打击传销范文

导语：如何才能写好一篇打击传销，这就需要搜集整理更多的资料和文献，欢迎阅读由公务员之家整理的十篇范文，供你借鉴。

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讯：星辰在线—长沙新闻网8月17日讯(潇湘晨报记者夏雨实习生李文)打着“资本运作”、“特许经营”、“高科技”等名义利用互联网从事传销活动，将成为重点打击对象。昨日，记者从省工商局获悉，从8月10日起在全省范围内开展为期三个月的打击传销专项行动，并将建立和完善打传长效机制。

本次打击传销专项行动从8月10日起至11月10日，以娄底、邵阳、怀化被国家工商总局确定的打击传销重点整治地区，以永州、衡阳、岳阳等传销活动相对集中的区域为重点地区，在全省范围内开展专项行动，将集中力量查处一批涉及地区广、涉案人员多、涉案金额大、社会危害严重的大要案件，重点打击以“高科技”、“资本运作”、“连锁销售”等名义及利用互联网从事传销活动，加大对诱骗少数民族群众、在校学生参与传销活动的查处力度。

打击传销专项行动工作重点为严厉打击传销领导者、组织者和骨干分子，屡教不改、多次参与传销的涉案人员；重点打击以“资本运作”等名义及利用互联网从事的传销活动违法行为及以“拉人头”、团队计酬、交纳或变相交纳入门费等方式，假借直销、电子商务、特许经营等名义进行的传销活动；坚决惩处以介绍工作、从事经营活动等名义，欺骗他人离开居所地非法聚集并限制其人身自由的行为；打着职业介绍、招聘兼职等幌子，诱骗在校学生、下岗职工、返乡农民工等参加传销的行为；为传销活动提供住宿和培训场所等条件的行为。

目前，据工商查处、网友反馈与媒体曝光，正调查获悉的涉嫌网络传销的企业组织有：“北京金兴信投资顾问有限公司”、“英国TVI旅游快车”、“E网商务”、“广东康力医药”、“成都麦酷电子商务有限公司”、“杭州太竹卫生用品有限公司”、“麦罗国际”（香港MESUN(麦森)电子商务公司）、“南京铠鼎商贸有限公司”、“湖北林枫商贸集团有限公司（简称林枫公司）”、“美国全球教育网”、“亚洲生活网”、“MDG体验中心”……

此外，将建立和完善打传长效机制，加强对打击传销工作的组织领导，动员社会各方力量，齐抓共管，群防群控。结合创建“五无监管区”的要求，突出重点，扎实开展专项整治行动；继续深入开展创建“无传销社区(村)”活动。进一步规范直销行为，加强对在湘直销企业及其分支机构、直销人员的经营资格和经营活动的监督检查，查处违规招募、违规培训、违法计酬等行为，坚决取缔打着直销旗号从事传销、直销企业从事传销的行为以及个别企业假借工商部门名义从事相关活动的行为。（来源：《潇湘晨报》文/夏雨）

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这次打击传销工作联席（扩大）会议，是市政府调整全市打击传销工作联席会议成员之后，召开的第一次联席（扩大）会议。主要是通报今年以来打击传销工作，分析当前打击传销工作面临的形势，安排部署下一阶段的工作任务，进一步统一思想，提高认识，突出重点，强化措施，确保完成打击传销工作各项任务。刚才，市公安局张辉同志宣读了《市打击传销违法犯罪联合执法行动实施方案》；同志宣读了《市人民政府关于调整市打击传销工作联席会议成员的通知》；和剑光同志通报了今年以来全市打击传销工作情况，对下一阶段的打击传销工作做了具体安排。可以说成效是显著的，措施是得力的，请各县（市、区）结合已经积累的打传经验，在今后的打传工作中认真抓好落实。下面，我再讲三点意见：

一、认清形势，提高认识，切实增强打击传销工作的紧迫感和责任感

今年以来，在市委、市政府的领导下，各县（市、区）、各有关部门认真落实国家和省、市关于打击传销的各项工作部署，深入宣传教育，加大打击力度，强化基础工作，全市打击传销工作取得明显成效，有效遏止了传销蔓延的势头。前9个月，我市共开展打击传销集中专项打击行动20余次，检查社区、村庄1130个、公共场所1187个；发放宣传材料2万多份、联系卡5000余张；清除传销窝点34个，遣散传销人员320人，解救被骗群众17人。全市没有出现因传销引发的影响社会稳定的事件。打击传销活动的开展，为维护正常的市场经济秩序，促进社会的和谐稳定，推动全市经济快速健康发展发挥了积极作用。这些成绩的取得，是各县（市、区）、联席会各成员单位高度重视、齐心协力、扎实工作的结果。在此，我代表市委、市政府向大家，也通过你们向在打击传销工作一线的同志们，表示慰问和感谢！

在肯定成绩的同时，我们也要清醒地认识当前打击传销工作面临的新形势、新挑战。从全国情况看，传销活动在一些地方愈演愈烈。8月份开始，央视新闻频道连续报道了来宾传销活动猖獗的现象，在社会上引起了强烈反响。事实上，新型非法传销已蔓延到全国多个省份。这种新型非法传销，组织更加严密、活动更为隐蔽、手段更为狡猾、发展更加迅猛，从“传商品”变为“拉人头”式传销犯罪，大都采取精神和暴力控制手段，对经济社会的危害呈加剧趋势，已转变为实质性的刑事犯罪活动，严重损害了人民群众的生命财产安全，对社会和谐稳定构成了重大威胁。为更加有效地打击传销违法犯罪行为，目前，公安部、国家工商总局正在全国范围内开展打击传销联合执法行动。从全省情况看，地处中原，承东启西，人口众多，更易受到传销活动的冲击、渗透，一直是传销活动的重发区之一。我们省内就有务工人员被骗到宁夏、参加传销，如曾被社会广泛关注的赵作海就在宁夏陷入传销泥潭，今年8月份才被有关部门解救回来。目前，我省仍然是国家有关部门重点关注的地区，打击传销活动的压力大、责任重。省委、省政府对打击传销工作非常重视，强调要站在“四个重在”的高度，严厉打击传销违法犯罪活动。10月份后，省综治委将组织对各省辖市打击传销社会治安综合治理工作进行考评。从我市情况看，虽然传销活动总体上得到遏止，但传销活动在一些地方时有发生。近期，随着等地打击传销力度的加大，已发现有传销人员流窜我市。从8月份110中心受理传销举报的情况看，传销活动数量在一些区域有增加之势，形势不容乐观。

各县（市、区）政府、各有关部门要站在保护群众切身利益、维护全市和谐稳定的高度，牢固树立“责任重于泰山”和“打持久战”思想，切实把打击传销作为社会治安综合治理的一项长期任务，采取更加有力的措施，继续保持打击传销活动的高压态势，坚决遏止传销活动的发展蔓延，维护全市的和谐稳定。

二、突出重点，强化措施，推动打击传销工作深入开展

各县（市、区）、各有关部门要按照省委提出的“重在持续、重在提升、重在统筹、重在为民”的要求，全面落实打击传销各项工作任务，突出重点，攻坚克难，不断把打击和防范传销工作推向深入。

一是加大打击力度。今年以来，市110中心接转的160余起传销举报，没有一起是传销商品的，大都是打着“招工招聘、聊天交友、参观旅游”等旗号，诱骗外地人来洛，尔后实施限制人身自由、勒索、诈骗、抢劫、人身伤害等犯罪行为。各县（市、区）政府一定要切实肩负起打击传销第一责任的角色，迅速组织公安、工商、民政等部门，发动社区、村组等基层力量，开展好打击传销联合执法行动。市公安局要依据有关法律法规，尽快研究制定我市打击“拉人头”式传销犯罪的具体措施，10月31日前报市政府打击传销办公室。对传销违法犯罪首要分子、组织领导者，对传销活动中诈骗钱财、限制人身自由、甚至暴力抗法、破坏稳定的违法犯罪分子，要依法严厉打击，该拘留的拘留，该劳教的劳教，该判刑的判刑。

二是强化重点治理。从市110中心的举报情况看，目前，我市传销活动主要集中在洛龙区的关林、安乐和古城镇，西工区的洛北乡，瀍河区的瀍河回族乡、老城区邙山乡等区域。城中村、老居民区、城乡结合部小区、新区农民安置小区等出租房集中区是传销活动易发、高发区域，也是我们开展打击传销行动、源头治理传销的重点区域。要借助全市正在开展的流动人口、出租房屋专项整治，充分发挥社区、居委会、村委会等基层组织和相关方面的作用，通过完善日常打、防、控、管等措施，铲除传销活动的条件。要进一步加强对出租房屋、劳务市场、人才中介以及酒店、宾馆、招待所等重点场所的管理，常查、清查，不留死角。对为传销提供便利条件的，坚决依法予以惩处。对传销人员大量聚集、问题突出的地方，要通过督办、领导分包等形式，限期治理到位。对外出从事传销活动人员较多的地方，要通过综治考核以及其他手段进行责任追究。

三是夯实工作基础。要建全基层打击传销联动机制。今年是创建“无传销社区（村庄）”第三个年头，省、市两级年底将组织验收。各县（市、区）、有关部门要切实按照市联席会议的要求，深入开展“无传销社区、无传销村庄”创建和“防止传销进校园”活动，特别是传销多发的地区，更要充分发挥基层组织和群众力量，加大创建工作力度，力争年底完成创建任务，努力实现打击传销群防群治群管。要进一步健全完善出租服务和流动人口管理机制。规范房屋出租行为，切实加强对流动人口和出租房屋的管理，压缩传销分子活动空间。要着力构建打击传销长效监管机制。以街道办事处、乡镇牵头，居委会、村委会为主，工商、公安、综治部门组织配合，按照职责分工，做好市110联动中心传销举报处理、传销线索排查和上报工作，努力形成情况互通、信息共享的打击、预防、监控和管理网络，筑牢打击传销的基层防线。

四是加强宣传教育。各县（市、区）、有关部门要继续把宣传教育活动作为打击传销工作的重点措施进行部署、落实和检查，通过广播电视、公益广告、发送手机短信等方式，加强对常住人口、外来人口、出租房主的宣传教育，使广大群众识别传销、防范传销，自觉抵制传销，主动举报传销。同时，有针对性地做好外出务工人员的教育工作，防止误入传销陷阱。

五是维护社会稳定。要坚持预防为主，防范在前，发现和研究因传销引发影响社会稳定的苗头和动向，制定专门的预警防范和应急处置预案，及时妥善地处置遇到的矛盾和问题。在打击传销工作中，对教唆、煽动、组织传销人员聚众滋事的骨干分子要依法坚决予以查处；对既是受骗者也是骗人者的传销人员，要实行批评教育与惩治处罚宽严相济的政策；对上当受骗且没有欺骗他人参加的，要注意做好教育、说服和思想转化工作，防止因工作不力、查处措施不当，引发。

三、加强领导，严格考评，确保打击传销各项任务圆满完成

离年底只有两个多月的时间了，完成全年的打击传销工作时间紧、任务重。各县（市、区）、各有关部门要按照统一领导、政府负责、部门协调、各方联动的总体要求，进一步加强领导，强化综治考核，努力把打击传销各项工作落到实处。

（一）加强组织领导。各县（市、区）政府要高度重视打击传销工作，切实加强对打击传销工作的组织领导，把打击传销工作列入重要的议事日程，切实担负起组织、指挥、协调的责任。各级工商、公安部门要充分发挥打击传销主力军作用，在日常清查、案件查处、开展行动等方面相互配合，通力合作，形成执法合力。联席会其他成员单位要根据自身的职责，研究落实本部门本系统打击传销工作的具体措施，密切配合工商、公安部门开展工作。联席会会议办公室要加强与各成员单位的联系，及时沟通情况，协调各成员单位的行动。

（二）落实工作责任。要继续落实政府打击传销第一责任人制度，坚持属地管理原则，做到守土有责、守土尽责。要进一步建立和完善打击传销工作责任制，各县（市、区）、各有关部门要制定本单位打击传销工作考评办法和标准，确保工作有目标、任务有分工、考评有办法、奖惩有措施，充分调动各方面参与打击传销积极性。要落实工作问责机制，对领导重视不够、处置不力，出现影响稳定的传销事件的，要严肃追究责任。

（三）强化综治考核。要充分发挥打击传销社会治安综合治理工作作用，积极构建长效机制，进一步推动打击传销各项工作深入开展。11月份，省综治委、省打传办将采取现场检查、实地验收的方式，对我市打击传销社会治安综合治理和创建“无传销社区”情况进行考核验收。为此，我市已制定了《市年打击传销社会治安综合治理考核评比办法及标准》，今天已印发给大家。在省考核验收前，市综治办、市联席办公室将组织联合检查组，对各县（市、区）进行检查、抽查。各县（市、区）政府、相关部门要在市联席办公室的协调下，组织好综治考评工作。对考评工作中敷衍了事、弄虚作假、工作不落实，影响全市综治考评结果的，按照有关规定予以问责。

（四）提供工作保障。打击传销工作量大，任务艰巨，需要投入大量的人力、物力和财力。各县（市、区）政府、各有关部门要为打击传销工作创造条件，在人力、物力、财力上给予必要的支持，确保打击传销工作有效开展。关于市打击传销工作联席会议办公室的工作经费，请市财政给予必要支持，并协调解决打击传销举报奖励办法所需经费。

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一、组织领导

为强化对打击传销工作的领导，决定建立以工商行政管理部门、*机关为主的打击传销工作联席会议制度，组织协调各相关部门开展专项整治工作，督办重大案件，总结推广工作经验。联席会议由市政府法制办牵头，市工商局、市*局、市商务局、市教育局、市民政局、市财政局、市劳动保障局、市国税局、市地税局、天长街道办事处等相关部门和单位共同组成；市法制办主要负责人为召集人，各单位分管负责人为联席会议成员，联席会议办公室设在市工商局。

二、目标任务

通过此次专项行动，使我市传销活动得到有效控制，传销活动数量明显减少，经常性、规模化的传销活动基本杜绝，反复势头得到有效遏制；群众识别、防范传销的能力进一步增强，被骗往异地参与传销的人员明显减少；防范和打击传销活动的长效机制初步建立。主要工作任务：

（一）集中力量查处涉及地域广、参与人员多，以及通过互联网传销、利用传销非法集资等社会危害严重的重点案件，严惩从事传销活动的单位、组织者和骨干分子，摧毁传销网络。严厉打击暴力抗法以及传销引发的盗窃、抢劫、非法拘禁、杀人等恶性刑事案件。

（二）强化对互联网的相关监管工作，完善有关规定，坚决取缔为传销提供互联网信息服务的行为。

（三）加强学校防范传销工作，严防传销活动进入校园。切实加强对学生的教育和管理，使广大学生认清传销的违法犯罪性质、欺诈本质和危害，自觉抵制传销。对受骗参与传销的学生要及时做好解救工作。

（四）加强房屋出租的管理，严禁任何单位或个人为传销行为提供经营场所、培训场所、仓储和人员住宿等条件，加大对违法出租行为的处罚力度。

（五）依法规范直销行为，查处违规招募、违规培训、违法计酬等行为，坚决取缔打着直销旗号从事传销以及直销企业从事传销的行为，严格执行直销企业市场退出制度。

（六）进一步完善打击传销的联合执法机制，加快打击传销信息系统建设，逐步建立传销组织者、策划者及骨干分子档案，探索建立社会查询制度，健全群众投诉、举报及奖励制度。

（七）强化宣传工作，通过喜闻乐见的形式，以宣传《禁止传销条例》和《直销管理条例》为重点，着重抓好对进城务工人员、在校学生、下岗失业人员等重点群众的宣传教育，提高全社会防范传销的意识和能力。

三、实施步骤

此次专项行动分三个阶段进行：

1.动员部署阶段（20*年4月底前）。各地、各部门要按照方案要求做好专项行动的宣传动员和准备工作。

2.组织实施阶段（20*年5月至7月）。各地、各部门要按照专项行动方案积极开展工作。市打击传销工作联席会议组织相关部门对各地、各部门开展打击传销活动进行重点检查。

3.总结阶段（20*年8月）。市打击传销工作联席会议办公室将有关专项行动情况汇总上报市政府，市政府对打击传销专项行动工作进行通报并报*市人民政府。

四、工作要求

1、统一认识，狠抓落实。打击传销是贯彻“三个代表”重要思想、落实科学发展观、构建社会主义和谐社会的具体体现，是整顿和规范市场经济秩序的重点工作和长期任务，必须坚持不懈地抓好。各地、各部门要在市政府的统一领导下，坚持标本兼治、着力治本的方针，针对传销活动的新特点和突出问题，进行全面部署，逐级分解落实具体任务和工作目标，确保专项行动取得成效。

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为贯彻落实__市人民政府办公室《关于印发__市打击传销专项行为实施方案的通知》（宁政办[20__]213号）及__县人民政府办公室《__县人民政府办公室关于印发__县打击传销专项行动方案的通知》（古政办[20__]85号）精神，进一步防范和打击传销行为，维护市场经济秩序和社会安定稳定，为社会主义新农村建设营造良好环境，现结合我镇实际，制定本实施方案。

一、工作重点与工作目标

（一）严厉打击、坚持取缔以“拉人头”、团队计酬、收取入门费等方式以及通过互联网、假借直销名义进行的传销活动。

（二）重点惩处以介绍工作、从事经营活动等名义，欺骗他人离开居所地非法聚集，并限制人身自由的行为；为传销提供条件的行为。

（三）以__、玉源、玉库、新舫等4个行政村为重点地区，在全镇范围内进一步防范和打击传销活动。

（四）通过专项行动，使重点地区传销活动明显减少；其他地区传销活动得到有效控制，经常性、规模化的传销活动基本杜绝；群众识别、防范传销的能力进一步增强，被骗往异地参与传销的人员明显减少；防范和打击传销活动的长效机制初步建立。

二、主要任务与工作措施

（一）集中力量通过调查、走访，查处涉及地域广、参与人员多，以及通过互联网传销、利用传销非法集资等社会危害严重的重点案件，严惩从事传销活动的单位、组织者和骨干分子，摧毁传销网络。严厉打击暴力抗法以及传销引发的盗窃、[找材料到文秘站 -ˇ文秘站 网上服务最好的文秘资料站点！注：]抢劫、非法拘禁、杀人等恶性刑事案件。

（二）强化对互联网的相关监管工作，完善有关规定，坚决取缔为传销提供互联网信息服务的行为。

（三）加强学校防范传销工作，严防传销活动进入校园。切实加强对学生的教育和管理，使广大学生认清传销的违法犯罪性质、欺诈本质和危害，自学抵制传销。对受骗参与传销的学生要及时做好解救工作。

（四）加强房屋出租的管理，加大对违法出租行为的处罚力度，严禁任何单位和个人为传销行为提供经营场所、培训场所、仓储和人员住宿等条件。

（五）依法规范直销行为，查处违规招募、违规培训、违法计酬等行为，坚决取缔打着直销旗号从事传销以及直销企业从事传销的行为，严格执行直销企业市场退出制度。

（六）进一步完善打击传销的联合执法机制，加快打击传销信息系统建设，逐步建立传销组织者、策划者及骨干分子档案，探索建立社会查询制度，健全群众投诉、举报及举报奖励制度。以宣传《禁止传销条例》和《直销管理条例》为重点，重点抓好对农民工、在校学生、下岗失业人员等重点群体的宣传教育，提高全社会防范传销的意识和能力。

三、工作要求与保障措施

（一）打击传销是贯彻“三个代表”重要思想、落实科学发展观、构建社会主义和谐社会的具体体现，要作为整顿和规范市场经济秩序的重点工作和长期任务坚持不懈地抓好。要在国家有关部门的统一部署下，坚持“地方政府负责、部门统一协调，各方联合行动”工作格局和“标本兼治，着力治本”的方针，进一步强化地方政府及各相关部门的责任，严格实行工作责任制和责任追究制。要针对传销活动的新特点和突出问题，对专项行动进行全面部署，逐级分解落实具体任务和工作目标，确保抓住成效。

（二）这次专项行动以__工商所、__派出所为主，镇有关部门要依据各自职责和有关法律、行政法规规定密切配合。__工商所要充分发挥职能作用，在镇政府的统一领导下，加大传销违法行为的查处力度并加强对专项行动的指导和督查。__派出所要加大对传销犯罪的打击力度，加快侦破大案要案。__电信站等通信管理部门要配合有关部门加大利用互联网传销和为传销提供互联网信息服务 行为的监控和查处力度。农行__营业所、__邮政储蓄所、__信用社等金融机构要依法协助做好对传销组织者或经营者账户查询、资金冻结的协调工作，打击利用传销非法集资行为。各中、小学校要采取有效措施，严防传销活动进入校园。镇监管部门要依法加强监督，对传销屡禁不止、频发的地区和单位，严肃追究有关领导和人员的责任。要及时向县委宣传部、县广电局、《今日__》报投递相关宣传素材，营造良好的舆论环境。同时，在这次专项行动中要注重充分发挥各村委会以及社会中介组织的作用。

（三）要严格执法责任制，强化责任意识，落实工作责任制和责任追究制，进一步规范执法行为。对领导不力、实行地方保护、消极应付甚至失职渎职的，要依法依纪追究其领导责任；对监督管理不力，敷衍推诿、有法不依、执法不严，甚至包庇、纵容、支持和参与传销的，要依法依纪追究相关人员责任。

（四）各村和有关单位要结合本地实际情况，进一步完善和细化专项行动工作方案。要加强对执法人员的培训，提高执法水平，提高打击成效。

四、工作步骤和时间安排

这次专项行动分三个阶段进行：

（一）动员部署阶段（20__年11月25日前）。各村和有关单位根据本实施方案做好动员布署工作。

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宁夏回族自治区高级人民法院刑二庭负责人今天告诉《法制日报》记者，这起案件只是宁夏全区近3年来查办的大量非法集资案件中的一起。

数据显示，仅2007年至2009年，宁夏全区法院共判处非法集资犯罪案件10件23人。除2008年至2009年审理的1件6人为集资诈骗犯罪外，其余9件17人为非法吸收公众存款罪。

受害人变成犯罪者

“像刘某这样从受害人变为犯罪人，是非法集资案件的一个新特点。”宁夏高院研究室相关负责人说。

据介绍，很多非法传销案件，是通过网络等高科技媒介进行的。犯罪分子利用网络建立网站发展下线吸引投资，根据发展下线的人数按比例提取酬劳来层层诈骗和层层控制犯罪组织。主要策化者居于幕后，或者在外地遥控指挥。一些先期投入者本为受害者，但在获利的情况下又去发展更多的人加入，由此构成其他犯罪，而这些被发展加入的人往往是他们的亲朋好友，使得犯罪更具有智能性、隐蔽性、严密的组织性和传导性。

高息还本诱人上当

2009年宁夏高院终审的吴松伟等人非法吸收公众存款一案，吴松伟、张宁两被告人许诺支付的月息为2%至28%，远远高于银行的同期年利率。如此低风险，高回报，明显有违投资规律，简直就是天上掉馅饼，但依旧有人相信这是一条“旱涝保收”的致富捷径。两人向253家单位及个人许以高利，吸纳资金，但案发后申报债权的只有80人。

“高息还本是宁夏非法集资者抛出的最诱人的饵料，也是大多数受害者趋之若鹜、受骗上当的重要原因。”宁夏高院研究室负责人介绍说。

据介绍，非法集资者为支付先加入投资者的高额回报，便不断地发展下线，通过利诱、劝说、亲情、人脉等方式吸引越来越多的投资者参与，用后加入者的资金支付先加入者的高额利息。如此循环往复，直至资金链断裂，由此导致的结果往往是，先加入的投资者仅利息的收入就远远超出了本金，因此案发后申报债权的人数远远小于实际投资者人数。

时间久人数多数额大

宁夏高院刑二庭相关负责人告诉记者，非法集资作为一种面向社会公众的吸纳资金行为，决定了受害者必须达到一定规模，方能有效维系所需的现金流。因此时间久、人数多、数额巨大，犯罪数额往往数百、数千万甚至上亿元之巨，覆盖面广、受害人损失惨重，严重影响社会稳定。

从已有案例看，参与者不乏政府官员及金融从业人员，更多的当然是风险承受能力较低的普通大众，甚至包括不少下岗、失业人员及退休人员。

受骗人数多，受骗数额巨大又决定了其社会影响远远超过一般诈骗案件，对公众财产利益危害较大。如发生在宁夏区内的苏志强等人非法吸收公众存款一案，时间跨度从2001年至2007年10月，受害人达200多人；吴松伟一案也是自1999年5月至2007年6月长达8年。这两起案件在当地造成了恶劣的社会影响，引起了不小的震动。

有效预防打击需合力

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1材料与方法

1.1实验材料DNAMarker、BL21（DE3）感受态细胞购自TIANGEN、限制性内切酶BamHⅠ和HindⅢ、T4DNAligase购自TaKaRa，IPTG购自Solarbio，标准蛋白分子Marker购自Fermentas，溶菌酶、透析袋购自上海生工，尿素购自BioBasicInc.，咪唑购自Sigma-Alorich，HisTrapHP层析柱购自GEHealthcareLifeScience。

1.2基础载体pET-TAT的构建根据NCBI，TAT序列（GenBank：AF525447）为tacggtcgtaaaaaacgtcgtcagcgtcgtcgt，人工合成后插入pET-32a（+）酶切位点SalI和XhoI之间。把pET-32a（+）质粒改造为pET-TAT基础表达载体，由金思特科技（南京）有限公司完成。

1.3原核表达载体pET-EGFP的构建用限制性内切酶BamHⅠ和HindⅢ进行双酶切重组质粒pMD18-T-EGFP和载体pET-32a（+），胶回收目的片段EGFP，T4连接到线性pET-32a（+），构建成表达载体pET-EGFP。

1.4原核表达载体pET-NLS-EGFP-TAT的构建根据EGFP序列，使用Oligo6.0设计N端加有核定位NLS序列的引物，上游引物：5′-CGCGGATCCCCGAAAAAGAAACGTAAAGTTACCATGGCTATGGTGAGCAAGGGCGAGGAG-3′，下游引物：5′-CCCAAGCTTCTTGTACAGCTCGTCCATGCC-3′，（其中下划线-部分分别为BamHⅠ和HindⅢ的酶切位点，下划线波浪线部分为核定位NLS序列）。以pMD18-T-EGFP重组体为模板进行PCR扩增得到NLS-EGFP，然后进行TA克隆、酶切、连接到pET-TAT基础表达载体上，构建成原核表达载体pET-NLS-EGFP-TAT。

1.5蛋白EGFP和NLS-EGFP-TAT的诱导表达将原核表达载体pET-EGFP和pET-NLS-EGFP-TAT分别转化大肠杆菌BL21（DE3），当菌液浓度生长到OD值在0.6~0.8之后，添加IPTG终浓度为0.2mmol/L，37℃、220r/min摇床诱导4h，取样进行SDS-PAGE分析。然后对阳性菌液进行大摇，离心收集菌液沉淀，再用溶菌酶消化、超声波破碎菌体，得到粗制包涵体，再用含有1mol/L尿素的包涵体洗涤液超声洗涤包涵体。

1.6融合蛋白的纯化与复性洗涤后的包涵体，加入结合缓冲液，冰上充分冷却，再4℃离心，收集上清液再用0.22μm滤膜过滤得到蛋白上柱样品，然后将上柱样品通过HisTrapHP层析柱，再用结合缓冲液洗去未结合上柱的蛋白及杂质，然后用复性缓冲液在层析柱上复性融合蛋白，含有咪唑的洗脱缓冲液洗脱融合蛋白，得到纯化蛋白溶液。将纯化蛋白溶液放入透析袋中，用MilliQ水中4℃透析，除去咪唑等，然后再在透析袋表面撒上PVP进行浓缩蛋白。

1.7细胞培养验证穿膜功能水牛成纤维细胞接种培养24h后，更换培养液，然后在新的培养液中分别添加纯化的EGFP蛋白（100μg/mL）和NLS-EGFP-TAT（100μg/mL）蛋白，继续培养5~8h，在添加NLS-EGFP-TAT纯化蛋白时，为了加强TAT的穿膜效果，同时在培养液中添加HA2-TAT蛋白。培养规定时间后，再用PBS充分洗涤细胞，然后在激光共聚焦显微镜下观察EGFP蛋白分布状态。

2结果

2.1原核表达载体的构建与鉴定双酶切质粒pMD18-T-EGFP和载体pET-32a（+），得到EGFP片段，T4连接到线性pET-32a（+）上，构建为原核表达载体pET-EGFP，经酶切和PCR鉴定，结果与实验设计相符，（见图1和图2）。通过引物带入方式，PCR扩增得到NLS-EGFP片段，再经过TA克隆、酶切、连接到pET-TAT基础表达载体上，构建为表达载体pET-NLS-EGFP-TAT，经酶切和PCR鉴定，结果与实验设计相符（图3和图4）。

2.2融合蛋白的诱导表达由图5可知，含有pET-EGFP和pET-NLS-EGFP-TAT的阳性BL21（DE3）菌液，经IPTG诱导后，分别在47.3ku和50.1ku处有特异性条带，与预期相符。

2.3融合蛋白穿膜功能的初步检测水牛成纤维细胞在添加EGFP蛋白共培养后，细胞的生长状态并无影响，EGFP蛋白仍然散落在细胞培养液中；充分洗涤细胞后，并未观察到细胞表面和细胞内有绿色荧光（图6）。水牛成纤维细胞在添加了NLS-EGFP-TAT蛋白和HA2-TAT蛋白共培养后，可以观察到NLS-EGFP-TAT蛋白很快吸附在细胞表面，在培养5~8h后，用PBS充分洗涤细胞3次，除去培养中多余的未穿膜蛋白，然后在激光共聚焦下可以观察到细胞内均匀散布有荧光，说明NLS-EGFP-TAT蛋白已内化入细胞（图7）。

3讨论

Yamanaka等利用逆转录病毒载体在小鼠成纤维细胞中导入了4个因子（Oct4、Sox2、cMyc、Klf4），并用多能性标志分子Fbx15进行筛选，得到了iPS细胞，在这短短的几年时间里，iPS细胞技术得到了迅速发展。但是这些iPS细胞的诱导方法大多数都是采用病毒载体、转座子等，这些方法主要是采用了基因操作的原理来启动细胞的重编程，可能导致基因插入突变，具有潜在的不安全性。随后产生了更为安全可靠的方法，包括质粒转导、小分子化合物诱导、蛋白诱导等等。其中蛋白诱导的方法充分利用了中心法则，采用干细胞转录因子的重组蛋白，利用细胞穿膜肽的作用将蛋白分子载入细胞内，从而启动细胞重编程，获得了安全性很高的iPS细胞。而采用蛋白诱导的方法想得到iPS细胞，关键是如何顺利的将大分子物质（蛋白质）导入细胞内，并且定位于细胞核内作用于细胞DNA，充分的发挥其功能。因此本试验重在引入细胞穿膜肽，将其与干细胞转录因子进行融合表达，从而获得具有自主穿膜功能的重组蛋白。

Frankel等发现，从HIV-1（humanimmunodeficiencyvirus1）中纯化出来的含有86个氨基酸残基的反式活化因子蛋白—TAT蛋白（trans-activatorprotein，tat-86）能够快速地顺利穿过细胞膜。Vives等的研究表明，在TAT蛋白86个氨基酸残基中，只需要其中的11个氨基酸残基（tat：47-57），组成为YGRKKRRQRRR，即具有穿膜能力；并且推测其内化过程并不是依赖传统的胞吞模式，以及非温度依赖性。在对自然界存在的几种穿膜肽（TAT、ANTP和VP22）的研究中，富含Arg、Lys等碱性氨基酸残基，带有大量正电荷，以及具有α-螺旋结构，而这些Arg和Lys就是影响其穿膜功能的必须氨基酸残基。穿膜肽TAT的穿膜机制，目前还没有一个公认的模式，但是基于CPPs的分子结构以及诸多的实验验证表明，CPPs首先是通过其α-螺旋表面的正电荷与细胞膜表面的负电荷物质（比如肝素、硫酸乙酰肝素、蛋白聚糖等等）发生静电吸附，大量积聚在细胞表面，随后由于某种机理而启动的巨胞饮（macropinocytosis）通过不同的内化路径（internalizationpathways）进入细胞。

采用蛋白诱导的方法顺利得到水牛iPS细胞，另一个关键技术是如何将进入细胞内的干细胞转录因子活化蛋白定位于细胞核内。但是，对于穿膜肽TAT是否能将携带的外源蛋白进行亚细胞定位，在众多的文献报道中也各执一词。对于大分子蛋白质要进出细胞核，现论认为其必须通过载体蛋白才能顺利穿过核孔复合物（nuclearporecomlex，NPC）进入核内，而NLS（nuclearlocalizationsignal）序列则可以帮助大分子蛋白质与载体蛋白质结合成为聚合物，并提高其穿核效率。不同蛋白质转运所依赖的NLS有所差异，并且其作用机制也不尽相同。根据Yoshikawa等的研究结果，融合表达NLS序列（氨基酸残基序列为PKKKRKVTMA），可以准确地将目的蛋白（VENUS-TAT）定位于细胞核内。本实验借鉴其方式，在引物中合成NLS序列，将其与EGFP-TAT蛋白融合表达，期望能够使融合蛋白穿膜后因此具有细胞核内定位功能。从本实验结果中，可以清楚地观察到单独添加EGFP蛋白只是分散在培养液中，并未发生细胞吸附现象，也未能在胞内检测到荧光。而在细胞培养液中添加的NLS-EGFP-TAT蛋白，很快吸附在细胞表面，同时在培养液中添加了HA2-TAT蛋白，可以帮助NLS-EGFP-TAT蛋白在完成细胞内化后，能够顺利地从内含体中逃逸出来，避免被溶酶体降解掉，因此在细胞内可以检测到荧光。但是NLS序列的引入，在试验结果中并未有明显的体现出来。由于蛋白质在复性折叠时，各组成结构相互影响的原理比较复杂，可能会直接造成蛋白质分子在构象修饰过程中，掩盖了NLS结构，从而未能发挥出其较强的核定位功能。

4结论

篇7

 

广告语流行于19世纪中期，邦纳为了避开报纸广告中禁止登炫耀广告的限制，重复使用简短的警句。很多人效仿邦纳的这种风格，使它流行起来。很快，广告语制作就发展成一种专业。有些短句很快就写出来，有些人则是从早期广告中摘录下来的，还有一些则是费了九牛二虎之力才琢磨出来的。受人欢迎的流行广告语也提出了一些模式：它应该简洁适当、质朴、难忘、朗朗上口，而且还应该包容一个有关被宣传产品的主题和中心思想。

 

一、广告语的意义与地位

 

广告语在某种意义上来说，就像企业的商标一样，是企业在整合品牌传播中的一个重要标志。一个企业长期使用一个广告语，有助于消费者识别企业和产品。因此，有人把广告语称为广告主题或企业经营理念的“语言标志”和“文字商标”，并把它视为与企业商标一样重要。有些企业还把广告语进行识别设计，专有的颜色、字体、固定摆放的位置。如美的空调的系列广告。

 

企业在传播活动中，使经营理念和形象让消费者接收。作为概括企业形象和理念的广告语必须长期重复使用。对消费者来说，广告语必须具有：简洁、明确、贴切、独到、有趣味、有号召力、易于记忆、嵌入牌名等特点。这样才能让消费者记忆品牌，使其联想到企业和产品。

 

广告语是品牌形象的文字商标。成为企业品牌形象的核心价值之一。品牌形象一般来自于三个方面：企业主体形象、产品品质形象和使用者形象。这样，广告语也就有三种类型，一是企业形象广告语，如海尔集团“真诚到永远”。二是产品的广告语，如美的空调的“原来生活可以更美的”。三是使用者广告语(促销广告语)，如万宝路香烟的“男人的世界”。其中企业形象广告语在传播中影响力最大。

 

在今天，企业在进行传播活动中，越来越重视与消费者的关系。过去在大众传播模式中，“请消费者注意”的单一沟通模式，正逐渐被“请注意消费者”的双向沟通模式代替。整合品牌传播成为营销传播的主流。所以，企业必须向消费者表明企业经营理念，社会存在价值和对消费者的承诺。这许许多多的传播概念必须汇集在一点上，那就是广告语的任务。广告语在整合品牌传播活动中就起到连贯的、统一的、重复的、有号召力的功能。

 

世界在飞速变化，每个企业都在追求极大化增长，并梦求成为长寿公司。树立企业形象，和消费者有效沟通就成为前提。另一方面，企业为了分散经营风险开始多元化经营。从统一的企业形象来看，所有的企业多元化经营活动必须统一在一个鲜明的形象上，除商标识别外，企业形象广告语就能发辉最大功效。

 

为了适应市场的发展，企业在经营活动中，寻求新的惊爆点。也逐渐用“1：1营销”代替“大众营销”，用“顾客占有率”代替“市场占有率”，用“整合品牌传播”代替“大众传播”。广告语就为整合品牌传播提供连贯性、一致性和持续性的作用。整合品牌传播已经成为全球性的概念，普受全球各个市场及广告主的重视。整合品牌传播就是在一段时间内，发展并执行针对消费者的各项说服传播策略的过程。目前国际上有关整合品牌传播理论有三种不同观念。

 

近年来，整合品牌传播已经成为一明显趋势，甚至是上世纪90年代最重要的营销发展。过去，企业通常会将各项传播要素，如广告、促销、POP展示等，视为分别活动来对待。然而，目前“整合”已成为成功之不二法则。实际上，这也就是“整合品牌传播资源，共同发挥”，符合消费者在品牌接触中各阶段不同需求。

 

整合品牌传播另一种观念就是把传统各自分立的行销传播手段加以整合，使公共关系、广告、促销、直效营销……等各种传播活动的优劣势能加以妥善规划、整合、合理调配，发挥大兵团作战实力。还有一种观念就是把所有传播工具力量整合，使其口径一致，用“一个声音说话”。

 

二、广告语在整合品牌传播中所起的作用

 

1.广告语使整合品牌传播“口径一致”。

 

整合品牌传播就是将所有行销传播状态和工具加以紧密结合，以维持新式传达清楚、单一共享的形象、定位、主题等。

 

广告语在整合品牌传播活动中，承担传播信息单一、共享的功能。广告语的基本特点就是简洁、明确和信息单一。如东芝的广告语“为了人类和地球的明天”，明确告知消费者企业的经营理念。

 

2.广告语使整合品牌传播中的所有接触点进行统一认别。

 

整合品牌传播会使用所有可能传达企业或品牌讯息的渠道。这些接触消费者的渠道可能包括电视广告、杂志广告、报纸广告、网络广告、POP或其他任何有可能的信息渠道。

 

在这些渠道运用中，广告语是和企业商标共同出现，也就是说，只要能看到企业商标就可以看到企业广告语，只要消费者接触的渠道就能接触到广告语。是企业视觉，听觉识别的“文字标志”。如美的空调广告语“原来生活可以更美的”在传播活动中，出现在电视广告、报纸广告、杂志广告、路牌广告、POP与所有出现的传播渠道中，使消费者对品牌有深刻的印象。有些广告语用音乐来表达。

 

3.广告语是整合品牌传播中贯穿消费者导向的营销全过程的主线。

 

整合品牌传播的过程是起源自消费者，然后才以消费者的资讯，决定适当有效的方法和传播渠道，来发展传达说服讯息的策略。并且了解营销通路，共享的消费者资料库。因为通路是面对消费者的第一线。

 

按消费者的消费行为，首先有需求才会去注意信息收集，信息的收集第一个接触点就是品牌名称和广告语，在消费者没和企业、产品正面打交道之前，广告语先闯进消费者脑袋，广告语是否能让消费者记住，就会直接影响消费者购买产品的动机。所以广告语是吸引注意的重要因素。如耐克的“just do it”广告语。也明确告诉消费者在生活中可以为所欲为，该广告语还暗示耐克产品有助他们成功实现自己的愿望。

 

4.广告语可使整合品牌传播达到综合效果，单一品牌形象的传达。

 

整合品牌传播的重要目标之一是希望能够达到综合整体效果，也就是各项传播工具必须有单一品牌形象的讯息传达。如果这些传播工具无法紧密协调的话，可能会造成传达分散的品牌信息给消费者。

 

品牌形象传播的主要特征就是单一性、持续性和独特性。我们在整合品牌传播中采用的媒体是多样的，时间跨度是长期的，如何使品牌形象单一传达给消费者，非广告语莫属。广告语可以使一个品牌形象的概念和属性单一自始自终，不可轻易改变。还应该有独特字体、颜色，加强品牌形象传达，如丰田和盛世共同开发了“每一天”的广告语的标准字体。这样，不仅仅是为了提高丰田车的审美的品位，而且传达了丰田单一品牌形象。

 

5.广告语有助于影响消费者的行为

 

整合品牌传播的目的是为了要影响消费者的行为，也就是其目的不只是让消费者对品牌产生好感，成功的整合品牌传播活动希望能激发消费者的行动。

 

大卫·奥格威讲“一切为了销售，否则，我们不做广告”。李奥贝纳：“有趣却毫无销售力的广告，只是在原地踏步”。广告语提供了品牌形象，向我们保证了质量，并提供了全面解决方案。广告语超越了具体的产品要素，将产品作为一个整体来考虑。使消费者产生对产品利益联想，促使他们行动，如娃哈哈广告语“妈妈我要喝” 乐百氏广告语：“今天你喝了没有”，都是很好的案例。

 

6.广告语可使企业利用整合品牌传播与消费者建立长久关系。

 

成功的行销传播是需要在企业(品牌)与消费之间建立长久的关系。因为广告语可使关系的建立通过易于记忆，有趣味，简单的标语来联结。可口可乐的“要爽有自己”让人无法抗拒可口可乐与消费者的关系。

 

总的来讲，广告语两个基本功能：①为整合品牌传播各种手段提供连贯性。②将整合品牌传播的战略信息压缩成精练的，便于重复、便于记忆的定位承诺。至此，我们可以看出广告语的特点是相对稳定、易记易传、诉求单一。单纯的广告最有力，因此，企业在制定自己的广告语时必须慎重选择，广告语是消费者了解一个企业，一个商品最直接的渠道，也是一个企业走向成功的名片。

篇8

【关键词】 哮喘 气道重塑 喘复康大鼠

Abstract：ObjectiveTry to observe the effect and possible mechanism of ChuanFuKang mixture on airway remodell of rat models of asthma.MethodsAn animal model of asthma was established by OVA (ovalbumin) sensitizing-challenging SD rat. Water extract of ChuanFuKang were given to rats(ig). Immunohistochemical technology was used to estimate the change of CD44 in the rat lung tissues of each group， the thickness of bronchial wall and the area of collagen deposition was detected by computer image analyse system and by method of Masson trichrome staining.ResultsThe content of CD44 of lung tissue of asthma group was significantly higher than that of control group (P＜0.05)， the four-week group was more obvious than the three-week group. The content of CD44 of low dose and high dose group was obviously lower than that of asthma group(P＜0.05). The results of the image analysis showed that the thickness of bronchial smooth muscle and the area of collagen deposition obviously increased， the four-week group was more evident than the three-week group， there was significant difference compared with control group(P＜0.05). These changes of hormone group and ChuanFuKang group were not evident， there was no significant difference compared with control group(P＞0.05).ConclusionChuanFuKang mixture can inhibite the airway remodeling by reducing the produce and the expression of CD44 in asthmatic rat lung tissue.

Key words：Asthma; Airway remodeling; ChuanFuKang Rats

支气管哮喘(简称哮喘)是严重影响人体健康的慢性呼吸道炎症性疾病。近年来，人们针对哮喘病的慢性进行性和难以根治性，对于哮喘气道壁重塑的研究日益受到重视。气道重塑主要表现为气道平滑肌肥大、增生、基底膜增厚和玻璃样变，由此可致气道的不可逆阻塞和持续的气道高反应性，是顽固性哮喘的重要病理基础［1］。许多因素如炎症介质、细胞因子及原癌基因都参与了这一过程。本研究观察不同时段哮喘大鼠模型肺组织中CD44的表达及药物对其表达的影响，旨在进一步阐明CD44在哮喘气道重构中的作用和药物的干预机制，为进一步的实验研究提供依据。

1 材料与方法

1.1 药品与试剂 鸡卵清白蛋白（OVA），美国Sigma公司;地塞米松磷酸钠注射液，湖北天药药业；兔抗鼠CD44多克隆抗体、即用型SABC免疫组化染色试剂盒，武汉博士德生物工程有限公司；SP免疫组织化学、DAB显色试剂盒，北京中衫金桥生物技术有限公司。

1.2 仪器 402T型超声雾化器，上海四菱医疗器械厂；自制大鼠雾化吸入箱；DC200图象采集系统、IM50型图像采集软件、Image-Proplus真彩色医学图象分析软件，德国Leica公司产品等。

1.3 动物及分组 健康雄性SD大鼠80只，体重180～200 g，由华中科技大学同济医学院实验动物中心提供。实验前动物于正常温控、光照和自由摄取食物、水的条件下饲养1周后，被随机分成5组：正常对照组、哮喘组、地塞米松处理组及喘复康低剂量和高剂量处理组。各组又分成诱喘3周、4周两个时间段。

1.4 大鼠哮喘模型的建立 采用卵白蛋白（OVA）致敏法制备［2］。第1天，哮喘组及各给药组大鼠用1ml混悬液腹腔注射〔OVA 10 mg；Al(OH)3干粉100 mg〕致敏，第15天开始诱喘，哮喘组大鼠超声雾化1%OVA激发，约30 min/次，观察并记录大鼠呼吸及全身情况，以出现呼吸加快、口周发绀及腹肌痉挛、点头呼吸为激发成功，共21～28 d。分别于第35天，第42天处死大鼠。地塞米松组于每次诱喘前1h给予腹腔注射地塞米松1.0 mg/kg。对照组在相同的时间腹腔注射、雾化吸入0.9%生理盐水，其余同哮喘组。

喘复康处方药物由医学院中医内科提供，其主要成分为麻黄、杏仁、丹参、僵蚕、地龙、苏子、白芥子、鱼腥草、黄藤、甘草等。所有药物经浸泡、煎熬、过滤及浓缩成浓度为4 g生药/ml的药汁，将浓缩后的药汁装入已消毒的容器中，密封后再高温灭菌，置于4℃冰箱保存用。于雾化攻击前给予灌胃给药，低高剂量组分别以50，100 g生药/(kg·d) 灌胃。

1.5 肺组织病理学观察 末次激发结束后24 h内处死，取右肺中叶组织，修块，10%甲醛溶液固定，常规石蜡包埋切片。行HE染色及Masson三色法染色。

1.6 计算机图象分析气道壁厚度及胶原厚度 采用计算机图像分析系统，每张切片在显微镜下(400×)，确定完整的支气管横截面，分别选取6个完整的细支气管截面，分别测取支气管基底膜周径（Pbm）、总管壁面积（WAt）、内壁面积（WAi）以及平滑肌面积（WAm），并用Pbm将测量值标化，分别以Wat/ Pbm、Wai/ Pbm及Wam/ Pbm代表相应管壁层的厚度，并计算其平均值。Masson三色染色法使胶原纤维呈绿色，IMG-Q500图像采集系统采集图像，找到完整的支气管横截面，图像分析胶原厚度。

1.7 免疫组织化学染色 CD44免疫组化染色采用SABC法。切片脱腊、水化后3%H2O2室温下反应10 min以灭活内源性过氧化物酶，微波修复抗原，滴加正常牛血清封闭液，室温10 min。滴加适当稀释（1∶100）的一抗免抗鼠CD44多克隆抗体，4℃下过夜，PBS充分冲洗后滴加生物素化山羊抗兔IgG，37℃下反应20 min，滴加试剂SABC， 37℃下反应20 min后DAB显色，镜下控制反应时间，蒸馏水充分洗涤。苏木精轻度复染，脱水、透明、封片观察。计算机图象半定量分析系统测取管壁阳性染色的灰度值作相对含量，随机选取6个支气管，图像分析各支气管细胞染色的灰度值。

1.8 统计学处理 各组间数据均以(±s)表示，采用SPSS10.0统计软件进行统计分析，各组间比较首先采用方差齐性检验，组间差别采用单因素方差分析及q检验，相关性检验采用直线相关分析，P

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2 结果

2.1 病理组织学改变 各组肺组织石蜡切片常规HE染色，光学显微镜下发现，哮喘3周组，支气黏膜皱襞增多，上皮脱落，气道平滑肌的厚度明显增加，黏膜下、管壁及肺泡间质均见有大量嗜酸性粒细胞浸润，管腔狭窄；4周组上述改变更加明显。激素组和喘复康合剂组仅有轻度的炎症反应，支气管及肺泡炎性细胞浸润明显轻于哮喘组。Masson三色法染色法结果显示，哮喘组支气管黏膜及上皮下胶原纤维呈绿色，其分布明显增多，4周组较3周组更为明显；激素组和喘复康合剂组上皮下基底膜胶原沉积不明显，与正常对照组相比无显著性差异。见图1～10。

图1 CD44免疫组化染色空白对照（×20）（略）

图2 正常组CD44免疫组化染色（×20）（略）

图3 哮喘3周组CD44 免疫组化染色（×20）（略）

图4 哮喘4周组CD44免疫组化染色（×20） （略）

图5 地米3周组CD44免疫组化染色（×20）（略）

图6 地米4周组CD44免疫组化染色（×20） （略）

图7 低剂量3周组CD44免疫组化染色（×20）（略）

图8 低剂量4周组CD44免疫组化染色（×20） （略）

图9 高剂量3周组CD44免疫组化染色（×20）（略）

图10 高剂量4周组CD44免疫组化染色（×20）（略）

2.2 各组平滑肌面积及厚度、胶原厚度比较 用支气管基底膜周径标化总管壁面积、内壁面积和平滑肌面积为WAt/ Pbm，WAi/ Pbm及WAm/ Pbm，代表相应管壁层的厚度。哮喘模型组支气管平滑肌明显增厚，胶原沉积增加，4周组比3周组更为明显，与正常对照组及各给药组比较有显著性差异。激素组及喘复康大剂量组平滑肌增厚不明显，与正常对照组相比无显著性差异。见表1。

表1 各组不同时期平滑肌和胶原厚度比较（略）

与正常对照组比较，﹡P

2.3 气道壁CD44免疫组织化学表达改变 气道壁CD44主要表达在气道黏膜上皮细胞胞膜，炎性细胞、肺血管内皮细胞、基底膜、支气管平滑肌未见表达。图像分析结果显示，CD44在正常对照组气道壁弱阳性表达，激发3周时，在哮喘模型组气道黏膜上皮稳定阳性表达，4周时表达更为明显。在喘复康小剂量3周干预组其表达低于哮喘模型组但无显著性差异(P>0.05)，与正常对照组、喘复康大剂量干预组、激素干预组比较均偏高(P>0.05)；激素干预组及喘复康大剂量组CD44表达明显较哮喘模型组低(P

2.4 相关性分析 经直线相关分析得知，气道壁CD44含量与平滑肌厚度呈显著正相关（r=0.741，P

表2 各组不同时期肺组织CD44免疫组化学定量分析结果（略）

与正常对照组比较，﹡P

3 讨论

研究发现，细胞黏附分子中糖蛋白及其黏附机制可能是介导哮喘时炎性细胞浸润、增殖乃至纤维化形成的分子基础。CD44是一种细胞表面跨膜糖蛋白分子，属于未分类的黏附分子，通过介导细胞与细胞、细胞与基质之间的特异性黏连，刺激多种细胞增殖和细胞外基质的合成，而具有增高气道反应性、促使气道重塑发生的作用，与哮喘的发病密切相关［3］。Katoh等［4］通过在体实验发现CD44单克隆抗体(KM201或IM7)可以显著减少嗜酸性粒细胞和淋巴细胞在肺内的聚集，提示白细胞特别是嗜酸粒细胞和淋巴细胞向肺部炎症组织趋化浸润有赖于CD44分子参与，并且通过炎症细胞的破坏和分解导致局部损伤，进而引起上皮和基底的破坏和萎缩，直至重塑形成。Ohkawara等［5］报道致敏哮喘大鼠BALF中的嗜酸粒细胞明显增加，可能是通过CD44-HA途经实现的。

转化生长因子－β1（TGF-β1）是哮喘气道重塑的主要调控因子，其具有促胶原产生、增加细胞外基质沉积、诱导上皮细胞凋亡等重要作用［6］。CD44可通过介导炎性细胞分泌产生大量TGF-β1，喘复康合剂可能通过减少气道壁TGF-β1的表达而抑制气道重塑。

本实验通过建立大鼠OVA致敏的哮喘模型，测定了致敏不同时段肺组织中CD44表达量的变化，观察哮喘不同时段支气管肺组织的组织学改变及基底膜胶原沉积情况，并观察比较应用中药合剂喘复康以及激素治疗对于气道重塑的影响。喘复康由我校中医内科提供，是根据临床经验总结和改良的治疗哮喘的方剂。支气管哮喘属中医学中“哮证”范畴，哮病的病因多以肺虚、脾虚、肾虚为本，以风、寒、湿、痰、热、淤为标。方中甘草、麻黄具有松弛支气管平滑肌作用；地龙通过抗组织胺作用而扩张支气管；杏仁、苏子、白芥子、僵蚕等具有祛痰降气作用，减轻肺气壅塞，使呼吸较通畅而有助于止喘、降低气道反应性。诸药合用补益肺、脾、肾，调理脏腑气机，恢复升降功能，共同达到扶正、化痰、平喘的功效。但其解痉平喘的有效成分和分子机理还有待进一步研究。同时，喘复康合剂可通过减少哮喘时肺组织中CD44的表达，抑制或减轻气道平滑肌的增厚及胶原的沉积，从而防止气道重塑。但其具体作用于CD44表达的哪个环节及其如何发挥抑制它们表达的作用还有待进一步研究。

【参考文献】

［1］ 赵顺英.哮喘发病机制研究进展［J］.实用儿科临床杂志，2003，18（10）：768.

［2］ 吕国平，崔得健，郭英江，等.介绍一种建立大鼠哮喘模型的实验方法［J］.中华结核病和呼吸杂志，1995，18(6)：372.

［3］ Marc ER. CD44-a sticky target for asthma［J］.Clin Invest，2003，111(10)：1460.

［4］ Katoh S， Matsumoto N， Kawakita K，et al. A role for CD44 in an antigen-induced murine model of pulmonary eosinophilia［J］.Clin Invest， 2003，111(10)：1563.

［5］ Ohkawara Y. Activation and transforming growth factor-βproduction in eosinophils by hyaluronan［J］.Am J Respir Cell Mol Biol， 2000，23(4)：444.

篇9

1、在高级招募中已经上架了大蛇丸晓，达到一定的招募次数就可以得到对应的碎片，100个碎片进行兑换大蛇丸晓。

2、也可以通过直购的方式获得大蛇丸晓的碎片。

3、或者是参加大蛇丸实验室活动，完成每天的活动目标即可获得大蛇丸碎片。

4、或者还可以在活动期间，在活动界面直购大蛇丸礼包，打开获得碎片。

（来源：文章屋网 ）

篇10

2、同济大学：位于上海市杨浦区的五角场地区，是著名的百年名校，前身是1907年德国医生埃里希宝隆在上海创办的同济德文医学堂。

3、中国美术学院：是最早实施设计学的高等学府，是中国最早的艺术革命团体发祥地，中国唯一一个美术学国家重点学科所在地，是首批国家“双一流”世界一流学科建设高校和首批教育部来华留学示范基地建设高校。

4、南京艺术学院：是中国独立建制创办最早并延续至今的高等艺术学府，由中华人民共和国文化部与江苏省人民政府的省部共建大学，并且为世界五大综合类艺术大学之一、中国六大艺术学院之首。