顶级生活范文

导语：如何才能写好一篇顶级生活，这就需要搜集整理更多的资料和文献，欢迎阅读由公务员之家整理的十篇范文，供你借鉴。

篇1

一位名叫血红的网络，一不小心就成了其中的一位。

有人说，他代表着中国网络奇幻小说的一个时代，也有人说，他是中国网络奇幻小说的第一掘金人。

打开百度百科，如果你输入“血红”二字，第一个词条就是关于这位网络作家的：原名刘炜，年龄30岁，毕业于武汉大学计算机专业。2003年起，开始从事网络小说的创作，数年下来，完成了《升龙道》、《龙战星野》、《神魔》、《邪风曲》、《逆龙道》等多部网络小说，其中《升龙道》仅在“起点网”的点击率就达到了18050714，被读者誉为“网络第一人”，是2004年“起点网”惟一年薪超百万网络。血红的写作以超高的写作速度和强大的情节控制能力著称，文风独特，极易辨认，作品主角通常都带有独特的市井气息。

据了解，血红开始在“起点中文网”写作的时候，是靠作品点击率赚钱的。例如网民看小说按千字2分钱收费，他上传1万字，如果有10万人点击阅读，那么就产生2万元的收入，网站与作者是四六分成，分成后，他赚到1.2万元。

不过像他这样年收入能超过300万元的并不多。他说现在有二三十万人从事网络写作，但多数人赚的只是几包烟钱，新人靠一本书就红还比较困难。对自己的成功，他主要归结为运气好，因为出道早，所以有一批铁杆粉丝，有一定的名气，稿费自然要高一些。

血红一天的生活记录

8:00

当很多上海的小白领正拥挤在地铁里或塞车在马路上时，住在浦东的网络血红才刚好睡到“自然醒”。对他来说，8点还很早，如果前一天晚上喝过酒，他起得更晚，比如9点。2002年，刚走出大学校园的血红，也跟那些白领一样，每天匆忙起床，匆匆走进写字楼。这种状态并没维持太久，3个月后，他因为人际关系被那家IT公司扫地出门。2003年，家人安排他进了朋友的公司，因为工作清闲，也因为喜欢写作，他开始在“起点中文网”上写东西。2004年，他辞职去了上海，租房专职写作。

9:00

开始看书。血红看书很杂，眼下正在看的是《丁丁历险记》、《中国修辞学》。至于8点起床还是9点起床，对血红没什么影响。因为简单的早点后，他要做的不过是看书。虽是网络，但血红更愿意看传统出版物，而且内容很杂。他说网上写得好的基本都是理科出身，这些人的优点是写东西比较严谨，对情节的把握比较深刻，但缺点是文笔都不太好，需要慢慢积累经验。

11:00

打开音箱，伴着轻音乐，血红开始一天惟一的工作：码字。他写东西时很少分心，基本不停。眼下他正在写的是新作《人途》。这部作品从2008年12月起在“17K”上线连载。对血红而言，他写小说不会预先写什么提纲，随意性很大，不会过多考虑作品构架、人物设置等。另外，读者的参与也是重要依据。很多情节走向是跟着读者的口味和评论走的。主角最后被杀光的情节很少出现，因为读者不会答应，读者更愿意看喜剧，不愿意看悲剧。

13:00

1万字顺利写完。他进入邮箱粘贴好，输入编辑地址，按下发送键，这意味着他今天一半的收入已经到手――至少5000元。1万字是他比较常态的写作状态，如果心情好可能会写上1.5万字。发稿之后是简单的午饭。像血红这样的，写1万字跟玩儿一样。因为每个字都有稿费，字数越多稿费越多，写得少的话可能还赚不够上网费。而且网络读者对文字的要求不像传统读者那么高，于是就“成就”了网络的“井喷”式创作。

14:00

打开QQ，一边与读者群的人闲扯，一边去“起点”、“17K”等论坛看别人发表的东西。血红有4个读者群，都是他的粉丝建的。其中一个超级群里有300多人，另3个群里平均每个有一百七八十人。因为人多，他在群里不可能仔细聊什么，常常是这边忽悠两旬，那边忽悠两旬，不外乎是预告一下新书情节，或者说说自己今天的情绪，都是无关痛痒的话。除了网站举行的读者见面会，他很少私下与读者见面，行走江湖，安全第一。见男的，不外乎就是喝酒，喝了两次胃出血后，就不再见了。见女的，容易惹麻烦，他更不见。这些粉丝，很多都跟随他好几年了。他说，自己当初在网上写作时，成名相对容易，因为那时认真写的不过几十个人。现在则翻了上百倍。他说自己属于先占坑的，只要每部作品质量还可以，比上本有点改进，就能继续赚稿费。

16:00

篇2

那天坐地铁，上班高峰段，自然是百分百的沙丁鱼罐头。车门边有一条年轻的美女沙丁鱼很是惹眼，留着黄色披肩发，戴着大框眼镜，耳朵里塞着耳机，手里捏着手机，“旁若无鱼”地沉浸于自己的视听世界，好像这个罐头就是一泓鱼池，身在其中，便是如鱼得水，悠然自若哉！然而，一个紧急刹车，正专注于音乐世界的美女沙丁鱼在惯性作用下一头扑入了身旁一尾中年男鱼怀中。

中年男鱼幸运地被天上掉下来的馅饼砸到，他无辜地拥抱着美女鱼，脸上霎时荡漾起一阵幸福的红晕。美女沙丁鱼一声尖叫，撑住中年男鱼胸膛想推开他，可是车厢内拥挤到几无缝隙，两条鱼尴尬的推搡恰似缠绵的纠绕。美女鱼恼羞成怒，不知是要动武，还是要掩住那张凑得实在太近的脸，扬起手朝中年男鱼面门甩去。车门恰在那时开启，很不幸，美女鱼的眼镜在她自己的扬手挑拨下悠然脱离鼻梁，飞出了罐头，落到了站台上。更不幸的是，中年男鱼的“脑袋”居然也像一颗软塌塌的黑球，脱离它原来安放的肩膀，追随着美女鱼的眼镜飞射而出，沉甸甸地落于站台，“呼啦啦”一下扑在了美女鱼的眼镜之上。

整车鱼顿时发出一片惊叫声，扭头看车厢内的中年男鱼，这条可怜的沙丁鱼正顶着他那颗光芒四射的秃脑袋，目瞪口呆地盯着站台水泥地上已然脱离主体的黑发“脑袋”，脸上的幸福红晕早已被羞愤的煞白掩盖，颤抖的嘴唇里爆出一声惨烈的呼救：“我的假发套！”

整车厢的惊叫声立即被一阵哄堂大笑替代，笑声中，美女鱼的尖叫脱口而出：“你赔我眼镜！”

这一声喊叫让中年男鱼霎时怔住，他看了看不再戴着眼镜的美女鱼，又看了看站台上紧依在一起的眼镜和黑色发套，终于爆发出一声发自丹田的愤怒吼叫：“你赔我假发套！”

接下来，这两条年龄差距悬殊的沙丁鱼便如一对反目成仇的老夫少妻，开始了喋喋不休的争吵。三两声虚弱的劝架夹杂其中：“不要吵了，车门要关了。”

正在危急关头，站在这两人身后的一个瘦男孩，哦不，一条年轻的沙丁男鱼，忽然拨开争吵的两条鱼，一个箭步冲出车门，迅速捡起假发套和眼镜框，直起身回头快速朝车门内用力一挤。青年沙丁男鱼一手托着眼镜，对气急败坏的美女鱼朗朗而道：“凹凹造型的，又没有镜片，摔不坏，别叫人家赔啦。”

说完，又把另一只手里的假发套往中年男鱼头上一扣：“很好哦，没坏，大叔，还能戴。”

美女鱼接过镜框，羞怒而道：“这是国外买的原装名牌货，你有钱也赔不起……”声音明显轻了许多。

篇3

关键词 生活垃圾；微生物；除臭

中图分类号 Q939.9 文献标识码 A 文章编号 1007-5739（2011）12-0270-01

随着我国城市化进程的加快，城市人口日益增多，随之而来的是城市生活垃圾高速增加。据不完全统计，近年来我国垃圾增长率达10％以上，每年产生近1.5亿t。全国600多座城市已有2/3的大中城市陷入生活垃圾的包围之中。这些城市固体废弃物在转运、堆放处理的过程中产生大量臭气，造成严重的环境污染。恶臭气体按其组成可分成5类：含硫化合物，如硫化氢、二氧化硫、硫醇等；含氮化合物，如氨气、胺类、吲哚等；卤素及衍生物，如氯气、卤代烃等；烃类及芳香烃；含氧有机物，如醇、酚、醛、酮等[1]。气相色谱检测表明，城市生活垃圾臭气的主要成分为氨（NH3）和硫化氢（H2S）[2-4]。该文通过分离和筛选生活垃圾的有效除臭菌株，来减轻垃圾中恶臭气体对环境的污染[5]。

1 材料与方法

1.1 培养基

试验设3种培养基，即牛肉膏蛋白胨培养基、高氏一号培养基、马铃薯蔗糖培养基，分别用于培养细菌、放线菌、真菌[5]。

1.2 菌株分离方法

从屈原垃圾填埋场中采集样品，经筛选获得兼性厌氧菌和兼性好氧菌，在30 ℃的条件下，分别采用相应的培养基划线或系列稀释法[6]，获得若干菌株。

1.3 筛选方法

1.3.1 初筛。在发臭垃圾中按10%接种量接入所试菌株，以自来水作为对照，分别在间隔24、48、72 h后用感观法初步判断各菌株的除臭效果，经感官筛选出除臭能力较强的微生物，进行复筛试验[1]。

1.3.2 复筛。①降氨试验：取18 mL菌液于2 L大烧杯中，再加500 mg/L氨水2 mL；向大烧杯中放入装有20 mL稀硫酸吸收液的50 mL小烧杯，盖上双层塑料薄膜密封[1]。②降硫化氢试验：取10 mL菌液于2 L大烧杯中，再加10 mg/L硫化氢溶液10 mL，向大烧杯中放入装有20 mL氢氧化镉吸收液的50 mL小烧杯，盖上双层塑料薄膜密封[1]。

以上处理均以等量的去离子水作为对照。每个处理3次重复。将密封后烧杯置于（30±2）℃的培养箱中，24 h后，取出小烧杯检测氨或硫化氢气体的释放量。氨采用纳氏试剂比色法测定[6]，硫化氢采用亚甲基蓝比色法测定[7]。

1.4 垃圾除臭试验

试验用垃圾的主要成分为剩饭菜及果蔬等富含蛋白质的物质。每盆装5 kg垃圾，各盆的菌种使用量为垃圾重量的3%，将菌种稀释10倍后加入垃圾中拌匀。对初筛试验中有除臭效果的微生物进行分类编号，字母B、F、Y分别表示细菌、丝状真菌、酵母菌，字母后面加相应数字表示菌株号。试验设8个处理，即处理1：B2+B10；处理2：B10+Y3；处理3：B2+Y2；处理4：Y2+Y3；处理5：B2+Y2+Y3；处理6：B2+B10+Y3；以加自来水作对照（CK1）；以不加任何物质作空白对照（CK2）。3次重复。置于室温下（30±2）℃。间隔24 h，采用感观法评价臭气等级[8]。

2 结果与分析

2.1 初筛菌株的除臭效果

对分离到的菌株均进行了初步的降氨及降硫化氢试验，并对菌株进行了初步的分类，结果如表1所示。

可以看出，放线菌没有降氨效果，其他各类微生物的降氨结果也表现各异，48株细菌中6株表现有降氨效果，20株丝状真菌中仅有1株有降氨效果，22株酵母菌中有2株有降氨能力。降氨菌的分离效果以细菌最好，效果达12.5%；丝状真菌降氨效果最低，为5%。这可能是由于垃圾中细菌的繁殖能力高于丝状真菌和酵母，易形成优势菌群，从而表现较好的降氨能力。而相比之下能快速降硫化氢的微生物较少，且能有效降硫化氢的菌株主要是细菌和酵母。这可能与取样时成分及深度的影响有关。初筛试验只是定性试验，还需做定量试验，以确定各菌株除臭能力的强弱。

2.2 复筛菌株的除臭效果

部分在初筛试验中具有降氨或降硫化氢能力的微生物在复筛的定量试验中也表现出良好的除臭能力[1]，如Y3对氨气的去除率为82.0%（表2）。有一部分菌株在初筛试验中具有降氨能力，但在复筛试验中的降解能力明显下降，如B1、B4、B5、F1，因此，复筛试验在除臭菌株分离中是必要的。

2.3 垃圾除臭效果

通过人的嗅觉器官对恶臭气体的反应来进行评价和测定。在垃圾中加菌株处理24、48 h后的评定结果见表3。

可以看出，经添加菌株后，各处理的垃圾臭味明显降低，但处理3在加菌24 h后臭气有所回升；处理5、6则表现出较好的除臭效果，臭味明显降低。因试验所用垃圾臭气源的氨气产量较高，所以各处理的除臭效果均表现较好。但是不同地域垃圾的成分较复杂，为了进一步确定所筛选菌株的除臭效果，还需要在更大范围内进行试验。研究发现，垃圾在处理48 h后，各有效处理的臭气开始回升[1]。因此，还需进一步研究其使用量及使用次数等问题。

3 结论

（1）通过初筛与复筛相结合的方法，有效筛选出降氨效果较好的微生物B2、Y3和降硫化氢效果好的微生物B10、Y2。

（2）在垃圾中加入混合除臭菌株后，收到了较好的除臭效果，垃圾臭味在24 h内明显降低。因此，几个或多个菌株的协同除臭效果值得进一步研究。

4 参考文献

[1] 许丽娟，任杰，张德元，等.城市生活垃圾除臭微生物的筛选及效果测定[J].湖南农业科学，2010（11）：19-21.

[2] 石磊，边炳鑫，赵由才，等.城市生活垃圾卫生填埋场恶臭的防治技术进展[J].环境污染治理技术与设备，2005，6（2）：6-9.

[3] 赵由才.城市生活垃圾卫生填埋场技术与管理手册[M].北京：化学工业出版社，1999：125-139.

[4] 冯明谦.城市生活垃圾堆肥厂中的除臭技术[J].四川环境，2002，21（2）：44-46.

[5] 陈书安，黄为一.除臭微生物分离与效果测定[J].上海环境科学，2002，21（9）：571-573.

[6] 周耀明，张恒.生活垃圾降解菌除臭效果比较研究[J].安徽农业科学，2007，35（26）：8312-8313.

篇4

关键词：煤基活性炭；炭化；活化；再生

中图分类号： TQ424.1 文献标识码： A 文章编号：

引言：活性炭又叫多孔炭，是一种具有高度发达的孔隙结构和极大表面积的人工炭材料，其物理化学性质稳定，耐酸碱，能经受水湿、高温及高压，不溶于水和有机溶剂，使用失效后可以再生，是一种循环经济性材料。并且活性炭的制备原料十分广泛，主要分为木质类和煤质类原料。木质类原料主要有果壳，农作物秸秆及纸浆废液等；煤质类原料主要有褐煤，无烟煤，焦炭煤及石油，石油沥青焦等。

一、煤基活性炭的生产

1、炭化

煤基活性炭的生产工艺中，炭化的主要目的是使煤分子结构中的含氧官能团断裂并使得自由基芳环进行分解聚合，从而可以增加碳的含量，为活化过程中需要形成的孔隙碳结构进行培育。煤基活性炭的炭化过程，简单的说就是在隔绝空气，不加入化学品的条件下热解。炭化过程首先是包括氢、氧等大部分的非碳元素经过分解之后，以气态的形式释放，之后一些自由的碳元素互相结合，形成有序结构，也就是石墨微晶单元形式，然后，那些无序的碳就可以填充进去，经过活化之后形成发达的空隙结构活性炭。

2、活化

煤基活性炭的活化过程就是利用水蒸气和二氧化碳等对碳进行弱氧化的过程。活化过程分为化学活化法和物理活化法，所谓化学活化法是将化学药剂与含碳的物质进行混合，然后结合炭化进行活性炭的生产；而物理活化法是利用水蒸气和二氧化碳、氧气等与含碳物质炭化之后产生的半焦进行反应的一种活化方法，它也是生产中常用的方法。

二、影响煤基活性炭质量的因素

1、原料煤性质

煤基活性炭的生产以及活性炭质量的主要影响因素就是原料煤的性质，原料煤性质不同会对活性炭的质量造成不同的影响。比如说不同的煤种中，含有碳、氢、氧的含量不同，煤的化学结构也不同，因此在炭化后产生的半焦的特性就不同。经研究发现，原煤在没有经过处理时，大同的煤种效果是最好的。

2、炭化温度

炭化过程中产生的半焦的性质往往受到炭化温度的影响，温度过高，微孔的容积会有明显的下降，强度就会相应的增加。也就是说，煤的炭化温度能够直接影响碳化料的空隙结构以及性质。经过大量的实验，不难发现，600℃是炭化的最佳温度，除此之外，在炭化过程中一定要注意防止氧化，否则就会在很大程度上影响孔隙的碳结构。

3、活化温度

据统计数据显示，一般水蒸气的活化温度控制在800―900℃，烟道气活化温度一般控制在900―950℃，而空气的话化温度大约控制在600 ℃左右，而这些活化温度都是根据所用的活化剂与在炭化过程中形成的碳骨架发生反应的最佳温度以及催化剂使用过程中的最佳分解温度来确定的。

4、活化时间

活化时间的长短也间接影响着煤基活性炭的生产，在生产中，随着活化时间的不断延长，活性炭的碘吸附值就会呈现出先增大后减小的变化趋势，在一个小时左右会达到最大值。但是，如果活化的时间没有得到控制，过长会导致采用的活化剂与空隙周围的碳原子发生反应，从而影响了石墨微晶的结构和性质，使得活性炭遭到过度的烧蚀，造成活性炭的吸附能力降低，影响活性炭的质量。

5、煤中矿物质

灰分的含量是评价煤基活性炭的一个重要指标，而灰分就是煤中的矿物质以及有机成分经过灼烧后生成的产物，很多研究表明，灰分的存在会对活性炭的性能造成不利的影响，因此要尽量降低煤基活性炭中灰分的含量。而煤中的一些无机成分能够降低活性炭的着火点以及活性炭灼烧的熔点，从而就可以使灰分和活性炭成功的脱离开来，也就自然降低了活性炭中灰分的含量，并增强活性炭的质量。

三、活性炭再生与再生效果评价

1、活性炭再生研究

活性炭的再生从经济和环保角度来看很有必要。活性炭的再生循环利用技术已经成为反映活性炭工业水平高低的重要标志。活性炭的再生就是使失去吸附能力的活性炭用物理、化学或生物化学等方法，将所吸附的物质除去，恢复其吸附能力，以便重新用于吸附操作的过程。国内外学者提出了各种活性炭再生工艺技术，如溶剂再生法，热再生法，湿式氧化法等。溶剂再生法就是利用活性炭，溶剂与被吸附质三者之间的相平衡关系，通过改变温度、溶剂的pH值等条件打破吸附平衡，将吸附质从活性炭上脱附下来。溶剂再生法一般比较适用于那些可逆吸附，如对高浓度、低沸点有机废水的吸附。它的针对性较强，往往一种溶剂只能脱附特定污染物，而水处理过程中的污染物种类繁多，变化不定，因此一种特定溶剂的应用范围较窄。San Miguel等介绍活性炭的热再生法，吸附饱和的活性炭通过干燥、高温炭化和活化3个阶段而得到再生。活性炭不仅是一种强的吸附剂，而且还是一种强的吸波材料，因此常与微波技术相结合而应用与环保领域。微波的“体加热”，诱导催化，选择性和快速无滞后性是使其受青睐的主要原因。

kedding和Gitchel等人提出并进行了湿式氧化法再生活性炭的研究工作。研究发现，该方法具有不需要脱水过程，炭的损失率较低和二次污染低等显著优点。湿式氧化法主要研究思路是在活性炭投入吸附前，预先在活性炭上负载具有催化氧化作用的物质，以降低活性炭有机吸附质的分解温度，从而能有效地实现低温再生和在线操作。

2、再生效果评价

活性炭的孔结构和比表面积可通过BET氮吸附容量法测定，进而分析其吸附能力；也可通过测定活性炭对指定溶液的吸附等温线来比较其吸附性能大小。如采用苯酚静态再吸附法，即通过测定苯酚质量浓度获得的吸附等温线，进而求得吸附容量，再确定活性炭再生效率。更有研究对测试方法作了改进，由测试吸附等温线改为测试有机物吸附值。

四、活性炭应用与发展趋势

我国的煤基活性炭技术大致经历了三个发展阶段，包括单种煤生产活性炭、配煤生产活性炭以及催化活化生产活性炭。现在，以煤作为原料的活性炭已经在石化、食品、化工、电力等众多领域中广泛应用，而其出众的对污染物的吸附能力也使它被广泛的应用在城市污水处理、工业废水处理以及对水源的净化中去，尤其是活性炭的脱硫技术更是在近年来得到了极大的发展。除此之外，在原料煤的处理方面，我国正在研究开发煤的深度脱灰技术，这对扩展活性炭的应用领域具有十分重要的意义。煤基活性炭应用前景非常乐观，因此，更要利用我国丰富的煤资源，加大对煤基活性炭应用的开发和研究，为煤基活性炭的使用提供机会，从而使我国的煤基活性炭的发展取得更大的成就。

结束语：

在活性炭生产用原料煤处理方面，我国正在研究开发煤的深度脱灰技术(由于活性炭在食品、医药、化工、军事等领域应用时，对其中无机质的种类和数量均有一定的要求，因为这些矿物质或是使催化剂中毒、或是造成吸附分离产品在外观品质的劣质化。寻求合理的方法脱除灰分，替代木质活性炭在传统领域的应用，具有十分重要的意义。

参考文献：

[1]王飞军，张云红，朱燕云，等．添加剂作用下用粘结性烟煤制活性炭．煤炭转化，2001，24(1)：89―92．

[2]王秀芳。张会平，肖新颜，等．高比表面积活性炭研究进展．功能材料，2005。36(7)：975―977．

篇5

学习成绩不是非常好，但我却在学习的过程中收获了很多。首先是我端正了学习态度。在我考进大学时，脑子里想的是好好放松从重压下解放出来的自己，然而很快我就明白了，大学仍需努力认真的学习。看到周围的同学们拼命的学习，我也打消了初衷，开始大学的学习旅程。其次是极大程度的提高了自己的自学能力。由于大学的授课已不再像高中时填鸭式那样，而是一节课讲述很多知识，只靠课堂上听讲是完全不够的。这就要求在课下练习巩固课堂上所学的知识，须自己钻研并时常去图书馆查一些相关资料。日积月累，自学能力得到了提高。再有就是懂得了运用学习方法同时注重独立思考。要想学好只埋头苦学是不行的，要学会“方法”，做事情的方法。古话说的好，授人以鱼不如授人以渔，我来这里的目的就是要学会“渔”，但说起来容易做起来难，我换了好多种方法，做什么都勤于思考，遇有不懂的地方能勤于请教。在学习时，以“独立思考”作为自己的座右铭，时刻不忘警戒。随着学习的进步，我不止是学到了公共基础学科知识和很多专业知识，我的心智也有了一个质的飞跃，能较快速的掌握一种新的技术知识，我认为这对于将来很重要。在学习知识这段时间里，我更与老师建立了浓厚的师生情谊。老师们的谆谆教导，使我体会了学习的乐趣。我与身边许多同学，也建立了良好的学习关系，互帮互助，克服难关。现在我已经大四，正在做毕业设计，更锻炼了自我的动手和分析问题能力，受益匪浅。

一直在追求人格的升华，注重自己的品行。我崇拜有巨大人格魅力的人，并一直希望自己也能做到。在大学生活中，我坚持着自我反省且努力的完善自己的人格。四年中，我读了一些名著和几本完善人格的书，对自己有所帮助，越来越认识到品行对一个人来说是多么的重要，关系到是否能形成正确的人生观世界观。所以无论在什么情况下，我都以品德至上来要求自己。无论何时何地我都奉行严于律己的信条，并切实的遵行它。平时友爱同学，尊师重道，乐于助人。以前只是觉得帮助别人感到很开心，是一种传统美德。现在我理解道理，乐于助人不仅能铸造高尚的品德，而且自身也会得到很多利益，帮助别人的同时也是在帮助自己。回顾四年，我很高兴能在同学有困难的时候曾经帮助过他们，相对的，在我有困难时我的同学们也无私的伸出了援助之手。对于老师，我一向是十分敬重的，因为他们在我彷徨的时候指导帮助我。如果没有老师的帮助，我可能将不知道何去何从。我现在领悟到，与其说品德是个人的人品操行，不如说是个人对整个社会的责任。一个人活在这个世界上，就得对社会负起一定的责任义务，有了高尚的品德，就能正确认识自己所负的责任，在贡献中实现自身的价值。

社会实践能力有了很大提高。大学四年中，我参加了不少的校内活动和做过一些社会实践。参加校内的活动可以认识到更多的同学，也就增加了与其他同学交流和向其学习的机会，锻炼了自己的交际能力，学到别人的长处，认清自己的短处。此外，还一直做班委和寝室长，对自己既是压力又是动力。我喜欢做一些社会活动，会让大学生活更丰富多彩，做过家教、志愿者、推销员和设计员等，有时会感到累些，但乐此不彼。

体育成绩一向很好。我的体质并非很出色，可是通过我的练习和对体育项目的理解，还是能很好的完成体育课的教授项目。我喜欢运动，基本对所有运动都感兴趣，尤其是足球。在四年之后的今天，我的球技有了质的提高，脚法和意识。我是从高一开始接触足球，起步比较迟，可进步很快，总能在同一水平的伙伴中踢一段时间后脱颖而出。我认为这可能是由于抱定了要踢好的决心，也许还有那么点运动天赋。踢足球不仅锻炼了身体，而且增强了团队精神和集体荣誉感。

个人认为这个世界上并不存在完美的人，每个人都有自己的优点缺点，但关键是能否正视并利用它们。四年来，我不断的自我反省，归纳了一些自己的优缺点。

我的优点是诚实、热情、性格坚毅。我认为诚信是立身之本，所以我一直是以言出必行来要求自己的，答应别人的事一定按时完成，记得有好几次，同学或老师约了我见面，我答应以后必定按时到达指定约会地点，即使有急事也从不失约，给他们留下了深刻的映像。由于待人热情诚恳，所以从小学到大学一直与同学和老师相处得很好，而且也很受周围同学的欢迎，与许多同学建立起深厚的友谊。在学习知识的同时，我更懂得了，考虑问题应周到，这在我的毕业论文设计中充分展示了出来。我这个人有个特点，就是不喜欢虎头蛇尾，做事从来都是有始有终，就算再难的事也全力以赴，追求最好的结果，正因为如此，我把自己的意志视为主要因素，相信只要有恒心铁棒就能磨成针。一个人最大的敌人不是别的什么人，而是他本身。这么多年来，我一直都是在跟自己作战，准确地说，是和自己的意志战斗。现在回想起来，我确实比以前坚毅了许多，但我不会松懈下来的。以上这些优点，是我今后立身处世的根本，我应该继续保持，并不断以此鞭策自己奋发向上。超级秘书网

我个人认为自己最大的缺点就是喜欢一心两用甚至多用。急功近利，喜欢一口气学许多东西，但是贪多嚼不烂，即使最后都能学会，也已经搞得自己很疲劳。如今想想，这样其实并不好，正所谓贵在精而不在广。如果我一段时期内专注于一种学问，不求博但求精，相信一定能更深刻的理解并掌握这门知识。自从我发现自己有这个缺点和问题后，我常常警戒自己，步入社会后也不能一心两用。

篇6

中图分类号：G623.5 文献标识码：A 文章编号：1671-0568（2014）24-0098-02

一、背景导读

《确定位置》是义务教育课标本北师大版小学数学四年级上册第六单元的第1课时，属于空间与图形领域的内容，是在学生已经掌握并会运用前、后、左、右、上、下、第几、东、南、西、北等一维空间的方位词语描述物体所在位置的基础上，进一步学维空间的确定，描述物体所在的位置。

在本节课中，笔者根据教学目标调整了教学内容，紧密结合学生熟悉的生活环境——教室来开展教学活动，这样学生更感兴趣，学习更加投入。在实际情境中，学生用数对的方法表示位置过渡到在方格图中用数对表示，是本节课的一个教学难点。在这个环节上充分发挥多媒体的优势，将一个具体的情境（淘气班的座位图）抽象为方格图，让学生更能直观理解和接受。最后选取生活中几个运用数对知识的例子，进一步开阔学生视野、拓展学生思维，让他们体会到数学与生活的密切联系，感受数学知识在生活中的应用。

二、片断与反思

[片断一]创设情境，导入新课

师：很高兴和大家一道学习数学！老师希望通过今天的学习和大家成为好朋友，你们愿意和我交朋友吗？在班里，你有好朋友吗？（学生踊跃举手）请把他的名字告诉我，我来猜他的位置。

生：我的好朋友是XXX。（师随意指认几位同学，都不对）

师：哎呀！老师猜了几次都没有猜对，你能提示一下吗？

生：他在第3组。

师：你说的第3组是从老师的左边还是右边数起呢？

生：我是从我的左边、老师的右边数起的。

师：如果把从同学们左边起的第一列定为第一组，第二列定为第二组，其他依次为第三、第四、第五……第八组，那你再说说他在第几组，好吗？

生：他在第5组。

师：（根据学生目光有意错指）是他吗？（生摇了摇头）他吗？（生还是摇头）

师：（故作懊恼地）老师还是猜不到，你能再给一点提示吗？

生：他在第5组的第4个。

师（故意走到竖条的队尾）：是这一位同学吗？

生：不是。

师：他不正是第5组第4个吗？

生：是从前往后数第4个。

师：那就一定是他了！（全班同学点了点头）

师：看来，要想确定一个人的位置，不仅需要知道他在第几组，还需要知道他在第几个。今天，我们就一起来研究如何确定位置。（板书课题）

[反思]

教师巧妙地利用“希望通过今天的学习我们能成为好朋友！”“你们愿意和我交朋友吗？”“在班里，你的好朋友是谁？”“告诉他的名字，我来猜他的位置！”这些贴近学生实际、亲切自然的话语以及猜朋友的活动，拉近了师生的情感距离，激发了学生兴趣。看似随意地交流，实则为师生开展学习搭建了一个平台，是推进教学顺利进行的基础，不经意间向学生渗透着坐标系的思想：确定位置首先要确定观察的顺序或方向。

[片断二]合作交流，探究新方法

师：有谁愿意向大家介绍你的好朋友？

生：我的好朋友是王馨悦，她在第3组的第5个。

师：好！请这位同学站起来，好吗？（师走过去，摸着他的头）认识你很高兴，老师希望也能和你成为朋友！同学们，你们能用自己的方法在白纸上表示出她在教室的位置吗？（学生自主尝试，师巡视后，组织学生交流）

师：谁愿意把你的方法展示给同学们看看？

生：我是用文字表示的：王馨悦位于教室的第3组第5个。

师：还有没有不同的方法？

生：老师，我是用图来表示的（如图1），我用一个“X”代表一个人，我们班有8组同学，就画了8条“X”，按照我们刚才确定的顺序，王馨悦在第3组第5个的位置，将第3组第5个“X”换成“”，“”代表的人就是王馨悦。

师：这位同学的方法特别直观，而且特别说明他是按我们刚才的顺序确定王馨悦的位置，这样一眼就能看清楚王馨悦坐在哪里了。你们还有其它方法吗？

生：老师，我是用画格子的方法表示的（如图2）。我用竖行的格子表示组数，用横行的格子代表在第几排。王馨悦在第3组第5个，就在第3列第5行方格内打了一个点，表示她就坐在这里。

师：刚才很多同学都介绍了自己的方法，你更喜欢哪种？说说你的理由。

生：我喜欢图表的方法，因为用图表表示非常直观。

生：我喜欢文字表示的方法，因为用文字简单、快捷。

生：我也喜欢图表的方法，不过我喜欢的理由和X X X同学不同，我觉得用图表表示不仅能知道某个同学坐在哪儿，还能知道教室里有多少同学，其他同学又是怎样分布的……

师：同学们都说得非常好。上面几种方法都有自己的优点，但是大家能不能用我们数学的方式来表示位置呢？

生：可以用数来表示。

师：好，把你的想法写在黑板上吧！

（生写出了3.5，其他学生受到了启发，纷纷写出：3/5 5、3等表示方法）

师：正如同学们写的那样，在数学中，我们可以用一对数表示某个点在平面上的位置。一般把表示第几组的数写在前面，把表示第几个的数写在后面，中间用逗号隔开，用括号将这两个数括起来，这种表示方法就是我们数学中的“数对”。如王馨悦在教室的第3组第5个，用数对表示就是（3，5）。（师板书）

师：跟其他方法相比，用数对的方法表示位置有什么特点呢？

生：用数对的方法表示位置，很有数学味！

生：它很简捷明了。

……

[反思]

世界上没有两片树叶是完全一样的，由于生活经验和认知水平的差异，学生解决问题的思维方式也不尽相同，方法也就各种各样。在这个环节，让学生用自己的方法表示班上某个同学在教室的位置，有的用文字、有的用图形、有的用符号、有的用数对……通过交流讨论，认为采用数对的方法表示某个同学在教室的位置更简捷，更有数学味。这一过程是让学生经历解决问题多样化到策略化的过程，也是让学生经历从生活问题到建立数学模型的学习过程。

[片断三]巩固提高，应用新知识

（CAI课件呈现情境）

师：同学们真棒！很快找到了自己的新座位。老师这里有一幅淘气班上的座位图，你能从图中找到淘气并用数对表示他的位置吗？

生：淘气的位置是（6，4）。（师板书）

师：你是从哪边数起的呢？

生：从左往右数。

师：对，我们通常是按照观察者的角度从左往右数。笑笑呢？

生：是（2，1）。（师板书）

师：我们把从左往右每一组用一条竖线表示，把从前往后数的每排用横线表示，那么竖线和横线相交的点就是每个同学在教室的位置。得到这样一幅方格图（CAI课件闪烁，将班级座位图抽象成方格图），你能用数对的方法表示淘气的位置吗？（请学生在电脑上找一找）

师：你是怎样找的呢？

生：我先找从左往右的第6条线，再在这条线上从下往上数到第4条线，这两条线的交点就是淘气的位置。

师：笑笑呢？

生：我先找从下往上数的第1条横线，再找从左往右数的第2条竖线，这两条线的交点就是笑笑的位置。（生边说师边演示）

[反思]

从生活实际到数学世界，由座位图变成方格图，将教室里的一个个人变成平面上的一个个点，学生要经历从具体到抽象的过程。为了更好地突破这个转变，运用多媒体课件演示，让学生动手操作，亲身感受点在坐标系的意义和表示方法，学生在操作中掌握了运用二维空间来描述物体所在位置的方法。

[片断四]拓展延伸，开阔新视野

师：数对的知识在生产、生活和科学技术中有着广泛的应用，老师这里收集了几个例子，我们一起来看看！

生：好。（课件演示）

1.在武汉市市政地图中找黄鹤楼的位置。（出示黄鹤楼的图片）

师：这是一张武汉市城区地图，你能根据黄鹤楼图片上的数对（，）很快找到黄鹤楼的位置吗？（分析数对中字母和数字的意义，再引导学生找到黄鹤楼的位置）

2.在中国地图中确定北京的位置。（出示中国地图）

师：同学们注意看，在地图上有许多竖线和横线。我们把连接两极点的竖线叫做经线，垂直于经线的横线圈叫做纬线，根据经纬线可以准确确定地球上任何一点的位置。如北京在北纬40°，东经116°，根据这两条线准确地确定北京的位置。（电脑演示北京位置的确定）

3.神舟六号回收。

师：同学们，我国发射的神舟六号载人飞船已经成功返回，你们知道它返回时降落在哪里吗？

生：降落在内蒙古的四王子旗草原上。

师：对。我们知道草原那么辽阔，飞船返回是在凌晨，天还很黑。可是地面搜寻人员是怎样在较短的时间内迅速而又准确地找到它呢？（学生也感到纳闷）

生：运用全球定位仪可以很快找到。

师：对，我们很多同学可能听说过全球定位系统，它就是运用卫星等探测手段探测到物体的位置后，用数对的方法来表示。这样就能准确地找到目标。其实，用数对表示位置的例子在日常生活中还有许多应用，我们将在今后进一步学习。今天这节课就学到这里。谢谢同学们，再见！

[反思]

篇7

【关键词】新生儿窒息　脐血　血清心肌酶　缺氧

新生儿窒息是临床产科常见的疾病之一，窒息缺氧引起新生儿脑、心、肺、肾、胃肠等多器官内脏损害，因此，新生儿窒息及其并发症成为新生儿死亡的主要原因之一[1]。新生儿窒息是新生儿娩出后1min内，由于无自主呼吸或无法建立自主规律呼吸，发生的低氧血症、混合性酸中毒，有2/3的新生儿窒息是胎儿宫内窘迫的延续。本文旨在探析新生儿窒息早期脐血中血清心肌酶的变化与缺氧的关系，现报道如下。

1　资料与方法

1.1 一般资料 ①观察组：2008年2月-2009年6月共66例新生儿窒息患儿，其中男38例、女28例；胎龄36-42周，平均38.5周；诊断均符合第6版《儿科学》[2]的诊断标准，经临床诊断、CT检查排除颅内出血。②对照组：抽取2008年2月-2009年6月共66例健康新生儿，无窒息史、无神经系统症状，其中男37例、女29例；胎龄36-42周，平均38.8周。对比两组新生儿的胎龄、性别比例、分娩方式、体重等一般情况，差异无显著性（P>0.05），具有可比性。

1.2 仪器与试剂 全自动生化分析仪（日本OLYMPUS 2700），心肌酶谱检测试剂（日本OLYMPUS公司生产）。

1.3 方法

1.3.1 新生儿窒息判断 所有患儿娩出后迅速进行1min Apgar评分，以Apgar评分≤7分者为新生儿窒息。

1.3.2 脐血采集 胎儿娩出后用备好的肝素化注射器抽取脐静脉血4ml，静置1小时后离心，分离血清置-20℃冰箱中保存。

1.3.3 脐血血清心肌酶测定 用全自动生化分析仪，严格按照试剂盒说明书进行操作，采用速率法检测心肌酶谱的活性检测。心肌酶谱检测项目包括乳酸脱氢酶（LDH）、天冬氨酸转氨酶（AST）、肌酸激酶（CK）和肌酸激酶心肌同工酶（CKMB）。

1.4 统计学方法 用SPSS12.0软件进行分析，采用t检验，以P

2　结果

观察组患儿的心肌酶谱（LDH、AST、CK、CKMB）活性测定结果显著高于对照组，差异有显著性（P

表1 两组新生儿脐血血清心肌酶活性检定结果（x±s，U/L）

*与对照组相比，差异有显著性（P

3　讨论

新生儿窒息是围产新生儿最为常见的症状，本质是缺氧引起的低氧血症，缺氧导致炎性介质大量释放，可引起新生儿全身性多脏器损伤，心肌受损可能导致心衰，严重者死亡。据国内调查报道显示，新生儿窒息大多数为胎儿宫内窘迫的延续，其发病本质是缺氧[3]。正常情况下，新生儿心肌细胞主要以有氧代谢为主，对缺氧非常敏感。凡是能造成胎儿缺氧或新生儿缺氧的因素，均可引起新生儿窒息，缺氧状态导致心肌无氧酵解过程中所产生的酸性代谢物质大量堆积，进而细胞内酸中毒，致使心肌细胞ATP大量减少，造成心肌损害。

心肌细胞能量代谢发生障碍，消耗大量ATP，心肌细胞通透性发生改变，使心肌酶大量释放到血液中，通过检测血清AST、LDH、CK、CKMB五项心肌酶活性指标可检测缺氧缺血性心肌受损。在五项指标中，天门冬氨酸氨基转移酶（AST）在心肌细胞中含量较多[4]。AST及LDH-L广泛分布于体内，特异性不强，以肾和骨骼肌含量较多；90%以上CK主要存在骨骼肌中，其次是心肌细胞、脑组织；CKMB主要分布于心肌细胞的胞浆内，在心肌以外组织中含量较低，属于心肌特异性同工酶。CKMB在血清中含量较少，故一般认为血清CKMB大于总活性的6%以上可作为心肌受损的特异性指标。

新生儿心肌细胞修复能力和再生能力强，故早期心肌受损可通过及时有效治疗，有效逆转病情，阻止其恶化，对于提高患儿的生存质量具有关键作用。本调查结果显示，新生儿窒息患儿脐血中的心肌酶谱测定水平明显高于健康新生儿，尤其是CKMB含量的升高最为明显，故新生儿血液中心肌酶谱及其同工酶的活性测定能够作为诊断心肌损害的重要指标，用于早期诊断新生儿窒息心肌损害，及时采取有效治疗方案以降低并发症发生率及死亡率。

参 考 文 献

[1]傅川林.新生儿窒息多器官系统损害的研究进展[J].临床儿科杂志，2002，20（8）：506.

[2]杨锡强.儿科学[M].人民卫生出版社，2005:118-119.

篇8

内生菌（endophyte）广泛存在于植物各器官、组织的细胞内及细胞间隙，具有丰富的宿主植物种类多样性、在宿主植物组织中分布多样性以及功能多样性的特点，国内外相关研究报道很多，但未见道地药材基原凤丹的内生菌研究报道。鉴于植物内生菌种类很大程度上受制于植物本身的生理特点和周边的环境，而中药材又历来重视道地性，本研究对凤丹根部内生菌进行分离、鉴定和抑菌实验研究，在为生产实践服务的同时也为道地药材凤丹的研究积累科学资料

1材料与方法

1.1供试样品

2012年7―10月，在凤丹的果期和地上部分渐枯期，选择安徽铜陵顺安正常生长的三年生植株，参考平行线取样法，开挖30～40 cm的土壤剖面，去除表层土后收集根样：采集的根样用锡箔纸包裹好带回实验室置放4℃冰箱备用。

按常规方法准备牛肉膏蛋白胨固体培养基（NA）、马铃薯葡萄糖固体培养基（PDA）；液体发酵培养基为上述培养基不加琼脂

1.2内生菌分离与纯化

取凤丹根样洗净，晾干并进行表面消毒.取200 μL最后一次冲洗液涂布至相应平板中，检测表面消毒效果

在无菌状态下将处理完毕后的凤丹根样品切成0.2 cm×0.2 cm长段（片）置于PDA培养基、28℃下静置培养5～10d，挑取植物组织周围的菌落转接入PDA斜面中并纯化；同时，将上述根样置于NA培养基、37℃下静置培养48 h，培养基中可见菌落形成时挑取植物组织周围的菌落转接入牛肉膏培养基斜面中并纯化。

1.4抑菌试验

供试菌株金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草杆菌、毛霉、黑线炭疽菌、青霉、西瓜枯萎病原菌、链格孢霉菌，由安徽师范大学生命科学学院微生物研究室提供。

2结果与分析

2.1凤丹内生菌的种类构成

2.1.1内生真菌 结合形态学鉴定结果（表1），将内生真菌ITS序列在NCBI网站上用BLAST软件进行序列比对并利用MEGA 5.05采用Neighbor-Join-ing法构建凤丹内生真菌系统发育树（图1）。

2.1.2内生细菌 结合生理生化鉴定结果（表2），将内生细菌16SrDNA序列在NCBI网站上用BLAST软件进行序列比对并利用MEGA 5.05采用Neigh-bor-Joining法构建凤丹内生细菌系统发育树（图2）。

2.1.3不同生长时期内生菌分布及其多样性 实验共分离得到内生菌129株：内生真菌58株，其中果期的内生真菌35株、分离率为27.1%，地上部分渐枯期的内生真菌23株、分离率为17.8%：内生细菌71株，其中果期的内生细菌42株、分离率为32.6%，地上部分渐枯期的内生细菌29株、分离率为22.5%。果期与地上邵分渐枯期根样中内生菌种类和数量基本一致（表3）。

结合形态特征、ITS序列分析和系统发育分析，所得58株凤丹内生真菌隶属4属、6种：革菌属Thanatephorus 1种、青霉属Penicillum 1种、镰刀菌属Fusarium 3种、赤霉属Gibberella 1种，优势属镰刀菌属Fusarium，共有45株，占到77.6%，而镰刀菌属中的F.oxvsporum与F.purpurogenum为凤丹的优势真菌，分别占分离内生真菌总菌株的44.9%，24.1%。

结合内生细菌生理生化鉴定结果、16S rDNA序列分析和系统发育分析，所得内生细菌71株隶属3属9种，其中芽孢杆菌属Bacillus 6种、土壤杆菌属Agrobacterium 1种、假单胞杆菌Pseudomonas属2种。58株9种内生细菌以芽孢杆菌属Bacillus为优势属，占到81.8%，芽孢杆菌属中B.megaterium为凤丹根部优势细菌，其次B.cereus，它们分别占分离内生细菌总菌株的32.4%，14.1%。

2.2内生菌对病原菌的抑制作用

2.2.1病原细菌 菌活性大小根据抑菌圈直径划分为强（>15 mm）、中（10～15 mm）、弱（5～10mm）。在凤丹内生菌中，对金色葡萄球菌有较强抑制作用的内生细菌有P.chlororaphis，内生真菌有F.oxysporum’F.nematophilum’Gibberella intermedia’抑菌圈直径分别达到25.0，19.0，18.1，10.3 mm。内生细菌B.megaterium对枯草杆菌的抑菌圈直径达到24.0 mm。内生真菌F.nematophilum不仅对金色葡萄球菌具有较强抑制作用，对.大肠杆菌的抑菌圈直径也达到了20.2 mm（表4）。

2.2.2病原真菌 凤丹内生菌中，有8株内生菌对病原真菌有不同程度的抑制作用

其中对黑线炭疽菌抑制效果好的有内生真菌Thanatephorus cucumer-is，F.nematophilum，抑菌率分别达到82.6%，83.3%：G.intermedia对其也有一定抑制效果（抑制率为31.0%）：所分离内生细菌并不抑制黑线炭疽菌的生长。对西瓜枯萎病原菌有抑制效果有内生细菌P.chlororaphis、内生真菌T.cucumeris，G.inter-media，抑菌率分别为80.0%，61.7%，53.2%。内生细菌P.chlororaphis、内生真菌T.cucumeris，F.nematophilum对毛霉也具有一定的抑制效果，抑菌率分别为84.9%，39.6%，78.6%。内生真菌F.nematophilum对青霉的抑菌率最高，达到90.6%。内生真菌P.purpurogenum，F.nematophilum对链格孢霉的抑菌率分别为74.3%.65.7%（表5）。

3讨论

季节株龄甚至宿主（植物）生长的环境等因素可以影响到植物内生菌分离的数量和种类。从凤丹果期、地上部分渐枯期中分离出来的内生菌种类与数量相对稳定。凤丹果期内生真菌和细菌的数量都相对高于地上部分渐枯期，而且除内生真菌赤霉菌只在果期分离出外，从这2个时期分离得到的内生菌种类基本相同。这可能是由于凤丹的果期环境温度更适合内生菌繁殖有关。

篇9

【关键词】 生活饮用水； 氯化消毒副产物； 测定； 产生条件

中图分类号 R123 文献标识码 B 文章编号 1674-6805（2015）22-0160-01

doi：10.14033/ki.cfmr.2015.22.091

氯化消毒一直以来都是对饮用水进行消毒的主要对策，这种技术的应用在一定程度上有效预防了消化道传染病的传播和流行，使数以万计的人免于伤寒、菌痢、甲肝等消化道传染病的威胁，是社会饮水卫生事业迈入新的里程碑的关键举措。但是，随着社会科技的不断进步以及检测手段的丰富，荷兰科学家发现这种消毒方式之中存在着大量的副产物，且这些物质能够在人体内潜伏很长时间，产生远期危害。这一观点一经证实，也引起了人们对生活饮用水消毒方法的进一步思考。为了减少其对人体的危害，找到真正提升饮用水卫生质量的有效对策，文章就这些副产物产生的条件简单概述，并找到了测定的最佳方法。

1 氯化消毒副产物概况

氯化消毒副产物简称DBPs，是饮用水氯化消毒过程中水中的有机物与消毒剂相互反应产生的卤代化合物。主要由三卤甲烷（THMS）类、卤乙酸（HAAS）、氯化酚、卤代酮等物质组成，大量流行病学调查表明，长期饮用氯化消毒的饮用水，死于消化和泌尿系统的癌症的危险性增加，并和其他癌症的死亡率存在着统计学的关系。说明这些危害物，能够给人们的身体带来危害，具有潜在致癌性，长期饮用会引起远期病变。在对这种副产物质进行测定的时候，一般采用气相色谱法和反相高效液相色谱法进行研究[1]。

2 生活饮用水中氯化消毒副产物测定方法以及产生条件

众所周知，采用氯化消毒方法对生活饮用水进行检测，会产生大量不同的副产物质。由于这些副产物的特性、构造、组成等的差异，就使得它们的产生条件不尽相同，在对其进行测定的时候也要选用不同的方法。下面就来简单谈谈氯化消毒产生的不同副产物测定的具体对策和产生条件，从而提高饮用水卫生质量[2]。

2.1 卤乙酸

卤乙酸是饮用水氯化消毒副产物中对人体健康危害较大的一种，是确认致癌物。在有些地区饮水质量检测中，得出其致癌系数高达90%以上，是所有副产物中致癌指数最高的一种。目前对饮水质量进行检测的方法，普遍都能够运用于该产物的测定，如气质联用、气相色谱、毛细管电泳、离子色谱等手段都符合检测条件。但是，由于不同地区水质的差异，在对其进行具体方法运用的过程中要适当的进行选择。卤乙酸的生成是伴随着检测温度升高、氯化剂用量增大、pH值降低以及腐殖酸浓度增加而出现的，在采用氯化消毒手段进行消毒的过程中，适当加入腐殖酸，是减少该物质生成的有效对策[3]。

2.2 氯化酚

氯化消毒过程中的工业污染和天然有机物是生产氯化酚的主要条件。该物质在饮用水中的含量很小，但对人类的身体健康却存在着巨大的威胁。有关该种副产物的检测报道不胜枚举，检测手法也多种多样，不过在具体应用之前都要做好样品的富集工作，而反相高效液相色谱法是使用最为广泛也最有效的方法。它能够对水样中的氯酚的富集和浓缩量进行分析，并使两者达到科学分离的目的，适用于大规模检测，能够满足人们对饮用水的卫生要求。

2.3 腐殖酸

腐殖酸是卤乙酸生成的重要前提物质，自从DBPs从消毒引用水中检测出来以后，世界各国逐渐发现了将近500多种不同类型的该项副产物。据调查发现，饮用水中的DBPs物质多与腐殖酸、藻类及其代谢产物、蛋白质和污染物的产生有关。在对其进行测定的过程中可以适当的改变环境温度、腐殖酸浓度、消毒剂投入数值、溶液PH数值以及反应时间等来进行测定，从而准确得出具体的副产物，以供接下来的试验[4]。

总而言之，由于社会经济、科技的迅猛发展，传统的氯化消毒方法中存在的弊端被逐渐检测了出来，其中三卤甲烷、卤乙酸、氯化酚、卤代酮等副产物对人体的危害也越来越明确。为了保证我们国家的饮水卫生质量，促进人们身体健康，国家相关部门一定要做好氯化消毒副产物的测定工作，选择最恰当的方法予以检测，明确各种有害物质产生的条件，并找到切实可行的对策予有效去除氯消毒后水中形成的卤代有机物，从而确保人民群众的用水安全，为我国饮用水事业的全面进步奠定坚实的基础。

参考文献

[1]张霞，杨路平.离子色谱法测定饮用水中氯化消毒副产物的方法研究[J].中国消毒学杂志，2010，27（1）：5-9.

[2]胡江涛.生活饮用水中氯化消毒副产物测定及产生条件研究[D].成都：四川大学，2005.

[3]陈鑫.黄浦江为水源的水厂不同工艺点和管网水中THMs、HAAs消毒副产物生成模型和转归模型的建立[D].上海：复旦大学，2010.

篇10

【关键词】 CD3分子； 单链抗体

【Abstract】 The genes encoding antibody heavy and light chain variable regions (VH and VL) were cloned by RTPCR from OKT3 hybridoma cells， which produced antiCD3 moleclonal antibody. The VH and VL genes were fused and become a single chain Fv (scFv). The scFv gene was cloned into pCANTAB5E vector and expressed on bacterial phage surface. By three panning rounds， we have obtained two singlechain antibodys that specific for CD3. The antiCD3 scFv will be a reagent for diagnosis and therapy of immunodisorder

1

实验资料

杂交瘤细胞OKT3来自ATCC.质粒 pCANTAB5E，大肠杆菌TG1和HB2151，内切酶SfiI和NotI， 可变区引物均购自Pharmacia公司.Taq DNA聚合酶，mRNA磁性分离试剂盒购自Promega公司.以分泌抗CD3单克隆抗体的鼠杂交瘤细胞OKT3为原始材料，采用Promega公司试剂盒，从大约107细胞中分离和纯化mRNA，合成cDNA第一链.通过RTPCR分别扩增出重链可变区（VH）和轻链可变区（VL）基因. 为了加强抗体轻、重链可变区（Fv）的稳定性和更好地维持抗体分子内结合抗原区的空间构象，在VH和VL基因之间用一段编码(Gly4Ser)3的DNA序列把二者连接起来， 构成抗体可变区单链融合基因.为了把单链抗体基因插入pCANTAB5E 质粒，我们以单链抗体基因为模板，引入一对含SfiI和 NotI 酶切位点的引物， 再次 PCR 扩增.扩增产物Mr约720，基因大小与预测的单链抗体基因相符合（图1）.把单链抗体基因插入到表达载体pCANTAB5E所含的噬菌体外壳蛋白g3p基因中. 转化大肠杆菌TG1感受态细胞后，在辅助噬菌体M13K07的作用下，单链抗体和外壳蛋白g3p以融合蛋白的形式表达于噬菌体的表面，形成一个抗CD3单链抗体文库.以外周血单核细胞为抗原，用ELISA方法鉴定噬菌体抗体的免疫活性.首先用细胞分离液分离外周血T细胞，然后包被在经多聚赖氨酸处理过的96孔酶联板上.分别与重组噬菌体抗体温育1 h，用PBS淋洗3次后，加入HRP标记的抗M13噬菌体抗体温育1 h， 再用PBS淋洗3次，加入底物进行颜色反应.用酶标仪在490nm处检测每孔的吸收值.挑选阳性克隆，感染大肠杆菌，获得培养上清，再进行免疫活性鉴定.经过三轮亲合－感染－扩增的免疫筛选过程，使CD3重组噬菌体抗体得到富极. 随机挑选12个重组噬菌体抗体克隆进行ELISA检测.从中选出免疫活性最强的两株阳性克隆.把这两株阳性克隆的基因转入大肠杆菌HB2151，经IPTG 诱导培养后，可在上清中收集可容性单链抗体.ELISA进一步证明该抗体能够特异识别外周血单核细胞和淋巴母细胞性白血病细胞，而不结合黑色素瘤细胞和人宫颈癌细胞(图2).说明单链抗体保留了原单克隆抗体的抗原特异性.

1:1 kb标准分子量；2:抗体VL基因PCR扩增产物；3：重组质粒经XbaI和BamHI双酶切，鉴定VL基因；4：抗体VH基因PCR扩增产物；5：重组质粒经XhoⅠ和HindⅡ双酶切，鉴定VH基因.

图1

琼脂糖凝胶分析PCR产物和重组载体酶切产物鉴定（略）

可溶性单链抗体结合外周血单核细胞（PBC）和淋巴母细胞性白血病细胞（MOLT4），但不结合黑色素瘤细胞（A375）和人宫颈癌细胞（Hela）.

图2

ELISA检测单链抗体免疫活性（略） 转贴于 　2

讨论

单链抗体被认为是具有抗原结合能力的最小功能单位［1］.它在某些应用方面比完整抗体具有更多的优越性，如免疫原性较小，组织渗透性好， 在组织和血液中的清除率快，容易与其他功能分子重组，形成多功能抗体［2-4］.另外，单链抗体能够在原核系统中高效表达，有利于大批量生产.CD3分子是T淋巴细胞膜上特有的重要信号分子之一 ［5，6］.抗CD3单链抗体与其他功能分子结合所形成的双功能抗体在免疫调节和肿瘤治疗方面以显示出良好的应用前景［7，8］.我们构建了抗CD3单链抗体基因，利用噬菌体展示技术表达单链抗体，通过免疫筛选，获得CD3特异基因工程抗体.该抗体为双功能抗体和重组免疫毒素的研制打下了基础.

【参考文献】

［1］ Kuroki M， Arakawa F， Khare PD， Kuroki M， Liao S， Matsumoto H， Abe H， Imakiire T.Specific targeting strategies of cancer gene therapy using a singlechain variable fragment (scFv) with a high affinity for CEA［J］. Anticancer Res， 2000;20(6A):4067-4071.

［2］ Takemura S， Asano R， Tsumoto K， Ebara S， Sakurai N， Katayose Y， Kodama H， Yoshida H， Suzuki M， Imai K， Matsuno S， Kudo T， Kumagai I. Construction of a diabody (small recombinant bispecific antibody) using a refolding system［J］. Protein Eng， 2000 ;13(8):583-588.

［3］ Weetall M， Digan ME， Hugo R， Mathew S， Hopf C， TartRisher N， Zhang J， Shi V， Fu F， HammondMcKibben D， West S， Brack R， Brinkmann V， Bergman R， Neville D Jr， Lake P.Tcell depletion and graft survival induced by antihuman CD3 immunotoxins in human CD3 epsilon transgenic mice［J］.Transplantation， 2002;73(10):1658-1666.

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［5］ Hombach A， Wieczarkowiecz A， Marquardt T， Heuser C， Usai L， Pohl C， Seliger B， Abken H. Tumorspecific T cell activation by recombinant immunoreceptors: CD3 zeta signaling and CD28 costimulation are simultaneously required for efficient IL2 secretion and can be integrated into one combined CD28/CD3 zeta signaling receptor molecule［J］.J Immunol， 2001;167(11):6123-6131.

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