白石美香范文

时间:2023-04-09 11:11:37

导语:如何才能写好一篇白石美香,这就需要搜集整理更多的资料和文献,欢迎阅读由公务员之家整理的十篇范文,供你借鉴。

篇1

关键词:李白;意象;诗歌

下终南山过斛斯山人宿置酒

暮从碧山下, 山月随人归。

却顾所来径, 苍苍横翠微。

相携及田家, 童稚开荆扉。

绿竹入幽径, 青萝拂行衣。

欢言得所憩, 美酒聊共挥。

长歌吟松风, 曲尽河星稀。

我醉君复乐, 陶然共忘机。

李白(公元701年-公元762年),字太白,号青莲居士,又号“谪仙人”。是唐代伟大的浪漫主义诗人,被后人誉为“诗仙”。与杜甫并称为“李杜”。其人爽朗大方,爱饮酒作诗,喜交友。

这里的终南山指的是在陕西省关中地区南面的山,也称秦岭。当时多有隐士居于此地。这首诗写诗人在朦胧的月色下过访一位姓斛斯的隐士,并与他一起临风吟唱、饮酒言欢,陶醉于幽美景色中的乐趣,表现了诗人在长安时期生活和思想的一个方面。

“暮从碧山下,山月随人归。 却顾所来径,苍苍横翠微。”开头四句用铺陈的笔法描写傍晚时节的月光山色,准确地表现了薄暮冥冥中深山空谷光线和色泽的那种细微幽眇、不易察觉的变化。“下”和“归”两字用得极为生动恰切。分为两层来说。一,暮色最早是沿着山边渐渐弥漫开来的,而皎洁的明月却正当此时悄悄爬上了山林的上空。这种难以捕捉的微妙变化,经过诗人的描写,从视觉上就形成了可以感触的具体形象。二,两句关联,暗中点明了诗人过访斛斯山人的实践和行踪。“却顾”两句紧承一、二句说,待我回过头来看看所走过的小山路,只见一片苍翠铺满了幽深的山谷。一个“横”字,写尽了天光渐暗,远远望去,朦胧中只能见到苍翠深碧而别无所见的感觉。这几句描写中,诗人炼字炼句意在寓情于景,表现自己对大自然的喜爱。

“相携及田家,童稚开荆扉。绿竹入幽径,青萝拂行衣。”者四句是对于山间生活环境的描写。描写的线索沿着路行一贯而下。荆扉、绿竹、幽径和长丝拂荡的青萝,构成了一幅诗意盎然的清幽的画面。这里既无车马的喧闹,又无鸡鸣狗犬,客观景物的描写寄寓着诗人对隐居世外的向往。可以看出,全诗从起始四句到中间四句,随着描写的展开,诗人的感情逐步得到了深化。

“欢言得所憩,美酒聊共挥。长歌吟松风,曲尽河星稀。”这几句写诗人与主人饮酒的欢乐情形。由此以前,诗人虽然没有正面描述山庄主人的志趣、形象,但是透过对主人生活环境的描写意境足以表明斛斯山人是一位隐士,而且定然与诗人世界观中那种避世隐居的理想有一拍即合之处。所以他们开怀畅饮,倾诉心曲,甚至忘情歌吟,几乎忘记了时光的流逝。

“我醉君复乐,陶然共忘机。”月明星稀的时候,主客双方都陶然沉醉在一片重返自然、与世无争的心绪之中。这么一结,全诗就贯通了。前此所有的描写,都有力地烘托了这两句所表现的情绪。换句话说,上面三层共十二句为最后两句蓄足了势,所以最后两句点明全诗之旨就显得更有力。

李白诗歌中,自然意象富有鲜明的个性特点,神话意象注入了强烈的主观意识,社会意象寄寓着丰富的社会认识。李白在这些意象中寄寓了潇洒之情、自由意志与社会立场。在《古诗评选》卷五中又说:“言情则于往来动止缥缈有无之中,得灵而执之有象,取景则于击目经心丝分缕合之际,貌固有而言之不欺,而且情不虚情,情皆可景,景非滞景,景总含情,神理流于两间,天地供其一目,大无处而细无限… … ”此后,以意象论诗,更是数不胜数。我们认为,所谓意象亦即灌注了作者丰富思想情感的物象。“诗的意象带有强烈的个性特点,最能见出诗人的风格。诗人有没有独特的风格,在很大程度上取决于是否建立了他个人的意象群。一个意象成功地创造出来以后,虽然可以被别的诗人沿用,但往往只在一个或几个诗人笔下才具有生命力。以致这种意象便和这一个或几个诗人联系在一起,甚至成为诗人的化身。”

篇2

 

以下是的小编给大家整理的向白衣天使致敬赞美的优美语句,希望能帮助到大家!

1、 汗水流到眼睛里,口鼻里,手臂被口罩和衣袖勒得青紫,鼻梁上得压疮……他们不是白衣天使,是战斗天使!

2、 希望春暖花开,国泰民安,所有白衣天使平安归来,所有同胞有家可回,疫情快点结束。

3、 我们都是平凡人,却有白衣天使为生命逆行,加油武汉,加油中国,加油白衣天使!

4、 护士有着纯粹的心灵,高贵的情操;走进每一位患者总带着一份职业性的微笑;不求回报只求奉献成了她们心中的自豪;黑夜的可怕加上生物钟倒置;超负荷的工作连着疲乏的心身,她们想着的仍是患者的须要;面对很多渴求健康的眼光,她们习用激励的眼神传递力气,用有力的双手扶持着患者超出心灵的池沼地,带给她们解脱病魔的勇气和一份生存的基础需要,居心理学常识安慰心灵空寂的患者轻松地进入梦乡,用语言美学知识为患者弥补疾病痊愈的健康领导。

5、 护士,我为你赞美,你用柔弱的肩膀挑起了无私奉献的担子,如青春的雨露滋润患者苦干的心田;如夏日的微风吹散患者身心的痛楚;如秋天的明月照亮患者走向健康的道路;如冬日的阳光温暖人心!你们是爱的散播者,不求名利,不求回报。

6、 冠状病毒是恶魔,空街无人车不多。白衣天使辛劳赞,民亦煎熬阻传播。

7、 在这场疫情中,白衣天使一直冲在疫情防控的最前线。他们奉献自己,守护每个人的健康和生命安全。

8、 抗击疫情人人有责,向白衣天使致敬,祝患者早日康复!

9、 淡淡的微笑,浅浅的酒窝。凝望着你的笑脸,我就能想象出照顾病人时的你多么和蔼可亲。愿我心目中的你们,永远是背着白色羽翼的天使。

10、 不管,春夏秋冬,他们,总衣着白大褂。不论,老弱病残,他们,都仔细照料。无论,酷寒酷暑,他们,都呆在病院。他们,冒着生命的危险,使人快活,使人健康。就是他们!白衣天使!

11、 无私的天使,你用博爱的手腕,抚摩着每一个受伤的孩子;你用冰寒的内心,温暖着每一颗惧怕的心灵;一双双忧伤的眼睛,在你的恬淡中变得安详平静;一张张恐慌的面孔,在你的仁爱中变得坚强无惧。

12、 白衣天使们努力追寻着南丁格尔的足迹,以无私奉献精神,用圣洁的双手托起人文关爱、托起健康!彰显护理人文关爱,传承南丁格尔精神!天使们以“爱心、耐心、细心、责任心”对待每一位病人,让关爱无处不在、让温暖充满人间!

13、 护士工作平凡而又伟大,琐碎而又不易,艰辛而又劳苦;我赞美护士能用柔弱的肩膀挑起一份女儿、母亲、妻子的重担;我赞美护士如春天的雨露滋润患者久旱的心田;如夏天的微风吹走燥热的空气带走患者心灵的创痛;如秋夜的明月照亮患者通往健康的心灵彼岸;如冬天的阳光温暖着患者蒸发她们的忧伤。

14、 输液瓶里滴着你的希望,体温表里刻着你们的叮咛,你们是生命的守护神,你们用智慧和真诚托起生命的阳光,你们无私,献生命,扶伤痛,含辛茹苦。

15、 护士有着忘我的爱,面对多重性情的患者,她们贡献的是海一样博大的情怀;面对刁难者纵使本人受了天大的冤屈她们对病人讲得也是医德和榜样;世人眼前一笑而过,有谁知?一个人的时候她们却在暗洒的泪涛中苦苦地彷徨;饮下苦酒之后留给自己的是一份休会的悲痛。

16、 你们是一棵棵无名的小草,是多么的渺小,但你们从没有放弃自己执着的追求,你们也有崇高的信念,也有不移的人生坐标,那就是,奉献我的一切,为了他人生活 得更幸福更美好。

17、 我的天使,无论往后的路有多难、有多累、有多苦,请用你们的温柔,抹去饱受摧残的伤痛,将心比心,用你们的一丝爱心、诚心、细心,换取病人的一分舒心、放心、安心,我的天使,应该爱人如己,温暖如春。

18、 一袭白素衣,一双纤纤手,一颗炽热心。在如花般的流年里,见惯了人世的悲欢离合,深谙生命的可贵,揣一个天使的梦想,青春不悔,岁月依旧。

19、 她们奉献的是一丝温情,一份关爱,一滴汗水,一份真情;她们奉献的是最最可贵的青春,换来的是千家万户的幸福和健康领有者的安祥;南丁格尔精力永不灭。我赞扬护士,歌唱护士,国际护士节永远是她们幸福的天堂。

20、 你们是一棵棵无名的小草,是如许的微小,但你们从不废弃自己执着的寻求,你们也有高尚的信心,也有不移的人生坐标,那就是,奉献我的所有,为了别人生涯得更幸福更美妙。

21、 在肺炎疫情面前,所有奋战在一线的医护人员就是我们的英雄,无数的白衣天使无惧无畏地投身于抗战疫情的火热斗争中,他们保持积极奋进的状态,只为在这场疫情抗争中赢得胜利。

22、 白衣天使你穿梭在生死之间,用自己的青春挽救别人的生命,你把全部的爱都种在病人的心中,你是最美的。

23、 护士工作平常而又巨大,琐碎而又不易,艰苦而又劳苦;我讴歌护士能用纤弱的肩膀挑起一份女儿、母亲、妻子的重任;我夸奖护士如春天的雨露润泽患者亢旱的心坎;如夏天的大风吹走燥热的空气带走患者心灵的创痛;如秋夜的明月照亮患者通往健康的心灵此岸;如冬天的阳光暖和着患者蒸发她们的哀伤。

24、 个春天有这么多令人难忘的事情,不安,苦痛,更有那些逆向而行,奔赴救援一线的白衣天使和人民卫士,舍小家顾大家,忘我工作,每一天都有无数个令我们肃然起敬的人,有无数个令我们感动的瞬间,这一切终将镌刻在历史上,铭记在人们心中。

25、 正确对待疫情。自觉隔离响应着政府号召,坚信疫情转折即将到来。致敬默默无闻、忘我奉献、不计生死的白衣天使们,致敬不留姓名伸出援手的同胞们!

26、 祝你们平安凯旋!向白衣天使致敬!就算剃了头发,你们也是最帅的和最美的!

27、 一起致敬白衣天使,致敬守护生命英雄!防控疫情,我们始终在一起!

28、 在疫情面前,总有一些白衣天使舍小家为大家,愿疫情早日过去,奋战在一线的医生们早日回家!辛苦了!

29、 你们,象一滴晶莹的雨露,象一朵雪白的雪花,悄悄飘落在世间;你们象烛炬,焚烧自己照亮别人。

30、 当曾经喧闹的都市变成了流泪的城池,是你们冲在一线,负重前行。我们称呼你们为“白衣天使”,你们说““我们只是穿上白大褂,扮演好自己的角色。”感谢你们用生命托起生命,感谢你们逆风而来的守护。下次樱花烂漫,我们定相会!

31、 多少个白昼,你们战斗在救死扶伤的第一线;多少个夜晚,你们与死神和病魔抗争,治疗时是医生的臂膀,巡视时是患者的亲戚,监护时是健康的使者,抢救时是生命的卫士,精湛技艺让死神战栗,微笑服务献出真情爱意,救死扶伤燃起生命之火,保健预防使千家万户康益。

32、 护士有着无私的爱,面对多重性格的患者,她们奉献的是海一样博大的情怀;面对刁难者纵使自己受了天大的委屈她们对病人讲得也是医德和表率;众人面前一笑而过,有谁知?一个人的时候她们却在暗洒的泪涛中苦苦地徘徊;饮下苦酒之后留给自己的是一份体验的悲哀。

33、 在你病床上守候的除了家属,还有白衣天使。

34、 她们为了工作无碍,剪去了长发,她们是最美的天使。

35、 你用祥和的心境,慰藉天下绝望的灵魂,夜空中的明星,不及你的光芒,雪夜里的火焰,比不上你的温热。

36、 刚来时,他以为 她只是医生的助手 那么匆忙 那么机械 失眠时,他感叹 她像朋友又像家人 那么真诚 那么亲切 无意间,一个微笑 他发现她是白衣天使 那么美丽 那么温暖 离别了,他回忆 她为何总是一身白衣? 啊~ 原来她的色彩在我们身上

37、 多少个白天,你们战役在杀人如麻的第一线;多少个夜晚,你们与死神跟病魔抗争,医治时是医生的臂膀,巡查时是患者的亲戚,监护时是健康的使者,挽救时是生命的卫士,高深技能让死神战栗,微笑服务献出真情爱意,救逝世扶伤燃起性命之火,保健防备使千家万户康益。

38、 我心目中的护士是细致而入微,果断而不惊,每天站在没有硝烟的战场上,把每一个平凡演绎出无数个精彩

39、 致敬逆行者:共同战疫,共克时艰。致敬白衣天使,期盼平安归来。

篇3

出场人物:包公、陈世美、秦香莲,坏鬼师爷

道具:台,凳,原告牌,被告牌,棍仔糖,扇

王朝马汉随包公出场(奏包青天主题曲)《nono教包公》包公正襟危坐,王马立于包公左右两侧

包:升堂!!!!!

王,马:开工~~~~

包:门外何人击鼓鸣冤?带上堂来!

王,马:带原告上来!!

秦香莲缓缓进场,绕场一周,类似香港小姐,跟住企系原告席

包:原告这位美女,请问你贵姓芳名,家住何方呀?

秦:(头低下,暗送秋波)回大人的话,(白榄)小女名香莲,家住夫子`庙前,夫家姓陈名世美,正系今科`的状元。话说三年前,为左比距去考科举,奴家卖屋`又卖田。点知距一去无回头,等我以为距比我死先。差d将距个神主牌放去`祠堂前。近牌听人讲,话夫郎高中`状元。于是带埋对仔囡上京到夫前,距见到我母子,居然诈作`不见。奴家上前就问距`想点。点知距居然话,已娶公主作妻房,叫我返归去耕田,去耕田!!甘大人你话了,尼种甘的人系米应该打距去丰都兼落油镬去煎?

包:原来如此!!世上还有这等之徒,美人你放心,本府素有青天大老爷之名,肯定可以给你个你想要的答复的。

秦:谢大人~

包:来人啊!!给我把那个抛弃妻子,欺君犯上,不知廉耻,违反国策,不知死活,猪狗不如,无法无天,人面兽心,狼心狗肺,玩弄感情的负心汉带上来!

王:边个系负心汉啊?

马:whois“fuxinhan”?

包:er。。??那个陈……

秦:陈世美啊,大人!就系陈世美个陈,陈世美个世,陈世美个美啊!

包:哦!!对对对对!!!将那个陈世美给我带来~~他不来给我拷来!

陈世美上场,口咬棍仔糖,一字记之曰:寸,两个字:流氓,包出来迎接陈入被告席

包:哎哟,陈驸马,不好意思哦,今天请你过来开封府喝咖啡!昨日,广东那边刚进献了那个什么牙买加的南山咖啡,好正嘎哇!来一杯,好不?

陈:哎哟,包大人都中意饮咖啡嘎,我屋企有只好坚的卡普奇诺握!得闲一齐研究下啊!

秦:喂喂,加下台戏仲做5做嘎??倾咖啡收工先倾喇~你以为阿姐档期好多嘎??~你估时时都度到期过来拍嘎???

包,陈二人连连向秦,saysorry,跟住归位

包:好喇好啦,开审喇,醒目点!被告,你那狗名叫啥的??何方人士??

陈:(唱)我阿妈原来系女人,嫁岩果个又姓陈。所以我姓陈,甘我一出世,老豆妈打就觉得我好靓仔(亮相),所以就叫世美喇!!

包:为何不叫叫世靓咧??

陈:车,我点知姐!!你甘想知,米落去问下我个死鬼父母囖!!衣架你系米审案嘎??做乜研究我个名咧??

包:er。。。。。。。对对对,本官失职!!陈世美,现在原告秦香莲状告你抛弃结发妻子,另娶她人哦!你知罪不知罪啊???

陈:甘就梗系死都5认嘎拉,大人!!我认左你边有戏做姐??真系一d人情细故都5晓的。5怪得我大宋朝积贫积弱喇,就系因为你尼d番薯系到!!

包:可怒也!!!!!本官昨天才去做过做iq测试,超过140哦。好像比那个什么abc差那么一点点,怎么会是番薯!!来人啊,把他给我拉出去砍了,送去饭堂做点心,我请客!

陈:大人冤枉啊!!听我讲埋先~!冷静d~冷静d!

坏鬼师爷疾步上场拉住包,细声附耳说话

坏:大人,无甘激动啊~~你甘杀左距,我地就ending嘎拉,片酬少好多嘎!!你琳过啊~你比过辩解的机会距囖!

包:恩!有道理,有道理!!!陈世美,本官给你个辩解的机会,你说得通,我放你回去,说不通,就抛弃妻儿,辱骂本官两罪并罚!

陈:禀大人,开讲都有话,男人5坏,就有d变态;男人5姣,就训5到觉;男人5花心,肯定痴妈根;男人5无赖,出街比人踩;男人5风流,难分坚定流;男人5沟女,肯定揾老举(有朕除)阿大人,好似你甘,日理万机,几累啊!~但系你知5知咩叫真挚的爱情啊??古语有云,天若有情天亦老,人若无情死得早啊!!

包:唉!~老夫也有同感啊!!想我第一次恋爱就遇到一个完美的女人,哦!!这是多么的完美~完美啊!~你像维纳斯那么完美~你就是那完美的东西~啊!~

坏鬼师爷,拍拍张台,大叫

坏:够拉!!老爷~~翻来囖,翻来囖!!无再发梦囖!!

包大人猛然醒觉,擦擦口角,因为有口水

秦:包大人,你无听距乱up啊!!距把口廊过油嘎~d出谷黄莺都无距唱得甘好听啊!!

陈:边树系咧,大人。歌仔都得唱拉~“情人情人常念记,我一心痴醉地,从前从前如梦去,太多的不堪记,啊!~!!!!!!”(奏难兄难弟)全场一齐跳舞

秦:够拉!包大人,你要帮奴家啊!我衣架要告距违反基本法的四草原则

包:四草原则???whatisit?

秦:呵呵,等我话过你地知拉,我阿爹当年系基本法起草委员会的委员,我就最清楚基本法嘎了!四草原则就系,兔子不吃窝边草,好马不吃回头草,老牛欢喜嚼嫩草,天涯何处无芳草。

包:美女原告,啥叫兔子不吃窝边草咧?

秦:他连我地屋企养左几年的果只猪“哪”啊细花都5放过

包:猪???mygob!什么又叫好马不吃回头草啊?

秦:距仲同细过玩开的果只牛囡有联系啊~~激死我拉!!!最吧弊都系老牛欢喜嚼嫩草啊,距。。。。。距。。。。。居然去调戏d鸡仔啊!!

包:哟,这。。。。。岂非有违人伦???陈驸马,可有此事啊??

陈:回大人,有,确实有~~嗳系联合国下属爱护动物协会的成员,肯定欢喜同d动物一齐嘎拉~~

包:这个嘛。。。坏鬼书生,若本府要治他的罪,该如何处理啊??

坏:都系果d嘎拉,无非米就系行善积德,派油派米,热心助人,修桥补路,爱护动物,乱冲绿灯嘎咋握!!!

包:你喝多了(你饮大左啊),是不??这些都是好的,有益于创造和谐社会的,扣你半个月工资!

坏:甘我地可以按七出之条来入距罪的

包:哪七出???

坏:哦~甘啊!七出之条,米就系“出街”“出钱”“出千”“出海“出门”“出家”“出人头地”囖

包:er。。。。。。你这小子,欠扁的拉~来人啊~给我狠狠地打

包于是连同王马打坏鬼书生下台~在此期间,陈世美偷偷走左

陈:哎呀!全部都5系正常人,我都系翻去揾公主去自修室复习算囖!

打走左坏鬼书生之后,包大人坐回原位,王马分列左右

包:陈世美哪小子列???

秦:他跑拉!!

包:既然他走了,就当他放弃权力囖~本府宣判:秦香莲,陈世美正式离婚,财产归秦香莲所有。

秦:多谢大老爷

包:不必多谢拉,多帮咱们开封府作作宣传~!咋开封府专办离婚案件。来来来,给你个卡片。跳出来说:要离婚?找(揾)开封府拉!无副作用,无后顾之忧。收费便宜。免两年等待期,保证离婚成功!否则原银奉还!行拉!!你可以走拉~出去收费处把这次堂费交了就行~以后多多帮衬哦!退堂!!!

秦:好,开封府服务那么周到,下次离婚,肯定再来!seeyoueverybody!!

篇4

但是,在七年之痒还没有到来的时候,我离开了。其实,即使分手,在我的心底,他依然是那个重情重义的好男人。

如果不是到了而立之年面临结婚,或许我们还会纠结着走下去。可现实问题终归会出现。

身边朋友、同事,人来人往,没有比我们物质条件更差的情侣了。

当初,我真的是带着美好期许,带着一起奋斗的目标,陪他走过了我最美好的七年。可是直到最后,我们还是混得一塌糊涂,在这种窘态之下,还必须不时地贴补家中父母。

我们俩月收入6000元左右,在深圳这样的繁华都市,算是贫穷一族了。房租太高,我们和别人合租了关外的房子,每个月仅租金就要1700元,这还没有算上我们的通讯费、交通费、生活费等必不可少的费用。

生活的艰辛只有我们自己清楚:到超市买东西都挑打折的,挑完之后还要看了又看,只选必须立即买回家的,其余的通通放回货架。至于华强北那样的高档商业区,如果不是因为坐车经过,我从未踏进去买过东西。我的衣服都是在淘宝或者深圳的女人街选择,挑来选去就为了买到性价比最高的。偶尔遇到节日,想去看场电影浪漫一下,也要盘算这个月的支出计划会不会因为突然而至的人情礼金所干扰。每天吃饭都是在家自己做,买菜也只是到菜场买快下市的菜。因为便宜,买回来都要洗半天才能放心吃。即使出去吃饭,也只是找街边小摊或者小饭馆。每当这时,李锐都觉得委屈我了,我总是安慰他:“其实大饭店和路边摊口味差不多,我更喜欢吃路边摊的恣意感觉呢!”说这些话的时候我心里总是酸酸的,其实谁不想到环境好一些的饭店享受饕餮盛宴呢?

也许有人说,只要感情好,这样的生活也算苦中有甜。是的,我爱他,你们能想象吗?这七年,一个女孩从24到30岁,从不搭出租车,也舍不得买自己想买的一切,就算是护肤品也只能在超市买那些最便宜的牌子。

双方的父母早就知道我们在谈恋爱,但是没有一方提出让我们结婚。我们两家真的是物质、精神什么支持都没有。李锐的父母早就是一副“不管了,随便你们折腾,愿意结你们就结,不愿意就算了”的态度。曾看到很多朋友和同事说父母要为自己陪嫁车或者房,真的羡慕。我们不是羡慕他们有车有房,而是羡慕他们有人关心有人牵挂。

我觉得我们真的没有未来,眼看着自己岁数一天天大了,我撑不下去。2011年7月,我过完31岁的生日,妈妈打电话给我,问我什么时候回家看她。我还没得及答话,她就说,“你不用回来了,寄5000块钱回来吧!”面对这样的母亲,我还能说什么?我一口气喝下两瓶啤酒:我输给了生活,就算是我嫌贫爱富吧。我从小过够了苦日子,一家四口(我还有一个弟弟)挤在20余平方的平房里,阴冷暗湿。我不希望我的孩子以后还过这样的生活。我可以不为自己想,但我要为以后的孩子考虑,也为我深爱的这个男人着想……最终我做出了分手的决定。

我深爱着这个男人,但是这样的生活我无能为力。谁能理解我当时的心情呢?最美好的年华我们一起走过,如果我不够爱他,怎么能在最美好的时光里都陪着他?

那天,心里有被抽空的感觉。我流着泪对他说出想法,李锐也哭了,他说尊重我的选择,谢谢我陪他走过这么多年。最后,他提出把我们存着买房的5万元都给我,算是对我的补偿。我的心犹如滴血,这些钱真的是我们从牙缝里省出来的啊。

这些年来,我听到旁观者最多的安慰就是“你们还年轻,还有很多奋斗的机会。”可是,如果我能看到希望的话,我会选择离开吗?

他对我的好,让我一世也忘不了。即使那天我提出分手,临走时,他依旧把我电动车的电瓶拿到楼下为我装好,然后自己跑着去赶班车。整整五年了,这个习惯一直没有改变。

李锐为我受了很多苦。我患有慢性疾病,他为了给我治疗,一个月的时间,顿顿都是馒头就着咸菜稀饭。没有一个亲人过问我们的生活,看着他因营养不良而面黄肌瘦的样子,我真的很愧疚。此后,因为我身体不能太辛苦,他总是节俭到极致。我想,我不能再以爱之名牵绊他了。

2011年7月23日,大暑。我逼着自己不后悔不回头,即使以后我过得不好,也算是放彼此一条生路。当天早上,我请假在家收拾东西,李锐不知道我这么快会搬走,我也不想当着他的面离开,因为我不知道该怎么与他告别。这个我一手布置起来的家,虽然简陋,甚至有些破旧,可是每天下班,只要回到这个地方,我都是幸福的。我一步三回头地看着窗台上的植物,仿佛它们不知道我要离开,还在对我微笑。我狠狠地抹掉眼泪,转身离开。

每天下班通电话,是我们多年的习惯。那天晚上,李锐加班,没有给我打电话。我在朋友家鬼使神差地拨通了他的手机。我接连打了很多个,始终没有听到李锐的声音。晚上10时,已经准备睡觉的我从床上一骨碌爬起,骑着电动车就往我们租住的地方赶。我急得差点被车撞到,眼泪止不住地往下流,我疯了一样怕他出事。

那一刻,我才知道,我心里是多么爱他、依恋他。还没赶到小区,远远地看到李锐焦急的身影,他的手机忘记在单位了,他也在找我。相遇的那一刻,我俩居然大笑起来,然后泪如雨下……

今天讲述这一切时,点点滴滴又浮现眼前,打开记忆阀门的刹那,我泪流满面。没有物质、没有双方家长的支持,让我没有一丝安全感。直到现在,我都会回想,如果我们双方家庭能支持一点,哪怕只是精神上的齐心协力,我都会坚持下去。

那5万元,最终我没有拿走。他一个大男人,身边需要钱,当我把他所有的银行卡和证件从我钱包抽出来的时候,我的心,被撕扯得生疼生疼。也许离开他,对他也是最好的选择吧。

篇5

关键词 美国 种族主义 “肯定性行动” “逆向歧视”

美国是一个种族成分复杂、族群文化多样的移民国家,其中白人占绝大多数。据2000年人口普查,美国全国人口为281421906人,其中自人人口(含拉丁裔)为211460626人,占总人口的75.1%;纯白种人口(不含拉丁裔)为194552774人,占69.1%。种族主义是美国长期存在的社会问题,其表现形式就是白人以一种“自我中心”的态度,认为种族差异决定人类社会历史和文化的发展,白种人在各方面均远优于其他种族。从这种反科学的种族“优越论”出发,美国白人自殖民地时期起就对黑人和其他少数族群充满了偏见和敌意,而作为种族主义基本内容的种族歧视和种族隔离一直是黑人在美国社会中取得进步的主要障碍。为了使黑人和其他弱势群体能够和白人平等地分享美国的资源,在升学和就业这两个对每一个美国人都利害攸关的问题上,20世纪后半叶美国联邦政府颁布、推行了一系列优惠和照顾黑人等少数族群的特殊政策和法令,即“肯定性行动”(Affirmative Action)计划。可是,美国很多白人认为,如果依照美国政府推行的“肯定性行动”计划,那么在美国社会中遭受种族歧视之害的实际上是白人。这个涉及到“逆向歧视”(Reverse Discrimination)的复杂问题,在20世纪末引起了美国社会各界的广泛讨论。

一、美国的种族关系与白人的种族态度

从殖民地时期到20世纪上半期,美国白人精心构筑的种族“壁垒”对黑人的生活产生了深刻的影响,黑人一直遭受着白人公开的种族偏见和歧视,白人对黑人的种族压迫也是公开进行的。虽然自20世纪中期以来,许多传统的种族“壁垒”已经土崩瓦解,针对黑人的、明显的种族隔离与歧视已不多见,但具有显著种族标记的黑人在美国仍受到从法院到工会再到学校这样一些组织机构或明或暗的歧视,他们至今无论是在收入、教育、职业、自主经营、权力及在大公司中的职位方面,还是在居住环境、健康情况等方面,其整体状况都明显低于美国人的平均水平,黑人的整体社会地位与美国其他族群相比仍存在着根本上的差别。显然,在后民权运动时代,新的种族障碍也已在美国社会、经济结构的转变中产生。虽然这些障碍是非人格化的,但美国大多数黑人却仍深受其害。

是什么原因使美国黑人遭受诸多歧视?究竟是哪些因素造成黑人与美国普通民众之间长久存在的差距?正确、清醒地认识到这些问题并加以纠正,无疑会极大地有利于美国社会的和谐发展。然而,令人遗憾的是,许多美国白人至今在否认白人种族主义现实存在的同时,仍对黑人存有极其严重的偏见和歧视。

1995年“反诽谤联盟”(Anti―Defamation League,创建于1913年,总部设在纽约)在全美国进行了一次问卷调查,在调查表中列有对非洲裔美国人带有歧视性的八个选项,其中包括黑人“更愿意接受福利”和“天生不太聪明”等内容,要求白人进行评价。调查结果显示,有3/4的美国白人同意其中一项或多项,其中同意两项的占1/2略强,同意四项以上的约占1/3。1994年芝加哥大学“全国民意研究中心”(Nation Opinion Research Center)在全美国进行的一次调查中,近一半的白人受访者认为黑人“懒惰”,只有占16%的白人将黑人归入“勤奋工作”一栏;在对白人工作的评价中,仅有7%的人将白人归人“懒惰”一栏,大多数认为白人勤奋。1990年“全国民意研究中心”对白人所做的一次类似调查中,白人被要求就“更倾向于接受福利援助”(相对自给自立)项而对黑人和白人做出评价,一多半的白人受访者认为黑人依赖福利;在关于“黑人的智力”项方面,有29%的白人受访者认为黑人“不太聪明”。可见,美国的大部分白人仍对黑人充满偏见。

尽管黑人在当代美国社会中的整体发展水平远远落在美国其他族群之后,但大多数美国白人却拒绝将种族歧视视为有色种人族群发展的主要障碍。根据1994年芝加哥大学“全国民意研究中心”所做的调查,白人被问及的项目中有:“一般而言,比照白人,黑人在就业、收入和住房上都要差。你认为这些区别主要是由歧视造成的吗?”对这个问题的调查结果是:白人受访者中有60%多的人的答案是否定的。当问及这些差异是否主要由于大多数黑人“缺乏改善自身贫困的动力和意志力”时,大多数白人受访者的回答是肯定的。本案调查还发现,有35%的白人认为白人房主应该有拒绝向黑人出售房屋的合法权利(这是与现行联邦法律相违背的)。这说明,种族歧视观念在美国相当一部分白人中是根深蒂固的。

在1990年芝加哥大学全国民意研究中心的调查中,有2/3的白人受访者表示,如果近亲与黑人结婚,他们会有消极反应,仅有5%的人持积极态度。而且与一般调查时的表现不同,大多数白人受访者对族际通婚的问题立即做出了否定的回答,没有选择“不知道”或“不清楚”。另外,从全美国范围来看,大约有1/6的美国白人赞同从法律上禁止“黑白”通婚。一位白人企业家对于族际约会与通婚强烈反感,这在美国白人中是具有一定代表性的。当这位白人企业家被问及“自己已成年的孩子与黑人约会”的问题时,他回答说:

极倒胃口,我想吐。我会感觉对此很失望。我可能对此事大加指责。……如果发生了这样的事,我会觉得作为父亲我可能很失败。这是我永远不会接受的事情。我可能会长时间对此焦虑不安。在我的家庭中它确实是个问题,因为我从未处理过,而且我不知道由于我不能处理此事最后会发生什么。

上述这些调查说明了在美国白人中普遍存在的反黑人情绪。据2000年人口普查,美国非洲裔人口约为3500万,年龄在18---64岁的美国白人为131465799人。根据对17岁以上白人进行的调查结果可以粗略得出,有超过1亿的美国白人对黑人有歧视性看法,有4500万一6000万美国白人是极端种族主义者,他们为了最大限度地捍卫所谓白人的权利,甚至主张在像住房这样的领域里对黑人实施种族隔离。

白人对黑人的反感与不满也可以从白人对倡导平等权利的“肯定性行动”的支持不断减弱而得到证实。20世纪80年代以来,大多数美国白人认为美国黑人具有完全平等的机会。如,在1994年全美基督教与犹太教会议(National Conference of Christians and Jews)所做的一次调查中,有60%多的美国白人认为,美国黑人当时已有平等机会获得高质量的教育、技术职位 着这些障碍。此次洛杉矶调查还发现,大多数受过良好教育的亚裔和拉丁裔工人亦说自己在工作场所遭受过歧视。除在就业领域遭受过白人的歧视外,美国黑人还经历着更多的隐性歧视,如有意将黑人等有色种人引导到特定的工作场所,让他们从事白人不屑去做的一些基本“专属”于少数族群的职业。

黑人妇女在求职和工作岗位上遭受到了更为严重的歧视。美国有些学者在对专业领域和管理层的黑人妇女的采访中发现,有42%的黑人妇女遭受过歧视性对待,特别是在与晋升和工资相关的问题上。一个在一家大公司工作的黑人女经理在采访中谈及自己的白人男性上司给她的业务评估:

(业务评估)共有5个级别,依次为优秀、很好、好、良,不太令人满意。我……预计他应该给我一个“很好”,这是基于我以往与他打交道的经历及他对待女性的了解上,但我觉得自己应该得“优秀”,而且我也准备争取优秀级别。我不仅身为女性,还是这一部门做这一职位的惟一一个黑人。……他和我曾专门对种族问题进行过一些非常坦率的讨论。我们谈到了女性,但更多谈到了种族。这样我当然知道他有很多关于黑人的偏见。……他曾在许多场合对我说过他认为我是一个例外,与他所认为的一个普通黑人所具有的能力是不一样的。……当对我进行评估时,他提及在一年 。中我的许多成就与业绩,并给了我令人激动的评价,然后他总结说:“所以我给了你一个‘好…。这个成绩可真是让我意外……(我)尽可能不带感情地只是说我觉得自己不能接受,我认为这与他对我的评价不一致,我不能接受这一等级。我想我的话有几分震惊了他,因为当我说我不接受这一等级时,他有点支吾地说:“嗯,我不明白你的意思。”我说:“我不准备在这个评价上签字。”……我列举了这一年中我能够向他证实的我已经达到了的每一个目标和我胜过其他人的地方。

由此可见,这位黑人妇女与她的白人上司早就有交往并清楚地知道其消极的种族性态度,这使她准备采取应对行动来反对可能的歧视。这个案例也说明美国确实需要更为积极的“肯定性行动”和加强《民权法》的执行力度。

自从20世纪60年代《民权法》实施以来,大多数种族性歧视在美国已具有隐性特征。然而,相当公开的种族主义仍然在美国黑人的生活中肆虐,即便那些凭着自身能力和无畏勇气已进入白人占绝对优势的商业界的黑人,也不得不时刻面对着来自白人的歧视与偏见。对于广大普通美国黑人来说,他们在充满白人种族主义的社会中不仅是想找到一份工作相当困难,而且在做好这份工作时每天都要面临着白人或明或暗的种族性敌意和歧视,这使得下层黑人无望地陷入贫困中,日益被边缘化。

白人的种族歧视和对黑人某种程度上的隔离充斥于美国社会各个领域和许多制度、社会安排中。公共场所至今依然是非洲裔美国人经常遭遇歧视的地方,其所遭遇的歧视有被拒绝服务和不得不接受较差的服务。这种情况从下面一个在白人开办的电视台做新闻导播的黑人妇女的叙述中可以窥视一斑。这名黑人妇女和其男友在看过职业篮球赛后决定在一个白人开办的餐馆就餐:

他(男友)正等着就座……他说:“你先去洗手间,我找桌子……”等我回来时他还站在那里……当我回到他身边时,他准备离开,说:“我们走吧。”我说:“我们的餐桌怎么了?”他没有回答。于是我说:“不,我们不走,好不好?”他说:“不,我要走。”这样,我们到了外面,我们谈起此事。我对他说,你必须要意识到这样的事情绝非第一次发生在这个餐馆或其他餐馆,但在这里它却第一次碰巧发生在一个黑人新闻导播或其他能够将此成一个议题或正准备就此展开讨论的什么人身上。在我告诉他准备尽快结束这一切后我们又重回餐馆,我让经理出来。我使在那里的大多数人意识到我被如此对待激怒了……我说:“为什么你认为我们不能入座?”经理说:“哦,我真的不知道。”我说:“想想看。”他说:“我真是不知道,是不是因为你们是黑人?”我说:“那么这事还真不好玩,你不会是猜我没有钱吧?”于是我打开自己的钱包并说:“因为我确实有钱。……我这里有两张美国万国宝通银行卡和一张万事达信用卡。……这真是有趣,你正好想到的这是因为我是黑人。”

这家餐馆对黑人充满歧视的做法,并不是像美国早期对黑人“合法隔离”时那样推出“谢绝黑人”进入的标识,而是以不提供服务对黑人加以排斥。如果从许多白人旁观者的角度来看这个案例,充其量只含有“微量”的歧视;但对这对黑人来说,它是公然的歧视,是对他们民权的明显侵犯。

在美国历史上没有任何一个群体曾经历过黑人所遭受的持续而严重的居住隔离。强加在美国黑人身上的这种极端的种族孤立,是白人通过一系列目的性明确的制度安排制造出来的,不仅黑人所遭受的种族隔离的深度是空前的,也是其他群体无法比拟的,而且随着社会经济水平的相对提高,这个问题却没有表现出改善的迹象。1990年在一次对来自25个大都市区的3800份租房材料进行的联邦调查中,黑人租户大约有一半人面临着歧视对待,同时在与白人房主最初接触阶段59%的黑人租房者被歧视对待;拉丁裔遭遇到的歧视与黑人相同。而且,这只是最初接触阶段遭受的歧视,在租房成功后,黑人租房者还要在诸如抵押贷款等方面面临歧视。20世纪90年代初时,美国住房和城市发展部专门负责公平住房的助理秘书就指出,每年在美国住房方面发生歧视性案例的实际数字可能高达一千万起。

住房方面的种族歧视迫使大多数黑人住进服务设施不全、犯罪率高的地区,其子女只能就近进入条件差的公共学校读书,从而压制了他们对子女未来的期望。2000年,美国25岁以上的黑人中有42.5%的人接受过高等教育,其中有14.3%的人获得学士及学士以上的学位;而美国25岁以上的白人的相应比例分别为54.1%和26.1%。

篇6

网络的普及,新媒体的兴起,特别是各种品牌网络媒体正在改变着人们的生活方式及生活观念,基于此我们进行了本项研究。本次调查所针对研究对象是都市白领。首先在武汉光谷地区抽取了40名在职人员进行了试调查,发现这40名研究对象在网络上主要集中在学习网站、专业类视频网站、社交网络、网络舆论活动、维基百科、即时通讯工具、新闻门户网站、网络购物平台,网游这9大类网站的使用,本研究所指的品牌网络媒体主要指的是这些网站。

一、抽样与样本基本情况

本研究主要采用定量为主的方法进行研究。以武汉光谷地区18-45岁之间的白领为调查对象,数据取样于光谷软件园、光谷总部国际、光谷国际。本调查共发放问卷500份,回收有效问卷380份,有效问卷回收率为76%。本次抽取的380个样本中,男性占58%,女性占42%,被调查者年龄35岁以下者占比达到90.6%。受教育程度以专科和本科层次最多,两者占比为81%。

二、都市白领生活方式受品牌网络媒体影响的数据分析

都市白领生活方式我们主要设计了工作方式、休闲娱乐方式、人际交往方式、消费方式四个指标进行测量。对于都市白领的工作方式,研究设计指标“工作中遇到问题主要通过什么方法解决”进行测量,并提供6个指标值供调查对象选择,分别为“查找书籍、团队(小组式)讨论、品牌网站(远程教学、网络办公软件、网页搜索、视频等)、工作培训、学术交流会、其他“。对该问题回答采用选择三项并排序的方法,运用多响应统计分析结果表明,日常工作中遇到问题最常用的解决方法为“网络”的占比最大,为34.1%。排第二、第三位的分别是团队(小组式)讨论和查找书籍,分别占比为23.5%和19.2%。由此可知,都市白领日常工作中遇到问题时最主要通过寻求品牌网站帮助来解决。都市白领的主要娱乐方式,研究列出8个选项供被调查者进行选择,分别为“上网(浏览学习网站、专业类视频网站)、与朋友在一起、进行学习自修或进修、户外活动、文艺娱乐活动、外出旅游、逛街、走亲访友、在家陪父母、兴趣爱好培训、忙于工作几乎没有娱乐时间、其他”。运用多响应统计分析结果表明,选择上网为主要娱乐方式占比为29.3%,排第一位,排第二、第三位的分别是与朋友在一起、户外活动,所占比例远低于排第一位的网络。对人际交往方式的调查,本研究列出“电话、短信、QQ、微信、书信、面对面交往、团体活动(聚会、集体游等)、朋友介绍、兴趣爱好(参加台球、网球俱乐部等)”9个选项供选择,运用多响应统计分析发现,28.5%选电话,24.5%选QQ,23.9%选微信。可知,除电话联系外,人们在日常交往中更愿选择以网络为载体的新媒体社交软件。对经常使用的购物方式的调查,本研究列出了“大型商场/超市购物、官方旗舰店订购、购物网站(天猫、淘宝等)订购、电话/短信订购、QQ/微信/微博等通讯软件订购、商品代购、其他”共7项供被调查者选择,数据表明,49.4%的人选商场/超市购物,47%的人选购物网站,25.8%的人选官方旗舰店。表明除了商场/超市购物,人们更青睐在购物网站或旗舰店这类网络平台上选购商品。

三、品牌品牌网络媒体服务质量对都市白领生活方式满意度影响分析

1.生活方式满意度的描述性统计分析

为进一步分析白领生活满意度情况,品牌网络媒体服务于生活方式4个方面共设计16个指标进行测量。答案用李克特量表五点法进行设计,分别为“很不满意、不够满意、一般满意、比较满意、很满意”,依次给出得分为“1、2、3、4、5”。然后运用SPSS20.0软件生成新变量功能,把生活方式满意度的4个维度下的各二级指标相加后取平均值,生成4个新变量“工作方式满意度、休闲娱乐方式满意度、日常交往方式满意度、消费方式满意度”做进一步的统计分析。统计结果表明,合并生成的4个日常生活方式的平均值和中位数的数据取值都在3-4之间,均值的标准误差值都小于或等于0.05之下。这说明使用这些测量指标来测评被调查者目前生活方式各方面的满意度具有较高的可靠性,品牌网络媒体运用在工作方式的4个主面,满意度都处于“比较满意”层次。

2.6个品牌网络媒体服务因素和用户生活方式整体满意度的相关分析

为进一步研究品牌网络媒体6个服务方面对用户生活整体满意度的影响,我们运用相关分析的Pearson测量法分别对6个变量和用户生活整体满意度进行了相关分析,选用单侧检验,得到了6个相关系数,统计结果说明,6个网站服务水平和用户整体满意度都存在正性相关关系。6项中品牌网络媒体的个性化、安全性、帮助技持共3项因素和用户整体满意度呈高度正相关,相关系数分别为0.606、0.715、0.721,显著性都为0.000。6项之中,品牌网络媒体便捷性和用户整体满意度呈现的相关最弱,这一结果最大的原因可能是我们有针对性调查的商业网站基本都能提供好的便捷服务,用户在这一项上的关注度大大降低。

四、总结和结论

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[关键词] 玉屏风散;变应性鼻炎;类胰蛋白酶;实验研究

[中图分类号] R285.5[文献标识码]A [文章编号]1673-7210(2009)02(a)-013-02

Experimental study on YU-Pingfeng San to the tryptase released by mast cells of allergic rhinitis

ZHANG Zhong-lin, ZHONG Ling, ZANG Zhi-he, XIN Zhi-wei

(Pharmacy College of Chengdu Medical College, Chengdu610083, China)

[Abstract] Objective: To investigate the effect of YU-Pingfeng San on the tryptase of allergic rhinitis. Methods: Serum pharmacological and extra-cell culture methods were employed to study the effect of blood serum of YU-Pingfeng San on the tryptase released by rat peritoneal mast cell (RPMC) in allergic rhinitis model rat. Results: Compared with the blank serum group, the content of tryptase of administration serum group decreased remarkably. Conclusion: YU-Pingfeng San can inhibit the RPMC to release tryptase in allergic rhinitis model rat, which is probably one of the mechanism of the prescription to stable mast cells to cure the allergic rhinitis.

[Key words] YU-Pingfeng San; Allergic rhinitis; Tryptase; Experimental study

变应性鼻炎(allergic rhinitis,AR)又称过敏性鼻炎,是已致敏患者再次接触过敏原后,由IgE介导的鼻黏膜超敏反应性疾病。AR是全球性的常见病与多发病,我国每年约有2 000万人患病,10%~40%的世界人口经受AR困扰[1]。肥大细胞(mast cells,MCs)来源于造血干细胞,广泛分布于结缔组织、黏膜组织及血管周围,易接触病原体和变应原等物质从而参与过敏反应的病理过程,MCs被激活而释放出类胰蛋白酶等炎症介质引起过敏反应。玉屏风散是中医的传统经典方剂,出自元・朱丹溪的《丹溪心法》,由黄芪、白术、防风组成,具有益气固表之功,为肺气虚证治疗的传统经典方剂,临床上常用该方或加味治疗AR并取得良好疗效。本研究从MCs脱颗粒释放类胰蛋白酶研究玉屏风散对AR的作用及其作用机制,为临床上应用该方治疗AR提供实验依据。

1 材料与方法

1.1 主要材料

健康SD大鼠由四川医学科学院动物中心提供;RPMI 1640培养基、胎牛血清均美国Gibco公司提供;α-N-苯甲酰-DL-精氨酸-p-硝基苯酰胺盐酸盐(BAPNA),二甲基亚砜(DMSO)、Tris-HCl由美国Sigma公司提供;酮替芬由安徽华源医药股份有限公司提供。

1.2 实验分组及模型制作

健康SD大鼠40只,体重180~220 g,随机分为4组:模型组、阳性组、给药组和空白组,每组10只。造模方法参照文献[2],前3组为致敏组,将10% TDI橄榄油溶液用微量移液器滴入豚鼠双侧鼻孔(每侧5 μl),每天1次,连续用5 d,后改为隔日激发给药1次,直至末次给药后45 min再激发1次;后一组为空白组,仅给生理盐水滴入双侧鼻孔内,每天每侧5 μl,其方法同致敏组。以鼻部症状和体征为主要观察内容。造模成功后,即于第2次激发后(第9天)开始,除空白组外,各组分别给予生理盐水、120%玉屏风散和16%酮替芬10 ml/kg,给药时间为15 d。自给致敏药开始,依据鼻痒、喷嚏、流涕轻重程度、次数多少、出现的时间长短为评分标准并评分记录,参照文献[2]拟定评分标准(表1)。

表1 过敏反应行为学评分

各症状记分叠加,总分5分者为模型成功,其症状观察时间为每次给致敏药后30 min内。

1.3类胰蛋白酶活力测定

取“1.2”实验中的模型组大鼠,按文献[3]方法分离大鼠腹腔肥大细胞(rat peritoneal mast cell, RPMC),RPMC置于含10%胎牛血清的RPMI 1640培养液中悬浮,37℃孵育2 h备用。另取健康SD大鼠15只,分为空白组(n=5)、阳性组(n=5)和给药组(n=5)。后两组大鼠分别给予120%玉屏风散和16%酮替芬10 ml/kg,空白组给予生理盐水40 ml/kg灌胃,2次/d,连续3 d,于末次给药后1 h,各组大鼠经股动脉取血,通过离心取得含药血清,并经56℃水浴30 min灭活备用。将悬浮的RPMC细胞分为三组,每组包括10个样品,加入以上制备好的含药血清,在37℃下孵育2 h,收集培养的RPMC上清液待测。类胰蛋白酶活力测定根据Lavens SE等[4]的方法:BAPNA以20 mg/ml溶于DMSO,取40 μl加入含待测液的1.5 ml 0.1 mol/L的Tris-HCl(pH 7.4)反应缓冲液中, 30℃反应20 min,加入0.5 ml 30%(体积/体积)乙酸终止反应;在405 nm处测吸光度值,以反应缓冲液作参比调零。

1.4统计学方法

数据以均数±标准差(x±s)表示,先对每组数据做正态性检验,再做方差齐性检验。若方差齐,则做单因素方差分析;若方差不齐,则进行变量转换。使用SPSS 13.0统计软件对数据进行分析,P<0.05表示差异有统计学意义,P<0.01表示差异有高度统计学意义。

2 结果

2.1 模型动物鼻部症状表现

从造模第1天开始,观察动物鼻部症状,采用症状积分叠加评分法,比较组间差异。模型组大鼠中出现变应性鼻炎发作症状,表现为不同程度的喷嚏、流涕、搔抓鼻部等表现,约40 min后症状逐渐缓解。玉屏风散治疗后大鼠所表现症状的程度较同期模型组明显减弱, 5~10 min后症状缓解或消失。末次激发后,玉屏风散给药组鼻部症状积分明显降低,与空白组比较差异有显著性(P<0.05)。具体评分结果见表2。

表2 末次给药45 min后激发大鼠鼻部症状积分情况(x±s,分)

与空白组比较,P<0.001;与模型组比较,*P<0.05, ***P<0.001

2.2 类胰蛋白酶测定

不处理组(即模型组)类胰蛋白酶释放水平高,经阳性组与药物组含药血清处理后,RPMC脱颗粒释放类胰蛋白酶释放水平均降低。具体结果见图1。

3 讨论

在变应性鼻炎效应阶段,因抗原-抗体反应使MCs活化并释放多种炎症介质(如组胺、白三烯、类胰蛋白酶、前列腺素和白介素等)激活下游的次级效应靶细胞――嗜酸粒细胞和中性粒细胞,最终引起流涕、鼻痒、喷嚏和鼻塞等急性过敏反应。近年来的研究发现,肥大细胞类胰蛋白酶水平的病理性改变在肥大细胞介导的过敏性炎症疾病如哮喘中起重要作用。肥大细胞是人类速发性超敏反应的主要效应细胞,该细胞一旦被激活,就会释放类胰蛋白酶。人β类胰蛋白酶的血清水平与速发型超敏反应的严重程度相平行[5]。类胰蛋白酶是黏膜型肥大细胞颗粒内的主要中性蛋白酶类,是MCs的特征性组成成分,当MCs被激活后,它以胞吐的方式排出而在MCs介导的过敏性疾病中发挥炎性效应放大作用[6]。因此,可以通过检测类胰蛋白酶的含量衡量MCs的活性状态,进而评价肥大细胞稳定剂在治疗过敏性疾病中的作用与作用机制。现代药理研究证实,玉屏风散主要有免疫双向调节作用;提高巨噬细胞吞噬能力;提高淋巴细胞转化百分率,促进细胞免疫能力;增强溶血素和溶血空斑形成反应,增加免疫球蛋白IgA,降低IgE;增强迟发型超敏反应(DTH)等[7]。

本研究结果表明,与空白组大鼠比较,模型组大鼠鼻部症状积分明显升高且差异有统计学意义,表明模型复制成功;经玉屏风散治疗后,治疗组与模型组比较其积分明显下降,且差异有统计学意义(P<0.05),可见玉屏风散对模型动物鼻部过敏性症状有明显改善作用。与空白血清处理组比较,玉屏风散含药血清能明显降低变应性鼻炎RPMC释放类胰蛋白酶的量。可见,玉屏风散治疗变应性鼻炎的机制可能是通过稳定肥大细胞,抑制其脱颗粒释放出致炎症介质――类胰蛋白酶,从而减轻过敏性症状的发生而实现的。当然,对玉屏风散抑制肥大细胞释放类胰蛋白酶的量效关系、最佳配伍剂量以及方剂起作用的物质基础,还有待进一步地深入研究。配伍配比、物质基础的研究,必将为临床上应用玉屏风散有效治疗变应性鼻炎提供实验依据,这也是现代方剂学研究的关键科学问题。

[参考文献]

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[2]赵秀杰,董震,杨占泉,等.超敏反应实验模型的建立[J].中华耳鼻咽喉科杂志,1993,28(1):17-18.

[3]王沁芳,赵龙凤,郝彦琴,等.内毒素对肥大细胞脱颗粒释放组胺和类胰蛋白酶的影响[J].山西医科大学学报,2007,38(8):695-697.

[4]Lavens SE, Proud D, Wamer JA. A sensitive colorimetric assay for the release of tryptase from human lung mast cell [J]. J Immunol Methods,1993,166(1):93-102.

[5]王森,何韶衡,魏继福.类胰蛋白酶及其抑制剂研究进展[J].江苏大学学报(医学版),2008,18(1):82-84.

[6]窦肇华,张远强,郭顺根.免疫细胞学与疾病[M].北京:中国医药科技出版社,2004.673-701.

篇8

一、对农节目设置的必要性

我国是一个农村人口占绝大多数的农业大国,农村观众占电视节目受众的绝大多数,据统计约有9亿人,所以说,开办对农节目有着广阔的收视空间。央视每5年进行一次的全国电视观众抽样调查显示,近年来,我国农村电视观众数量呈现逐步攀升态势,有70%以上的农民每天都收看电视,而且看电视的时间平均每天达2小时以上。看电视已经成为当代农民获取信息和文化娱乐的最主要方式之一。

然而,目前众多的电视媒体中,与“三农”息息相关的政策信息、农民增收、劳动致富和相关的市场、科技信息,以及一些农村娱乐节目在电视节目的总量中所占比例太小,还不能很好地满足广大农村受众的需求,各级电视台也都亟待为农民多设置一些可以获取信息和丰富文化娱乐生活的对农类节目。

吉林省白城市是个以农业为主的地级市,220万总人口中,单是农业人口就占180万。2002年,白城电视台在改版中尝试着创办了对农节目《乡村致富经》,当时是开吉林省市级电视台办对农栏目的先河。白城电视台连续8年开办对农节目的实践,笔者深深地感受到,市、县级电视台,尤其是以农业为主地区的电视台,设置对农节目是大有可为的。这是因为,《乡村致富经》节目在白城电视台播出不久就拥有了当地最大的观众群,栏目收视率始终占据全台所有栏目的前三名,节目前后的广告时段也很快成为了黄金时段。这充分说明,农民非常需要这样的对农节目,也非常渴望这样的对农节目。

如果说,白城电视台的对农节目《乡村致富经》是因为受众需要而产生的,那么,《乡村致富经》如今在白城广大农民心目中已经占有了极其重要的地位,它也为白城电视台探索出了一条可持续发展之路。

二、对农节目内容取向

准确把握农村电视观众需求,使对农电视节目更有针对性是创办对农节目的关键。我觉得根据农民的需求,对农节目在内容上可以分为三大类,即信息类、服务类和娱乐类。

(一)信息类节目内容

调查显示,目前广大农民最钟情的是电视信息类节目,而电视信息主要有四类,即宏观类信息(政策、法规方面的信息)、实际操作类信息(种植业和养殖业新技术、新品种的信息)、市场类信息(农产品价格、销路、需求等信息)、科学知识类信息(科学常识、文化教育知识等)。

信息与农民自身利益息息相关,它关乎每一个农民家庭的经济收入和生活水平。一项减轻农民负担的减免农业税政策就可以影响到农民一年的经济收入,一个新型的适合的赚钱项目足可决定农民的致富成败,一个科技知识信息就可能决定农民经济作物的收成状况。所以,信息类的内容在对农节目中,是不可或缺的重头戏。

电视信息类节目,中央电视台有《每日农经》、《致富经》、《理财在线》等,省级电视台有吉林电视台的《乡村四季》、辽宁电视台的《黑土地》、山东电视台《乡村季风》等,市级电视台有沈阳电视台的《庄稼院》、营口电视台的《新农村》、松原电视台的《沃野三农》等。这些以信息类节目内容为主的对农栏目,在全国各地区的农村观众中都深有影响。

白城电视台创办对农节目已八年有余,节目也在不断地进行微调,到现在已经逐渐走出了一条农民观众喜欢,电视人容易操作的路子。直至2010年,《乡村致富经》更名为《美丽田野》。我们在节目中尽可能的涵盖各类信息,比如,子栏目《信息站》里放置一些新的对农政策的简介,子栏目《致富经》里传递一些适合当地实际的致富项目、致富经验。根据农民的需要,结合地市级电视台的办节目的实力,我们不追求大而全,而追求小而精;不追求华丽,而追求实际实用。栏目创办之初,我们采访一些成功的农民,侧重挖掘他们创业路上的感人故事,如《养鸡女状元——方月红》、《创业路上悲与喜——赵洪喜》等,节目做得好看也感人,我们很快就发现这样一个事实:每一个创业路上的成功人士都会有属于自己的一段感人的坎坷经历,而农民观众更喜欢更需要的是这些成功人士的成功经验。这样,我们以后的节目改变了侧重点,比如《狐貉养殖带头人——王丽君》的主人公创业之路虽然感人,可是我们把重点放在了她在狐貉养殖上的经验之谈上,也就是面对跌宕起伏的特种养殖市场,她是在什么情况下扩群,什么情况下缩群,这就是根据需要设置节目内容。每期节目里尽可能地多一些有实用价值的信息,节目里涉及致富项目信息技术五花八门,种养结合的内容如《种紫粒苋养牛羊》、《稻田养鸭》《果园养鸡》等,间种套作的内容如《向日葵和菠菜套种》、《白菜和香瓜间种》、《玉米和辣椒间作》等,特种养殖的内容如《鸵鸟养殖》、《赛马养殖》、《孔雀养殖》、《林蛙养殖》、《大雁养殖》等。

总之,对农节目,尤其是地市级电视台的对农节目,必须努力架构如各类政策、致富项目、产供销信息及致富典型经验的信息流,向农民提供各种致富路径,只有这样,对农节目的信息量才能真正满足农民观众的需求。

(二)服务方面的内容

对农节目就是需要真正立足服务“三农”, 以满足农民观众的现实需求为已任, 秉承“为农民服务、替农民说话”的宗旨,为农民解疑释惑,解决难题,让对农节目成为农民的知心朋友。

农民在平时的生产生活中会遇到很多的难题,尤其是在生产上,会随时遇到亟待解决的问题,这个时候,农民观众是最需要帮助的。衢州电视台的《农技110特快》,湖北荆州电视台的对农电视节目《垄上行》等等都是专门为农民答疑解惑的电视对农栏目。吉林电视台《乡村四季》的一个板块《农业110》也是为农民提供帮助的栏目,专家现场接听电话,为农民现场解答技术上的难题。

白城电视台的对农栏目也设置了这样一个为农民朋友答疑解惑的板块,并设置了专门的热线电话,每天24小时开机,栏目编导轮流值班。 “我的羊陆续死了好多只了”、“我们村的猪死老多了”、“我们这几片地都是这样黄叶子”、“我养的这种鸡都不认,没人买”、“我俩换种的地,他给租出去了”、“我们咋就贷不出来款呢”等等,每天这部电话都会接到许多热线。我们一方面介绍各方面的专家给这些需要帮助的农民观众,另一方面,也会选择有影响或者比较有代表性的问题制作成节目呈现给电视机前更多的农民朋友。比如阶段流行的玉米大斑病、传染性强的猪的蓝耳病、鸡的法式囊病等等,再比如帮助农民出售难以找到销路的特种作物绿小米、笨养的肉鸡等等。这一板块深得农民朋友的欢迎。

(三)娱乐方面的内容

在提高物质生活水平的同时,对农节目还要注重丰富农民的精神生活。黑龙江电视台的《咱村也有文艺人》、吉林电视台的《农村俱乐部》等等都是专门的娱乐方面的对农栏目。

白城电视台对农节目设置了一个板块叫做《村里人》,主要是挖掘各乡村有一技之长的“明星”在电视上亮相,尽可能侧重选择那些能够给农民兄弟带来欢乐的人物。比如《农民老周》讲述了一个一边种地,一边学习琴棋书画、吹拉弹唱的农民的故事;《村里的名人》讲述了一对老人在晚年的幸福生活。再比如,通过节目进行一些简单的赛事,比谁会种田,比谁的力气大,比谁家的婆媳关系好,或者在农民中间搞赛西瓜会等等,都可以为农民带来无穷的欢笑。对农节目在制作过程中善于以娱乐方式切入,根据农民需要和喜爱来调整,往往会收到更理想的效果。

三、对农节目的形式

各级电视台办对农节目往往存在着节目的形式与农民接受能力失调的现象。有关资料显示:农村观众的文化程度在初中或初中以下者占88.1%,绝大多数农民只有中小学文化水平。这样,对农电视节目不仅应该考虑农村观众的这种状况,特别是一些农技信息类节目,不要专业化色彩过于浓厚,而且对农电视节目在形式上要追求趣味性、互动性。

首先是趣味性。趣味性就是在制作对农电视节目时,要考虑农民的收视习惯,要有情节,讲故事,寓教于乐,因为人们在接受新事物的时候,不喜欢说教。比如我们采访的《薄荷种植》采取的形式是两位编导如同说相声一样,由一瓶薄荷口香糖引发的风波来现场串联;再比如我们采访的《牛胃里有铁怎么办》的表现方式如同办儿童节目一样,利用编导和玩偶对话的方式串联这项技术,不仅阐述了技术内容,而且让农民印象深刻;再比如我们适当增加一些网上的视频来烘托采访的内容,采访《鸵鸟养殖》时我们下载了“鸵鸟心态”的视频,引出鸵鸟养殖规程,还提醒农民注意在养殖过程可能遇到的困难,不能像鸵鸟一样逃避困难;再比如采访《如何预防水稻病害》时采用了第一人称的方式叙述稻瘟病的发生、预防、治疗的过程,让农民在趣味中学会知识和技术。

其次是互动性。对农电视节目不能单纯根据编辑和记者的想法来制作。想要制作出受农民喜欢的节目,就要了解农民的想法。了解农民想法的最佳途径,就是深入到农村,或者用热线电话的方式,让农民表达出他们的想法和需求。《黑土地》栏目曾经拿出周末时间开设过《希望之旅》、《大篷车》等板块,让农民与记者、农民与专家面对面地交流互动,取得了良好的效果。白城电视台的对农节目在平时的运作中也注重这种互动,比如,我们采访的有影响的节目,《鹅吃鹅——鹅的啄羽病》、《玉米地里的地老虎》、《葡萄大小粒的现象》、《阴雨天气下猪的水肿病》等,大都是在农民给我们打来求助电话之后,我们《美丽田野》栏目组找农业专家,深入田间地头、农家小院来帮助农民解决。这样,在节目播出之后,热线电话更加繁忙了,节目的收视率也就更高了。

四、对农节目的播出时间

篇9

关键词:百叶玫瑰;整形修剪方式;生长发育;产量

整形修剪是玫瑰生产管理的重要技术措施之一,适时采取正确的整形修剪方式是影响玫瑰树势和决定玫瑰产量的重要因素。为探讨不同整形修剪方式对百叶玫瑰生长发育及产量的影响,选取4种整形修剪方式做对比跟踪观察,以研究筛选出适合西山区百叶玫瑰冬春休眠期修剪、花后修剪的技术措施,为生产上大面积推广百叶玫瑰丰产栽培技术提供科学的依据,正确指导生产。

1试验时间和地点

试验时间:2013~2014年。

试验地点:在西山区团结街道办事处乐亩居委会1家农户玫瑰地块内进行试验。

2材料和方法

2.1供试玫瑰地的基本情况

百叶玫瑰不同整形修剪方式对比跟踪观察试验地选择在乐亩居委会1家农户的玫瑰地进行,该地块面积667m2,玫瑰于2009年栽种,株行距1.95m×0.8m,栽种玫瑰430丛,试验地玫瑰已达盛花期。试验前,2013年4~5月产花200kg左右。

2.2试验设计及方法

2.2.1试验设计。试验设4种整形修剪方式(4个处理),处理1:夏季花后短截,留桩高50cm,修剪时间为2013年6月;冬季不剪,对玫瑰株丛进行拉枝,顺行拉成水平枝,高度70cm。处理2:夏季花后短截,留桩高50cm,修剪时间为2013年6月;冬季轻剪,剪枝长度在10~20cm,修剪时间为2013年12月。处理3:夏季花后短截,留桩高80cm,修剪时间为2013年6月;冬季不剪,对玫瑰株丛进行拉枝,顺行拉成水平枝,高度100cm。处理4:夏季花后短截,留桩高80 cm,修剪时间为2013年6月;冬季轻剪,剪枝长度在10~20cm,修剪时间为2013年12月。每个处理设计1个小区,共4个小区,每个小区面积7.75m2,合计试验面积为31m2,定点调查玫瑰株丛5丛。

2.2.2试验方法:跟踪调查记载百叶玫瑰整形修剪后2个重要生长阶段,即:花后整形修剪至次年春季玫瑰萌芽前玫瑰株丛高度、开展度及成枝量增长等情况,次年春季玫瑰萌芽至花期结束玫瑰株丛高度、开展度、成枝量增长以及产量等情况,对以上调查项目进行观测记录并统计分析,得出不同整形修剪方式对百叶玫瑰生长发育及产量影响的结论。

3结果与分析

3.1百叶玫瑰生育期

通过跟踪观察,2014年试验地百叶玫瑰生育期如下:萌芽期为2月23日,展叶期为3月15日,现蕾初期为3月26日,现蕾期为4月2日,初花期为4月10日,盛花期为5月3日,落叶期为11月21日。

3.2不同整形修剪方式对百叶玫瑰生长的影响

通过跟踪调查,不同整形修剪方式对百叶玫瑰生长的影响情况如表1。

3.2.1株高。从表1看出:处理1增长最明显,丛均增长高度为189.4cm,比处理3(143.6cm)增加高度为45.8cm,增31.9%;比处理2(133cm)增加高度为56.4cm,增42.4%;比处理4(121.8cm)增加高度为67.6cm,增55.5%。4种整形修剪方式的高度增长情况为:处理1>处理3>处理2>处理4。

3.2.2开展度。从表1看出:处理2增长最明显,丛均增长开展度为143.4cm,比处理4(123.4cm)增加开展度为20cm,增16.2%;比处理1(112.6cm)增加开展度为30.8cm,增27.4%;比处理3(103.4cm)增加开展度为40cm,增38.7%。4种整形修剪方式的开展度增长情况为:处理2>处理4>处理1>处理3。

3.2.3成枝量。从表1看出:处理3增长最明显,丛均成枝量为271枝,比处理2(196.5枝)增加74.5枝,增37.9%;比处理1(185.6枝)增加85.4枝,增46%;比处理4(162.2枝)增加108.8枝,增67.1%。4种整形修剪方式的成枝量增长情况为:处理3>处理2>处理1>处理4。

3.3不同整形修剪方式对百叶玫瑰产量及产值的影响

3.3.1丛均产量。根据表3得出:处理3丛均产量最高,为0.886kg,比处理1(0.592kg)增0.294kg,增49.6%;比处理2(0.502kg)增0.384kg,增76.5%,比处理4(0.479kg)增0.407kg,增85.1%。因此,4种整形修剪方式的丛均产量情况为:处理3>处理1>处理2>处理4。

3.3.2产量及产值。以各处理丛均产量为基数,按种植密度折合产量及产值,表现为:玫瑰鲜花产量最高的是处理3,667m2产量达380.9kg,产值3808.6元;其次是处理1,667m2产量为254.8kg,产值为2547.6元;再其次是处理2,667m2产量为215.8kg,产值为2158.4元;最低的是处理4,667m2产量为205.8kg,产值为2057.9元。处理3(380.9kg)比处理1(254.8kg)667m2增产126.1kg,增加产值1261元;比处理2(215.8kg)667m2增产165.1kg,增加产值1650.2元;比处理4(205.8kg)667m2增产175.1kg,增加产值1750.7元。处理3综合表现为最好,且增产增收效果明显。

4结论与建议

4.1结论

处理3对玫瑰生长(玫瑰高度、开展度和成枝数)以及开花方面具有很好的促进作用,玫瑰产量最高,667m2产可达380.9kg,是值得在西山区内推广的玫瑰整形修剪技术。处理1对玫瑰生长(主要是高度)以及开花方面也具有一定的促进作用。处理2和处理4在促进玫瑰株丛开展度的增长方面具有较为显著的作用,但在促进玫瑰开花方面却不显著。

4.2建议

篇10

【摘要】 :目的 观察青藤碱对体外培养类风湿关节炎患者成纤维样滑膜细胞增殖以及基质金属蛋白酶-3(MMP-3)mRNA含量的影响。方法 培养人成纤维样滑膜细胞,分为青藤碱高、中、低剂量组和空白对照组,经青藤碱干预后,用四甲基偶氮唑蓝法测定细胞增殖情况,用半定量RT-PCR方法检测成纤维细胞中MMP-3 mRNA的表达。结果 经青藤碱干预后的人成纤维样滑膜细胞的增殖率受到显著抑制(P

【关键词】 类风湿关节炎 青藤碱 成纤维样滑膜细胞 基质金属蛋白酶-3

Abstract:Objective To observe the effect of sinomenine on the proliferation of fibroblast-like synoviocytes (FLS) and expression level of MMP-3 secreted by FLS in rheumatoid arthritis in vitro. Methods FLS were obtained by digesting synovial tissues with collagens and were pided into four groups:sinomenine high, middle, low concentration and control group. The proliferation of FLS was assessed by methyl- thiazolyl-tetrazolium (MTT) assay and the mRNA expression of MMP-3 was measured by semi-quantitative RT-PCR respectively after treated by sinomenine. Results The rate of FLS proliferation was significantly reduced in groups treated by sinomenine. Compared with control group, the mRNA expression of MMP-3 markly decreased in sinomenine groups (P

key words:rheumatoid arthritis;sinomenine;fibroblast-like synoviocytes;MMP-3

类风湿关节炎(rheumatoid arthritis, RA)是一种常见的以关节组织慢性炎症为主要表现的自身免疫性疾病。病变关节主要表现为炎性细胞浸润、滑膜增生、血管翳形成以及由此引发的软骨、骨和关节囊的损伤,最终可以导致关节的畸形和功能丧失。成纤维样滑膜细胞(fibroblast-like synoviocytes, FLS)是一种可以在RA的发病中引起关节损害的主要效应细胞。FLS分泌的基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase, MMPs)是一族锌离子依赖性的内源性蛋白水解酶,可以直接降解软骨和骨质从而对关节造成破坏。由于许多外来信息都必须首先激活MMP-3后才能活化其它MMPs,所以,FLS分泌的MMP-3在关节破坏过程中所起的作用非常重要[1]。研究表明,青藤碱(sinomenine,SIN)治疗RA具有较明确的疗效,具有抗炎、免疫抑制、镇痛等药理作用,且毒副作用较小,临床上得到了广泛的应用[2]。但是,SIN对于RA患者FLS分泌的MMP-3作用尚不清楚。本实验就SIN对RA患者FLS的增殖以及其MMP-3的mRNA表达进行研究。

1 材料与方法

1.1 标本取材

RA滑膜均取材于南方医院脊柱骨科因RA行全膝关节置换术或关节镜滑膜切除术患者的关节滑膜组织,所有患者均符合1987年美国风湿病学会修订的RA分类标准[3],患者对取材均知情同意。

1.2 主要材料和仪器

超净工作台、普通离心机、CO2培养箱、荧光倒置显微镜、酶联仪(BIO-RAD Model 550)、PCR仪(Perkin Elmer公司)。SIN干粉(含量98%,性状为白色粉末)由湖南正清公司提供;高糖DMEM培养基、胰蛋白酶均购自GIBICO公司;胎牛血清(FBS)、胶原蛋白酶、EDTA、四甲基偶氮唑蓝(MTT)均购自Sigma公司;Trizol试剂、引物(上海生物工程技术服务有限公司);RT-PCR试剂盒[宝生物工程(大连)有限公司]。

1.3 人成纤维样滑膜细胞的分离培养

手术中获得的滑膜组织,在无菌条件下用D-Hanks液洗涤3~4次,剔除脂肪组织后获得白色滑膜组织,修剪收集的滑膜组织的滑膜层,充分剪碎,加入胶原酶消化,用含10% FBS的DMEM,直接分散贴附于培养瓶底部,置CO2培养箱(5% CO2、37 ℃)培养。3~4 d更换培养基,去除未贴壁的组织块,以后2~3 d更换1次培养基。利用光学显微镜对人FLS进行鉴定,待长满培养瓶底后,用0.25% 胰酶-0.02% EDTA混合消化液消化,传代分瓶培养,以第2~5代FLS进行实验。

1.4 人成纤维样滑膜细胞的药物干预及分组

将SIN溶于DMEM基础培养基中,按照参考文献[4]方法设立高、中、低剂量组,配制成浓度分别为0.3、0.1、0.05 mmol/L的SIN溶液。在传代后培养的第3天分别按照高、中、低浓度加入SIN溶液,对照组加入等量DMEM培养液,于培养第8天收获。采用光镜观察鉴定滑膜细胞。

1.5 MTT法检测细胞增殖

取处于对数生长期的FLS,用含有0.25%胰蛋白酶-0.02% EDTA的消化液反复吹打,制成细胞悬液,用锥虫蓝拒染法检测细胞活力>95%。将细胞悬液1 000 r/min、离心5 min后弃上清,各组细胞用含有血清的DMEM培养基分别稀释至5×106/L。细胞悬液接种于24孔板,每孔加入800 μL,12 h后换液,用按照0.3、0.1、0.05 mmol/L配制好的含有高、中、低不同浓度SIN的DMEM培养液对各组细胞进行培养,空白对照组加入等量的DMEM培养基,37 ℃、5% CO2进行培养。按照文献[5]方法,在第8天用MTT比色法测定各组的A值均值,记录并计算不同浓度组和空白对照组对FLS的抑制率[抑制率(%)=1-试验组A值/对照组A值均值×100%]。

1.6 细胞总RNA提取

采用Trizol一步法提取人滑膜细胞的总RNA,经紫外分光光度计测量260 nm和280 nm吸光度,二者比值在1.7~1.9之间。

1.7 逆转录聚合酶链式反应

取2 μg总RNA,42 ℃ 30 min,99 ℃ 5 min;进行30个周期的PCR逆转录后,进行PCR扩增,以β-肌动蛋白(β- actin)作为内对照。采用DNAman软件设计引物,引物序列及扩增产物长度见表1。表1 MMP-3与β-actin引物序列(略)

按照宝生物工程(大连)有限公司RT-PCR试剂盒(AMV)说明进行PCR扩增。扩增参数设置如下:94 ℃ 2 min预变性1个循环,每个周期为94 ℃变性30 s,55 ℃退火30 s,72 ℃延伸2 min。取PCR产物置于2% 琼脂糖凝胶中电泳,溴化乙锭染色,电泳条带经Hema凝胶图像分析系统作条带密度扫描,结果以MMP-3与β-actin密度比值作为MMP-3表达参数,对MMP-3 PCR产物相对定量。

1.8 统计学方法

采用SPSS10.0统计软件进行数据分析,结果以x±s表示,各组数据经过正态检验和方差齐性检验后,进行单因素方差分析,P

2 结果

2.1 人成纤维样滑膜细胞的培养鉴定

胶原酶消化法培养的人FLS在培养1周后在倒置显微镜下可见组织块周围呈放射状生长,10 d见细胞开始脱离组织块呈梭形生长且连成网状,2周左右细胞成片生长,3周细胞长满瓶底,且细胞排列整齐,呈现明显的方向性;传代后的细胞在12 h内完全贴壁,初期呈网状分布生长,以后随细胞数量的增长逐渐紊乱无明显的方向性,细胞形态以梭形为主,交织成网,网间散布有较多多边形细胞。在光镜下可观察到:细胞呈卵圆形、梭形或柱形,有短突起, 核呈卵圆形位于细胞中央,有时可见多核巨噬细胞样细胞,生长良好,纯度高,细胞形态无改变。

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2.2 青藤碱对人成纤维样滑膜细胞体外增殖的影响

实验结果显示,较之于空白对照组,不同浓度试验组的细胞增殖均受到明显抑制(P

P

2.3 RT-PCR检测的结果

MMP-3的mRNA经逆转录聚合酶链式反应扩增后的扩增产物大小与预期一致。Hema凝胶图像分析系统作条带密度扫描显示,MMP-3与β-actin产物的OD比值,SIN高剂量组与空白对照组之间存在显著差异(P

3 讨论

RA以持续存在的滑膜炎为特点,其慢性滑膜增生主要表现为滑膜衬里层细胞增生、炎性细胞浸润以及滑膜下层血管生成,进而导致关节组织包括肌腱、关节囊、软骨和骨进行性和不可逆性破坏以及功能障碍。FLS是关节滑膜细胞中的一种主要细胞,可以根据环境的变化发生演变,存在异常的增殖与分泌。研究证实,在体外分离和培养的情况下,滑膜各层的FLS和血管翳细胞几乎没有区别[3]。FLS不但参与滑膜组织对关节软骨及关节周围骨组织的破坏,而且还分泌多种细胞因子,如肿瘤坏死因子α、白细胞介素-1等,相互作用,构成细胞因子网络,持续刺激滑膜细胞,使得关节软骨过度增殖,刺激炎症反应,间接导致关节软骨的破坏[1]。这些都提示FLS是一种可以引起关节损害的主要效应细胞。RA的关节组织破坏主要是结缔组织的细胞间质降解以及溶解的结果。而结缔组织细胞间质以及软骨的降解和溶解长期以来被认为与细胞因子刺激下软骨和滑膜细胞产生的MMPs有关[6]。MMPs是一组在结构上具有极大同源性、能降解细胞外基质蛋白的内肽酶的总称。MMPs对RA的关节破坏作用可以概括为两个途径,一是直接降解软骨和骨质,二是在血管生成方面具有重要作用,这是RA的显著特征[7]。在RA的早期,增生的滑膜组织在向关节软骨面生长的同时侵蚀关节软骨,形成血管翳,血管翳中含有大量的成纤维细胞,可以释放胶原蛋白酶、MMP-3等[8];同时,FLS在一些细胞因子的刺激下也可以分泌MMP-3,进而激活胶原蛋白酶,通过滑液作用于无血管翳附着的软骨进而引起骨组织的破坏。这种分泌的MMP-3也是一种对基质起广泛作用的蛋白酶,被认为是导致软骨降解的最重要的蛋白酶,它对RA关节的破坏作用主要在于软骨和骨质[8]。有研究证实,滑膜细胞、成纤维细胞、软骨细胞都可以分泌MMP-3,其活化可以导致软骨连接蛋白、纤维连接素以及多种胶原酶等蛋白酶的降解,被认为是降解关节软骨最为关键的蛋白酶[7]。所以,MMP-3在RA中的研究近年来也得到了越来越多学者的重视。

研究发现,RA患者血清中的MMP-3水平显著高于正常对照组,而且其水平的升高与RA的活动性有关[9]。同时还发现,RA患者关节滑液中MMP-3含量明显增高而且其滑膜中的MMP-3蛋白和基因均处于过度表达状态[10]。所以,抑制FLS增殖已成为治疗RA的重要手段之一。在对RA患者关节滑膜液中的糖蛋白降解产物进行进一步的分析中发现,其核心蛋白成分都是在对MMP-3易感的位点处被裂解[11]。这些也都提示,MMP-3在RA关节的破坏中起着极为重要的作用。

我们研究发现,RA患者滑膜组织是大量增生的,SIN可以显著抑制FLS的增殖,同时,SIN还可以显著抑制MMP-3的mRNA表达,且实验初步表明,高剂量组较之低、中剂量组的抑制效果更加明显(P

参考文献

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[2] 汪倪萍,魏 伟.中药活性成分的抗炎免疫和镇痛作用[J].中国药理学通报,2003,19(4):366-370.

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