，并与健康患儿进行对比，旨在探讨HFMD患儿病情进展与细胞及体液免疫水平的关系，以及机体免疫水平在HFMD患儿病情进展中的作用，现报道如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料
随机抽选该院收治的175例HFMD患儿，诊断均符合《手足口病诊疗指南》[4]的诊断标准，其中男92例，女83例，年龄5个月～8岁，平均（2.85±1.07）岁；根据临床表现和病情发展分型：轻症型63例，其中男42例，女21例，年龄5个月～7岁，平均（2.79±1.09）岁；重型60例，其中男32例，女28例，年龄6个月～8岁，平均（2.83±1.05）岁；危重型52例，其中男18例，女34例，年龄5个月～7岁，平均（2.80±1.11）岁；所有患者均未合并其他慢性疾病史，轻症型组均治愈好转，重型组病例中死亡3例，危重型组死亡6例。同时抽选同期131例健康体检儿为对照组，其中男75例，女60例，年龄4个月～7岁，平均（2.88±1.06）岁；各组间性别、年龄比较差异无统计学意义（P>0.05）。
1.2 重型及危重型HFMD患儿临床特性
重症均有如单纯脑炎、脑炎合并肺炎及其他上呼吸道感染等并发症。重型组指有发热、皮疹以及神经系统受累症状，表现为嗜睡、肢颤、阵发性抽搞、易惊吓等。危重型组临床表现为持续性高热（基础体温≥39.0℃），持续时间大约为2～7 d；病情危重，频繁抽搐以及有严重意识障碍，亦有循环、呼吸系统受累症状。
1.3 检测方法
各组患儿入院后2 h内（未进行治疗前）抽取静脉血送检。采用免疫比浊法、HITACHI7600全自动特定蛋白分析仪检测IgM、IgG、IgA等体液免疫功能，试剂从ORION DIAGNOSTICA公司（芬兰）选购，采用BD FACSCalihur型号的流式细胞仪（FCM）检测CD3+、CD4+、CD8+等细胞免疫功能指标，取肝素抗凝新鲜全血1 mL， 然后再50 μL的样品试管中分别加入10 μL剂量的相应单克隆抗体，充分混匀后室温避光放置15 min，采用PACS做溶血，FCM分>10 000个细胞，仪器和试剂购自BD Biosciences公司（美国）。
1.4 观察指标
包括各组患儿临床一般情况、表现、病情变化、体液免疫（IgM、IgG、IgA）及细胞免疫（CD3+、CD4+、CD8+）结果，判断疾病预后。
1.5 统计方法
采用SPSS17.0软件对数据进行统计分析，计量资料以（x±s）表示，两组间采用t值检验，3组均数采用F值检验。
2 结果
2.1 HFMD患儿与健康对照组各免疫指标比较
HFMD患儿细胞免疫（CD3+、CD4+、CD8+等T细胞亚群）水平均显著低于健康对照组（P
2.2 HFMD患儿不同病情程度各免疫指标比较
随着病情严重程度的加重，轻症型、重型、危重型患儿的CD3+、CD4+、CD8+水平不断降低，IgM、IgG、IgA水平升高，3组比较差异有统计学意义（P
3 讨论
手足口病（HFMD）是因感染肠道2病毒而导致的一种传染性疾病，可引发HFMD的肠道病毒多达20多种类型，其中以CoxA16及EV71最为常见。多数患儿感染HFMD后预后良好，有少部分重症患儿可并发脑膜炎、心肌炎以及肺水肿等并发症，个别重症患儿由于病情发展快速，抢救无效而发生死亡。有学者[5]认为HFMD的病情转归与人体免疫功能可能存在重要相关性。
目前，临床通常采用T细胞亚群测定来准确判断病人机体细胞免疫功能。越来越多的研究[6-7]表明，T细胞在人体肠道病毒感染后起着重要的免疫介导作用，可释放出多种细胞因子，在机体抗感染、抗病毒感染免疫应答机制中发挥重要作用。CD4+、CD8+能够调节T细胞的免疫功能，其中CD4+对B淋巴细胞分化功能具有调节作用，刺激产生抗体；而CD8+对抗体合成以及分泌具有抑制作用，同时可抑制T细胞增殖，两者的协调作用使机体免疫应答维持正常。T细胞亚群中的CD3+表达水平代表外周血成熟T细胞总数，CD3+可通过向T细胞内传导TCR双识别信号而促进T细胞活化，分布于所有活化T细胞表面。CD4+又称为Th细胞，是一种辅助诱导性T细胞亚群，CD4+上的TCR能够识别出抗原肽-II类分子复合物，从而参与Th2细胞激活。CD8+是一种抑制性（Ts）以及细胞毒性（Tc）细胞亚群，可识别并结合抗原肽-II类分子，激活细胞毒性T细胞。CD4+与CD8+的比值能够反映出Th与Tc功能间的动态平衡状态，是机体免疫内环境稳定的一项最重要的监测指标，其比值下降，则表示机体免疫力下降[8]。该研究HFMD患儿细胞免疫（CD3+、CD4+、CD8+等T细胞亚群）水平均显著低于健康对照组（P
免疫球蛋白可使体液免疫增强，IgA、IgG能够增强巨噬及NK细胞的免疫吞噬功能，IgA通过经典途径还能对补体系统产生激活作用，使得机体免疫应答反应明显增强。有研究显示，HFMD患儿体液免疫亢进，并且同病情程度存在相关相关性，重症患儿体液免疫亢进表现更为明显，可能与HFMD患儿机体防御有关。本研究中，HFMD患儿体液免疫（IgM、IgG、IgA）水平明显高于健康对照组（P
综上所述，HFMD患儿尤其是有脑炎合并症的重症患儿会出现显著的细胞及体液免疫功能低下及调节紊乱，与疾病严重程度存在相关性。
[参考文献]
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篇4
摘要 :目的 检测新生儿缺氧缺血性脑病（HIE）患儿血清IgG、IgA、IgM的变化，以了解HIE患儿体液免疫功能的变化。 方法 67例HIE患儿根据出生后的日龄和病情轻重分为1～3天组32例，其中轻度HIE14例，中重度HIE18例;4～6天组35例，其中轻度HIE16例，中重度HIE19例。对照组30例新生儿为同期我院产科出生的正常新生儿。采用散射免疫扩散法对HIE患儿和对照组进行体液免疫指标IgG、IgA、IgM的检测，相关结果进行统计学分析。 结果 在1～3天组，IgG、IgA、IgM在对照组、轻度HIE组和中重度HIE组3组间比较无显著性差异（P>0.05）。在4～6天组，IgG、IgA、IgM在对照组、轻度HIE组和中重度HIE组3组间比较亦无显著性差异（P>0.05）。 结论 HIE患儿体液免疫功能无明显变化。
关键词 :缺氧缺血性脑病;新生儿;体液免疫
Abstract:Objiective To detect the changes of serum IgG，IgA and IgM in neonates with hypoxic ischemic encephalopa-thy（HIE）.Methods Sixty-seven neonates with HIE and thirty normal full-term infants were recruited in the study.Ac-cording to the characteristics of immunological function and the degree of HIE，the neonates were pided into1-3day group（n=32）and4-6day group（n=35），and each of them was further pided into a mild group and a moderate-severe group.The immunoglobulin（Ig）in serum was examined by radial immunodiffusion assay with Behring Nephelometer100Ana-lyzer.Results In the1-3day group，the levels of IgG，IgA and IgM in HIE group were not obviously different from that in the control group（P>0.05）.In the4-6day group，these levels did not differ from the control either（P>0.05）.Conclu-sion The levels of IgG，IgA and IgM in serum are not obviously affected by HIE in neonates.
Key words:hypoxic ischemic encephalopathy;newborn;fluid immunity
新生儿缺氧缺血性脑病（hypoxic ischemic en-cephalopathy，HIE）大多由围生期窒息引起，仍然是当今新生儿研究领域的热点，其对全身各个系统的损害国内国外都有许多报道，已为大多数人所熟知。随着Besedovsky［1］ 神经-免疫-内分泌网络学说的提出，人们越来越关注神经系统疾病对免疫功能的影响。HIE是否伴有机体免疫系统受损从而使免疫功能处于抑制或低下状态，导致抗病能力降低，对感染易感性增加?为此，本研究检测了67例HIE患儿血清IgG、IgA、IgM，以了解HIE患儿体液免疫功能的变化，总结报道如下。
1 对象和方法
1.1 研究对象和分组 67例均系我院1999年9月―2001年4月收治的HIE患儿，诊断标准符合1996年10月杭州第4届全国新生儿学术会议所修订的HIE的诊断标准［2］ 。其中男38例，女29例，均为足月产儿，胎龄为37～42周，平均（38.43±2.25）周，出生体重为2500～4000g，平均（3293±386）g。根据出生后的日龄分为1～3天组（n=32），其中轻度HIE14例，中重度HIE18例;4～6天组（n=35），其中轻度HIE16例，中重度HIE19例。对照组30例新生儿为我院产科同期分娩的正常足月顺产新生儿，胎龄为37～42周，出生体重为2500～4000g，平均（3395±358）g。所有检测对象之母亲均无自身免疫性疾病及其他可影响婴儿免疫功能的疾病，患儿住院期间均未使用任何可影响其免疫功能的药物。
1.2 方法 分别采外周血4ml，当日测定。采用散射免疫扩散法（radial immunodiffusion，RI）测定血清IgG、IgA、IgM。抗人IgG、IgA、IgM血清、样本稀释液、IgG、IgA、IgM标准血清、Behring Nepherlometer100An-alyzer均由美国DADE-BEHERING配套提供。
1.3 统计学处理 数据以ˉx±s表示，采用PEMS2.00软件包进行数据处理。所有数据进行方差齐性检验后，进行单因素方差分析，组间比较采用q检验（Newman-Keuls法），P
2 结果
2.1 1～3天组IgG、IgA、IgM测定结果 见表1。IgG、IgA、IgM在对照组、轻度HIE组、中重度HIE组3组间比较无显著性差异（P>0.05）。
2.2 4～6天组IgG、IgA、IgM测定结果 见表2。IgG、IgA、IgM在对照组、轻度HIE组、中重度HIE组3组间比较无显著性差异（P>0.05）。
表1 1～3天组IgG、IgA、IgM、测定结果（略）
表2 4～6天组IgG、IgA、IgM、测定结果（略）
3 讨论
在体内有2种免疫应答类型，一种是遇病原体后，首先并迅速起防卫作用的，称为固有性免疫应答，包括皮肤黏膜的物理作用、吞噬细胞、补体等。另一种是适应性免疫应答，其执行者是B及T淋巴细胞，B及T淋巴细胞识别病原体成分后被活化，活化后并不是即刻表现防卫功能，而是经过免疫应答过程，约4～5天后才生成效应细胞，对已被识别的病原体施加杀伤清除作用。神经系统和免疫系统是维持机体内环境相对稳定的重要调节系统，当机体受到应激或感染后，这两个系统相互作用，免疫系统通过细胞因子对神经系统发挥者特殊的调节作用［3］ 。窒息缺氧可引起免疫功能紊乱［4］ ，而免疫功 能异常又进一步导致和加重新生儿缺氧缺血脑损伤［5］ 。免疫球蛋白（Ig）是体液免疫应答中发挥免疫功能最重要的免疫分子，具有特异性结合抗原、活化补体、结合Fc受体等生物学活性。但本组资料显示HIE患儿体液免疫无明显改变，是否与我们早期使用抗生素防治感染，早期阻断了病原体对机体的刺激，减少了B及T淋巴细胞对病原体的识别，使B及T淋巴细胞活化、效应减少等因素有关，值得进一步研究。 转贴于
IgG于生后3个月开始合成，3～5岁接近成人水平，是血清中含量最高的Ig，其占血清总Ig的75%～80%，其中IgG含量最多。IgG半衰期约20～23天，为再次免疫应答的主要抗体。新生儿的血清IgG绝大多数为通过胎盘的来自母亲的IgG，自身合成的各类IgG量很少，甚至测不出。由于母体转移到胎儿IgG的时期大多在胎龄32周以后，新生儿的IgG含量受母体的IgG水平和胎龄影响较大，新生儿本身的影响较小。本组患儿其母亲均为健康人，血清IgG水平变化不大，HIE患儿IgG水平变化也不大可能与此有关。
IgM是分子量最大的Ig，占血清Ig含量的5%～10%。由于记忆B细胞并不大量分泌IgM，所以IgM的升高表示近期有抗原出现。IgM不仅是初次免疫应答的重要组成部分，而且像IgA一样，通过pIgR（多聚Ig受体）横过上皮在黏膜表面作为重要的分泌性免疫球蛋白。由于在母乳中也存在免疫球蛋白，IgM也能保护新生儿免受肠内病原菌感染直到婴儿的免疫系统完善。IgM不能通过胎盘，是初次体液免疫反应早期阶段产生的主要免疫球蛋白，本组所有的患儿在入院后都早期使用抗生素防治感染，减少了抗原的刺激，因此，与对照组比较差异不显著。也可能研究对象为生后1周的初生婴儿，因来自母体的抗体有抑制作用，抑制性T细胞（Ts即CD8）数高可抑制B细胞产生抗体，免疫系统不成熟，易产生免疫耐受等，使机体产生抗体能力较弱、较慢有关。
IgA分2型，包括分泌型和血清型IgA。分泌型IgA合成和分泌的部位在呼吸道、泌尿道、胃肠道、乳腺组织的特定部位的浆细胞。血清型IgA由骨髓、淋巴结、脾内浆细胞合成入血。IgA是外分泌体液（如唾液、黏液、汗液、胃液、泪液）中最主要的Ig，也是初乳及乳汁中主要的Ig，它在维持婴儿消化道对病原体免疫功能中起作用，被认为是机体防御病原体通过黏膜层的第一道防线。IgA不引发明显的炎症反应，一般认为主要通过隔离、结合以及交联病原体从而组织病原体穿过上皮并促进黏膜对病原体的清除，同时IgA有经旁路途径激活补体的能力，还能调整巨嗜、单核、中性粒细胞对抗原的胞吞作用。IgA分子量较大，不能通过胎盘，开始合成的时间是生后4～6个月，新生儿IgA主要是从初乳及乳汁中获得，量很少，这也是新生儿易患呼吸道、胃肠道感染的原因之一。HIE患儿IgA水平与对照组比较无统计学差异可能与新生儿期IgA基础水平低下有关。本研究结果显示新生儿缺氧缺血性脑病患儿体液免疫功能变化不显著，与刘敬［6］ 、李志奇［7］ 等报道的结果不同，有待于大样本、多中心进一步观察研究。
参考文献 :
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篇5
目的: 研究内源性危险信号分子低分子量透明质酸作为天然佐剂对hav抗原诱导小鼠体液免疫应答的影响。方法: 将icr小鼠分成9组, 分别设生理盐水对照组、 hav抗原组、 hav抗原+铝佐剂组、 hav抗原+低分子量透明质酸50 μg组、 hav抗原+低分子量透明质酸100 μg、 hav抗原+低分子量透明质酸200 μg、 hav抗原+低分子量透明质酸300 μg、 hav抗原+低分子量透明质酸500 μg、 hav抗原+低分子量透明质酸1 mg组, 皮下免疫小鼠。分别在4、 8、 12 、 16周用elisa法检测小鼠血清抗hav igg水平。结果: （1）空白对照组在4、 8、 12 和16周未见抗hav ig生; 各实验组抗hav igg水平在8周时达到最高; 12周和16周时各免疫组的抗hav igg水平逐渐下降, 尤以铝佐剂组下降明显; （2）与hav抗原组相比, 低分子量透明质酸各免疫组小鼠血清抗hav igg水平明显升高（p<0.05）; 与铝佐剂组相比, 低分子量透明质酸免疫组明显增强特异性抗hav igg水平（p<0.05或p>0.05）; （3）低分子量透明质酸安全无毒, 无过敏反应。结论: 低分子量透明质酸能够明显增强灭活hav抗原的体液免疫应答, 具有强的免疫佐剂作用。其免疫佐剂效应优于铝佐剂。
【关键词】 透明质酸 危险信号 佐剂
免疫佐剂对辅助抗原诱导机体产生持久高水平的免疫应答十分重要[1], 透明质酸（hyalouronan acid, ha）是从动物组织提取的一种黏多糖, 由（1β4）d葡糖醛酸和（1 β3）n乙酰基d氨基葡糖双糖单位重复连接组成。透明质酸是细胞外基质的重要成分而广泛分布于细胞外基质, 它是构成皮肤、 玻璃体、 关节滑液和软骨组织的重要成分, 具有独特的理化性质和生物学功能。近年研究表明, 低分子量透明质酸是免疫系统的一种重要内源性危险信号, 与tlr2作用后, 以依赖于myd88、 il1r相关激酶、 tnfr相关因子6、 蛋白激酶cζ、 nfκb的方式进行信号传导, 激活机体的天然免疫应答[2]。因此我们推测低分子量透明质酸可能具有免疫佐剂的特性。本研究中以低分子量透明质酸作为疫苗佐剂, 与hav抗原混合后皮下免疫接种小鼠, 观察内源性危险信号分子低分子量透明质酸对hav抗原诱导小鼠体液免疫应答的影响, 以探讨低分子量透明质酸作为疫苗佐剂的可行性。
1 材料和方法
1.1 材料 icr健康小鼠(spf级, 雌性, 6～8周龄, 质量18～20 g), 由中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所灵长类实验动物中心提供, 并按实验动物中心的方法饲养。酶标仪（biorad microplate reader model 550）购自美国biorad公司。抗hav igg elisa检测试剂盒购自kpl公司, 酶标板购自美国ebioscienc公司。灭活hav抗原和al(oh)3佐剂均由本室保存。低分子量透明质酸（相对分子量（mr）为10000以下）购自江苏镇江东元生物科技有限公司。
1.2 方法
1.2.1 低分子量透明质酸的制备 用电子天平称取适量低分子量透明质酸, 用蒸馏水溶解配制成浓度为5 μg/l。
1.2.2 免疫动物 将icr雌性小鼠随机分成9组, 分别设生理盐水空白对照组、 hav抗原200 μg免疫组（hav）、 hav抗原200 μg+300 μg铝佐剂免疫组（haval）、 hav抗原200 μg+50 μg透明质酸免疫组（havha1）、 hav抗原200 μg +100 μg透明质酸免疫组（havha2）、 hav抗原200 μg +200μg透明质酸免疫组（havha3）、 hav抗原200μg +300μg透明质酸免疫组（havha4）、 hav抗原200 μg +500 μg透明质酸免疫组（havha5）和hav抗原200 μg +1 mg透明质酸免疫组（havha6）, 每组6只。免疫途径为皮下免疫, 共免疫1次。
1.2.3 血清抗hav igg水平检测 分别于免疫后4、 8、 12和16周对小鼠尾静脉采血, 血样37℃放置1 h后, 4℃过夜, 分离血清, 用elisa试剂盒检测抗hav的特异性igg水平, 具体操作方法按照试剂盒说明书。
1.2.4 低分子量透明质酸安全性检测 （1）低分子量透明质酸的异常毒性试验: 实验组选用icr小鼠10只, 雌雄各1半, 每只小鼠皮下注射5 mg低分子量透明质酸, 同时设立生理盐水对照组, 连续观察7 d。（2）低分子量透明质酸的刺激性试验: 取icr小鼠2只, 分别在一侧后肢股四头肌注射低分子量透明质酸（5 μg/l） 1 ml, 另一侧注射等量生理盐水。另取icr小鼠2只, 分别在一侧后肢脚掌注射低分子量透明质酸（5 μg/l） 1 ml, 另一只注射等量生理盐水。48 h后处死, 解剖观察局部组织变化。（3）低分子量透明质酸的过敏试验: 取icr小鼠10只, 雌雄各1半, 皮下注射50 μg低分子量透明质酸, 2周后再尾静脉注射50 μg低分子量透明质酸, 立即观察有无过敏反应。
1.2.5 统计学分析 采用spss11.5统计软件进行单因素方差分析, 并进行levene方差齐性检验, 如方差齐, 则进行单因素方差分析; 而方差不齐则采用kruskalwallis h test, p<0.05具有统计学意义。
2 结果
2.1 低分子量透明质酸安全性 （1）低分子量透明质酸的异常毒性试验: 试验期内所有动物均未出现松毛、 缩团、 发抖等异常反应; 进食、 饮水、 粪便和精神等均正常。实验结束后所有动物均健在且质量增加, 说明低分子量透明质酸安全无毒。（2）低分子量透明质酸的刺激性试验: 在小鼠股四头肌注射低分子量透明质酸48 h后解剖观察局部组织无充血、 水肿及硬结等异常变化; 小鼠后掌注射48 h后解剖观察局部也无异常变化。表明低分子量透明质酸剂量为5 mg时安全无毒性。（3）低分子量透明质酸的过敏反应: 小鼠在过敏试验中未出现蜷缩、 竖毛、 流泪、 喷嚏、 搔鼻、 抽搐、 痉挛、 呼吸困难、 水肿及休克等过敏反应。
2.2 不同剂量低分子量透明质酸免疫增强效应 初免后4、 8、 12、 16周检测抗hav igg水平, 结果显示生理盐水空白对照组检测不到抗hav igg, 各实验组小鼠在4周内均产生抗hav igg; 随着时间推移呈上升趋势, 到第8周达到抗体滴度的峰值, 此后逐渐下降; 但是不同剂量透明质酸免疫组的抗体水平仍然明显高于hav单独抗原免疫组以及铝佐剂组。不同剂量低分子量透明质酸免疫组在同一时间的抗体水平不同, havha4、 havha5和havha6组在8周时产生的抗hav igg的水平较高, 分别为1∶(359.19±2.25)、 1∶(320±3.46)、 和1∶(285.09±3.10); 且havha5和havha6组的抗体水平能够长时间维持在较高水平, 至16周时两组的抗hav igg水平分别为1∶(160±1.55)和1∶(113.13±2.25), 而其他实验组抗hav igg水平均已明显下降。提示低分子量透明质酸的免疫增强效应在一定范围内可能与免疫剂量成量效依赖性。
各低分子量透明质酸免疫组的免疫效应与hav抗原单独免疫组的免疫效应相比较, 结果显示, 4周、 8周、 12周和16周时结果显示不同剂量低分子量透明质酸免疫组的抗hav igg水平均明显高于hav抗原单独免疫组, 在4周时havh6免疫组的抗hav igg水平最高, 为1∶(201.59±3.10), 约为hav抗原单独免疫组的7倍, 二者相比有统计学意义（p<0.05）。8周时havha1组、 havha4组、 havha5组、 havha6组与hav抗原单独免疫组相比有统计学意义（p<0.05, 图1）。至12周和16周时, 所有剂量的低分子量透明质酸免疫组的抗hav igg水平与hav抗原单独免疫组相比有统计学意义（p<0.05, 图1）。这些结果表明, 低分子量透明质酸能够增强hav抗原的特异性体液免疫应答, 具有免疫佐剂效应。
各低分子量透明质酸免疫组的免疫效应与铝佐剂组的免疫效应相比较, 结果显示, 除havh3免疫组的抗hav igg水平在4周时低于铝佐剂免疫组以外, 其他各低分子量透明质酸免疫组的抗hav igg水平在4、 8、 12和16周时均要明显高于铝佐剂组。虽然在4周和8周时各低分子量透明质酸免疫组的抗体水平明显高于铝佐剂免疫组, 但是无统计学意义。在12周时结果显示, havha1组、 havha4组、 havha5组和havha6组与铝佐剂组的抗hav igg水平相比, 具有统计学意义（p<0.05, 图1）; 而havha2免疫组、 havha3免疫组的抗hav igg水平与铝佐剂组相比无统计学意义。至16周时, havha2组、 havha3组和havha5组与铝佐剂组的抗hav igg水平相比, 具有统计学意义（p<0.05）; 而其余低分子量透明质酸免疫组的抗hav igg水平与铝佐剂组相比无统计学意义。这表明低分子量透明质酸不仅具有免疫佐剂作用, 增强特异性的抗hav igg水平, 而且其佐剂效应在一定剂量范围内和一定时间内优于铝佐剂。
图1 不同时间小鼠血清抗hav igg水平（略）
ap<0.05与hav组; cp<0.05与haval组.
3 讨论
目前铝佐剂是惟一批准应用于人的疫苗佐剂, 但是铝佐剂存在诱导体液免疫应答, 而细胞免疫很弱, 与ige型过敏性疾病有关等弊端等[3]。理想疫苗佐剂应该是既能增强体液免疫应答, 又能诱导细胞免疫应答, 且无毒副作用[1]。因此, 研究开发新型疫苗佐剂, 以替代铝佐剂成为疫苗佐剂的研究热点。研究发现, 细胞损伤释放的内源性危险信号分子具有刺激树突状细胞成熟, 增加共刺激分子如cd86和cd83等的表达, 促进细胞因子的分泌; 介导t细胞免疫应答的作用[4, 5]。提示内源性危险信号分子可能作为有效的内源性免疫佐剂, 增强t淋巴细胞对外来抗原的免疫应答。
为了探讨内源性危险信号分子低分子量透明质酸作为疫苗佐剂的可行性, 本研究中采用灭活hav抗原和低分子量透明质酸进行不同剂量配比, 通过免疫小鼠观察了抗hav igg水平的变化, 并对低分子量透明质酸作为佐剂与铝佐剂的效应比较进行了初步探讨。研究证实, 低分子量透明质酸联合灭活hav抗原进行免疫, 有效地诱导了抗hav igg的产生。与单独灭活hav抗原组相比, 不同剂量低分子量透明质酸免疫组其产生的特异性抗体水平均明显高于hav抗原单独免疫组, 其差异性有统计学意义（p<0.05）, 提示低分子量透明质酸具有免疫佐剂效应; 与铝佐剂组相比, 不同剂量的低分子量透明质酸免疫组其诱导产生的免疫增强效应在不同时期显示优于铝佐剂或与铝佐剂相当; 且本研究结果还提示在一定范围内随着低分子量透明质酸的剂量的增加, 抗hav igg的水平逐渐增高, 即其抗hav igg水平与低分子量透明质酸在一定范围内可能呈量效依赖性。低分子量透明质酸是细胞外基质成分, 属于内源性危险信号分子, 具有无毒安全性高、 结构明确、 易于生产和价格便宜等特点, 符合理想疫苗佐剂的特点。本实验结果也证实了低分子量透明质酸安全无毒。
综上所述, 本实验以低分子量透明质酸作为新型疫苗佐剂,能够有效地增强灭活hav抗原的体液免疫应答, 而且不同剂量低分子量透明质酸免疫增强效应显示相当于或优于铝佐剂, 且低分子量透明质酸的免疫增强作用持续时间要长于铝佐剂。因此, 通过本研究提示, 低分子量透明质酸可以作为一种潜在的新型人用疫苗佐剂。同时, 随着许多重大疾病如hbv、 hiv、 肿瘤等严重危害着人类的健康, 开发新型治疗性疫苗迫在眉睫, 而寻找一种佐剂能够协同疫苗抗原诱导产生ctl免疫效应, 达到治疗疾病的作用是一种非常有潜力的策略。因此, 我们下一步的工作将进一步研究低分子量透明质酸是否能够诱导强的ctl免疫反应。
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篇6
关键词: 免疫力； 竹荪； 砷中毒； 体重； 补体溶血活性测定； 淋巴细胞； 巨噬细胞； 吞噬作用
地方性砷中毒是一种严重威胁人类健康的疾病，可以引起神经、泌尿、消化、心血管、免疫、内分泌等多系统、多器官的损伤，甚至可以引起肿瘤的发生[1，2]。竹荪是一种食、药两用真菌，有学者观察到竹荪托盖液对辐射损伤大鼠免疫系统有一定的修复作用[3]，但对砷引起的免疫损伤是否具有保护作用却未见报道。在既往竹荪提取液抗突变和抗氧化损伤研究的基础上[4，5]，本实验进一步研究竹荪提取液对急性砷中毒小鼠免疫系统的损伤是否具有保护作用，为地方性砷中毒的防治提供依据。
1 材料与方法
1.1 主要仪器
酶标仪MQX200（美国BiO-TEK公司）、CO2培养箱（日本三洋公司）、TGLL-18台式高速离心机（北京长源实验设备厂）、HH-8恒温水浴箱（上海申化仪表自控公司）。
1.2 主要试剂
As2O3(AR)由公共卫生学院中心实验室提供，溶血素由浙江省玉环县南方试剂厂生产，小牛血清由杭州四季青有限公司生产，细胞培养液RPMI1640由Hyclome公司生产。
1.3 竹荪提取液竹荪干品由贵州省野生资源开发保护研究中心生产。准确称取竹荪干品50 g加500 ml双蒸水浸泡3 h，制成匀浆，煮沸30 min后用200目滤筛过滤，将滤液浓缩至200 ml，所得竹荪提取液浓度为0.25 g/ml，4 ℃冰箱保存备用。
1．4 动物及分组健康昆明种小鼠180只，雌雄各半，体重28～32 g，由贵阳医学院实验动物中心提供。平均分为3批，每批60只，每批随机分为6组，每组10只；每批分组及剂量均相同。正常对照组，竹荪高剂量、低剂量组（10 g/kg、5 g/kg），砷中毒模型组(As2O3 5 mg/kg)，竹荪治疗高剂量和低剂量组（竹荪10 g/kg、5 g/kg）。砷中毒模型组和竹荪治疗组用As2O3按5 mg/kg标准造模，1次/d，连续7 d；竹荪治疗组在造模的每天下午给竹荪治疗，灌胃量0.02 ml/g。
1.5 实验相关试剂的配制
1.5.1 绵羊红细胞悬液(SRBC)
健康成年绵羊颈静脉处局部消毒采血，加入等体积阿氏细胞保存液(Alsever's)，4 ℃保存。临用前用巴比妥缓冲液洗涤3次，2 000 r/min离心5 min，弃上清液。
1.5.2 巴比妥缓冲液（BBS）
准确称取NaCl 85 g、巴比妥 5.75 g、巴比妥钠 3.75 g、MgCl21.017 g、无水CaCl2 20.066 g，将巴比妥钠溶于双蒸馏水中，依次溶解上述试剂，双蒸馏水定容至1 000 ml，高压蒸气灭菌20 min，4 ℃冰箱中保存。
1.5.3 营养肉汤及6%淀粉肉汤配制
牛肉浸膏0.3 g、蛋白胨1.0 g、NaCl 0.5 g，加入100 ml双蒸馏水中，微火加热溶解，高压蒸汽灭菌20 min，4℃冰箱中保存。在营养肉汤中加入可溶性淀粉6 g。
1.6 观察指标
实验结束时准确称量实验小鼠体重，颈椎脱臼法处死小鼠，取肝脏、肾脏、脾脏并称重，计算脏器指数。用分光光度比色法检测CH50活性，四甲基偶氮唑盐（MTT）比色法检测T淋巴细胞的增殖功能，显微计数法检测并计算巨噬细胞吞噬百分率和吞噬指数。
1.7 统计方法
采用SPSS 10.0统计软件进行分析，实验结果用（x±s）表示，采用方差分析及t检验。
2 结果
2.1 小鼠体重和脏器指数各组小鼠的体重、肝脏、脾脏和肾脏指数均无显著性差异。见表1。表1 各组上鼠小鼠体重及脏器指数比较（略）注：脏器指数=[脏器重量(g)/小鼠体重(g)]×100%。
2.2 CH50淋巴细胞增殖、吞噬率及吞噬指数
由表2可见，与正常对照组相比，砷中毒组CH50显著降低，差异具有显著性（t =3.345,P=0.032<0.05）；竹荪5 g、10 g组CH50与正常组比较差异无显著性。与砷中毒组相比，竹荪治疗5 g组CH50有升高趋势，但无显著性差异；竹荪治疗10 g组CH50显著升高，差异具有显著性（F=4.923,P<0.01）。与正常对照组相比，砷中毒组淋巴细胞增殖功能显著降低，差异有显著性（t=2.150，P<0.05）；竹荪5 g、10 g组淋巴细胞增殖功能与正常对照组比较差异无显著性。竹荪治疗5 g组淋巴细胞增殖功能与砷中毒组相比，差异无显著性；竹荪治疗10 g组淋巴细胞增殖功能与砷中毒组比较明显升高，差异具有显著性（F=2.703，P<0.05）。与正常对照组相比，砷中毒组吞噬率显著降低，差异有显著性（t =3.170，P≦0.05）；吞噬指数显著降低，差异有显著性（t =4.009，P=0.01）。竹荪5 g、10 g组吞噬率和吞噬指数与正常对照组比较差异无显著性。与砷中毒组相比，竹荪治疗5 g组和竹荪治疗10 g组吞噬率明显升高，差异有显著性（F=23.005，P<0.01，P≤0.01）；吞噬指数明显升高，差异有显著性（F=27.175, P<0.01）。表2 各组小鼠CH50、淋巴细胞增殖功能、巨噬细胞吞噬率和吞噬指数比较（略）注：A，吸光度值的差值，反映淋巴细胞增殖功能；与正常对照组比较(1)P<0.05, (2)P<0.01；与砷中毒组比较（3）P<0.05，（4）P<0.01。
篇7
关键词：林企；水电移民；应对；补偿
中图分类号：D632.4文献标识码：A文章编号：16749944（2013）08013702
1基本现状
四川省雅砻江木材水运局隶属四川省林业厅，是四川省国有大型林业企业之一，在1998年以前是以木材水运收贮及销售为主业的林业企业，有在岗职工6000余人、离退休职工4000余人，其流送江段自四川省甘孜州境内新龙县的沙堆和炉霍县的泥巴沟口大桥，途经鲜水河、扎楚河、雅砻江、金沙江、长江，地跨川、滇、渝、鄂4省市，全长3075km，沿江修建了收漂工程34处，驿道297.8km，公路149.24km，建有职工生产生活房屋33.78万m2，在攀枝花市、宜宾市形成了木材收贮、转运和销售基地。
1998年7月二滩水电站蓄水发电，木材水运过坝成了问题，加之国家林业政策的长期调整，木材水运企业借助国家政策开始产业调整，整体转制，就地就近实施国家“天然林保护工程”，但随着雅砻江、金沙江水电基地的梯级开发，锦屏电站、官地电站、桐梓林电站、溪洛渡电站及向家坝电站的相继开工建设，还有即将上马的白鹤滩和乌东德水电站，给林企带来了大量的移民搬迁以及林业产业转移问题，涉及移民搬迁职工和家属累计达3000余人，受影响的沿江职工生产生活房屋达6.5万m2、土地230亩，造成大量的水运工程设施设备闲置被淹。
2问题分析
2.1人员搬迁、生产生活安置问题
企事业单位的职工、家属生产生活移民安置目前均交由本单位自行安置，以支持国家大中型工程项目建设，但人员搬迁、生产生活安置费用过低，本是政府应做的事都交由企业自身解决，由于企业跨区域较广，自身存在的实际困难也较多，不可能将职工统一安置在条件较好的地方，地域差造成了安置条件较大差异。如：溪洛渡水电站建设移民林企职工和家属分散安置在四川省凉山彝族自治州的雷波县和金阳县境内，安置环境较差；桐梓林水电站建设移民林企职工和家属集中安置在攀枝花市米易县城内，安置环境较好。同样都是一个林企的职工，但安置后的生产生活条件差异却很大，由此产生的企业内部矛盾是职工队伍不稳定的因素之一。
2.2水电移民补偿方式不尽合理
2.2.1土地产权制度存在缺陷
林业企业用地绝大多数是国有划拨土地，没有所有权，只有使用权，在面临水电站建设征地时，无法获得被征土地足额的补偿，若需异地迁建，落实土地就是一个难题，各地政府划拨用地首先考虑是国家重点企业和当地企事业单位，通常不会考虑异地的林业企业，要想取得条件较好的地块必须有足够的购置土地费用，然而过去的国有划拨用地无法获得相应补偿，因此异地迁建土地的落实就成了头等大事。
2.2.2补偿方式局限林企发展
目前水电站建设征地针对林企补偿方式主要采取现金补偿和随集镇后靠迁建，独立选址迁建因土地落实困难大多没有选择。由于过去水运企业的房屋资产大多数都处在较偏远的江边，后靠安置的地方当然也就较为偏远，并不利于林企现从事的工作和今后的生存发展，后靠安置后企业资产就会面临闲置，因此很多时候迫使企业不得不选择货币补偿方式，由企业自行安置。如溪洛渡水电站建设涉及林企的雷波和金阳两个林场，后靠安置地均处在较为偏远的乡镇，并不利于林企的生存和发展，因此被迫选择货币补偿方式，自行安置。
2.2.3水电建设征地移民货币补偿费用偏低
首先现行的补偿标准低，以溪洛渡水电站补偿企业实物资产标准为例，房屋砖混结构为813元/ m2、砖木结构为567元/ m2，土木结构442元/ m2 ，基础设施费按房屋总造价的40%～60%进行补偿，企业选择货币补偿自行迁建的话，按目前国家现行的抗震建设要求，不可能再重建土木结构和砖木结构房屋，因此无法按原规模实施重建。
2.3实物指标登记权属争议问题
2.3.1房屋、土地及附属设施权属争议
木材水运企业在1998年底整体转制后，主要从事“天然林保护”工程，原有的沿江生产生活点房很多已不能有效利用，有的留守职工看守，有的租赁给当地政府或请人看守，由于长时间企业没有收回利用，当地政府在没有征得企业同意的情况下，将原企业用地重新划拨给当地企事业单位，致使在水电站建设征地时对实物指标调查登记过程中，将权属登记到目前使用人的头上，造成了权属争议。如2011年白鹤滩水电站建设征地实物指标调查登记时，将原雅水局位于云南省的东川漂木管理站所有实物指标登记到了东川区海事处的名下，造成的权属争议至今未能彻底解决。
2.3.2造林地权属问题
木材水运企业转制实施“天保”工程后，按照国家下达的生产任务，沿雅砻江、金沙江河谷实施了30余万亩的人工造林，大多数是生态公益林，也有部分是与地方合作造林的经济林，企业都没能拥有林权，水电站建设征地影响的林地调查登记又以林权为准，无法登记到林企名下，今后的林地征用补偿也归林权所有人，林业企业却无法获得相应补偿，林企的产业转移和产业升级将无法获得相应资金支持。如乌东德水电站建设征地所涉及林企与地方合作造林地4590亩，2011年实物指标调查时都登记在当地林权人头上，林企与地方面临造林地今后的补偿争议。
3应对策略3.1集中统一安置搬迁职工及家属
由于水运企业沿江分布点多面广，大多地处偏远村、社，交通极不方便，职工生产、生活条件差，在移民补偿方式上应多考虑集中迁建，与当地政府和水电开发业主多沟通协商，将企业发展和职工利益有机结合，选择最适当的迁建地点，最好是在县城或是县城周边，将所涉及移民搬迁各场、段集中迁建一处，交由当地政府和开发业主统一规划、统一建设，这样不仅能充分改善职工的生产、生活条件，同时也能保证林企有一个较好的生存发展环境，可以有效避免林企职工因自行安置差异引起的内部矛盾，有效解决因异地迁建土地划拨困难的问题。
3.2有效解决实物指标权属争议
（1）水运企业由于受国家产业政策调整及沿江水电站的相继开发建设影响，沿江水运资产闲置较多，管理困难，租赁或请人看守时间过长，很多房屋资产年久失修，对方在使用过程中，在没有通知权属人的情况下对其进行了改扩建或维修，发生权属争议，在争议过程中企业往往处于下风。鉴于此类问题，要有不放弃、不抛弃的精神，认真查找相关原始资料，据理力争，依据《中华人民共和国企业国有资产法》、《中华人民共和国物权法》等相关法律法规，通过与当地政府相关部门友好协商，本着尊重历史，面对现实的原则，努力达成共识，必要时通过法律手段解决争议，确保国有资产不流失。
（2）对于林企产业调整后与地方村组的合作造林地，在林改时虽然当地村组办理了林权，但根据《中华人民共和国森林法》以及《中华人民共和国物权法》等相关法律规定，按照合作造林双方签署的合同约定，如果合作造林地因水电站建设征地影响，林企作为入股投资方有权获得相应股份比例的补偿。因此，林企应积极与当地林业、移民等相关部门联系，提供合作造林合同等相关资料，争取林业主管部门支持，避免因林地权属问题引发的补偿争议，按照合作造林合同约定的利益分配比例获得相应的补偿，减少林企在产业建设过程中因水电建设征地造成的损失。
3.3争取搬迁补偿标准合理调整
水电站建设征地移民搬迁补偿标准特别是对林企能否成功实施异地迁建至关重要，各项补偿单价应能够按国家建设现行标准要求建成房屋及配套相应附属设施设备后，并略有盈余，才能达到搬得出、稳得住、能发展的目标。在水电移民补偿标准偏低的情况下，林企应积极向国家、省相关主管部门专题报告林企在水电移民搬迁过程中遇到的各种问题，争取到林企在水电移民搬迁的一些特殊补助政策，弥补因现行水电站建设征地移民搬迁补偿标准偏低带来的一系列问题，以便林企在移民搬迁过程中获得发展空间。
3.4合理安排使用搬迁补偿资金
原木材水运企业沿江水运工程和生产生活房屋等水运资产在获取因水电站建设补偿资金后，应首先确保林企职工和家属的顺利安置，使其在搬迁后的生产生活环境大为改善，同时也要保证企业的正常运转和今后一个时期的发展，抓住水电站建设征地补偿这一契机，使原有的林企水运资产获得足额补偿，以便成功实施林企的产业转移和升级，打造好林企发展平台，改变林企职工收入偏低的现状，为国家生态文明建设做出更大贡献。参考文献：
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1、面粉发酵一般在四个小时以内，不宜放置一晚长时间发酵。
2、若面团的发酵程度不够，蒸出的馒头就会变成开花馒头，蒸出的包子也会显得又小又死；而如果面团发酵过度，则成品表面又会起层或出现皱皮。鉴别面团是否发酵好用手指轻轻插入面团顶部，将手指抽出后，四周不向凹处塌陷且凹处也没有快速恢复原状，这就表明面团发好了。
（来源：文章屋网 ）
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关键词：物业公司；管理；目标；措施
Abstract: Entering a period of rapid growth in the property management; same time, the constant improvement of the relevant state laws and regulations, the market competition is becoming increasingly fierce, property management companies bring opportunities and challenges, and how to regulate the internal management, the establishment owners to serve rationalize the internal and external working relationship-oriented operation mechanism, expand service model, enhance core competitiveness, all property management companies are facing a major issue. This article made some useful discussions on the current property management companies how to improve their management capabilities, the establishment of modern enterprise management mechanisms for market-oriented public welfare and enterprise customers.Key words: Property Company; management; objectives; measures
中图分类号: F570.6 文章标识码:A文章编号:
一、制定发展战略目标
清晰而切实可行的战略规划，是建立在对宏观环境、行业特征、竞争对手和自身实力的充分理解基础上的。通过明确企业发展战略，可以使物业管理公司确定发展目标，充分挖掘自身潜力，刻意提升企业核心竞争能力，制定相应的提升服务质量和品牌策划战略，拓展服务理念战略，并通过有效的战略实施手段，进行战略目标分解，为公司的内部管理制定行动纲领和理论基础，在此基础上再细化制定战略实施措施，以具体工作开展来保证战略目标的实现。
二、健全组织结构
物业管理公司兼顾物业经营和物业管理服务两大业务内容，因此，健全的组织机构和岗位管理体系是必不可少的。在满足企业资质的前提下，对于管理社区，要根据社区的实际情况配备充足的小区管理人员和专业技术人员，提升物业服务等级和质量；对于管理公司，也要根据企业发展的需要配备足够的职能管理人员和经营人员，这是因为，没有足够的管理人员帮助企业领导承担起日常事务的管理工作，没有足够的参谋人员能够帮助企业领导进行经营策划，必将导致企业领导整天忙于应付各种琐碎事件，陷入日常管理的泥潭，难以集中精力站在高端思考公司未来的发展方向和发展策略，常此以往，公司必然始终在出现问题－解决问题－再出现－再解决的低层次状态下循环，不可能实现企业高效快速的发展，这在国内的很多物业管理公司非常普遍。因此，作为物业管理，必须强化公司，加强集中管理能力，统一经营策划、设施维修服务管理、财务管理、人力资源管理和品牌宣传等核心职能，将公司的管理提升到一个新的高度。
三、开发业务项目
物业管理公司在提供房屋、设备设施的维修、维护和保养，环境卫生、安全消防、清洁绿化等的基本服务以外，还可进行一些增值服务或综合服务，以整合和充分利用社会资源和社会服务供应来提高公司的服务能力和品牌效益，常见的一般包括：
①便民服务:提供方便居民入住前装修装饰材料、五金水暖以及日用百货销售场所，建立超市、菜市场、幼儿园、社区医疗所、警务治安室等。
②文化娱乐：开办特色老年学校、健身运动协会、文化娱乐场所等。
③业主投诉协调：设立社区调度指挥中心，协调解决居民投诉问题。
④推出中介服务：如房屋出租、出卖中介，家政服务中介等；
四、创建品牌服务
物业管理的实质就是提供高效便捷的服务，品牌和口碑是物业公司服务的核心，因此，物业管理公司应该根据社区资源、小区特点、外部经营和内部提升的不同需要，提供有针对性的应对措施，致力于提升品牌的社区美誉度和业主认知度，具体方式可考虑以下几项：
①政府与社区的衔接：建立与政府机关的良好关系，发展学校、银行、商店、网络通讯、饮食等公共服务部门，企业机关的外包后勤服务业务。
②未改造的旧小区服务：对现有的维持小区，可以大力宣传物业公司作为诚信企业，其企业经营的重点不是以赚钱为目的地，而是以社区和业主为中心，树立物业公司负责任的外部形象。
③新建小区服务：通过规范管理大力提高服务质量，健全便民服务措施，建立良好社区文化，提升物业公司的品牌知名度。
④资质注册与质量体系认证方面：通过注册高级别资质和进行iso9000质量体系认证，增强公司的宣传力量，提高业主的信任度，提升品牌认知度。
五、成本控制体系
建立严格的成本控制体系加强成本控制，节省费用支出，建立目标成本体系，使得企业在不影响所提供的服务质量的前提下，达到成本的持续降低，是规范公司内部管理，降低消耗，增效节支的重要工作内容；因此，物业管理公司必须建立严格的成本控制和预算管理体系，通过对工作流程的精细梳理和权责体系的明确界定，对公司的采购成本、营销成本、人力成本、管理成本以及财务成本等进行严格的规划、评审和优化工作，在事先、事中和事后进行全方位的成本管理，最终达到持续降低成本的目的。
六、规范业务流程
流程是公司创造价值的机制，对企业的业务流程进行根本性再思考和彻底性再设计，理顺公司内外关系和工作衔接，从而获得在成本、质量、服务和速度等方面业绩的巨大改善，使得企业能最大限度地适应以‘顾客、竞争和变化’ 为特征的现代企业经营环境，对于物业管理公司这类服务型企业至关重要。
通常意义上，物业管理的全流程如下：
对于每一项工作流程，都应该明确其工作目标、适用范围、相关术语与定义、涉及的部门与岗位以及其负有的权责、工作程序、关键控制点和核心重要输入输出，并配以相应的操作性表单，保证工作内容无缝衔接、工作人员克尽职守，最终实现工作任务的圆满完成和企业发展目标的实现。
七、健全人力资源管理体系
物业管理公司必须建立科学的人力资源规划、严格的绩效考核体系和市场化的薪酬管理体系为核心内容的人力资源管理体系，充分调动优秀员工的工作积极性和企业认同感，为企业发展目标提供根本保障。
人力资源规划——按现代企业管理原则编制企业的人力资源规划，包括企业的人员编制计划、人才的职业生涯规划、人才更换和人才储备计划以及员工的培训与教育制度与计划等。
绩效考核——建立基于安全指标、环境指标、绿化指标、设备指标、房管指标、客服指标、培训指标、内审指标、满意工程指标等九大模块的kpi指标（KPI（Key Performance Indicators）意为关键绩效指标，来自美国哈佛商学院教授罗伯．柯普朗(Robert S. Kaplan)和管理大师戴维．诺顿(David P. Norton)的“平衡计分卡”（Balanced Scorecard）体系），设计考核制度和管理办法，设计考核应用表单，指导考核工作开展。
薪酬体系——规划公司的薪酬、福利政策等方面的制度，按现代企业制度规划公司工资及福利方案，使其具有竞争力、公平性，并解决员工的后顾之忧，针对公司发展需要和不同层次的人员设计利益激励机制。
八、建立服务质量管理体系
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关键词： 棉纺织； 涉税； 审计方法
中图分类号： F426 文献标识码： A 文章编号： 1009-8631（2012）08-0018-02
棉纺织行业作为纺织产业的基础性行业，是印染、色织、针织、服装行业的上游行业，其进步和健康发展直接影响并带动着整个纺织行业的进步。针对棉纺织行业出现的混淆抵扣标准，虚开发票，虚列成本；应税与非应税项目划分不清，多抵扣增值税；部分半成品直接销售不计收入；次品成本转嫁；账外经营，偷逃税款等涉税问题，本文从收入的确定、产品成本的核算、固定资产的管理、期间费用的确认四个方面，谈谈相应的审计方法。
一、棉纺织行业存在的涉税问题
（一）收入的确认
1.涉税问题一：以产品抵换加工费，不作销售处理
棉纺织行业发外加工现象比较普遍，企业为了实现资金利用最大化，往往采取以产品抵加工费的现象，而加工企业一般将所抵产品直接销售给批发市场不开发票，从而导致加工费和所抵产品增值税流失。
2.涉税问题二：半成品销售不入账，偷逃税款
棉纺织企业生产过程中，会形成精梳棉、纱等半成品，企业往往不入库而直接销售，不入账，导致税收流失。
3.涉税问题三：废料、刀口布、材料包装物等销售不入账
棉纺织企业在生产过程中会产生棉籽、废棉、刀口布以及材料包装废料等，部分棉纺织企业将其销售后不入账，而收入直接纳入小金库或长期虚挂往来账户。
4.涉税问题四：现金交易销售收入不入账
由于棉纺织行业属于生产技术要求低，劳动密集型行业，这些年来，一些规模小、生产经营不规范的加工型棉纺织企业不断涌现，由此形成的棉纺织企业委外加工和现金交易情况比较普遍，且存在瞒报销售偷逃税款的现象。
（二）产品成本核算
1.涉税问题一：成本转嫁
棉纺织企业在生产过程中，会积压一部分次品布和废布，对于企业来说，这部分产品的市场价值一般来说要低于成本价，企业往往把这部分次品布和废布的成本转嫁到实现销售的合格品的成本中，从而调减利润。
2.涉税问题二：改变存货计价方法多结转成本
一些棉纺织企业，为了调节利润而在各年度之间或年度内改变存货计价方法。
3.涉税问题三：计划成本核算不规范
棉纺织企业为了在成本核算时，应对棉花市场价格的经常性波动，采用计划成本法进行核算。按照现行有关规范，利用计划成本法进行存货核算时，企业对存货的计划成本和实际成本之间的差异应当单独核算，按期结转应负担的成本差异，将计划成本调整为实际成本。而企业为了人为调节成本，通过频繁调控计划成本和年终一次性结转成本差异等方法，降低企业利润。
4.涉税问题四：食堂、浴室领用煤、耗汽进项不转出，成本直接在制造费用中列支
棉纺织行业生产过程中需要用蒸汽，一般有两种来源方式：一是通过自用煤锅炉生产蒸汽，二是购买热电厂的管道蒸汽。企业食堂、浴室等福利部门耗用的煤和蒸汽，往往不单独核算，而是一并作为生产用辅助材料计入生产成本，并抵扣税金。
（三）固定资产的管理
棉纺织企业由于面临设备和技术的更新，一批技术先进的纺织设备逐渐替代了老设备。为了加快老设备的淘汰，企业改变折旧方法或减少折旧年限，而不向税务机关备案，导致折旧成本增加。主要涉税问题是：任意改变折旧方法或折旧年限，多结转成本。
（四）期间费用的确认
1.涉税问题一：利息资本化问题
棉纺织企业为了增强公司的市场竞争力，不断扩大生产规模，购建固定资产的借款利息一般允许计入相关资产的成本，即所谓的利息资本化。但有些企业则将应资本化的利息全部记入当期费用，从而减少当期利润。
2.涉税问题二：外币业务核算不规范
棉纺织企业引进国外先进设备时，往往涉及到外币业务核算，部分企业在将外币金额折算为记帐本位币时，选用的方法不规范，其汇兑损益，往往在设备安装竣工前后，全部计入当期损益，未计入相关固定资产的成本。
二、棉纺织行业涉税的审计方法
（一）收入的确认
1.涉税问题一：以产品抵换加工费，不作销售处理
审计方法：
审计人员可以查核企业委托加工材料明细账、发外加工记录表和加工合同，根据投入产出率或加工合同注明损耗率、成品率，核对发外数量和加工收回数量是否匹配，从而确定以产品抵换加工费数量和金额，据以补税。
2.涉税问题二：半成品销售不入账，偷逃税款
审计方法：
（1）掌握棉纺织企业生产工艺流程，核对生产流程记录（车间原始记录）、入库单和出库单，对生产环节各项制度进行内控测试；
（2）必要时可以向车间统计人员进行询问调查，根据投入产出法测算企业产品数量，并与企业账面数据核对，确定是否存在账外销售行为。
3.涉税问题三：废料、刀口布、材料包装物等销售不入账
审计方法：
（1）对生产环节的内部控制制度进行测试；
（2）询问车间管理人员，对废料的处理方式，查看相关废料处理台账和有关记录，如果废料通过仓库处理，还必须查看仓库相关台账和记录，并与财务上其他业务收入账户进行核对，如有差异，应作补税处理。
（3）对一些长期挂账的其他应付款科目，要查明原因，必要时可以通过函证或实地调查的形式进行核实。
（4）还可以对企业的保险箱等进行突击检查，以防企业私设小金库
4.涉税问题四：现金交易销售收入不入账
审计方法：
（1）审计人员可以根据企业实际情况，对企业的投入产出、能耗率等数据指标进行测算；
（2）将企业出库单（发运记录）、送货单、销售合同与财务账册反映的往来客户信息进行核对，根据仓库明细账和盘点表等原始资料对存货内容进行真实性测试，以确认是否存在未及时开票申报收入或产品发出未做销售的行为；
（3）也可结合“其他应付款”贷方科目、“预收账款”“其他应收款”贷方科目对预收款项目进行跟踪审计。
（4）对于发外加工业务，可参照产品抵换加工费审计方法
（二）产品成本核算
1.涉税问题一：成本转嫁
审计方法：
审计人员可以对企业产成品明细账进行比较分析，将不同型号产成品的期初单位成本余额与当期入库的产成品单位成本进行比对，差异较大的且属于成本转嫁性质的，应重新进行正确的成本核算。
2.涉税问题二：改变存货计价方法多结转成本
审计方法：
审计人员可以通过遵行性测试，审计企业选择存货计价方法的依据以及前后各期的一贯性。对企业销售成本率年度或月度间有明显异常的，应该进行重点测试，以确定企业是否存在人为改变存货计价方法的情况。
3.涉税问题三：计划成本核算不规范
审计方法：
（1）检查企业有没有制定各种存货的计划成本目录。检查存货的分类、各种存货的名称、规格、编号、单位和计划单位成本。除一些特殊情况外，计划单位成本在年度内一般不作调整。如果进行了调整，应考虑到是否进行利润调控。同时应关注计划成本制定的合理性，可与同行业水平进行比较。
（2）检查收到存货时，有没有按计划单位成本计算收到存货的计划成本并填入收料单内，将实际成本与计划成本的差额作为“材料成本差异”分类登记。
（3）发出存货负担的成本差异必须按月分摊，不得在季末或年末一次分摊。检查企业在核算过程是否存在违规的会计处理。
4.涉税问题四：食堂、浴室领用煤、耗汽进项不转出，成本直接在制造费用中列支
审计方法：
（1）获取企业领料单，核实各部门领用煤的数量，对照企业账务处理情况，确定企业福利用煤实际数量，据以补交增值税，同时调整成本项目；
（2）对于外购蒸汽，通过实地查核企业蒸汽计量总表和分表，根据企业浴室、食堂计量表分表上记录的用汽量来作为企业进项税金未转出计税依据，同时调整成本项目。
（三）固定资产的管理
涉税问题一：任意改变折旧方法或折旧年限，多结转成本。
审计方法：
审计人员在对固定资产和累计折旧项目进行审计时，对照企业固定资产和累计折旧明细账，核实企业折旧年限和折旧率是否正确，折旧方法是否遵守一贯性原则。
（四）期间费用的确认
1.涉税问题一：利息资本化问题
审计方法：
关注借款合同是否与购建的固定资产有关，结合固定资产交付使用记录及质检、消防等相关部门的验收记录，确定应资本化的利息是否合理。
2.涉税问题二：外币业务核算不规范
审计方法：
查核企业外币业务的核算是否与制度规定相符，前后各期采用的折算方法是否一致，对汇兑损益的处理方法是否符合规定。
我国是世界产棉大国，棉纺织行业得到了快速发展，并对世界棉纺织业的原料供应、产能水平、加工贸易的发展都已起到了举足轻重的影响。通过一定的审计方法，客观地获取和评价有关涉税事项认定的证据，能够有效地起着财政监督的作用。
参考文献：
[1] 解忠艳.税收审计式稽查的有关问题研究[J].天津经济，2011.
[2] 何媛.浅谈计算机辅助审计在税收征管审计中的应用[J].现代审计与经济，2010，6.
[3] 罗涛.深化税收审计推动税制改革和体制机制创新[J].中国审计，2010，2.
