免疫学在医学中的应用范文

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免疫学在医学中的应用

篇1

湖北民族学院医学院,湖北建始 445000

[摘要] 目的 探讨研究PBL教学模式在医学免疫学教学中的应用效果。方法 将我院临床医学两个教学班分班教学,一班采取传统教学模式,二班进行PBL教学模式,两班授课内容和课时无差异,观察两班教学结果的差异,并进行问卷调查。结果 两班之间考试成绩分布差异很大,PBL教学组成绩明显优于传统教学组,两组间具有显著统计学差异。PBL教学模式在医学免疫学教学中的应用满意度为80.6%,54.9%认为完全应该推广PBL教学模式,25.7%认为应该推广,PBL教学模式比传统教学模式有明显的优势。结论 PBL教学模式比传统教学模式更容易接受,能够提升学生自主学习等能力,值得推广应用。

[

关键词 ] PBL教学模式;传统模式;医学免疫学

[中图分类号] R725 [文献标识码] A [文章编号] 1672-5654(2014)08(a)-0046-02

PBL教学法(Problem-Based Learning),是一种以学生为主体的典型教学方法,1969年由美国神经病学教授Howard Barrows在加拿大麦克马斯特大学创立,是近年来教育工作者一直关注和研究的热点问题[1]。其核心是如何培养学生自主学习的能力,强调把学习置于复杂的有意义的问题情境中,学习隐含于问题背后的科学知识,提高学生自主分析和解决问题的能力。随着医学技术领域的进步和免疫学技术的迅猛发展,医学免疫学是医学本科教学环节中不可缺少的一门课程,是研究机体免疫系统结构和功能的科学,主要涉及免疫学理论、方法和技术在疾病预防、诊断和治疗中的应用,探讨免疫功能异常所致的病理过程及其机制,基础理论比较抽象,难以理解,课堂乏味[2]。因此提高的教学效果,激发学生热情,调动学生学习激情在医学免疫学授课中尤为重要。本文以“素质教育、能力教育”为切入点,将PBL教学模式应用于临床医学本科专业的医学免疫学理论教学实践中,以期调动学生的学习积极性,提高学习效率,提高医学免疫学的教学质量,为理论教学改革提供新的尝试。

1 对象与方法

1.1 研究对象

以我校2012级临床医学专业的两个班为研究对象,其中,一班114人,男性58人,女性56人,为传统教学组;二班113人,男性54人,女性59人,为PBL教学组。两组间学生性别、年龄等无显著性差异,具有可比性。

1.2 研究方法

一班传统教学组采取传统的“教师讲,学生听”的传统授课模式,大课班大课时教学,以多媒体辅助教学解决重点和难点的内容,共用42学时讲授基础免疫学和临床免疫学[3]。二班教学组进行PBL教学模式,为了保证教学的一贯性,两组学时和教学内容不变,授课前由主讲老师编写适用于PBL教学的教学大纲,教研室老师讨论收集和整理临床病例,每个病例都涵盖医学免疫学内容,有不同的临床症状和检验结果,根据结果编写相应的引导性问题,供学生参考和准备讨论提纲。在讲授完内容后,将所有学生按学号分为三组,为每组提供4例涵盖临床免疫学、基础免疫学和免疫学应用的病例,进行6学时的讨论课,并整理讨论结果,包括病人现病史决定讨论的问题及答案;病人实验室检查情况决定讨论的问题及答案和根据病人实际情况设计一些有关人文社会行为医学伦理等的开放性问题,在教师的引导下整合知识,三个组将各自整理好的教案派组长进行讲解。两组在课时结束后,进行理论课考核,比较两组学生成绩,同时对PBL教学班进行教学模式、学生能力、教学效果、学生兴趣等方面的问卷调查[4]。

1.3 统计学方法

所有数据采用SPSS 13.0 统计学软件进行对比分析处理, 计量数据用均数±标准差(x±s)表示,计数数据采用检验, P<0.05为具有统计学意义。

2 结果

2.1 考试成绩

两个班组全体学生均参加考试,考试内容一样,考试结果如表1,可以看出两组间成绩分布差异很大,PBL教学组成绩明显优于传统教学组,两组间具有显著统计学差异。

2.2 问卷调查结果

对二班PBL教学班113名学生进行无记名问卷调查,问卷全部收回,有效率100%,对PBL教学模式在医学免疫学教学中的应用效果、学生自学能力、自我解决问题能力等进行评价。

从图1可以看出,PBL教学模式在医学免疫学教学中的应用结果还比较满意,满意度为80.6%,有62名学生认为完全应该推广PBL教学模式,有29名学生认为应该推广,PBL教学模式比传统教学模式有明显的优势,15名认为无所谓,与传统教学模式差不多,7人认为不应该推广PBL模式,传统教学模式更容易接受,上课轻松无压力。

PBL教学模式在医学免疫学教学中队学生的影响结果表明,与传统教学模式相比,PBL教学模式能够提升学生的自主学习能力、分析和解决问题的能力、提高课堂注意力和人际交往沟通能力。调查问卷结果表明,68.1%的学生非常认同PBL教学模式能够提升自主学习能力,仅1.8%的学生不赞同此说法;56.6%的学生赞同PBL教学模式可促进师生和组员之间的沟通能力,6.2%的学生认为与传统模式无区别;73.4%的学生认为PBL教学模式提升了他们自主分析和解决问题的能力,8.8%的学生持无所谓的态度;69.0%的学生认为PBL教学模式增加了他们的学习积极性和主动性,6.2%的学生感觉并未提升自己的主动性和积极性;53.9%的学生认为能够提高他们的语言表达能力。问卷调查结果说明,PBL教学模式在医学免疫学的教学中具有明显优势,可进一步优化推广应用。

3 讨论

传统教学模式上课的主体是教师,围绕教案,以授课为中心,是在教师精心备课的基础上进行灌输授课,学生以被动的形式接受知识,课堂乏味、沉闷,学生依赖教师,不能充分发挥自主能动性,导致教学效果并不理想。我国目前的教学的现状是教师具备丰富的专业知识,对授课内容具有全面系统的掌握,能够自主控制教学过程,能够在有限的课堂时间将专业知识全面的传授给学生,使得大家接受教学资源的机会平等,以考试成绩作为唯一的考核标准,评价教师教学能力和学生学习能力。这种教学模式的缺点是,忽视了学生的主观能动性,不能充分调动学生自主学习的积极性,难以调动学生的兴趣和好奇心,不利于培养学生的自主学习能力和创新精神,教学与实践脱节,理论知识与临床疾病脱离,教师更加注重知识点的讲解,使得学生的应试能力较强,但对知识的应用能力较差[5]。

PBL教学模式在医学领域的应用主要通过教学理论与病例相结合的模式,针对学生的自主学习能力的提升,调动学生的学习积极性,引导学生自主分析和解决问题,提高学习效率,提高医学免疫学的教学质量。本文研究结果表明,传统教学班和PBL教学班之间考试成绩分布差异很大,PBL教学组成绩明显优于传统教学组,两组间具有显著统计学差异。问卷调查结果显示,PBL教学模式在医学免疫学教学中的应用满意度为80.6%,54.9%认为完全应该推广PBL教学模式,25.7%认为应该推广,仅6.2%的学生认为不应该推广PBL模式,PBL教学模式比传统教学模式在提升学生自主学习能力、分析和解决问题能力、人际交往和沟通、学习的积极性和主动性等方面有明显的优势。汪青等[6]将学生分为传统教学组和PBL-LBL教学组,通过理论考核及调查问卷评价教学效果,结果发现PBL-LBL双轨组理论考试成绩明显高于传统教学组,与本研究结果一致。赵芳芳等[7]通过传统教学法与PBL教学相结合在医学微生物学中的应用比较,结果发现PBL教学相结合传统教学效果优于单纯的任何一种教学模式,与本研究结果一致。综上所述,PBL教学模式在医学免疫学教学中的优势很明显,但是该模式下,教师提出问题,学员自行去解决问题,对于自制力差的同学,不能严格要求自己,只敷衍于形式完成任务,对于这部分学生该如何进行管理,改变学习态度,还有待于进一步研究探讨。

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参考文献]

[1] 韦秀英.PBL教学法在内分泌科见习教学中的应用[J].医学理论与实践,2005,18(9):1114-1115.

[2] 王燕,谢婷玉,张萃丽,等.PBL在眼科教学中的对比应用[J].中国高等医学教育,2011(3):86-88

[3] 刘杨,樊鑫.浅谈中国医学教育中的PBL教学模式[J].辽宁医学院学报(社会科学版), 2007, 5(1):33-35.

[4] 侯晋,周烨,李楠,等.自主实验设计在医学免疫学教学中的应用[J].基础医学教育,2012,14(3):274-276.

[5] 叶湘漓,雷立方.医学免疫学教学中的开放性课堂教学模式研究[J].湖南师范大学学报:医学版, 2005,2(3): 34.

[6] 汪青,国内医学院校.PBL教学模式的应用现状及问题剖析[J].复旦教育论坛,2010,8(5):88-91.

篇2

关键词:医学免疫学;实验教学;虚拟实验室

Discussion on the application of virtual laboratory in the experimental teaching of medical immunology

YANG Guang, WEI Wei, MIAO Xiao-yan Miao, LIU Hui

(College of Medical Laboratory, Dalian Medical University, Dalian 116044,Liaoning,China)

Abstract:Experimental teaching of medical immunology is an important link in the whole curriculum system. It is an urgent problem to renew the teaching concept and improve the experimental teaching method. Virtual laboratory provides a new teaching environment, which can stimulate students' interest in learning and improve students' comprehensive practical ability.

Key words:Medical Immunology;Experimental teaching,;Virtual Laboratory

医学免疫学是医学院校的一门重要的基础医学课程,其理论知识抽象深奥,是学生反映难以理解和掌握的课程。其中实验教学是课程体系中的一个重要环节,通过实验教学增强学生的实验操作技能,是学生掌握的理论知识最终得到应用的重要途径。如何更新实验教学观念,改进实验教学手段,增强实验教学的效果,是值得深入探讨的教学课题。随着计算机网络技术和虚拟仿真技术的高速发展,虚拟实验室提供了全新的教学环境。

目前已有国家级虚拟实验教学中心300个,构建高度仿真的虚拟实验环境和实验对象,让学生可以随时随地通过网络在虚拟环境中开展实验,达到教学大纲所要求的教学效果[1]。虚拟仿真技术已被广泛地应用于医学院校教学和科研领域,成为国内外现代教育的研究热点和发展趋势。

1医学免疫学传统实验教学现状

医学z验专业本科学制五改四,专业基础课程课时压缩,免疫学实验课时也相应减少,尽管任课教师会精心挑选和准备实验课程,但仍无法保证实验教学的全面性;学生在实验教学中动手操作和观察的机会减少,导致了学生的动手能力较差。传统的实验课内容多数是单因素设计,一次课仅涉及单一的免疫学技术,实验缺乏灵活性。由于实验环境的约束,传统实验教学多采用"灌输式"教学法,实验项目的选择、实验步骤的制定、试剂的配制及仪器设备的准备调试等均由实验教师完成,任课教师详细的讲解实验原理和实验方法,学生只需机械地完成实验操作即可,具有一定的模仿性,学生始终处于被动地位,不利于激发学生的学习兴趣和培养学生的实践能力。免疫学实验内容用时长、实验需要的实验仪器或试剂比较贵,所以许多高成本、高消耗的实验项目也不会被列入教学计划内。随着免疫学和分子生物学的发展,免疫学实验技术也飞速发展,不仅涉及的知识量较大,而且对于学生的自主操作技能要求非常高,目前开展的实验课程的广度和深度不够,学生很难学到新技术。

实验课程的局限性将直接导致学生很难掌握各项实验操作技能,很大程度上影响了实验教学的质量和学生综合能力的培养。而提高教学质量是现代高等教育的最起码要求,如何改进实验课程,切实提高实验教学质量是迫在眉睫的问题。

2 虚拟实验室在实验教学中的优势

2.1学习不受时间和空间的限制 传统的实验教学只能在实验室内进行,这就造成地域和时间的局限,不符合现代教学多元化发展的需求。虚拟实验室是以互联网络和远程数据传输系统作为依托,可以采用远程登录的方式进行访问,因其不需考虑使用者所在的地点和时间,所以学生随时随地可以做实验,无需到真实的实验室就可以完成实验所需要的实验操作,从而使实验过程不受实验场地、仪器设备、实验动物及试剂的制约,每位学生都可以独立完成模拟实验,学生可以自己动手连接、调节和使用实验仪器设备,从而实现实验教学的课前预习、课后复习使实验具有高度的可重复性和可操作性,与课堂实验紧密关联,提供个性化的学习环境,能够满足学生的不同需求。

2.2节省资金,避免风险 利用虚拟仿真技术,可虚拟各种现实很难或无法满足的场景,虚拟实验室减少了实验室建设的投入成本,避免仪器设备的重复购买,不存在试剂的损耗和浪费,并且虚拟实验室没有设备损坏和老化问题,可以节省大量教学经费的投入。

医学实验操作的严谨性非常高,而且部分实验所使用的试剂具有污染性,如操作失误容易给学生带来伤害,涉及有毒、有放射性、易造成污染的试剂会对实验室安全和学生健康产生威胁,一般采用录像、演示等方式来取代实验,学生无法直接参与而获得感性认识。虚拟实验就消除了这些隐患,可以通过虚拟仿真实验来弥补,可以放心地让学生进行实验操作。

2.3具有开放性,提高实验效率 虚拟实验室可以全天候向学生开放,学生在真实实验前利用虚拟实验进行预习,能模拟逼真的实验环境,结合实验具体内容,构建和实验教学内容相匹配的虚拟实验模型,建立起直观的感性认识。对于操作步骤繁琐的实验,在虚拟环境下可重复操作,当学生熟悉实验流程后,就可以减少实际操作的失误,提高了实验效率。在实验结束后,提出和实验教学有关的问题,用来评估实验效果,以检测学生对知识的掌握程度,实现理论和实验的结合,使学生掌握每一实验步骤的作用及其涉及理论知识,从而具备传统实验难以比拟的优势。

2.4更新实验教学体系,培养学生的创新精神 虚拟实验室是一个虚拟的实验平台,使学生可以在实验室外有机会操作仿真的实验课程。虚拟仿真实验能构建逼真的实验环境、实验对象和实验内容,是借助计算机对真实实验的模拟或再现,具有视觉、听觉、触觉等多感知性,使学生作为主角沉浸于模拟环境中,达到了难以分辨真假的程度。虚拟技术将复杂、枯燥的实验操作,用类似于游戏的方式展现,实现了寓教于乐的教学境界,大大提高了学生的学习兴趣和创新意识[2],培养学生创新精神和实践能力。

3合理安排虚拟实验与传统实验的比例

虚拟实验室虽然具有特别逼真的沉浸感,使人身临其境,但是也存在某些局限性,缺乏真实实验中视、听、触全方位的教学体验,这是将来从事临床工作所必需有的真实体验。虚拟实验的操作都是通过点击或移动鼠标来实现的,不能培养学生的实验技能。虚拟实验只能作为传统实验教学的辅助手段,不能完全取代实际实验操作。真实实验在操作过程中充满不确定性,影响因素众多,而虚拟实验是预先设置好,干扰因素有限,不利于培养学生对实验异常结果的分析和解决实际问题的能力;虚拟实验由单人独立完成,而传统实验多数是分组进行,需要一组同学共同参与,协力合作,更能培养学生的团队协作精神。因此需要在实际教学中不断发展和完善原有的实验教学体系,加强虚拟仿真实验教学的地位和作用,将虚拟实验与传统实验紧密Y合,提升实体实验效果;应科学规划、统筹安排虚拟实验教学,以切实提高学生的实践能力和创新精神为出发点,掌握好传统实验与虚拟实验的比例,合理分配[3],让两种实验教学模式相得益彰。

4结论

时代的发展推动实验室的发展,随着虚拟实验技术的成熟,虚拟实验室被广泛应用在高校的教学和科研领域。虚拟实验室不仅突破传统实验教学的诸多局限性,推动和变革传统的教学模式,使实验室走向虚拟化,也带来前所未有的发展空间。虚拟仿真实验教学将成为教学改革的重要发展方向。

目前便利的上网条件,给高校虚拟实验室的应用和发展提供了极为有利的条件,达到资源共享[4]。虚拟实验室呈现出许多新特点和新优势,作为走在时代最前沿的教育工作者,应积极地把虚拟技术运用到实验室建设中,发挥虚拟实验室在新时代教学和科研中的巨大作用。

参考文献:

[1]胡今鸿,李鸿飞,黄涛. 高校虚拟仿真实验教学资源开放共享机制探究[J]. 实验室研究与探索,2015,34(2):140-144.

[2]张弛,曾勇智,张海涛,等. 虚拟实验系统在医学机能实验学教学中的应用[J].教育教学论坛,2013(33):265-267.

篇3

【关键词】以病例为引导的问题教学法 临床免疫学

【中图分类号】R4 【文献标识码】A 【文章编号】2095-3089(2016)10-0221-02

医学免疫学是生命科学领域一门重要的基础学科,包括基础免疫学和临床免疫学两大组成部分。临床免疫学是我校2013年开始设立的针对医学生的一门全新课程,是连接基础免疫学和临床免疫系统紊乱相关疾病的桥梁课程。临床免疫学如果再继续沿用单纯的教师施教为中心,学生持续被动接受为主的传统教学模式则临床免疫学的教学就会成为一次基础免疫学知识的总复习。因此如何教授临床免疫学,如何在短短32个学时中将所学的枯燥的医学免疫学理论知识生动的贯穿到临床实践中,如何调动学生的学习积极性和主动性成为临床免疫学课程教学中的重点和难点。

1.以病例为引导的问题教学法的概念和应用

以病例为引导的问题教学法,是将以病例为引导的教学(case?鄄based study, CBS)和以问题为中心的学习(problem?鄄based learning, PBL)相结合的一种教学方法,以临床病例为引导,以问题为基础,以学生为主体的自学讨论式教学方法[1]。目前CBS和PBL教学模式在国内外被逐渐接受并收到了良好的效果。尼春萍[2]等在2002年即报道在该校181名护理学专业的学生中94名学生实施CBS模式实施教学。87名以单纯操作为主的学徒式的临床教学模式为对照教学。统计结果显示:92.6%学生认为CBS教学模式明显优于传统的教学模式,93%学生认为应用CBS能进一步促进书本理论在临床实习中的运用。之后CBS教学模式又在内科学、儿科学、病理学、医学微生物学和医学检验学等多门学科中得到了应用,并取得了良好的效果[3-4]。PBL自1969年被引入医学教育领域后,逐渐被全世界各医学院校广泛采用。因为PBL教学能够激发学生的学习兴趣,提高学生的思考能力和解决问题的能力,特别适合医学各学科的教学工作。目前我国已有多所医学院校报道了在基础医学和临床医学中应用PBL教学所取得的良好效果[5-6]。

但目前将二者合二为一的以病例为引导的问题教学法在医学教育特别是在临床免疫学教学中还尝试甚少。

2.以病例为引导的问题教学法在我校临床医学免疫学教学中的实施

2.1 精选的病例

以病例为引导的问题教学法给授课老师的备课提出了艰巨的挑战。例如免疫缺陷病章节,我校授课教师首先在课堂上把免疫缺陷病的定义、免疫缺陷病的种类、每一种免疫缺陷病的特点都做逐一描述,学生利用网络和书籍提前准备和分析病例在上课前一天,而教师要从中选择出具有代表性的病例在课堂中和学生一起讲解分析:该病例为什么归纳到免疫缺陷并的范畴、该病例属于免疫缺陷病的哪一种、该病的临床特征等。

2.2 精心设计的问题

教师还要根据该病例,考虑学生的知识面设置具有启发性、针对性和实用性的问题如治疗措施等让学生分组讨论问题的解决方案,并当堂讲述制定的方案和原则。问题的准备和设计要考虑学生的知识掌握情况,需要有一定的难度,不能从课本上“照本宣科”解决问题;同时问题答案要有确切性、科学性。使大多数学生在讨论后能有一个明确的结论,答案不能模棱两可。另外随着学生主动学习与思考能力的提高,设计的问题可以从难到易, 最终达到使学生能深入理解疾病发生发展机制和治疗的目的。

2.3 完备的课后总结

中国有句古话“听君一席话,胜读十年书”,课件授课教师的课后完备的总结至关重要,可使学生受益匪浅。学生虽然课前预习、病例查找、问题讨论和回答对该种疾病有了一定的了解和掌握,但对该种疾病的总体认识还有所欠缺,只会就事论事。这就需要教师在课前做充分准备,加大备课量,做完备的课后总结。对该病例学生的回答,该病例涉及的其他问题,该病例涉及的免疫缺陷病的相关知识,免疫缺陷病的诊断、治疗总结等。使学生能够从“点”到“面”,对这一章内容作一个完整的掌握。

3.以病例为引导的问题教学法的应用效果

3.1 以病例为引导的问题教学法的应用激发了学生学习的积极性和主观能动性

以病例为引导的问题教学法能使学生从被动地接受知识到主动地探索知识,启发学生的主观能动性,增强学生学习的积极性和兴趣。而调动学生的积极性和主动性是提高整个教学质量的关键[7]。在搜集病例过程中,需要首先对该病例的主要特征、主要临床症状做详细了解,需要对发病的年龄,群体做一个综合的分析,在查阅过程中就运用了需要掌握的知识点;问题的提出又需要学生把自己掌握的知识点活学活用到具体事例当中。虽然无形中增加了学生学习的压力,但同时也增加了动力,促使学生掌握课本知识的同时也了解了该学科领域的最新动态和发展趋势,增加了学生对本学科的兴趣,为今后进一步的深入临床学习打下良好基础。

3.2 培养了学生学习问题和解决问题的能力

以病例为引导的问题教学法首先要求学生按照要求挑选符合条件的病例在课堂讲解,这就要求学生带着问题去找合适的病例,提高了学生发现问题的能力[7]。在引导学生正确分析病例,提出一些相关的学生力所能及的问题,则进一步提高了学生解决问题的能力。在不断的学习问题、解决问题过程中融会贯通,促进了学生对知识的综合分析能力的培养和独立工作能力的养成。同时教师还可以针对学生的学习弱点有针对性的讲解,更好地指导学生的学习。

3.3 有助于提高授课教师的综合素质

以病例为引导的问题教学法对授课教师来说也是提高教学业务水平的很好的方法。每次学生搜集的病例授课教师都要事先分析、筛选,选取其中具有代表性的病例作为课堂讲解内容,并查阅相关资料,提出问题供学生解答,并总结学生解答该问题需要的相关理论知识,如此对提高授课老师的业务水平会有很大的提高。

4.以病例为引导的问题教学法存在的问题

以病例为引导的问题教学法虽然在教学过程、特别是医学桥梁课程的讲述过程中有很多优点,且学习过程中学生兴趣高涨,能达到预期的教学目的。但由于该方法在我国应用的时间较短,特别是讲二者结合的方法更是一种全新的尝试,所以难免会存在一些问题。以病例为引导的问题教学法适合小班教学模式,并以小组为基础讨论,但在我校临床免疫学教学均采用大班模式,课堂时间有限,因此每次只能采纳部分学生的病例,在讨论时时间也只允许部分学生发言,因此不能充分调动所有学生的积极性和主动性,因此部分学生的教学效果甚至劣于传统的教学效果。另外以病例为引导的问题教学法的大面积推广也存在师资严重不足、教师素质有待进一步提高以适应这种教学模式及缺乏有效的教学评价体系等问题。

总而言之,以病例为引导的问题教学法是医学教育改革迈出的重要一步,可以极大的推进基础医学和临床医学实践的发展,为培养我国高素质的医学人才做出贡献。

参考文献:

[1]焦瑞娟,李志红,张瑞英等.以病例为引导的问题教学法在临床护生带教中的应用体会[J].中国医学创新,2010,07(36):122-123.

[2]尼春萍,刘冬焕,化前珍等.以病例为引导的教学模式在临床护理实习教学中的应用与思考[J].现代护理,2002,8(10):786-787.

[3]焦艳丽.CBS 教学模式在急诊护理教学中的应用[J].医药前沿,2013,(11):312-313.

[4]付显华,李春,张俊玲等.CBS教学模式在外科护理见习中的实践[J].中外医疗,2012,31(17):111.

[5]陆媛,于德华,张斌等.PBL教学模式在全科医师规范化培训中的实践应用[J].中国全科医学,2014,(16):1880-1883.

篇4

关键词 《病原生物与免疫》 高职护理 比较教学法 应用

中图分类号:G420 文献标识码:A

Application of Comparative Teaching Method in

Biological Pathogens and Immune Teaching

WANG Caiyun

(Changzhou Health Vocational and Technical School, Changzhou, Jiangsu 213002)

Abstract "The biological and pathogenic immune"is a basic professional course of the nursing. This course content abstract concept, and easily confused, knowledge crossed-before and after. We often use comparative teaching method to help students acknowledge, cognitive new concept connotation and denotation in teaching, make different knowledge organic connection, and learning content to propagation of sperm, train the students'ability to analyze and solve problems, in order to achieve good teaching effect.

Key words "biological pathogens and immune"; senior high vocational school nursing; comparative teaching method; application

《病原生物与免疫》是高职护理专业的专业基础课程。本课程免疫学基础部分内容抽象、概念多、前后知识交叉,学生在尚未学习专业课程、没有临床体验的情况下普遍感到难学,而病原生物部分内容多、易混淆。因此,在当前职业教育课程改革大力推进的形势下,在《病原生物与免疫》教学中必需要根据教学内容采用多种形式的教学方法,促使学生达成教学目标。本文主要介绍比较法在教学中的应用。

1 比较教学法的概念

比较是人们常用的思维方式,是主动思考的过程,是提高分析和综合能力的过程。①通过比较,将两个或两个以上内容辨出异同,有助于认识内容本质。同时,学生的认知能力在比较过程中逐步建构,不断丰富、提高和发展。比较教学法是在教学中应用对比手段,对多个教学内容进行观察、分析、整理的一种教学方法。

2 比较教学法的作用

比较教学法在《病原生物与免疫》教学中经常得到应用,其作用体现在以下几方面。

2.1 有助于学生认知新知识

在讲述新课时,有些知识点是学生首次接触,有时难以接受,通过与前面讲课内容进行比较,就能促进学生对新知识的理解。例如,讲述病毒的培养,先与细菌的培养进行比较,细菌可以在人工培养基中生长,是因为具有完整的细胞结构,可以直接从外界环境吸收营养,进行二分裂法繁殖,而病毒是非细胞型微生物,体内缺乏进行新陈代谢的酶系统,其增殖方式为复制,必需在活细胞内进行,只能依靠宿主细胞(病毒寄生的活细胞)提供合成子代病毒的原料、能量、场所才能完成。通过与细菌的培养相比较,引出复制的概念和病毒的培养方法。促进学生对病毒培养方法的理解。

2.2 有助于学生掌握概念的内涵和外延

学生在学习新知识时,往往难以抓住知识的实质,对一些相近的概念容易混淆,分不清,难记住。教学中对这些概念进行比较,学生就能正确地理解和掌握概念的内涵和外延。如讲述非特异性免疫(先天性免疫)与特异性免疫(获得性免疫)概念时,首先让学生弄清这两个概念的内涵,即非特异性免疫是机体通过遗传得到的,是人类在进化过程中为了适应环境而具备的本能,因此作用无特异性且生来就有、人人都有;而特异性免疫是在非特异性免疫的基础上,在出生后受到抗原(病原生物等物质)刺激后针对抗原产生的,因为每个人受到抗原刺激的情况不同,故作用有特异性且个体特有。由此,帮助学生理解这两种免疫概念的内涵和外延。

2.3 有助于学生将不同知识点有机联系

教材内容叙述往往都是独立的,有些知识点可以通过比较法使之结合,加深学生对知识的理解。如T细胞和B细胞都是重要的免疫细胞,有相同之处,亦有不同的方面。在T细胞讲完后再讲B细胞,这时通过比较,将两者的关系联系在一起就较容易理解了。将两者关系归纳成:“一母所生、二种经历,一个模样、二种标记,一个目标、二种功能”。“一”字开头表示两者相同之处,“二”字开头表示两者不同之处,意思是T细胞和B细胞都是来源于骨骼,但分化场所分别是胸腺和骨骼,T细胞和B细胞在光学显微镜下的形态相同都是小淋巴细胞,但表面有不同的受体和表面标志,T细胞和B细胞都参与了特异性免疫应答,但分别参与的是细胞免疫应答和体液免疫应答。通过比较,找出它们之间的区别和联系,使学生更清楚地理解这些知识点。

2.4 有利于学生将学习内容去繁存精

病原生物与免疫内容繁多,尤其是病原生物各论部分有许多内容雷同,学生难以记住,通过将相似的内容进行比较起到去繁存精的作用。如将常见病原菌、常见其它微生物、常见重要病毒、常见重要寄生虫列表比较,能使学生去繁存精、一目了然、掌握每一种病原生物的特征,将繁杂知识简单化。

2.5 有利于培养学生分析问题、解决问题的能力

老师的教学不仅是传授知识与技能,并要培养学生分析问题、解决问题的能力,在教学中恰当应用比较法能达到较好的预期结果。如在革兰染色操作实验中,酒精的脱色是关键,在实验中可设计对照法,分别将脱色时间改成<0.5分钟和>1分钟(实际是0.5~1分钟),观察脱色时间对染色结果的影响,让学生分析出现不同结果的原因,使学生真正理解脱色在革兰染色操作中的重要性,培养分析问题、解决问题的能力。

3 比较教学法在病原生物与免疫教学中的应用

比较教学法主要适用于具有共性、相似或相反内容的教学。病原生物与免疫课程特点决定了比较教学法是一种常用的教学方法。具体实施时,要根据教学内容采取不同类型的比较法,以期取得较好的教学效果。病原生物与免疫教学中常用的比较教学法常用下列几种方法。

3.1 类比法

将相同或相似的知识进行比较,先比较相似处,再区别之间的差异。如前述的T细胞和B细胞比较,“一”字开头为两者的相同之处,“二”字开头为两者的不同之处,其他如细菌的特殊结构、常用热力灭菌法、细菌基因的转移与重组、细菌的全身感染等都可以用类比法进行比较。

3.2 对照比较法

对照比较法是对不尽相同的知识进行综合比较、找出异同的方法。如细菌与病毒的比较。细菌与病毒相同点都是常见的病原生物,个体均微小,对人体都有致病性,都能用人工的方法进行特异性预防;不同点有大小、细胞结构、人工培养方法、增殖方式、对抗生素的敏感性、致病物质等方面。通过对细菌与病毒的对照比较,两者的异同一清二楚,以此加深学生的记忆。其它如细菌的全身感染、医学上重要的抗原、各类Ig的主要特性、细胞免疫与体液免疫、人工免疫都可以应用对照比较法。

3.3 正反比较法

正反比较法是通过对两个相反的内容进行比较,帮助学生树立整体观、提高辨证思维能力的方法。如免疫功能及其表现,免疫具有三大功能,正常情况下对机体有利,可以维持机体处于健康状态,但在异常情况下,对机体是不利的,可以引起机体损伤。免疫防御功能在正常情况下能抗抗病原微生物入侵,但在异常情况下,可引起超敏反应、免疫缺陷;免疫稳定功能在正常情况下能清除衰老、损伤的细胞,但在异常情况下,可引起自身免疫性疾病;免疫监视功能在正常情况下能识别、清除突变细胞,但在异常情况下,可导致肿瘤的发生。正常情况和异常情况对机体的作用是相反的,通过正反比较,促进学生对知识的全面了解,提高辨证思维能力。其它如正常免疫应答与异常免疫应答结果的比较等也可以应用对照比较法。

总之,病原生物与免疫是高职护理专业的重要专业基础课程之一,在教学中,教师必须坚持课程改革的理念,体现以学生为主导的教学思路,积极实施比较教学法,并与其它教学方法如项目教学法、理实一体化教学、学生参与式教学法、启发教学法、形象教学法、案例教学法等方法结合应用,以完成本课程的教学目标。

篇5

关键词 卵黄免疫球蛋白 免疫 药理

1893年Klemperer提出母鸡血清中的抗体可通过产卵方式传给后代,在胚胎发育早期作为主要的免疫球蛋白为雏鸡提供被动的免疫保护。因该抗体蛋白与哺乳动物IgG分子类似,故称其为鸟类IgG。而1969年Leslie等[1]的实验证明,鸟类IgG与哺乳动物IgG的分子不同,所以又提出了卵黄免疫球蛋白(IgY)这个概念。由于当时IgY提取困难,故未受到重视。直到1990年后,Akita等[2]建立了水稀释法,使IgY的提取变得简单易行,从而掀起了IgY制备和应用的热潮。鉴于IgY具有产量高、稳定性好、免疫学特性独特等优点,该蛋白被称为最具潜力的哺乳动物抗体替代品。1996年欧洲实验方法替换确认中心(EC-VAM)推荐使用IgY替代哺乳动物IgG。1999年出于对动物保护的考虑,IgY技术被瑞士联邦政府接受。德国、日本、瑞典和南非等国家对IgY的研究也明显领先,这些研究进展将使多克隆抗体的生产进入无害化、易操作的新时代,鸡也被称作新一代的抗体“加工厂”[3]。

IgY的来源和产量

IgY来源于鸡卵黄。与哺乳动物(兔、牛等)相比,产蛋母鸡成本低,是有效的多克隆抗体生产者。Li等[4]研究证实,卵黄的重量与母鸡产蛋天数的百分比是IgY产量的2个重要因素。母鸡初次免疫10天后,即可获得高浓度的抗体,且效价稳定,可持续6~28周。另外,免疫鸡的饲养简单,花费少,且符合3R[替代(replacing)、减少(reducing)、改善(refining)]的动物保护原则[5]。IgY在鸡卵黄中的浓度约为5~20 mg/ml,每枚鸡卵黄中可提纯100~150mg,12枚鸡卵黄约可提纯1g的IgY,与100 ml血清中所含IgG的含量相当。每只母鸡每年可产卵280枚,即可生产约40 g的IgY;而每只兔每2~3周抽血1次,一年仅可生产1.3 g抗体,所以1只鸡的年产蛋量所获得的IgY可相当于40只兔的年产抗体量。

理化性质

IgY为可溶性蛋白,亲水性比IgG好,且等电点较IgG低,约为5.2。IgY化学性质稳定:①耐酸性好,pH值

免疫学特性

Kronvall等[7]和Akerstrom等[8]分别证明,IgY不与蛋白A和蛋白G结合,是单克隆抗体和多克隆抗体检测的有力工具。20世纪90年代,研究者又发现IgY的其他免疫学特性:①不与类风湿因子结合。类风湿因子是一种自身抗体,可与IgG的Fc片段结合,产生假阳性反应。类风湿因子的干扰使免疫测定中易产生交叉反应。Larsson等[4]利用夹心ELSIA证明,类风湿因子不与IgY结合,使用IgY作免疫检测可避免假阳性。②不激活补体系统。新鲜的血清样品均含未激活的补体系统,通常IgG会激活补体系统,激活的补体组分与抗体结合,阻碍了抗体结合表位。而IgY则不激活补体系统,使用IgY可避免补体系统对固相免疫测定的干扰[4]。③不结合细菌和哺乳动物细胞表面Fc受体,使得IgY在双重免疫组化方面比IgG更具优势[9]。④与IgG几乎无交叉反应,常用于循环复合物的测定[10]。⑤使用少量抗原即可产生大量抗体。高度保守的哺乳动物蛋白在兔中不能引起免疫应答,但在鸟类中却很容易获得抗这些蛋白的抗体。对各种哺乳动物的抗原均有效,如总量30~475μg增殖细胞核抗原可产生鸡抗弱免疫原性RNA多聚酶Ⅱ的抗体[11]。

IgY在医学领域中的应用

IgY在人类医学、兽医学、食品科技和生物制剂等方面应用广泛。IgY可作为特异抗体已成为医学领域中新的研究热点[12~14]。

IgY在疾病相关蛋白检测中的应用:血浆白蛋白(HSA)和IgG等10种高浓度蛋白约占血浆总蛋白的90%,由于部分低浓度蛋白很可能是癌症、心肌梗塞等重大疾病的关键指示分子。如何祛除高浓度蛋白,检出低浓度蛋白,在疾病的早期诊断和疗效考核中具有重要意义。制备抗HSA和IgG的鸡卵黄抗体(IgY),金磁微粒载体固定,可特异结合HSA和IgG,以便除去血浆中大部分的HSA和IgG,使低丰度蛋白富集,有效提高低丰度蛋白的检出率,这为血浆蛋白质组学研究提供了一种新的方法[15]。Hb Bart’S胎儿水肿综合征是最严重的一种α型地中海贫血病。从该病患者的红细胞溶解液中提取γ链四聚体(γ4,Hb Bartt’S),免疫鸡获得特异IgY抗体,该抗体可特异结合γ球蛋白、Hb Bartt’S和血红蛋白F,用直接ELISA检测336份人红细胞溶血产物,其敏感性高达100%,特异性为96%,比传统渗透脆性试验法的特异性(约86%)高。该方法的建立有利于在地中海贫血病流行的国家简单快速的检测α型地中海贫血病[16]。

IgY在病原体检测中的应用:疗效考核是目前日本血吸虫病免疫诊断的瓶颈,建立有效的评价方法是寄生虫学界广泛关注的问题[17]。近两年已有研究者使用IgY以改进血吸虫病免疫诊断方法。即用纯化的抗可溶性虫卵抗原(SEA)的IgY为捕捉抗体,以酶标抗SEA单克隆抗体为检测抗体的双抗体夹心酶联免疫吸附试验(S-ELISA)检测急性血吸虫病患者、慢性血吸虫病患者和健康人的血清,其中急性血吸虫病患者和慢性血吸虫病患者的血清循环抗原的阳性率分别为100%(9/9)和84.4%(38/45),特异性为96%(48/50)[18]。而常用的间接血清凝集试验(IHA)的敏感性和特异性分别为69.6%和89.4%[19]。可见前者比后者更具敏感性和特异性,为解决血吸虫病疗效考核的问题带来了希望。

IgY在胃肠道疾病中的应用:最新研究显示,通过口服抗菌抗体或抗病毒抗体可替代抗生素药物而有效预防胃肠道感染。但传统的抗体生产工艺复杂,价格昂贵。而IgY因其来源便宜、易制备、稳定性好、耐酸和耐胃蛋白酶等优点成为制备口服抗体的最佳选择。如轮状病毒是致婴幼儿秋冬季腹泻的主要病原体,全球每年约有100万儿童患轮状病毒性腹泻,至今尚缺乏有效的治疗手段。新药百贝宁主要成分是抗轮状病毒抗体(IgY),治愈率高达88.9%,在临床应用中未发现有不良反应[20]。

IgY在呼吸道传染病中的应用:Nilsson等[21]在瑞典对17例胆囊纤维症患者给予口服IgY以预防铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa),通过长达12年的观察,发现17人中仅有2人有铜绿假单胞菌慢性植入情况,而对照组23人中却有7人。所有试验组患者肺功能均正常,且身体质量指数正常或接近正常。表明抗铜绿假单胞菌的特异IgY能有效预防铜绿假单胞菌引起的呼吸道传染病。

IgY在免疫治疗中的应用:因鸡抗体耐酸、耐热且性能稳定,可经口服用于预防或治疗年幼动物或人类的肠道传染病,如婴儿防病食品、龋齿预防、新生乳猪致死性大肠杆菌感染的预防以及鱼病治疗等。特别是抗生素或其他药物的使用存在问题时,IgY成为首选。在非典流行期间,鸡卵黄抗体还被研制用于抑制SARS病毒。

在人类保健上的应用:大量研究结果显示,鸡IgY对病原体感染的防御无动物的种属差异,故应用鸡高免IgY防治婴幼儿疾病是完全可行的。随着SPF鸡群的使用,用卵黄研制安全可靠的人用抗病(尤其是肠道疾病)生物制品必将获得广泛的应用。由修正药业生产的口服免疫球蛋白——修正修修爱优尔胶囊,其主要有效成分即为免疫球蛋白,且含量高,每100g中含有19.8gIgG,,对提高免疫力低下人群的抵抗力具有很好的效果。

中毒解救:针对蛇毒、蜘蛛毒等生物毒素的lgY与药物开发已开展多年。王桂平等[22]使用嗜硫色谱法提纯抗眼镜蛇王毒素lgY,在小鼠试验中,体外6mglgY中和4LD50毒素(约1.6mg/kg),体内可有效中和约3LD50毒素(约1.2mg/kg)。Paul等[23]使用免疫亲和层析纯化抗蝰蛇毒素lgY,对小鼠进行皮下注射免疫保护试验,可中和2LD50毒素,保护率为100%。Meenatchisundara等[24]制得纯化的抗蝰蛇毒素lgY和鳞状蝮蛇毒素lgY,能够中和蝰蛇和鳞状蝮蛇毒素,同时有抑制水肿、减少溶血和降低磷脂酶活性的作用。De Almeida等[25]使用抗非洲蝰蛇和眼镜蛇毒素的lgY,1440μg的lgY能够中和62.2LD50的毒素,同时使用抗毒液的lgY几乎没有免疫副作用。

结语和展望

经过20多年的发展,IgY已在世界范围引起重视。国内外研究文献数量不断增多,IgY的应用也日益广泛。特异IgY的制备为治疗和诊断各类疾病提供了新的思路。在免疫诊断方面,IgY是传统哺乳动物抗体最好的替代品,它改进了现代免疫诊断检测方法,已在蛋白质印迹分析、免疫组化、胶体金标记和免疫电泳等检测方法中广泛应用。在免疫治疗方面,IgY是抗生素药物最好的替代品,在寻找药物靶位和肿瘤治疗中应用前景广阔,但在目前均处于实验研究阶段,距临床应用还较遥远。但相信,IgY凭借其自身优势,将会在医学领域中发挥更大的作用。

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21 Nilsson E,Larsson A,Olesen HV.Good effect of IgY againstPseudomonas aeruginosa infections in cystic fibrosis patients[J].Pediatr Pulmonol,2008,43(9):892-899.

22 王桂平,刘新艳,朱柳,等.抗眼镜王蛇毒卵黄抗体的免疫活性及其对眼镜王蛇毒的中和作用[J].中国临床药理学与治疗学,2007,12(11):1250-1254.

23 PAUL K,MANJULA J,DEEPA EP,et al.Anti-Echiscarinatus venom antibodies from chicken egg yolk:isolation,purification and neutralization efficacy[J].Toxicon,2007,50(7):893-900.

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【关键词】循证医学 口腔颌面外科学 临床教学

【中图分类号】R78 【文献标识码】A 【文章编号】2095-3089(2013)06-0251-02

循证医学(Evidence Based Medicine,EBM)是遵循科学证据的临床医学[1]。它提倡将临床医师个人的临床实践和经验与客观的科学研究证据结合起来,将最正确的诊断、最安全有效的治疗和最精确的预后估计服务于每位具体患者。临床实习是将理论知识联系实践或应用于实践的开始,对于医学生进入临床工作具有重要意义。

1.循证医学和传统临床医学教育模式的比较

循证医学不同于传统医学。传统医学是以经验医学为主,即根据非实验性的临床经验、临床资料和对疾病基础知识的理解来诊治病人。循证医学并非要取代临床技能、临床经验、临床资料和医学专业知识,它只是强调任何医疗决策应建立在最佳科学研究证据基础上[2]。 我国传统医疗模式是以理论知识为基础,以临床经验为指导制定医疗决策的。其运作过程是医生知识经验在临床的再现、验证和重复运用,实质上属于经验医学的范围。传统临床医学教育模式与这种医疗模式高度一致,突出教师、课堂、教材三中心,强调以传授知识、经验和技能为目的,以培养知识经验和技能型人才为目标。其弊端主要是学生用大量时间积累知识,而没有创造性的实践;教师或上级医生在完成临床医学教育的过程中重在知识的灌输,并注重知识的完整性、连贯性;强调教师的主导性,而没有体现学生的主体性。传统临床实习阶段,实习医生看一看典型病例和阳性体征,能够验证理论和增加感性认识,再加上教师结合典型病例把课堂上讲过的内容重复一遍,实习医生可以对疾病有比较深刻的印象。这种机械、刻板、缺少领悟的教学方式不利于调动学生的学习主动性,限制了临床实践能力的发展,难以激发学生的创新思维能力。

2.循证医学的定义

David Sackett将循证医学定义为“慎重、准确和明智地应用目前可获得的最佳研究证据,同时结合临床医师个人的专业技能和长期临床经验,考虑患者的价值观和意愿,完善地将三者结合在一起,制定出具体的治疗方案”[3]。循证医学的核心思想是在医疗决策中将临床证据、个人经验与患者的实际情况和意愿三者相结合。循证医学为临床医学教育改革开辟了一个崭新的领域。从临床医学教育角度看,循证医学既是一种新的思维方式,又是在这种认识方式指导下为临床研究和实践提供科学依据的方法论,同时也是一种与传统医学教育模式不同的教学方法,是一种新的临床医学教育观。其实质是一个新式高效的终身学习和主动学习的临床医学教育模式。

3.口腔颌面外科临床实习的重要性

口腔颌面外科临床实习具有重要作用,对学生毕业后从事临床工作有较大影响。临床实习阶段是医学理论与实践相结合的第一步,是医学基础课与临床之间的桥梁,对巩固课堂知识、培养学生独立思考、综合分析等临床思维能力能力尤为重要[4]。所谓临床思维能力是指把理论课所学的基础知识融会贯通于临床实践中,对具体临床现象进行分析和思考,最后作出符合实际的判定能力。具备这种能力是一个临床医生独立解决临床问题的基本保证。而实习阶段正是培养医学生临床思维能力的重要阶段。实习过程就是临床实践的初始过程,应注意培养学生的临床思维能力,指导其临床实践,不仅能提高他们的学习兴趣,还会为进入临床工作打下良好的基础。循证医学在口腔颌面外科临床实践过程中大致可分为:(1)针对患者提出的临床上需要解决的痛苦,明确具体问题;(2)检索含有与临床资料相关的所有颌面外科学文献;(3)严格评价所收集证据的合理化和实用化;(4)根据医生的临床经验和患者的愿望要求相结合评价结果,制定最佳的治疗方案;(5)对治疗疗效进行长期追踪随诊并进行再评价。

4.何适应新的教学模式、改进教学方法

在口腔颌面外科临床中的诊断,治疗方案,处理及其预后中所遇到的问题,都可以用循证医学来解决。比如:关于放射性骨髓炎的诊疗。首先面对就诊原因,临床表现及其危害性等进行文献检索,查寻采用临床随机对照试验(randomized controlled trial,RCT)相关的论文,同时也应重视其并发症(如颌骨病理性骨折,神经损伤,术后出血及感染等),应该慎重的按患者要求做合理的决定性治疗方案。在治疗后,应做临床随机对照研究并行追踪观察。统计其放射性骨髓炎的患病率,术中及术后并发症的发病率,特别是病理性骨折的发生率,神经的损伤率及其此在处理后的恢复率。认真评估手术治疗的价值及意义,并为系统评价提供一定的资料。再如唇裂的手术修复治疗。手术目的: 是尽量恢复唇、鼻部的正常外形和功能。正常的唇、鼻部有如下特点:两侧鼻孔等圆等大,鼻尖及鼻小柱居中,鼻翼不塌陷,上唇两则高度相等、对称,红唇丰满、唇珠微突、唇红缘呈弓背形。患儿适应于手术的基本条件是:一般健康情况良好,无明显贫血,无上呼吸道感染,局部及周围组织无感染。目前具有争议的是手术时机,一般认为单侧唇裂在婴儿出生三个月左右手术为宜,双侧唇裂推迟到六个月。再次,手术方法也较多。现在,在循证医学中根据唇裂具体情况在取证分析后采用一种最适合患者的手术方法和手术时机。其实,在面对错综复杂较困难的问题时往往可以在循证医学中寻找答案,众多临床医师把循证医学和口腔颌面外科紧密联系起来,一定会将口腔颌面外科推向一个新的台阶,新的领域。许多口腔疾病的临床症状较重变动较大,轻型患者一般很少就诊。一位合格的口腔医生对于任何病例在选择治疗方案时必须知道并了解不同治疗方案对病人好转的可能性,需要明确各种治疗方法的效果。医生选择治疗方法或做出治疗意见均可在所需的资料证据中获知。其实,实践循证医学在口腔外科临床中起着相当重要的作用。它将医学教育与临床实践溶为一体,使我们临床医生常规地更新知识,提高临床医师对研究方法的理解并在使用资料时更加严格,同时也增加临床医生在做出决策时的自信心,同样也聚焦了所有临床医生的力量和去发展口腔颌面外科学。

5.提高综合素质,加强教师队伍建设

加强口腔颌面外科教师队伍建设。临床教师不但要在改进教学方法与教学手段的层面上努力,更要在教学思想这个深层次的问题上下功夫,重视向学生传播先进的循证医学思想。临床教师要认识到,循证医学教学模式取代传统的教学模式是医学发展的趋势[5]。要充分认识循证医学的本质、意义、价值,熟悉循证医学的基本内容、基本精神和主要程序,掌握实践循证医学的各种知识、技巧,并改进。加强教师队伍建设。教师不但要在改进教学方法与教学手段的层面上努力,更要在教学思想这个深层次的问题上下功夫,重视向学生传播先进的循证医学思想。教师要认识到,循证医学教学模式取代传统的教学模式是医学发展的趋势。要充分认识循证医学的本质、意义、价值,熟悉循证医学的基本内容、基本精神和主要程序,掌握实践循证医学的各种知识、技巧,并改进临床教学工作。要求教师在实施教学过程中更新以下观念:①从传播临床知识转变为教会学生学习;②让学生从死学转变为巧学;③从被动接受转变为主动求学;④从短期充电转变为终身教育;⑤变知识经验型人才的培养目标为创新开拓型人才培养目标。

总之,做为口腔外科从业人员,必须认真学习和掌握这门学科,积极进行循证实践[6],不断善于寻找评价运用证据,以自己临床实践,为循证口腔颌面外科学提供最佳证据,在今后的工作中更好的防治口腔疾病,减轻病人的痛苦,促进人类口腔健康。

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[6]Evidence?鄄based medicine methods and critical reading of the paper devoted to degenerative lumbar and sacral spinal stenosis. Zh Vopr Neirokhir Im N NH Burdenko.2012;76(4):64-8; discussion 68

篇7

【关键词】 中医穴位按摩;产时分娩镇痛;效果

DOI:10.14163/ki.11-5547/r.2017.09.091

Effect of traditional Chinese medicine acupuncture point massage applied in intrapartum labor analgesia XIAO Ri-hua, CHEN Ai-lian, HUANG Jian-tao, et al. Department of Science and Education, Guangzhou City Panyu District Hexian Memorial Hospital, Guangzhou 511400, China

【Abstract】 Objective To study and analyze effect of traditional Chinese medicine acupuncture point massage applied in intrapartum labor analgesia. Methods A total of 100 primiparas as study subjects were randomly divided into control group and acupuncture point massage group, with 50 cases in each group. The control group received conventional natural delivery without other treatment measures, and the acupuncture point massage group received traditional Chinese medicine acupuncture point massage. Comparison were made on analgesic effect and neonatal Apgar score, 2 h and 24 h postpartum haemorrhage amount, lactation amount in3 days postpartum in two groups. Results ①The acupuncture point massage group had higher total analgesic effect as 98.00% than 80.00% in the control group, and the difference had statistical significance (P0.05). ③The acupuncture point massage group had obviously less 2 h and 24 h postpartum haemorrhage amount as (87.39±3.57) and (156.61±12.59) ml than (186.51±13.23) and (365.62±21.21) ml in the control group, and their difference had statistical significance (P

【Key words】 Traditional Chinese medicine acupuncture point massage; Intrapartum labor analgesia; Effect

促进自然分娩和降低剖宫产率是产科工作重点。近年来, 随着社会发展, 人么对分娩服务要求也随之提高, 产时分娩镇痛在临床上受到广泛青睐。目前, 产时分娩镇痛多采用药物和非药物镇痛两种方法, 但药物镇痛存在安全顾虑, 因此, 积极探索非药物镇痛有效减轻产痛, 加速产程, 是提高自然分娩的关键[1, 2]。本研究旨在专门研究穴位按摩对分娩镇痛的影响, 探索出一套适用于自然分娩镇痛且母婴安全的穴位按摩方法, 解决初产妇惧怕分娩阵痛的所致的剖宫产率增高的问题, 从而降低我国整体剖宫产率。现报告如下。

1 资料与方法

1. 1 一般资料 选取2015年2月~2016年8月来本院分娩的100例初产妇。纳入标准:①孕周37~42周, 单胎头位, 估计胎儿体重2500~4000 g, 无严重产科合并症或并发症。②胎儿监护正常。③无不良孕产史。④各项辅助检查无明显异常。⑤无阴道分娩禁忌证。⑥年龄18~34岁。⑦身高155~165 cm。排除标准:①不符合纳入标准者。②产程中出现异常者, 需剖宫产, 新生儿重度窒息抢救。③依从性差者。向入院待产者及家属解释自然分娩镇痛的方法和意义, 并签署知情同意。100例初产妇随机分为对照组与穴位按摩组, 每组50例。对照组年龄18~33岁, 平均年龄(25.73±5.21)岁。穴位按摩组年龄19~34岁, 平均年龄(25.58±5.12)岁。两组初产妇一般资料比较差异无统计学意义(P>0.05), 具有可比性。

1. 2 方法 对照组:常规自然分娩, 不实施其他治疗措施。穴位按摩组:常规接产的同时, 当宫口开至3~5 cm时, 接受本研究制定的穴位按摩方法(按摩百会、肩井、合谷、三阴交四穴配合骶尾部局部揉)。

1. 3 观察指标及评价标准 ①产妇实施镇痛前后疼痛的程度:根据WHO镇痛分级标准进行评价:0级:无疼痛, 安静合作;Ⅰ级:轻微疼痛, 易忍受, 可合作;Ⅱ级:中度疼痛, 难忍受, 不安, 合作欠佳;Ⅲ级:重度疼痛, 不能忍受, 叫嚷不安, 不能合作。痛级评估[3]:显效:按上述疼痛标准, 疼痛至少减轻1级或以上者;有效:疼痛有所减轻, 但未达WHO分级中1个级别的程度;无效:疼痛程度无改变。总有效率=(显效+有效)/总例数×100%。②新生儿Apgar评分。③产妇产后2、24 h出血量。④产后第3天泌乳量。

1. 4 统计学方法 采用SPSS18.0统计学软件处理数据。计量资料以均数±标准差( x-±s)表示, 采用t检验;计数资料以率(%)表示, 采用χ2检验。P

2 结果

2. 1 两组镇痛效果比较 穴位按摩组镇痛总有效率98.00%高于对照组80.00%, 差异具有统计学意义(P

2. 2 两组新生儿Apgar评分比较 两组新生儿Apgar评分比较差异无统计学意义(P>0.05)。见表2。

注:与对照组比较, aP>0.05

2. 3 两组产后2、24 h出血量比较 穴位按摩组产后2、24 h出血量(87.39±3.57)、(156.61±12.59)ml显著少于对照组(186.51±13.23)、(365.62±21.21)ml, 差异均具有统计学意义(P

2. 4 两组产后第3天泌乳量比较 穴位按摩组产后第3天泌乳量(195.44±28.55)ml显著多于对照组(123.23±17.66)ml, 差异具有统计学意义(P

注:与对照组比较, aP

3 讨论

降低我国的剖宫产率已成为目前严峻的使命, 随着剖宫产率的升高和我国二胎政策的逐步放开, 势必影响中国整体剖宫产率的控制, 所以关键是降低初产妇的非医学指征的剖宫产率, 由于非医学指征的剖宫产的发生主要是因为产妇害怕分娩镇痛, 因此, 除了要求医生严格掌握剖宫产指征, 加强对孕妇及其家属关于分娩的相关知识的健康教育, 让他们了解自然分娩和剖宫产分娩方式的利弊之外, 最关键的是要解决分娩镇痛的问题[4-9]。

目前, 解决分娩镇痛的方法有药物镇痛和非药物镇痛。药物镇痛虽然效果理想, 但副作用多[6, 10-12]。非药物分娩镇痛日益引起人们的关注, 其中中医穴位镇痛总体效果最好, 在常用的针刺镇痛、穴位注射、穴位按摩、经皮电神经刺激法等穴位镇痛方法中, 又以穴位按摩最具安全性和操作性[13-16]。穴位按摩可通过刺激穴位, 提高体内内啡肽水平, 发挥镇痛作用, 还可加速肾上腺活动, 增加皮质醇分泌, 减轻分娩疼痛。另外, 穴位按摩合谷穴还可补气血, 通冲任, 健脏腑, 促进乳汁流畅, 增加产后泌乳量[7, 8]。

本研究中, 对照组常规自然分娩, 不实施其他治疗措施。穴位按摩组应用中医穴位按摩。结果显示, 穴位按摩组镇痛总有效率98.00%高于对照组80.00%, 差异具有统计学意义(P0.05)。③穴位按摩组产后2、24 h出血量(87.39±3.57)、(156.61±12.59)ml显著少于对照组(186.51±13.23)、(365.62±

21.21)ml, 差异均具有统计学意义(P

17.66)ml, 差异具有统计学意义(P

综上所述, 应用中医穴位按摩在产时分娩镇痛的效果确切, 可有效镇痛, 减少产后出血, 增加产后泌乳量, 且对新生儿无不良影响, 值得推广应用。

参考文献

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篇8

关键词:炎症因子 免疫标志物 高脂血症 急性胰腺炎

Application of immune index detection in the prediction of hyperlipidemic acute pancreatitis

BAO Feng LI Ting WU Li-rong ZHAO Ping-wu XIANG Chun-hua DENG Zhi-gang LI Guo-qiang ZHI Xing LIU Wen

Department of General Surgery,Mianyang Central Hospital; Department of General Surgery,Mianyang Hospital of Traditionanl Chinese Medicine;

Abstract:Objective:To determine the prediction value of immune index detection for severity hyperlipidemic acute pancreatitis(HLAP).Methods:116 patients with HLAP admitted to Mianyang Central Hospital from June 2017 to December 2019 were collected.According to the severity of the disease,the patients were divided into mild HLAP group(M HAP group) and severe HLAP group(SHAP group).The clinical data and serum PCT,CRP,TNF-α,IL-6,IL-10 were collected after in hospital.Logistic regression analysis was used to identify the risk factors of SHAP.Results:Compared with MHAP group,the concentrations of PCT [(2.1±0.8) μg/L vs(1.2±0.5) μg/L,P<0.001],CRP[(14.3±2.7) mg/L vs(8.9±2.5) mg/L,P<0.001],IL-6[(19.4±3.9)pg/m L vs(10.0±2.4) pg/mL,P<0.001],IL-10[(18.2±2.5) pg/m L vs(14.5±1.8) pg/mL,P<0.001]and TNF-α [(16.4±2.2) pg/mL vs(10.4±1.0) pg/m L,P<0.001] in SHAP group were significantly higher(P<0.05).Multivariate analysis showed that PCT≥1.5 μg/L(OR=9.1,95% CI:4.0-20.6,P=0.004),CRP≥11 mg/L(OR=27.3,95% CI:1.3-54.9,P=0.031),IL-6≥12 pg/mL(OR=26.9,95% CI:8.4-86.0,P=0.002),IL-10≥16 pg/mL(OR=13.3,95% CI:5.1-34.8,P=0.003) and TNF-α≥11 pg/mL(OR=22.5,95% CI:1.3-38.9,P=0.032) were independent risk factors for SHAP.Conclusion:PCT,CRP,TNF-α,IL-6 and IL-10 were independent risk factors associated with SHAP.The combined detection of immune indexes is helpful to the early diagnosis and reasonable treatment for SHAP,worthy of application.

Keyword:Inflammatory factors; Immune index; Hyperlipidemia; Acute pancreatitis;

自1952年Klatskin和Gordon[1]首次报道了原发性高脂血症导致的急性胰腺炎(acute pancreatitis,AP)后,高脂血症性急性胰腺炎(hyperlipidemic acute pancreatitis,HLAP)被广泛研究。近年来大量流行病学及医学研究表明,HLAP的发病率逐年上升,其原因可能与生活水平的提高和膳食结构的变化有关[2-3],国外研究表明,HLAP约占AP总病例的1.3%~12.3%[4-5],已经成为导致AP的第二大病因[6-7]。与AP的其他病因相比,HLAP的重症比例、器官衰竭的发生率、复发率均高于其他原因所致的AP[8-9]。

研究证实,AP并不只是单纯的胰酶自身消化导致的结果,其发生、发展与机体自身免疫功能失调密切相关[10],多种炎症因子参与急性胰腺炎的免疫反应。现在越来越多的研究认为,重度急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)的核心问题是促炎-抗炎平衡障碍导致身体不足以拮抗过度的炎症反应[11-12]。然而现有的临床诊断标准以及治疗评估方法均没有纳入免疫相关指标。因此本研究即是评估降钙素原(procalcitonin,PCT)、C-反应蛋白(C-reactive protein,CRP),肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factorα,TNF-α),白介素6(interleukin-6,IL-6),白介素10(interleukin-10,IL-10)等免疫指标与HLAP病情严重程度的相关性,为早期预测HLAP的严重程度和临床治疗提供帮助。

1 资料与方法

1.1 一般资料

收集2017年6月—2019年12月绵阳市中心医院就诊的HLAP患者。根据临床资料和实验室结果评估患者病情,其中轻度HLAP(mild hyperlipidemic acute pancreatitis,MHAP)患者设为MHAP组,重度HLAP (severe hyperlipidemic acute pancreatitis,SHAP)患者设为SHAP组。本研究经绵阳市中心医院伦理委员会的批准。

1.2 纳入及排除标准

AP的诊断必须至少满足以下两点[13]:(1)具有AP特征性的腹痛症状。(2)血清淀粉酶和/或脂肪酶升高至正常上限的3倍以上。(3)特征性AP的腹部CT表现。SHAP诊断标准为急性胰腺炎伴有器官功能障碍,或出现坏死、脓肿或假性囊肿等局部并发症,或两者兼有。可以并发一个或多个器官功能障碍,也可伴有严重的代谢性功能紊乱,包括低钙血症(钙<1.87 mmol/L)。(4)在明确诊断AP后,若甘油三酯≥11.3 mmol/L或5.65~11.3mmol/L并伴有血清乳糜样则可诊断为HLAP。

排除标准:(1)其他原因导致的HLAP、服用抗凝药物、合并恶性肿瘤、活动性结核、慢性炎症性疾病、心血管疾病等;(2)资料不完整;(3)尚未完全缓解,但已经自动出院。

诊断明确后所有患者均禁食水、监测血糖、液体复苏、维持内环境平衡、抑酸抑酶、改善微循环等常规治疗。

1.3 免疫指标检测方法

在入院的第1天,取6m L外周静脉血来测量IL-6、IL-10、TNF-α、CRP及PCT水平。将收集的样品以1500 r/min离心10 min,分离血清并储存在-70℃冰箱中。在实验开始前于室温下复苏,并且使用相同批次的试剂检测。IL-6、IL-10、TNF-α、PCT采用双抗体夹心法(ELISA)检测,试剂采用西门子医疗产品(上海)有限公司产品,CRP采用乳胶增强免疫比浊法,试剂采用四川迈克生物科技股份有限公司产品。

1.4 统计学处理

采用spss26.0软件,正态分布计量资料以表示,组间比较用t检验,计数资料比较采用χ2检验。采用单因素及多因素Logistic回归分析以明确SHAP的危险因素,对单因素Logistic分析中有统计学意义的因子进行多因素Logistic回归分析。P<0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 SHAP组与MHAP组临床资料的比较

共有143例AP患者符合纳入标准,其中排除的患者包括服用抗凝药物2例、合并恶性肿瘤3例、慢性炎症性疾病5例、心血管疾病8例,资料不完整6例,尚未治愈而自动出院3例。最终总共有116例HLAP患者纳入本研究,其中男72例,女44例;年龄27~77岁,平均(47.9±10.2)岁。其中SHAP组患者42例,MHAP组患者74例。两组患者的临床资料见表1。两组患者年龄、性别、BMI、甘油三酯、总胆固醇水平相当,差异均无统计学意义(P>0.05);与MHAP组相比,SHAP组PCT、CRP、IL-6、IL-10、TNF-α浓度均较高,差异均有统计学意义(P<0.05)。

表1 SHAP组与MHAP组患者临床资料(n=116)

2.2 影响SHAP的危险因素

单因素分析显示PCT≥1.5μg/L、CRP≥11 mg/L、IL-6≥12 pg/m L、IL-10≥16 pg/m L、TNF-α≥11 pg/m L与SHAP相关(P<0.001);多因素分析显示PCT≥1.5μg/L,CRP≥11 mg/L、IL-6≥12 pg/m L、IL-10≥16 pg/m L、TNF-α≥11 pg/m L是影响SHAP的独立危险因素(P<0.05)。见表2。

表2 单因素和多因素Logistic回归分析影响SHAP的危险因素

3 讨论

AP是由胰酶异常激活所引发的急性炎症过程,引起胰腺的局部炎症反应,伴或不伴其他器官衰竭[14]。根据临床表现及病理分型可以将AP分为轻度AP和重度AP。重度AP具有病情进展快速、并发症多、治疗费用昂贵、治疗效果差等特点。早期重度AP即可引发多器官功能障碍综合征(multiple organ dysfunction syndrome,MODS)和全身炎症反应综合征(systemic inflammatory response syndrome,SIRS),其病死率高达20%左右[15]。研究表明,AP的预后与疾病的严重程度密切相关[16]。早期预测AP的严重程度和并发症发生率,从而实施针对性治疗可有效缩短病程,减少痛苦,降低死亡率[17]。

目前,免疫细胞过度活化-炎症因子理论被认为是AP最重要的发病机制。促炎-抗炎细胞因子理论表明,当身体受到不利的炎症刺激时,抗炎和促炎机制被激活,并释放大量促炎和抗炎因子,以调节炎症反应。IL-6、IL-10、TNF-α等是目前研究较多的炎症因子[18],抗炎因子和促炎因子通常处于动态平衡并保持低分泌状态,一旦这一平衡被打破,机体则表现为SIRS或代偿性抗炎反应综合征。由此可见,预防和治疗SAP的关键是维持两者之间的动态平衡。因此,通过早期检测免疫指标有可能为早期诊断SHAP以及制定临床诊治策略提供帮助。

本研究发现,CRP、PCT、IL-6、IL-10和TNF-α是与HLAP相关的独立危险因素(P<0.05)。CRP是反映炎症的敏感标志物之一,刘希龙等[19]通过对60例AP患者、32例非AP腹痛者,以及50例健康体检者血清CRP变化研究发现,检测CRP有助于早期预测AP病情。PCT是一种含有116个氨基酸的糖蛋白,在体内具有良好稳定性的急性期反应蛋白。郭浚等[20]通过对153例AP患者及150例健康对照者第1、4、7天血清PCT变化研究发现,PCT水平有助于判断AP的严重程度且更优于其他炎症因子指标。IL-6主要特征是诱导急性炎症反应,它可引起胰腺持续性坏死并加重全身状况。Sternby等[21]通过对175例AP患者的前瞻性研究表明,IL-6可以早期预测AP的严重程度,并且IL-6和CRP的联合检测对诊断AP的严重程度更敏感。IL-10是一种重要的抗炎细胞因子,可有效抑制促炎细胞因子如IL-6的合成[22]。相关实验证实,IL-10可以对抗炎症并减少氧自由基的释放,减少胰腺损伤[23]。TNF-α具有多种生物学效应。TNF-α在AP从局部病变到全身病变的进展中起重要作用。高明等[24]对68例AP患者进行研究后发现,TNF-α在急性胰腺炎的发展中起重要作用。

目前,临床常用的AP疾病评估方法主要有APACHEⅡ[25]、BISAP[26]、Ranson[27]和CTSI[28]评分等。尽管这些方法在早期评估AP病情及提供诊断和治疗策略上都发挥了重要作用,但在临床应用中由于受到评分项目较多及动态性和连续性观察较差等因素的影响而增加了使用难度,而且上述方法均不包括免疫指标的检测。本研究发现,通过对免疫指标的检测有可能为早期AP患者的疾病评估提供新的思路,其检测操作简单、结果准确可靠,值得临床进一步研究。

总之,PCT、CRP、TNF–α、IL-6和IL-10是与HLAP相关的独立危险因素,通过对免疫指标的联合检测有助于SHAP的早期诊断和合理治疗,建立包含多种免疫指标在内的AP评价体系有可能使患者的诊断和治疗获益。

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篇9

铁岭市妇婴医院检验科,辽宁铁岭 112000

[摘要] 目的 探讨干化学法和免疫胶体金法在尿液潜血检测中的差异,为尿液潜血临床治疗提供可靠的参考资料。方法 将该院在2012年7月—2013年7月所治疗的252例肾病患者作为此次研究的主要对象,分别给予免疫胶体金法、干化学法检验,两种检验组分别为实验组和对照组。利用人工显微镜技术对其质量进行监控,采用统计学对患者的检测结果进行对比分析,研究其灵敏度和特异度的差异。结果 用免疫胶体金法测得的结果表明,有0例假阳性患者,有3例假阴性患者,并且其概率是1.20%;用干化学法测得的结果显示,有0例假阴性患者,有56例假阳性患者,并且其概率为22.22%。结论 干化学法检测的灵敏度比免疫胶体金检测的灵敏度强,而免疫胶体金检测的特异度比干化学法检测的特异度要强,值得临床推广应用。

[

关键词 ] 干化学法;免疫胶体金法;尿液;临床效果

[中图分类号] R726.9[文献标识码] A[文章编号] 1674-0742(2014)11(a)-0190-02

在进行尿液潜血的实验中,一般采用的是干化学法,而干化学法检测尿液潜血存在着一定的不足,例如在假阳性和假阴性的检测上还有一定的缺陷[1],而免疫胶体金法的应用可以对其进行有效的弥补,通过两者之间的对比来进行差异分析,从而不断地提升尿液潜血检测工作的灵敏度和特异度。为探讨干化学法和免疫胶体金法在尿液潜血检测中的差异,为尿液潜血临床治疗提供可靠的参考资料,该研究选择该院在2012年7月—2013年7月所治疗的252例肾病患者作为对象进行研究,现报道如下。

1资料与方法

1.1一般资料

选取该院治疗的252例肾病患者作为此次研究的主要对象,随机分成两组,实验组为免疫胶体金法组,对照组为干化学法组,在病患当中有138例为女性,114例为男性,年龄1~23岁,平均年龄(9.12±0.36)岁。

1.2检测方法

要在早晨进行患者首次中断尿的取样,需要注意的是,必须在两个小时内进行三种比较重要的检验,即胶体金单克隆抗体隐血试验、红细胞镜检以及干化学检测。通过严密的操作和实验,得出精确的实验结果,并进行一定的记录工作,确保各种数据的有效性和适用性,为之后的尿液潜血分析提供宝贵的参考资料。

1.3尿液潜血检验结果的判断标准

阳性:镜检(﹢),免疫胶体金法(﹢),干化学法阴血(﹢);阴性:镜检(﹣),免疫胶体金法(﹣),干化学法阴血(﹣);假阳性:镜检(﹣),免疫胶体金法(﹣),干化学法阴血(﹢);假阴性:镜检(﹢),免疫胶体金法(﹢),干化学法阴血(﹣)。

1.4统计方法

对实验的结果进行统计分析。通过利用spss14.0软件将此次研究的数据进行仔细的统计和分析,其中计数资料用χ2检验,P<0.05为差异有统计学意义。

2结果

对照组假阴性为0.0%,假阳性为22.22%,观察组假阳性为0.0%,假阴性为1.20%,差异有统计学意义(P<0.05),具体的检测数据如表1所示。

3讨论

3.1干化学法的含义以及临床应用

干化学法分析技术是将液体检测样品加到特定的干燥试剂条上,通过被测样品的水分来实现特定的化学反应,再进行以酶为基础的干化学分析,这就是所谓的干化学法分析技术。其原理是根据红细胞中血红蛋白所含的血红素具有类似过氧化物酶的作用,通过血红素催化分解过氧化氢,释放出新生态氧,使邻联甲苯胺氧化呈色,从而达到检测隐血的目的[2]。干化学法分析技术不仅仅被广泛的应用于定性检查,而且还可以进行半定量和定量的深入分析,为临床检测提供了更大的便利。且干化学法分析技术通常是运用反射光度法或者是差示电极法来进行测量的,具有准确度高和测量速度快的特点,操作简单易行,不需要进行任何试剂储备或是试剂配制,而且其中的多层膜会对干扰性的物质进行过滤,产生化学反应的水分来源于标本液体成分,可以有效地提升检测的灵敏度[3]。但由于尿液中的成份很复杂,常存在一些类似过氧化物酶活性的物质,如肌红蛋白、某些细菌繁殖代谢产物等因素可造成干化学隐血结果的假阳性,而还原型谷胱苷肽、维生素C等还原剂存在时,可竞争性抑制反应,导致干化学法隐血检测结果出现假阴性。干化学法隐血阳性可通过镜检红细胞的存在来证实,但镜检未发现红细胞的现象在临床检验中也很常见,这既可能是红细胞溶解导致仅有游离血红蛋白存在(低渗尿液中红细胞溶解更为明显),也可能是干化学法检测隐血出现了假阳性;干化学法隐血阴性可能是真阴性,但也不能排除由于检测敏感性不足或维生素C、还原型谷胱苷肽等还原剂存在而导致的假阴性。且干化学法分析技术中在使用差示电极法原理时,其中的多膜片只能使用一次。在该研究中,对照组假阴性为0.0%,假阳性为22.22%,表明存在一定的假阳性及假阴性问题。

3.2免疫胶体金法的含义以及临床应用

免疫胶体金法其实是一种新的免疫标记技术法,主要是利用免疫学方法来对尿液潜血给予检测,能够有效地利用胶体金来作为示踪标记物,观察应用之后的特异性原抗体反应。胶体金标记技术就是蛋白质分子吸附在胶体金颗粒表面的过程,因为红色的胶体金颗粒遇到相应的抗原或是抗体就会聚集起来,达到一定密度就会呈现出肉眼可见的红色,所以在尿液潜血的检测中被推广利用[4]。

免疫胶体金技术在临床应用中具有可操作性,胶体金颗粒对于蛋白质分子的吸附主要是依据PH值,如果胶体金的PH值比蛋白质分子的等电点低,就会在聚集的同时不具备结合的能力,此外胶体金颗粒的离子强度、蛋白质分子量等也会影响到两者的结合[5]。但是这种技术的标记物制作简单,不需要使用一些放射性的同位素,也不需要荧光显微镜,使用的方法具有一定的敏感性和特异性,而且应用广泛,不仅适用于液相免疫测定,而且更适用于固相免疫分析、流式细胞术等领域[2]。在该研究中,观察组假阳性为0.0%,假阴性为1.20%,表明该方法检测尿液潜血不会具有假阳性问题,可有效解决干化学法所导致的假炎性问题。但是免疫胶体金技术也存在着不足,在检测的过程中会经常出现漏洞,它检测的灵敏度以及可重复性也有待提升,并且胶体金颗粒本身也具有一定的局限性,因此,以其为依托的免疫胶体金技术也是存在局限的,例如清洁度要求高、胶体金溶液稳定差、胶体金颗粒大、渗透能力大等都会影响到检测的结果。

3.3干化学法和免疫胶体金法在尿液潜血检测中的比较应用

在进行尿液潜血检测的过程中,必须要进行严格的观察和实验,确保检测的结果具有较高的灵敏度和特异度,从而为临床治疗提供宝贵的参考资料,提升医疗检测的质量和水平,例如在对患者进行临床检验的过程中,如果患者的镜检红细胞呈阴性,但尿液潜血检测结果是呈阳性,就应该考虑是不是患者的泌尿道划伤或者在血管的内外存在着溶血的现象,一般要对患者进行复诊,但是复诊会增加病患的医疗负担,并且很容易引发医患纠纷[6],因此,必须使用先进的检测技术进行高效检测,而干化学法和免疫胶体金法在尿液潜血检测中的应用使得检测的结果有了很大的保障。

对于检测的结果分析主要是通过干化学法尿液分析仪,利用这种自动化的仪器可以对尿液中的一些成分进行检测,并且使用的标本少,操作简单快捷,适合进行疾病筛查和临床疾病的普查,但是必须要控制好尿液放置的时间、阳光的照射以及药物性等,按照规定的要求进行操作,避免不利因素对检测结果的影响。使用该仪器可以把催化之后的氧化氢当作电子受体,从而实现色源的氧化呈色,以达到便于分析检测结果的目的[7]。

在患者的尿液中存在着有机红蛋白,并且尿液中的杂质具有过氧化酶相似的活性,尿液样本中的56例在镜显中没有发现红细胞,但是免疫胶体金技术检测的结果为阴性,通过两种技术的对比分析发现,56例样本呈假阳性[8]。由此可见,干化学法在进行尿液潜血检测时具有较高的灵敏度,可以被运用到临床筛查中,但是它也存在着缺点,其特异性并不高,很容易在进行结果检测时出现一定的误差,对患者的病情造成误诊,增加诊断费用,引发医患纠纷。

同时,在该实验当中,有156例尿液样本经过免疫胶体金法进行检测全部呈阳性,它的检测效率比干化学法检测的效率要高,优化率为73.83%,并且两者之间的差异有统计学意义,即P<0.05。但是有3例样本在高倍显微镜下呈阳性,而免疫胶体金法检测的结果却是阴性,出现这种状况是因为样本尿液的红细胞含量低,超出了其检测的范围,使得检测的结果出现了误差。

通过此次试验结果的分析可以明确的指示,免疫胶体金法在灵敏度上要比干化学法弱,而在特异度方面要比干化学法强,因此,在进行对病患的尿液潜血检测的过程中,要将两种方法有机结合起来,确保检测结果具有较高的灵敏度和特异度,提升检测工作的质量和水平。

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参考文献]

[1]田利荣,孙恒寿,张庆贤,等.尿液干化学法和镜检法检测尿液红细胞结果与性别因素的分析[J].中国社区医师:医学专业,2012,14(20):261-262.

[2]徐新,罗春丽,蒲军,等.干化学法尿隐血检测的可靠性分析[J].重庆医学,2012,41(18):1802-1804.

[3]杨宗树,张蕾.两种方法检验尿潜血阳性的准确度比较[J].吉林医学,2012,33(29):6301.

[4]郭宝丽.干化学法尿潜血异常结果分析[J].医学检验与临床,2011,22(4):100.

[5]张翠玲,王贞,白洪涛,等.一种鉴别尿潜血假阳性的方法[J].大连医科大学学报,2011,33(1):94-95.

[6]王树林.单纯干化学法检测尿液潜血假阳性鉴别与分析[J].内蒙古医学杂志,2013,45(4):483-484.

[7]孔京慧,宋银森.干化学法、免疫胶体金法在儿童尿液潜血检测方面特异性的差异[J].中国保健营养,2013,23(2下旬刊):993-993.

篇10

[关键词] 免疫组织化学;前列腺腺癌;应用

前列腺癌是一种常见的恶性肿瘤。在美国,前列腺癌是男性肿瘤中发病率最高的肿瘤之一,病死率也高居肿瘤病死率次席。我国不是前列腺癌高发区,但随着人均寿命的延长,膳食结构的改变和诊断技术的提高,前列腺癌的发病率在逐年提高。

病理检查是前列腺癌诊断的金标准。准确率约90%。。同时,前列腺癌的诊断,特别是对于针吸活检标本的判断、对病理学家来讲是一种极大的挑战,因为许多前列腺癌可以模拟良性前列腺腺体形态。在组织病理诊断中,人们一直苦于寻找不到一种可以明确区分良恶性肿瘤的阳性标记物。以往发现和(或)使用的标记物PSA检测在前列腺癌早期诊断中发挥了积极作用,也给病理诊断提出了新的课题。血清PSA筛选出大量小于1mm的肿瘤。要区分这些小肿瘤和正常前列腺组织,只用传统的HE染色是不够的。近年来,广泛使用了高分子量细胞角蛋白34βE12法。已知恶性腺泡没有基底细胞。如基底细胞34βE12染色阳性,可诊断为良性腺体。然而,如果染色结果为阴性,则可能出现一些漏洞。因为在某些良性损伤的前列腺病变中(如腺病和一些萎缩性腺体),其基底细胞可呈现片状或不连续状态,34βE12的阴性结果并不能判定它们的恶性。由于上述因素,限制了角蛋白特异性染色的使用价值。因此,如果有一种新的特异性染色试剂,将是非常有价值的。

1.P504S的发现

Jmng等通过分析前列腺和前列腺癌的基因表达方面的不同性,应用CDNA文库减影法和微检测筛查法,发现了三种前列腺组织和(或)前列腺癌特异的基因,其中最为有意义的一种基因即为P504S。

2.P504S生理功能及它在前列腺癌变中的作用

P504S基因所编码的蛋白由382个氨基酸组成,通过分析发现这种蛋白即为α甲酰基辅酶A消旋酶(AMACR)在支链脂肪酸的β氧化和脂肪酸氧化过程中起重要的作用。在正常生理条件下,AMACR是侧链脂肪酸和胆汁酸氧化代谢和生物合成的必要成分。前列腺癌的发生,可能是细胞质中侧链脂肪酸长期升高的结果,AMACR在前列腺癌中的高度表达提示AMACR在前列腺癌形成和发展过程中的潜在作用。

3.前列腺癌穿刺标本的P504S免疫组化染色

总的来说,前列腺癌的P504S免疫组化染色呈强阳性,在低倍镜下也能容易的观察到并能与正常组织区分。对于那些很小的、非典型的腺体,也能加以区别。“疑似前列腺癌的非典型性小腺泡增生”用HE染色不能确诊的穿刺标本。用P504S结合34βE12染色基本上能做出明确诊断。

4.P504S在放疗或内分泌治疗后前列腺癌中的应用

放射治疗是治疗前列腺癌的有效手段。放疗后正常前列腺上皮出现明显的退变,使其细胞形态类似恶性上皮。如果病人在放疗后出现血清PSA升高,必须区分肿瘤是否复发,以采取不同的治疗方法,组织学诊断是很重要的手段。P504S的使用给组织学诊断带来了方便。Jiang等认为放疗或内分泌治疗后前列腺癌标本对P504S的过表达及P504S的染色强度均无影响。

综上所述,P504S是一种有应用前景的前列腺癌早期诊断生物试剂。在前列腺腺癌穿刺活检标本病理诊断中有着极高的价值及意义。

参考文献:

[1]肖雨,陈杰,罗玉凤,等.前列腺腺癌中p504s的检测及意义.中华医学杂志,2004,8,17:1362-1366.