思恋短信范文
时间：2023-03-19 18:56:07
导语：如何才能写好一篇思恋短信，这就需要搜集整理更多的资料和文献，欢迎阅读由公务员之家整理的十篇范文，供你借鉴。
篇1
世纪佳缘是个比较垂直化的服务商。目前世纪佳缘的主营收入来自世纪佳缘网和手机佳缘两个方向，线下活动和51猎婚两个品牌完全基于线下服务。线下活动是世纪佳缘最早获得现金收入的产品和服务。随着移动互联网步伐的加大，世纪佳缘开始探索移动端的商业模式，力求商业模式的完美化。
婚恋网站的突破口
世纪佳缘成立的十年是典型的互联网创业公司历程。从2003年创立到后来吸收投资，再到商业模式从免费变成收费，再到依托电视媒体、传统媒体和数据报刊的宣传，通过多种途径进行推广和传播。
世纪佳缘的大数据核心是9200万左右的注册用户，其中会员占10%。有了这样的数据，世纪佳缘在移动端的用户量就得到了保障，所以世纪佳缘手机家园的重心就放在了LBS位置服务。
“说到位置，我们不得不提到国外的Foursquare和Color，这两者不管是从之前的签到服务，还是到现在的无线支付，国内很多团队都在争相模仿。不同的是，Color从媒体方面获得报道，在产品没上市之前就得到了投资人的亲睐，获得了大概几千万美元的投资。其实Color还是一个典型的技术流产品，两年前的产品创新和概念都是获得投资人亲睐的关键点，这也是世纪佳缘移动端目前要努力的方向”，司说。
移动端的LBS即通过手机的传感器获得用户环境，通过环境，无论是图片、声音还是辅助的GPS定位，都能获得用户在近场内的数据位移，由此产生近场定位的概念。司指出，到目前为止国内团队很少能看到精准位置服务的产品。现在来看，国内很多产品经理在设计产品时一是区别借鉴，借鉴一些新的经验，在原有的产品上做些优化。另外，根据用户的数据做些微创新。
世纪佳缘在基于位置服务方面，把位置服务划分成五个纬度：第一是低于坐标的点，就是每个GPS坐标点基于点行程的轨迹。基于这种散点行程面积的区域以及加上时间后，可以判断用户的行为；再加上空间的三维坐标和真实场景，就可以定位在某个纬度上。
司表示，很多基于位置的产品都是基于点坐标去扩展，而基于轨迹的目前有一些偶遇性的产品或者叫匹配产品。机遇轨迹交叉是说两个用户相遇时会有一个交叉点；基于区域是指虽然在真实场景里两人没有互相关注，但事实上两人却处于一个很近的位置。同一个位置在现实生活中可能无法达成见面的效果，但基于世纪佳缘的位置数据可以让用户实现这个效果。
移动端服务定位为重
基于位置的服务一般选择多为列表，或者采用地图模型呈现，但是这种模式的视觉冲击力不够。为了弥补产品在视觉上的缺陷，世纪佳缘采用了大幅的表现方式，即有思想上的沟通，又有视觉上的沟通。
基于位置的轨迹服务，目前技术能够达到的程度离用户的真实场景差别还很大。其实用户的真实场景通过目前的技术手段只有加大获取位置的频次，或者拉长获取位置的时间才可以尽量还原。但这种做法会带来一些弊端。第一会影响用户体验，第二会加剧用户的流量消耗。所以基于轨迹的位置服务目前来看还没有达到真正理想的环境。
篇2
挂职锻炼半年来，我对司法行政工作有了更新的认识、更深的了解。身处这样一个开拓奋进的集体,我时刻面临着压力和挑战,工作丝毫不敢懈怠。挂职锻炼近半年来，在分管领导的直接带领下，我和社矫科的同志一道创造性地开展工作，召开了公、检、法、司分管领导及相关部门负责人参加的社区矫正工作联席会议，营造了各方齐抓共管、注重实效的良好氛围；加强与县检察院对接，实现了监外执行人员信息共享，落实监管安全责任；加大集中教育的力度，会同县检察院监所科在山阳镇开展社区矫正对象集中法纪教育试点活动，并在全县推广，增强了社区矫正对象的法纪意识；成立县社区矫正教育（心理矫正）中心，并从县卫生局、职业技术学校聘请了两名具有心理咨询师资格的工作人员，为社区矫正对象提供心理咨询与救助服务，提高了社区矫正教育、改造质量；利用省厅拨付社区矫正专项资金的契机,及时制定出台了《社区矫正百分考核办法》，将对社区矫正工作的考核与社区矫正专项经费挂起钩来，强化了考核的力度；针对一些社区矫正对象不报到入矫、逃避矫正的现状，积极撰写了《社区矫正入矫工作漏洞及立法思考》的调研文章，建议尽快立法堵塞漏洞，以此来进一步指导实际工作；分别不同对象,先后去南通、镇江监狱对宝应籍在押犯人开网展多形式的延伸帮教工作，帮教效果明显，受到狱方的热烈欢迎。以上工作在接受市局年终检查时，得到了市局领导的充分肯定。
我对自己挂职锻炼的要求是：首先，摆正位置。挂职锻炼是一个难得的机遇，更是一次终生难忘的经历。挂职不是镀金，不是享受，而是学习，更是锻炼。“挂职”是一种特殊身份，代表的不只是自己的形象，更是组织的形象。因此在实际开展工作时，我注意对自己进行准确定位。一方面,协助分管领导为开展好全县的社区矫正和安置帮教工作而发挥积极的组织、协调、领导作用；另一方面，将自己看成社区矫正科的一员，主动参与社区矫正的各项具体工作，分解科长的工作责任和压力。其次,转变角色。挂职锻炼是一种新的工作体验，需要学习、思考与实践的有机结合。随着工作环境、工作对象的变化，我注意适时转变自己的工作角色和工作方式,适应从强权部门向弱权部门工作的转变。以前我一直从事反贪侦查工作，以查处经济犯罪为主要工作内容，工作对象相对处于劣势地位，让别人适应自己的情形非常明显；现在从事司法行政管理工作，特别是身处局机关，更多的是要考虑大局利益，为基层司法所正常开展工作搭建平台、创造有利的外部环境和为地方经济建设提供法律服务是现在的主要工作内容，工作对象彼此地位平等，要我主动去适应别人的情形相对比较突出。正因为我事先思想准备充分，因而实际开展工作时能够得心应手。
挂职锻炼半年来，我对司法行政工作有了更新的认识、更深的了解，既解放了思想，更新了观念,开阔了眼界，丰富了经验,增长了才干;同时也认识到自己还存在差距和不足。一年的挂职时间已经过半，在感叹光阴易逝的同时，更感到了一种责任感和危机感。社区矫正、安置帮教工作关系到全县的社会稳定，任重道远，且社区矫正目前尚处于试点阶段，无现成经验可言。俗话说：“机遇与挑战并存！”接下来，我必须始终保持奋发有为的精神状态，始终保持蓬勃朝气、昂扬锐气和浩然正气，围绕局制定的“一条主线、四个重点”的工作思路,在社区矫正工作中不断探索，积极思考，打造亮点特色,为全局争创“全省优秀司法局”的目标作出自己应有的努力，为全县经济社会的和谐稳定奉献自己绵薄的力量。
篇3
挂职锻炼半年来，我对司法行政工作有了更新的认识、更深的了解。身处这样一个开拓奋进的集体,我时刻面临着压力和挑战,工作丝毫不敢懈怠。挂职锻炼近半年来，在分管领导的直接带领下，我和社矫科的同志一道创造性地开展工作，召开了公、检、法、司分管领导及相关部门负责人参加的社区矫正工作联席会议，营造了各方齐抓共管、注重实效的良好氛围;加强与县检察院对接，实现了监外执行人员信息共享，落实监管安全责任;加大集中教育的力度，会同县检察院监所科在山阳镇开展社区矫正对象集中法纪教育试点活动，并在全县推广，增强了社区矫正对象的法纪意识;成立县社区矫正教育(心理矫正)中心，并从县卫生局、职业技术学校聘请了两名具有心理咨询师资格的工作人员，为社区矫正对象提供心理咨询与救助服务，提高了社区矫正教育、改造质量;利用省厅拨付社区矫正专项资金的契机,及时制定出台了《社区矫正百分考核办法》，将对社区矫正工作的考核与社区矫正专项经费挂起钩来，强化了考核的力度;针对一些社区矫正对象不报到入矫、逃避矫正的现状，积极撰写了《社区矫正入矫工作漏洞及立法思考》的调研文章，建议尽快立法堵塞漏洞，以此来进一步指导实际工作;分别不同对象,先后去南通、镇江监狱对宝应籍在押犯人开网展多形式的延伸帮教工作，帮教效果明显，受到狱方的热烈欢迎。以上工作在接受市局年终检查时，得到了市局领导的充分肯定。
我对自己挂职锻炼的要求是：首先，摆正位置。挂职锻炼是一个难得的机遇，更是一次终生难忘的经历。挂职不是镀金，不是享受，而是学习，更是锻炼。“挂职”是一种特殊身份，代表的不只是自己的形象，更是组织的形象。因此在实际开展工作时，我注意对自己进行准确定位。一方面,协助分管领导为开展好全县的社区矫正和安置帮教工作而发挥积极的组织、协调、领导作用;另一方面，将自己看成社区矫正科的一员，主动参与社区矫正的各项具体工作，分解科长的工作责任和压力。其次,转变角色。挂职锻炼是一种新的工作体验，需要学习、思考与实践的有机结合。随着工作环境、工作对象的变化，我注意适时转变自己的工作角色和工作方式,适应从强权部门向弱权部门工作的转变。以前我一直从事反贪侦查工作，以查处经济犯罪为主要工作内容，工作对象相对处于劣势地位，让别人适应自己的情形非常明显;现在从事司法行政管理工作，特别是身处局机关，更多的是要考虑大局利益，为基层司法所正常开展工作搭建平台、创造有利的外部环境和为地方经济建设提供法律服务是现在的主要工作内容，工作对象彼此地位平等，要我主动去适应别人的情形相对比较突出。正因为我事先思想准备充分，因而实际开展工作时能够得心应手。
挂职锻炼半年来，我对司法行政工作有了更新的认识、更深的了解，既解放了思想，更新了观念,开阔了眼界，丰富了经验,增长了才干;同时也认识到自己还存在差距和不足。一年的挂职时间已经过半，在感叹光阴易逝的同时，更感到了一种责任感和危机感。社区矫正、安置帮教工作关系到全县的社会稳定，任重道远，且社区矫正目前尚处于试点阶段，无现成经验可言。俗话说：“机遇与挑战并存!”接下来，我必须始终保持奋发有为的精神状态，始终保持蓬勃朝气、昂扬锐气和浩然正气，围绕局制定的“一条主线、四个重点”的工作思路,在社区矫正工作中不断探索，积极思考，打造亮点特色,为全局争创“全省优秀司法局”的目标作出自己应有的努力，为全县经济社会的和谐稳定奉献自己绵薄的力量。
篇4
【摘要】 目的 探讨急性下壁心肌梗死心前导联ST段压低的意义。方法 对87例急性下壁心肌梗死中有冠脉造影的26例病人心前导联ST段改变与冠脉血管病变的关系进行比较分析。结果 以CPK峰值、左室射血分数、多支血管病变数为指标进行了统计对照，差异有非常显著性（P值分别为P<0.001、P<0.001、P=0.0077）。结论 急性下壁心肌梗死心电图心前导联ST段压低可能成为预测病人有多支血管病变的一项指标。
关键词 急性下壁心肌梗死 ST段压低 心电图
急性下壁心肌梗死早期心前导联对应性ST段压低的临床意义和发生机制各文献报道不一。本文从87例急性下壁心肌梗死中有冠脉造影的26例病人心前导联ST段改变与冠脉血管病变的关系进行了比较分析。
1 资料与方法
1.1 一般资料 选择2000～2001年收住冠心病监护室87例急性下壁心肌梗死病人，所有病人均符合WHO诊断标准。其中有心前导联ST段压低者68例（78%），无ST段压低者19例（22%）。68例中有冠脉造影的18例（组Ⅰ）:15例为多支血管病变，3例单支血管病变;19例中有冠脉造影 的8例（组Ⅱ）:2例为多支血管病变，6例单支血管病变。组Ⅰ平均年龄（61±6.5）岁，组Ⅱ平均年龄（54.1±9.6）岁。
1.2 方法 （1）心电图选择:为入冠心病监护室即刻描记的一帧心电图。（2）对应性ST段压低的测量:V 1～6 导联至少2个相邻导联QRS综合波J点0.08秒ST段水平或斜行下移>1mm ［1］ 。（3）多支血管病变:冠脉造影有2支或2支以上血管腔径狭窄≥70% ［2］ 。
2 结果
两组间的年龄、CPK峰值、左室射血分数、多支血管病变例数的比较见表1。
表1 急性下壁心肌梗死心前对应导联ST段压低组与无ST段压低组各因素比较表 （略）
3 讨论
急性下壁心肌梗死病人心前导联ST段压低发生率71.9%～87.5% ［3，4］ 。本文87例中68例有ST段压低（78%），与文献一致。近年来关于急性下壁心肌梗死早期伴对应性ST段压低的发生机制颇有争议。Odemyiwa O ［5］ 等对51例下壁心肌梗死病人冠脉造影发现血管病变率及严重程度不因有无对应性ST段改变而有所不同。他们认为急性下壁心肌梗死早期对应性ST段压低可能是梗死部位的电生理改变在心脏对侧面的反映（镜像反映），不能预测相应区域的冠状动脉有严重病变。Croft ［6］ 等对47例下壁心肌梗死病人心电图分析发现，心前导联ST段压低与下壁导联ST段抬高数呈正相关，与上述观点一致，而Shan ［7］ 等以平衡法放射核素心室造影对急性下壁心肌梗死研究发现，有对应性ST段压低者比无ST段压低者左室射血分数明显降低。Katz ［4］ 等研究的结果是下壁心肌梗死伴对应性ST段压低血清心肌酶水平显著高于无ST段压低者。本文组Ⅰ左室射血分数显著低于组Ⅱ（P<0.001），组ⅠCPK峰值显著高于组Ⅱ（P<0.001），与文献报道相似。
Roubin GS ［2］ 等对84例下壁心肌梗死病人冠脉造影观察到伴前间壁ST段压低的多支血管病变率高（53%），左前降支狭窄发生率也高（36%）。他们认为下壁心肌梗死伴前间壁ST压低者多为多支血管病变或供应梗死区的血管供应区域较大，而不伴有对应性ST段压低者可排除多支血管病变。认为对应性ST段压低是远离梗死部位的心肌缺血。其发生机制可能是梗死部位血管闭塞后，经其侧支流向对应部位的血流减少或通过“窃血现象”使相对应部位血流经侧支流向梗死区增加。本文组Ⅰ15例为多支血管病变（83%），显著高于组Ⅱ的2例多支血管病变（25%）（P=0.0077）。与文献 ［2］ 相符。急性下壁心肌梗死伴心前导联ST段压低对于识别多支血管病变的敏感性、特异性、阳性预测值和阴性预测值分别为88%、83%和75%。
另外，本文下壁心肌梗死伴对应性ST段压低病人的平均年龄显著高于无ST段压低的病人（P<0.02）。提示ST段压低和多支血管病变发生率可能在老年下壁心肌梗死时多见。总之，急性下壁心肌梗死伴对应性ST段压低时不只是心电图在远隔导联的“镜像反映”，可能同时提示有广泛心肌缺血和多支血管病变的存在。所以，急性下壁心肌梗死心电图心前导联ST段压低可能成为预测病人有多支血管病变的一项指标。
参考文献
1 Strasberg B.Important of reciprocal ST segment depression in Leads V 5 and V 6 as an indicator of disease of the left anterior descending coronary in acute inferior wall myocardial infarction.Br Heart J，1990，63:339.
2 Roubin GS.Anterolateral-ST segment depression in acute inferior myˉocardial infarction;angiographic and clinical implications.Am Heart J，1984，107:1177.
3 Tzironi D.Reciprocal electrocardiographic changes in acute myocardial infarctiom.Am J cardial，1985，56:23. 4 Katz R.The actiology and prognlstic plicution of reciprocal electrocarˉdiograp changes in acute myocardial infarction.Br Heart J，1986，55:423.
5 Odcmuyiwa O.Reciprocal ST deprssion in acute myocardial infarction.Br Heart J，1985，54:479.
篇5
关键词：垄断 滥用市场支配地位 价格歧视
一、引言
2011 年 11 月 9 日，中央电视台新闻节目报道了国家发改委已针对中国电信和中国联通在电信宽带接入市场的价格歧视问题进行了相关反垄断调查的新闻，可谓一石激起千层浪。进入21世纪以来，中国电信行业改革由于加入WTO以及社会主义建设的需要而显露出许多新的问题。比如说，中国电信与联通之间虽然存在着一定的竞争关系，但是由于二者之间存在着严重的分割市场的地区性垄断，竞争的激烈性并不尽如人意。同时由于它们为了维护其现有地位，不断地利用其牢牢占据着电信市场的上游的供货商优势，对于那些与其主营业务存在着一定竞争关系的中小企业设置障碍，通过拉高中小宽带接入商经营成本等方式迫使这些中小企业最终退出宽带接入市场。
二、 市场支配地位的判定
市场市场支配地位又称控制市场地位或市场控制地位，我国的《反垄断法》在第十七条对其作出了明确的解释：“指经营者在相关市场内具有能够控制商品价格、数量或者其他交易条件，或者能够阻碍、影响其他经营者进入相关市场能力的市场地位。”该定义将构成市场支配地位的两个条件作为选择性条件：一是企业在市场中的地位，即能够控制商品价格、数量或者其他交易条件；二是对竞争的影响，即能够阻碍、影响其他经营者进入相关市场。 而我国《反垄断法》对市场支配地位推定制度及其适用原则也作了规定。根据有关规定：只有一个经营者在相关市场的市场份额达到二分之一的；两个经营者在相关市场的市场份额合计达到三分之二的；三个经营者在相关市场的市场份额合计达到四分之三的。而其中并没有某个经营者市场份额不足十分之一的，则可以推定该经营者（们）具有市场支配地位。而根据国家发改委的调查统计，在宽带接入领域中国电信和中国联通所占的市场份额已经超过了三分之二，其中中国电信的市场份额为37%而中国联通的市场份额则为29%。已经到了相关法律要求可以推定中国电信和中国联通在互联网宽带接入领域是具有市场支配地位的。
三、滥用市场支配地位的判定
我国反垄断法明确规定了7种滥用市场支配地位的情型，中国电信和中国联通的行为主要涉及到反垄断法第十七款第六条的规定：即无正当理由，对具有相同条件的交易相对人在交易产品或者服务价格等交易条件上实行了不公正待遇。作为电信行业的主要宽带接入服务供应商，中国电信与中国联通对企业和个人实行差别定价，两大寡头为了维持垄断地位在卖给中小宽带服务商和自家用户相同流量时，却给出了不同价格，前者是后者的2-3倍以上。据有关媒体报道，中国电信和中国联通给予长城宽带、铁通等这些中小互联网接入服务的提供商的价格十分高昂，最高达到了1000Mbit/月 100 万的。与此同时，他们卖给自己的用户的价格仅仅只有每个月30万左右。众所周知，在正常的市场交易中批发价是要低于零售价的，因为只有这样零售商才能保证其利润空间，也只有这样整个市场才会更长远健康的发展。而像中国电信、中国联通这样批发价几倍于零售价，这样的现象无论如何都是不科学的。两大寡头对这些中小宽带服务商除了采取了价格歧视以外，它们还借助其处于宽带接入市场的主要供应商地位，限制下游的中小宽带服务提供商的竞争者的网络速度。对此行为中国铁通和长城宽带也想出了一些办法，比如：不直接向电信和中国联通租用电信骨干网络的宽带，而是向两大寡头的大客户进行转租，以达到降低成本的目的。而中国电信察觉到这种行为后，认为随着竞争对手的主营业务成本的下降其竞争能力日益增强，会威胁到自身的市场垄断地位，就展开了针对铁通、长城宽带的穿透流量清理行动。此举导致广东省全省范围内出现了大范围断网的现象，直接影响到了广大普通宽带接入用户的利益，投诉者高达上万人。据此我们推定中国电信与联通二者在宽带接入领域存在着滥用市场支配地位、价格歧视、限制竞争等垄断行为。
四、垄断的后果及治理
根据上述结论可以得出：中国电信和中国联通二者在互联网宽带接入领域具有市场支配地位，且具有滥用其市场支配地位的行为，而这种滥用市场支配地位的行为是法律所不允许的。但是我们也要认识到，中国电信和中国联通的这种垄断地位，是由于中国电信体制改革而导致的，价格歧视行为则是两家企业的市场行为，有关部门应当给予二者相应的行政处罚，维护正常的市场交易秩序。其次，为了消除电信和联通滥用市场支配地位所带来的不利影响本人认为还应采如下措施：首先，加强互联网行业之间的互联互通。当前互联网行业之间壁垒严重，这主要是因为当年我国实行电信行业改革中使用的拆分切割方式形成的。其次，继续增加电信行业中的经营者数量，进一步加强电信市场中的竞争氛围，放宽电信行业的进入限制。最后，继续深化电信行业的改革。当前中国的电信行业迅猛发展最大的源动力在于我国不断深化改革所带来的改革红利，只有继续深化改革才能从源头上解决我国电信行业改革过程中所带来的一系列问题，“革命尚未成功，同志仍需努力！”
参考文献：
[1]初佳颖.政府规制下电信产业的技术效率分析[J].经济纵横，2006，（4）
[2]戚肇东等著.自然垄断产业改革国际经验与中国实践[M].中国社会科学出版社 ，2009.
篇6
[关键词] 氯吡格雷；阿司匹林；非ST段抬高型心肌梗死；临床观察
[中图分类号] R972 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721（2012）06（a）-0065-02
Clinical observation of clopidogrel and aspirin in the treatment of non ST segment elevation myocardial infarction
LI Mingyu
The People''s Hospital of Tumen City in Jilin Province, Tumen 133100, China
[Abstract] Objective To observe the clinical curative effect of clopidogrel combined with aspirin in the treatment of non ST segment elevation myocardial infarction. Methods Ninty six patients were randomly divided into the treatment group 50 cases and control group of 46 cases, based on the routine treatment, the treatment group were treated with clopidogrel 75 mg daily (the first dose of 300 mg), aspirin 100 mg daily, the control group was only given aspirin 100 mg, observed for 4 weeks, the clinical efficacy and adverse reaction of two groups patients were observed. Results After 4 weeks treatment, the total effective rate of the treatment group was 85.7%, the control group was 63.3%, the two groups had significant difference (P < 0.05). Conclusion The clopidogrel and aspirin in the treatment of non ST segment elevation acute myocardial infarction is effective in reducing cardiovascular events, has good curative effect, less adverse reaction, it is worthy of popularization and application.
[Key words] Clopidogrel; Aspirin; Non ST segment elevation myocardial infarction; Clinical observation
冠状动脉粥样硬化性心脏病指由于冠状动脉粥样硬化管腔狭窄、痉挛或阻塞导致心肌缺血、缺氧或坏死而引起的心脏病，它是动脉粥样硬化导致器官病变的最常见类型[1]。急性心肌梗死由于冠状动脉急性狭窄或闭塞，供血持续减少或终止，所产生的心肌严重缺血和坏死。分为ST段抬高型心肌梗死和非ST段抬高型心肌梗死，治疗上在严格掌握适应证的情况下及早进行溶栓、介入治疗与外科手术治疗基础上，积极抗凝、抗血小板治疗尤为重要，并能明显降低患者心血管事件、脑梗死、再发心肌梗死，提高远期疗效、生活质量。本文旨在观察氯吡格雷与阿司匹林联合治疗非ST段抬高型急性心肌梗死的临床疗效。
1 资料与方法
1.1 一般资料
选择本院心内科2010年6月～2011年4月住院诊治的非ST段抬高性心肌梗死患者96例，具有典型的胸痛，时间大于30 min，血清肌酸激酶（CK）增高；心肌坏死标志物升高；心电图表现ST段明显压低0.4～0.6 mV，T波倒置。入选前均未服用氯吡格雷，将96例患者随机分为治疗组50例，其中，男35例，女15例，平均年龄（60±8）岁，吸烟3例、高血压4例、糖尿病3例、血脂异常2例；对照组46例，男28例，女18例，平均年龄（65±7）岁，吸烟者4例、高血压3例、糖尿病3例、血脂异常2例；两组患者在吸烟、性别、高血压、糖尿病、血脂异常、心功能等方面差异无统计学意义（P ＞ 0.05），具有可比性。
1.2 方法
两组患者均接受常规治疗，包括阿司匹林片、硝酸酯类、血管紧张素转换酶抑制剂、β受体阻断剂、他汀类以及注射低分子肝素5 000 U，每12小时1次，连用7 d。治疗组在此基础上给予氯吡格雷每日75 mg（首剂300 mg），对照组仅给予阿司匹林100 mg，观察比较两组在治疗期间内心脑血管事件（包括心绞痛复发、ST段抬高型急性心肌梗死、心源性猝死、缺血性脑卒中）的情况，以及药物不良反应。
1.3 临床疗效评定标准
显效：症状消失或心绞痛发作次数减少85%，心电图缺血或损伤性改变恢复正常；有效：心绞痛发作次数减少55%～85%，心电图压低的ST段回升0.5 mV以上；无效：心绞痛的发作次数减少55%，心电图ST段下移较入院时改善。总有效为显效加有效。
1.4 统计学处理
采用SPSS 11.5软件进行统计学处理。计量资料以x±s表示，进行t检验，计数资料采用χ2检验。P < 0.05为差异有统计学意义。
2 结果
住院治疗4周后，治疗组50例中，显效35例，有效9例，无效6例，总有效率为88%；对照组46例中，显效21例，有效8例，无效17例，总有效率为63%。两组比较差异有统计学意义（P < 0.05）。
再发非致死性心肌梗死治疗组2例，对照组5例；心律失常治疗组2例，对照组4例；心力衰竭治疗组1例，对照组5例；心血管性死亡治疗组1例，对照组3例；两组心泵功能治疗组好于对照组。
4周内两组均未出现严重出血、胃肠道反应，治疗组较对照组发生率低，骨髓抑制、皮疹无显著差异。
3 讨论
心肌梗死是心肌缺血性坏死，在冠状动脉病变的基础上发生冠状动脉血供急剧减少或中断，使相应的心肌严重而持久地急性缺血所致[2]。冠状动脉病变或粥样硬化斑块的慢性进程，即使可导致冠状动脉严重狭窄甚至完全闭塞，由于侧支循环的渐渐形成，通常不易产生心肌梗死，相反冠状动脉的粥样硬化病变在进展过程中即使狭窄程度不重，当侧支循环尚未建立，狭窄的冠状动脉管腔内有血栓形成，心肌血供急剧下降，中断使心肌持久缺血达30 min以上，即可发生心肌梗死。急性心肌梗死起病急而凶险，死亡率高，预后差，是冠心病极其危重的表现类型，已成为危害健康的重大的卫生问题[3]。
目前治疗急性心肌梗死主要是及早进行血运重建，尽早恢复冠状动脉的血流和增加心肌的灌注，以挽救濒死的心肌、防止梗死范围扩大、缩小心肌缺血范围，保护心脏功能。但基于血栓形成的病理生理，抗血栓形成也是AMI治疗的重要环节之一[4]。
临床上已将血小板聚集的药物列为治疗AMI的常规用药。氯吡格雷与阿司匹林都有抗血小板聚集作用。氯吡格雷通过选择性抑制ADP和血小板受体的结合，抑制ADP介导的血小板活性，抑制血小板聚集，也通过其代谢产物发生作用。氯吡格雷起效快，口服后代谢产物在2 h达到抗血小板的高峰[5]。阿司匹林又名乙酰水杨酸，作用机制主要通过抑制血小板环氧化酶，阻止活化四烯酸代谢合成血栓素，选择性抑制通过血栓素A2（TXA2）途径诱导的血小板聚集。阿司匹林的这种抑制作用持久不可逆，一次用药抑制作用可持续近7 d，直到骨髓细胞产生新的血小板才能重新合成TXAt2。但由于更新10%的血小板即可使血小板功能低下的状态恢复，故仍需每日服用才能维持疗效。阿司匹林口服后吸收迅速，胃肠道吸收，血浆浓度在1～2 h达高峰，半衰期为18～20 min[6]。氯吡格雷耐受性好，无阿司匹林胃肠道反应。
本文中氯吡格雷与阿司匹林联合治疗非ST段抬高型急性心肌梗死有效降低治疗期间心脑血管事件，再发非致死性心肌梗死、心律失常、心力衰竭、心血管性死亡和心肌梗死复发率减少36%，而严重并发症未增加，值得临床借鉴。
[参考文献]
[1] 陈灏珠，何梅先，魏盟,等. 实用心脏病学[M]. 上海：上海科学技术出版社，2007：856.
[2] 赵水平，胡大一. 心血管病诊疗指南解读[M]. 北京：人民卫生出版社，2008：210.
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[5] 余枢，马业新. 心血管病诊疗指南[M]. 北京：科学出版社，1999：88.
篇7
[关键词] 非ST段抬高性心肌梗死 ；参麦 ；灯盏花
[中图分类号]R544.2+2 [文献标识码] B[文章编号]1673-9701（2011） 27-66-02
Effects of Combination of Shenmai and Erigeron Breviscapus in Treatmentof Patients with non-ST Segment Elevation Acute Myocardium Infarction
ZHANGPing
Department of Cardiology, Zhangzhou City People’s Hospital in Fujian Province, Zhangzhou,363000,China
[Abstract] Objective To investigate the efficacy and safety of integrated chinese traditional and western medicine therapy innon-ST-segment elevation acute myocardial infarction（NSTEAMI）. Methods Fifty-six patients with NSTEAMI were randomly and equally divided into treatment group which received shenmai and Erigeron Breviscapus combined with low-molecula-weight heparin, aspirin and clopidogrel and other therapy, and the control group which received placebo combined with the same therapy. The changes of the main adverse cardiovascular events（MACE）were observed after 7 days, 1 month, and adverse drug effect were observed. ResultsCompared with those of the control group, the patients in treatmeant group showed the endpoint events and MACE incidence decreased （P ＜0.05）There were no serious adverse drug effects. Conclusion Shenmai and Erigeron Breviscapus combined with routine therapy is effective and safe in the treatment of NESTEAMI.
[Key words]Non-ST-segment elevation acute myocardial infarction；Shenmai；Erigeron breviscapus
急性心肌梗死是一种严重危害人类健康的疾病，致残、致死率高。目前西医采用急诊介入治疗，使该病的预后明显改善，但因患者的个体差异、经济条件和基层医院的技术条件所限，不能得到相应的治疗。本研究根据当地的实际情况，对NSTEAMI患者采用中西医结合治疗，取得较满意疗效，报道如下。
1资料与方法
1.1一般资料
选择2004年3月～2009年12月我院内科住院急性NSTEAMI患者56例，符合NSTEAM I诊断[1]，排除药物过敏及有抗凝治疗禁忌证者。将患者按就诊顺序采用双盲、随机、平行对照试验原则，分为对照组和受试组各28例。对照组男14例，女14例，年龄（63. 6±9.5）岁；受试组男15例，女13例，年龄(64.0±9.6)岁。所有患者能够完成整个实验，两组性别、年龄、血压、血脂、血糖、心功能、血清心肌标记物等各项指标均无明显差异（P＞0.05）。见表1 。
表1两组一般资料的比较
组别 n 梗死部位 入院情况
前壁 下壁 前壁+下壁其他 低危中危高危
对照组 2814 5 2 7 324 1
受试组 2813 6 3 6 2 25 1
1.2治疗方法
对照组给予阿司匹林、低分子肝素、β受体阻滞剂、对无β受体阻滞剂反指征的患者加用美托洛尔[2]ACEI及调脂等西医常规治疗。受试组在对照组基础上加用参麦注射液（四川雅安三九药业有限公司生产，国药准字Z51020665）40mL及灯盏花粉针（昆明龙津药业有限公司生产，国药准字Z20053907）50mg分别加入0.9%氯化钠注射液250mL静滴，每日1次，连用2周后改口服同类药物4周。
1.3观察指标
观察两组间的主要不良心脏事件发生情况。
1.4统计学处理
应用SPSS13.0统计软件对数据进行分析。两组之间差异的比较采用χ2检验， P＜0.05有统计学意义。
2结果
2.1两组主要终点事件发生情况比较
见表2 。
表2两组终点事件比较
组别 心力衰竭 心律失常 心源性休克病死例
对照组 15 15 4 3
受试组 7* 6* 2 0
注：与对照组比较具有统计学意义（*P＜0.05）
2. 2两组主要不良心脏事件发生情况比较
见表3 。连续观察1个月,受试组无1例死亡, 并发心力衰竭、心律失常及再发心绞痛发生率较对照组降低（P＜0.05），主要不良心脏事件联合终点发生率较对照组显著降低（P＜0.01）。两组均无不良反应发生。
表3 两组主要不良心脏事件发生情况
组别 n 再发心绞痛 再发心肌梗死死亡 联合终点
对照组
1周288 2 2 10
1个月26 11 3 3 17
受试组
1周28 2* 1 0 2**
1个月28 3* 2 0 5**
注：与对照组比较具有统计学意义（*P＜0.05，**P＜0.01 ）
3讨论
NSTEAMI在中医学属“胸痹”、“真心痛”范畴，系心之气血阴阳不足导致气滞、血瘀、痰浊、寒凝等阻遏胸阳，闭塞心络，痹而作痛。治疗上主张行气通脉、活血化瘀。
本研究结果显示，与单纯用西医治疗的对照组比较，参麦和灯盏花联合西医治疗NSTEAMI，可改善心功能、减少心律失常和心源性休克的发生，并降低心绞痛和心肌梗死再发率及死亡率，并未发现不良反应。机制如下：参麦由人参和麦冬两味药组成。现代医学研究表明，人参减轻线粒体损伤、促进心肌细胞DNA合成，对缺血、缺氧时代谢和超微结构损伤均有保护作用，并促进心肌毛细血管内皮细胞释放NO，扩张冠脉血管，使心肌收缩力增强，从而改善心肌收缩功能[3，4]。麦冬能改善心肌细胞的能量代谢，抑制缺血心肌氧自由基生成和清除氧自由基、保护心肌细胞膜，显著提高动物的耐缺氧能力和增加冠脉流量，对心肌缺血有明显保护作用，并能抗心律失常及改善心肌收缩力[5，6]。因此，参麦具有扩张冠脉、改善心肌代谢、增强机体耐缺氧能力。而灯盏花能降低心肌氧摄取率、外周阻力，增加心肌血液供应，改善缺血心肌代谢，抑制血小板聚集及血栓形成，对缺血损伤心肌具有保护作用[7]。参麦和灯盏花二者联用，药性相辅相成，起到改善心肌血供、抗心律失常及改善心功能之功效，达到提高生活质量、降低病死率之目的。
在治疗过程中所有患者未出现药物不良反应，提示参麦和灯盏花联合西医治疗NSTEAMI安全有效，值得在临床上进一步探讨和实践。
[参考文献]
[1] 中华医学会心血管病学分会，《中华心血管病杂志》编辑委员会，《中国循环杂志》编辑委员会.急性心肌梗死诊断及治疗指南[J].中华心血管病杂志，2001，29（12）:710.
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[3] 王皓光，谷春华，姜凤.参麦注射液配合西药抢救急性心肌梗塞合并心源性休克23例临床小结[J].中国中医急症，1999，8（2）:72-74.
[4] 张静舒血宁、参麦注射液治疗急性心肌梗死的临床观察[J].中国医药导报，2008，5（8）：75-76.
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篇8
【关键词】 st段抬高型急性心肌梗死；重组链激酶；溶栓治疗
【摘要】
目的 探讨国产重组链激酶治疗st段抬高型急性心肌梗死(stemi)的临床疗效。方法 选取126例stemi患者使用国产重组链激酶(150万u,60 min内)溶栓治疗。结果 再通率为84.1%，4周内总病死率5.6%, 无1例发生颅内出血。结论 国产重组链激酶静脉溶栓治疗stemi冠脉血管再通率高，相对安全、有效。
【关键词】 st段抬高型急性心肌梗死；重组链激酶；溶栓治疗
河北省玉田县医院从2005年1月至2009年12月采用青岛国大生物制品股份有限公司生产的国产基因重组链激酶(recombined streptokinase，rsk) 进行静脉溶栓治疗st段抬高型急性心肌梗死（stemi）患者126例，尽早开通闭塞的血管，并进行临床观察，观察其临床疗效和不良反应,并对其安全性做出评价，报告如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料
126例均为我科冠心病监护室（ccu）患者，资料完整，首发急性心肌梗死（ami），其中男86例，女40例；年龄34～74岁。wwW.133229.cOM前壁心肌梗死30例，前间壁心肌梗死14例，广泛前壁心肌梗死24例，下壁心肌梗死40例，同时合并正后壁、右心室梗死18例。均符合胸痛持续≥30min，心电图两个或两个以上相邻导联st段抬高(胸导联≥0.2 mv，肢导联≥0.1 mv)，起病时间<6 h，年龄<75岁，并除外以下疾病：出血性脑卒中病史及1年内发生过缺血性脑卒中或脑血管事件；颅内肿瘤；近2～4周有活动性内脏出血；可疑为主动脉夹层；入院时严重且未控制的高血压(>180/110 mm hg，1 mm hg=0.133 kpa)或慢性严重高血压病史；使用治疗剂量的抗凝药物或已知有出血倾向；近2～4周创伤史或近3周大手术史；近2周有不能压迫部位的大血管穿刺术史；严重肝、肾功能损害；孕妇。
1.2 方法
符合入选条件的患者，溶栓前常规记录十八导联心电图，急查血常规、凝血、心肌酶、肌钙蛋白i、肾功能、血糖、电解质。取标本后即开始溶栓：即刻嚼服阿司匹林300 mg，以后300 mg/d，5 d后改为100 mg/d长期服用；在60 min内静脉滴注重组链激酶150万u。溶栓后12 h根据监测活化全血凝固时间(aptt)，纤维蛋白原(fib)，若aptt缩短至正常值的1.5～2.0倍，fib＞1 g/l，可给予低分子肝素钠（克塞）0.4 ml皮下注射，每12小时 1次,共7 d，常规应用硝酸酯类药物（持续静脉泵入，但右心室心肌梗死慎用），酌情选用β受体阻滞剂，血管紧张素转化酶抑制剂(acei)，他汀类调脂药物，抗心律失常药物等，对症处理并发症。
1.3 疗效评价
1.3.1 观察：胸痛减轻及缓解时间；再灌注心律失常；溶栓开始后3 h内每0. 5 小时记录心电图1次，以后7 d内每天记录1次；发病4 h起每2 小时抽血查心肌酶至发病20 h，以后7 d内每天查1次；观察过敏反应，有无低血压、出血等不良反应；观察溶栓治疗4周内并发症及其转归。
1.3.2 根据临床指标判断血管再通率：①心电图抬高的st段在输注溶栓剂开始后2 h内，在抬高最显著的导联st段回降≥50％；②胸痛在输入溶栓剂开始后2～3 h内基本消失；③输入溶栓剂后2～3 h内出现再灌注心律失常；④血清肌酸激酶同工酶mb（ckmb）酶峰提前在发病14 h内或ck酶峰提前在发病16 h内。具备上述4项中2项或以上者考虑再通，但②③组合不能判断为再通［1］。
1.4 并发症
ⅰ～ⅱ度房室传导阻滞(avb)10例，ⅲ度avb 8例，窦性心动过缓16例，室性期前收缩26例，室性心动过速10例，心室颤动4例，心房颤动6例，急性左心衰竭12例，心脏破裂3例。
2 结果
2.1 126例患者中106例达到再通标准，再灌注率84.1%，20例未达到再通标准，占15.9%。其中心源性休克5例、心力衰竭4例，心室颤动4例。死亡7例。4周总病死率5.6%（7/126），均为心脏性死亡。
2.2 不良反应
皮肤黏膜轻度出血6例，牙龈出血13例，胃肠道出血2例，泌尿道出血2例，无颅内出血，心寒颤动4例，发热2例，皮疹2例，低血压7例，过敏反应3例（其中1例死亡）。
3 讨论
ami目前为临床上常见的危及生命的急症，也是心血管内科的危重症，多由于冠状动脉急性血栓形成，引起血供急剧减少或中断，心肌严重而持久地急性缺血所致。治疗stemi关键措施是尽快开通梗死相关冠状动脉，使心肌得到再灌注。再灌注治疗是目前公认的疗效显著而且相对安全的治疗方法，急诊冠状动脉介入治疗（pci）能及时、充分、持续的开通梗死相关血管,是再灌注治疗中最好的方法［2］, 但是对于基层医院和边远农村来说,溶栓治疗仍不失为开通梗死相关动脉的另一有效方法, 它已成为治疗stemi的一项重要手段。对ami溶栓治疗而言，“时间就是心肌，时间就是生命”［3］，从溶栓时间上看［4］，1 h为“黄金时间”，2 h为最佳时间，6 h为规定溶栓治疗时间窗，6～12 h为延迟溶栓，超过12 h溶栓弊大于利。如能在起病6 h内溶栓，可降低病死率30%，若在起病2 h内溶栓，则可降低病死率50%。因此应积极缩短患者入院后至开始溶栓的时间， stemi诊断要及时、准确，心肌标记物检验需要一定时间，若有典型心电图改变，则不必等待生物标记物的结果，患者入院后应立即开始治疗，并提倡院外溶栓，有研究表明，尽早溶栓的疗效是肯定的，但能在起病后2 h内溶栓的仅占总例数的27%，入院后能在1 h内溶栓者仅占40%。早期溶栓治疗能使梗死相关冠脉再通,实现梗死区再灌注,挽救濒死心肌，缩小心肌梗死面积，抑制心室重构，保护心功能，降低严重并发症和病死率、致残率，改善患者近期和远期预后。
目前国内治疗stemi常用的溶栓剂有尿激酶、链激酶和重组组织型纤溶酶原激活剂(rtpa),前者由于再通率相对较低，后者由于价格较昂贵一定程度上限制了它们的使用。本试验采用青岛国大生物制品股份有限公司生产的rsk，它通过在体内与纤溶酶原结合形成复合物，以此激活纤溶酶原形成纤溶酶，后者通过分解纤维蛋白从而溶解血栓［5］。本组病例中我们使用国产rsk静脉滴注治疗stemi，在6 h内溶栓，梗死相关血管再通率为84.1％，高于国内报道的77.1%［6］, 提示rsk为高效的溶栓药物，但随着时间的延长，梗死相关血管再通率下降，说明溶栓应愈早愈好，应尽可能在2 h内溶栓。rsk的不良反应部分是由于其具有抗原性所致［5］。3例严重过敏反应来势汹猛，病情极重，1例死亡，虽不能因此说明rsk严重变态反应发生率高，但必须引起足够的重视，为防止再次出现类似严重的变态反应，我们在此后用rsk溶栓的过程时,对于过敏体质患者，在静脉溶栓前先静脉给予地塞米松5 mg，以防发生过敏反应。本组低血压的发生率为5.6%（7/126），均在溶栓过程中发生，经扩容,静脉滴注多巴胺后短时间内恢复正常，提示低血压的发生与血容量相对不足有关，此结果与文献报道一致［7］。本组资料中所有死亡病例均为溶栓未通者。溶栓治疗过程中容易发生出血并发症，最严重的是颅内出血，只要严格掌握适应证，注意颅内出血危险因素：年龄>75岁，使用纤溶蛋白特异性溶解药物，脑血管病史，低体重者，入院时血压高等，脑出血并发症是可以避免的，本组资料显示无1例脑出血并发症发生，此点显然优于rtpa。从本组资料可以看出，rsk溶栓治疗引起严重心律失常的发生率较高。再灌注心律失常是溶栓成功的标志之一，又是溶栓治疗的重要病发症。溶栓后出现缓慢型心律失常较出现快速型心律失常更具有提示再灌注成功的意义。但通常却难以与自发性非灌注性心律失常相鉴别。不过只要具备ccu的医疗单位, 出现心律失常能做到及时处理，对于一切没有溶栓治疗禁忌证，短时间内又不能接受急诊冠状动脉介入治疗的stemi患者都应积极的给予药物溶栓治疗。本研究表明国产rsk用于stemi静脉溶栓治疗，血管再通率较高，出血等不良反应发生率低，是一安全有效的溶栓药物，具有较高的临床使用价值，值得基层医院推广应用。
【参考文献】
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篇9
【关键词】 食管鳞癌;nf?κb;rna interference;cyclin d1
effect of sirna?mediated inhibition of nf?κb combination with 5?fu on cell cycle of escc cell lines
tian fang1，2，chai yu?rong3，xu pei?rong2，liu hong?tao2，xue le?xun2
1. department of pathophysiology, basic medical college of zhengzhou university, zhengzhou 450052, china，2. laboratory for cell biology，3. department of histology and embryology
corresponding author：xue le?xun，e?mail：abstract：objective rna interference (rnai) was employed to inhibit the expression of p65 and to evaluate the effects of nf?κb signaling pathway as a target for gene therapy in escc cell lines. methods a fluorescein?labeled non?special sirna was used to monitor efficiency in ec9706. ec9706 and eca109 were transfected with 50 nm p65sirna, p65 and cyclind1 protein levels were determined using western blotting. after transfected with or without p65sirna at 72h, cells were tested for nuclear activity of nf?κb using nuclear extracts by emsa. escc cells were treated with or without p65sirna, 5?fu or combinations thereof for 48h. the cells were stained with pi and analyzed cell cycle by flow cytometry. results a fluorescein?labeled non?special sirna was used to monitor efficiency in ec9706, demonstrating nearly 90% transfection efficiency. the protein level of p65 and cyclind1 decreased after transfected with p65sirna at 72h. and p65sirna also suppressed the nf?κb?dna?binding. p65sirna?transfected cells showed an increase in the percentage of cells in the g0/g1 phase and a decrease in the percentage of cells in the s phase. while combination with 5?fu, the results were more prominence. conclusion p65sirna inhibits the constitutively active nf?κb signaling pathway, and downregulats the expression of cyclind1. the strong constitutive nf?κb signaling pathway in escc makes nf?κb a target for the development of novel therapeutic strategies.
key words：esophageal squamous cell carcinoma;nf?kappab;rna interference;cyclin d1
食管鳞癌是一种侵袭性很强的肿瘤，它的预后差，临床进展迅速，多伴有淋巴结转移，且易复发。核因子nf?κb (nuclear factor?kappa b) 是近年来发现的转录调控因子，最常见的形式是由 p50 和p65组成的异源二聚体，在绝大多数静止期的细胞中，nf?κb 与其阻抑物iκbα蛋白相结合，以非活性形式存在于细胞质中。许多刺激物可以通过对iκbα的磷酸化而使其降解，使解离的nf?κb进入到核内并暴露它的核识别位点，从而促进靶基因的转录。活化的nf?κb信号通路可增强肿瘤细胞对放化疗药物的抵抗力，从而产生耐药性。有研究表明，在许多人类肿瘤中nf?κb信号通路的激活在肿瘤的发生发展中起着重要的作用[1?3]。
rna干扰(rna interference，rnai)是由双链rna(double?stranded rna，dsrna)引发的转录后基因静默机制，是目前研究基因功能强有力的工具之一[4]。rnai 的功能是由21～23 个碱基长的短双链rna完成的 ,即sirna(small interference rna ,sirna)，它具有与目的基因互补的序列。目前这一方法被用于体外细胞水平的基因敲除或基因表达抑制,为其成为基因治疗的手段开辟了广阔的前景。本研究拟应用rna干扰技术，使用针对nf?κb信号通路中p65的特异性sirna,观察其对p65表达的抑制作用及联合化疗药5?fu对食管鳞癌ec9706和eca109细胞周期的影响，探讨将nf?κb作为基因治疗靶点的价值。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 细胞系及细胞培养 食管癌细胞系eca109由本室保存，食管癌细胞系 ec9706由中国医学科学院肿瘤医院肿瘤研究所分子肿瘤学国家重点实验室惠赠。两株细胞在含有10%的胎牛血清，100u/ml青霉素，100μg/ml链霉素的1640培养液(gibco公司)中于37 ℃、5% co2 的条件下培养，实验细胞均处于对数生长期。
1.1.2 抗体和试剂 鼠抗人p65(sc?8008)单克隆抗体和兔抗人cyclin d1(sc?753)购自santa cruz biotechnology 公司;细胞核和细胞质蛋白提取试剂盒、生物素3′末端标记试剂盒(89818)、化学发光emsa 试剂盒(78833)均购自 pierce 公司。nf?κb p65 sirna干扰试剂盒购自cell signaling technology公司，碘化吡啶pi购自美国sigma公司。
1.2 方法
1.2.1 sirna的转染及效率检测 按照cell signaling technology公司sirna干扰试剂盒说明书的要求，进行转染。在转染前，ec9706(5×104) 和eca109(6×104)按一定细胞数铺于6孔板中，使用无抗生素的培养基培养24h。将含有sirna的转染试剂或荧光素标记的对照sirna与细胞共孵育5h后，加入新鲜培养基孵育24h。用日本nikon公司显微荧光摄像/照相系统检测荧光素标记的对照sirna在ec9706细胞中的转染效率并照相。
1.2.2 胞浆、胞白的制备 按照细胞核和细胞质蛋白提取试剂盒说明书，分别提取细胞质、细胞白，bradford 法检测蛋白质的含量，-70℃保存。
1.2.3 western blot测定蛋白的表达 转染p65sirna72h后，从ec9706和eca109细胞中取细胞质蛋白，与预染的蛋白质分子量标准一起上样。检测p65和非靶向mapk蛋白表达，及细胞周期蛋白cyclin d1的表达，经12%sds?page分离，电转到硝酸纤维膜上。5%的脱脂奶粉tbst溶液封闭2h，抗体按1∶100 孵育4℃过夜，tbst溶液洗涤10min×3次，硝酸纤维膜分别与辣根过氧化物酶标记的二抗(1∶50 000)室温孵育1h后，tbst溶液洗涤10min×3次，dab显色。实验重复三次。
1.2.4 凝胶电泳迁移率(electrophoretic mobility shift assay，emsa)检测nf?κb与 dna的结合活性 ec9706和eca109细胞转染p65sirna 72h后，收集转染细胞和未转染细胞提取细胞白，检测转染前后p65与dna结合活性的变化，方法如下：采用生物素3′末端标记法将nf?κb探针5′?agt tga ggg gac ttt ccc agg c?3′，3′?tca act ccc ctg aaa ggg tcc g?5′进行标记。将细胞核提取物(10μg)与生物素标记的探针在20μl的缓冲液(10m tris?hcl，ph 8.5，0.5 mm edta，5mm mgcl2，1m kcl，0.05% np?40，2.5% glycerol，1μg/μl poly (di·dc) and 0.2μg/μl bsa)中充分结合，行6%非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳后，采用毛吸转移法转移至带正电荷的尼龙膜上，120mj紫外交联5min。生物素标记的dna探针与hrp标记的亲和素之间相结合，通过化学发光，显影，定影。
1.2.5 流式细胞仪检测细胞周期 转染和未转染p65 sirna的食管鳞癌细胞，在50ml培养瓶中培养，5?fu单独或联合应用，进行试验分组和处理，作用48h后，收集细胞;1 000 r/min离心5min，弃去上清;用pbs洗两遍，离心后弃去，加入70%冰乙醇固定，4℃过夜;上机前，1 000 r/min离心5min，弃去乙醇，pbs洗三遍;加入1ml pbs制成细胞悬液，加rnasea(终浓度50μg/ml)，室温放置1h;调整细胞浓度为1×106，加1ml pi(100μg/ml)，避光30min，上机检测细胞周期，每个样本检测10 000个细胞。
2 结果
2.1 sirna转染食管鳞癌细胞ec9706的效率
将荧光素标记的对照sirna，在同样条件下转染到ec9706细胞中，置37℃、5%co2孵育箱内培养48h，通过荧光显微镜观察转染效率，见图1。sirna转染食管鳞癌细胞的效率可达90%以上。
2.2 食管鳞癌细胞转染p65sirna后p65蛋白的表达水平
western blot检测细胞中p65的蛋白表达水平，见图2。结果表明，与未转染p65 sirna的ec9706和eca109细胞相比，转染后的ec9706和eca109细胞，p65蛋白的表达水平下调，而非靶向蛋白mapk的表达无影响。
2.3 食管鳞癌细胞转染p65sirna后，nf?κb与κb位点结合活性的改变
ec9706和eca109细胞转染p65sirna72h后，收集各组细胞提取细胞白，emsa检测nf?κb与dna结合活性的变化。结果发现，与未转染p65 sirna的ec9706和eca109细胞相比，转染p65 sirna的ec9706和eca109细胞中，nf?κb与dna的结合活性明显下降，见图3。提示：p65 sirna可以抑制p65的表达，下调nf?κb与靶基因的结合活性。
2.4 p65sirna阻断nf?κb信号通路下调cyclind1的表达
食管鳞癌细胞ec9706和eca109在转染p65 sirna72h后，分别提取细胞总蛋白检测细胞周期cyclin d1蛋白的表达情况。结果表明，与未转染的细胞相比，cyclin d1的表达在转染72h后开始下降，见图4。
2.5 p65sirna单独或联合5?fu对食管鳞癌ec9706和eca109细胞周期的影响
食管鳞癌细胞ec9706和eca109按以下方法分组：未转染组;转染p65 sirna72h组;单独使用5?fu组;转染p65 sirna48h后，使用5?fu治疗24h组。各组细胞使用pi染色，以未转染组为对照，检测细胞周期变化情况。结果显示，ec9706和eca109在转染p65 sirna后，g0/g1期的细胞开始增加，同时s期的细胞逐渐减少;当转染细胞联合使用5?fu时，g0/g1期的细胞明显增加，同时s期的细胞明显减少，见表1、2。
3 讨论
研究表明，活化的nf?κb信号通路存在于多种人类肿瘤中，作者以往的研究已证实在两种食管鳞癌细胞中存在有激活的nf?κb信号通路[5]。但是，激活的nf?κb信号通路在食管鳞癌细胞的增殖及对化疗药的耐受性等机制中是否起作用，尚不清楚。本研究使用rna干扰技术，特异性的阻断nf?κb亚单位p65的表达，研究nf?κb信号通路在食管鳞癌的发生发展中的作用。western blot实验中，将终浓度为50nm的p65 sirna分别转染ec9706和eca109细胞，持续作用72h，检测p65的蛋白表达水平，结果发现，在转染72h后，与未转染细胞相比，p65的蛋白表达水平也明显下降，而非靶向抗体mapk的表达水平未受到影响。表1 p65 sirna转染前后与5?fu单独或表2 p65 sirna转染前后与5?fu单独或联合
活化的nf?κb可以进入到核内，与下游调控基因上共同的κb序列结合，参与细胞的增殖、转化、浸润及抗凋亡。抑制nf?κb信号通路的活性，最终是抑制nf?κb与κb的序列结合，阻断它促进下游基因表达的功能。本研究采用凝胶滞留实验检测nf?κb与dna的结合，结果发现，在转染72h后，nf?κb与dna的结合活性明显下降。以上实验结果表明，p65 sirna可以高效的转染到食管鳞癌细胞中，特异性的抑制目的基因p65在mrna和蛋白水平上的表达，导致nf?κb与dna结合能力下降，从而抑制nf?κb信号通路的活化。
cyclin d1的高表达存在于多种肿瘤中，如mega等[6]的研究发现，在食管鳞癌组织中，cyclin d1和e2f1的高表达会促进肿瘤的发展，导致病人的预后欠佳。在研究中国南方的食管癌组织中发现，cyclin d1的高表达存在于61%的样本中，提示cyclin d1的表达是食管癌发生的早期事件，并在肿瘤的进展中cyclin d1的表达不断积累[7]。本研究采用western blot法，检测转染p65sirna，阻断nf?κb信号通路后，是否能够下调nf?κb下游基因cyclin d1的表达。将终浓度为50nm的p65 sirna分别转染ec9706和eca109细胞，72h后收集细胞总蛋白，结果发现，与未转染细胞相比，转染细胞中cyclin d1的表达受到抑制。本研究还采用流式细胞仪检测食管鳞癌细胞在转染前后及单独或联合应用5?fu后，对细胞周期的影响。ec9706和eca109在转染p65 sirna后，g0/g1期的细胞开始增加，s期的细胞逐渐减少;当转染细胞联合使用5?fu时，g0/g1期的细胞明显增加，同时s期的细胞明显减少。以上这些结果表明，由于cyclin d1是细胞周期进行中一个重要的调节者，当使用p65 sirna阻断食管鳞癌细胞中nf?κb信号通路时，cyclin d1的表达下调，肿瘤细胞被停滞在g1期，提示cyclin d1是受nf?κb调节的一个重要的下游基因，nf?κb可以通过对cyclin d1的调控来促进食管鳞癌细胞的增殖。p65 sirna阻断食管鳞癌细胞中nf?κb信号通路并联合使用5?fu，可以明显抑制食管鳞癌细胞的增殖，使更多细胞停滞在g1期，减少细胞的分裂。
因此，激活的nf?κb信号通路在食管鳞癌细胞的增殖及耐药中起着重要的作用，通过转染p65 sirna可以特异性的阻断nf?κb信号通路，抑制食管鳞癌细胞的增殖，增加细胞对化疗药的敏感性，提示nf?κb信号通路可以成为食管癌基因治疗中一个强有力的作用靶点。
【参考文献】
[1] wang jh，huang qk，chen mx. the role of nf?κb in hepatocellular carcinoma cell[j]. chin med j, 2003,116(5):747?752.
[2] yu hg，yu ll，yang y. increased expression of rela/nuclear factor?kappa b protein correlates with colorectal tumorigenesis[j]. oncology, 2003,65(1):37?45.
[3] nair a，venkatraman m，maliekal tt. nf?κb is constitutively activated in high?grade squamous intraepithelial lesions and squamous cell carcinomas of the human uterine cervix[j]. oncogene, 2003, 22(1):50?58.
[4] takahashi y, nishikawa m, kobayashi n, et al. gene silencing in primary and metastatic tumors by small interfering rna delivery in mice: quantitative analysis using melanoma cells expressing firefly and sea pansy luciferases[j]. j control release, 2005, 105(3):332?343.
篇10
摘 要 目的：探讨阿司匹林、氯吡格雷联合低分子肝素钙治疗急性非ST段抬高性心肌梗死治疗效果。方法：收治急性非ST段抬高性心肌梗死患者36例，使用阿司匹林、氯吡格雷联合低分子肝素钙治疗进行回顾分析。结果：胸痛或（和）胸闷、气短完全缓解出院，且出院后经随访2个月未再发作21例，无效而转入上级医院行冠脉介入术12例，终点心血管事件发生3例。结论：阿司匹林、氯吡格雷联合低分子肝素钙治疗能显著缓解低危险组、部分中危险组病情，降低转入上级医院行介入治疗比率。
关键词 急性非ST段抬高性心肌梗死 阿司匹林 氯吡格雷 低分子肝素钙
Abstract Objective：To investigate the effect of aspirin，clopidogrel combined with low molecular weight heparin calcium in the treatment of acute non ST segment elevation myocardial infarction.Methods：A retrospective analysis was made on the treatment of 36 cases of patients with acute non ST segment elevation myocardial infarction with aspirin，clopidogrel combined with low molecular weight heparin calcium in 2009 March-2013 April.Results：Chest pain or（and） chest tightness，shortness of breath completely was alleviated of 21 cases discharged from the hospital，and not to attack after two months of follow-up.Invalid and transferred to the superior hospital with coronary interention 12 cases，and end point of cardiovascular event 3 cases.Conclusion：Aspirin，clopidogrel combined with low molecular heparin calcium treatment could significantly alleviate the patient's condition of the low risk group and part of the middle risk group，reduce patients transferred to higher hospital for interventional therapy ratio.
Key words Acute non ST segment elevation myocardial infarction；Aspirin；Clopidogrel；Low molecular weight heparin calcium
资料与方法
2009年3月-2013年4月收治急性非ST段抬高性心肌梗死患者36例，50～60岁12例，61～80岁21例，>80岁3例；单纯急性非ST段抬高性心肌梗死无合并症6例，合并高血压9例，合并糖尿病9例，合并脑血管病变6例，合并慢性肾衰3例，合并心律失常9例（其中合并阵发性房颤3例、合并频发室早3例、合并房早和室早3例）。
治疗：①一般治疗：主要包括卧床休息、吸氧、监护和建立静脉通路，保持大便通畅和情绪稳定，对于胸痛剧烈或烦躁不安者给予吗啡静脉注射2～4mg，硝酸甘油0.5mg含服，继之以5～10μg/分速率开始静滴。②抗血小板治疗：阿司匹林0.1g，1次/日口服，首剂水溶剂0.3g嚼服；氯吡格雷75mg，1次/日口服，首剂0.3～0.6g口服。③抗凝治疗：低分子肝素钙5000U，12小时1次，皮下注射。
结 果
入院时所有患者均有不同程度胸痛和（或）胸闷、气短，时间持续≥30分钟，起病时间0～2天，9例胸痛伴发夜间阵发性呼吸困难；治疗后，患者血脂水平有明显改善，胸痛和（或）胸闷、气短完全缓解出院且出院后经随访2个月未再发作21例，无效而转入上级医院行冠脉介入治疗12例，因心源性休克抢救无效死亡3例（转诊患者均为中、高危险组，死亡患者为高危险组）。
讨 论
急性非ST段抬高性心肌梗死最常见的病理基础是动脉粥样斑块破裂，产生非闭塞性血栓，引起冠脉狭窄急剧加重，心肌灌注减少[1，2]。因此，防止血栓形成的关键是抑制血小板的黏附和聚集。阿司匹林是环氧化酶抑制剂，能抑制血小板环氧化酶活性，减少血栓素A2生成。除非禁忌，应尽早应用；联合ADP受体拮抗剂氯吡格雷，二者联合应用较单用阿司匹林能显著提高疗效，降低病死率[3]。低分子肝素在降低心脏事件发生方面较肝素疗效更优。
该类患者由于较急性ST段抬高性心肌梗死更趋于老龄化，合并更多伴发疾病，特别是再梗死率、心绞痛再发生率和远期病死率则较高[4]，这就决定了急性非ST段抬高性心梗较急性ST段抬高性心梗不能溶栓治疗，预后差；对于急性非ST段抬高性心肌梗死中危险组、高危险组首选介入治疗是明确的，但基层医院不具备冠脉造影及介入治疗的条件。应用抗血小板联合抗凝治疗急性非ST段抬高性心肌梗死，对于低危和部分中危患者是十分有效、切实可行的治疗措施。
参考文献
1 宫霄欢，余金明，毛勇，等.中国非ST段抬高性急性冠脉综合征抗凝多中心观察研究[J].中国实用内科杂志，2013，33（2）：134-137.
2 马爱群，胡大一，牛小麟，等.心血管病学[M].北京：人民卫生出版社，2005.