青春啊范文

导语：如何才能写好一篇青春啊，这就需要搜集整理更多的资料和文献，欢迎阅读由公务员之家整理的十篇范文，供你借鉴。

篇1

各大论坛都流行着一句话，韩剧核心理念是闪闪发光的我在你眼里闪闪发光，日剧的理念是我平凡又渺小，好比一块黑面包，可这样的我，在你眼里依旧能够闪闪发光。

这部《对不起，青春》也秉承着日剧一向的核心理念，关键词是青春、热血、有趣。男主角是近年有着超高人气，并且和女神新桓结衣有过一段情的锦户亮，帅气的外表也为整部剧添色不少，被称为耷拉眼版本的陈坤。

男主角恋上气质女神，却不幸被好友撬了墙脚，一气之下，怒放烟花，却导致了隔壁女校的火灾。这场火灾导致两所学校之人一直彼此憎恶着对方，十四年后，女高面临破产，不得不尝试与隔壁男高合并。

合并前的试点班级班主任，便是十四年前引发那场火灾的男主角。十四年前的火灾一直是男主角心中无法释怀的原罪，他想要尽自己最大的努力弥补自己的过错。

整部剧的人设就是：女主角是神经病一样的存在，气场暴烈，能瞬间手撕鸡；男主角软萌可爱，每集耍一次嘴皮，爱说教；保守的大嫂以前拍过热辣写真集；神神道道的妈妈会常常扮成各种卧姿奇怪的佛像。

总有人呵斥国产青春剧不属于我们这一代人，又穷又丑的人没有青春，只有堆满课桌的试卷和习题册。其实青春里点点滴滴的快乐如同被海浪冲上沙滩的贝壳，缤纷且多彩，关键是看你是否有心采撷。

剧中每个人物都诠释着自己在青春时面临的种种问题，男主角为自己十四年前犯下的错耿耿于怀，女主角不明白自己为什么会喜欢上完全不是理想型的男主角。有人因为压力一直压抑着自己，有人因为自卑一直不敢向喜欢的人表白心迹。

可身为男主角的班主任鼓励他们勇敢去做――

“喜欢一个人，就应该让他（她）知道，否则不是白白喜欢了吗？”

“青春只有一次，贪婪点有何不可？”

置身事外的人永远最轻松，停顿在原地的人永远不用担心未来，可是不努力迈出一步，就永远不知道前面等待着自己的是什么，是他（她）的“我也喜欢你”抑或是“对不起”？无论答案是哪一个，只有迈出这一步的人才有权利知道。

青春不是一条一通到底的大道，它是一条有着无数岔道的小路，每一个岔路口，我们都要选择往哪里走。偶尔走了错误的路，绕了远一点的路，又有什么关系呢？或许这条小路有更美丽的风景，或许你在这条小路上能碰到志同道合的好朋友。

我们每个人都有权利犯错误，也都有权利说对不起，年轻的时候，要勇敢地去走那条自己向往的路。

我读书的时候喜欢一个人，我觉得他有一点傻，像横道世之介，也像堂吉诃德，勇敢到莽撞，善良到蠢笨。可年轻时的骄傲总是阻止我告诉他自己的心意。后来我跌跌撞撞长大了，我喜欢的那个人却早已经有了一个对他好、喜欢他的姑娘。

所以我一度认为自己是一个很糟糕的人，年少时候的虚荣让我不敢承认自己的心思，后来又成了一个胆小鬼，总也不敢说自己那点忐忑的念想。

因着这点经历，我看这部剧时，几乎哭成了泪人。

篇2

“女硬汉”VS“小娇羞”

小时候坚信妇女能顶半边天，长大了后才发现不对劲，但凡顶天立地的女子们都变成了一群会痛经的“女硬汉”，有些甚至还引以为荣。这让人挺伤感的，女人哪能是这样的?

我们是该在超市掰碎袋装泡面报复社会?还是该痛骂男人不够争气?还是该诅咒那些不肯跟我们一起做一条真的汉子的“小娇羞”呢?一切的一切都只能无解，“女硬汉”和“小娇羞”的关系就好比刘三好与姚金铃、聂宝言与小唐菜、四眼衰女与金发啦啦队长、奥斯卡影后与杰西卡・阿尔芭。

如果你常看美式青春校园片，就会发现，片子里雷打不动会有啦啦队长与橄榄球四分卫或篮球队长的“官配”组合，要是啦啦队长恰好是不起眼女主角的死对头，那么橄榄球四分卫或篮球队长在影片最后必定会被猪油蒙了心，发现外在美虽重要，四眼衰女的内在美却更好。

那些骄纵任性、美丽动人的拉拉队长们，她们自小貌美优秀、充满自信、人见人爱，早上上学去，呼风唤雨带着小喽，双手叉腰猫步横行于休息区，众人如迎接公主驾临。这样的生活多么美好，直到被女主角使绊子、插足。然后，就没有然后了，你用脚趾头想都该知道，代表主流价值观的女主角彻底赢了，美女的命运再无人关心。

笔者年轻的时候很喜欢看这类灭美女威风的桥段，但是随着年龄的渐长，却越来越喜欢漂亮的人物，尤其是年轻的啦啦队长们都酷似杰西卡・阿尔芭的翻版。她可是全民宝贝啊，是自从《风度》杂志2000年开始设置“年度最性感100人”名单以来，唯一每年都榜上有名的女人。业界总有各种关于杰西卡的“神话”――《美国周刊》声称，杰西卡曾是汤姆・克鲁斯与凯蒂・霍尔姆斯交好之前的首选目标。而痞子阿姆则在歌曲《My Band》中念叨：“昨天Kuniva(说唱乐队D12成员之一)拿刀威胁我，因为我告诉他，杰西卡・阿尔芭会成为我的老婆。”《碧海追踪》的导演斯托克威尔则回忆道：“米高梅的主管们在后期监制过程中，都被杰西卡的美貌所分神。我会时不时地受到质问：‘为什么你把她游泳那段剪掉了?’”

少年记忆女主角

没错，能让观众几年来都忽略演技，只求一睹银幕上芳容的女星，似乎也只有杰西卡・阿尔芭一人。其实杰西卡并不是一个嚣张跋扈的姑娘，只是那样一张阳光明媚如五月天的脸庞，和如蜜糖裹身般的身段，就该是一个颠倒众生的校园尤物。

据美国IMDb电影网站的一项统计表明，杰西卡的美貌正好符合15-28岁常上电影院观影的男青年的审美标准。在他们心里，杰西卡是青春的影像，当历史背景褪色、记忆浑浊的时候，只有她的笑容和美好还是清晰的，定格在16岁暑假的海边假期里，鲜明在和死党的中――少年始终不敢冲上前去和她说声“嗨”，因为她身边已经有一个高大英俊的他，她是一个爱欺负人但本性不坏的17岁姑娘，并忠于爱情，即使他是一个人渣，少年也深知就算他和她分手了也没自己的事儿。于是漫漫长夜里，为情所困的少年撸完一管又一管。

于是杰西卡成了所有少年心事中的女神，是他们储藏柜深处的秘密，是从美国东海岸到西海岸天空上呼啸而过的飞机，是返校舞会皇后评选时斩钉截铁的选票，是再也回不去的高中时代里最后一丝忧郁。

如今已经是两个孩子妈妈的杰西卡，仍然保持着神奇的少女美态，仿佛从未走出过少年们的梦中。她一直站在原地，像个符号，指导大家完成青春必修课。虽然身边除了高大英俊的外，还多了两个小奶瓶，但这无损她爱情导师的形象。

龅牙妹都是潜力股

现实中的杰西卡并不是一路从美少女长成大美人的。小时候的她根本就不是学校里的风云人物，她在接受采访时表示：“我在学校时总是被欺负得很惨，爸爸不得不经常护送我进学校以免受到袭击。中午我要躲在护士的办公室吃午餐，这样就不必跟其他女孩坐在一起。总是蓬头垢面的我，上课时则得时刻保持警醒。这些遭遇除了因为我是混血人种外，还因为我的爸妈没钱。我既没有漂亮衣服，也没有酷酷的背包，你想，一个讲话带着浓厚得克萨斯州口音的龅牙妹，谁不想顺带欺负一下?”

杰西卡长到十五六岁的时候，才开始穿短裙和泳装，蜕变由此开始。她一步步地突破自我，摆脱拘束，重拾自信。拍摄电影《罪恶之城》时，导演罗德里格斯觉得她应该把头发染成金色，于是人生中第一次杰西卡上沙龙换了发色。那段时间，当她顶着金发出入比弗利山酒店或四季酒店的酒廊时，都不需要自己掏钱买酒。“酒店里挤满了王子或富有的老男人，每次都会有人请我喝一杯，我对自己说：‘噢，天啊，难道就是因为我的金发?!’那是我最大限度地卖弄自己了，仅此而已。我一直遵循妈妈教给的道德标准，自我尊重和尊重他人。我希望我的孩子也能学到这点。”

看看今时今日的杰西卡，不晓得当年欺负过她的男同学们作何感想。笔者不得不提醒大家，龅牙妹都是潜力股，好好珍惜吧。

表演自在街头

在国内即将上映的系列电影《非常小特工之时间大盗》中，杰西卡・阿尔巴饰演一个孩子的亲妈，两个孩子的后母，隐藏身份还是一个身手不凡的女特务。这是杰西卡第一次在大银幕上扮演母亲的角色，看似是个挑战，实际上是她最拿手的――去年杰西卡生下了第二个女儿海文・加纳・沃伦，辣妈春游的队伍又壮大了。

说到好莱坞的辣妈街拍，就必须得提杰西卡・阿尔芭，虽然她没有“精灵嫂”米兰达・可儿的模特身材，没有“贝嫂”维多利亚・贝克汉姆的大女人气场，也没有“阿汤嫂”凯蒂・霍尔姆斯的全身贵气名牌，但是杰西卡胜在温婉亲切，家常可人。更重要的是，她随身携带的最佳配饰――大女儿奥娜，实在是太古灵精怪了。被围观群众亲切称为“图娃”的奥娜，完全不是小苏瑞那样的小公主派头，你永远都想不到头戴各种莫名其妙、五彩斑斓发卡的娃，在面对狗仔镜头时的下一个表情和动作是什么，吐舌头还是斗鸡眼?猩猩步还是僵尸舞?萌得太刺激了。

比起演技时常被评论家诟病的妈妈来说，娃更有表演天分，这就叫上帝关上一扇门，又会为你打开一扇窗――辈子都可能无缘奥斯卡奖的杰西卡，收获了一个小表演艺术家。

一个能把孩子捌饬成这样的妈妈，也一定是个极天真和有趣的人。所以在街拍这件事情上，杰西卡也总给人一种“我很认真地想知道，你们到底喜欢我穿什么”的敬业态度。她的出镜率特别高，以至于街拍都快成了她的主业。在所有好莱坞辣妈中，杰西卡的穿着打扮有很高的学习价值。不拍戏时，她做的最多的事情就是把自己和孩子打扮得漂漂亮亮，挑一个光线最佳的时段出门，有意无意地配合着狗仔拍美照。

篇3

太阳是金梭，月亮是银梭，织出生活的灿烂，织出岁月的壮美。这是青春的主旋律，也道出了生命之于时光的意蕴。

光阴荏苒，转瞬离开共青团岗位已经十多年了，也许日常工作的琐屑渐次淡然，但青年工作朝气蓬勃、昂扬奋发的气息和精神，一直激励着我在不同的工作中进取。回首过往，那是一段深刻而美好的记忆。之所以深刻，是因为共青团工作让我感悟到，青年人敢作敢为的情怀只有与祖国和人民的念想紧紧拥抱在一起，才会显得那样的开阔和博大；之所以美好，是因为共青团工作让我从一种职责、一种使命的角度去透视赤橙黄绿青蓝紫，让我认识到青春是以奉献印证出自己最靓丽的本色。故此，我多有感慨：人生能有在共青团工作的经历，端的是一种缘分，一种精神的财富，它能让你跟随时代的走向一往无前，终身受益。

由青年工作我想到青年人，由青年人我想到青春。青春不属于某个年龄段的专利，青春是进取的标志，是创新者的宣言。青春是一种精神，是书山勤为径、学海苦作舟的追寻，是路漫漫其修远兮的求索，是苦其心志劳其筋骨的磨砺，是百尺竿头更进一步的跋涉。青春是一种使命，是成就伟业舍我其谁的气魄，是天下兴亡匹夫有责的胸襟，是我以我血荐轩辕的赤诚，是只问耕耘不问收获的超脱。

人生短暂，平凡而伟大；青春不朽，纯粹而灿烂。生命因奋斗而壮美，青春因追求而风流。朋友们，该是我们写下传说的时候了。

谨以此感言向《时代青年》创刊60周年暨复刊30周年表示热烈的祝贺。

(作者王新强系河南省西平县人民政府县长。曾任河南省直机关团委书记)

精彩的驿站，无悔的青春――写在《时代青年》创刊60周年复刊30周年之际

朱良才

六十甲子，岁月轮回，沧海桑田，流逝的是岁月，孕育的是希望；

三十而立，时光荏苒，峥嵘年华，留下的是足迹，收获的是辉煌。

《时代青年》，谱尽青春风华；《时代青年》，指引青春航向。

“聚是一团火，散作满天星。”正是这种生生不息的共青精神，感召我们奋斗在鲜艳的团旗下。有缘投身团的工作，是组织的信任，更是个人的光荣。

我从乡镇最基层的岗位上一步步走进共青团的大家庭，既经历了战天斗地的豪情、面朝黄土背朝天的艰辛，也感受了泥土芳香中播撒希望、欢庆收获的喜悦。回首美好难忘的流金岁月，五彩斑斓的广阔天地，浸润这片沃土的滋养，沐浴共青团工作洗礼，砥砺了自己的品性，坚定了自己的意志，陶冶了自己的情操，真正领会了“春夏秋冬共青路，东南西北共青情”的内涵。

我挚爱共青团工作，并荣幸能成为共青团大家庭的一员，先后两次团的工作经历，四年难忘的共青岁月，让我深切感受到共青团火一样的生命力和青年的热情、无畏、朝气与潜能。与青年志愿者一起支援四川灾区，和小朋友共值“红领巾交通岗”，为留守儿童送去发自内心的关爱，同周口青年英模倾情交流，帮外出务工青年撑起一片晴空……我正是在朝气蓬勃、实事求是的追求与挑战中感受着青春的魅力与永恒。

篇4

中国内地新生代85后男演员，人称“广告小天王”。毕业于上海戏剧学院表演系的郑恺，曾任上海话剧艺术中心演员，现为华谊兄弟文化经纪有限公司旗下艺人。主演电视剧有《离婚前规则》、《我的青春在延安》、《梦回唐朝》等，2013年在电影《致我们终将逝去的青春》中饰演许开阳，《非常幸运》中饰演阿宝。

MJ X 郑恺

MJ：最近在忙些什么？

郑恺 最近在拍冯导的《私人定制》，这是部爆笑喜剧贺岁片，由冯小刚导演、王朔编剧，与葛优、李小璐等演员合作演出，预计在年底12月份上映。

MJ：说一说你在电影《非常幸运》中的角色是怎样的？

郑恺 是一个特工的角色，这是一部美国喜剧商业大片，导演是来自好莱坞的邓尼・戈登，所有的幕后团队几乎都来自好莱坞，这使我们的电影有了一个很高的起点。和《非常完美》一样，《非常幸运》讲述的依然是关于爱画漫画的女孩“苏菲”的故事。傻头傻脑的苏菲被卷入一场商业大案，在破案过程中发生了一系列好笑的事。我与王力宏出演两个特工搭档，新剧情也加入更多幻想元素，苏菲不同于上次只是和情敌周旋，而经历了仿佛漫画中真正惊险刺激的场景。

MJ：这次拍戏过程中，经历的印象最深刻的事是什么？

郑恺 这次拍戏规模非常庞大，我们到全球众多旅游胜地取景。在新加坡、澳门、香港等地，可以看到各种好看的风景。包括在拥有世界最高的空中游泳池的金沙酒店进行拍摄，在拍戏的同时丰富自己的阅历并且开拓自己的眼界，这是尤为特别的一点。

MJ：跟章子怡合作下来，对她本人有什么印象？

郑恺 子怡是一个很认真的人，作为演员她在演戏时非常投入，将自己的角色琢磨很透，同时她还担任制片人的角色，会时不时跳出来，以一个制片人的身份来指挥现场的工作。但平时她私底下还是比较小女生的，包括她演的角色也是傻傻乐乐的小女孩，我觉得这也是她本身就带着的一种感觉，而有时候她又可以很国际范儿，她可以很自如地在几个身份之间转换。

MJ：这次拍摄以度假风格为主，基本上都是蓝色，你个人有没有比较喜欢的颜色？

郑恺 其实我最喜欢的就是蓝色！说起对蓝色的感觉，就要提起小时候了。有一次我躺在草地上看天空，突然发现天空特别蓝，给人感觉特别舒服和放松。然后，我就爱上了天空的颜色。

篇5

作者：梁英民　蒋姗姗　孙强　吴绒丽　陈萍　李荣　周鹏　王键　韩骅

【关键词】 基因表达

关键词: bcr/abl;基因表达;融合蛋白;抗血清

摘 要:目的 克隆并表达bcr/abl融合基因片段，并制备其抗血清. 方法 PCR扩增包含蛋白融合点的bcr/abl癌基因片段，序列测定后克隆入带有His标签的原核表达载体pET-16b，转化宿主菌BL21，IPTG诱导表达，SDS-PAGE分析表达结果，Ni-NTA树脂亲和纯化，皮下多点注射免疫小鼠，ELISA确认抗血清的滴度. 结果 PCR扩增得到大小约523bp的目的片段，序列测定表明与发表序列完全一致;得到了一种新的癌基因bcr/abl片段的原核表达载体pET-16b-bcr/abl，在BL21中表达可见于Mr21×103 处有一蛋白新生带，表达的BCR/ABL蛋白免疫小鼠后，ELESA确认抗血清的滴度>1∶2000. 结论 成功的克隆、表达了bcr/abl融合基因片段，并制备了相应的抗血清.

Keywords:bcr/abl;gene expression;fusion protein;immune serum

Abstract:AIM To clone and to express bcr/abl fusion gene fragment and to produce immune serum against the expressed fusion protein.METHODS PCR-amplified bcr/abl gene fragment was inserted into plasmid pET-16b with His tag　to form a new plasmid pET-16-bcr/abl（pEb）.The BCR/ABL fusion protein was expressed in E.coli BL21trans-formed with pEb and induced with IPTG.The expressed pro-tein was purified by affinity resin-Ni-NTA and analyzed by SDS-PAGE.In order to produce anti-serum，Mice were im-munized by subcutaneously multi-site injection with BCR/ABL protein.The anti-serum was assayed by ELISA.RESULTS Molecular weight of the PCR-aimplified bcr/abl gene fragment which was consistent with the published se-quence was about523bp.Plasmid pEb was constructed.The molecular size of BCR/ABL protein expression was about Mr21×103 .The titer of the BCR/ABL protein anti-serum was more than1∶2000.CONCLUSION Fragment of bcr/abl fu-sion gene is successfully cloned and expressed.The antiserum of BCR/ABL protein fragment has been produced.

0 引言

慢性粒细胞白血病（Chronic myelogenous leukemia，CML）是起源于骨髓造血干细胞的恶性肿瘤.绝大多数CML患者的肿瘤细胞带有染色体异常，即9∶22号染色体易位，形成特征性的费城染色体（Pheladophia，ph染色体）［1，2］ .在分子水平，这一染色体易位造成bcr基因和abl基因的融合，表达的BCR/ABL融合蛋白具有持续性的激酶活性，引起细胞的转化［2］ .Bcr/abl融合蛋白被认为是CML特异性肿瘤抗原，可作为CML诊断和治疗的指标［3-6］ .我们用PCR扩增了BCR/ABL融合蛋白的基因片段，并在大肠杆菌中进行了表达.表达产物经纯化复性后，用于免疫小鼠，得到可识别该抗原的小鼠抗血清.

1 材料和方法

1.1 细菌和质粒 大肠杆菌XL-10gold由本室保存.质粒pET-16b及大肠杆菌BL21均来自Nav-agene公司.带有人bcr/abl（b3a2）融合基因的质粒pGD210由本校附属唐都医院血液科刘立博士提供.

1.2 引物设计与bcr/abl融合基因表达质粒的构建 DNA重组所用试剂来自Promega、宝生物工程公司及华美生物工程公司.以质粒pGD210为模板，用PCR扩增了bcr/abl基因跨越融合点的523bp基因片段（93aa-265aa）.PCR引物的序列为:上游引物:5’-CTCGAGACGTTCCTGATCTCCTCT;下游引物:5’-GGATCCTTAGTAGTTGCTTGGGACC-CA.PCR产物经电泳回收纯化后插入pGEM-T载体（Promega），进行DNA序列分析.从正确克隆的载体中，用Xho I和BamH I双酶切下含有bcr/abl融合基因插入片段，插入质粒pET-16b，得到表达BCR/ABL融合蛋白的质粒pET-bcr/abl（Fig1），以下简称pEb.

1.3 重组蛋白的诱导表达和纯化 用表达质粒pEb转化大肠杆菌BL21，加入IPTG至终浓度1mmol・L-1 ，诱导不同时间后，收集菌体.悬浮于PBS，超声裂菌，离心弃去上清.向沉淀中加入2mol・L-1 尿素，离心除去杂蛋白.再用8mol・L-1 尿素溶解沉淀的蛋白，在Ni-NTA-agarose柱（Vector公司）上进行亲和层析.用250mmol・L

-1 咪唑洗脱.收集洗脱的蛋白，透析后冻干保存.

图1 略

1.4 抗血清的制备 BALB/c小鼠由第四军医大学实验动物中心提供，用50μg基因重组的BCR/ABL融合蛋白与等量的福氏佐剂混后皮下多点注射，每周一次，第四周腹腔注射加强一次，加强免疫后14天取血，分离血清备用.

1.5 酶联免疫试验（ELISA） 向96孔板中加入纯化的BCR/ABL融合蛋白（5μg/μL）100μL，4℃包被过夜.加入稀释的经免疫小鼠的血清与未经免疫小鼠的血清，血清稀释度均为1∶500，1∶1000，1∶2000，1∶4000，1∶8000，1∶16000，设一阴性对照孔， 37℃水浴1h，加入酶标抗体，37℃1h，TMB显色15～30min，酶联免疫检测仪测定，测定波长为492nm.

1.6 DNA序列分析 按说明书用PE公司的荧光DNA序列测定试剂盒（Big-dye）进行序列测定反应，用310型DNA序列测定仪进行电泳及结果分析.

2 结果

2.1 bcr/abl基因的亚克隆 为表达BCR/ABL融合蛋白融合点两侧约200个氨基酸的片段.以全长bcr/abl基因为模板，用PCR扩增了这一片段的cD-NA.Fig2显示523bp的目的片段被扩增出来.将这一片段插入T载体后，进行DNA序列分析，但在5’和3’端分别插入了设计的Xho I和BamH I酶切位点.

图2 略

2.2 BCR/ABL融合蛋白的诱导表达 用bcr/abl表达质粒pEb转化大肠杆菌BL21，培养后用IPTG进行诱导.SDS-PAGE分析结果表明，与用pET-16b转化的BL21及未转化质粒的BL21裂解产物相比，在21kd处有一新生蛋白带，与预期的融合蛋白分子大小相同.灰度扫描显示IPTG诱导3h后融合蛋白的表达约占细菌总蛋白的20%.

2.3 BCR/ABL融合蛋白的纯化 用Ni-NTA-a-garose亲和层析柱进行BCR/ABL融合蛋白的纯化.收集蛋白峰，PBS透析后，进行SDS-PAGE分析（Fig3）.表达的融合蛋白被纯化为单一条带.

2.4 BCR/ABL融合蛋白在小鼠中的抗体应答 收集免疫小鼠的抗血清，ELISA检测结果见图4，与正常对照比较，接受融合蛋白免疫的小鼠产生了较高滴度的血清，说明基因重组的BCR/ABL融合蛋白对小鼠具有免疫原性.

图3 － 图4 略

3 讨论

bcr/abl融合基因是CML的分子标记，bcr/abl融合基因编码一个分子量为Mr21×104 的融合蛋白.由于融合蛋白连接区的氨基酸序列是其他任何正常蛋白质不具有的，被认为是CML细胞所特有的.BCR/ABL融合蛋白是一种胞浆内蛋白，研究bcr/abl融合蛋白在细胞表面的表达的类型和该融合蛋白的免疫学特点对开展CML的免疫治疗有重要意义［3-6］ .然而，由于融合蛋白很难从患者体内获得，而且在细胞内加工和提呈的效率也难以检测，为此，本文用体外基因重组的方法获得了bcr/abl融合蛋白的原核表达产物，经纯化复性后，用于免疫小鼠，得到了可识别该抗原的小鼠抗血清，为随后的单克隆抗体制备及免疫治疗的研究奠定了基础.

参考文献

［1］Kurzrock R，Gutterman JU，Talpaz M.The molecular genetics of Philadelphia chromosome-positive leukemias ［J］.N Engl J Med，1988;319（15）:990-998.

［2］Shtivelman E，Lifshitz B，Gale RP，Canaani E.Fused transcript of abl and bcr genes in chronic myelogenous leukaemia ［J］.Na-ture，1985;315（6020）:550-554.

［3］Liang Y M，Sun Q，Jiang S S，Cheng P，Wang J S，Liu L，Han H.Expression of PTD-bcr/abl fusion oncoprotein fragment carrying protein transduction domain and its transmembrane transportation ［J］.Di-si Junyi Daxue Xuebao（J Fourth Mil Med Univ），2001;22（7）:Cover2.

［4］Feng Q，Sun BZ，Zhao YT，Sun K，Yan Z，Han W，Zhang YQ.Study on the cleavage ability of three ribozymes specific to the different sites of bcr-abl fusion gene ［J］.Di-si Junyi Dax-ue Xuebao（J Fourth Mil Med Univ），1999;20（4）:284-287.

篇6

[关键词] 阿法骨化醇；IgA肾病；肿瘤坏死因子-α；白细胞介素-6；转化生长因子-β1

[中图分类号] R692.6 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210（2016）03（b）-0150-04

[Abstract] Objective To explore the effect of different doses of Alfacalcidol on serum levels of tumor necrosis factor alpha （TNF-α）， interleukin 6 （IL-6） and transforming growth factor beta 1 （TGF-β1） in patients with IgA nephropathy （IgAN）. Methods 52 patients with IgAN admitted to Three Gorges University People's Hospital from October 2012 to February 2015 were selected and randomly divided into group A and group B， with 26 cases in each group. While 30 healthy adults were selected as normal group. On the basis of routine RAS therapy plan， group B was treated with Alfacalcidol （0.5 μg， once a day） for 12 weeks， while group A was treated with Alfacalcidol （0.25 μg， once a day）. The changes of serum TNF-α， IL-6， TGF-β1， cystainCm（Cys-C）， blood urea nitrogen （BUN）， serum creatinine （Scr） and 24 hours urinary total protein （UTP） in two groups were compared before and after treatment. Results Compared with normal group， serum TNF-α， IL-6 and TGF-β1 levels were significantly higher than those in IgAN group （P < 0.01）. After 12 weeks of treatment， the level of TNF-α， IL-6， TGF-β1， Cys-C and 24 h UTP had obviously declined （P < 0.05）， compared with that before treatment in two groups， and the reduction of group B was higher than group A （P < 0.05）. There was no significant difference in BUN and Scr between the two groups before and after treatment （P > 0.05）. Conclusion Inflammation reaction exists in IgAN， Alfacalcidol can significantly reduce TNT-α， IL-6， TGF-β1 level in serum of IgAN patients， reduce albuminuria， improve renal function， and the dose of 0.5 μg/d is better than 0.25 μg/d.

[Key words] Alfacalcidol； IgA nephropathy； Tumor necrosis factor-α； Interleukin-6； Transforming growth factor-β1

IgA肾病（IgA nephropathy，IgAN）是导致我国终末期肾病的主要原因之一。尽管其病因与发病机制尚未完全阐明，但IgAN发病机制的中心环节与细胞炎性因子的分泌异常有关，且被认为是导致各种肾小球肾炎肾脏损伤的重要物质。既往已有研究报道在IgAN患者血清中炎性因子表达升高[1]，且临床研究证实活性维生素D能降低IgAN患者的蛋白尿，已作为IgAN治疗新的尝试[2-3]，但目前尚不清楚在不同的病理生理状态下，活性维生素D作用于维生素D受体，进而能产生抗炎性反应作用所需的合理剂量[4]。本研究旨在观察已应用双倍剂量肾素血管紧张素系统（RAS）阻断剂治疗3个月以上、但蛋白尿未降至0.5 g/24 h以下的IgAN患者血清肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）和转化生长因子-β1（TGF-β1）水平的变化及探讨不同剂量阿法骨化醇对其的影响，现将结果报道如下：

1 对象与方法

1.1 研究对象

选取2012年10月～2015年2月在三峡大学人民医院（以下简称“我院”）随访的IgAN患者52例。纳入标准：①Lee分级Ⅱ级或Ⅲ级；②双倍剂量的RAS阻断剂治疗时间3个月以上，血压控制在130/80 mmHg（1 mmHg=0.133 kPa）以内；③24 h尿蛋白定量0.5～3.0 g伴或不伴血尿，估算肾小球滤过率（MDRD计算公式）>50 mL/（min・1.73 m2）。排除标准：①继发性IgAN患者；②阿法骨化醇过敏者；③计划妊娠者；④使用糖皮质激素或其他免疫抑制剂者；⑤合并严重心、脑、肝等慢性疾病者；⑥高钙血症者；⑦2周内应用过维生素、阿司匹林、调脂药及抗氧化剂药物者；⑧依从性差不能完成随访者。符合入选标准的IgAN患者52例，其中男29例，女23例，平均年龄（35.1±13.2）岁。按随机数字表法分为A组和B组，每组26例，两组患者在性别、年龄、病程、血压、肾脏病理及RAS阻断剂药物治疗方面比较，差异无统计学意义（P > 0.05），具有可比性。见表1。同期选取性别和年龄与患者相匹配的健康成年人30例为正常组，其中男16例，女14例，平均年龄（34.9±13.1）岁，均来源于我院健康体检者。本研究方案经我院医学伦理委员会通过，所有患者均签署了知情同意书。

1.2 方法

所有IgAN患者均维持原有双倍剂量RAS阻断剂等常规治疗，在此基础上，A组患者口服阿法骨化醇胶丸（中美合资昆明贝克诺顿制药公司生产，国药准字J20130162）0.25 μg，1粒/d，B组口服阿法骨化醇胶丸0.5 μg，1粒/d。两组疗程均为12周。

1.3 检测指标及方法

双抗体夹心酶联免疫吸附试验法检测外周血中TNF-α、IL-6和TGF-β1含量。日立7600型全自动生化分析仪检测血胱抑素-C（Cys-c）、血尿素氮（BUN）、血肌酐（Scr）水平。双缩脲法测定24 h尿蛋白总量（UTP）。

1.4统计学方法

应用SPSS 20.0统计软件对本研究所得数据进行分析。计量资料以均数±标准差（x±s）表示，同组内治疗前后比较采用配对t检验，两组间比较采用独立样本t检验，以P < 0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 IgAN组和正常组血清TNF-α、IL-6和TGF-β1水平比较

与正常组比较，IgAN组患者血清TNF-α、IL-6和TGF-β1水平明显升高，差异均有高度统计学意义（P < 0.01）。见表2。

2.2 A组和B组Cys-c、BUN、Scr、24 h UTP比较

治疗前，A组和B组Cys-c、BUN、Scr、24 h UTP差异比较无统计学意义（P > 0.05）。12周后，A和B组患者Cys-c、24 h UTP均较本组治疗前显著下降（P < 0.05），且治疗B组患者Cys-c、24 h UTP均低于治疗A组，差异均有统计学意义（P < 0.05）。两组患者BUN、Scr水平比较以及与本组治疗前相应指标水平比较，差异均无统计学意义（P > 0.05）。见表3。

2.3 A组和B组血清TNF-α、IL-6和TGF-β1比较

治疗前，A组和B组患者血清TNF-α、IL-6和TGF-β1水平比较差异无统计学意义（P > 0.05）。12周后，A组患者血清TNF-α、IL-6、TGF-β1水平较治疗前明显下降，差异有统计学意义（P < 0.05）；B组血清TNF-α、IL-6、TGF-β1水平较本组治疗前及治疗A组治疗后明显下降，差异均有统计学意义（P < 0.05）。见表4。

3 讨论

IgAN是多因素参与的免疫相关性肾小球肾炎，现代分子生物学研究认为，免疫介导的炎症反应在IgAN发生、发展中起关键作用[5]，免疫反应为始动因素，IgAN患者体内的异常多聚IgA1沉积于肾系膜细胞（glomerular mesangial cells，GMC）后释放了多种炎性因子而致病，其中炎性因子TNF-α、IL-6、TGF-β1 在IgAN进程中的作用逐渐引起人们的广泛关注[6]。

TNF-α主要由活化的单核巨噬细胞产生，但肾脏固有细胞如GMC、上皮细胞均可分泌TNF-α。研究表明[7]，TNF-α可影响肾小球GMC功能，导致细胞形态和细胞骨架的改变，刺激GMC增殖及表达黏附分子，并能刺激成纤维细胞增生，促进肾脏纤维化。有报道显示[8]，IgAN患者血、尿及肾组织中TNF-α的浓度均明显增高，其升高程度与病情成正相关，随着病情的好转，TNF-α含量明显下降。IL-6既可作为各种肾脏病急性期反应的调节因子，又可通过自分泌或旁分泌方式与多种细胞炎性因子如TNF-α、TGF-β1等相互作用，参与免疫调节和炎症反应。目前有研究显示IgAN患者血清IL-6水平明显增高，IL-6可促进内皮细胞和巨噬细胞的促凝血活性、增加系膜细胞蛋白激酶的活性，加重肾脏损害[9]。马云霞等[10]研究表明，在系膜增殖性肾炎病变中，免疫复合物沉积刺激GMC分泌IL-6，IL-6又可以进一步刺激细胞外基质的增生，形成恶性循环，导致肾小球纤维化。有学者应用抗IL-6抗体，既可抑制GMC分泌IL-6，又可抑制系膜增殖[11]，进一步表明IL-6在IgAN的发生、发展及转归中的重要意义。TGF-β1在IgAN进展过程中起重要作用，其过度表达可通过多种途径促进GMC增殖及细胞外基质聚积[12]。多项对TGF-β1/Smad通路的研究发现，拮抗该通路的活化，可以抑制肾间质纤维化[13]。有学者报道中国华北地区IgAN患者的肾小球和血清中TGF-β1水平明显升高，且与病理级别、尿蛋白呈正相关[14]，提示可以通过抑制TGF-β1生成来防治IgAN的发生、发展。

阿法骨化醇主要成分是1α-羟基维生素D3，临床主要用于骨质疏松、甲状旁腺功能亢进、维生素D缺乏症和肾性骨病等。近期的动物实验发现活性维生素D具有抑制肾素活性、调节免疫功能，可以通过核因子κB信号通路及Toll样受体4路径抑制肾脏局部炎症反应[15-16]。Fishbane等[17]发现活性维生素D 治疗CKD患者，可抑制T淋巴细胞的增殖与活化，减少细胞因子及TGF-β1的产生，抑制粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子及树突状细胞的生长。Andress等[18]在CKD中的研究表明，活性维生素 D 可抑制炎症因子IL-1B、IL-6合成，促进IL-10、IL-4分泌，抑制巨噬细胞活性。以上研究提示，活性维生素D可以减轻CKD患者的免疫炎症，但在不同的病理生理状态下所需要的最佳剂量尚不明确。

本研究尝试在已使用双倍剂量RAS阻断剂治疗3个月以上、但尿蛋白水平未降至0.5 g/24 h以下的IgAN患者中，采用不同剂量阿法骨化醇探讨其对IgAN患者血清TNF-α、IL-6 、TGF-β1水平的影响，结果显示：与正常组比较，IgAN患者治疗前血清TNF-α、IL-6和TGF-β1水平明显升高，差异均有统计学意义，提示IgAN患者存在炎性反应，疾病处于进展状态。经12周治疗后，两组患者Cys-C及24 h UTP自身前后对照均明显降低（P < 0.05），组间比较差异有统计学意义（P < 0.05），说明两种治疗方法均有效，但是B组优于A组。有研究表明[19]，双倍剂量活性维生素D治疗糖尿病肾病，其降低尿蛋白程度与单倍剂量相比，有明显的增加，与本研究结果类似。表4结果显示：两组患者血清TNF-α、IL-6、TGF-β1水平较治疗前均明显下降，差异有统计学意义（P

综上所述，阿法骨化醇对IgAN患者具有减轻炎症反应、减少蛋白尿及保护肾功能的作用，本研究初步结果显示阿法骨化醇0.5 μg/d剂量效果优于0.25 μg/d剂量。当然，由于本研究纳入的样本量偏少、时间较短，阿法骨化醇对IgAN肾脏保护作用与剂量依赖性是否相关有待进一步探讨。

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篇7

早上，奶奶晨练回来，我赶忙给奶奶问好，可奶奶却好像没听见似的，径直走向厨房忙她的去了，我便去问妈妈：“妈妈，为什么我向奶奶打招呼，奶奶却像没听到似的，不理我啊？”妈妈说：“奶奶年纪大了，听力下降了，有些不太大的声音听得不是很清楚，

等到你像奶奶这么大年纪了，你也会这样的。”

哦，原来年纪大了，人的听力就会下降啊。啊，青春真好！

中午，爷爷拿着一个放大镜看报纸，我从旁边走过，便问爷爷：“爷爷，您为什么要用放大镜看报纸啊？难道不用放大镜就看不到吗？为什么我不需要放大镜呢？”爷爷笑着说道：“老喽，眼睛不好使喽，你还是个孩子，

当然不需要用放大镜啦。”

哦，原来人老了之后，人的眼睛就会不好使啊。啊，青春真好！

晚饭后，我一边嚼着豌豆，一边看着《骆驼祥子》，爸爸从厨房走出来，我说：“爸爸，来点吗？”爸爸说：“不了，你吃吧，我还有事呢。” 我疑惑的问：“多好吃啊，为什么不吃点呢？”爸爸回答道： “牙齿不行了，咬不动了，太硬的东西咬起来疼。”

哦，原来人到中年，人的牙齿就会不行啊。啊，青春真好！

篇8

－－－－－－题记

当飞扬的群裾，旋转过彼此的笑脸时，我们还会知道，有一种表情叫

青春．

16岁的花季里，我们的张望，曾映出一张张哀伤的脸．如百年创伤．

丹麦的海，天边的象牙塔，曾被我们的眼泪，洇成蔚蓝．16岁的天空，

最美的天空，将是无悔青春的美丽回忆......

可不可以没有悲伤？可不可以只有微笑的弧度？可不可以永远停留在

那个洋娃娃的时代？

如果可以，我宁愿一直呆在自己的那个城堡，没有悲伤的问号？没有糖果的苦涩？只有沿着蜿蜒的路攀爬．但是，别无抉折，炎热仍在牵挂着夏天的衣群时，丝丝的凉爽已走进秋天，萧瑟还荡漾在冬天脚边，她，却迈着轻盈的脚伐降临了。

红色的是草莓，甜甜的，略带点酸；花季里的青春可爱从中益出；黄色的是香蕉，永远那么甜蜜，是那无数个无忧的日子里笑声在阳光下闪耀；柠檬酸酸甜甜，但也清香缕缕．正如释怀着一段青涩的花季雨季......

岁月的琴弦，断了还可以接上，只是当年的调已改变．

青春若是一场天真的固执，梦则是我最在乎的坚持．曾为你笑过，为你哭过，为你害怕错过，忧郁也变成了主调．

什么是忧郁？不过是一种调调．眼说，是见到你后的模糊；耳说，是听到你后的寂寞；鼻说，是闻到你后的回味；唇说，是吻到你后的苦涩......心颤颤总结说，忧郁是你有意无意的一笑而过．的确，换位思考，秋天的落叶不是败给了苍老，而是败给了清风啊！

青春无敌，青春的时光如一块块砖石，垒起了人生的一堵堵墙；你的健康是一堵墙，这是青春给你的力量，是你生存于世间宝贵的财富；你的年龄是一堵墙，这是青春给你的优势啊，也是你宝贵的资本啊｀～

篇9

今天做客的嘉宾是河南信阳的何乐澈、湖北石首的汪雨晴、天津的张珺，让我们用热烈的掌声欢迎三位美友！

小雨：欢迎三位的到来，先给大家打个招呼吧！

何乐澈：亲爱的美友们，我是喜欢结交笔友的何乐澈，如果哪位美友也有同样的爱好，我会留下我的联系方式，随时等待着大家的信从四面八方来啊！

雨晴：大家好，我是开朗活泼的汪雨晴，非常喜欢《青春美文》，同样也喜欢热爱《青春美文》的你们。

张珺：亲们，你们好，我是善良温柔、细心体贴的张珺，很高兴我的青春能有《青春美文》的陪伴。

小雨：哇！三位美友可真不是盖的哦，连自我介绍都别具一格。好了，言归正传，我们就来聊聊各自与《青春美文》有什么样的故事吧。

何乐澈：要说与《青春美文》的故事，那可是多了去了，自从我认识《青春美文》那一刻起，我们之间的故事每天都在上演。话说有一次吧，上自习课，我做完了数学卷子没事干，就把《青春美文》拿出来藏在数学卷子下面偷偷地看。你们这时一定会说：小心，别被老师抓到了。呵呵，放心吧，我是不用担心这个问题滴，因为我们老师也被《青春美文》迷住了，她那时也正在看《青春美文》呢！

小雨：哈哈，难怪你不怕被老师抓！我要爆你一个料，你之前和我聊天时说你买了新一期的《青春美文》，但是你让我保密，说是怕被你们班同学抢……

何乐澈：是是是，我承认。因为我们班同学都很爱看《青春美文》，可是我们这都是“供不应求”的，好多人买不到，所以当同学们发现谁有新一期的杂志就会疯抢。

小雨：原来是这样啊，看来大家真的都很喜欢《青春美文》，那么我们就想办法让《青春美文》在你们那里发行得再多一点。

何乐澈：嗯，这样就好了，我的书就不会被抢了。

雨晴：我们班同学也是超爱《青春美文》的，我经常在杂志上看到我们班同学的名字，因为他们都喜欢写信与小编互动，很是积极呢。而且我自己也是“美文控”，《青春美文》上有很多我喜欢的文章，我会一遍又一遍地阅读，然后认真地抄在笔记本上，我是不是很疯狂啊，哈哈！

小雨：真的很疯狂啊，在现在这个多媒体的时代，你还能一遍一遍地做摘抄，真的让小编很感动！

篇10

现在大多数人都认为，早步入社会，就多一点机会，可是你们知道么？这么早的步入社会之中，被社会大染缸所渲染，你已经不是那个如青春朝阳一般的少年了，在社会上尔虞我诈，让你比你同龄在学校上学的人要更加的圆滑，当你想回到他们身边的时候，你已经回不去了，正因为你在社会上的一圆滑，让你在他们之中格格不入。

白驹过隙，18年的时光流过，当你回头看一看你小时候的样子你是否还记忆犹新？当你回想现在的生活，你是否还会选择回到过去？我想，你一定会想到回到过去吧，因为正是小的时候，让你充满回忆，那种无忧无虑的日子让你无法自拔，

但是，一切都是回忆，青春的印记在你身边已经慢慢的消散，还有几年，我们也会进入社会，在社会之中摸爬滚打，为了自己的家、为了自己的房子、乃至为了自己心爱的她，去努力奋斗，而那时，青春已经离你而去，正如一首歌：‘啊~青春再见，啊~青春再见，啊~青春再见吧，再见把，再见吧’唱的，生活也不是如此？总是离开了都是好的，但你为什么不珍惜一下现在呢？现在青春还有尾巴在你的身边，如果你连最后一丝尾巴都要抛弃的时候，那么你真的就离青春而去了。

也许，你怀念青春，也许，你祭奠青春，但是有一点你要记住，你的青春已将离你而去，你现在是一无所有，你现在是成年，青春将逝去，但是你记得一点，青春虽然离你而去，但是你有他的回忆，那将永垂不朽，因为它已经深深的进入到你的脑海里了，那是永远都不会离你而去的东西，只有你丢弃它，他才会离你而去，总是一味的丢弃，总是要得到什么吧，所以，珍惜现在，回忆过去。