情人节英语范文
时间:2023-03-19 08:51:20
导语:如何才能写好一篇情人节英语,这就需要搜集整理更多的资料和文献,欢迎阅读由公务员之家整理的十篇范文,供你借鉴。
篇1
英语的情人节祝福语一
1. you and me together, we can make magic.我们两个一起可以创造奇迹。
2. i can be myself when i am with you.和你在一起的时候我才是真正的自己。
3. you always say what i need to hear.你的话总是那么悦耳动听。
4. your love gives me the feeling that the best is still ahead.你的爱让我相信我们的未来会更好。
5. you're the one who holds the key to my heart.只有你,握着开启我心门的钥匙。
6. you have taught me the true meaning of love. love is, what you mean to me - and you mean everything.你教会了我爱的意义。爱就是你在我心中的分量——而你,就是一切。
7. i have had the time of my life and i owe it all to you.我生命中的美好时光全都归功于你。
8. your undying faith is what keeps the flame out of love alive.你永恒的信任让我们的爱火永不熄灭。
9. you are my theme for a dream.你是我梦的主旋律。
10. every time i look at you, my heart misses a beat.每次看着你,我的心都会漏跳一拍。
11.天下有情人终成眷属may i wish that all jacks shall have jills, all shall be well.
12.我想在情人节紧握你的手。亲爱的,情人节快乐。i want to hold your hand on valentine’s day. happy valentine’s day, sweetie.
13.情人节快乐:happy valentine's day!!
14.希望你的心上人早日出现。wish your mr.right/miss right will appear soon.
15.祝你们朝朝暮暮,缠缠绵绵到永久。may you two linger on each other every day and night till the end of time.
16.我俩的爱,一年比一年更坚定。亲爱的,情人节快乐。our love grows stronger with every passing year. happy valentine’s day, sweetie.
17.愿我俩的爱情永远不变!:may our love will last forever.
18.愿你们一起分享生命中的每一天,直到永远。may you two share every day of life together till forever.
19.一如既往的我,愿情人节快乐!as always ,i hope the sweetheart festival to be joyful!
20.你是我生命的全部。请说你愿意。情人节快乐,我亲爱的。you mean everything to me. please say yes.happy valentine’s day, honey!
22.你走出了我的梦,投入我的怀里。我不能让你走。情人节快乐。you stepped out of my dreams andsintosmy arms. i can’t let you go. happy valentine’s day.
23.送你一个吻,悄悄的说我很高兴你是我的。情人节快乐!sending you a kiss to say i’m glad that you are mine. happy the day!
24.真诚,不必隐藏,把所有的话语,都写在那小小的贺卡上。祝我新爱的人,情人节快乐。be genuine and conceal noting.i write every wiod i wand to say on this small card.i wish my honey a happy valentine’s day.
25.愿情人节带给我们丘比特之爱和暖融融的浪漫。情人节快乐!may this valentine bless us with the cupid of love and warmth of romance. happy valentine’s day honey!
26.我一直不相信有真正的“幸福”,直到不久以后,我邂逅了你。亲爱的,情人节快乐。i didn’t think that i could ever trust happiness. then i met you.happy valenti ne’s day, dear.
27、just because someone doesn‘t love you the way you want themto,doesn‘t mean they don‘t love you with alltheyhave.
爱你的人如果没有按你所希望的方式来爱你,那并不代表他们没有全心全意地爱你。
28、the worst way to miss someone is to be sitting center besidethemknowing you can‘t have them.
失去某人,最糟糕的莫过于,他近在身旁,却犹如远在天边。
29、to the world you may be one person, but to one person you maybethe world.
对于世界而言,你是一个人;但是对于某个人,你是他的整个世界。
30、i love to be the one you always think of,
the one you share the joys and hardships with,
i'll always love to be the one you love.
我多想做你时刻思念的人,
你倾诉梦想的人,
与你同甘共苦的人,
我总想做你所爱的人。
31、i have been sleeping all alone,
you have been staring in my dreams.
i want to kiss you, my baby,
i want to kiss you tonight.
我一直孤独入眠,
睡梦中你出现在我的眼前,
我要亲吻你,我的爱人,
今夜我就要亲吻你。
32、my love is like the grasses
hidden in the deep mountains.
though its abundance increase,
there is none that knows.
我的爱情 犹如青草,
藏在深山。
它郁郁葱葱,
却无人知晓。
33、oh, my love, my darling,
i have hungered for you touch a long time.
and time goes by so slowly, and time can do so much.
are you still mine?
i need your love,
god speed your love to me.
哦!我的爱,亲爱的,
我渴望你的抚摸已经好久了。
而时光难熬,它能改变许多事,
你还是我的吗?
我需要你的爱。
愿上帝赐给我你的爱。
34、i just can't believe the loveliness of loving you.
i just can't believe the one to love this feeling, too.
i now know how sweet a kiss could be.
like the summer sunshine,
your sweetness over me.
我简直不敢相信,爱你是如此地美好。
我不敢相信你也有如此感觉。
我现在才明白吻原是那么甜蜜,
就像夏日的阳光,
包含着你对我的柔情蜜意。
35、maybe god wants us to meet a few wrong people before meetingthecenter one, so that when we finally meet the person, we willknowhow to begrateful.
在遇到梦中人之前,上天也许会安排我们先遇到別的人;在我们终于遇见心仪的人时,便应当心存感激。
英语的情人节祝福语二
1.Every man is a poet when he is in love.
每个恋爱中的人都是诗人。
2.Love is a chord in life, not a solo.
爱是人生的和弦,而不是孤独的独奏曲。
3.Don't cry because it is over, smile because it happened.
不要因为结束而哭泣,微笑吧,为你的曾经拥有。
4.There will always be people who'll hurt you, so you need to continue trusting, just be careful.
生活中总会有人想伤害你,你仍然需要继续相信别人,只是小心点而已。
5.Maybe God wants us to meet a few wrong people before meeting the right one, so that when we finally meet the person, we will know how to be grateful.
在遇到梦中人之前,上天也许会安排我们先遇到别的人;在我们终于遇见心仪的人时,便应当心存感激。
6.Love is ever matter of comedies, and how and then of tragedies.
爱情常是喜剧,偶尔是悲剧。
7.Love triumphs over everthing. Love has no age, no limit and no death.
情战胜一切。爱情没有寿命,没有极限,不会死亡。
8.To the world you may be one person, but to one person you may be the world.
对于世界而言,你是一个人;但是对于某个人,你是他的整个世界。
9.Love is not only a sentiment but also an art.
爱情不仅仅是感情,它也是艺术。
10.Love and a cough cannot be hid.
爱情跟咳嗽一样是掩饰不了的。
11.Never stop smiling, not even when you're sad, some man fall in love with your smile.
永远都不要停止微笑,即使在你难过的时候,说不定有人会因为你的微笑而爱上你。
12.The worst way to miss someone is to be sitting right beside them knowing you can't have them.
失去某人,最糟糕的莫过于,他近在身旁,却犹如远在天边。
13.To love and to be loved is the greatest happiness of existence.
爱人和被人爱是人生最大的幸福。
14.True love's the gift which God has given to man alone beneath the heaven.
真爱是上帝单独赐予普天下芸芸众生的礼物。
篇2
The mature never ask the past, the wise never ask the present and the open-minded never ask the future.
爱,又何必多问?成熟的人不问过去,聪明的人不问现在,豁达的人不问未来。
The key for happiness is not to find a perfect person, but find someone and build a perfect relationship with him.
幸福的关键不在与找到一个完美的人,而在找到一个人,然后和他一起努力建立一个完美的关系。
If you leave me, please don't comfort me because each sewing has to meet stinging pain.
离开我就别安慰我,要知道每一次缝补也会遭遇穿刺的痛。
The most special feeling of human is the one-sided love. That's the unique.
You would never see a cat loving another cat in secret.
人类的感情最特别的就是单恋,那是绝无仅有的。你绝不会看到一只猫,会偷偷地喜欢上另一只猫。
Do you think that the sourest feeling is to be jealous? No, the sourest thing is that you have no rights to be jealous. That's the sourest thing.
你以为最酸的感觉是吃醋吗?不是的,最酸溜溜的感觉是没权吃醋,根本就轮不到你吃醋
The love world is big, which can hold hundreds of disappointments; the love world is small which is crowded even with three people inside.
原来爱情的世界很大,大到可以装下上百种委屈;原来爱情的世界很小,小到三个人就挤到窒息。
To the world you may be one person, but to one person you may be the world.
对于世界而言,你是一个人;但是对于某个人,你是他的整个世界。
Don‘t waste your time on a man/woman, who isn‘t willing to waste their time on you.
不要为那些不愿在你身上花费时间的人而浪费你的时间。
Don‘t try so hard, the best things come when you least expect them to.
不要着急,最好的总会在最不经意的时候出现。
Maybe God wants us to meet a few wrong people before meeting the right one, so that when we finally meet the person, we will know how to be grateful.
在遇到梦中人之前,上天也许会安排我们先遇到别的人;在我们终于遇见心仪的人时,便应当心存感激
It is better to have love and lost than never to have loved at all.
宁可曾经爱过而失败,也不要从来未曾有过一次爱。
Love me little, love me long.
爱不贵亲密,而贵长久。
To live in a world without you is more painful than any punishment. Do you know that no one can replace you in my heart?
生活在没有的你的世界,比任何一种惩罚都要痛苦,你知道吗,对我而言,你是任何人都无法取代的。
If love is a mountain, then if men go up, more women they will see while women will see fewer men.
如果爱情像座山,那么男人越往上走可以俯视的女人就越多,而女人越往上走可以仰视的男人就越少。
Love makes man grow up or sink down.
爱情,要么让人成熟,要么让人堕落。
The only thing you can do when you no longer have something is not to forget.
当你不能再拥有的时候,唯一可以做的就是令自己不要忘记。
Most of people are looking forward the crystal-like love—pure without any defect. However the truth is most people are having the glass-like love.
许多人向往水晶般的爱情,晶莹剔透没有瑕疵。但更多人拥有的是玻璃般的爱情。
When every love comes to the end, if you look back, you will find flowers and sorrows, but it's always beautiful.
每段爱情在走向终结时,倒带回去,一路上或花草鲜美,或落英缤纷,而最初总是倾心的。
To lose in something you love is better than to win in something you hate.
宁可失败在你喜欢的事情上,也不要成功在你所憎恶的事情上。
Sometimes you need to look back; otherwise you will never know what you have lost in the way of forever searching.
偶尔要回头看看,否则永远都在追寻,而不知道自己失去了什么
It's often said that you will have the same life as the person you find.
Therefore, different choices make different endings.
人们说,找到了什么样的人就有了什么样的生活,于是不同的选择,就有不同的童话结尾。
No man or woman is worth your tears, and the one who is, won‘t make you cry.
没有人值得让你为他/她流泪,值得让你这么做的人不会让你哭泣。
I love you not because of who you are, but because of who I am when I am with you.
我爱你,不是因为你是一个怎样的人,而是因为我喜欢与你在一起时的感觉。
An unacceptable love needs no sorrow but sometime for forgetting.
A badly-hurt heart needs no sympathy but understanding.
一段不被接受的爱情,需要的不是伤心,而是时间,一段可以用来遗忘的时间。
一颗被深深伤了的心,需要的不是同情,而是明白。
篇3
This festival is in mid-summer when the weather is warm and the grass and trees reveal their luxurious greens. At night when the sky is dotted with stars, and people can see the Milky Way spanning from the north to the south. On each bank of it is a bright star, which see each other from afar. They are the Cowherd and Weaver Maid, and about them there is a beautiful love story passed down from generation to generation.
Long, long ago, there was an honest and kind-hearted fellow named Niu Lang (Cowhand). His parents died when he was a child. Later he was driven out of his home by his sister-in-law. So he lived by himself herding cattle and farming. One day, a fairy from heaven Zhi Nu (Weaver Maid) fell in love with him and came down secretly to earth and married him. The cowhand farmed in the field and the Weaver Maid wove at home. They lived a happy life and gave birth to a boy and a girl. Unfortunately, the God of Heaven soon found out the fact and ordered the Queen Mother of the Western Heavens to bring the Weaver Maid back.
With the help of celestial cattle, the Cowhand flew to heaven with his son and daughter. At the time when he was about to catch up with his wife, the Queen Mother took off one of her gold hairpins and made a stroke. One billowy river appeared in front of the Cowhand. The Cowhand and Weaver Maid were separated on the two banks forever and could only feel their tears. Their loyalty to love touched magpies, so tens of thousands of magpies came to build a bridge for the Cowhand and Weaver Maid to meet each other. The Queen Mother was eventually moved and allowed them to meet each year on the 7th of the 7th lunar month. Hence their meeting date has been called "Qi Xi" (Double Seventh).
Scholars have shown the Double Seventh Festival originated from the Han Dynasty (206 BC-AD220). Historical documents from the Eastern Jin Dynasty (AD371-420) mention the festival, while records from the Tang Dynasty (618-907) depict the grand evening banquet of Emperor Taizong and his concubines. By the Song (960-1279) and Yuan (1279-1368) dynasties, special articles for the "Qi Xi" were seen being sold on markets in the capital. The bustling markets demonstrated the significance of the festival.
Today some traditional customs are still observed in rural areas of China, but have been weakened or diluted in urban cities. However, the legend of the Cowhand and Weaver Maid has taken root in the hearts of the people. In recent years, in particular, urban youths have celebrated it as Valentine's Day in China. As a result, owners of flower shops, bars and stores are full of joy as they sell more commodities for love.
双七节,在阴历7月7日,是中国传统节日中最具浪漫色彩的。它经常在阳历8月进入
这个节日是在仲夏,天气温暖,草木揭示其奢华的绿色。晚上天空点缀着星星时,人们可以看到银河系跨越从北到南。在每个银行是一颗明亮的星星,从远处看到对方。他们是牛郎和织工女仆,对他们有一个美丽的爱情故事一代一代传下来。
很久很久以前,有一个诚实和善良的名叫妞妞朗(牧牛工)。他的父母去世时,他还是个孩子的时候。后来他被他的嫂子赶出他的家。所以他靠自己放牧牲畜和农业。一天,一位仙女从天上之怒(编织女佣)爱上了他和秘密下来到地球并嫁给了他。牧童养殖领域和韦弗女仆编织在家里。他们过着幸福的生活,生了一个男孩和一个女孩。不幸的是,天上的神很快发现这样一个事实,并下令太后西方天堂把韦弗女仆。
在老牛的帮助下,牛郎飞到天堂和他的儿子和女儿。时他正要赶上他的妻子,女王母亲脱下她的一只金簪,中风。一个汹涌的河出现在前面的牧童。牧牛工和韦弗女仆永远分离的两家银行,只会觉得自己的眼泪。他们的忠诚的爱情感动了喜鹊,成千上万的喜鹊来建造一座桥梁牧牛工和韦弗女仆来满足彼此。女王的母亲最终被移动和允许他们来满足每年的阴历7月7日。习因此他们会议日期被称为“气”(双第七)。
学者所示双七节起源于汉朝(206 BC-AD220)。从东晋王朝历史文献(ad371 - 420)提到的节日,同时记录从唐朝(618 - 907)描述的盛大晚宴唐太宗李世民和他的小妾。通过这首歌(960 - 1279)元(1279 - 1368)时期,特殊物品的“气习”被认为在资本市场上出售。熙熙攘攘的市场展示了节日的意义。
篇4
有关情人节英文祝福语
1.May this Valentine bless us with the cupid of love and warmth of romance. Happy Valentine's Day Honey!
愿情人节带给我们丘比特之爱和暖融融的浪漫。情人节快乐!
2.You stepped out of my dreams andsintosmy arms. I can't let you go. Happy Valentine's Day.
你走出了我的梦,投入我的怀里。我不能让你走。情人节快乐。
3.I didn't think that I could ever trust happiness. Then I met you.Happy Valenti ne's Day, Dear.
我一直不相信有真正的“幸福”,直到不久以后,我邂逅了你。亲爱的,情人节快乐。
4.Every man is a poet when he is in love.
每个恋爱中的人都是诗人。
5.Love is a chord in life, not a solo.
爱是人生的和弦,而不是孤独的独奏曲。
6.Love is ever matter of comedies, and how and then of tragedies.
爱情常是喜剧,偶尔是悲剧。
7.Love triumphs over everthing. Love has no age, no limit and no death.
情战胜一切。爱情没有寿命,没有极限,不会死亡。
8.To the world you may be one person, but to one person you may be the world.
对于世界而言,你是一个人;但是对于某个人,你是他的整个世界。
9.Love is not only a sentiment but also an art.
爱情不仅仅是感情,它也是艺术。
10.Love and a cough cannot be hid.
爱情跟咳嗽一样是掩饰不了的。
11.Never stop smiling, not even when you're sad, some man fall in love with your smile.
永远都不要停止微笑,即使在你难过的时候,说不定有人会因为你的微笑而爱上你。
12.The worst way to miss someone is to be sitting right beside them knowing you can't have them.
失去某人,最糟糕的莫过于,他近在身旁,却犹如远在天边。
13.To love and to be loved is the greatest happiness of existence.
爱人和被人爱是人生最大的幸福。
14.True love's the gift which God has given to man alone beneath the heaven.
真爱是上帝单独赐予普天下芸芸众生的礼物。
15.No man or woman is worth your tears, and the one who is, won't make you cry.
没有人值得你流泪,值得让你这么做的人不会让你哭泣。
16.ust because someone doesn't love you the way you want them to, doesn't mean they don't love you with all they have.
爱你的人如果没有按你所希望的方式来爱你,那并不代表他们没有全心全意地爱你。
17.I love you not because of who you are, but because of who I am when I am with you.
我爱你,不是因为你是一个怎样的人,而是因为我喜欢与你在一起时的感觉!
18.This card is to let you know that I still love you after all of these years.
这张卡片是要让你知道,纵使时光荏苒,我却爱你如初。
19.After 25 years, our love is even stronger than before.
25年已经过去,我俩的爱情历久弥坚。
20.You were my high school sweetheart, And still are.
高中时代,你是我的意中人,一直到今天,你还是。
21.To my one and only Valentine: I love you.
献给我惟一的爱人:我爱你。
22.You h***e always been there for me, And I will always be there for you. Happy Valentine's Day.
你永远在那里等待着我,而我也将永远在那里守候着你。情人节愉快。
23.I fell in love with you when I first saw you, And I still am after 40 years.
40年前,我对你一见钟情。到如今,对你的感情仍丝毫未减。
24.I didn't think that I could ever trust happiness. then I met you. Happy Valenti ne's Day, Dear.
我一直不相信有真正的“幸福”,直到不久以后,我邂逅了你。亲爱的,情人节快乐。
25.Our love grows stronger with every passing year. Happy Valentine's Day, Baby.
我俩的爱,一年比一年更坚定。小宝贝,情人节快乐。
26.You have been And still are my only true Valentine.
从过去到现在,你一直是我惟一真正爱恋的人。
27.To the girl of my dreams And the mother of our child: you are the only Valentine for me.
献给我梦中的女孩及我们孩子的母亲:你是我惟一的爱人
28.I will be your Valentine until the end of time.
我将是你的情人,直到地老天荒。
29.After all these years I still feel like a schoolboy when I hold your hand. I'm thinking of you this Valentine's Day.
纵使多年已过,但每当我紧握你的手时,仍有一种自己还是高中生的感觉。我在这个情人节,一直思念着你。
30.I made the right choice when I decided to marry you. Be my Valentine forever.
决定跟你结婚,是正确的选择。愿你今生今世做我的情人。
31.No one has ever loved me the way you do. I love being your little Valentine.
从来没有人像你这般地爱我。我喜欢做你的小情人。
32.On this Valentine's Day, just like every day, all I h***e is love for you.
如同每一个平常的日子,我在这个情人节里所拥有的东西,就是对你的爱。
33.We h***e had our difficulties recently, but you are still the one I call my Valentine.
虽然最近我们发生争执,但我仍视你为我的情人
34.Please come back. I want to make up. I want to be your Valentine.
请回来。我希望能够和解。我要当你的情人。
35.To my ever loving; I am yours forever.
献给我永远的爱人;我将永远属于你。
36.I knew that there would be ups And downs when I married you. But through it all you h***e always been my Valentine.
当年娶你,已知人生总有起伏不定的时候。但经历过这一切的甘与苦,你终究是我的爱人。
37.I'm sorry that I can't be with you on this Valentine's Day. I send this Valen tine's card to remind you that I love you.
很抱歉,这个情人节我不能陪你。我送上这张卡片,为的是要提醒你,我爱你。
38.It is graceful grief and sweet sadness to think of you, but in my heart, there is a kind of soft warmth that can't be expressed with any choice of words.
想你,是一种美丽的忧伤的甜蜜的惆怅,心里面,却是一种用任何语言也无法表达的温馨。
39.Do you understand the feeling of missing someone? It is just like that you will spend a long hard time to turn the ice-cold water you have drunk into tears.
你知道思念一个人的滋味吗,就像喝了一大杯冰水,然后用很长很长的时间流成热泪。
40.I know you like this song most and I know what you are thinking about ,too, I miss you .
我知道你最喜欢这首歌,我也知道你的心思,我想你。
41.Those days when we were together appear in my mind time after time, because they were so joyful, happy, blest, disappointing, sad and painful. I miss you ,and miss you so mach……
常常想起曾和你在一起的那些日子。开心、快乐、幸福、失落、伤心、痛苦的所有日子。很想你,很想你……
42.Do you know there is someone thinking of you and caring you all the time ? Your smiling eyes are just like the sparkling stars hanging on the curtain of my heart.
你知道么,有个人时时想念着你,惦记你,你含笑的眼睛,象星光闪闪,缀在我的心幕上,夜夜亮晶晶。
43.Listening to my heart beating. Seeing how much I love you ,I dare to admit how much I love you .When thinking of you, I hope you can receive the passionat words I left for you!
心要让你听见,爱要让你看见,不怕承认对你有多眷恋;想你的时候,盼你能收到我的真情留言!
44.Thousand of time I have thought of you .My heart is going high into the air and flying with my blessing towards you I don't care loneliness. I am satisfied when you are happy and I am happy when I think of you!
千万个思念,在空气中凝固。扬起风吹向你,带着我的祝福,寂寞我不在乎,你快乐我就满足,想你是我的幸福!
45.I miss you not because of my loneliness but I do feel lonely when I miss you. Only when I miss you deeply I feel so lonely.
不是因为寂寞才想你,是因为想你才寂寞。孤独的感觉之所以如此之重,只是因为太想你。
46.miss you so deeply that my love just like a kite has broken its line and won't stop flying until it reaches you at last.
长长的思念,就像风筝断了线,飘啊飘啊,飘到你的身边。
47.Oh, How much I miss you! If the passionate refreshing breeze knows my heart, it can tell you that I miss you and care you for my life's time. If graceful white cloud knows my heart, it can tell you I love you and would be together with you forever.
好想,好想你!如果清风有情,请带去我对你的思念,这一生都为你牵挂;如果白云有意,请带去我对你的爱恋,生生世世都愿和你共缠绵!
48.Maybe God wants us to meet a few wrong people before meeting the right one, so that when we finally meet the person, we will know how to be grateful.
在遇到梦中人之前,上天也许会安排我们先遇到别的人;在我们终于遇见心仪的人时,便应当心存感激。
49.I want to hold your hand on Valentine's Day. Happy Valentine's Day, sweetie.
我想在情人节紧握你的手。亲爱的,情人节快乐。
篇5
【关键词】情景化教学 目标导向 自主学习
[背景]
小学英语有效教学需要教师根据学生的年龄、心理特征,创设真实的语言情境,帮助学生在情境中接触、感知、习得、理解、运用英语。本文通过笔者一节展示课课堂实例及其研讨(译林版小学英语六年级上册Unit 8 Chinese New Year Story time),内容是人们在中国年来临之际的准备活动,呈现了小学英语情境教学如何做到回归再现生活的,同时帮助学生更有效地综合运用英语。
[案例]
1.我们要过年了吗?
首先,教师在课前对教室做了一些布置,如挂鞭炮、贴窗花等(如下图),营造一种现实情境,让学生在学习时身临其境。
2.原来,这是我们今天的目标!
上课开始前,教师用以下形式向学生展示了本节课的教学目标。
What are you going to learn at this lesson?
1.You’re going to learn the story time.
2.You’re going to talk about the topic.
3.You’re going to work with your classmates to do a skit.
3.西方人眼中的中年好美!
教师播放视频《西方人眼中的中国年》。本节课的授课时间恰逢年末,接近新年,正好上个月又是西方的重要节日――万圣节。笔者向学生发问:
T:What holiday did we have last month?
S:Halloween.
T:Right.It’s an important holiday in western countries. Do you know what holiday is important in China?
S:Chinese New Year.
T:Let’s see what is our Chinese New Year like in western countries.
4.我们都争做学习的主人!
笔者大致设计了以下三个环节:
环节一 听录音,排序,看看Anna将要为中国年做哪些事。(如下图)
环节二 在文章中找到几个时间标志,小组合作说一说写一写每个时间段将要具体做哪些事情,并进行汇报。
Before Chinese New Year, they are going to ...
On Chinese New Year’s Eve,they are going to ...
On Chinese New Year’s Day,they are going to ...
On the second day of Chinese New Year,they are going to ...
环节三 自读课文,找出疑难点,并复述总结课文。
5.看!我们的思维导图精彩吗?
课后的作业是小组合作做一张中国年的思维导图,用上我们今天学的句型描述一下你这个春节将要做的事情。看看哪一小组的思维导图能得到大家的青睐哦!以下是随机选取的两个小组的合作成果。
[案例反思]
1.情境中的目标知情,做学习的主人
《义务教育英语课程标准(2011年版)》(以下简称《标准》)更强调对学习对象的关注,这就要求教师在设计教学活动时从人本主义思想出发,让学生对学习目标的知情权得以体现。比如案例中上课主题是中国年,教师先在课前对教室做了一些布置,如挂鞭炮、贴窗花等,营造一种现实情境,让学生在学习时身临其境,有利于开启学生想象的思维,刺激表达的欲望。根据本节课的语言知识重难点现在进行时的一般构成:be going to表示将要做某事,教师在新授课之前就利用这个语言结构,将该语言结构富于情景化,即我们今天将要学习什么,在让学生知道本节课学习目标的同时,也做到了让学生初步感知语言重难点,即在现实情境中做到语言学习内容与形式的统一。语法是语言的骨骼,笔者设计的这一环节其实是将语法情景化。让学生在自然的情境中真实地感知新的语言项目,为本节课语言学习目标的有效达成做铺垫。该语法的情景化拉近了学生和英语语言之间的距离, 消除了学习焦虑感,学生在不知不觉中加深了对该语言点的理解。《标准》中明确规定把对学生的学习兴趣、态度和自信心的培养放在英语教学的首要地位。我们在教学实践中也深刻体会到创设大量的英语情景,让学生在形式多变的教学中,时常处于兴奋、活跃的状态,对于学生产生浓厚的英语学习兴趣,激活创新意识,发挥学习潜能是非常有利的。没有良好的学习环境就没有好的教育,要让学生说好英语,就要重视环境的营造。让学生在现实的情境中,知晓目标,使得教学更具人情味儿。
2.多媒w的合理怡情,增强共鸣
随着教学中多媒体技术的引入,灵活运用各种电教手段,为学生提供真实自然的语言使用示范,使教学变得生动、活泼、感染力强,让学生置身于以英语为母语的环境中,体验英语的实际运用。在现代化电教设备创设的情境下,让学生多看、多听,获取最大的信息量。本课可以结合中西文化,语言有丰富的文化内涵,在小学英语教学中,接触和了解外国文化有益于对英语的理解和使用,有利于加深对中华民族优秀传统文化的认识与感受。通过贴近生活的中西方文化对比,做到了学习的回归与生活的再现。同时,笔者巧用视频的形式,为学生呈现了一个直观,形象的中国年习俗,有利于调动学生学习兴趣以及唤醒他们的旧知识,开启他们用英语表达的欲望,启发学生的思维,起到了抛砖引玉的效果。实践证明,学生不仅有话可说,而且有说不完的话,有的甚至大胆尝试了一些没有学习过的新词来表达,课堂氛围很是活跃,学生畅所欲言,学习热情高涨,共鸣强烈。
3.明确要求下的自主学习,通情达理
自主学习是老生常谈的话题,但往往流于形式,因此需要教师循序渐进,为学生提出明确的要求。案例中,笔者充分尊重了学生的学习自,小组合作的方式也帮助降低了学习难度,教师所创设的活动均是在中国年这一情景中,学生的语言学习的延续性得以保证,并且是循序渐进的,帮助了学生有效完成学习任务,习得语言。教师围绕语篇话题创设恰当的情景,开展拓展活动,科学高效地设计各种活动或任务,供学生们在任务达成的过程中积极应用所学语言进行交际与展示,从而体现英语课堂教学的整体性与语言运用的真实性。
笔者设计了两个教学拓展,学生可以自行选择。一个是根据所学内容排演一个关于新年的情景剧,可以用上一些新年的祝福语,互相说一说自己新年的计划,或者小组合作制作一张手抄报。情境会话贯串全套教材。其意图在于体现《标准》“从学生已有经验出发,重视学生的经验和体验”的基本理念。教材情境图给学生提供了支架性的语言学习空间,教材提供了情境图和文本的统一做到了现实情境和文本情境的结合,强化了学生提取、加工和分析问题的能力有利于培养学生的观察力、分析力和口头表达能力,让学生形成有效的学习技能,养成良好的英语学习习惯。让学生能较好地掌握文章内容,以至在文章的总结复述时基本做到自主复述,课堂文本内容达成度较高。明确的要求使得自主学习有了方向,有了指导意义,有了自主学习的可能性,更具人情味儿。
[结语]
总之,在情境中的英语教学,既能活跃课堂气氛,激发学生的学习兴趣,锻炼学生的语言能力,又能培养学生的思维能力和空间想象能力。使学生产生仿佛置身于英语世界的感觉,在轻松、愉快的环境中积极地学习,养成良好的学习习惯,加深语言信息输入,产生语言内化,做到学以致用,从而为学生进一步学习英语奠定良好的基础。教师只有深入地钻研教材,研究教学方法,讲究教学艺术,最大限度地调动学生的学习积极性,才能更有效地提高课堂教学质量,真正让情景教学为自己所用,让学生的英语学习回归到现实生活,让英语课更有人情味儿。
【参考文献】
篇6
今天我要侃的中心思想可以概括为:这是一个人民宰猪的时代,请还刀于民。
有人在下面笑:爱成你可真的胡整,好好地宰什么猪?谁是猪?先别急。这个“猪”我是指广告客户。大学教授讲课的时候会说广告客户是媒体的上帝,因为他掏钱嘛!可我们传媒的广告业务员私底下却把一个广告客户谈成了,叫宰猪——从广告客户身上吃到了肉的意思。现实中其实就是这么回事,因为广告客户到底能不能通过销售收回这笔投资还很难说——收不回来,或者投入产出不成比例,那可不就是当猪被人宰了一刀?!怎么说,广告客户是猪。但猪们现在都越来越聪明,比我们的媒体从业人员更聪明了?
那么如何做好传媒提高广告业务收成呢?我的想法就是:让人民来宰猪,我们传媒应该把刀还给人民。
为什么这么说?因为过去一直是官僚主宰媒体,而当前的中国正在从官僚主宰媒体的时代,逐步进化到人民主宰媒体的时代。在这样的背景下,如果我们的传媒仍然保守于让官僚满意、完全听官僚的话、让官僚充斥着我们的媒体,那就坏事了,你的媒体就因为无聊而死。你就是官僚手中的一根鞭子,没人理你,大家都躲着你,谁会找你投广告?
人民主宰,就是媒体要体现人民大众的需求,听人民的话,按人民的意愿办媒体,你的内容要全是人民感兴趣的东西。只有这样,你的媒体才有发行量和收视率,你的广告投放价格和收费才有支撑,广告客户才会争着抢着哭着含着对说:“求求你,来宰我吧,我是最肥的猪!”
那么官僚主宰媒体和人民主宰媒体具体有什么不同?我想我可以用“三讲”来说明这个问题。底下有人一听我这边要讲“三讲”,一定在心里骂上了:M的,今天算是见鬼了。三讲不就是:你不讲;我不讲。你要讲,我也讲。你讲我,我讲死你。错了,不是那个意思。
官僚主宰媒体的特点是这样的三讲:一是讲权力,二是讲级别,三是讲资历。
所谓讲权力,比如说我们大家每年大年三十的晚上,都有一个集体性的弱智习惯,就是和家人在失望中去收看春节联欢晚会。一个如此无聊缺乏新意的娱乐节目,在中国的收视率居然能达到95%个百分点。好像真的“全国人民看春晚,十亿人民九亿欢”。此情此景,让那些不了解中国媒体情态的国外传媒大亨都急死!心想中国人民这么低的“欢商”,他要是进来还不得赚死?是中国人民“欢商”“智商”低吗?不是,你不让别的电视台自己办春节联欢晚会,你还逼着别的电视台非转播不可,那谁不傻B啊!这叫讲权力,权力统治着娱乐。没权力这层,春节联欢晚会立马就现招人烦的原形。今年美国AOB media搞了个2007年春节海外双语晚会暨2007年度中美娱乐先锋人物大奖北美颁奖晚会。它来找我说,央视这个晚会这么差劲,居然一晚上搂4、5个亿,我再不怎么地搂个上千万总没问题吧!我说,就央视春节联欢晚会的水平,丫确实不应该捞那么钱;你这春节海外双语晚会干两条就能盖了它。一是你请美国现任总统布什给全球华人拜年;二是你请央视对抗性的人物超女、黄健翔、陈佩斯、朱时茂、王治郅、羽泉等出演节目。有这两天才叫过年呢!!!问题是丫不让你在国内同时播出啊!它要敢让你播,随便放到哪个驴儿不拉屎的省级卫视,你都至少能搂一个亿!
所谓讲级别,你比如当年各级电视台的广告业务去秦池拉广告,有央视的、山东卫视的、临朐电视台的。结果怎么着?临朐电视台一进厂就被厂子的保安打跑了;山东卫视运气要好点,可也被灌酒灌爬下了,躲到宾馆的床底下不肯出来。只有央视的,人家秦池酒厂老老实实用加长林肯一路侍侯着送回北京。这就是讲级别,你的媒体是哪一级的,头上是几品顶戴。
所谓讲资历,就是讲您熬了多少年头了,熬的日子越久越牛。比如我们央视的《动物世界》,就这么个拿动物赚眼球的节目,坚持用赵忠祥这样一个身经百战的老大爷来主持。搞得中央电视台主持人的那些茅坑十年如一日地蹲着那些老家伙,好像中国进入老年社会后年轻人都死绝了。
以上是老“三讲”。
我们要进入的人民主宰媒体的时代就完全不同了,它的特点也可概括为“三讲”:讲人民,讲PK,讲热闹。这是新“三讲”。
提起讲人民,大家就会想起“三个代表”,那里好像也有“人民”。三个代表是说,代表着中国先进社会生产力的发展要求,代表着中国先进文化的前进方向,代表着中国最广大人民的根本利益。里面最根本的是代表人民群众的根本利益。
但我申明,这里头的人民和我要表达的是两个意思。区别在于人民就是人民,没有什么代表不代表的。我们今天讨论的是媒体、广告和赚钱之间的关系,媒体以外的政治什么的领域我管不着,也不让我去管。就在媒体这领域,你别跟我玩什么代表。人民就是人民,你媒体内容、价值取向、节目品味等统统都要根据人民的意志来定,别去用一帮伪精英和传媒官僚给我在那儿假装人民的一份子,还死乞白赖地要代表人民——谁TMD要你来代表了?真不要脸!人民就不能直接把属于他们的事按照他们的方式给办了吗?
篇7
关键词: 汉英副词性关联词语 情感域 认知识解
一、 引言
国内外学界对汉英副词性关联词语的研究有Biber,Johannessen和Halliday认为连接副词可以用做状语,具有篇章衔接功能,并对该类词语的功能做了一定的分类。国内学者如原苏荣、张谊生等对副词性关联词语的性质、范围、分类和功能进行了阐释和研究;桂严捷等、邹清妹等和刘曜等探究汉英文本中副词性关联词语的语篇衔接功能等。由此可见,国内学者不仅提出了该类词语的功能及分类,而且做了比较深入的研究。然而,从认知语言学角度对副词性关联词语的探究还少见。
本文基于“北京大学中国语言学研究中心语料库”和“英国国家语料库”,采用认知语法的研究方法,集中探究在语篇层面汉英情感域内的副词性关联词语的分类和特点。
二、副词性关联词语的认知识解
认知识解是认知语法的重要部分,是学界研究的热点问题。Langacker认为认知识解是当人们使用语言时用不同方法诠释同一场景的能力。Hamawand则认为认知识解是“说话者在语篇上使场景概念化并且在语言上选择合适的结构时采用的语言策略” 。
副词性关联词语和认知机制有着密切联系,因此从认知语法角度研究副词性关联词语是一个很好的选择。
辖域又叫认知域或语义域,是认知语法的一项重要内容。辖域是人们描写语义结构时涉及的概念领域。任何对词语的描述都要在认知域范围内进行。
认知语法描写词语的意义时主要用“认知域”代替传统的意义特征,将意义视为概念化的过程和结果,认知域就是在这一过程中形成的一个内在的、连贯的、凝聚在一起的范围,并进行语义描写。在某种程度上,认知域等同于语境,因为所有语言单位都是依靠语境的。在认知域中,通过次结构的凸显限定并描写语义单位。然而,认知域又不同于语境,它是人们大脑中的知识语境。
认知域有两种类型:基本认知域和抽象认知域。前者是一个简单的概念,包括时间域、空间域、情感域、颜色域、嗅觉域、触觉域、上位域及下位域。 基本认知域是概念复杂性的最底层(Langacker 1987:149),是人类概念化过程的出发点。抽象认知域是一个复杂的概念或者知识系统,又称为“概念复合体”。本文主要讨论基本认知域下的副词性关联词语。值得一提的是,本文探究的副词性关联词语是基于原苏荣的界定标准和限定范围内的副词性关联词语(功能类型分8个大类20个次类)。
根据Langacker的观点,情感有两类:一类是积极情感,如欣喜、热爱和兴奋;另一类是消极情感,如伤心、焦虑和绝望。然而,他也提出这两类情感的交叉。我们发现有一些副词性关联词语可以表达情感或态度,它们属于情感域,下面看一些从语料库中精心选取带有副词性关联词语的例子是如何表达情感的:
(1)沈爱民本人就曾两次踏入冰缝,幸好冰缝不算宽,如果跌入一条很宽的冰缝,那生还的希望是渺茫的。(1994年报刊精选)
例(1)中的句意为:如果沈爱民掉入很宽的冰缝,他几乎无法生还。从例句中我们可以感觉到“幸好”后面的事情是好事,属于积极的情感域。
(2)传说伍子胥一连几夜愁得睡不着觉,连头发也愁白了。幸亏他们遇到了一个好心人东皋公,同情伍子胥,把他接到自己家里。(《中华上下五千年》)
例(2)中的“幸亏”也是表达积极的语义,即对于伍子胥而言,有好心人愿意收留他的积极情感。伍子胥在逃出郑国后,被人追捕情况窘迫,因此有人收留是一件好事。所以,“幸亏”传达的语义属于积极情感域。
(3)在美国,死于心脏病的人更超过了100万,而且人数还在不断增加之中。不过,好在我们还有发展健康的习惯,减少这些疾病的危险。(《哈佛管理培训系列全集》)
从例(3)中我们得知,在美国超过100万人死于心脏病,而且数量还在上升;针对这种情况,作者表露出自己的一丝安慰――人们发展健康的习惯将有助于缓解该趋势。例句中的“好在”传递了一种积极的情感态度。
(4)Fortunately, the United States and Irish camps came to our rescue, and we got Marcus out on to the track. (The Daily Mirror, 1985-1994)
(5)There was a time when a popular cocktail food was salame (usually Danish) rolled round a cream or cottage cheese filling to form a cornet. Luckily, this fashion seems to have passed as such things were never very easy to eat in a dignified way. (Delicatessen: a celebration and cookbook, 1985-1994)
(6)Unfortunately, this means that any residential building you design could be littered with satellite dishes in no time at all. Not a pretty sight, we’re sure you’ll agree. Happily, however,it’s one you can easily avoid by talking to BSB today.(Adverts from The National Trust Magazine,1985-1994)
副词性关联词语fortunately、luckily和happily可以表达相同的语义特征。它们描述的事件都是让人们感到欣慰的,至少在说话者看来。例(4)的语义为:如果美国和爱尔兰方没有提供及时的援助,Marcus将无法返回赛场继续参加比赛。所以,在说话者看来这是一件好事。例(5)可以理解为:如果意式腊肠的这种吃法没有过时,那人们永远不会以一种优雅的方式吃它。可见luckily后面的事件在说话者看来是好事,属于积极的情感域。例(6)的说话者很开心,因为人们可以通过向BSB反映情况避免居民滥用信号器接收卫星电视信号。从以上分析我们可以看出fortunately、luckily和happily传达的语义都属于积极情感域。
(7)正走着,突然,我发现石径右侧有一平坦巨石,可以歇脚,便拐了过去。(1995年9月份《人民日蟆罚
(8)阵阵腰痛和对边疆缺水的极度焦灼,使得李国安无法入睡。突然,一阵敲门声打断了他的思路,推门一看,是从百里外的托克托县团结村赶来的两位老大爷,身上的霜就像洒了一层面粉。(1996年1月份《人民日报》)
例(7)和例(8)中的“突然”表达不同的情感。前者表达的是一个精疲力竭的说话者的积极情感。令他惊奇的是他发现一块可以休息的石头,因此他很兴奋。而在后面的一个例子中,它表达的是消极的情感。李先生的腰痛和对边疆缺水的极度焦急,使得他无法入睡,并且在这个时刻,使情况更加糟糕的是敲门声打断了他的思路。
(9)本来,作为一个领导干部,有一件风雨衣,拿应得的奖金,一些急难险重的工作交给下级干部去做,等等,情理之中,合理合法,但是他们偏偏从严要求自己,这就大大提高了他们的威望和感召力,激发了广大干部和群众的积极性,化为推动改革和发展的强大动力。(1994年第三季度《人民日报》)
(10)偏偏,我们就是执迷地相信,失败者都是咎由自取的。我们从来没有认真反省过,真正失败的是我们这个社会!(香港中文大学学生会《为我们未来的社会建言》)
副词性关联词语“偏偏”后面的内容既可以是肯定的又可以是有悖于人们的逻辑的。例(9)领导者应当把紧急的、困难的事情下发给下级干部去做,然而他们对自己要求很严格,这也激发了群众的热情,无疑是一件好事情。例(10)中的“偏偏”表达的就是一个消极的情感。通过使用“偏偏”读者可以意识到他们失败的原因应该归咎于社会,而不是失败者自己。
(11)终于,我们平安地抵达目的地。(《读者》)
(12)终于,宋、蒋矛盾加剧,一场孕育已久的暴风雨来临了。(陈廷《宋氏家族全传》)
尽管上面两个例子中都运用了“终于”,但是不同的情感被表达出来了。很明显,例(11)表达的是积极的情感,因为“我们”安全地到达目的地,但是例(12)中的“终于”表达的是消极的情感,因为随着宋、蒋矛盾加剧,一场孕育已久的暴风雨最后终于来临了。
(13)We were sitting there, and then suddenly I don’t remember anything afterwards. (PBS_News hour, 1994)
(14)I realized that I had forgotten about the party at my house after school.Suddenly I was not sad anymore, but excited.(Writing, 2001)
(15)In 2013, there were about 3,000 people on death row. Only, 2% of those were executed. (ABC, 2014)
(16)He expects to come here next year because I’m here. Only, he wants to be a doctor. (New York Times, 2011)
(17)Finally, she whispers, with love, with hate. (Three Musketeers, 1993)
例(13)中的suddenly告诉读者说话者那时很无助,因为当他和家人坐在一起的时候什么事都记不起来了,所以这里的suddenly表达的情感是否定的。但是例(14)中的suddenly表达的是积极的情感,说话者感到很兴奋而不是伤心的是当他放学后忘记去参加派对了。例(15)的only表明与监狱里的人们相比被处死的人数是相当少的。读者可以从两方面理解说话者的意思,一是说话者认为那些没有被处死的人是很幸运的。二是说话者对不完善的司法系统感到失望。也许说话者认为犯法的人应当被判以死刑。例(16)中的only与want一起连用表达了说话者想成为医生的强烈愿望。除了医生,他都不想做。既可以理解为积极的情感,因为我在,又可以理解为消极的情感,除这个职业找别的都不干。同样,例(17)中的“她”既爱又恨地耳语某件事,表达一种交集的情感。
根据以上讨论我们将汉英副词性关联词语的情感域归纳为下图:
上面两个圆A 和B,A代表积极情感域,B代表消极情感域,A∩B代表交叉情感域,也就是说,这部分的副词性关联词语既可以表示积极的情感又可以表示消极的情感。然而,经过分析我们发现几乎没有副词性关联词语纯粹地表示消极的情感。
三、结语
通过对情感域下的汉语副词性关联词语的研究分析,可以看出情感域中的副词性关联词语可以分为积极情感域内的副词性关联词语,消极情感域内的副词性关联词语和交叉情感域内的副词性关联词语三类。我们发现读者可以较容易地洞察到说话者的情感。某些副词性关联词语是处于积极和消极之间的,即它们在一种语境中表达积极的情感,而在另一种语境中表达的却是消极的情感。
参考文献:
[1]Biber,D.and Leech,G.et al.Longman Grammar of Spoken and Written English[M].Beijing:Foreign Language Teaching and Research Press,2000.
[2]Halliday,M.A.K.An Introduction to Functional Grammar [M].London:Arnold. 2004.
[3]Hamawand,Z.The Construal of Salience in Atemporal Complement Clauses in English [J].Language Sciences 27.3 (2005):193-213.
[4]Johannessen,J.B.The Syntax of Correlative Adverbs[J].Lingua International Review of General Linguistics 115.4 (2005):419-443.
[5]Langacker,R.W.Foundations of Cognitive Grammar(Vol.I.)[M].Theoretical Prerequisites.Stanford:Stanford University Press,1987.
[6]Langacker, R. W. Foundations of Cognitive Grammar(Vol.II.)[M]. Descriptive Application.Stanford: Stanford University Press,1991.
[7]桂澜荩原苏荣.英语:“nowonder”和汉语“难怪”比较研究[J].现代语文,2014(2):130-135.
[8]邹清妹,原苏荣.“侥幸”类副词性关联词语的语篇功能比较[J].宜春学院学报,2015(10):88-91.
[9]刘曜,原苏荣.巴金散文汉英文本中副词性关联词语的语篇衔接功能[J].蚌埠学院学报,2016(2):119-126.
[10]原苏荣.汉英副词性关联词语比较研究[M].上海:生活・读书・新知三联书店,2013.
[11]原苏荣.汉英特殊类词语―副词性关联词语的性质特点和界定标准[J].西安外国语大学学报,2015(1):12-15.
篇8
关键词 黄曲霉毒素B1;人血清白蛋白;结合反应;光谱法
1 引 言
霉菌毒素中黄曲霉毒素B1(Aflatoxin B1, AFB1)是目前已知的最强化学致癌物之一,能通过多种途径污染粮油等农产品、食品和饲料等,直接或间接进入人类食物链[1]。据估计,全球约有50亿人暴露于高水平的AFB1中[2]。血清白蛋白占整个血浆蛋白的52%~60%,是循环系统中主要的可溶性蛋白组分,能结合、运输许多内源性和外源性的化合物[3],且可与外源性物质在特异性结合部位形成非共价复合物。毒素分子与血清蛋白结合,不仅会延长毒素的半衰期,而且会更有利于对器官的定位和形成高剂量毒素。此外,一旦血浆中的毒素浓度比胃肠道高很多,也会形成对毒素分子的被动吸收[4]。研究人血清白蛋白与AFB1作用的毒代动力学,对黄曲霉毒素的毒理学及其安全风险评估具有极大的借鉴意义,对于寻找低毒性的潜在竞争分子及其降低在体内吸收提供理论依据。
荧光光谱是研究小分子与蛋白相互作用的重要手段[5~7],而圆二色谱技术可以从蛋白质二级结构变化的层次讨论小分子与蛋白质作用情况。目前利用荧光、CD技术研究药物与蛋白质的相互作用已有许多报道,但研究外源性毒素分子与血清白蛋白作用的报道还较少。本研究利用多种分析技术研究了模拟生理条件(pH 7.40,离子强度0.1)下AFB1与人血清白蛋白的相互作用。先对加入AFB1的各浓度AFB1-HSA的荧光值进行校正,再利用修正的双对数方程分别求出反应的结合常数和结合位点数,由Frster′s能量转移确定了AFB1与色氨酸残基的距离,并根据热力学参数确定了它们之间的主要作用力类型,以酮洛芬和布洛芬讨论了AFB1在人血清白蛋白上的结合位置,同时结合3D荧光和圆二色谱讨论了AFB1对HSA的二级结构的影响。
2 实验部分
2.1 仪器与试剂
UV-2450紫外分光光度计(日本岛津公司); F-4500荧光分光光度计(日本日立公司);MOS-450圆二色谱仪(法国Bio-logic公司)。 人血清白蛋白(Human serum albumin,HAS, Sigma 公司),使用时用缓冲液配制成0.1 mmol/L。黄曲霉毒素B1(AFB1,纯度≥98%,Sigma公司),使用前用甲醇配置成浓度为4.0 mmol/L, 4℃避光保存。酮洛芬(Ketoprofen,纯度≥99%,上海化学技术上海有限公司);布洛芬(Ibuprofen,纯度≥98%,北京百灵威科技有限公司)。上述试剂使用前都用无水乙醇配制成4.0 mmol/L,其它试剂都为分析纯。用0.1 mol/L Tris, 0.01 mol/L HCl和NaCl最终配制成含0.1 mol/L NaCl,pH为7.4的缓冲液。
2.2 实验方法
2.2.1 “内滤光效应”的校正 由于黄曲霉毒素在荧光激发波长280 nm处有吸收,随着样品中毒素浓度增加,其淬灭行为存在内滤光效应,需要按下列操作对实验数据进行校正。在1 cm比色皿中加入2.0 mL缓冲液, 用微量进样器加入适量4.0 mmol/L AFB1溶液,使AFB1浓度分别为2.0, 4.0, 6.0, 8.0, 10.0, 12.0, 14.0, 16.0, 18.0和20.0 μmol/L,混匀后,扫描紫外波段190~500 nm。按公式(1)对实验荧光数据进行校正[5]:
Fcor=Fobs×e(Aex+Aem)/2(1)
式中, Fobs和Fcor分别为测定得到的荧光值和校正后的荧光值; Aex和Aem分别为HSA激发和发射波长下相应浓度的AFB1吸收值,实验结果的荧光数据均为校正后的荧光值。
2.2.2 荧光淬灭 和3D荧光的测定 在1 cm比色皿中加入1.0 mL 2.0 μmol/L HSA溶液,用微量进样器每次加入适量4.0 mmol/L AFB1溶液,使AFB1浓度分别为2.0, 4.0, 6.0, 8.0, 10.0, 12.0, 14.0, 16.0, 18.0和20.0 μmol/L,混匀后,在不同的温度条件下,固定激发波长λex=280 nm,狭缝宽度为5/5 nm,发射波长在220~400 nm范围内扫描HSA的荧光光谱及AFB1-HSA作用的荧光光谱。将激发波长扫描范围设置为200~450 nm,发射波长设置为220~600 nm,激发波长每递增5 nm扫描一次谱图,可得HSA及作用后AFB1-HSA的三维荧光光谱。
2.2.3 竞争实验 Site I位点标记药物酮洛芬和AFB1与HSA的竞争结合实验:在1 cm比色皿中加入1.0 mL 2.0 μmol/L HSA溶液,用微量进样器加入4.0 mmol/L AFB1溶液,使AFB1浓度为30 μmol/L,再分别加入微量4 mmol/L酮洛芬,最终酮洛芬的浓度分别为4.0, 8.0, 12.0, 16.0, 20.0, 24.0, 28.0和32.0 μmol/L,混合均匀,在荧光光谱相同的测定条件下测定荧光强度。用相同的方法测得AFB1和Site II位点标记药物-布洛芬的竞争结合实验。
2.2.4 圆二色谱扫描 配制1.0 μmol/L HSA和复合物混合液(1.0 μmol/L HSA和10 μmol/L AFB1), 用光程为1 mm的比色皿, 单位扫描间隔设置为1 nm, 单位扫描时间为2 s, 扫描波段为190~250 nm。
3 结果与讨论
3.1 结合常数与结合位点数的研究分析
AFB1与HSA结合时,HSA荧光强度和毒素浓度与K和n的关系满足方程式(2)[6]:
其中,F0和F分别是加入毒素前后的HSA荧光强度。[Q0]和[P0]分别是毒素和HSA的总浓度。通过lg[(F0-F)/F]对lg{[Q0]-[P0](F0-F)/F0}作图,得到图1。通过线性拟合得到直线的斜率和截距,可测得AFB1与HSA在不同温度下的结合位点数n和结合常数K。从表1可见,AFB1-HSA在4个温度下测定得到的结合位点数n值均约为1,表明HSA与AFB1的结合过程中只有一个结合位点,同时结合常数K值随着温度的升高而变小,说明淬灭机制是静态淬灭。因静态淬灭时,温度升高复合物稳定性下降,会导致结合率降低,而动态淬灭属于分子扩散过程,温度升高,扩散系数增大,K值相应增大。另外,AFB1-HSA在4个温度下K值的数量级均为104,比很多其它的血清蛋白-配体复合物结合常数高很多,表明AFB1与HSA存在较强的亲和力,在血浆中有很长的半衰期, 推测AFB1-HSA能够在血液中存储较长时间,能远距离运输,持续发挥毒性。
3.2 结合距离的确定
能量转移现象是一个分子发射光谱(供体)与另一个分子吸收光谱(受体)重叠,此时分子在偶极-偶极共振耦合作用下发生能量转移,最终供体荧光降低,受体荧光升高。根据Frster′s非辐射能量转移,供体和受体之间的转移效率E与临界距离R0、距离r的关系式如下[10]:
3.3 作用力类型的确定
通常,蛋白质与配体形成超分子复合物主要通过疏水作用、静电作用、范德华力及氢键等实现[12]。ΔH(焓变)、ΔS(熵变)、ΔG(自由能变化)可通过Van′t Hoff方程进行计算,再根据热力学参数判断AFB1与HSA主要作用力类型,方程如下:
AFB1与HSA反应的ΔG
3.4 AFB1与HSA结合位点的确定
HSA的高级结构可分为3个结构域,从N-端开始依次为Domain Ⅰ, Domain Ⅱ和Domain Ⅲ, 这些结构域主要由α-螺旋反向平行形成,每个域又由槽口相对的两个疏水性亚域(Sub domain A和Sub domain B)空腔形成[3],且HSA中主要有两个疏水性口袋(Site Ⅰ)和(Site Ⅱ)是配体的主要结合部位,为了确定AFB1在HSA上的结合位置,使用酮洛芬(Site Ⅰ)和布洛芬(Site Ⅱ)作为位点探针,位点探针通常发生的反应有竞争反应和非竞争反应两种[16]。
竞争反应:
根据2.2.3节实验操作,依次向AFB1-HSA体系加入不同体积的酮洛芬和布洛芬溶液,根据体系中HSA和AFB1荧光变化情况(因AFB1与HSA之间存在能量共振,使得毒素荧光强度增强),确定AFB1与HSA的结合位点。Sudlow等[17]提出了计算取代百分比的表达式:
式中, F2和F1分别为存在和不存在探针时的荧光强度。
在实验中,为了确保探针产生最小的非特异性结合,控制AFB1与HSA摩尔比为15∶1。测得体系的荧光光谱,根据公式(8)求得取代百分比,以取代百分比对探针与HSA的浓度之比作图。从图4可知,加入布洛芬对AFB1-HSA体系中HSA、AFB1的荧光强度影响较小,但随着酮洛芬的加入量,AFB1与HSA的二元体系中HSA和毒素的荧光强度都发生较大降低,由此可推断出,酮洛芬取代了AFB1,与HSA发生结合。以上结果表明,AFB1与HSA的结合反应发生在Site I中,靠近Trp-214位色氨酸。OTA的动物实验表明,将OTA毒素从血清蛋白中置换出来,可以加快消除OTA在靶器官中的积累[18], 因此研究在该结合位点低毒的与AFB1存在竞争关系的小分子,可以发展AFB1中毒的体内预防措施。
3.5 AFB1诱导HSA构象发生的变化
3.5.1 三维荧光扫描 三维荧光光谱表现的是荧光强度随激发和发射波长同时变化的信息,拥有谱图特征以及丰富的信息含量,为有机小分子作为介质荧光探针的研究,以及它们与生物大分子血清白蛋白相互作用机理的研究提供了有力手段。图5是测得加入AFB1前后HSA的3D荧光等高线图,对应的一些参考数据见表2。
图5中的峰1主要显示了色氨酸和酪氨酸残基的光谱特性;峰2主要显示多肽链主链结构的荧光特征,是由多肽骨架结构具有CO发生nπ*跃迁引起的,该峰的荧光强度与蛋白质的二级结构密切相关[19]。加入AFB1后,HSA的峰1和峰2的荧光强度都呈现明显下降,但程度有所不同。峰1降低了26.3%,峰2降低了33.2%。从表2可知,AFB1-HSA系统中的峰1和峰2的斯托克斯位移都略有蓝移,说明AFB1的加入使得HSA生色团氨基酸残基(主要是色氨酸和酪氨酸)微环境及其二级构象发生了变化。
3.5.2 AFB1 与HSA的圆二色谱分析 在蛋白质或多肽的规则的二级结构中,肽键是高度有规律排列的,排列的方向性决定了肽键能级跃迁的分裂情况。因此,不同二级结构的蛋白质或多肽所产生的CD谱带的位置、吸收的强弱都不相同。因此CD谱带的位置、吸收相关的变化反映蛋白质的二级结构变化。蛋白质的典型的α-螺旋结构式在208 nm(肽键的π-π*跃迁)和222 nm(肽键的n-π*跃迁)处出现负的吸收峰,α-螺旋结构的含量可用下列公式求得[20]:
CHSA=1.0 μmol/L; CAFB1=10 μmol/L.实验中测得nHSA∶nAFB1=0∶0和1∶10时体系的CD光谱,结果见图6。
在AFB1存在的条件下,在208和222 nm处存在HAS的α-螺旋特征峰。通过计算,单独HSA的α-螺旋含量为49.3%,加入10 μmol/L AFB1后,HSA的α-螺旋含量增加到61.1%。α-螺旋结构主要是由多肽链上羰基CO()和氨基(说明NH)之间的氢键稳定[21],说明AFB1与HSA的结合诱导了HSA多肽链的重排,引起原有的氢键网络的结构改变,使得卷曲结构增加,肽链的二级结构发生了较大变化,推断可能是AFB1与HSA相互作用,使蛋白质分子的疏水性增强,导致HSA的肽链结构收缩使得α-螺旋含量增加。
4 结 论
本研究采用了荧光淬灭法、同步、三维荧光光谱3种荧光光谱技术在模拟人体血液pH值条件下研究AFB1和HSA的相互作用,获得了AFB1-HSA系统的淬灭机制、结合常数、结合位点数、结合距离、结合位置、作用力类型、构象变化等相关信息。结果表明,AFB1对HSA的主要淬灭机制为形成静态复合物的静态淬灭,且结合时只有一个结合位点,二者相互作用力主要为疏水作用和氢键,结合位置为靠近Trp-214的疏水腔中,二者的结合引起了HSA的氨基酸残基微环境及其α-螺旋含量的增加。AFB1与HSA较强的结合常数说明,AFB1能够通过HSA被运输到各个靶器官中,可在血液中贮存较长的时间,存在潜在的毒性。本研究为评价黄曲霉毒素的毒性提供了有用信息,且从分子水平上研究了血液运输过程中黄曲霉毒素的毒理学效应及其对血清蛋白构效影响等。
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篇9
山东省高级人民法院:
你院鲁法(民)发〔1990〕25号关于许秀英夫妇与王青芸间是否已事实解除收养关系的请示报告收悉。
经我们研究认为,一九三七年王青芸两岁时被其伯父母王在起、许秀英夫妇收养,并共同生活了二十年,这一收养事实为亲戚、朋友,当地群众、基层组织所承认,应依法予以保护。虽然王青芸于一九五七年将户口从王在起处迁出到其单位落户,后又迁入其生母处,但双方未以书面或口头协议公开解除收养关系。而且,王在起生前与王青芸有书信来往,并以父女相称,王青芸对王在起夫妇也尽有一些义务。据此,我们同意你院第一种意见,即以认定许秀英夫妇与王青芸的收养关系未事实解除为妥。
以上意见,供参考。
篇10
听朋友语气如此轻松,我有些吃惊,去年情人节前夕,她也曾打电话,不过却是气愤地抱怨,幼儿园的孩子那么小,老师居然要给他们庆祝情人节,实在不像话。要知道,在国内,家长们恨不得屏蔽这个节日,好让孩子永远保持天真纯洁。
朋友说,就是因为对情人节抵触,所以去年她只给儿子准备了巧克力,想应付一下了事,没想到,老师和其他家长都非常重视,都亲手做了精美的礼物,让她非常尴尬,所以今年她要好好地补回来。
我觉得挺好奇,幼儿园里的情人节要怎么过呢?转眼情人节就到了,朋友再次打电话回来,兴高采烈地给我讲述起当天的情形。
一大早,当朋友带着五岁的儿子走进学校时,只见校园内早已被装饰一新,彩色气球拼成一个个大大的心形,红色的横幅上用英语写着:“情人节快乐!”每个孩子都穿着最漂亮的衣服,手里拿着各种各样的礼物,额头上还画着心形的彩图,脸上洋溢着喜悦和期待。
走进教室,发现墙上挂着一排颜色各异的心形纸袋,上面写着每个孩子的名字。如果想给哪位小朋友送礼物,就可以直接放到写有他名字的纸袋里。孩子们顿时活跃起来,拿着自己和父母一起精心准备的礼物,跑着放到其他小朋友的纸袋子里。不一会儿,所有的袋子都装满了,有孩子们充满童趣的涂鸦,有手工做的卡片,虽然不昂贵,但都是孩子们自己做的,让人觉得特别温暖。
送完了礼物,老师还带着大家一起做游戏。地上画着一个心形的图案,老师让所有的孩子都站进去,然后从纸袋子里拿出心形的卡片,捧在自己胸口。老师手里拿着针线,将孩子手中的卡片紧紧串在一起,并大声问孩子们:“让我们大家的心永远在一起好不好?”孩子们开心地回答:“好!”
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