火星救母记范文

导语：如何才能写好一篇火星救母记，这就需要搜集整理更多的资料和文献，欢迎阅读由公务员之家整理的十篇范文，供你借鉴。

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目的 研究水母毒素的提取及其溶血活性的影响因素。方法通过缓冲溶液浸取、超声波细胞破碎等操作从水母触手的刺丝囊中提取毒素，采用分光光度法对水母毒素的溶血活性进行测定，并研究了温度、浓度和二价金属离子等因素对毒素溶血活性的影响。结果水母毒素的溶血活性对温度敏感，随着浓度的提高而增大，并且依赖于Ca2+，Mg2+等二价金属离子的存在。 结论水母毒素具有较强的溶血活性，但不稳定。

【关键词】 水母毒素；提取；溶血活性

Abstract:ObjectiveTo study the extraction and the affecting factors to haemolytic activity of jellyfish venom.MethodsJellyfish venom was extracted from the oral arms with tentacles through such operations as soaking in buffer solution and disrupting cell in supersonic wave. Activity of the venom to chicken red blood cells was detected by spectrophotometric method. The effects of factors such as temperature， concentration， palent metal cations on the haemolytic activity were studied. ResultsThe haemolytic activity was temperature-sensitive， and improved with the concentration increase. The presence of Ca2+，Mg2+ wass necessary for haemolytic activity.ConclusionThe haemolytic activity of jellyfish venom is relatively strong， but it is unstable.

Key words:Jellyfish venom; Extraction; Haemolytic activity

生物毒素是生物活性最高、毒性最大的一类化学物质，对探索生命运动过程和发展新药均有重要价值。药物是指对失调的机体呈现有益作用的化学物质。药物的药理活性和毒副作用主要取决于药物分子的化学结构。化学结构与药物效应之间的关系（即构效关系）是药物研究的重要依据。海洋生物毒素所特有的化学结构使其极有可能成为特异的高活性、高药效的先导化合物，以具有确定药理效用的海洋毒素为先导化合物，对先导化合物进行结构或性能的改造，寻求新的疗效更好的药物是当前新药研究的重要方向之一［1，2］。

水母属于腔肠动物门，是一个重要的海洋浮游生物类群，它种类多、数量大，分布广泛，我省黄海领域就具有丰富的水母资源，主要的水母品种有海蛰、海月水母和多管水母等。对于具有食用价值的海蛰已经于2004年实现了全人工育苗养殖，如江苏连云港市已经在赣榆、宿城、燕尾港等地建立了养殖基地。水母在食用及药用上都具有研究、开发的价值，自古以来水母用于传统中药，有清热解毒、软坚散结、降压、抑菌、抗衰老的功效，可用于治疗高血压病、气管炎、哮喘、胃溃疡、中枢神经系统疾病等，并可作为神经组织的活性物质和组织胺释放剂。水母的触手上分布着腔肠动物所特有的刺丝囊，其中含有大量的毒素成分。毒素蛋白是水母的主要活性成分之一，它是结构新颖独特的肽类毒素，具有多种生物活性，如溶血性、酶活性、神经毒性、皮肤坏死、肌肉毒性、肝脏毒性以及心脏毒性等［3，4］。

溶血毒素(Hemolysin)是指多由病原微生物所产生的，能导致机体红细胞及其他有核细胞裂解的毒素类物质，它存在于环节动物、节肢动物、软体动物、棘皮动物等动物的血清或体液中，可以单独作为调理因子或通过蛋白水解酶发挥作用，其活性大小通过溶解（水解）脊椎动物的血细胞表示，最终的溶解效应被称作溶血活性。目前溶血毒素研究以微生物为主，无脊椎动物溶血毒素研究报道非常少，有关水母毒素溶血性能的研究报道很少［5］。本实验通过缓冲溶液浸取、超声波细胞破碎等技术从水母触手的刺丝囊中提取水母毒素，采用分光光度法对其溶血活性进行测定，并研究温度、pH 值、金属离子等理化因子对其溶血活性的影响。

1 材料与方法

1.1 水母的采集

水母于200607采集于江苏燕尾港附近海域的人工养殖场，扇形带刺丝囊的触手沿水母口腕人工切除分放在食品级聚乙烯塑料袋中，扎好封口后，立即于-20℃冷冻保存备用。

1.2 水母毒素的提取及浓度测定

取一定重量的冷冻的水母触手，在冷冻状态下放入浸取剂（0.01 mol/L，pH 6.0的磷酸缓冲液）中，在保持温度低于4℃的条件下浸泡3 h，匀浆10 min后，超声波破碎，超声波功率200 W、总工作时间2 min、工作/间隙时间15/30S。破碎后的物料于4℃、13 000 r/min的条件下高速冷冻离心15 min，所得到的上清液即为水母毒素粗品。以牛血清白蛋白(BSA)作标准，在塑料器皿中用Bradford法(1976)测定水母毒素粗品中蛋白质的浓度C(mg/ ml)。

1.3 鸡红细胞悬液的制备

采集新鲜鸡血50 ml，2 000 r/ min离心5 min，取上层液体，以pH 7.4的磷酸盐缓冲溶液（含136.9 mmol/L NaCl，2.68 mmol/L KCl，10.14 mmol/L Na2HPO4，1.76 mmol/L KH2PO4）离心洗涤3次，用磷酸盐缓冲溶液配成体积分数为1%的鸡红细胞悬液，4℃冰箱保存备用。

1. 4 水母毒素溶血活性的测定方法

取2 ml体积分数为1%的鸡红细胞悬液与一定量的水母毒素混合均匀，37℃保温30 min，间歇振荡。在对照管中加入2 ml体积分数为1%的鸡红细胞悬液和0. 5 ml磷酸盐缓冲溶液，与实验管同时保温，取出后立即冰浴以终止反应，经2 000 r/min 离心5 min后获得上清液。以对照管上清液作空白，于540 nm处测吸光度(A)，A值每增加0.001定义为1个溶血活性单位（u）。所测定必须重复3次，记录3次结果的平均值。

1.5 理化因素对水母毒素溶血活性的影响

1.5.1 浓度、温度对溶血活性的影响

在8支实验管中取一定量的水母毒素与2 ml体积分数为1%的鸡红细胞悬液混合均匀，使水母毒素的最终浓度分别为：0.02，0.05，0.1，0.2，0.5，0.8，1.0，1.2 μg/ml。将上述水母毒素实验管分别在4，25，37，45，60，100℃下恒温处理20 min后，按“1.4”的方法检测其对鸡红细胞的溶血活性。

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1.5.2 二价金属离子对溶血活性的影响

为研究二价金属离子对水母毒素溶血活性的影响，并排除其他离子的干扰，将水母毒素在4℃的缓冲溶液中透析4 h，透析缓冲溶液的组成为：0.01 mol/L，pH 6.0的磷酸缓冲液100 ml中加入1 g十二烷基硫酸钠和1 ml b-巯基乙醇。

取2 ml体积分数为1%的鸡红细胞悬液与0.5 ml透析过的水母毒素混合均匀放入9支实验管（1～9#），1～9#实验管中分别加入0. 1 ml的不同浓度的CaCl2、MgCl2、ZnCl2溶液，使二价金属离子的最终浓度分别为5，10，15 mmol/ L，10#实验管中加入2 ml鸡红细胞悬液和透析过的水母毒素、11#实验管中加入2 ml鸡红细胞悬液和未透析的水母毒素，对照管中加入0. 1 ml磷酸盐缓冲溶液作为空白对照，实验管和对照管同时在37℃处理30 min，检测溶血活性。所有实验管的水母毒素蛋白的最终含量都为0.5 μg/ml。

2 结果

2.1 温度、浓度对水母毒素溶血活性的影响

结果见表1。由实验结果可以看出，在实验浓度范围内，随着水母毒素浓度的提高，溶血活性增大。当浓度低于0.1 μg/ml，几乎没有活性；当浓度高于0.8 μg/ml，活性增大不显著。表1 不同浓度的水母毒素经不同温度预处理后的溶血活性浓度（略）

随着预处理温度的提高，水母毒素的溶血活性降低，预处理温度高于45℃时，溶血活性显著大幅度下降。预处理温度达到100℃时，毒素蛋白变性，溶血活性完全丧失。这反映水母毒素的溶血活性对热是非常不稳定的。

2.2 二价金属离子对溶血活性的影响

金属离子对溶血活性的影响实验结果见表2。结果显示，水母毒素透析后，溶血活性显著降低；添加CaCl2，MgCl2，ZnCl2后，溶血活性增大，并且随着二价金属离子浓度的提高，活性增强。说明水母毒素的溶血活性依赖于二价金属离子的存在，与类似的文献报道一致［5］。表2 不同浓度金属离子作用下的水母毒素溶血活性（略）

3 结论

水母毒素的溶血活性对温度敏感，当预处理温度高于25℃时，活性明显下降，100℃时完全失去活性。

水母毒素的溶血活性随着浓度的提高而增大，但当浓度高于0.8μg/ml，活性增大不显著。

水母毒素的溶血活性依赖于Ca2+、Mg2+等二价金属离子的存在，且在一定范围内随着二价金属离子浓度的提高，活性增强。

参考文献

［1］胡延春，贾艳，张乃生. 生物毒素的应用研究［J］.生物技术通讯，2004，(1)：84.

［2］李光友，刘发义. 海洋生物活性物质的研究与开发技术［M］.青岛：青岛海洋大学出版社，2000.

［3］张奕强，许实波. 水母的化学和药理学研究概况［J］.中国海洋药物，1999，(1)：43.

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关键词：工程机械；销售；项目化管理；使用

项目管理作为一种能最有效地整合资源、提高企业快速响应能力的理念和技术，随着其多元化的发展，明显表现出了向一般管理领域渗透的趋势，进而成为企业管理学科中成长性最快的一个分支。项目管理对项目的实施提供了一种有力的组织形式，改善了对各种人力和资源利用的计划、组织、执行和控制的方法，对管理实践做出了重要的贡献。

一、大型工程机械销售活动规划和设计

（1）销售团队的组建。大型工程机械销售运用项目化管理方式最明显的特点就是由项目团队负责所有产品的销售。销售不单单只涉及企业销售以及市场部门等相关工作，还需要由技术部门以及生产，还有可能涉及财务部门等等，这些职能部门中的所有员工都需要参与到销售项目的全过程。组建项目管理团队，最为关键的是确定项目经理人选，并且明确项目经理的职责是对项目的计划以及组织，还有控制。

（2）销售项目启动会议。在销售项目启动之前，应该把和项目有关的利益相关者都集中到一起开展会议，有利于澄清和项目相关概念的内涵，并且获得大家的一致认可。落实各个项目利益相关者的责任以及角色，并且提高他们对于整个项目的兑现程度。实施项目销售的过程中，应该启动会议，主要由副总经理负责，并且由销售总监召集相关部门的负责任，还有项目销售团队的所有成员参加。会议的内容大致是介绍销售项目的背景以及立项评估情况，并且进一步明确企业的销售目标，进一步说明创建项目团队进行销售的具体管理方式。

（3）销售项目目标和计划。制定大型工程机械销售项目计划，并且进行目标分解以及任务确定，并且针对有可能出现的问题提出切实可行的解决问题的方案、措施以及手段，并且还应该按照大型工程机械销售的时间以及成本，还有质量要求做出明确规定，为整个销售项目制定一份有效的推进计划，制定一个虚拟团成员矩阵图。明确销售目标，并且签订销售合同。

二、大型工程机械销售项目的实施和控制

（1）项目沟通管理。由于大型工程机械销售的对象都有着非常复杂的组织结构，并且参与采购的成员以及组织，还有流程都是非常复杂的。因此，销售人员面临的更为复杂的沟通对象也是很常见的。作为大型工程机械的销售人员，应该和销售对象的利益相关部门做出有效沟通，主要包括了使用部门以及技术管理部门，还有采购主管部门以及财务部门等，各方面都应该做好沟通。

（2）客户跟进和控制。进行大型工程机械销售，这是一个漫长而又艰巨的任务。因此，需要对销售对象做好跟进和控制。在明确了客户的购买需求之前应该由销售总监对客户进行拜访，了解购买方的需求以及资金实力，还有现有设备的具体使用情况等等信息。当客户有了正式购买意向的时候应该进行官方正式地交流。设立不同的里程碑来对项目成员的销售努力方向进行引导。对整个项目销售开展例会等办法加强控制，尽量做到降低风险。

（3）招投标管理。大型工程机械销售过程中的招投标管理最为重要的是体现在制定报价方案以及招标小组进行前期干预方面。加强对招投标文件的管理，这是确保工程机械销售成功的基础工作。

（4）项目后评估和总结。即使最终获得了销售合同也应该对销售项目做出评估和总结。并且把评估报告以及成功案例以纸质文件的方式保存到企业知识库，这为企业的更进一步发展做出了各种参考依据，对于企业项目的销售也能够起到非常良好的借鉴意义。

三、总结

本文主要对大型工程机械销售管理当中通过引用现代项目管理的经验，开创了一种全新的销售管理模式，并且把现代项目管理当中的技术方法和手段都运用到工程机械销售任务以及活动当中，充分实现了对工程机械销售整个活动进行了计划及组织，还有协调及控制，并且最终实现了工程机械销售目标。

参考文献：

[1] 韩连胜.企业项目化管理范式：企业整体管理系统解决方案[M].机械工业出版社，2012.

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1、火星救母记（亏损1.3亿美元）

《火星救母记》是由西蒙·威尔斯执导的动画片，赛斯·格林、琼·库萨克等参与配音。该片于2011年3月11日在美国上映。该片讲述了小男孩麦洛先前对妈妈严厉的教育耿耿于怀，突然有一天妈妈被绑架到火星，麦洛踏上了救回妈妈的旅程的故事。

2、异星战场（亏损2亿美元）

《异星战场》（John Carter）是一部2012年上映的科幻电影，由迪士尼公司制作，安德鲁·斯坦顿执导，泰勒·克奇、琳恩·柯林斯、威廉·达福主演。电影改编自美国小说家埃德加·赖斯·巴勒斯于1917年发表的科幻小说《火星公主》（A Princess of Mars），于2012年3月9日美国上映。电影讲述了美国内战时，饱受创伤的前军官John Carter莫名其妙地被带到了火星，随后被迫卷入了当地居民间的一场空前冲突，其中就包括Tars Tarkas和魅力十足的公主Dejah Thoris。

3、独行侠（亏损1.9亿美元）

《独行侠》是华特迪士尼影片公司出品的一部3D影片。由戈尔·维宾斯基执导，杰瑞·布鲁克海默制片，约翰尼·德普、艾米·汉莫、露丝·威尔森和汤姆·威尔金森等联袂主演。影片于2013年7月3日在美国首映。影片讲述通过印第安人武士唐托（约翰尼·德普饰）之口，叙述了独行侠约翰·瑞德（艾米·汉莫饰）的故事。他们将带领观众登上逃亡列车，来一次史诗般的惊险之旅。

4、掠食城市（亏损1.7亿美元）

《掠食城市》是由美国环球影业出品的科幻动作片，由克里斯蒂安·瑞沃斯执导，罗伯特·席安、海拉·西尔玛、雨果·维文联合主演。该片根据菲利普·雷夫蒸汽朋克幻想小说改编，讲述了在核战毁掉多数人类社会文明的几千年之后，来自伦敦城下层的汤姆和逃犯Hester为自己的生存进行斗争的故事。该片于2019年1月18日在中国内地上映。

5、亚瑟王：斗兽争霸（亏损1.5亿美元）

《亚瑟王：斗兽争霸》是由美国华纳兄弟影片公司出品的奇幻动作片，由盖·里奇执导，查理·汉纳姆、阿斯特丽德·伯格斯-弗瑞斯贝、杰曼·翰苏、艾丹·吉伦、米克尔·佩斯勃兰特、裘德·洛、艾瑞克·巴纳联合主演。该片改编自亚瑟王的传说，讲述了亚瑟小时候父亲就惨遭叔叔伏提庚杀害并被篡夺王位，亚瑟在穷街陋巷之中长大成人，最终推翻暴君伏提庚并夺取王位的故事。该片于2017年5月12日在美国、中国内地同步上映。

6、割喉岛（亏损1.47亿美元）

《割喉岛》（Cutthroat Island）是米高梅公司1995年出品的一部场面震撼宏大、情节跌宕起伏的海盗题材电影。由兰尼·哈林执导，吉纳·戴维斯、马修·莫迪恩等主演。电影讲述，摩根继承父业当上海盗首领，并根据遗父留下的拉丁语藏宝图出海找寻宝藏。摩根找来懂拉丁语的神偷威廉一起出海，途中却惹来强盗多岳的争夺，一场斗智斗力的惊险夺宝战由此展开。

7、边城英烈传（1.46亿美元）

《阿拉莫之战》是2004年在美国上映的剧情片，由约翰·李·汉考克执导，丹尼斯·奎德、比利·鲍伯·松顿、杰森·帕特里克等主演。该片根据美国历史上最重大的战争之一——阿拉莫之战这一真实事件改编，讲述了1836年德州英雄奋起反抗强大的墨西哥政府军，志愿参加战役直至全数壮烈牺牲的故事。

8、明日世界（亏损1.4亿美元）

《明日世界》是华特·迪士尼影片公司于2015年出品的一部科幻电影，由布拉德·伯德执导，达蒙·林德洛夫担任编剧， 乔治·克鲁尼、休·劳瑞、布丽特妮·罗伯森、拉菲·卡西迪、蒂姆·麦格罗、凯瑟琳·哈恩、朱迪·格雷尔、托马斯·罗宾森、克里斯·鲍尔等联袂出演。影片定于2015年5月22日在美国上映。影片讲述曾被奉为天才少年如今却梦想破灭的弗兰克，与一个对科学充满好奇的少年凯西，共同参与到一项充满危险的任务，意图揭开一个被称作“明日世界”的地方的秘密 。

9、时间的皱折（亏损1.3亿美元）

《时间的皱折》是迪士尼影业出品的科幻冒险片，由阿娃·杜威内执导，马德琳·英格、珍妮弗·李编剧，斯托姆·里德、莱维·米勒、克里斯·派恩、瑞茜·威瑟斯彭、奥普拉·温弗瑞、敏迪·卡灵等主演，于2018年3月9日在美国上映。该片根据马德琳·英格所著的同名科幻小说改编，讲述了天体物理学家艾利克斯·莫里博士失踪后，梅格·莫里与弟弟查尔斯·华莱士及同学Calvin O‘Keefe得到三位神仙告诉的线索，一同穿越时间和空间的皱折，去寻找失踪的父亲的故事。

10、宾虚（亏损1.2亿美元）