立春诗句范文

时间:2023-03-29 08:29:19

导语:如何才能写好一篇立春诗句,这就需要搜集整理更多的资料和文献,欢迎阅读由公务员之家整理的十篇范文,供你借鉴。

立春诗句

篇1

描写立春的唯美诗句

1、雨打梨花深闭门,误了青春,忘了青春。____唐寅《一剪梅·雨打梨花深闭门》

2、春宵一刻值千金,花有清香月有阴。____苏轼《春宵·春宵一刻值千金》

3、人面不知何处去,桃花依旧笑春风。____崔护《题都城南庄》

4、沾衣欲湿杏花雨,吹面不寒杨柳风。____志南《绝句》

5、夜月一帘幽梦,春风十里柔情。____秦观《八六子·倚危亭》

6、红酥手,黄縢酒,满城春*宫墙柳。____陆游《钗头凤·红酥手》

7、小楼一夜听春雨,深巷明朝卖杏花。____陆游《临安春雨初霁》

8、寂寞空庭春欲晚,梨花满地不开门。____刘方平《春怨》

9、人间四月芳菲尽,山寺桃花始盛开。____白居易《大林寺桃花》

10、江碧鸟逾白,山青花欲燃。____杜甫《绝句二首》

11、读书不觉已春深,一寸光阴一寸金。____王贞白《白鹿洞二首·其一》

12、沉舟侧畔千帆过,病树前头万木春。____刘禹锡《酬乐天扬州初逢席上见赠》

13、竹外桃花三两枝,春江水暖鸭先知。____苏轼《惠崇春江晚景 / 惠崇春江晓景》

14、江南无所有,聊赠一枝春。____陆凯《赠范晔诗》

15、春风十里扬州路,卷上珠帘总不如。____杜牧《赠别》

16、人闲桂花落,夜静春山空。____王维《鸟鸣涧》

17、流水落花春去也,天上人间。____李煜《浪淘沙令·帘外雨潺潺》

18、相见时难别亦难,东风无力百花残。____李商隐《无题·相见时难别亦难》

19、春江潮水连海平,海上明月共潮生。____张若虚《春江花月夜》

20、红豆生南国,春来发几枝。____王维《相思》

21、天街小雨润如酥,草色遥看近却无。____韩愈《早春呈水部张十八员外 / 初春小雨 / 早春》

22、春风又绿江南岸,明月何时照我还?____王安石《泊船瓜洲》

23、春心莫共花争发,一寸相思一寸灰!____李商隐《无题·飒飒东风细雨来》

24、春水碧于天,画船听雨眠。____韦庄《菩萨蛮·人人尽说江南好》

25、等闲识得东风面,万紫千红总是春。____朱熹《春日》

26、知否,知否?应是绿肥红瘦。____李清照《如梦令·昨夜雨疏风骤》

27、满目山河空念远,落花风雨更伤春。____晏殊《浣溪沙·一向年光有限身》

28、绿杨烟外晓寒轻,红杏枝头春意闹。____宋祁《玉楼春·春景》

29、流光容易把人抛,红了樱桃,绿了芭蕉。____蒋捷《一剪梅·舟过吴江》

30、故人西辞黄鹤楼,烟花三月下扬州。____李白《黄鹤楼送孟浩然之广陵》

31、迟日江山丽,春风花草香。____杜甫《绝句二首》

32、草长莺飞二月天,拂堤杨柳醉春烟。____高鼎《村居》

33、谁家玉笛暗飞声,散入春风满洛城。____李白《春夜洛城闻笛 / 春夜洛阳城闻笛》

34、羌笛何须怨杨柳,春风不度玉门关。____王之涣《凉州词二首·其一》

35、春潮带雨晚来急,野渡无人舟自横。____韦应物《滁州西涧》

36、两个黄鹂鸣翠柳,一行白鹭上青天。____杜甫《绝句》

37、风乍起,吹皱一池春水。____冯延巳《谒金门·风乍起》

38、海棠未雨,梨花先雪,一半春休。____王雱《眼儿媚·杨柳丝丝弄轻柔》

39、若待上林花似锦,出门俱是看花人。____杨巨源《城东早春》

40、花褪残红青杏小。燕子飞时,绿水人家绕。____苏轼《蝶恋花·春景》

41、有情芍药含春泪,无力蔷薇卧晓枝。____秦观《春日》

42、日出江花红胜火,春来江水绿如蓝。____白居易《忆江南·江南好》

43、乱花渐欲迷人眼,浅草才能没马蹄。____白居易《钱塘湖春行》

44、好雨知时节,当春乃发生。____杜甫《春夜喜雨》

45、爆竹声中一岁除,春风送暖入屠苏。____王安石《元日》

46、一片春愁待酒浇。江上舟摇,楼上帘招。____蒋捷《一剪梅·舟过吴江》

47、千里莺啼绿映红,水村山郭酒旗风。____杜牧《江南春》

48、唯有门前镜湖水,春风不改旧时波。____贺知章《回乡偶书二首》

篇2

1、城春草木深这一句诗句的历史背景安史之乱。

2、出自杜甫的《春望》。国破山河在,城春草木深。感时花溅泪,恨别鸟惊心。烽火连三月,家书抵万金。白头搔更短,浑欲不胜簪。译文:长安沦陷,国家破碎,只有山河依旧;春天来了,人烟稀少的长安城里草木茂密。感于战败的时局,看到花开而潸然泪下,内心惆怅怨恨,听到鸟鸣而心惊胆战。连绵的战火已经延续了半年多,家书难得,一封抵得上万两黄金。愁绪缠绕,搔头思考,白发越搔越短,简直要不能插簪了。

3、《春望》是唐代大诗人杜甫创作的一首诗,此诗前四句写春日长安凄惨破败的景象,饱含着兴衰感慨;后四句写诗人挂念亲人、心系国事的情怀,充溢着凄苦哀思,表现出诗人爱国之情,也展示出诗人忧国忧民、感时伤怀的高尚情感。

(来源:文章屋网 )

篇3

1、该剧改编自冯唐的小说《北京北京》,讲述了秋水在本硕连读八年的大学生涯中,结识了爱人小红与一群好兄弟。毕业后几经坎坷,让他们对青春时代产生无尽怀念与感悟的故事。

2、二十世纪九十年代,文学青年秋水遵从父母的意愿考入医学院,遇到性格截然不同却一样爱他的小红和赵英男。面对两个女孩的追求,秋水虽然选择了自己认为应该喜欢的赵英男,但心里一直住着小红;在秋水与赵英男交往的七年里,小红也还是一直守在秋水身边。即将毕业之时,痴迷文学的秋水被赵英男批评不务正业,两人渐行渐远;但小红理解秋水,欣赏他的文学才华,是秋水的心灵伴侣。

(来源:文章屋网 )

篇4

值此新春佳节到来之际,我代表管理团队向xx快递的全体成员致以最诚挚的祝福!祝大家身体健康,阖家幸福!

在金戈铁马的XX年,天天快递逆流争锋,勇创佳绩。前半年里,我们稳扎稳打,夯实网络基础,调整和改进管理策略;后半年里,我们不断刷新各项业绩最高纪录,圆满度过“双十一”和“双十二”业务高峰,喜气洋洋迎来公司20周年庆,获得邮管局各级领导、同行伙伴以及社会大众的高度评价和称赞。

与此同时,xx快递注重对员工的人文关怀,积极履行社会责任,努力建设企业文化。公司内部多次发放节日福利和补贴、组织员工活动、热心帮助困难员工。另外,主动响应社会号召,参加“大绳的希冀”、“让生命多一点绿”、“爱心夏令营”、“快乐阅读 袋袋相传”等多项公益活动,丰富企业文化内涵,传递社会正能量。

种种令人瞩目的成绩,表明天天快递已经成功度过转型期,进入快速发展期。

企业的发展进步,离不开每一位xx人的付出。在过去的一年里,天天人凝心聚力,营造奋发向上的工作氛围,充分发扬亮剑精神,用智慧和汗水换来每一项进步。正是你们的辛勤奉献,扭转了天天的新形象,打响了天天的品牌口号,创造了天天美好的未来!

篇5

主持人:梅林竹雨

庄 主:百媚千红 (以《落花香》为题目步庄主韵)

清泉的开场白:梅林竹雨、百媚千红是网络上的诗歌才女。她们以聪慧的才华吸引了

全国爱好诗词的诗友。常在空间吟诗对句。清泉观后深有感触,认为在诗歌低迷的今

天,团结广大诗歌爱好者,成立一个诗社,互相交流作品,学习和提高诗歌创作,何

乐而不为!本人根据梅林竹雨辛勤整理,编辑了此篇《春季赛诗会》。意在如此。有

何不妥,还望大家原谅

梅林竹雨步韵百媚千红《落花香》

七绝【落花香】八首 步韵 百媚千红

【1】

风推雨逐筑春殇,梦醒楼台看晓棠。

独秀闲庭无以趣,问君可闻落花香。

【2】

潇潇春雨望谁量,倾向繁枝惹恨长。

一夜东风无意虐,城庭陌野落花香。

【3】

夜声渐籁月光凉,无故寻愁酒痛肠。

前日庭前相对醉,今宵墨研落花香。

【4】

蜂飞蝶舞绕山梁,杏雨桃风施意长。

无奈绿肥红粉退,徘徊不舍落花香。

【5】

窗台月映柳丝长,欲赋春诗句句殇。

倦墨昏灯情寄枕,梦中几缕落花香。

【6】

红绡香断觉凄凉,不忍樽前独自伤。

置酒呼来笺上客,闲庭弄韵落花香。

【7】

千红百媚也曾狂,谁比风流占宋唐?

纵使无情无义客,也怜一地落花香。

【8】

有情有意酝华章,墨底无私誉满堂。

两处缘深终不忘,与君共赋落花香。

【9】

外一首

词来诗往好文章,笔墨横飞尽肖狂。

百媚千红题意巧,家家醉赋落花香。

百媚千红原诗:

****

七绝【落花香】八首

【一】

诗中愁怨酒中殇,暮雨潇潇湿海棠。

消瘦人儿勤执笔,素函沾满落花香。

【二】

情深缘浅自思量,过尽深春恨夜长。

疏影临窗风细细,送来阵阵落花香。

【三】

冰弦慢奏指微凉,一曲离歌碎断肠。

惆望星窗幽梦远,庭前唯有落花香。

【四】

双双紫燕栖雕梁,眷眷情深绮梦长。

烟雨红尘君与度,痴心还赏落花香。

【五】

红笺小字蕴情长,千念无休粉泪殇。

燕子双飞谁共我,自怜满地落花香。

【六】

弯弯新月透寒凉,回首前缘枉自伤。

曲径幽深闲渡步,罗衣沾满落花香。

【七】

兰亭把酒赋诗狂,锦句佳文论宋唐。

墨舞人生多快意,酒樽沾满落花香。

【八】

有花有酒有文章,墨客文人聚一堂。

笑论春秋千古事,别时同赋落花香。

**众诗友和诗步韵**

幽若-嫦娥落月和诗

1.

横琴奏断泪成殇, 古陌清风瘦海棠。

孤影伶仃寂寒夜, 谁人共赏落花香

2.

横琴奏断泪成殇, 古陌清风瘦海棠。

孤影伶仃寂寒夜, 谁人共赏落花香

3.

灯花挑尽夜难量,寸寸愁思寸寸長。

诉尽清笺情未寄,怎描窗外落花香

4.

灯花挑尽夜难量,寸寸愁思寸寸長。

诉尽清笺情未寄,怎描窗外落花香

5.

古楼弦月夜寒凉,更漏未息人断肠。

素女凭栏寂声问,心思寄与落花香

6.

余音三日绕陈梁,未了高山流水長。

正恨今生知己少,与君执手落花香!

7.

罗衾难暖夜绵長,血帕同焚尽泪殇。

一世篱人檐下寄,半生但葬落花香!

8.

无人共我话凄凉,织就寒衣缕缕伤。

月下关山千里外,夫君可憶落花香

9.

谁言稚子但痴狂 泼墨诗洋傲宋唐。

海内书山勤為徑,挥毫写尽落花香。

秋山和诗

1.

艳妆秾丽孕情殇,谁在深春泣露棠。

昨夜欣闻宜沐雨,今朝忽叹落花香。

2.

牵情软语绕雕梁,一剪东风柳线长。

紫羽翩翩云上下,新巢垒就落花香。

3.

孤灯钝笔耐昏凉,试步君诗忘饿肠。

自感陈词难适意,吟笺时透落花香。

4.

春风着意密丝量,云绽霞铺织锦长。

双袖撩纱杯映玉,酒唇沾得落花香。

5.

重包叠裹裱辞章,附雅怜庸寄陋堂。

墨款无名欣自贵,四时同赏落花香。

6.

嘶风犹喜去途长,万里心存伏枥殇。

百战难消神骏骨,轻蹄愧染落花香。

7.

晚风萧瑟骤添凉,或恐春英夜渍伤。

罗帐轻舒权抵虐,暖熏期共落花香。

8.

纵情诗酒近痴狂,顺水跟风搏宋唐。

律辩中华传雅韵,春深闲赋落花香。

心如止水和诗:

1.

孤芳难解夜幽凉,未语心思酬旧伤。

冷月无计怜惜顾,残霜几度落花香

2.

相思愁解枉然量,梦扰秋寒犹恨长。

无助残殇心寂寂,哪堪零落碾魂香。

3.

霜风犹染夜思凉,残寂还摧泪断肠。

无语相对凝眸悴,休将疏离落泥香。

4.

清寒月寂枕幽长,旧绪萦怀寂寞殇。

梦系情思酬对盏,恐惊落落泪花香。

5.

风欺雨顾助心殇,月冷星寒老海棠。

谁系愁痴蘋惹绪,忍将泪眸袖残香。

6.

高朋雅韵情意长,馨词款款慰愁殇。

雀上枝梢啼笑语,才下眉头落花香。

锦绣伊人 和诗

1.

秋水长天云雾翔,昆仑掩翠红日妆。

霞光墨染彩锦绣,细雨润笔落花香。

2.

家家争赋落花香,百媚千红好文章。

梅林步韵长亭外,竹雨斜织古道旁。

3.

百花争艳满庭芳,低吟浅唱皆成章。

天南海北聚一堂,巧笔痴赋落花香。

蜗牛也牛和诗

1.

骤雨叩窗夜初凉,无限相思转柔肠。

若是人生无聚散,怎知幸福似花香。

2.

情深缘浅费思量,花自飘香嫌夜长。

只恨东风无情意,吹落百花空余香。

花香盈袖 和诗

1.

搜肠刮肚费思量,腹内空空怨夜长。

喜看众友新诗就,只恨自己笨花香。

2.

夜雨声声敲断肠,梦里又添新忧伤。

明朝怕见海棠泪,满园都是落花香。

醉言梦语和诗

1.

横笺泼墨正疏狂,对月抒情效宋唐。

一陈东风千树绿,只闻满卷满花香。

2.

落影无意染澄江,不奈春老谢幕忙!

因有花红争先赋,唯恐来年无好章!

春风依旧和诗:

1.

孤灯瘦体影犹长, 月暗星移已是殇。

诗韵乏词难入墨, 夜风吹过落花香。

2.

文风雅韵不轻狂,细琢精磨效宋唐。

雪月风情诗里颂,最怜庭院落花香。

浮云和诗:

江南神往不成殇,红豆东边恋海棠。

我写诗词和月色,行行沾满夜花香

清影凝霜和诗:

一溪春水浣斜阳,粉蝶翩翩入画堂。

雁字相思谁与寄,归来恰是落花香。

清风飘雪和诗

萧风细雨润愁肠,拈香执笔惹心伤,

已现梅林诗千百,班门岂敢把斧扬。

重剑无锋 和诗

清风拂面柳丝长,情到浓时却是殇。

最是春深花满地,小舟泛尽水中香。

清风明月 和诗

遍洒珠玑字字香,梅林竹雨好文章。

景融情意馨香透,词赋清醇醉四方。

云中月和诗:

一夜春风幽梦长,无端摇月落花殇。

高洁谁念梅枝瘦,掸去粉华只留香。

落花人独立和诗

月淡星稀夜微凉,思君万里几断肠。

独酌醉卧残红晕,清风可寄鬓花香。

慕云风和诗:

音沉客倦透心凉,玉笛声催断寸肠。

户外杨花频落去,疏帘淡对海棠香。

红尘之:烟的寂寞和诗

梅林竹雨落花香, 梦醒晨风微微凉,

别院偶闻鸟鸣叫,寻声移步看端详!

清泉 和诗:(另附学诗扎记八首)

独守寒窗身觉凉,怨诗句句痛断肠;

风摧雨打洒满地,谁闻庭院落花香。

***

四月二十九日是百媚千红生日,梅林竹雨赋词祝贺

【满庭芳,祝百媚千红生辰快乐!】百媚千红,吟风醉月,素颜浓裹幽芳。东风细雨,滋润蕊欣狂。馨梦盈香满院,诞辰至、云雀鸣窗。同声祝,汁飞墨引,万古绝风扬。春秋应载梦,诗词秀丽,梦笔成章。莫愁女,文坛一代娥皇。日月风花共醉,红颜俏,福寿安康!情缘何须细问,字里见衷肠!

学诗扎记(一)步韵百媚千红、梅林竹雨《落花香》

一、举杯饮酒心中殇,点点泪水湿海棠;

问讯远方作诗人,何知满地落花香?

二、心事重重难思量,无缘逢君说短长;

诗稿焚作漫天灰,犹如桃李落花香。

三、秋风瑟瑟身觉凉,一声别离痛断肠;

从此都是天涯客,难闻庭院落花香。

四、春归燕来绕屋梁,往返穿梭筑巢忙;

世间生灵皆有情,林中阵阵落花香。

五、独依栏杆沐月光,遥望远方路茫茫;

春去春来又一年,小院片片落花香。

六、诗人天生性情狂,弄文舞墨学宋唐;

枉费心思化梦蝶,深春处处落花香。

七、文友挥笔写诗章,天南地北聚一堂;

梅林竹雨莫愁女,吟诗作赋落花香。

篇6

原文:

《董生秉纯吉夕贻书求诗》朝代:清    作者:全祖望

远闻奠雁结缡日,大好小春红叶天。

佳儿佳妇定难得,正身正家岂偶然。

篇7

“心逐春光万里流,回风吹堕望京楼。”下一句是:江南尽是相思树,和雨和烟系紫骝。

原文:

《题望京楼》朝代:清    作者:屈大均

心逐春光万里流,回风吹堕望京楼。

江南尽是相思树,和雨和烟系紫骝。

篇8

(二) 闹钟对我来说的作用就是让我换个姿势睡觉 就算穷途末路也不会回头找那些背叛过我的狗

(三) 说实话 我真的挺羡慕你的皮肤的 你说你怎么能把它保养的那么厚呢

(四) 学渣苦,学渣累,学渣考前不能睡,学渣还要瞻学霸,待到期考一结束,学渣一把辛酸一把泪。

(五) 有人说我帅 我笑了 结果他们说我笑起来更帅

(六) 考试给学生扣分是违法的,刑法规定:利用他人无知造成他人损失的行为就是欺诈罪

(七) 不要怪校服不好,其实还挺好的。起码袖子能装好多好多吃的,兜里也可以,想蹭哪蹭哪

(八) 你们怎么说我帅都行我不介意但是别扯上我朋友和他们没关系他们只是一群无辜的傻狍子

(九) 父母为了阻止你早恋,都采用过哪些丧尽天良的办法?给了我这张脸...

(十) 我生气的时候你别笑 因为你一笑我就会跟着笑 这样很没面子知道吗

(十一) 爱我你怕了吗 眼泪你忘了吗 还记得仰望天空度角说你爱我吗 不是说好做彼此的舔屎吗???

(十二) 我简直不敢相信 我整天好吃好喝伺候着我的那群脂肪细胞 当我在寒风中要冻死的时候它们一个二个就装作不懂的

(十三) 生活小技巧 当你某一阵觉得自己生活特别宽裕的时候一定要记得给大衣口袋书包夹层或者是书或本子里塞点钱

(十四) 我总结一下现在的网红,高鼻白脸美瞳眼,嘟嘴长发锥子脸。有时候你和网红只差一个鼻影和美瞳的距离。

(十五) 长发及腰有什么了不起的,有种你刘海及腰啊。

(十六) 假期生活是这样的,你在半夜十一二点打电话给我,我不介意,但你要是早上六七点打电话给我,我不介意弄死你

(十七) 漂亮女生不会跟漂亮女生做朋友她们只会找长相一般的女生当跟班这就是贱的所在

(十八) 别用你那盗版蒙娜丽莎般的微笑冲着我,我的胃没你想象的那么坚强

(十九) 我希望我的好朋友们都能发肆发狠的读书,然后考上理想的大学找到合适的工作,然后养我

(二十) 其实当初我也是有八块腹肌的 只是练第九块的时候走火入魔九九归一了!

(二十一) 老师,我想请假。 你怎么了? 我晕课。 滚! 谢谢老师!

(二十二) 我们究竟要变得多坚强才能承受住这世间的荒凉

(二十三) 作为一件衣服,你居然不会自己洗澡,要我给你洗,你丢不丢衣服的脸,你说!

(二十四) 我就喜欢你这种不喜欢我又反抗不了我,只能一次次被我强吻的女人

(二十五) 目前状态:学不进去 玩不痛快 睡不踏实 浑身不对劲 吃的还特多

(二十六) 弱水三千只取一瓢是什么意思? 就是整组的作业我只抄她的

(二十七) 挣钱是一种能力 花钱是一种技术 我能力有限 但我花钱的技术相当牛逼

(二十八) 大冬天的,不想上课让舍友帮忙请假,第二天我中暑的消息传遍校园。

(二十九) 不要在你最好的年纪做一个只会玩手机的丑逼

篇9

【关键词】 白藜芦醇;微小RNA-146a;肺泡巨噬细胞;肿瘤坏死因子-α

Effect of ResveRatRol on expRession of lipopolysacchaRide-induced micRoRNA-146a in alveolaR macRophages Zeng Zhenguo,Shao Qiang,Li Yong,Ding Chengzhi, Qing Cheng, Liu Fen, Zhan Yian, Nie Cheng, Jie Kemin, Gong Honghan, Qian Kejian. DepaRtment of CRitical CaRe Medicine, FiRst Affiliated Hospital, Medical College of Nanchang UniveRsity, Nanchang 330006, China

CoRResponding authoR: Qian Kejian,Email:qkj0607@sohu,com

【AbstRact】Objective To obseRve the effect of ResveRatRol on expRession of lipopolysacchaRide (LPS) -induced micRoRNA-146a (miR-146a) in alveolaR macRophages. Methods Rat alveolaR macRophages(NR8383)weRe seeded at 2×106cell/poRe in 6 well plates in vitRo and incubated foR 90 min. NR8383 weRe Randomly divided into fouR gRoups: contRol gRoup, NR8383 stimulated with phosphate buffeR solution (PBS); LPS-stimulated gRoup, NR8383 stimulated with 1μg/mL of LPS; ResveRatRol-tReated gRoup, NR8383 tReated with diffeRent concentRations of ResveRatRol (1 μg/mL oR 10 μg/mL) foR 30 min, then stimulated with 1 μg/mL of LPS. AfteR incubation foR 6 h, the cells weRe haRvested and the supeRnatant of cell cultuRe medium was collected. The expRession of miR-146a of cells was detected by using fluoRoilluminance Real-time quantitative PCR device, and the levels of TNF-α pRotein in the supeRnatant weRe assayed by using enzyme-linked immunosoRbent assay (ELISA).Results CompaRed with contRol gRoup, the expRession of miR-146a and the level of TNF-α weRe significantly incReased in LPS stimulated gRoup (miR-146a’ s expRession folds: 5,92±1,57 vs 1,03±0,58,P

【Key woRds】ResveRatRol; MicRoRNA-146a; AlveolaR macRophages; TumoR necRosis factoR-α

大量临床及实验研究表明,白藜芦醇对脓毒症肺损伤具有保护作用[1-5]。微小RNA-146a(miR-146a)是TLRs/NF-κB炎症通路中重要的负反馈调控介质,能够抑制炎症反应[6]。本课题组前期研究发现,miR-146a参与了肺泡巨噬细胞炎症反应,有望成为抑制肺泡巨噬细胞炎症反应的新途径[7-8]。研究发现,白藜芦醇与miRNA关系密切,有可能通过miRNA发挥其抗炎作用[9-11]。然而,在肺泡巨噬细胞炎症反应模型中,白藜芦醇是否影响miR-146a的表达以及是否通过上调miR-146a的表达来抑制炎症介质释放均未见报道。

1 材料与方法

1,1 实验材料

大鼠肺泡巨噬细胞株NR8383(中国科学院细胞库),胎牛血清(美国HyClone),Ham’ s F-12K培养基(美国Sigma-AldRich),LPS(E,coli 0111∶ B4,美国Sigma-AldRich),白藜芦醇(美国Enzo life sciences),TRIzol Reagent(美国InvitRogen),四甲基偶氮唑盐(MTT,北京索来宝科技有限公司),TaqMan UniveRsal 聚合酶链反应(PCR)检测试剂盒、TaqMan MicRoRNA 逆转录试剂盒、TaqMan MicRoRNA 检测试剂盒(美国ABI),十二烷基硫酸钠(SDS,美国Sigma-AldRich),大鼠TNF-α ELISA试剂盒(上海明睿生物),氯仿、异丙醇、无水乙醇等均为国产分析纯。

1,2 细胞培养

R8383细胞培养于含15%FBS、1,5 g/L碳酸氢钠、2 mmol L-谷氨酰胺的Ham’ s F-12K完全培养基中,置于大气压下37 ℃、含5%体积分数CO2的温湿培养箱中培养,2~3 d更换培养液,3~4 d传代1次。

1,3 MTT比色法检测白藜芦醇对细胞活性的影响

取指数生长期NR8383细胞,按每孔细胞0,5×104个接种至96孔板。细胞贴壁90 min后,分别加入0,1、1、10、50、100 μg/mL终质量浓度的白藜芦醇,每组设5个复孔,同时设阴性对照组(等体积PBS替代白藜芦醇)和阳性对照组(等体积10%二甲亚砜替代白藜芦醇)。加药后细胞再培养48 h,加入5 g/L MTT 溶液20 μL/孔,继续培养4 h,加入三联溶解液100 μL/孔,于培养箱内继续孵育8 h,用酶标仪(波长570 nm)测定各孔的吸光度(OD 570 nm)值。

1,4 细胞处理及分组

取指数生长期NR8383细胞,按每孔细胞2×106个接种至6孔板。细胞培养90 min后,分为以下四组:(1) LPS处理组:培养板中加入LPS溶液(终质量浓度1 μg/mL);(2) PBS对照组:培养板中加入等体积PBS溶液;(3) 白藜芦醇+LPS组:培养板中加入不同浓度白藜芦醇溶液(终质量浓度1 μg/mL、10 μg/mL)预处理30 min后,加入LPS溶液(终质量浓度1 μg/mL)。细胞培养6 h后,离心收集细胞上清液和细胞团块,保存于-80 ℃冰箱,分别用于ELISA检测和细胞总RNA提取。

1,5 检测指标及方法

1,5,1 TNF-α蛋白测定 收集各组细胞培养上清液,检测按照ELISA试剂盒使用说明书进行检测。

1,5,2 miR-146a表达测定 采用TRIzol法提取细胞中的总RNA,通过琼脂糖凝胶电泳检测总RNA完整性及纯度,紫外分光光度计测定总RNA浓度。采用TaqMan MicRoRNA逆转录试剂盒进行反转录,反应条件:16 ℃ 30 min,42 ℃ 30 min,85 ℃ 5 min。采用TaqMan UniveRsal 聚合酶链反应(PCR)检测试剂盒进行PCR扩增,反应条件:95 ℃ 10 Rain;95 ℃ 15 s,60 ℃ 60 s,40个扩增循环,在ABI 7500定量PCR仪上扩增和检测。操作均按说明书进行,所有操作均在冰上完成。选取U6 snRNA作为内参照,miR-146a的相对表达量采用2-Ct计算。

1,6 统计学方法

采用SPSS 13,0统计软件进行分析,数据以均数±标准差(x±s)表示,组间比较采用单因素方差分析,组间两两比较采用SNK-q检验,以P

2 结果

2,1 MTT比色法检测白藜芦醇对NR8383

细胞活性的影响

白藜芦醇在0,1~100 μg/mL的质量浓度范围内对NR8383细胞无毒性作用。见图1。

2,2 TNF-α蛋白含量及细胞内miR-146a的表达变化

表1显示,与PBS对照组相比,LPS处理组TNF-α蛋白含量及miR-146a表达均明显升高(P

3 讨论

脓毒症并发急性肺损伤是脓毒症高病死率的主要原因[12,13],如果发生脓毒症时避免或减轻肺损伤的发生,将有助于提高脓毒症患者的成功救治率。肺组织中最多的非实质性细胞是肺泡巨噬细胞[14],脓毒症发生时,肺泡巨噬细胞内TLRs/NF-κB炎症通路活化,导致大量炎症基因的转录活化,失控性释放大量炎症因子,形成肺内炎症“瀑布”反应,导致ALI的发生。LPS是革兰阴性菌细胞壁的主要致病成分,是导致TLRs/NF-κB活化的常见因子。本研究结果显示,LPS刺激肺泡巨噬细胞后,导致TNF-α分泌显著增加。

白藜芦醇是一种多酚类化合物,是天然的植物抗菌素。它能够抑制肺泡巨噬细胞的活化,减少细胞内炎症因子的释放,避免或减轻脓毒症时肺损伤,提高脓毒症时肺损伤的治疗效果[1-5,15]。本实验研究也证实,白藜芦醇预处理大鼠肺泡巨噬细胞后,能明显抑制LPS诱导的炎症因子TNF-α 的产生,并且其抑制作用呈剂量依赖性。

miRNAs是一类小的内源性非编码RNA,通过识别靶基因mRNA的3’ 端非编码区来抑制靶蛋白的翻译或促进靶基因的降解[16-17]。miRNAs通过抑制炎症相关靶基因的转录表达,在炎症反应调控中具有重要作用。miR-146a在TLRs/NF-κB通路中具有重要调控作用。它的靶基因是TLRs/NF-κB通路中的两个重要接头蛋白编码基因IRAK-1和TRAF-6。miR-146a上调后将负性调控TLRs/NF-κB通路,能够抑制炎症介质的升高[6,18]。并且已证实miR-146a参与调节了LPS诱导的肺泡巨噬细胞炎症反应[7-8]。在本实验中,用LPS刺激肺泡巨噬细胞后,也诱导了miR-146a的表达上调,与前者报道结果相似。

研究发现,白藜芦醇通过影响miRNA前体的转录和miRNA的加工成熟,能特异性地引起一些miRNAs改变,包括miR-21、miR-146a、miR-663等,这些miRNAs都参与炎症反应的调控[9-11]。本研究发现,白藜芦醇预处理大鼠肺泡巨噬细胞后,能明显促进miR-146a的表达上调,并且相比于较低质量浓度白藜芦醇组(1 μg/mL组),较高质量浓度白藜芦醇组(10 μg/mL)更能诱导miR-146a的表达。

综上所述,在LPS诱导的肺泡巨噬细胞炎症反应中,白藜芦醇能够抑制炎症因子TNF-α的产生,并上调miR-146a的表达,由此笔者可以推测,白藜芦醇调控炎症的机制之一可能是通过升高细胞内miR-146a的表达水平来发挥其抗炎作用。

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(收稿日期:2013-05-07)

DOI:10,3760/cma,j,issn,1671-0282,2014,01,009

基金项目:国家自然科学基金(81060152);江西省自然科学基金(2009GZY0215)

作者单位:330006 南昌,南昌大学第一附属医院重症医学科(曾振国、邵强、丁成志、卿城、刘芬、詹以安、聂成、钱克俭),肿瘤科(李勇),影像科(龚洪翰);南昌大学医学院生物化学与分子生物学教研室(揭克敏)

篇10

   有关春天的诗句

   1、万物苏萌山水醒,农家岁首又谋耕。

   2、击罢泥牛物候新,一鞭分与万家春。

   3、今夜偏知春气暖,虫声新透绿窗纱。

   4、不知细叶谁裁出,二月春风似剪刀。

   5、竹外桃花三两枝,春江水暖鸭先知。

   6、菜丝生叶落雕盘,欲去春衣怯晓寒。

   7、上林宫馆好,春光独早知。

   8、谁言寸草心,报得三春晖。

   9、九重天子去蒙尘,御柳无情依旧春。

   10、冰丝玉缕簇青红,已逗花梢一信风。

   11、好雨知时节,当春乃发生。随风潜入夜,润物细无声。——唐·杜甫《春夜喜雨》

   12、春雨断桥人不渡,小船撑出绿荫来——宋·徐俯《春游湖》

   13、春潮带雨晚来急,野渡无人舟自横。——唐韦应物《滁州西涧》

   14、小楼一夜听春雨,深巷明朝卖杏花。——宋陆游《临安春雨初霁》

   15、灞桥杨柳年年恨,鸳浦芙蓉叶叶愁。——苏庠《鹧鸪天·枫落河梁野水秋》

   16、笙歌散尽游人去,始觉春空。——欧阳修《采桑子·群芳过后西湖好》

   17、总是愁媒,欲诉谁消遣。——苏轼《蝶恋花·蝶懒莺慵春过半》

   18、春未老,风细柳斜斜。——苏轼《望江南·超然台作》

   19、江南春尽离肠断,苹满汀洲人未归。——寇准《江南春·波渺渺》

   20、绿暗红嫣浑可事。——欧阳修《青玉案·一年春事都来几》

   21、从此阳春应有脚,百花富贵草精神。

   22、千里莺啼绿映红,水村山郭酒旗风。

   23、旧历年光看卷尽,立春何用更相催。

   24、今年春色早,应为剪刀催。

   25、绿杨烟外晓寒轻,红杏枝头春意闹。

   26、还欣好景平生事,赢得旬余分外春。

   27、柳色早黄浅,水文新绿微。

   28、泥牛鞭散六街尘,生菜挑来叶叶春。