读书小报书籍范文
时间:2023-03-31 21:54:20
导语:如何才能写好一篇读书小报书籍,这就需要搜集整理更多的资料和文献,欢迎阅读由公务员之家整理的十篇范文,供你借鉴。
篇1
先知死后知生
李小宝两岁多的时候有一天忽然跑来问他娘:“妈妈,你会死吗?”
他娘先吓了一大跳,然后镇定地回答:“会的。人都会死的。”
见李小宝啥也没说去玩别的了,他娘松了口气,想这孩子准是从故事中听到了谁谁死了才好奇地问问。
那天晚上,要睡觉了,他娘发现李小宝独自缩在被子后面,小屁股撅在外面,一动不动。
“你干吗呢?”李小宝趴在那儿,埋着头不动:“我在哭呢。”
“为什么呀?”他娘赶紧把他抱在怀里,李小宝哭着说:“妈妈,我不要你死。”
他娘马上说:“妈会陪你长大,上小学、上大学,看着你实现梦想,妈不会死呢。”
李小宝非常喜欢卡尔维诺写的《意大利童话》,百听不厌。有一次他让他娘朗读之前,忽然指着封面上卡尔维诺的照片问:
“他死了吧?”
当得到肯定的回答之后,他又问:“那他为什么还老讲故事呢?他假装死吧?”
“不。他死了。他写了书,人们读他的书就常会记起他,他好像没有死一样。”
李小宝听了马上去拿了笔和本塞给他娘:“那你也写一本书吧。”
他娘起初没理会,“好吧,我们写什么呢?”
“写个故事吧。”李小宝说完就开始瞎编自己的故事,看着他娘认真记下他讲的故事,他满意地笑了,然后说出一句让他娘不知所措的问话:“你不会死了吧?”
见他娘说不出话来,他平静地说:“人都会死的吧?”
“对。但我会一直陪着你的,陪你长大。一直爱你。”他娘用同样的平静回答他,
“你知道我爱你吗?”
“我知道。我早就知道。”
看着李小宝安心的样子,他娘释然了,也许是阅读带来的力量。
读莎士比亚
李小宝上小学三年级,近来他迷上了莎士比亚,他读莎士比亚,但他其实不知道莎士比亚是谁,在他心里,莎士比亚只是他喜欢的一个七年级男孩霍林(《星期三的战争》中的人物)被迫阅读的“冗长”而“乏味”的作品,但最后他们都爱上了莎士比亚。孩子不像我们大人,他们没有被莎士比亚吓住,李小宝后来很认真地说:“我现在知道莎士比亚是好的戏剧。”
这句朴素的评价反映了孩子对“大书”有着天然的亲近,虽然他们刚开始从那里学来的只是一句骂人的话,比如三年级的李小宝和七年级的霍林首先从莎士比亚习得并不断运用的是:“愿西南的恶风把你们吹得浑身起水疱”……
起初李小宝从书架上挑了《星期三的战争》让他爹读,他爹说:“这个你能自己看,读别的。”其实他爹有点私心,睡前阅读总是读儿童文学什么的实在很难坚持,必须有些“童叟共赏”的书掺和着,像前一阵子读《金银岛》,李小宝不用央求,他爹就会主动说:“我再给你读一段。”那叫一个欲罢不能!这次他爹还想找这么一本书来读,捎带着满足大人的爱好。但李小宝坚持说:“这是我的睡前故事,得我决定读什么书!”他爹当然得让步。
好在《星期三的战争》带给一家大小的愉悦感受丝毫不减,不仅如此,听完霍林的故事李小宝宣布:“下一个睡前故事我要听莎士比亚。”
说实话他爹都没怎么正经读过莎士比亚,莎士比亚对于大人是书架上端正站立的“大书”!孩子可不管这么多,他要读,而且和霍林的阅读顺序一致,李小宝先点了《暴风雨》。
当晚听了一幕,李小宝还不过瘾,他说要带两本莎士比亚到学校去,他爹没太当真,那天放学回家,李小宝说读完了三个剧本,还没等他爹起疑,他继续说:“你猜那磅肉是怎么解决的?”幸好高中课本里有《威尼斯商人》节选,不然可能还不知道小宝说的是“哪磅肉”呢。“那个法官真是够聪明的,她说当初只说了是一磅肉,没说要一滴血,所以不能有一滴血,你就可以割去一磅肉!”孩子眼里闪着兴奋火花,在大人眼里的“大书”带给他的是单纯的故事的快乐。
听读加上阅读,李小宝读完了大部分莎士比亚,他爹娘也和他一起完成莎士比亚扫盲。
篇2
关键词:消毒;专利;申请量;申请人
DOI:10.16640/ki.37-1222/t.2017.05.020
为了提高包装物品的安全性,保证包装物品的质量,将包装件进行合理的消毒是必要的。通过对包裹材料或贮器的消毒方面专利的相关分析,了解该领域的发展状况。
1 包裹材料或贮器消毒技术概况
本文涉及在包装前或包装过程中对包裹材料或贮器消毒的专利文献。其中消毒按消毒方式又可以划分为用加热方式、用辐照、用液体或气体,目前用液体或气体对包裹材料或贮器消毒的专利申请量较大。
包裹材料或贮器消毒的专利申请量上,以在日本的申请量最多,其中以利乐公司在该技术上的申请量远远大于其他申请人的申请量。因此本文将以利乐公司为切入点,对包裹材料或贮器消毒技术的发展进行分析研究。
2 利乐公司的技术演进
(1)用加热方式对包裹材料或贮器消毒的技术路线。利乐公司最早采用的是以高压蒸汽处理以纤维为基料的容器,在容器的临界温度时通过改变分别用于加热或冷却容器的传热介质。传热介质从容器传递热能或将热能传递到容器的试剂,适宜的传热介质包括例如水(液相)、蒸汽和空气。但是这种消毒方式对包装容器的材料结构存在限制。
随后利乐公司采用加热化学灭菌剂来实现对包装容器的灭菌,解决现有包装容器灭菌方法消耗大量灭菌剂、难以全面灭菌、易破坏容器的问题。
近几年,正确灭菌包装材料是在过氧化物浴中,对于在加热室内部气体混合物中过氧化氢浓度的精确控制是决定性的。如果浓度太低,应用于包装材料的过氧化氢蒸发得太快,存在未充分灭菌的风险。另一方面,如果浓度过高,应用于包装材料的过氧化氢蒸发得太快,存在过多的过氧化物残留在离开加热室的包装材料上的风险,为了解决这些问题,利乐公司主要是采用一种用于测量可氧化物质浓度的设备(如CN200810147117)来达到对开口纸瓶的灭菌。
(2)用辐照方式对包裹材料或贮器消毒的技术路线。用辐照对包裹材料或贮器消毒就是将容器密封,使容器受到能量水平能够使电子穿透容器的电子辐照,在容器内产生臭氧,并在密封的容器内保留所产生的臭氧,以便消毒容器的方法。
包装片材因电子通过会产生“异味”的味觉,因此利乐公司在专利CN02805128中就提供了一种采用辐照给包装片材杀菌的方法,即将低压电子束分别引导至包装片材的相对表面上,电子束均具有至多100千电子伏的能量,辐射装置包括两个用于产生低压电子束的产生装置,装置中还至少包括一个屏蔽元件,用于屏蔽围绕所述产生电子束的产生装置的区域。
至2012年,在辐射消毒方面,利乐公司主要的研究方向变为电子束装置,其中申请号为CN201280030018的申请就是关于一种电子束装置,通过装置提高消毒效果。
(3)用液体或气体方式对包裹材料或贮器消毒的技术路线。用液体或气体对包裹材料或容器消毒,通常是和加热消毒材料相结合的消毒方式,在90年代初,利乐公司就有相关申请CN90108853,具体为一种产生含过氧化氢气态灭菌流体的方法。确定空气流的均匀气化温度的方法是,在气化前,通过与具有大质量(热容) 和大热交换表面积的加热元件进行热交换而将空气加热,该加热元件通过有控制地供给其能量而保持所要求的高温,该加热元件在间歇注入液态过氧化氢之间中止气化期间,借助贮存在该加热元件中的热量得到加热,其装置较复杂。而对于带材的灭菌利乐公司则采用了较简单的措施,例如申请号为CN00108229的专利。至2014年,利乐公司直接研发将包装材料制成密封包装和消毒为一体的机器,其中有申请号为CN201280048826的专利申请,这个专利申请主要是关于一种包装机器。
3 包裹材料或贮器消毒技术展望
从利乐公司在包裹材料或贮器消毒方面的专利申请可以看出,包装行业正在从机械化程度低的时代过渡到机械化程度高的时代,包裹材料或贮器的消毒不再是在容器成型前或后消毒,其更是在容器或包装过程中的一个小步骤,而且消毒也更趋于安全、便捷。因此包裹材料或贮器消毒将来的发展趋势是对整个包装装置的研究以及对于消毒装置在包装装置中的设置和控制的研究,未来的产品加工与包装过程不仅更一体化,自动化,也将更可靠、更安全、更符合人类健康的发展需求。
参考文献:
[1]利乐拉瓦尔集团及财务有限公司.从包装材料的幅材生产食品的密封包装的包装机器和方法 CN103842258 A,2012(08)29.
[2]利乐拉瓦尔集团及财务有限公司.在包装机上对带材进行灭菌处理的装置和该包装机 CN1272444 A,2000(04)30.
[3]利乐拉瓦尔集团及财务有限公司.产生含过氧化氢的气态灭菌流体的方法 CN1051509 A,1990(11)7.
[4]利乐拉瓦尔集团及财务有限公司.电子束装置和制造所述电子束装置的方法 CN103620696 A,2012(06)27.
[5]利乐拉瓦尔集团及财务有限公司.照射物体的方法和装置 CN101557832 A,2007(11)12.
[6]利乐拉瓦尔集团及财务有限公司.消毒密封容器的方法 CN1233221 A,1997(09)19.
篇3
关键词:大树杜鹃;极小种群;濒危植物
中图分类号:Q948
文献标识码:A 文章编号:1674-9944(2016)21-0065-03
1 引言
杜鹃花是世界名花之一,在植物分类上属杜鹃花科杜鹃花属(Rhododendron)植物。全世界已知的杜鹃花属种类共967种,广泛分布于亚洲、欧洲、美洲,主要产于东亚、东南亚[1]。我国是杜鹃花的重要产地,在全世界的杜鹃花属种中,中国拥有561种杜鹃花,占全世界总数的58.01%,其中,420种是我国特有种,约占国产种类的74.87%[2,3]。因此我国素有“杜鹃花王国”之称,云南更是杜鹃花群芳荟萃之乡,是杜鹃花属植物的分布中心和发祥地,共有243种杜鹃花分布,其中大树杜鹃(Rhododendron protistum var.giganteum (Forr.ex Tagg) Chamberlain)被誉为“杜鹃花王”。
大树杜鹃为杜鹃花科(Ericaceae)杜鹃属(Rhododendron)常绿树种,是翘首杜鹃(Rhododendron protistum Balf.f. et Forrest)的变种[4],与原变种的区别是这一变种叶背面全面被毛,毛被淡肉桂色,疏松,不脱落。大树杜鹃在中国分布于高黎贡山一带海拔2100~3300 m的混交林中[5,6],数量为3000株左右,主要分布于腾冲县。因其生长缓慢,更新困难,数量较少,目前已被世界自然保护同盟(International Union for Conservationof Nature,IUCN)将其列为极危物种,云南省极小种群物种拯救保护规划纲要(2010~2020年)将其列为极小种群物种进行保护[7],针对大树杜鹃的保护迫在眉睫。
2 大树杜鹃的发现
早在20世纪初,云南的杜鹃花就被欧洲一些国家所注意,多次引种我国杜鹃和其他植物进行栽培。1919年,英国人在云南腾冲高黎贡山区,率先发现了杜鹃花树王。他们采集了大树杜鹃的花和果实标本,并取样带走了一段树干。据记载这株树的树干径围2.6 m,株高25 m,树龄280年,至今树干圆盘状的木材标本仍展览在英国伦敦大英博物馆里。1926年,英国人傅礼士(G. Forrest)和塔吉(Tagg)将大树杜鹃定名为Rhododendron protistum,并在爱丁堡皇家植物园刊物上做为新种发表。大树杜鹃在异国他乡声名鹊起。
在国内,国人开始关注大树杜鹃,是在60年后的1981年。1981年,中国科学院昆明植物研究所专家冯国楣通过查阅关于傅礼士的资料,在三次实地调查后,终于进入大塘,在海拔2400 m的密林深处找到了大树杜鹃。其中一株树龄在500年以上,高28 m,基径3.07 m,树冠61 m2,被植物学界公认为“世界大树杜鹃王”[8]。据冯国楣记载,大树杜鹃叶片革质,呈椭圆形或倒披针形。总状伞形花序,序着花20~24朵,整个花序构成直径达25 cm的花团。花呈水红色,花冠漏斗状钟形,单花直径6~8 cm,基部有8个深色蜜腺囊,雄蕊16枝,不等长,花药暗紫色,子房16室,花柱长3.5~5 cm,淡绿白色,无毛。在大树杜鹃种群内还有厚朴(Magnolia officinalis)、木莲(Manglietia)、含笑(Michelia)、樟(Cinnamomum)、楠(Phoebe)等树种伴生。之后大树杜鹃也引起了当地林业单位的重视。1982年4月,腾冲县林业局、林业学会组织了10人的考察队,对腾冲县界头公社大塘大队、大河头生产队以北的高黎贡山,海拔2100~2400 m的火草地、平岔一带进行考察。在调查中发现大树杜鹃40余株,胸径在1 m以上的有12株。其中,发现一株特大大树杜鹃,树高25 m,地面基部直径达3.07 m,离地面20 cm处分成两大主干,胸径分别为1.57 m和1.11 m[9,10]。
为应对越来越严重的环境,掌握大树杜鹃的分布情况和数量信息等科学资料,2009年5~11月,高黎贡山保山管理局腾冲分局大塘管理站分别于5月及11月在辖区内又进行了40 d的野外调查。调查结果显示:大树杜鹃集中分布在大塘火草地及南部茨竹河辖区中山湿性常绿阔叶林中海拔2340~2600 m的沟谷两侧,少数沿沟谷上升到2780 m,共发现大树杜鹃1437株(火草地1325株、占92.2%,茨竹河112株、占7.8%),两个分布地点之间的直线距离近11 km。前人的这一系列发现,都为今后大树杜鹃的研究和保护提供了珍贵的基础资料。
3 大树杜鹃的资源状况
大树杜鹃目前主要分布在高黎贡山国家级自然保护区大塘管理站西坡的大河头和茨竹河。但不仅限于腾冲县,泸水县、福贡县和贡山县也有极少量分布,物种总数量为3000株左右[5,7,11]。其主要分布地高黎贡山山区海拔2340~2600 m,年平均气温11 ℃,最热月平均气温约16 ℃,极端最高温约27.8 ℃,最冷月平均气温约3.50 ℃,极端最低温在0 ℃以下;年均降水量约2000 mm,干湿季分明,雨季(5~10月)集中年降水量的85%,其中7~9月雨量尤多,旱季(11月至次年4月)雨量较少,属典型的亚热带季风气候[12]。该区域年平均相对湿度在80%以上,土壤为黄棕壤,中等厚度。整体生境多为多雨高湿,气候温凉,土壤疏松排水良好的地段。由于特殊的地质历史和上述独特的自然环境,高黎贡山山区成为杜鹃花科植物的主要分布区,云南所产10属中有9属在高黎贡山有分布(只有当年枯(Arctous ruber)1属1种未见在高黎贡山地区分布),共产187种(包括亚种、变种),分别占中国总种数的约34%及云南种数的49%。高黎贡山地区杜鹃花科植物种类最多的是杜鹃属(Rhododendron),计140种(变种),占该属云南种数的45%[13]。
大树杜鹃在高黎贡山国家级自然保护区主要分布于沟谷两侧,植被类型为中山湿性常绿阔叶林,群落外貌上层木以常绿树为主,同时也有少量干季换叶的树种混杂,林冠参差不齐。主要群落类型包括青冈-南亚含笑群落、薄片青冈群落与旱冬瓜群落等,壳斗科(Fagaceae)、樟科(Lauraceae)、木兰科(Magnoliaceae)、山茶科(Theaceae)、金缕梅科(Hamamelidaceae)、杜鹃花科(Ericaceae)植物是乔木层主要优势树种,主要伴生植物包括曼青冈(Cyclobalanopsis oxyodon)、薄片青冈(Cyclobalanopsis lamellosa)、毛脉青冈(Cyclobalanopsis tomentosinervis)、南亚含笑(Michelia doltsopa)、红花木莲(Manglietia insignis)、印度木荷(Schima khasiana)、滇西红花荷(Rhodoleia forrestii)、黄心树(Machilus gamblei)、红梗润楠(Machilus rufipes)、云南柃(Eurya yunnanensis)、清香木姜子(Litsea mollis)、山柿子果(Lindera longipedunculata)、角柄厚皮香(Ternstroemia biangulipes)等[14]。
4 大树杜鹃的濒危原因
一般认为造成物种濒危的原因主要来自两方面:一为物种的内部因素,包括遗传力、生殖力、生活力、适应力的衰竭等,是物种本身的生物学特性和对环境的适应能力的体现,它们是威胁植物生长繁衍导致其稀有濒危的重要原因;二为外部因素,指外界干扰对物种繁育造成的影响,包括自然因素和人为因素等。自然因素是指地质史上由于陆地的隆起和下沉、冰期和后冰后干热期的交替等造成的大规模的气候变迁,往往使许多植物灭绝。部分得以存活的种类也因环境的变化成为稀有种类, 如银杏、苏铁(Cycas revoluta)等。人为因素是人类活动所引起的使植物生存受到威胁的灾害[15]。
大树杜鹃十分集中地分布在高黎贡山自然保护区,相比我国其他濒危植物来说,外界干扰的影响很小,它的濒危主要由于自身原因。大致可分为以下几方面。
4.1 种群分布局限性强,拓殖途径狭窄
大树杜鹃分布集中于高黎贡山山区海拔2340~2600 m的原始森林中,邻近山体鲜有分布,地理分布范围十分狭窄,具有很强的局限性和特殊性。现有的人工繁育和引种栽培技术表明,大树杜鹃幼苗建成与人工繁育对外界生态因子的需要极其苟刻,昆明植物研究所在1984年曾经引种过200多株大树杜鹃,仅存活下来几株,但至今也没有开花。此外,大树杜鹃的种子很小,靠风力和重力传播,生长和繁育的生态幅范围狭窄。这些都造成大树杜鹃仅在适宜的小生境中生长、繁育,导致大树杜鹃种群增加和更新困难。
4.2 环境因子影响显著,群落更新困难
在室内试验中,大树杜鹃的种子萌发率较高(86%~88%),但对环境的依赖显著,其年生长量仅为6.6 cm/年,营养生长的缓慢直接导致了生殖生长的的延长,而在生长过程中大树杜鹃耐寒能力较弱,不耐-1 ℃的低温,温度在-1 ℃时,大树杜鹃叶芽变为棕色,-2 ℃时,植株死亡[5]。同时,大树杜鹃的生境中凋落物厚度大,靠风力和重力传播的种子很难散布到有效的土壤基质层。这些都导致,大树杜鹃群落中成年植株较多,幼苗幼树较少,形成更新结构不稳定的衰退型种群,限制了物种的自然更新。
5 大树杜鹃的保护策略
综上所述,大树杜鹃能够在当地环境中恢复稳定的自然更新,但不能适应改变的环境条件,如低温会很大程度上限制大树杜鹃的生长、繁育,所以,保护策略应以就地保护为主,异地保护并用,具体策略如下。
5.1 对残存种群就地保护
对珍稀颜危植物的保护,目前认为最关键而又最有效的措施就是就地保护,即保护现有种群及其生境[16]。从大尺度来说,就地保护是以各种类型自然保护区(包括风景名胜区、森林公园)的方式, 将有价值的自然生态系统和野生生物生境,或将植物多样性丰富、具有珍稀濒危植物分布的区域保护起来。我国目前属于自然保护和生物多样性保护的主要区域有3种类型:自然保护区、森林公园、风景名胜区。大树杜鹃种群集中分布于高黎贡山国家级自然保护区的核心区,因此,对大树杜鹃种群的保护首先就是对高黎贡山自然保护区的保护,确保现有的群居和生境得到保护和提升,减少人为干扰和破坏。特别值得注意的是近年来国家对国家级自然保护区开展生态旅游苑⒌牟椒ブ鸩郊涌欤大树杜鹃作为高黎贡山自然保护区的核心保护植物资源,极具旅游价值,这是保护大树杜鹃的机遇也是挑战,应在未来的工作中把重点放在处理好保护与开发的关系,在开发生态旅游的同时,做好濒危植物资源的保护,杜绝破坏性的开发。
5.2 就地展开适当的人为干扰促进群落更新
从生物特性上来说,大树杜鹃在自然生境中的大树杜鹃开花、结实正常,自然结实量大,室内试验条件下种子萌发率也较高,这说明大树杜鹃本身可以完成自我更新,但在自然环境中,光照条件、凋落物厚度等显著影响着种子的出苗率。所以,应该适当的在原有生境中展开人为干扰促进群落的更新,如清除凋落物、灌木、草本保证种子的能接触到有效的土壤基质层;扩大幼树、幼苗集中分布区的林窗面积,保证光照条件,促进幼龄树苗的更新。
5.3 异地保护,开展驯化繁殖
大树杜鹃由于种群环境独特,又多处于过熟年龄,繁殖能力低下,加之人们对大树杜鹃的繁殖方法知之甚少,因此应加大大树杜鹃人工繁殖技术的研究,通过采取种子采集、人工育苗的保护措施,扩大种群数量。另外,大树杜鹃具有很高的观赏价值,人工驯化繁殖若取得成功,可为该种迁地保护和增添我国园艺树种打下基础。
参考文献:
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[14]吴富勤.极小种群野生植物大树杜鹃的保护生物学研究[D].昆明:云南大学,2015.
篇4
一、基本情况:
xxx,四川宜宾人,1985年10月出生,XX年毕业于东北师范大学。
二、政治思想素质:
本人自参加工作以来,坚持正确的政治方向,拥护中国***,全面贯彻党的教育方针,忠诚于人民的教育事业,认真学习和领会党的xx大精神和“三个代表”重要思想,爱岗敬业,热爱学生,尊重学生,遵守学校的各项规章制度,积极参加学校的各类政治学习,并且认真记录,及时反馈,努力提高自己的思想觉悟,不断地完善自我。
三、教学能力:
从XX年起, 一直积极配合学校开展各项教研活动 ,在教学上,我切实抓好教学的每一个基本环节,深钻教材,认真备课,以学生为主体精心设计每一堂课,激发学生学习兴趣,创设轻松活跃的学习氛围,师生双方密切合作,交流互动,合理并创造性地运用教学方法,形成自己独特的教学风格。 加强培优补差,对于特长生,要不断拓宽知识视野,充分挖掘他们的潜力,使这些学生能充分发挥自己的优势。 对于基础薄弱的学生,有步骤有计划地加强课外辅导,善于发现这些学生身上的闪光点,及时给予鼓励,让他们也能学好 知识。从而使整个班级数学成绩逐步上升。
四、班主任工作:
在担任班主任工作时,深知班主任是一个班的组织者和领导者班级是学校教学活动的基本单位,班级管理水平的高低,对学生健康全面的发展,对学生的素质教育起着重要作用。在班主任工作中,我学得要搞好班级管理,让学生受到严格的行为规范的约束,又能在宽松自如的氛围中充分发挥自己的个性特长,并健康的成长。我要求全班同学参加班级日常管理,形成轮值制度,每个人都有机会履行班级管理职责,增强责任感和参与意识,为管理好班级献出自己的一份力量。班主任对学在教育、教学、生活和各项活动中,该肯定的就肯定,并给予适当的批评和教育,在全班形成一种能够扶持正气,伸张正义,制止错误思想的良好良班风。
篇5
摘要:目的观察灵芝孢子油的扶正减毒作用。方法以正常和 H22荷瘤小鼠为对象,通过检测外周血 WBC数、骨髓有核细胞数、脾脏指数、胸腺指数来观察口服灵芝孢子油(2.5,1.25,0.625 g/kg)对于环磷酰胺(Cy)化疗及60Co放疗的减毒作用;通过小鼠碳廓清实验、血清溶血素测定实验检测药物对 H22荷瘤小鼠免疫功能的影响。结果灵芝孢子油中高剂量组均可明显对抗由大剂量Cy、60Co照射造成的正常及荷瘤小鼠外周血WBC,骨髓有核细胞数,脾脏指数和胸腺指数下降 (P<0.01, P<0.05)。灵芝孢子油各剂量均可显著提高荷瘤小鼠吞噬系数α,中高剂量组可明显提高荷瘤小鼠的血清半数溶血值(P<0.01,P<0.05)。结论灵芝孢子油可减低 Cy和 60Co所致的骨髓抑制毒性,并可显著提高小鼠细胞和体液免疫功能。
关键词:灵芝孢子油; 免疫 ; 环磷酰胺
Effect of Ganoderma lucidum Spores Oil on Reducing the Toxicity of Radiochemotherapy and Enhancing the Function of Immune System in Mice
Abstract:ObjectiveTo study the effects of G. lucidum spores oil on reducing the toxicity of the radiochemotherapy and enhancing the function of immune system in mice. Methods Study the effect of G. lucidum spores oil (at the dose of 2.5,1.25,0.725 g/kg) on reducing the toxicity of the Cy chemotherapy and 60Co radiotherapy by detecting the number of the peripheral blood leucocyte, the number of bone marrow karyota;spleen index, thymus index of normal mice and H22-bearing mice by carbon clearance test and serum erythrocytolysin test. Results It showed that G. lucidum spores oil at high (2.5 g/kg) and middle dose (1.25 g/kg) could significantly relieve the decrease of the number of the peripheral blood leucocyte, the number of bone marrow karyota, spleen index and thymus index of normal mice and tumopbearing mice by Cy at a high dose and 60Co (P<0.01, P<0.05). G. lucidum spores oil at each dose could significantly increase macrophage phagocytic index; and at high and middle dose it can significantly enhance the serum erythrocytolysin level of H22-bearing mice (P<0.01, P<0.05).ConclusionG. lucidum spores oil could relieve the myelosuppression caused by Cy and 60 Co; enhance the cellular and humoral immune function of tumor H22-bearing mice.
Key words:G. lucidum spores oil; Immunity; Cy
灵芝是祖国医药宝库中的珍贵药品,我国最早的药学专著《神农本草经》将其列为“上品”。基于灵芝的确切临床治疗作用,近年来对其化学成分及作用机理进行了大量的研究,对灵芝的生殖细胞――孢子的药用价值研究也日趋深入。以往的研究表明,灵芝孢子具有显著的防癌、抗肿瘤作用,其功效是灵芝子实体的60~70倍。本实验所用灵芝孢子油是利用超临界 CO2流体萃取技术从灵芝破壁孢子中提取出来并浓缩富集而得,其各种有效成分(如三萜类)的含量均较传统提取方法显著提高。本实验主要研究其对荷瘤小鼠的免疫调节及对常规放化疗的减毒作用,以期为灵芝孢子油的临床抗肿瘤辅助应用提供实验依据。
1 材料
1.1 药物灵芝孢子油,由广州灵芝孢子油现代中药研究开发有限公司提供,批号:050601,临用前用豆油稀释成所用浓度。云芝孢内糖肽胶囊,南京老山药业股份有限公司,批号:050104,规格:0.5 g×21粒,临用前用生理盐水成所用浓度。注射用环磷酰胺,上海华联制药有限公司,规格:200 mg/瓶,批号:020804。
1.2 瘤株与动物H22小鼠肝癌细胞,由中科院上海药物研究所提供。ICR小鼠,雌雄各半,18~22 g,由中国药科大学动物室提供,合格证号:苏动质 SCXK(苏)2002-0011。
2 方法
2.1 灵芝孢子油对正常、H22荷瘤小鼠化疗(Cy)的减毒作用 取 ICR小鼠60只,按移植性肿瘤研究法[1]接种 H22实体瘤,24 h后随机分组,实验设:空白对照组,豆油对照组(20 ml/kg),灵芝孢子油高、中、低剂量组(2.5,1.25,0.625 g/kg) ig给药,云芝胞内糖肽胶囊组(1 g/kg)ig给药。另取 ICR小鼠60只,不接种荷瘤,分组给药方法同上。各组给药1次/d,共7次,各组于给药第4,5天(除空白组外),连续2 d ip Cy(100 mg/kg),于停药后24 h,各组眼眶静脉取血,镜检外周血白细胞总数,同时摘取一侧完整股骨、胸腺、脾脏,分别测定骨髓有核细胞数,称胸腺、脾重,计算胸腺、脾脏系数,并进行统计学处理(t检验)。
2.2 灵芝孢子油对正常小鼠、H22荷瘤小鼠60Co放疗的减毒作用取 ICR小鼠60只,按移植性肿瘤研究法[1]接种 H22实体瘤,24 h后除空白对照组10只动物外,其余50只小鼠进行60Co照射,剂量为500 rad;60Co照射后动物随机分为5组,实验设:空白对照组,豆油对照组(20 ml/kg),灵芝孢子油高、中、低剂量组(2.5,1.25,0.625 g/kg) ig给药,云芝胞内糖肽胶囊组(1 g/kg)ig给药。另取 ICR小鼠60只,不接种荷瘤,除空白对照组10只动物外,其余50只小鼠进行60Co照射,剂量为500 rad;60 Co照射后动物随机分为5组,分组及给药方法同上。各组均给药1次/d,共7次,于停药后24 h,各组眼眶静脉取血,镜检外周血白细胞总数,同时摘取一侧完整股骨、胸腺、脾脏,分别测定骨髓有核细胞数,称胸腺、脾重,计算胸腺、脾脏系数,并进行统计学处理(t检验)。
2.3 灵芝孢子油对 H22荷瘤小鼠网状内皮系统吞噬功能的影响取 ICR小鼠50只,按移植性肿瘤研究法[1]接种 H22实体型瘤。次日随机分为5组,实验设:豆油对照组(20 ml/kg),灵芝孢子油高、中、低剂量组(2.5,1.25,0.625 g/kg) ig给药,云芝胞内糖肽胶囊组(1 g/kg)ig给药。共给药11次。于末次给药后24 h,尾静脉注射印度墨水,注入后1 min及5 min从小鼠眼眶后静脉丛取血,立刻吹入 Na2CO3液中,于680 nm处比色,按下式计算廓清指数K及吞噬系数 α值。所得数据进行统计学处理(t检验)
廓清指数K=(logOD1- logOD5)/(t5-t1)
吞噬系数α=(体重/肝脾合重)×(K)1/3
2.4 灵芝孢子油对 H22荷瘤小鼠体液免疫功能的影响取 ICR小鼠50只。按移植性肿瘤研究法[1]接种 H22实体型瘤。次日随机分为5组,实验设:豆油对照组(20 ml/kg) ig给药,灵芝孢子油高、中、低剂量组(2.5,1.25,0.625 g/kg) ig给药,云芝胞内糖肽胶囊组(1 g/kg)ig给药。共给药11 d,于第7天,各组小鼠腹腔注入绵羊红细胞0.2 ml/只(20%)进行初次免疫,末次给药1 h后,取血,分离血清,测定并计算半数溶血值 HC50,进行组间t检验,比较差异的显著性。
3 结果
3.1 灵芝孢子油对正常小鼠、H22荷瘤小鼠化疗 (Cy)的减毒作用结果如表1~2所示,与空白组相比,Cy可显著抑制正常小鼠和荷瘤小鼠外周血 WBC、骨髓有核细胞数、胸腺系数和脾脏系数(P<0.01)。与 Cy模型组相比,灵芝孢子油中高剂量组及云芝胞内糖肽组均可对抗 H22荷瘤和正常小鼠脾脏系数、胸腺系数、WBC数和骨髓有核细胞数的下降 (P<0.05或P<0.01)。
表1 灵芝孢子油对正常小鼠化疗的减毒作用(略)
与空白组比较,P< 0.05, P< 0.01;与豆油+Cy组比较,*P<0.05,**P < 0.01,n=10
表2 灵芝孢子油对 H22荷瘤小鼠化疗的减毒作用(略)
与空白组比较,P< 0.05, P< 0.01;与豆油+Cy组比较,*P<0.05,**P < 0.01
3.2 灵芝孢子油对正常小鼠、H22荷瘤小鼠60Co放疗的减毒作用结果如表3、4所示,与空白组相比,60Co可显著降低正常小鼠和荷瘤小鼠外周血 WBC、骨髓有核细胞数、胸腺系数和脾脏系数(P<0.01)。与60Co模型组相比,灵芝孢子油中高剂量组及云芝胞内糖肽组均可明显抑制正常及荷瘤小鼠脾脏系数、胸腺系数、WBC数和骨髓有核细胞数的下降(P<0.01,P<0.05)。
表3 灵芝孢子油对正常小鼠60Co放疗的减毒作用(略)
与空白组比较,P< 0.05, P< 0.01;与豆油+60Co组比较,*P< 0.05,**P< 0.01,n=10
表4 灵芝孢子油对H22荷瘤小鼠60Co放疗的减毒作用(略)
与空白组比较,P< 0.05, P< 0.01;与豆油+60Co组比较,* P< 0.05,**P< 0.01,n=10
3.3 灵芝孢子油对 H22荷瘤小鼠网状内皮细胞吞噬功能的影响结果如表5所示。与豆油对照组相比,灵芝孢子油各剂量组及云芝胞内糖肽组均可显著提高H22荷瘤小鼠的廓清指数 K及吞噬系数 α值(P< 0.01或P< 0.05)。表明灵芝孢子油可显著提高小鼠网状内皮细胞的吞噬功能。
3.4 灵芝孢子油对 H22荷瘤小鼠体液免疫功能的影响结果如表6所示,与豆油对照组相比,灵芝孢子油中高剂量组及云芝胞内糖肽组可显著提高 H22荷瘤小鼠血清半数溶血值 (HC50)(P<0.01或P<0.05)。表明灵芝孢子油可显著提高 H22荷瘤小鼠的体液免疫功能。
表5 灵芝孢子油对 H22荷瘤小鼠网状内皮细胞吞噬功能的影响(略)
*P<0.05,**P<0.01 与豆油对照组比较.n=10
4 讨论
当前对恶性肿瘤的治疗是采用多种治疗手段联合应用的综合治疗模式,而放疗、化疗作为综合治疗中的重要手段,对肿瘤细胞缺乏特异性选择,在杀伤癌细胞的同时也损伤了正常细胞,致使机体免疫功能下降,骨髓造血功能明显受到抑制,引起外周 WBC下降,从而影响治疗效果。肿瘤患者的免疫功能不仅与肿瘤的发生、发展密切相关,而且对判断肿瘤患者转归和预后都有重要的参考价值[2,3]。肿瘤的存在会抑制机体的细胞免疫及体液免疫功能,而放化疗治疗又会进一步加重机体的免疫抑制[4]。因此在抗肿瘤治疗中,提高机体的免疫力、降低放化疗的毒性,成为抗肿瘤治疗的一个主要方面。近年来,中药因其良好的免疫调节、减毒抗癌作用越来越引起人们的重视,从中药中寻找抗肿瘤辅助治疗的生物反应调节剂已成为当今研究的热点[4,5]。灵 芝是一味在中医中沿用2000多年的中药,是祖国中医药宝库中的珍品,素有“仙草”之誉。古今药理与临床研究均证明,灵芝确有防病治病、扶正固本、延年益寿之功效,广泛用于许多慢性病的治疗,如癌症、肝炎、II型糖尿病、高血压等[7]。近年来,对灵芝属真菌的化学成分及临床作用的研究颇多,对灵芝的生殖细胞--孢子的药用价值研究也日益加强。现有的研究证明,灵芝孢子具有显著的防癌、抗肿瘤作用,其功效是灵芝子实体的60~70 倍。灵芝孢子的功效成分主要有三萜类、多糖类、有机锗等[8]。灵芝孢子油是灵芝孢子的脂溶性物质,包括全部三萜类、核苷及有机锗,与部分水溶性物质(多糖类),经浓缩后的集合,具有极佳的抗肿瘤生物活性。 本实验所用的灵芝孢子油是利用破壁灵芝孢子粉由超临界 CO2流体萃取合超声强化提取,经进一步浓缩富集而得,其三萜类活性成分的含量高于传统的提取方法。前期体内外实验均已证实,此种方法提取的灵芝孢子油对多种肿瘤均有明显的抑制作用。本实验研究表明,灵芝孢子油中高剂量组可显著提高H22荷瘤小鼠的免疫吞噬系数 α及和血清半数溶血值,说明其对小鼠网状内皮系统(RES)吞噬功能及其体液免疫功能均有明显的提高作用。灵芝孢子油对 Cy和 60Co照射造成的正常或H22荷瘤小鼠外周血 WBC、骨髓有核细胞数的减少、免疫器官萎缩等毒性反应,虽然不能使其完全恢复到正常水平,但均有明显保护作用。由此证明灵芝孢子油具有抗癌、扶正、减低放化疗毒性之功效,提示其在临床抗肿瘤治疗中可起到扶正减毒、改善患者生活质量的作用,有良好的应用前景和研究价值。对于灵芝孢子油提高免疫及对 Cy和60Co照射减毒作用的内在机理,还有待于进一步研究。
参考文献
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篇6
这一学期里,我担任三年级班主任和语文教学,我班在学校领导的统一组织下,在任课教师的大力支持和配合下,各项工作顺利开展,学习、生活等方面都取得较突出的成绩。现将本学期的工作总结如下:
一、加强对学生的思想道德工作,培养学生良好的品质,净化学生的心灵,努力培养又红又专的合格人才。为了配合学校少先队大队部和处的工作,我们班积极开展了许多有益于学生身心健康发展的活动。例如,“积极参与“‘为中华之崛起而读书’的主题班会”、“‘美化校园、保护环境从我做起’的实践活动”、法制教育主题班会等。同时,我也经常利用班会课对学生进行身心教育,帮助学生澄清思想上的模糊认识,及时对学生进行针对性的教育。
二、加强班级管理,培养优秀的学风、班风,深入全面地了解学生,努力培养“求知、砺志、活泼、团结”的班集体。在这个学期里,一方面,我慎重地选拔和培养班委成员:第一。大力表扬班委优点,宣传他们的先进事迹,帮助小班委树立威信;第二。在鼓励班委大胆工作,指点他们工作方法的同时,更严格要求班委个人在知识、能力上取得更大进步,在纪律上以身作则,力求从各方面给全班起到模范带头作用,亦即以点带面;第三。培养班委团结协作的精神,通过班委这个小集体建立正确、健全的舆论,带动整个班集体开展批评与自我批评,形成集体的组织性、纪律性和进取心,亦即以面带面。另一方面,我有效地利用好每周一的班会课开展一些专题性的活动,扎实有效地加强一个学生的常规训练。训练的内容包括《小学生守则》和《小学生日常行为规范》要求的常规、课堂常规、集会和出操常规、卫生常规、劳动常规等等诸多方面。务必使每个学生具有服从集体,服从命令的思想,具有自我约束力,形成习惯,保证整个班集体随时表现出活而不乱,严而不死的良好班风班貌。
三、根据学校工作安排和本班实际情况,拟定了全班与小组在知识、能力、情感等方面的远、近期目标,让每一个学生明确到我们全班和小组正在努力奋斗的目标是什么,避免了盲目、低效地学习和生活,从而增强了集体的凝聚力和动力。同时积极抓好后进生的转化工作,尽可能创造条件和机会让后进生表现其优点和长处,使他们品尝到成功的欢乐和喜悦,努力帮助他们消除或减轻种种心理担忧,让他们认识到自己的位置和学习方向。
四、积极开展好文体活动,做好课间操、眼保健操,保护学生视力,增强学生的体质,提高学生的学习效率。三年级学生学习任务比较繁重,进行适当的体育活动不仅有利于学生身体素质的提高,而且也有利于学习效率的提高,每次活动我都亲临现场与学生一起活动并适当予以技术性的指导,这样不仅可以防止意外事故的发生,而且也可以加深与学生感情的交流。
篇7
[关键词] 手术室;内镜器械;辅助设备;清洗;消毒;保养
[中图分类号] R472 [文献标识码] C [文章编号] 1673-9701(2013)24-0122-02
随着医疗技术的发展,微创医疗技术也在不断发展和进步,手术室内镜的品种及数量也越来越多,包括腹腔镜、胸腔镜、宫腔镜、关节镜、鼻内镜等。器械质量优劣直接影响手术效果,而器械的清洗与保养直接关系到内镜手术的顺利进行[1]。内镜结构复杂、价格昂贵,内镜的清洗、消毒质量影响着医疗质量,与医院感染密切相关,因此,保证内镜的清洗、消毒质量尤为重要。我院手术室按照《内镜清洁消毒技术操作规范》执行清洗、消毒和保养工作,取得了良好的临床效果,现报道如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料
选取2012年1月~2013年1月我院腔镜手术1610例为实验组,2011年1月~12月腔镜手术1500例为对照组。两组腔镜手术包括:腹腔镜、胃镜、肠镜、纤维支气管镜、泌尿内镜、胸腔镜、宫腔镜、鼻内镜等。两组内镜种类比较,差异无统计学意义,具有可比性。
1.2 方法
对照组:采用传统常规方法对内镜进行清洗及消毒。清洗时清除管道中的血液、黏液及残留组织,洗净吹干后进行消毒灭菌。用2%戊二醛消毒,2%戊二醛浸泡10 h可灭菌,消毒、灭菌后用无菌水冲洗。实验组:清洗消毒方法严格按照《内镜清洁消毒技术操作规范》步骤进行,具体如下:
1.2.1 内镜的清洗:①初洗:手术结束后的内镜器械及辅助设备立即放入清洗槽内,用流动水彻底冲洗,管腔用高压水枪冲洗。对可拆卸的器械,清洗前先拆开零部件,打开各个阀门,用毛刷刷洗钳夹部位,最后用纯水涮洗全部器械。初步去除器械表面和管腔内的残留组织物和血块。②酶洗:清洗后的器械、辅助设备放入浓度为1∶100~1∶150多酶液的超声机中,管腔内灌满酶液,清洗5~10 min,发挥酶的催化作用,使器械中残留血液、体液及组织残留物溶解、松动;然后利用超声振动直接作用于被溶解的血液、体液等污垢,将其松解、粉碎成小颗粒[2]。再次在流动水中漂洗器械,用高压水枪或注射器吸取蒸馏水冲洗干净各管道,洗去器械表面多余的酶液及脱落的污物。③上油:器械擦干后,浸泡在器械油中。剂为水溶性,较好的与人体组织相容。保持器械表面光泽及关节部位易于松动,延长使用寿命[3]。捞起后甩尽表面液体,用高压气枪吹干器械表面和管腔,用烘干箱干燥30 min,检查安装好准备消毒灭菌。
1.2.2 内镜的消毒 实践证明,使用2%碱性戊二醛浸泡对内镜器械进行消毒灭菌,灭菌效果安全、可靠性高[4]。采用2%碱性戊二醛对内镜器械及其辅助设备进行消毒,腔镜器械所有关节完全浸泡于戊二醛中,管腔内充分注入消毒液。灭菌指杀灭或清除一切微生物。按内镜器械性质选择灭菌方法。耐高温的金属器械按照腔镜器械厂家说明书对内镜器械进行高压蒸汽灭菌。不能耐高压灭菌的器械如电凝摄像头、等离子刀等用环氧乙烷气体灭菌,内镜器械附件如光源线、单极线、电刀导线等,清水擦洗,用75°酒精擦洗后干燥处理,低温灭菌器灭菌。
1.2.3 内镜的保养 内镜器械轻拿轻放,不能碰撞、强烈摩擦、受压等;各类钳子要经常检查,观察钳端是否闭合良好,关节处要定期检查、上油、活动关节;用无水酒精脱脂棉球擦拭镜面,防止摩擦刮伤镜面,影响手术视野清晰;器械的尖端或锐利处应套上橡皮保护套,以免损伤医护人员;器械上的阀门要定期拆卸,进行清洁、上油,保持阀门灵活;各种密封圈、橡皮帽如有老化、裂口等迹象,要及时更换,以免影响手术。内镜操作手术结束后,先关闭各器械开关,再关闭电源开关,达到保护仪器,延长使用寿命的目的。
1.3 检测方法与结果判断
用隐血实验检测清洗消毒后的内镜是否合格。先用白纱布擦拭内镜器械,然后再在白纱布上滴上一滴A试剂,等到试剂全部渗入纱布后,在滴一滴B试剂,在2 min内判读完毕。在检测时间内颜色无任何改变者即为合格,变为淡紫色、紫色或是深紫蓝色即为不合格。
1.4 统计学分析
本次实验数据采用SPSS 16.0软件进行统计学分析,计数资料采用χ2检验,以P < 0.05为差异有统计学意义。
2 结果
两组内镜消毒合格率及医源性感染率比较见表1。对照组内镜消毒合格率为85.2%,实验组内镜消毒合格率为96.2%,两组内镜清洗、消毒合格率比较,χ2=113.82,P = 0.001
3 讨论
3.1 内镜器械清洗的重要性
内镜是医学中很重要的诊疗工具,临床上应用广泛,但内镜器械制作材料特殊、结构复杂、精密度高,术中血液、黏液附着在内镜器械管腔内表面,清洗不彻底将导致消毒灭菌失败,因为传统的理化灭菌方式不能有效去除血迹和微粒等,并且内镜器械一般不宜进行高温消毒,且残存在手术器械上的有机物妨碍灭菌介质穿透,影响灭菌效果,清洗不彻底可使器械管腔内的细菌病毒继续存活,从而易引发院内感染[5]。
3.2 强化硬件及软件功能
结合我院具体情况,对内镜室进行合理布局,配备一般清洗设备及专用清洗机,清洗消毒槽、超声清洗机、高压水枪、通风设备等为内镜清洗创造充足的条件[6]。完善医院制度管理,制定内镜消毒操作规范,通过对比分析,《内镜清洁消毒技术操作规范》改良措施如下:彻底清洗器械及辅助用品的污渍是保证消毒灭菌成功的关键,清洗过程中拆卸便于拆卸的各个部件,不能因为有消毒、灭菌而忽视清洗环节。保证内镜清洗、消毒、灭菌质量,能有效减少医源性感染和交叉感染。特别是有些内镜管道细长,长期不彻底清洗,内镜表面形成一种生物膜,常规的内镜清洗步骤不可能将它去除,从而造成灭菌失败,引起交叉感染[7]。同时,清洗时加酶能有效分解内镜表面及内部的各种有机物,增加洁净度[8]。所有手术器械、医疗用品及接触患者的用品都要一用一灭菌,供应中心人员要定期学习有关内镜清洗、消毒、灭菌及保养的相关知识,不断加强对新器械的学习,掌握新知识、新技能[9]。转变手术室器械管理措施,使护士由过去的被动接受仪器与器械管理,转变为参加到管理中去成为管理者中的一员,大大提高手术室内镜器械的消毒,降低器械的耗损[10]。
本项结果显示,严格按照国家卫生部规定的清洗、消毒、灭菌及保养原则操作,能保证有效的消毒灭菌效果,提高内镜清洗、消毒、灭菌的合格率,降低医院感染的风险,延长内镜的使用寿命,有利于外科腔镜手术顺利进行和发展,使医院取得良好的效益。
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篇8
[关键词]京大戟;醋制;大鼠小肠隐窝上皮细胞(IEC-6); 高内涵细胞成像系统(HCS)
京大戟为大戟科植物大戟Euphorbia pekinensis Rupr.的干燥根,用于治疗水肿胀满,胸腹积水,痰饮积聚,气逆喘咳,二便不利,痈肿疮毒等[1]。但京大戟对口腔黏膜、咽喉部以及胃肠黏膜有严重的刺激性,可引起呼吸衰竭[2],以及细胞毒作用[3-4],不仅严重制约着临床的用药安全,也为新药创制带来了困难。中医传统采用醋制来降低京大戟的毒性,缓和其泻下作用[5],但对于醋制降低京大戟毒性作用的物质基础及作用机制,国内外迄今尚未见明确报道。前期本课题组已完成京大戟细胞毒性部位的筛选,确定京大戟的细胞毒性部位为石油醚部位和乙酸乙酯部位,其中石油醚部位的毒性更强[6]。因此,本研究以体外培养的大鼠小肠隐窝上皮细胞IEC-6为研究对象,拟从石油醚部位对大鼠小肠隐窝上皮细胞IEC-6细胞活性等方面探讨醋制降低京大戟胃肠道毒性的作用机制,以期为京大戟醋制减毒的物质基础与作用机制提供参考。
1 材料
1.1 药材 京大戟饮片购于安徽亳州药材市场,经南京中医药大学乐巍副教授鉴定为大戟科植物京大戟E. pekinensis的块根。
1.2 供试品溶液的制备 京大戟生品(JDJ-1):取京大戟饮片100 g,粉碎,打粉备用(过2号筛);京大戟醋品(JDJ-2):按照《中国药典》2010年版,取净京大戟100 g加食醋30 g,加水稀释至200 mL(浸没药材),焖润2 h,文火煮沸至醋吸净,切开无白心,取出,凉至六、七成干,减压干燥(40 ℃)8 h,粉碎,打粉备用(过2号筛)。
称取上述粗粉各50 g以10倍量乙醇回流提取3次,每次2 h,合并提取液,50 ℃减压回收溶剂至近干,继用石油醚萃取至无色,合并萃取液,50 ℃减压回收溶剂至近干,得京大戟生品和醋品浸膏(得率分别为4.3%,4.1%)。精密称取上述浸膏,用DMSO溶解,再用无血清的培养液稀释(DMSO终浓度小于0.5%),使各样品均有50,100,200,400,800 mg・L-15个质量浓度。配好的各组以0.22 μm滤器推滤除菌,即得。
1.3 细胞株与试剂 大鼠小肠隐窝上皮细胞IEC-6(购自ATCC)。DMEM(Gibco,批号12100-038);胎牛血清(Wisent,货号085-150);胰蛋白酶(Bio-sharp,批号27250-018);磷酸缓冲盐(PBS)(博士微生物工程有限公司,批号AR0030);MTT(solarbio,批号M8180);DMSO(分析纯,国药集团化学试剂有限公司)。
1.4 仪器 AY220电子分析天平(日本岛津,精度为万分之一);超净工作台(苏州净化设备有限公司);电热恒温水浴箱(上海精宏实验设备有限公司);JEM-1200EX透射电子显微镜(日本JEOL公司);VIT 700高内涵细胞成像分析系统(美国ThermoFisher Scientific公司);微量高速离心机(美国LabNet公司);Powerwave X340全波长酶标仪(美国Bio-Tek公司);CO2恒温培养箱(美国NAPCO公司);KQ-500B超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司);MDF-382ECM超低温冰箱(日本SANYO);TGL-16M高速台式冷冻离心机(长沙湘仪离心机仪器有限公司);WH-90A微型漩涡混悬器(上海振荣科学仪器有限公司);脱色摇床(南京大学普阳科学仪器研究所)。
2 方法
篇9
【关键词】 尿毒症
【摘要】 目的 本文采用甲基纤维素细胞培养的方法,分析尿毒症患者血清对小鼠骨髓红系祖细胞集落形成的影响,初步探讨红细胞生成抑制因子的存在。方法 选择12例尿毒症肾性贫血未透析患者为试验组,另选正常健康体检者12例为正常对照组,将实验组、正常对照组血清分别稀释成不同终浓度,采用甲基纤维素细胞培养的方法对小鼠骨髓细胞进行培养,对比不同浓度血清组红系集落形成单位(CFU-E)、红系爆式形成单位(BFU-E)的集落数。结果 在实验组中,与血清浓度为0的浓度组相比,与各浓度组血清共同培养的小鼠骨髓CFU-E和BFU-E的集落数均明显减少,且随血清浓度的增加,小鼠骨髓CFU-E和BFU-E的集落数逐渐减少,各浓度组间差异有显著性(P<0.05)。结论 尿毒症患者血清抑制小鼠骨髓红系祖细胞集落形成,随患者血清浓度的增加,抑制作用增强,具有剂量依赖性。
【关键词】 尿毒症;贫血;红系祖细胞;集落形成单位测定
【Abstract】 Objective To investigate the existence of the erythropoiesis inhibitors (EI).Methods The present study included twelve undialyzed ESRD patients with anemia.The sera from the uremic patients were added to CFU-E and BFU-E culture in the concentrations ranging from 1.25% to 5%.In vitro CFU-E and BFU-E growth in the presence of sera from ESRD patients was compared with in the presence normal human subjects with the use of normal mice bone marrows.Results The effects of the sera from uremic patients on CFU-E and BFU-E colony growth in concentrations ranging from 1.25% to 5% were investigated to be dose-dependent.The effect increased with the concentrations increasing of the sera(P<0.05).There were not significant inhibitory effect on the CFU-E and BFU-E growth of mice bone marrow in vitro from sera of the normal subjects.Conclusion The erythropoiesis inhibitors exist in uremic sera which has a dose-dependent inhibitive effects on the growth CFU-E and BFU-E of normal mice bone marrow cells.
【Key words】 uremia;anemia;erythroid progenitor cell;colony-forming units assay
贫血是尿毒症常见的并发症之一,严重影响患者的生活质量和疾病的预后。红细胞生成素(EPO)缺乏是尿毒症贫血的主要原因,但应用人基因重组红细胞生成素(rHu-EPO)治疗仍有20%~30%左右的患者疗效不佳[1]。目前的研究显示,一些尿毒症患者血EPO浓度并不下降,而是正常甚至高于正常,提示尚有其他重要因子参与肾性贫血的机制[2,3]。有研究表明,尿毒症患者血清能抑制骨髓红系祖细胞生长,充分透析增加毒素的消除,可改善尿毒症的贫血、提高rHu-EPO的疗效,所以提出了尿毒症某些毒素可能是红细胞生成抑制因子。但不同的研究小组获得的实验结果也存在争议。因此,近年来有关尿毒症红细胞生成抑制因子是否存在又引起学者们的关注,但目前仍没有达成共识。本文通过观察尿毒症患者血清对小鼠骨髓红系祖细胞集落形成的影响,初步探讨红细胞生成抑制因子是否存在。
1 对象与方法
1.1 实验对象 选择12例尿毒症肾性贫血未透析患者为实验组,原发病为慢性肾炎8例、高血压肾动脉硬化2例、慢性肾盂肾炎2例,其中男5例,女7例。患者平均年龄(50±12)岁,Cr范围8.2~14.7mg/dl,BUN范围83~135mg/dl。入选病例均无慢性炎症(C-反应蛋白水平正常),无血液系统疾病或肿瘤,无铁缺乏(血清铁蛋白>100ng/ml)。患者在实验前均无输血史,未使用过rHu-EPO、铁剂,实验前一个月未使用过ACEI。另选正常健康体检者12例设为对照组,男6例,女6例,平均年龄(48±14)岁。
1.2 实验方法
1.2.1 标本采集与保存 实验组及对照组受试者均于清晨空腹抽取静脉血,室温静置30min后离心,分离血清,56℃加热灭活30min,-80℃冰箱保存备用。
1.2.2 小鼠骨髓细胞红系集落形成单位(CFU-E)、红系爆式形成单位(BFU-E)的培养 取8~10周Bal-c小鼠(均由军事医学科学院实验动物研究所提供)。小鼠击头处死,75%酒精浸泡20min。立即无菌取出双侧骨髓,用IMDM培养液冲出全部骨髓细胞,台盼蓝染色进行细胞计数,并用IMDM培养液调整细胞密度为1×105/0.2ml(活细胞率>95%)。
1.2.3 培养体系和条件 2.7%甲基纤维素,IMDM培养液,10-4mol/L巯基乙醇,15%小牛血清,3%谷氨酰胺,EPO(2u/0.2ml),CSF(50ng/ml),IL-3(10ng/ml)。将混匀的体系分别加到两个30mm培养皿中,加盖后放入37℃、饱和湿度的5%CO2培养箱内。培养第3天,联苯胺染色后倒置显微镜下计数含8个以上染色阳性的细胞集落为CFU-E。培养第7天,计数含50个以上染色阳性的细胞集落为BFU-E。
篇10
摘要:目的 观察热毒宁注射液对病毒性心肌炎(VMC)小鼠血浆SOD活性及MDA含量的影响,探讨热毒宁注射液对病毒性心肌炎小鼠的抗炎保护作用。方法 40只雄性BALB/c小鼠随机分为四组:空白组(A组)、模型组(B组)、更昔洛韦注射液组(C组)、热毒宁注射液组(D组),每组10只。A组腹腔注射0.5 ml生理盐水,连续注射10 d;B、C、D各组首先腹腔注射巨细胞病毒(CMV)悬液0.1 ml,0.5 min后分别注射生理盐水、更昔洛韦注射液、热毒宁注射液各0.4 ml,连续治疗10 d;10 d后采集血液,采用采用黄嘌呤氧化酶法、硫代巴比妥酸法检测血清SOD活性及MDA含量。结果 与B组相比,C、D组小鼠的SOD活性显著升高,MDA含量明显降低(P
关键词:病毒性心肌炎;热毒宁注射液;SOD;MDA;小鼠
心肌炎主要是由病毒感染、化学物质损伤或自身免疫引起的心肌局灶性或弥漫性炎性病变。心内膜穿刺的病理检查结果表明,大约60%心肌炎患者的心肌细胞病毒检测为阳性[1],这种因病毒感染心肌细胞而引起的心肌炎称为病毒性心肌炎。大约有20%病毒性心肌炎患者逐渐演变为扩张型心肌病,其致残致死率高[2]。能引发心肌炎的病毒较多,其中以柯萨奇病毒感染最为常见,CMV也是侵犯心肌的重要病毒之一。近年来,病毒性心肌炎患者发病率逐年上升,但具有明确疗效的治疗药物却为数不多。本课题研究了热毒宁注射液对巨细胞病毒性心肌炎小鼠的抗炎保护作用。
1 资料与方法
1.1实验病毒、动物 CMV由徐州医学院附属医院急诊实验室赠予,40只6~8w龄雄性BALB/c健康小鼠,体重25 g左右,购自湖北医药学院实验动物中心。
1.2实验试剂、药物SOD及MDA测定试剂盒均购自南京建成生物工程研究所,更昔洛韦注射液购自湖北科益药业有限公司,热毒宁注射液由连云港康缘药业有限公司生产。
1.3动物分组、取材 将40只6w龄雄性BALB/c健康小鼠随机分为四组:空白组(A组)、模型组(B组)、更昔洛韦注射液组(C组)、热毒宁注射液组(D组),每组10只。A组腹腔注射0.5 ml生理盐水,连续注射10 d;B、C、D各组首先腹腔注射10-4LogTCID50CMV悬液0.1 ml[3],0.5 min后分别注射生理盐水、更昔洛韦注射液、热毒宁注射液各0.4 ml,连续治疗10d; 10 d后眼球摘除取血法采集血液约1.0 ml,离心后,-20℃冰箱中保存,以检测SOD活性及MDA含量。
1.4血清SOD及MDA含量检测 按照SOD及MDA试剂盒说明书步骤进行操作,检测SOD及MDA含量。
1.5统计学处理 计量资料以均数±标准差(x±s)表示,采用SPSS13.0软件处理数据。多组定量资料间的比较进行方差齐性检验,若方差齐采用单因素方差分析,若方差不齐采用Dunnett's T3(3)检验。单因素方差分析中的两两比较采用SNK法检验,检验水准为α=0.05,P
2 结果
与模型组相比,热毒宁组、更昔洛韦组SOD活性显著升高,MDA含量明显降低(P0.05)。见表1。
3 讨论
心肌炎是一种弥漫性或局限性的心肌炎性病变,其详细发病机制尚不清楚,可能与病毒本身对心肌的直接损伤及其引起的免疫反应有关[4],目前缺乏特效的病毒根治方法。热毒宁注射液是复方中草药注射剂,有效成分为青蒿、金银花、栀子,具有解热、抗病毒、抗细菌、增加免疫等药理作用。现代药理学研究表明,青蒿含倍半萜内酯、黄酮类、青蒿酮,具有抗病毒、解热、抗炎、抗氧化、镇痛等作用。
VMC的发生与脂质过氧化反应增强有关,VMC时受损的心肌细胞产生的氧自由基破坏了原来的动态平衡,引发了脂质过氧化反应,而氧自由基的清除依赖抗氧化酶系的作用[5]。SOD是抗氧化酶系中的主要抗氧化酶,其活性高则抗氧化作用强。MDA是脂质过氧化反应的中间产物,其含量多少体现了氧化损伤的程度。
本研究结果显示,热毒宁注射液组小鼠SOD活性升高,MDA含量降低,但与更昔洛韦组无明显差别,表明热毒宁注射液具有抗氧化作用,其可使VMC小鼠的SOD活性升高,清除过表达的氧自由基,改善动态失衡,减少脂质过氧化反应,从而减少中间产物MDA含量抑制炎症反应。为临床热毒宁注射液治疗病毒性心肌炎提供了实验依据,但热毒宁注射液治疗病毒性心肌炎的具体作用靶点尚有待于进一步研究。
参考文献:
[1]Luo H , Wong J , Wong B .Protein degradation systems in viral myocarditis leading to dilated cardiomyopathy[J].Cardiovascular Research, 2010, 85(2): 347-356.
[2]Olimulder MA, Van Es J, Galjee MA.The importance of cardiac MRI as a diagnostic tool in viral myocarditis induced cardiomyopathy[J]. Netherlands Heart Journal, 2009, 17(12): 481-486.
[3]WangYX, Da Cunba V, MartinMcNuhy B. Inhibition of Rho-kinase by fasudil attenuated Angiotensin II induced cardiac hypertrophy in apolipoprotein E deficient mice[J].Eur J Pharmacol, 2005, 512(223):215-222.