环保的标语范文
时间:2023-03-27 11:12:18
导语:如何才能写好一篇环保的标语,这就需要搜集整理更多的资料和文献,欢迎阅读由公务员之家整理的十篇范文,供你借鉴。
篇1
1. 如厕后请勿忘关闭水龙头。
2. 不需要“涌泉”相报,只需止水之恩。
3. 向前一小步。文明一大步(男)。
4. 前进一小步,文明一大步。
5. 情不在切,贴心就行;“纸”不在多,够用就行。
6. 一纸一屑煞文明,一举一动显文明。
7. 请您”方便”后记得要冲洗。
8. 如厕后请冲水,不要乱丢杂物。
9. 卫生用品包好再扔,体谅打扫者的辛劳。
10. 对准了位置解决内急,你好,我好,大家好!
11. 只需举手之劳,便可清洁一新。
12. 文明向前看一小步。文明一大步。
13. 冲刷精神,一切为用户着想。
14. 今天你冲了吗?
15. 请不要在小便池内拉屎。
厕所温馨提示标语【精选篇】
1. 克服不良习惯,养成文明行为。
2. 来也匆匆,去也冲冲。
3. 冲一冲,你好,我也好。
4. 当我们心情愉快的时候,也别忘了让厕所的心情和我们一样愉快哟!
5. 上前一小步,文明一小步,用完快冲水,卫生你我他。
6. 轻轻按一下,清新你我他。
7. 按下这里,你会有一个惊喜。
8. 手纸请放纸篓里便后请用水冲洗洗。
9. 设备真可贵,公德不可退。
10. 若您如厕功告成,顺手冲水了无痕。
11. 你清洁,我卫生,齐齐健身心。
12. 同志们,冲啊!
13. 如果你不给别人方便,你将不能”方便”。
14. 您瞅准了,按这里冲。一般人我不告诉他。
15. 如果你不冲刷厕所,你将是历史的罪人。
厕所宣传标语【集锦篇】
1. 干干净净牌冲刷器,用过就知道。
2. 拉屎不冲,天理难容!
3. 谁按谁精神,您瞅准了,就按这里。
4. 文明手底下方便你我他。
5. 请您”方便”后一定要:洗刷刷洗刷刷,洗刷刷洗刷刷。
6. 随手冲一冲,干净又轻松!
7. 同志们请冲一冲啊!
8. 文明生活从小做起。
9. 飞流直下一两尺,记得冲水大拇指。
10. 爱护公共设施,是你我应尽的责任。
11. 大环境,小环境,干净才有好心情。
12. 贴近文明,靠近方便。
13. 如厕冲水了无痕,道德水准功告成。
14. 今天,你冲了吗?
15. 起身冲一冲,大家都轻松。
16. 厕所卫生要注意,干净清洁要保持。
17. 厕所卫生要注意,干净清洁常保持。
18. 匆匆走?别!冲冲再走!
19. 按一按,清洁又流畅。
20. 高高兴兴方便,轻轻松松冲刷。
看过“厕所环保标语”的人还看了:
1.卫生间环境卫生标语
2.卫生间环境标语
3.创意卫生环保标语
篇2
有关环保方面的警示标语欣赏1、与自然重建和谐,与地球重修旧好。
2、你的星球需要你,联合起来应对气候变化!
3、保护戈壁植被,防止沙尘污染,保护大气环境。
4、没有地球的健康就没有人类的健康与自然重建和谐,与地球重修旧好垃圾混置是垃圾,垃圾分类是资源。
5、保护环境,保存希望。
6、加强环境宣传教育,提高全民环境意识。
7、拣回垃圾分类老传统,倡导绿色文明新时尚。
8、破坏环境,就是破坏我们赖以生存的家园。
9、土壤不能再生,防止土壤污染和沙化,减少水土流失。
10、保护环境是一项必须长期坚持的基本国策。
11、拯救地球,一起动手。
12、不要旁观,请加入行动者的行列。
13、保护水环境,节约水资源。
14、追求绿色时尚,拥抱绿色生活。
15、垃圾回收,保护地球,举手之劳,参与环保。
16、今天节约一滴水,留给后人一滴血。
17、善待地球就是善待自己。
18、让经济发展的浪潮进入绿色的河道。
19、建设美丽的边疆,爱护我们的家园。
20、破坏环境,祸及千古,保护环境,功盖千秋。
21、把消费限制在生态圈可以承受的范围内破坏环境,祸及千古,保护环境,功盖千秋。
22、人类若不能与其他物种共存,便不能与这个星球共存。
23、环境与人类共存,资源开发与环境保护协调。
24、促绿色消费,做绿色选民。
25、地球是我们从后代手中借来的、环保不分民族,生态没有国界不要旁观,请加入行动者的行列今天节约一滴水,留给后人一滴血。
有关环保方面的警示标语分享1. 热带雨林——地球的肺
2. 爱护我们的地球从点点滴滴做起
3. 花草丛中笑,园外赏其貌
4. 酸雨是地球万物的共同敌人
5. 水-----20亿人生命之所系
6. 索取资源力求简单,利用资源转化完全
7. 合理利用自然资源,有效保护生态平衡
8. 欲揽春*入自家,无可奈何成落花
9. 保护生物多样性
10. 小草对您微微笑,请您把路绕一绕
11. 积极推展减废运动,落实做好废弃管理
12. 保护环境是责任,爱护环境是美德
13. 遵守法律法规,防治环境污染
14. 人人提案创新,成本自然降低
15. 种树种草,有利环保
16. 环境与人类共存,开发与保护同步
17. 草儿可爱,大家爱
18. 购买尾气排放达标的汽车
19. 水是生命之源,节约用水就是保护环境
20. 地球是我家,绿化靠大家
21. 提高环境保护意识,爱护我们共有家园
22. 距离产生美,谢绝亲密接触
23. 绿色——生命之源
24. 建设绿色企业,坚持绿色经营
25. 种一棵树,种一枝花,世界会更美好
有关环保方面的警示标语推荐1. 多栽一棵树,就给人类多增添一丝生存的希望。
2. 朋友,请给鸟儿多一片温暖的天空,请给鱼儿多一点娱乐的天地。
3. 含一滴水,还一份真情!
4. 地球不仅仅是人类的家园,更是所有生物的家园。
5. 用我们的双手,保护我们的地球。
6. 让我们为地球妈妈共同撑起一把绿伞。
7. 我们为天然资源越来越少而伤心,地球为我们破坏资源而哭泣。
8. 利用地球资源是为了人类更好地生存,保护地球环境是人类为了生存得更久。
9. 保护我们的家园,让地球充满绿色。
10. 保护环境,有益健康。
11. 没有绿色,生命就没有希望。
12. 你是否听见,地球妈妈在哭泣。
13. 把绿色还给地球。
篇3
1、有了您的真心呵护,学校才会更加美丽!
2、学校是我家,人人都爱它。
3、踏破青毡可惜,多行数步无妨。
4、建设绿色校园,增强环保意识。
5、给我一片绿,还你一片荫。
6、请您爱护绿色,绿是生命之源。
7、手上留情花自香,脚下留意草如茵。
8、花木有情报春晖,同学爱护喜心扉。
9、树木拥有绿色,地球才有脉搏。
10、美化生活,净化心灵。
11、只要给予一些爱,就能给你带来郁郁葱葱的绿荫。
12、少一个脚印,多一份芳香。
13、小草给我一片绿,我给小草一份爱。
14、绿色是我们的家园。
15、轻轻地我走了,正如我轻轻地来。(图书馆)
16、绿色明亮了我们的眼睛,是为了让我们看清足下绿的生命。
17、当你不要我时,请把我送回家。
18、小草对您微微笑,请您把路让一让。
19、别在绿色消失时,我们才去后悔。
20、青青小草有生命,请君足下留情。
21、保护学校环境,共创学生圣地!
22、除了足迹,什么都不能遗留;除了回忆,什么都不要拎走。
23、多一声谢谢,多一个朋友,多一声抱歉,多一份宽容。
24、请您足下绕一绕,草儿向您笑一笑。
25、你来绕一绕,我来笑一笑。
26、绕行三五步,留得芳草绿。
27、草儿绿、花儿香,环境优美人健康!
28、芳草依依,大家怜惜。
29、创造绿色时尚,拥抱绿色生活。
30、轻轻抬起你的小脚,我在你的脚下微笑。
31、人人都来爱护它,世界才会更美妙。
32、小花小草传芳香,请你把路绕一绕。
33、爱无限,绿无边。
34、编织爱心,保护环境。
35、你珍惜我的生命,我还你一片绿荫。
36、注意了,每个人都看见你在这里的一举一动。(走廊)
37、小草青青,花香飘飘;青草鲜花,应当爱惜。
38、我爱花,我爱草,我爱青青小树苗。
39、我很怕羞,请别碰我!
40、拯救地球,一起动手。
41、心中有情,脚下留情。
42、创建绿色校园,从你我做起。
43、心动不如行动,去怨不如去干。
44、人类只有好好地对待大自然,大自然才能无限地回报人类。
45、花香阵阵,鸟鸣声声。琅琅书声,浓浓情深。
46、小草正睡觉,请你勿打扰。
47、环境好,生活就好。
48、用爱心呵护每一片绿色。
49、请让我们的腰杆永远挺直!
50、少一串脚印,多一份绿意。
51、它失去了保护,我们就失去了健康。
52、绿色校园,绿色生活。
53、鲜花还需绿叶扶,学校更需同学护!
54、问坛哪得绿如许,为有大家来爱护!
55、天是蓝的,草是绿的,心是纯粹的。
56、如果没有树木,世界将会暗淡无光。
57、保护环境,从我做起。
58、你挥一挥袖,不带走一片云彩。我动一动手,不留下任何纸屑。
59、请让我们的校园永远充满绿色。
60、手下留情花更艳,脚下留情草更翠。
61、一花一草皆生命,一枝一叶总关情。
62、花草树木都是宝,没它我就不行了。
63、保护环境,少说多做,让校园成为绿色的殿堂。
64、茵茵绿草地,脚下请留情。
65、劝君多走几步路,莫把草坪当马路。
66、喝洁净的水,呼吸新鲜的空气,这需要您每时每刻爱护环境!
67、追求绿色时尚,拥抱绿色生活。
68、小草青青,脚下留情。
69、走一走,看一看,花红柳绿美无限。
70、多一份绿色,多一份健康。
71、花草是我的朋友,请多一份爱护!
72、人人参与环境保护,个个争当绿色天使。
73、大路随你走,别踩在我头。
74、少一个脚印,多一个生命,不锈钢水箱。
75、创建环保模范城市建设环保绿色家园
76、不要让白色的面纱罩在我绿色的笑颜上。
77、小草青青,脚步轻轻。
78、绿色象征生命,珍惜生命,环保第一。
79、水孕育和维持着地球上的生命,谁来关爱水的生命!
80、保护环境从我做起,爱护学校从学生做起。
81、青青绿叶红花,岂能肆意践踏(请勿践踏草坪)
82、改善民生,共享水利发展成果
83、绿色,永恒的美;校园,永远的家!
84、珍惜资源永续利用,绿化环境净化心灵。
85、让绿色看得见,让绿色听得见。
86、青山清我目,流水静我耳。
87、赏花爱花花更美,观景惜景景更幽。
88、追求绿色时尚、走向绿色文明。
89、给我一份爱,送你一片绿
90、保障饮水安全,维护生命健康
91、8.节约为本,治污优先
92、你的行动代表花的未来。
93、当你昂首阔步时,我在你脚下。
94、一草一木皆生命,一枝一叶总关情。
95、坚持团结治水,构建和谐流域
96、垃圾箱:请你近距离投篮。
97、全面规划,统筹兼顾,推进水利协调发展
98、让校园阳光普照,让绿色神圣美妙。
99、让花儿含笑,让草儿传情,让心儿绽放。
100、鸟儿渴望洁净的天空,人类渴望绿色的家园。
101、小草微微笑,请你绕一绕。
102、人重脸,树重皮,请勿墙上留痕迹。
103、今天节约一滴水,留给后人一滴血。
104、捡起片片纸,传递深深情。
105、迈步留意地下草,掸指莫折枝头花。
106、要想校园净又美,健康文明记心里。
107、节约用水就是珍惜生命。
108、坚持人水和谐,建设生态文明
109、花儿以花香回报我们,我们只需脚下留情。
110、环境你不爱,美景不常在。
111、建环保模范城市创美好幸福生活
112、节电环保标语:节约能源,大有可为,功在当代、利在千秋
113、保护绿地标语:不要踩我啊。我也会疼的……
114、保护生态环境,就是爱护自己。
115、保护环境,保护自然就是保护人类自己。
116、我们是幼苗,我们都需要呵护。
117、乘阴靠绿树,美化靠大家。
118、水资源是有限的,生命之河是无限的。
119、同建绿色校园,共享鸟语花香。
120、珍惜水,保护水,让水造福人类。
121、珍惜水资源,保护水环境,防治水污染
122、树环保之风,迎美好明天。
123、珍爱生灵、节约资源、抵制污染、植树护绿。
124、学校一片绿,学生心中一片春。
125、为了美丽家园,请从小事做起。
126、同花儿一起开放,和小树一起成长。
127、鸟语花香,爱赏共享。
128、幸福生活不只在于丰衣足食,也在于碧水蓝天。
129、爱护小草吧,它是春天的信使!
130、保护水环境,节约水资源。
131、实施科教兴国与可持续发展战略。
132、学校是我家,保护环境靠大家。校园是我家,卫生靠大家。
133、加强环境宣传教育,提高全民环境意识。
134、伸出你的手,伸出我的手,让纸屑远离我们的校园。
135、美好的校园环境,需要大家共同建设和创造。
136、为了校园更美,请勿摘花。
137、拯救地球就是拯救未来。
138、用我们的爱心,迎来校园的一片绿。
139、自然不可改良、生活可以选择选择绿色生活、健康适度消费
140、爱花、爱草、爱树、爱校园。
141、青草绿树你我他咱们同住一家
142、学校是我家,绿化靠大家。
143、你栽一棵树,我栽一棵树,我们共同为校园添绿。
144、少生孩子多种树【有点搞笑…】
145、青山清我目、流水静我耳
146、让校园成为绿色殿堂。
147、保护环境就是保护我们自己。
148、除了足迹,我们什么也没有留下;除了摄影,我们什么也没有带走为了子孙后代,请留下一片净土
149、万人齐参与,共建‘绿色生命树’
150、让绿色的希望从校园萌芽。
151、赞化天地、道法自然
152、保护树木,就是保护我们人类
153、学校是我家,美化靠大家。
154、让校园变成绿色家园,让祖国变成绿色宝库。
155、珍惜自然资源,共营生命绿色。
156、保护环境是一项必须长期坚持的基本国策。
157、家园由我来保护。
158、保护树木是第一。
159、保护地球,就从美化校园开始吧!
160、保护环境,造福人民。
161、校园整洁,大家开心。
162、绿色——永恒的美;学校——永远的家。
163、但存方寸地,留与子孙耕。
164、保护蓝天碧水。
165、土壤不能再生,防止土壤污染和沙化,减少水土流失。
166、美好校园需要我们共同建设。
167、美丽的校园,美丽的家,永远的美丽靠大家
168、学校是我家,环保靠大家。
169、郁郁葱葱,创新州
170、草木无情皆愿翠行人有情多爱惜
171、环境与人类共存,资源开发与环境保护协调。
172、人间知音难觅,校园草坪难培。
173、建设美丽的边疆,爱护我们的家园。
174、校园是我家,美丽靠大家。
175、保护环境系各人,美化校园靠大家。
176、尊崇自然、敬畏生命
177、环境保护,人人有责。
178、把绿色带入校园。
179、美我校园重在每一举动。
180、环境保护从我身边做起。
181、花草树木对人笑,因为人类爱环保。
182、我是有生命的躯干,你是有德行的贤君
183、人类离不开花草,就像婴儿离不开母亲的怀抱。
184、1998年6月5日世界环境日主题是:"为了地坏上的生命-拯救我们的海洋"。
185、破坏环境,就是破坏我们赖以生存的家园。
186、有限的资源,无限的循环。
187、保护环境是每一位公民应尽的责任。
188、举手之劳,美化校园。
189、多种一棵树,世界上就多一片绿色
篇4
关键词 .net环境 报表应用与管理 工作效率 优化与改进 现实意义
中图分类号:TP3 文献标识码:A
0前言
目前.net环境下报表的应用研究主要是针对水晶报表设计与实现来进行,因此本次研究工作选取了水晶报表作为研究对象,依据.net环境下对报表的需求来深入分析报表设计与实现,以此来推动相关研究工作进一步发展,提高实际报表管理与应用工作效率做出应有的贡献。
1 基于.net环境下报表应用需求研究
互联网是一个开放性平台,人们可以随时随地通过访问网络来搜集感兴趣的信息以满足工作需要,在很大程度上提高了实际工作效率,促进了生活工作方式变革。.net环境下报表的应用与管理将不再局限于某一个领域,而是通过网络信息资源的共享与交流来满足全面具体的应用需求。因此针对报表的应用与开发对满足工作需要,推进社会经济进一步发展具有重要的促进作用和现实意义。报表开发与应用也将会朝着多元化发展,需要在实际工作中不断研发与改进,以提高报表的实用性。因此基于.net环境下报表开发与应用需要投入较多的精力来给予支持,以确保报表能够紧随时展要求,为社会输出更多优质服务。
2 水晶报表概述
2.1水晶报表含义
Crystal Reports(水晶报表)是一款具有良好实用性的商务智能应用软件,主要用于日常工作中设计以及产生报表。水晶报表是目前世界范围内最专业、功能最全、操作性较高的报表应用管理系统,除了能够满足日常企事业单位生产所需之外,还能够与绝大多数主流应用工具实现无缝对接,从而延伸了报表的使用范围,进一步推动了社会无纸化办公进程,有力的促进了相关行业发展,具有重要的推动作用与现实意义。
2.2水晶报表特点
2.2.1操作简便、快捷
水晶报表相较于传统报表应用与管理方式具有明显的优势,在报表数据计算与整理过程中不需要将繁杂的数据进行捆绑操作,从而有效节约了工作时间,很大程度上提高了工作效率。同时报表在进行编辑过程中可以通过简单操作就能够轻松实现,降低了报表操作与应用难度,使得报表能够成为日常办公软件之一得到有效推广使用。目前水晶报表应用已经进入了一个高峰阶段,所带来的社会效益与经济收益在很大程度上推动了社会经济进一步发展,日常办公无纸化进程进一步加快,实现了经济社会可持续发展的总体社会目标。
2.2.2水晶报表程序控制能够满足实际所需
水晶报表程序控制程序目前主要有拉(PULL)模式和推(OUSH)模式,根据实际工作需要选取科学合理的报表控制模式不仅能够有效节约工作时间,还能够在很大程度上促进报表得到优化和完善,具有较高的使用价值。在.net环境下,通过使用水晶报表不同程序控制模式可以有效降低数据库连接消耗程度,提高系统自身的运行性能具有重要的影响作用。随着计算机不断普及应用,数据库系统也将随之普及,因此为了能够有效提高数据库系统运行效率与使用价值,就需要针对报表连接消耗问题进行有效解决,而实际研究也证实了水晶报表程序控制模式确实能够实现降低连接消耗的目的。
3 .net环境下报表应用研究
3.1利用向导制作报表
利用向导来制作报表是实际工作中利用程度最高、应用范围最广泛的报表生成方法,其主要是通过向导的引导来完成所需要报表的设计与生成工作。具体步骤为:根据向导指引新建一个网站来添加报表,之后利用已经存在的数据源来进行报表内容的进一步加工工作。在报表设计器中通过选取合适的报表以及相应数据来进行内容丰富,之后将报表进行导出,如此一来就可以生成一个简单实用、内容丰富翔实的报表。
3.2动态生成报表
由于实际工作需要,报表的应用不可能一直沿用固定报表生成模式,往往会因为实际数据变动而需要进行编辑改进,如果能够动态生成报表将会在很大程度上简化报表应用管理流程,提高工作效率。因此通过利用ReportViewer,根据实际所需报表需求来指定显示报表,自动生成Object Data Source文件,该文件会根据生成数据源时默认定义方法来获取数据库中已经存在了的数据。打开Name="DataSet1_DEPARTMENT"/>,通过重新命名Name就可以针对已有报表按照正常方式来加载数据源以及将生成的数据添加到报表之中,从而实现了对报表的动态加载与编辑,生成的报表能够符合实际动态需求,具有较高的应用价值。
4总结
综上所述,.net环境下报表的应用需要紧随时展需求,力争做到与时俱进来满足工作需要,从而改变传统办公模式,将现代化无纸化办公理念和方式运用在工作生活中,促使社会经济实现可持续发展的总体社会目标。
参考文献
[1] 孙惠娟,高瑞华.NET环境下几种报表解决方案的对比分析[J].河南财政税务高等专科学校学报,2011,12(03):90-92.
篇5
关键词:简洁;重点;阻止;感情;思维
中图分类号:G648文献标识码:B文章编号:1672-1578(2017)04-0005-02
"人们运用语言这一社会交际工具,准确、鲜明而生动地表达思想感情,传递信息,达到相互了解,从而产生出一定的政治、经济、社会、宣传、教育和艺术效益,这就是语言的效果。语言效果是无法估量的,有关专家指出:'语言的力量能征服世界上最复杂的东西--人的心灵'"[1]正因如此,我们就要充分利用环保警示语为我们的环保服务。
环保警示语宣传和倡导的是环保理念,借助于警示语的形式,达到警示心灵,制约行为的目的,围绕共同的目的,虽是简短的一句话,但表达上各显神通,因而在环保工作中却起到举足轻重的作用。
1.简洁的语言标示在万绿丛中或人来人往的公共场所,可以引起人们的关注
(1) 请勿吸烟。
(2)人类只有一个可生息的村庄--地球,保护环境是每个地球村民的责任。
这些话语简单明了,但又有明确的意义,禁止做什么,倡导做什么,在不难理解的句子中让人一目了然,表达的效果显著。
2.直接阻止与间接阻止某种行为运用在环保警示语中,能起到词必达意的效果
有些是间接阻止某种行为的发生,例(3)破折号后面是"垃圾筒"的呼告,"我不想'失业'",连"垃圾筒"都在努力为环保做奉献,何况是有思维能力的人,而"垃圾筒"不"失业"的方法是要别人去做某事,人们只有自觉地把垃圾放入"垃圾筒"里,才能让"垃圾筒"不"下岗",间接阻止了乱吐、乱丢、乱扔、乱放、乱抛垃圾的现象发生,达到净化环境的目的。环保警示语的语用的最终目的就是要实现保护环境的目的。
(3)垃圾筒--我不想"失业"!!!
一般这种间接阻止的行为不是人对人的讲述,它是从另一个角度来说话,人们也许听不进别人的话,或是听人说话已听麻木了,"失业"的频率太高了,而现在有存在的第三方有话要说,这是要人们倾听第三方的声音,要我们听听它们对人类的诉求,易引起人们的共鸣,从而引起人们的同情;同时也让我们想到,如果连它们都失业的话,那将是人类的灾难,我们还不赶紧行动起来吗?
这种间接阻止实际采用了言此意彼的委婉的方式,让人耳目一新,大大提高了"吸睛"率,起到很好的语言效果。
3.环保警示语有感情,拉近了人与物之间的距离,增强了表达的效果
环保警示语中修辞格的运用,使环保警示语带上了丰富的感情,更好发挥它的传情达意的作用,使人类与异类的沟通与交流也就更密切了,看下面的一些语句:
(4)小草在沉睡,请勿打扰他!
(5)小草有生命,承蒙多关照。
(6)爱花的人心灵美如花!
(7)满园飘香,邀您共赏!
(8)封山育林,造福子孙!
一是用了拟人的辞格,把物当人来写,把植物的世界人性化,使人与物能互相交流与了解。如"小草在沉睡",从第三人称的角度来描情状物,使小草富有人的情态,小草就像一个弱小的、正在沉睡中的婴儿,他就像是你自己的孩子,他的成长需要人们的关爱与保护,这也勾起人们保护弱者的心理,而人类对弱小的生命一向都有爱心,这就传达了小草需要保护的意愿。再如"邀您共赏"中用的"邀"是有方向性的动词,把绿色领域中的植物当作人来描写,有一方存在的同时还希望有他方的加盟,从而达到香飘四方,美化环境的目的,同时也慰劳你对花草世界的爱护:"他"今天有最美一面的展示,有你的功劳,所以请你欣赏。还有就是"小草有生命",在这句话里省略了喻词与喻体,完整的一句话为"小草就像是有生命的婴儿",何况人类对有生命的东西历来都关爱与尊重,"承蒙多关照"中的"承蒙"是谦词,小草的卑微与谦恭易勾起人们的同情心,从而得到更好的关爱与保护。
还有就是对偶的使用,把"结构相同或基本相同、字数相等、意义上密切相连的两个短语或句子,对称地排列","从形式上看,音节整齐匀称,节律感强"[3]。像第(9)句中前后句的最后一个字的读音都押"i"韵;第(10)句"环保"与"环境","感动"与"牵动"意义是相近、相连的;第(11)句前后两句话的最后一个字都押"ān"韵。而且句式中的用词,词性是相对的,使"句式富有表现力,便于人们记诵"[4]。这样可以使相似、相近的内容进行比照,使其更好的衬托和突出语义。
(9)草木无言皆青翠, 行人有情多爱惜。
(10)环保感动中国, 环境牵动心灵。
(11)绿色与生命时时相伴, 环境与健康息息相关 。
此外,顶真的运用,例(12),使"连贯的思索之间的递相依存的内在联系作了清楚的阐述,"[5]让语句的"说理周密谨严,表达如行云流水,气势贯通"[6];还有排比修辞格的运用,如例(13),突出了句意,使语言气势得到了加强,丰富了环保警示Z的表情达意的效果,延伸了环保的广度,增强了环保的力度。
(12)垃圾混置是垃圾,垃圾分类是资源。
(13)地球怎么长成,我不知,你不知,他不知.地球怎么灭绝,我知,你知,他知。
还有就是使用婉曲,"即不是直接明白而是含蓄曲折地把自己的意思表达出来。修辞学上把这种方法叫婉曲。运用婉曲手法,可以接近双方感情上的距离。"[7]如,
(14)除了回忆,请你什么也别带走。
(15)除了足迹,请你什么也别留下。
(16)当你想丢点什么的时候,请想一想,可千万别丢脸。
这些话语都没有严厉的制止和训斥,没有刺目的、语气强硬的字眼,如"不准"、"严禁"、"罚款"等。有的只是委婉的告诫与和蔼的提示,但观者不难读懂它要提醒游人要自觉爱护自然景观,不要采摘花果,不要丢弃任何垃圾,这些引人思考的话语,不难明白它的潜台词。通过这些委婉含蓄的话语,催人警醒,激人自律,当看到景区这些文明的警示语时,谁还忍心摘花采果,乱扔垃圾,损坏这里美丽无比的环境呢?这种既热情诚恳,又婉转含蓄的话语不仅仅起到警示语的作用了,更是文明用语的典范。因为它成功地运用婉曲手法,得体,准确地传达出环保者的意图。
总之,在环境保护的警示语中运用了修辞格,彰显了环保领域以人为本的宗旨,它的人性化的一面,向人们传播了人文关怀,构建了人文生态,使人类更容易融入周遭的自然环境的世界,达到善待、保护、开发、利用的目的。
4.环保警示语有思维,使环境保护领域中的语义更符合人类思维的规律,达到人与物的交融
语言是思维的载体,根据语用学"我们用预设来解释一些语义中的逻辑现象"[8]如果用形象的数学公式来表示就是"语言学+逻辑推理=预设",在公式中有逻辑推理的存在,根据逻辑推理的三段论,那就说明语用预设存在着隐藏起来的前提。而且这个前提具有可推知性的特点,下面以(17)――(21)句为例来例举这种预设:
通过上面的例举,我们看到这里主要用了解释性的预设,它主要是对某种做法做出解释进行了预设,从而达到告知的目的,而这种预设往往是让人容易知晓的,如果我们听不出或看不出那层暗设的前提,那就是语用预设的失误。我们通过对语义预设的分析,可以了解环境保护领域中的警示语的使用必须符合逻辑,也就是符合人脑思维的规律性,真正的让植物的世界成为人类世界不可或缺的部分。人们才会倍感珍惜这种和睦共处的氛围,珍爱提供给人类生存的这份绿色环境,从而让人类更好的保护地球环境资源。
5.用"意合法"来鲜明地表明立场、观点和态度,讲清楚道理,从而让人接受
这就使有些句子的语义是不需要预设的,不需要回味无穷的,只是为了让人一看就懂,达到明白晓畅的目的。从语用学的角度看,"有一些复句不用任何关联词语,完全依靠语序以及前后分句的语义制约构成,这就叫'意合法'"[9] 。这类句子的语义一般讲环境保护的意义和作用的为多。如:
(22)绿化环境,保护家园。
(23)保护绿化环境,热爱人类自己的家园。
(24)人类靠绿色环境生存 ,绿色环境靠人类保护。
它的表达效果符合人们阅读审美的习惯,无须过度的思考就可达到人们思想,从而指导人们的行为。像(17)就是如此,首先做"绿化"工作,第二步才是"保护"的工作,语句本身就有符合人们行为习惯的语序,前一句的"绿化"的动作是后一句"保护"的前提条件,后一句动作"保护"是前一句"绿化"的行为结果,也就是说,有"绿化"紧接着为巩固劳动成果就要实施"保护"。这些词语的使用,频率也是很高的,296句中占了1/3强,符合人们的性情,讲明白话,做明白事,直接警示"绿化"、"保护"的主题,使人易于接受。(23)、(24)也是如此,其他就不一一例说,总之,这种句子表达出来的语义就是要明白晓畅,达到植入人们心尖的效果。
在h境保护领域中,我们对环保警示语在表达效果上进行探究,能更好地通过对环保警示语的运用,把大家的积极性调动起来,只有让大家积极的行动起来,才能真正起到保护环境,净化环境,美化环境的目的,这也为优化我们的生活质量奠定了环境基础。
参考文献:
[1]晁金泉编著《语言表达技巧--加强语言效果100法》,北京:金盾出版社,2006.9,P28页。
[2]《现代汉语・下删》黄伯荣,廖序东主编.-4版-北京:高等教育出版社,2007.6(2010重印).P184页
[3]、[4]同上.P206页
[5] [6]《现代汉语・下删》黄伯荣,廖序东主编.-4版-北京:高等教育出版社,2007.6(2010重印).P212页
[7]傅炳民 汪欣著《说写辨赏学语文》-武汉:武汉大学出版社,2006.6.P3页
篇6
【关键词】 调节性T细胞; 弱精症; 免疫破坏; 免疫抑制细胞因子
【Abstract】 Objective: To observe the change pattern of CD4+CD25+ regulatory T cells (Treg) in asthenospermia infertile patients and the correlation with sperm quality.Method: The peripheral blood and prostatic fluid specimens were collected from 60 asthenospermia infertile patients as the observation group and 36 healthy volunteers as the control group. The flow cytometry was used to determine the volume of Treg, intracellular transforming growth factor β1 (TGF-β1) and interleukin 10 (IL-10) in the peripheral blood and prostatic fluid.The correlation of the above three substances of sperm viability and motility rate were analysed.Result:Compared with control group,the observation group patients of Treg, IL-10 and TGF-β1 asthenospermia infertile had significantly lower volume in their peripheral blood and prostate massage fluid,the differences were statistically significant(P0.075,P
【Key words】 Regulatory T cells; Asthenospermia; Immunity damage; Immunosuppressive cytokines
First-author’s address:Shantou Chaoyang District Dafeng Hospital,Shantou 515100,China
doi:10.3969/j.issn.1674-4985.2015.09.009
近年报道弱精症导致不育的案例越来越多,该类患者甚至连慢性前列腺炎的病史都不具备,其机制不明,因此给治疗带来困难。有研究表明免疫因素可能是弱精症的重要发病机制[1]。国外有报道CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)与不育症相关,但目前国内关于弱精症患者Treg变化的研究不多。因此笔者以此为切入点,重点观察了弱精症与健康成年男性外周血Treg及血常规的变化,发现弱精症患者Treg数量明显降低,且与Treg功能密切相关的细胞因子IL-10及TGF-β1亦表现为数量不足。
1 资料与方法
1.1 一般资料 本研究以2013年1月-2014年12月本院泌尿外科门诊及病房接诊的60例弱症患者为观察组,平均年龄(35.3±9.3)岁,平均病程(5.6±1.5)年。入选标准如下:所有患者均为婚后性生活正常,未采取任何避孕措施而不育1年以上,女方生育力检查正常,男方无生殖系统发育异常、无生殖系统感染、无精索静脉曲张、精道梗阻、逆行或不等疾病;参数中前向运动的(a和b级)
1.2 实验材料 鼠抗人CD4-FITC单抗,CD25-PE单抗及同型对照IgGI-FITC,IgG -PE,均为B&D公司产品。流式细胞仪为Beckman公司产品(型号:EPICS-XL)。IL-10及人TGF-β1的血清及前列腺液ELISA试剂盒购自南京建成生物工程研究所。淋巴细胞分离液(AXIS-SHIELD公司)、RT-PCR试剂盒及Tregizol RNA提取试剂盒均购自武汉博士得生物科技有限公司,PE9600型PCR扩增仪(美国PE公司)[2]。
1.3 标本采集 外周血:清晨采集以上观察对象的静脉血约2.0 mL,采用肝素钠抗凝;:采用法采集约1~3 mL,采用肝素钠抗凝;前列腺液:采用前列腺按摩法,采集前列腺液约0.5~1.0 mL,采用肝素钠抗凝[4-7]。
1.4 检测方法 外周血:采用淋巴细胞分离液常规分离外周血单个核细胞(PBMC),用含10%小牛血清的RPMI-1640调细胞至106/mL,取200 μL细胞分别加入抗CD4-FITC、抗CD25-PE的单克隆抗体各20 μL,同型对照分别为IgG1-FITC、IgG-1-PE,混匀后避光孵育25~30 min,PBS洗涤2次。将细胞悬浮于0.5 mL PBS洗涤液中,振荡混匀后上机检测[3]。同法检测前列腺液及外周血IL-10、及TGF-β1的含量。:使用质量分析仪检测存活率、平均运动速度、活力指数等指标。
1.5 统计学处理 运用统计软件包SAS 8.1对本研究数据进行统计,计量资料采用(x±s)表示,符合正态分布及方差齐者采用t检验比较组间差异,不符合正态分布者采用秩和检验,指标之间的相关性分析采用Pearson参数法,以P
2 结果
2.1 两组患者Treg及细胞因子比较 观察组患者外周血CD4+CD25+ Treg、外周血及前列腺液的TGF-β1和IL-10均显著低于对照组,两组比较差异有统计学意义(P
2.2 两组常规比较 两组量比较差异无统计学意义(P>0.05);观察组活率、运动速度和ATP含量指标均显著低于对照组,两组比较差异均有统计学意义(P
2.3 相关性分析 经Pearson检验,CD4+CD25+ Treg、TGF-β1和IL-10与活率、畸形率、运动速度、ATP指标之间均呈正相关性(r>0.075,P
3 讨论
弱症占所有男性不育致病因素的半数以上,引发弱症的原因很多,主要有生殖道感染、免疫因素、精索静脉曲张、内分泌因素以及先天性疾病等[4-9]。目前弱症的免疫发病机制尚未明确,是其治疗效果欠佳的主要原因之一。Treg细胞是近年发现的一群具有独特免疫调节作用的抑制性T细胞[4]。本研究从T细胞免疫学角度研究弱症患者调节性T细胞及其细胞因子的表达,总结弱症患者Treg及其细胞因子的变化规律,以及弱症患者CD4+CD25+ Treg及其细胞因子含量与质量的相关性[10]。研究结果表明,观察组外周血CD4+CD25+ Treg的含量显著低于对照组,外周血的TGF-β1和IL-10显著低于对照组;观察组前列腺液的TGF-β1和IL-10显著低于对照组;外周血的TGF-β1和IL-10均显著高于前列腺液;两组量比较差异无显著性;观察组活率、运动速度和ATP含量指标均显著低于对照组;经Pearson检验,CD4+CD25+ Treg、TGF-β1和IL-10与活率、畸形率、运动速度、ATP指标之间均呈正相关性。
CD4+CD25+ Treg在前列腺的免疫失衡中起到重要作用[11]。Treg活化后不仅能抑制CD4+和CD8+ T细胞的活化和增殖,还可抑制组织内由于T细胞免疫杀伤过度所致的免疫性损伤,因此Treg具有下调及抑制免疫的功能[12]。Foxp3是一个重要的蛋白,其可促使初始(未成熟)T细胞向Treg转化,因此Foxp3是Treg的主要功能因子,前者的减少可导致Treg功能的缺陷[5]。在Treg所分泌的细胞因子中,IL-10与TGF-β1所占的位置最为重要:TGF-β1可促进Foxp3基因的克隆表达,而后者是发挥免疫抑制功能的主要功能因子[13-14]。除TGF-β1外,作为白介素家族重要成员的IL-10,具有抑制炎性反应、预防自身免疫现象出现的生物学作用,因此缺乏IL-10可导致一系列自身免疫病如肠炎或脑脊髓膜炎(EAE)的发生[15]。
本文以上述背景为理论依据,从免疫调节的角度观察弱精症的发病机制,通过直接检测外周血Treg数量发现该T细胞在弱精症患者的表达明显降低,且发现外周血及前列腺液当中该细胞的功能因子TGF-β1及IL-10均显著降低,这进一步印证了不论在全身抑或前列腺组织局部,都表现为Treg数量的减少及功能的不足。其原因可能是:弱精症患者降低使IL-10不足以抑制单核细胞的活化与增值,导致单核细胞过度执行抗原提呈功能,后者致使外周血及前列腺局部的免疫反应过强,使前列腺导管和腺泡不断受到免疫损害而导致生精功能减退等临床表现[14]。
综上所述,对于弱症患者而言,CD4+CD25+ Treg含量和功能的异常,导致TGF-β1和IL-10细胞因子减少进而引发免疫抑制功能下降,导致了前列腺的免疫反应过强产生了抗抗体,影响的活动能力、运动能力以及穿透能力。因此,CD4+CD25+ Treg免疫异常是弱症发病的重要影响因素。
参考文献
[1] Cinar C,Beyazyurek C,Ekmekci C G,et al.Sperm fluorescence in situ hybridization analysis reveals normal sperm cells for 14;14 homologous male Robertsonian translocation carrier[J].Fertil Steril,2011,95(1):e5-9.
[2] Zhang H,Su D,Yang Y,et al.Some single-nucleotide polymorphisms of the TSSK2 gene may be associated with human spermatogenesis impairment[J].J Androl,2010,31(4):388-392.
[3] Prasad A S.Zinc in human health: effect of zinc on immune cells[J].Mol Med,2008,14(5-6):353-357.
[4] Zhang C,Yeh S,Chen Y T,et al.Oligozoospermia with normal fertility in male mice lacking the androgen receptor in testis peritubular myoid cells[J].Proc Natl Acad Sci U.S.A,2006,103(47):17 718-17 723.
[5]李继清,冯国生,秦俭.老年前列腺癌手术前后外周血调节性T细胞变化的临床意义[J].中国老年学杂志,2010,30(7):904-905.
[6] Maloy K J,Salaunl,Cahill R,et al.CD4+CD25+ T(R) cells suppress innate immune pathology through cytokine dependent mechanisms[J].J Exp Med,2003,197(1):111-119.
[7] Jacobo P,Pérez C V,Theas M S,et al.CD4+ and CD8+ T cells producing Th1 and Th17 cytokines are involved in the pathogenesis of autoimmune orchitis[J].Reproduction,2011,141(2):249-258.
[8]曾春花,熊承良,官黄涛,等.少、弱症患者精浆、和血清中锌及性激素水平的相关分析[J].中国计划生育学杂志,2007,140(6):352-355.
[9]梁明,孙伟,张斌.少症、弱症的病因及治疗[J].中国性科学,2009,18(7):20-23.
[10] Gondek D C,Olive A J,Stary G,et al.CD4+ T cells are necessary and sufficient to confer protection against Chlamydia trachomatis infection in the murine upper genital tract[J].J Immunol,2012,189(5):2441-2449.
[11] Setiady Y Y,Ohno K,Samy E T,et al.Physiologic self antigens rapidly capacitate autoimmune disease-specific polyclonal CD4+CD25+ Regulatory T cells[J].Blood,2006,107(3):1056-1062.
[12]刘群龙,蔡志明.无精及少弱症研究进展[J].现代诊断与治疗,2008,19(2):84-87.
[13]荆结线,乔丽娟,郭爱芝,等.卵巢癌患者外周血CD4+CD25hi CD127lo调节性T细胞格局变化及临床意义[J].中国免疫学杂志,2012,28(1):49-53.
[14] Suri-Payer E,Fritzsching B.Regulatory T cells in experimental autoimmune disease[J].Springer Semin Immunnopathol,2006,28(1):3-16.
篇7
关键词 大豆苷元;氨基修饰β环糊精;固体包合物;包合行为;水溶性
1 引 言
大豆苷元,即7,4′二羟基异黄酮(Daidzein,图1) ,又名黄豆苷元、大豆黄酮、大豆素等,是一种重要的异黄酮类化合物,主要存在于豆科类植物如大豆和葛根中。研究表明,大豆苷元具有多种重要的药理作用,主要包括抗血栓和动脉粥样硬化的形成[1]、抗糖尿病[2,3]、抗氧化[4,5]、骨骼保护[6,7]及抗肿瘤等作用[8,9],同时,大豆苷元还通过在肠道中代谢为Sequol而具有雌激素样的作用[10,11]。但是,大豆苷元溶解性差,稳定性低,口服吸收差,致使其生物利用度低,体内吸收量少,大大阻碍了其药理作用的有效发挥[12,13]。化学修饰手段,如成酸[14,15]、成盐[16,17]和糖苷化[18,19]等,是近年来报道的提高大豆苷元的水溶性最为常见的途径。但是,这些方法常存在制备困难、水溶性提高程度有限及大豆苷元活性受到影响等不利因素。因此,改善大豆苷元的水溶性,对提高其生物利用度、开发其药用价值等均具有重要意义。
环糊精(Cyclodextrin, CD) 是直链淀粉在环糊精糖基转移酶作用下生成的一系列环状寡糖的总称,通常含有6~8个D(+)吡喃葡萄糖单元,分别称为α, β和γ环糊精。环糊精具有“内疏水、外亲水”的截锥状分子结构,能与众多有机/无机分子通过多种非共价相互作用,如范德华力、氢键作用、疏水作用等形成水溶性的主客体包合物或组装成复杂的超分子体系。当将环糊精作为超分子主体应用于难溶药物或生物活性分子时,可大大提升其水溶性、稳定性和生物利用度等性质[20~22]。
本实验室近年致力于以环糊精为主体的天然药物超分子体系研究[23~27],发现用氨基等基团修饰β环糊精后,可极大地提升其水溶性。本研究以两种氨基修饰的β环糊精衍生物(ACD) ,即单6氨基β环糊精(NCD) 和单6乙二胺基β环糊精(ENCD) 为主体,采用饱和水溶液法分别制备了它们与大豆苷元的固体包合物,优化了包合条件,通过X射线粉末衍射(XRD) 和热重(TG) 分析等手段对它们进行了表征,采用荧光光谱法确定了包合平衡常数和包合比,同时对包合物的水溶性进行测试。
2 实验部分
2.1 仪器与试剂
Shimadzu RF5301PC荧光分光光度计(日本岛津公司); D/Max3B X射线衍射仪(日本理光公司); NETZSCH STA449F3同步热分析仪(德国耐驰公司) 。
大豆苷元(纯度>98%,阿拉丁试剂) 、β环糊精(食品级,98%,孟州华兴) 为直接购买使用,NCD和ENCD为参考本实验室已有方法[28,29]自制。其它试剂均为分析纯,实验用水为二次蒸馏水。
2.2 实验方法
2.2.1 大豆苷元与氨基修饰β环糊精固体包合物的制备 在室温(25℃) 及避光条件下,取大豆苷元76 mg(0.3 mmol) 溶于5 mL无水乙醇中,同时按一定比例取氨基修饰β环糊精溶于20 mL蒸馏水(pH≈7.0) 中,混合两种溶液。室温避光搅拌一定时间之后,减压蒸去体系中的溶剂,再加少量水溶解。过滤除去其中的不溶固体,并用0.45 μm微孔滤膜过滤,得到澄清滤液。减压蒸干后, 于40℃真空干燥24 h,即得到固体包合物。通过对大豆苷元与氨基修饰β环糊精的投料比及搅拌时间的优化,以固体包合物的产率为指标获取两种固体包合物形成的最佳条件。
2.2.2 XRD分析 分别取大豆苷元、NCD、ENCD及它们的固体包合物作X射线粉末衍射分析。测试条件为:Cu靶,Kα辐射源(k=1.5460 ) ,电压为40 kV,电流为100 mA,扫描速率为5°/min。
2.2.3 热力学性能测试 对大豆苷元、NCD、ENCD及它们的包合物进行了热性质研究。热分析条件为:氮气流速为70 mL/min,升温速率为10℃/min,并由室温升到400℃。
2.2.4 荧光光谱滴定 采用荧光光谱滴定法测定大豆苷元与β环糊精衍生物的包合稳定常数KS。首先,配制Na2CO3NaHCO3缓冲溶液(pH 10.5) ,并用其配制0.01 mol/L氨基修饰β环糊精溶液及3.0×105 mol/L大豆苷元溶液。取8支10 mL比色管,分别加入大豆苷元溶液1.0 mL,然后依次加入氨基修饰β环糊精溶液0, 0.2, 0.4, 0.6, 0.8, 1.0, 1.2, 1.5和2.0 mL。所有待测比色管均用缓冲溶液定容至10 mL,室温下超声30 min后,在λex/λem = 385/468 nm波长下测定。
2.2.5 水溶性测试 采用饱和水溶液称重法来进行包合物的水溶性测试。分别在2 mL蒸馏水(pH≈7.0) 中加入过量固体包合物,25℃避光剧烈搅拌1 h。滤纸过滤除去不溶固体后,再用0.45 μm微孔滤膜过滤,滤液减压蒸干,称重,以此计算包合物在水中的溶解度。
3 结果与讨论
3.1 大豆苷元/NCD固体包合物的制备
在大豆苷元/NCD固体包合物的制备过程中,大豆苷元与NCD的投料比(大豆苷元∶NCD,摩尔比) 及包合搅拌时间对生成包合物的收率有一定的影响。 实验结果表明:随着搅拌时间延长,收率随之提高,且至72 h时基本达到平衡,此时继续延长搅拌时间对提高收率不再起作用,这时包合脱包的可逆过程基本达到平衡。此外,随着投料比的增加,收率也随之增加。当大豆苷元与NCD的投料比为3∶1时,收率基本趋于平衡,此时继续提高投料比也不会导致收率的明显变化。因此,经筛选确定该包合物制备的最佳条件为:大豆苷元与NCD的投料比为3∶1,包合时间为72 h,此时收率为83%。具体的投料比和搅拌时间对包合物回收率所产生的影响如表1所示。
3.2 大豆苷元/ENCD固体包合物的制备
与大豆苷元/NCD固体包合物的制备过程相似,包合搅拌时间和投料比这两个因素同样对大豆苷元/ENCD固体包合物的收率产生明显影响。实验结果表明,随着搅拌时间的延长,产率随之提高,且当搅拌时间为72 h时,收率达到最大;随着投料比的增加,收率也随之增大。当大豆苷元与ENCD的投料比为3∶1(n/n) 时,收率达到最大。因此确定包合物制备的最佳条件为:大豆苷元与环糊精投料比为3∶1(n/n) ,包合时间为72 h时,产率为67%。具体的条件筛选过程如表2所示。
3.3 XRD分析
采用XRD分析对大豆苷元在形成包合物前后的晶体/非晶体形态进行了表征。图2为大豆苷元、NCD、ENCD及它们之间的两种固体包合物的XRD图谱。从图2可见,大豆苷元本身呈现典型的晶体形态(a) ,而两种氨基修饰β环糊精NCD和ENCD均为无定形态粉末(b和d) 。而在形成包合后,两种包合物均不再表现出大豆苷元的晶体形态特征,而是更多地呈现与其主体(NCD和ENCD) 相似的无定形态特征。通常,环糊精如与另一组分只形成简单的物理混合物时,其XRD分析结果将呈现两者图谱的简单加合。因此,该变化可初步证明大豆苷元与氨基修饰β环糊精之间形成了主客体包合物,而非物理混合物。
3.4 包合物的热力学性能
通过热重(TG) 分析对大豆苷元形成包合物前后的热力学性质的改变进行了探讨。图3记录了大豆苷元、NCD、ENCD及两种固体包合物的TG曲线,大豆苷元在308.82℃开始分解(曲线a) ,NCD在303.25℃开始分解(曲线b) ,而大豆苷元/NCD包合物在296.83℃开始分解(曲线c) ,即形成包合物后分解温度较大豆苷元和NCD均有所降低。另一方面,ENCD的分解温度为272.91℃(曲线d) (其中向上的尖峰应为仪器误差) ,而与大豆苷元形成包合后,包合物的分解温度降至245.04℃(曲线e) 。从包合前后主、客体及包合物之间热重曲线的明显区别可进一步证实大豆苷元与两种氨基修饰β环糊精均形成了包合物。
3.5 包合比的确定
以Na2CO3NaHCO3缓冲溶液(pH 10.5) 配制大豆苷元分别与NCD和ENCD的混合溶液。保持大豆苷元与氨基修饰β环糊精的总浓度不变(3.0 × 105 mol/L) ,使大豆苷元在其中的物质的量的比率在0.1~0.9变化。通过测定它们的荧光强度变化获得Job′s曲线(图4) ,进而得到大豆苷元的两种包合物的包合比。由图4可见,从曲线中最高点所对应的横坐标(0.5) 可知,大豆苷元与两种氨基修饰β环糊精的包合化学计量比均为1∶1,此结果与本研究组之前的研究结果[30]一致。
3.6 包合稳定常数的测定
NCD和ENCD与大豆苷元的混合溶液的荧光光谱曲线如图5所示。荧光光谱曲线均是以Na2CO3NaHCO3缓冲溶液(pH 10.5) 为介质而测得,检测波长为:λex/λem=385/468 nm。
由于大豆苷元与NCD和ENCD的包合比均为1∶1,所以其包合稳定常数Ks满足公式(1) :
KS: 包合稳定常数(L/mol);[CD]0和[CD]分别为环糊精的初始浓度及环糊精浓度(mol/L); [Daidzein]0和[Daidzein]分别为大豆苷元的初始浓度及大豆苷元浓度(mol/L); [CD・daidzein]:环糊精/大豆苷元包合物的浓度(mol/L);ΔF: 大豆苷元荧光强度的变化;Δε: 有无环糊精时大豆苷元的摩尔消光系数差值。
由此可推出公式(2) :
其中,ΔF可以根据实验中环糊精浓度改变测得的荧光强度差值计算得到,然后根据非线性最小二乘法计算得到包合物的KS值。表3给出了两种包合物包合稳定常数KS及吉布斯自由能变化ΔG,两种氨基修饰β环糊精对大豆苷元的包结能力NCD>ENCD,这与两者在同一条件下的包合收率大小一致(83%和67%) ,表明包合能力的强弱可能影响氨基修饰β环糊精与同一客体形成包合物的收率。
3.7 包合物的水溶性
通过饱和水溶液法测试表明,大豆苷元与NCD及ENCD形成包合物后,在水中的溶解度分别提高至15.2和13.2 mg/mL(以大豆苷元的质量计算) ,相对于同样条件下大豆苷元本身的溶解度(8.31 μg/mL) 分别提高了约1800和1500倍。与此同时,与文献报道的β环糊精常见衍生物如2羟丙基β环糊精(HPβCD) [30,32]、磺丁基醚β环糊精(SBEβCD) [31]以及β环糊精[32]等相比,本研究所使用的两种氨基修饰β环糊精对大豆苷元具有更强的增溶能力(见表4) 。
实验结果表明,利用饱和水溶液法制备的大豆苷元与两种氨基修饰β环糊精NCD和ENCD的固体包合物,均可明显提高大豆苷元的水溶性,形成包合物后,大豆苷元在水中的溶解度分e提高了约1800和1500倍,对大豆苷元的增溶能力强于已报道的环糊精及其衍生物。这些实验结果可为设计和开发新的大豆苷元的水溶性制剂提供新的研究思路。
References
1 Gottstein N,Ewins B A, Eccleston G P, Hubbard G P, Kavanagh I C, Minihane A M, Weinberg P D, Rimbach G. Brit. J. Nutr., 2003, 89: 607-615
2 Park M H,Ju J W, Park M J, Han J S. Eur. J. Pharmacol., 2013, 712: 48-52
3 Cheong S H,Furuhashi K, Ito K, Nagaoka M, Yonezawa T, Miura Y, Yagasaki K. J. Nutr. Biochem., 2014, 25: 136-143
4 Fritz K L,Seppanen C M, Kurzer M S, Csallany A S. Nutr. Res., 2003, 23: 479-487
5 Dwiecki K, Neunert G, Polewski P, Polewski K. J. Photochem. Photobiol. B, Biol., 2009, 96: 242-248
6 Fonseca D, Ward W E. Bone, 2004, 35: 489-497
7 Somjen D, Katzburg S, Kohen F, Gayer B, Livne E. J. Cell. Biochem., 2008, 103: 1826-1832
8 de Lemos M L. Ann. Pharmacother., 2001, 35: 1118-1121
9 Liu X, Suzuki N,Laxmi Y R S, Okamoto Y, Shibutani S. Life Sci., 2012, 91: 415-419
10 Lu Z, Zhou R, Kong Y, Wang J, Xia W,Guo J, Liu J, Sun H, Liu K, Yang J, Mi M, Xu H. Curr. Cancer Drug Targets, 2016, 16: 455-465
11 Kang N J, Lee K W,Rogozin E A, Cho Y Y, Heo Y S, Bode A M, Lee H J, Dong Z. J. Biol. Chem., 2007, 282: 32856-32866
12 King R A,Bursill D B. Am. J. Clin. Nutr., 1998, 67: 867-872
13 Setchell K D R, Brown N M, Desai P, ZimmerNechemias L, Wolfe B E, Brashear W T, Kirschner A S, Cassidy A, Heubi J E. J. Nutr., 2001, 131: 13625-13755
14 Kanakubo A, Koga K, Isobe M, Fushimi T, Saitoh T, Ohshima Y, Tsukamoto Y. Tetrahedron, 2001, 57: 8801-8805
15 Chen X L, Shi X N,Qu L B, Yuan J W, Lu J S, Lu Y F. Chin. J. Chem., 2007, 25: 1008-1013
16 Fairley B,Botting N P, Cassidy A. Tetrahedron, 2003, 59: 5407-5410
17 Soidinsalo O, Whl K. Steroids, 2004, 69: 613-616
18 Needs P W, Williamson G. Carbohydr. Res., 2001, 330: 511-515
19 Shimoda K, Sato N, Kobayashi T, Hamada H, Hamada H. Phytochemistry, 2008, 69: 2303-2306
20 Loftsson T, Brewster M E. J. Pharm. Sci., 1996, 85: 1017-1025
21 Rajewski R A, Stella V J. J. Pharm. Sci., 1996, 85: 1142-1169
22 Loftsson T, Duchêne D. Int. J. Pharm., 2007, 329: 1-11
23 Han B, Yang B, Yang X, Zhao Y, Liao X, Gao C, Wang F, Jiang R. J. Biosci. Bioeng., 2014, 117: 775-779
24 Wang F, Yang B, Zhao Y, Liao X, Gao C, Jiang R, Han B, Yang J, Liu M, Zhou R. J. Biomater. Sci. Polym. Ed., 2014, 25: 594-607
25 Xiao D, Yang B, Zhao Y, Liao X, Yang X, Wang F, Chen Y, Zhou R. J. Incl. Phenom. Macrocycl. Chem., 2014, 79: 349-356
26 Ren Y, Liu Y, Niu R, Liao X, Zhang J, Yang B. J. Mol. Struct., 2016, 1117: 1-7
27 Ren Y, Liu Y, Yang Z, Niu R, Gao K, Yang B, Liao X, Zhang J. Mater. Sci. Eng. C Mater. Biol. Appl., 2016, 69: 68-76
28 Ren Y, Yang B, Liao X. RSC Adv., 2016, 6: 22034-22042
29 Ren Y, Yang B, Liao X. Catal. Sci. Technol., 2016, 6: 4283-4293
30 Deng Y, Pang Y,Guo Y, Ren Y, Wang F, Liao X, Yang B. J. Mol. Struct., 2016, 1118: 307-315
31 LEI YingJie, YU Mei, ZHAO Kang. Food Sci., 2005, 26(10): 134-137
雷英杰, 俞 玫, w 康. 食品科学, 2005, 26(10): 134-137
篇8
关于对江苏兴联电子科技有限公司
年产新能源及各种电线100万公里、各种空气源热泵机组1万台、各种线束产品350万套、汽车配件200万套、铜材制品6000吨项目
环境影响报告表的批复
江苏兴联电子科技有限公司:
你公司委托苏州品润环境评价有限公司环评工程师吴媛(资格证书编号:2014035320350000003512320748)主持编制的《江苏兴联电子科技有限公司年产新能源及各种电线100万公里、各种空气源热泵机组1万台、各种线束产品350万套、汽车配件200万套、铜材制品6000吨项目环境影响报告表》(以下简称《报告表》)收悉。经研究,批复如下:
一、根据《报告表》评价结论及寺巷街道预审意见,在落实《报告表》中提出的各项污染防治和环境风险防范措施的前提下,从生态环境角度考虑,同意该项目在泰州经济开发区振兴西路666号公司现有厂区内建设,总投资15000万元,在预留空地内新建生产车间33000m2,购置高速放线机、高速印字机、高速收线机、束丝机、剪板机、折弯机、卷板机、焊接机、自动焊接机等加工设备180台(套)。建成后形成年产新能源及各种电线100万公里、各种空气源热泵机组1万台、各种线束产品350万套、汽车配件200万套、铜材制品6000吨。具体产品方案详见《报告表》,你公司不得擅自扩大生产规模、改变生产工艺和产品方案。
二、在项目工程设计、建设和运行管理中,你公司须认真落实《报告表》中提出的各项环保要求,严格执行环保“三同时”制度,确保各类污染物达标排放,并须着重做好以下工作:
(一)施工期必须采取有效措施减缓环境影响,切实做好施工噪声、扬尘、固体废弃物和废水的污染控制及治理。
(二)排水系统严格实施雨污分流、清污分流。项目无生产废水;生活污水经化粪池预处理后,接入市政管网送亚同环保水处理有限公司集中处理;冷却水定期补充损耗,不外排。
(三)强化废气收集措施,落实各类废气净化技术,确保治理设施正常运行,处理效率及排气筒高度应达到《报告表》提出的要求,加强车间、危废暂存间等区域的无组织废气控制。浸锡、押出和印字废气均有效收集,经“二级串联活性吸附”装置处理后,分别通过15米高排气筒(1#、2#、3#、4#)排放;危废暂存间废气有效收集,经“活性炭吸附”装置处理后通过15米高排气筒(5#)排放。
废气排放执行《大气污染物综合排放标准》(GB16297-1996)、《恶臭污染物排放标准》(GB14554-93)、《《挥发性有机物无组织排放控制标准》(GB37822-2019)相关要求。
(四)项目设计、施工和建设中应选用低噪声设备,合理布局设备,采取有效的减振、隔声等降噪措施。运营期厂界噪声执行《工业企业厂界环境噪声排放标准》(GB12348-2008)中 3类标准,施工期噪声应符合《建筑施工场界环境噪声排放标准》(GB12523-2011)要求。
(五)一般固体废物、生活垃圾、危险废物须分类收集、分类处理处置。按照“资源化、减量化、无害化”的原则和环保管理要求,落实各类固废的收集处理处置和综合利用措施,实现固废全部综合利用或安全处置。废拉丝液(HW09/900-007-09)、拉丝污泥(HW09/900-007-09)、废胶塞(HW49/900-041-49)、废活性炭(HW49/900-039-49)、废油(HW08/900-217-08)、废包装桶(HW49/900-041-49)等危险废物,须委托具备危险废物处置资质的单位安全处置;废边角料、不合格品、废锡渣、废包装材料出售综合利用;生活垃圾委托环卫部门定期清运处置。危险废物暂存场所应按《省生态环境厅关于进一步加强危险废物污染防治工作的实施意见》(苏环办〔2019〕327号)、《危险废物贮存污染控制标准》(GB18597-2001)及修改单要求设置,一般废物暂存场所应按《一般工业固体废物贮存和填埋污染控制标准》(GB18599-2020)及修改单要求设置。
(六)做好土壤和地下水污染防治工作。落实《报告表》中提出的源头控制、分区防渗要求,危废暂存间、拉丝液池等区域采取重点防渗措施,制定地下水监控和应急方案。
(七)按照《江苏省排污口设置及规范化整治管理办法》的要求,完善各类排污口和标志设置。本项目依托现有1个污水接管口和1个雨水接管口及1个废气排放口,新增4个废气排放口。
三、本项目VOCs排放量经泰州市生态环境局医药高新区分局审核同意。本项目建成后,污染物年排放量不得突破《报告表》中核定的排放量。
四、按照《关于做好生态环境和应急管理部门联动工作的意见》(苏环办〔2020〕101号)的相关要求,对环境治理设施开展安全风险辨识管控,健全内部污染防治设施稳定运行和管理责任制度,严格依据标准规范建设环境治理设施,确保环境治理设施安全、稳定、有效运行。
五、本项目应当在启动生产设施或者在实际排污之前申领排污许可证,未取得排污许可证的,不得排放污染物。项目建设必须严格执行配套建设的环境保护设施与主体工程同时设计、同时施工、同时投产使用的环境保护“三同时”制度。主体工程和环保设施建成后,你公司须按规定程序实施竣工环境保护验收。
六、请泰州市生态环境局医药高新区分局负责该项目相关管理工作,泰州市生态环境综合行政执法局负责该项目的现场执法监督检查工作。
七、项目的性质、规模、地点、采用的生产工艺或者防治污染、防止生态破坏的措施发生重大变动的,应当重新报批项目的环境影响评价文件。自本批复文件批准之日起,如超过5年方决定工程开工建设的,环境影响报告书应当报我局重新审核。
泰州医药高新技术产业开发区管理委员会
2021年6月22日
篇9
【关键词】 银屑病;淋巴细胞;受体CXCR3;趋化因子,CXC
Expression of CXCR3 mRNA in peripheral blood lymphocytes and neutrophils in patients with psoriasis
【Abstract】 AIM: To investigate the expression of chemokine receptor CXCR3 mRNA in peripheral blood lymphocytes and neutrophils in patients with progressive plaque psoriasis and its correlation with Psoriasis Area and Severity Index (PASI). METHODS: Reverse transcriptasepolymerase chain reaction (RTPCR) was applied to semiquantitatively analyze CXCR3 mRNA expression in peripheral blood
lymphocytes and neutrophils from 33 psoriatic cases, 16 cases with about 70% remission of the 33 patients after treatment and 30 healthy controls. The correlation between CXCR3 mRNA expression and PASI was evaluated. RESULTS: CXCR3 mRNA level in lymphocytes from psoriatic patients was 1.12±0.81, markedly higher than that in normal controls (0.28±0.28, P
【Keywords】 psoriasis; lymphocytes; receptor CXCR3, chemokines, CXC
【摘要】 目的: 了解银屑病患者外周血淋巴细胞与中性粒细胞中CXC型趋化因子受体CXCR3 mRNA的表达水平及其与银屑病皮损面积和严重程度指数(PASI)之间的关系. 方法: 应用逆转录聚合酶链反应(RTPCR)法检测进行期斑块型银屑病患者33例及其中16例患者治疗后外周血淋巴细胞及中性粒细胞中CXCR3 mRNA的表达水平,设30例健康人作为正常对照,并将检测结果与PASI进行了相关性分析. 结果: 斑块型银屑病患者外周血淋巴细胞中CXCR3 mRNA表达水平为1.12±0.81,明显高于健康对照组(0.28±0.28, P
【关键词】 银屑病;淋巴细胞;受体CXCR3;趋化因子,CXC
0引言
银屑病的病理特征之一为表皮和真皮中白细胞浸润,其中主要为中性粒细胞及淋巴细胞. 趋化因子是主要使细胞发生趋化作用的细胞因子,分为CXC, CC, XC及CX3C四型. 趋化因子通过与其特异性受体结合发挥作用,相应的趋化因子受体也分为CXC, CC, XC及CX3C四型. 大量研究结果显示趋化因子及其受体系统参与了炎症的发病机制,尤其与炎症细胞向皮损局部的移行关系密切. 银屑病患者外周血中性粒细胞中趋化因子受体CXCR1与CXCR2 mRNA的表达增高,可能参与了中性粒细胞的活化及其向皮损部位的趋化[1]. CXCR3为CXC型趋化因子干扰素诱导的单核因子(Mig)及干扰素诱导蛋白10(IP10)的特异性受体,有报道Mig mRNA在银屑病皮损部位真皮上部高表达[2]. 目前对银屑病患者外周血淋巴细胞与中性粒细胞中CXCR3的表达情况仍不明确.
1材料和方法
1.1材料明确诊断的中、重度进行期斑块状银屑病患者33例,均为200203/200212在中国医学科学院皮肤病医院就诊的门诊或住院患者,其中男19例,女14例,年龄18~65岁,病程4 mo~40 a. 用银屑病皮损面积和严重程度指数( psoriasis area and severity index, PASI)来评估患者的疾病严重程度. 入选标准: 年龄在18周岁以上,临床诊断明确,PASI评分在8.4以上;近3 mo内未用过维甲酸制剂、皮质类固醇激素及免疫抑制剂,1 mo内未用过治疗银屑病的内服及外用药物,无其他系统性疾病或皮肤疾病;女性患者排除怀孕、哺乳及月经期. 健康对照30例,均来自中国医学科学院皮肤病研究所研究生、体检职工及皮肤外科整形美容的患者,男17例,女13例,年龄18~50岁( 经统计学处理,年龄、性别与银屑病患者组无统计学差异 ). 对符合上述入选标准的患者详细记录病史资料,进行血常规检查,征得患者本人同意后自肘静脉取血8mL加入肝素抗凝管备分离,标本收集完毕后根据患者病情给予相应的抗银屑病药物治疗[1]至皮损消退70%以上时再次进行血常规检查,取疗后血,并再次记录患者的PASI评分,共收集到治疗后患者16例(男9例,女7例,年龄22~58岁).
Hema 480基因扩增仪(珠海黑马医学仪器有限公司),TFX20M紫外检测仪(Vilber lourmat法国),CS9000双波长飞点薄层扫描仪(日本岛津),TRIzol (GIBICO/BRL), SuperScriptTM FirstStrand Synthesis System for RTPCR( Invitrogen ). 特异性引物CXCR3 5′ TCCTTGAGGTGAGTGACCACAAA3′, 5′CTCGTCGTGGTGGGCCGACAG3′,扩增片段为584 bp;β肌动蛋白5′CAACTCCATCATGAAGTGGTAAC3′,5′CCACACGGAGTACTTGCGCGCCTC3′,扩增片段为180 bp. 由上海生工生物工程技术服务有限公司合成.
1.2方法用RTPCR方法检测淋巴细胞与中性粒细胞中CXCR3的基因表达水平. 用60 g/L葡聚糖溶液沉降红细胞,淋巴细胞分层液分离淋巴细胞与中性粒细胞,显微镜下记数2×106个细胞. 总RNA提取试剂TRIzolTM提取淋巴细胞与中性粒细胞总RNA. 紫外分光法检测RNA纯度,TBE/琼脂糖电泳检测RNA的完整性. 严格按照Invitrogen的试剂盒说明书进行操作反转录合成cDNA. 以cDNA为模板建立PCR反应体系:反应总体积为25 μL,反应程序为: 94℃变性45 s, 57℃退火45s, 72℃延伸1 min,首次循环94℃预变性5 min,共进行35个循环,最后72℃延伸7 min. 以β肌动蛋白作为内参照进行半定量,CXCR3与β肌动蛋白同管扩增. PCR产物用20 g/L琼脂糖凝胶电泳检测,以每厘米胶长5 V的电压进行电泳,50 min后在紫外检测仪上观察结果并进行近距离摄影,用薄层扫描仪扫描胶片,基因表达水平以内参照β肌动蛋白基因为基准校正后获得.
统计学处理: 采用SPSS10.0软件处理,数据以x±s表示,治疗前后数据用配对资料t检验分析,基因表达量用OneWay ANOVA (单因素方差分析)方法,两两比较用最小显著差数法(Leastsignificant difference)检验. 相关性分析采用Pearson线性相关. P
2结果
治疗前患者的PASI评分为8.4~47.2(27.3±8.8). 所收集到的治疗后患者的PASI评分为1.2~15.3(5.0±3.9),经统计学分析,比相应患者治疗前的PASI评分(10.8~47.2, 25.6±10.8)下降,差异具有统计学意义(P
进行期斑块状银屑病患者淋巴细胞及中性粒细胞中CXCR3 mRNA的平均表达水平见表1及图1. 银屑病患者治疗前外周血淋巴细胞中CXCR3 mRNA表达水平明显高于健康对照组(P
表1外周血淋巴细胞及中性粒细胞中CXCR3 mRNA的表达水平(略)
aP
A: 淋巴细胞;B: 中性粒细胞. M: 100 bp marker; 1~2: 银屑病患者治疗前; 3~4: 健康对照; 5~6: 银屑病患者治疗后. 180 bp: 内参照β肌动蛋白; 584 bp: CXCR3.
图1淋巴细胞与中性粒细胞中CXCR3 mRNA的电泳图(略)
3讨论
银屑病是一种在多基因遗传背景下、受多种内外环境因素刺激和诱导的自身免疫性慢性炎症性皮肤病. 免疫异常在银屑病的发病机制中起到核心作用,参与银屑病皮损部位免疫反应的细胞主要涉及淋巴细胞、角质形成细胞、抗原提呈细胞等,而细胞因子是各种免疫细胞之间相互作用的枢纽[3-4].
现认为银屑病是一种T细胞介导的自身免疫性疾病. 在体外,银屑病患者外周血单个核细胞具有促进自身角质形成细胞生长的作用[5],提示银屑病表皮的病理变化也与淋巴细胞的过度活化有关;细菌超抗原介导的银屑病发病机制与T淋巴细胞活化有关,有研究[6]显示极微量的链球菌M6蛋白可引起点滴状银屑病患者外周血单一核细胞明显增殖,导致Th1型细胞因子IFNγ明显增加. T细胞介导的免疫异常在银屑病的发病机制中起到核心作用,T细胞不只局限于真皮,而且进入表皮诸层,参与银屑病发病的T细胞主要为活化的I型T细胞,表皮主要为Tc1细胞,真皮主要为Th1细胞. 细胞因子是细胞之间相互作用的主要介质,在银屑病皮损部位,T细胞、抗原提呈细胞、角质形成细胞等通过细胞因子、趋化因子发生相互作用,而且其间的关系变得复杂而紊乱[7]. 随着研究的深入,人们发现由抗原提呈细胞与自然杀伤细胞介导的天然免疫及由T细胞介导的获得性免疫在银屑病患者中发生紊乱,二者相互作用,导致细胞因子、趋化因子及生长因子产生,进而导致皮损部位炎症细胞浸润及炎症网络的逐级放大,最终导致银屑病特有的浸润性鳞屑性红斑发生[8].
趋化因子及其受体系统在炎症细胞自毛细血管向皮损部位的迁移过程中起到至关重要的作用. Goebeler等[2]的研究结果显示趋化因子Mig mRNA在银屑病皮损部位真皮上部高表达并在真皮顶端呈簇集分布,与T细胞及巨噬细胞在银屑病皮损顶部的浸润模式相一致, 由于Mig具有活化及趋化T细胞的能力,推测真皮顶端是T细胞外渗继而移入表皮的首选部位,由于某一时段中只有部分皮损部位的真皮表达Mig,提示T细胞的外渗和迁移受时间的限制并呈周期性. Mig的特异性受体为CXCR3, CXCR3主要表达于Th1细胞亚群,这与银屑病皮损部位浸润的主要T细胞亚群相一致. 有报道CXCR3在银屑病皮损部位皮肤中升高,主要表达于真皮CD3+淋巴细胞[9].
我们的研究结果表明趋化因子受体CXCR3在银屑病外周血淋巴细胞中的表达增高并与PASI呈正相关,并且随着病情的好转而下降,结合文献报道,推测CXCR3可能通过与其特异性配体Mig结合,参与了淋巴细胞向皮损部位的移行及皮损炎症状态的维持,其机制可能涉及包括参与细胞信号转导途径在内的多环节调节,使细胞之间及细胞与细胞外基质之间的结构发生改变而更加符合炎症细胞迁移的需要,从而在银屑病的发病机制中起着重要作用.
参考文献
[1] 杨桂兰,陈志强,郑家润,等. 银屑病患者中性粒细胞中CXC型趋化因子受体CXCR1, CXCR2 mRAN的表达[J]. 中华皮肤科杂志, 2003,36(9):516-518.
[2] Goebeler M, Toksoy A, Spandau U, et al. The CXC chemokine Mig is highly expressed in the papillae of psoriatic lesions[J]. J Pathol, 1998,184(1):89-95.
[3] RoussakiSchulze AV, Kouskoukis C, Petinaki E, et al. Evaluation of cytokine serum levels in patients with plaquetype psoriasis[J]. Int J Clin Pharmacol Res, 2005,25(4):169-173.
[4] Boniface K, Lecron JC, Bernard FX, et al. Keratinocytes as targets for interleukin10related cytokines: A putative role in the pathogenesis of psoriasis[J]. Eur Cytokine Netw, 2005,16(4):309-319.
[5] 王刚,刘玉峰. 银屑病患者外周血单个核细胞对自身角质形成细胞的促生长作用[J]. 第四军医大学学报, 2001,22( 24):2297-2299.
[6] 刘雯,赵广,刘玉峰. 银屑病患者外周血单一核细胞对链球菌M6蛋白的反应[J]. 第四军医大学学报, 2003,24( 13):1213-1215.
[7] Bos WE, Thio HB, Neumann HA, et al. The pathogenesis of inflammatory dermatoses, especially psoriasis[J]. Ned Tijdschr Geneeskd, 2006,150(4):179-183.
篇10
【关键词】 高压氧;重型闭合性颅脑损伤;补体受体;氧自由基;红细胞免疫粘附
重型颅脑损伤患者由于伤后出现脑缺血、缺氧、水肿等,往往出现能量代谢障碍,无氧代谢增加,导致脑组织中酸性代谢产物增加,出现酸中毒及微循环障碍,反过来加重脑组织缺氧,形成恶性循环。要打断这一恶性循环,提高脑组织供氧是有效的措施之一。氧自由基是机体需氧代谢的中间产物,氧化能力强,对各种细胞膜都有不同程度的损害,可破坏细胞膜的结构,并影响其功能。为了探讨高压氧对重型闭合性颅脑损伤患者临床治疗价值,我们观察了重型闭合性颅脑损伤患者高压氧(HBO)治疗前、后氧自由基水平变化及红细胞膜补体受体1型分子(CR1)数量表达(即活性变化),并探讨了红细胞膜CR1分子数量表达与氧自由基二者之间的相关性,以期进一步了解氧自由基对红细胞免疫粘附(RCIA)功能影响的机制。
1 对象与方法
1.1 研究对象 重型闭合性颅脑损伤患者58例,均经CT或MRI确诊。颅脑损伤原因主要以交通事故居多,其次为高处坠落,无其它部位重要损伤,伤前无心、肾、肝等脏器急慢性病及糖尿病史等,全部有昏迷史。①高压氧治疗组(HBO组):31例,男20例,女11例,年龄9~68岁,平均397岁。行HBO和其他常规治疗。②对照组:27例,男17例,女10例,年龄10~67岁,平均391岁。单纯常规治疗。③正常组:本院同期健康体检者30名,男21例,女9例,年龄10岁~66岁,平均385岁。以上各组2周内均未使用类固醇激素及免疫抑制剂。HBO组和对照组患者年龄、伤情、颅内血肿及脑挫伤程度、手术治疗等临床指标无统计学差异,并均在伤后24 h内入院。
1.2 治疗方法 两组患者均住重症监护病房,生命体征及颅内压均用仪器24 h连续监测,定期抽血查血气、血糖和电解质,常规使用激素、脱水剂、能量合剂、止血药及脑细胞激活剂。根据适应证进行血肿清除术或颅内外减压术,术后对中、重度昏迷者做气管切开术和呼吸机辅助呼吸。HBO组的HBO治疗在入院后或手术后7 d左右开始,治疗压力02 MPa,升压15 min,稳压,戴面罩吸氧30 min 2次,中间吸空气10 min,减压20 min出舱。每日1次,10次为1个疗程,分别治疗2~3个疗程。
1.3 检测方法 治疗前(均为住院次日)、治疗后(HBO组HBO治疗平均15个疗程,对照组均在住院15 d)晨抽取静脉血4~5 ml,分别用EDTANa2、肝素抗凝。
1.3.1 红细胞上CR1分子的测定:根据文献[1]建立的ELISA法检测红细胞上CR1分子的表达。抽取静脉血2 ml,以EDTA抗凝,经PBS洗涤3次、戊二醛固定后,以PBS配成2%的红细胞悬液,取25 μl红细胞悬液加入V形板各孔中,依次加入抗CR1单抗mAb、碱性磷酸酶标记的羊抗鼠IgG和底物单磷酸酚酞(PMP)(以上试剂均购自第二军医大学长海医院免疫室)。离心,吸取上层显色液,加入到另一个干净的U形板中测定A405值。实验中以一抗的稀释液(PBS/BSA)作为空白对照,用绵羊红细胞(无CR1分子)作为阴性对照。检测结构以实验组的A405值与空白对照A405值之差作为测定值。主要仪器为芬兰产Multiskan MK3酶标仪、Wellwash 4 MK2洗板机。
1.3.2 血浆SOD、MDA和GSHPX的测定:均采用化学比色法(试剂盒购自南京建成生物工程研究所),操作按说明书进行。GSHPX以新单位表示酶活力(8 μl全血在37 ℃反应5 min使GSH降低μmol数[2])。主要仪器为美国Backman CX7全自动生化分析仪。
1.4 统计学处理 采用SPSS统计学软件,计量资料均以x±s表示,多组间显著性比较采用F检验,两组间显著性比较采用q检验,相关性分析采用统计学直线相关分析处理,求出r值。
2 结果
2.1 治疗前外周血红细胞CR1分子数量表达及SOD、MDA和GSHPX水平差异 见表1。
表1 治疗前外周血红细胞CR1分子表达及SOD、MDA和GSHPX的检测结果(略)
注:vs HBO组, P>005;vs 正常组,P<001
表1显示,①对照组、HBO组患者细胞CR1分子数量表达显著低于正常组(P<001);SOD和GSHPX的水平显著下降,MDA的水平显著上升。②SOD、GSHPX、MDA的水平及红细胞CR1分子数量表达差异无显著性(P>005)。提示红细胞CR1分子数量表达、血浆SOD、MDA和GSHPX水平与病情相关。患者外周血红细胞CR1分子数量表达与氧自由基的相关性分析:红细胞CR1分子数量表达与SOD和HSHPX的水平呈显著的正相关(r=0504,P<001;r=0538,P<001);与MDA的水平呈显著的负相关(r=-0660,P<001)。
2.2 治疗后外周血红细胞CR1分子数量表达及SOD、MDA和GSHPX水平差异 见表2。
表2 治疗后外周血红细胞CR1分子数量表达及SOD、MDA和GSHPX的检测结果(略)
表2显示,两组患者红细胞CR1分子数量表达、血浆SOD、MDA和GSHPX水平相差显著(P<001),HBO组红细胞CR1分子数量表达、SOD和GSHPX的水平显著上升,MDA的水平显著下降。
3 讨论
红细胞有许多与免疫有关的物质,如CR1、CR3、CD58、CD59、IL8受体和SOD酶等,红细胞表面的CR1,是RCIA功能的物质基础。C3b一方面与CIC结合,另一方面又作为配体与CR1相结合触发免疫细胞对异物及抗原的粘附和消除。此外,C3b作为替代途径的C3等转化酶的组成要素,发挥着活化补体系统,放大补体功能的主要作用。在血循环中C3b受体总数的90%~95%存在于红细胞膜上即CR1,因此,红细胞在消除CIC中起主要作用。几乎所有经补体调理过的抗原和IC,都由红细胞结合运至肝脾消除[3]。红细胞膜由脂类和蛋白质组成,膜蛋白质以糖蛋白或糖脂蛋白形式存在,膜的结构和功能的完整性对决定膜上CRI功能有决定性作用,由于红细胞膜直接接触高分压氧,易导致膜的脂质过氧化,机体则主要通过抗氧化剂和抗氧化酶(如SOD、GSHPX等)的作用来抗衡自由基的膜毒性[4]。而红细胞上的SOD酶等抗氧化物质,除参与清除吞噬细胞产生的氧自由基,增加吞噬功能外,还可使巨噬细胞产生IL1和TNF的能力增强[5]。本研究结果显示,重型闭合性颅脑损伤患者红细胞CR1分子数量表达显著低于对照组,说明重型闭合性颅脑损伤患者红细胞CR1分子活性降低,RCIA功能也降低,则患者红细胞携带IC至网状内皮系统的能力下降,致使IC沉积于血管壁,激活补体系统,一方面激活凝血系统,导致DIC;另一方面至使血管内皮细胞损伤,引起血小板粘附聚集,进而释放组织胺等血管活性物质,进一步造成全身小动脉痉挛,引起重型闭合性颅脑损伤患者一系列症状和体征。急性颅脑损伤后的应激反应及下丘脑损伤,可导致神经内分泌免疫系统具有广泛抑制作用的内分泌激素,特别是阿片肽类物质升高,可能使细胞表面的CR1分子结构、数目及功能受到一定的影响。为了进一步探讨患者细胞CR1分子数量表达及RCIA功能低下的原因,我们检测了患者血浆SOD、MDA和GSHPX水平,发现MDA水平升高,SOD和GSHPX水平降低。可能患者存在组织缺血/缺氧、感染和应激等因素,可使体内自由基的含量增加。红细胞膜CR1分子数量表达与SOD和GSHPX的水平呈显著的正相关,与MDA的水平呈显著的负相关。这就提示,患者红细胞CR1分子数量表达与脂质过氧化反应增强密切相关。患者增加的自由基可直接影响红细胞膜的功能,降低了膜上CR1的含量及SOD酶的活性,致红细胞膜CR1分子数量表达降低,清除IC的功能减低。患者红细胞膜受损,机体的抗氧化能力下降及自由基水平升高,均可导致机体细胞免疫功能下降。高压氧治疗对机体的影响主要是高浓度氧和高气压的双重作用。文献报道[6],HBO治疗能通过调节细胞黏附分子,降低缺血灶炎症反应的程度。本研究HBO组经高压氧治疗后,红细胞CR1分子数量表达、SOD和GSHPX的水平显著上升,MDA的水平显著下降,与常规治疗组相比具有显著性差异。证明了高压氧治疗不仅使脂质过氧化反应降低,而且还可以使机体清除高压氧环境下机体产生的氧自由基及疾患所产生的氧自由基的能力提高。SOD活性的增高还表明机体有很大潜能适应间歇性高压氧环境的自由基改变[7]。在高压氧条件下,红细胞变形能力及屈曲性的恢复,通透指数下降和电泳时间加快,改变了红细胞膜的液晶状结构使CR1分子数量和构型发生变化。说明高压氧能够减少或抑制自由基的产生,可提高患者的细胞免疫功能。因此,高压氧对患者及阻止氧自由基产生,对提高患者的红细胞膜CR1分子数量表达即RCIA功能,促进病情好转,具有重要意义。综上所述,重型闭合性颅脑损伤患者存在机体的抗氧化能力下降,自由基水平升高及红细胞CR1分子数量表达下降[3],两者具有相关性。高压氧能显著影响患者SOD、GSHPX、MDA的水平及红细胞CR1分子数量表达,其治疗效果可能是通过减少或抑制自由基的产生促进红细胞膜CR1分子数量表达而实现的,为临床上高压氧治疗在自由基方面及提高RCIA功能提供了理论基础,并可能作为调整HBO治疗方案的依据。
参考文献
1. 王海滨,张景萍,王辉,等.红细胞CRI分子的定量测定及其临床意义[J].中华微生物学和免疫学杂志,2000,20(4):381384
2. 白继文.检验医学诊断技术[M].第3版.北京:人民卫生出版社,2001.284286
3. 王玉龙,杨文东,安振国,等.红细胞CRI在急性颅脑损伤患者表达及免疫功能的探讨[J].细胞与分子免疫学杂志,2003,19(2):206
4. 陈瑗,周玫.自由基医学[M].北京:人民军医出版社,1991.2860
5. 刘景田,张洁.红细胞免疫学[J].西安:陕西科学技术出版社,1995.1519
免责声明
公务员之家所有资料均来源于本站老师原创写作和网友上传,仅供会员学习和参考。本站非任何杂志的官方网站,直投稿件和出版请联系杂志社。