纪检员述职报告范文

导语：如何才能写好一篇纪检员述职报告，这就需要搜集整理更多的资料和文献，欢迎阅读由公务员之家整理的十篇范文，供你借鉴。

篇1

各位村民代表：

大家好，我是xx村纪检委员xxx，今天代表第二届村监督委员会作简要的三年来工作报告。

一、纪律监督方面

我村村干部严格按照值班表做好日常上下班、值班的工作，每月填写好考勤记录。认真对照村干部廉洁自律规定对村干部履行职责、依法办事进行监督。

二、财务公开监督方面

对村两委执行党和政府在农村的各项方针政策以及各项惠农政策及时进行监督，村里的耕地力补贴发放、大病救助办理，低保办理、公益性岗位用工劳务费用支出等全部纳入监督。

三年来，未发现有村干部违规使用资金、违法违纪现象发生。

三、村级重大事项与党务村务公开监督方面

一是对村级重大决策、扶贫项目等进行监督，一事一议项目的讨论、工程质量、跟进进度、验收、资金拨付情况进行监督。

二是监督村务党务的公开工作，认真审核党务村务公开的内容、时间、形式及程序，督促村两委及时公开群众关心的热点问题。

三是监督落实“四议两公开”工作法、监督村民代表会议决议授权的其他事项。

四、配合村委做好脱贫攻坚工作

篇2

仅供参考

各位领导老师，大家好！作为19级辅导员兼团总支书记，按照院总支分工，今年我分管团总支、19级日常管理工作。现将一年来工作报告如下，请予审查：

注重加强思想修养，提高政治素质。今年5月份以来，我积极参与了学校的创先争优活动，按照党委要求系统地学习了党的十七大和十七届三中、四中全会精神，认真开展了个人承诺、评诺工作，以学院教学活动为中心扎实高效地开展了学生日常管理工作，做到了“理论指导实践，实践兑现承诺”。11月份，按照校团委要求，认真开展了“五赛五优五在前”活动，布置召开了学院动员会、推进会，使**学院各班团支部在活动中明确了目标，强化了责任，提高了工作水平，进一步浓厚了优良学风氛围。

分管学院团总支工作，主要通过三个方面加强管理与引导。第一是以“团校培训”、“推优入党”、“主体团日”、“团代会”等活动为手段，加强青年团员的思想建设。10月份，通过召开全院团支书会议，经民主表决，组织审查，共推荐了46名同学入校党校学习；

团校培训和结业考试，我都到现场进行了安排组织；

组织了13个团支部开展了“庆祝祖国61周年”主体团日活动，共有2个班级获优秀组织奖；

**学院成届次化得团代会已形成特色，今年的团代会也得到了学工部和校团委的高度肯定。我深知团员思想政治建设任重而道远，只有通过会议上教育、实践上推进才能为青年团员的全面发展奠定基础。

第二是通过举办形式多样、内容各异的课外科技文体活动，全面丰富同学们的大学生活，提升其综合素质。

本年度扎实完成常规工作，保证日常稳定安全，提高思想道德水平，推进学风寝风建设,开展了通过举行各种学习座谈会以及各种竞赛活动，如“爱我中华”演讲比赛、辩论赛，开展课外阅读等，召开学习经验交流会，学术讲座，100%完成团费收缴，超额完成团属报刊征订任务，组织团校培训与学习，进行了素质认证的工作，精心组织了“寝室文明创建活动”;通过形式多样的团日活动推动学习贯彻科学发展观，培养积极向上的人生态度，乐于贡献社会的精神；

以提升学生的综合素质为目的，以科技文化体育竞赛活动为载体，继续开展具有我系特色的各项活动,取得了一系列成绩。课外科技创新方面，我指导学生获得湖南理工学院2020年寝室文明创建ppt制作竞赛三等奖；

今年4月，院团总支举办了颇具专业特色的“**学院第三届建筑文化节”，包括建筑历史文化知识竞赛，cad绘图竞赛，手工绘图竞赛，工程测量竞赛、学术讲座、测量竞赛等各项特色活动，在上届活动的基础上，增加两项专业活动，扩大规模，提高了影响力。在挑战杯中获得校“优胜杯”佳绩，其中获特等奖四个,一等奖两个,二等奖四个，在校科技创新节当中，19名同学获先进个人荣誉称号。考赛方面，我院团总支组织了校物理竞赛、大学英语竞赛及其他专业考赛，组织承办的我校第二届结构模型创作大赛，我院27名同学获奖，选拔的两组选手在湖南省结构模型创作竞赛中，获两个二等奖；

在湖南省力学竞赛中，我院学生获得一个二等奖，四个三等奖；

在湖南省测绘大赛中，我院学生获得二个二等奖；

在湖南省高校大学生数学竞赛（非专业组）中获得二个二等奖等佳绩。社会实践活动方面：我院团总支配合校团委成功举办了“新余坪、新规划”2020年暑期社会实践活动，是全国百个重点团队之一，服务团志愿者在对余坪乡28个行政村进行充分调研的基础上，为余坪乡党委行政提供全乡“三集中”、“三系统”的整体规划设计方案。活动取得了圆满成功，并在余坪建立了社会实践基地和青年就业创业实习基地，本人也获得了湖南省暑期三下乡优秀指导老师荣誉称号。体育运动方面：在2020年上学期的校篮球联赛中，我学院队员刻苦训练，奋勇拼搏，取得了篮球联赛全校第一名，实现三连冠的佳绩；

乒乓球联赛全校第五名；

网球联赛全校第六名；

“阳光杯”校足球联赛获全校第二名；

校运会上，我院代表队荣获团体总分第六名及体育道德风尚奖，取得了历史性突破；

此外，团总支还组织了学院08级班级足球赛、学院班级篮球赛活动等。文艺活动方面：3月底，成功举办了我院一年一度的superking歌唱比赛；

校华尔兹比赛中，我学院荣获三等奖佳绩；

校健康活力操比赛中获优秀组织奖，举办学院三.八节女生系列活动；

11月，我院团总支经过为期两个月的精心策划准备，举办了2020年**学院迎新晚会，盛况空前，赞誉不断。

第三是搞好团总支学生会干部队伍建设。

团总支的工作好不好，重点是学生干部队伍自身建设过不过硬。为做好这项工作，我不断琢磨、思考、研究。针对我院学生获奖面不高的情况，我向陈书记提议系统评选2009-2010年度院级先进班级与优秀个人，此次共评选出3个优秀班级，3名优秀班主任，205名优秀个人，评优的推行倡竖典型，极大地鼓舞了我院学生努力拼搏，勤奋学习，使我院学生的综合获奖面提高到50%，进一步增强了学生的学习自觉性和就业竞争力。每届团总支学生会换届我都会亲自对笔试精心命题，面试时我也会找该生的年级辅导员、寝室成员、上届学生及其本人多方面谈话，了解情况后再结合其平时表现、综合素养确定名单并报党总支审议。对成立后的班子，每两周一次的工作例会我必会参加，主要是部长述职，大家共同探讨工作思路，改进工作方法。我特别强调班子队伍的团结，并通过团学干部球赛、联谊会等活动拉近成员的距离。我还制定出台团学干部奖惩制度，鼓励团学干部进行学习竞赛，淘汰考试不及格的成员。通过这些措施，我致力形成干部队伍团结一致、奋发上进的氛围，致力于学生综合素质的全面提升。

今年校团委对四个学院的团总支进行了五四表彰，在院总支、行政的正确领导和全体团学干部的共同努力下，我院团总支被评为湖南理工学院2020年度五四红旗团总支。

分管19级学生日常管理，主要从组织和个人两个方面带动引导19级学生。一是组织各项活动让学生树立目标，提升综合素质。我认真组织了全年级的职业规划大赛，让度过大一迷茫期，迈入大二选择期的学生尽快明确奋斗目标，找到工作重心。同时从抓英语四级、举办学术讲座和“英语话剧之夜”等各项专业活动等方面来促进学风建设，通过公布年级到课率、卫生寝室名单、设四级过级率专项班费奖励等方法引导学生形成优良学风、寝风。

二是坚持严格管理和爱心教育相结合，通过个人方式带动影响学生。

我经常到课堂检查晚自习到课率和课堂到课率，严格考勤制度，以强调“五防”为手段加强安全纪律教育，同时经常下寝室与学生交朋友，多谈心，设立家庭贫困学生、心理问题学生、重大疾病学生及欠修学分学生档案，跟踪关注，实时介入，以个人经验和方式教育学生成长成人，以期通过宽严结合的方法推动优良学风养成。

篇3

主体：在工作中，虽然我只是客房服务员的角色，但我的工作也绝不仅仅是打扫卫生那么简单，其中也有一系列的复杂程序。在这儿的工作中，我发现要能自如的做好一项工作，就必须正视好自己的工作态度，以一种乐观的心态去面对着每一天的工作，无论工作是繁重、繁忙还是清闲，要用积极的态度去完成我们的每一份工作，而不是因为工作量比例的大小而去抱怨，因为抱怨是没有用的。我们更要做的是不要把事情想的太糟糕，而是要保持好的心态面对每一天。因为快乐的心态会使我们不觉的工作的疲惫。

我在工作中也有过失误，是客人、师傅们给了我一次又一次的鼓励，使我对工作更有热情。米尔兰德先生曾说过：年轻人天生就需要鼓励。是的，正是这一次次的鼓励使我在工作中勇敢的闯过难关，不断进步。

整天在酒店里辛辛苦苦的工作，天天都面对着同样的事物，做着同样的事情，真的感觉到好无聊，好辛苦。在那时我才真真正正的明白，原来父母在家里挣钱真的很不容易。

在这次实践中最让我有感触的就是在人际交往方面。大家都知道社会上的人际交往是非常复杂的。我想大家都很难说的清楚，只有经历了才能了解，才能有深刻的体会。

酒店就像是一个大染缸什么样的人都有，大家为了工作走到了一起，每个人都有自己的思想和个性，要想和他们搞好关系好就需要许多的技巧。在交往中如果我们不能够去改变什么东西，那么我们就要采用各种方法去适应它。这次实践让我掌握到了许多的东西，但最重的就是在待人处事，如何处理好人际关系方面有了很大的进步。同时在这次实践中也让我深深的体会到，在实践的过程中，我们应勤于动手，不断琢磨，不断学习，不断积累，不懂的地方要多问，请教师傅，多和同事们沟通，共同协作。

在一个酒店里面有许多的管理员，他们就如同我们学校里面的领导和班上的班干部。要想成为一名好的管理员就要有一套属于自己的好的管理方案。以最好的管理方法去管理好自己的每一位员工。但在管理的方法上我们要因人而异，面对不同的员工要有不同的管理方案，这样你的员工才会服从你。

在家里的时候我们有自己父母的照顾、关心、呵护，生活过的无忧无虑。但是只有我们走进了社会，参加工作的时候，不管我们遇到了什么样的困难、挫折，都要靠我们自己独自一个人去解决，去承担。在这一个月的实践中也让我懂得了自强自立。凡事都要靠自己，现在就算父母不在我的身边我也能够自己独立。

在这一个月的实践中我中途差点就放弃了，但是我还是撑了过来，我战胜了自己，我也能自强自立。一次宝贵的经历胜过我们在课堂里埋头于课本里绞尽脑汁，当我们还躲藏在家长老师的庇护之下对未来感到渺茫的时候，倒不如鼓起勇气勇敢的踏出一步，尽管这样的实践不能代表什么，但却能使我们感受到走出象牙塔后危机四伏的压力，有了这样的体验过后，当我们真正面对困难的时候，我们会发现自己比别人多了一份的淡定和冷静，还有慌乱整理错误的时间，千万不要忽视每一件细微之处，因为往往事情的结果就在这样一个不起眼的细节处决定成败。社会实践是艰苦的，但收获是巨大的。实践让我们的生活变的多姿，实践让我们的人生变得多彩。

社会实践是一笔财富。一分付出，一分收获，有付出，就一定会有收获。在社会实践中可以学到在书本中学不到的知识，它让你开阔视野，了解社会，深入生活，无限回味。更何况参加社会实践活动的过程、阅历本身就是一笔宝贵的财富。

社会实践是一种动力。看到在土地上耕种的农民，在工地上挥汗的工人，在边防上守卫的战士，我明白了书桌的分量，一种强烈的责任感油然而生，是人民哺育了我，是国家陪养了我，给了我知识和一切。作为一名大学生，在祖国需要的时候，我会无条件地把所学的知识和一切奉献给祖国和人民。

社会实践是体味人生的“百味筒。”让我深刻体味了一下生活的酸甜苦辣咸，为以后出了社会后将所面对的现实作好了心理准备，是自己到时候不在迷茫、不在彷徨。

篇4

【关键词】高职 传感器 立体教学

【中图分类号】 G 【文献标识码】 A

【文章编号】0450-9889（2015）06C-0191-02

一、背景分析

（一）传感器技术发展现状

传感器技术是信息时代信息获取的重要手段之一，它相当于系统的感觉器官，将各种各样形态各异的信息量转换成能够被直接检测的信号。“没有传感器就没有现代科学技术”，因此传感器与检测技术是机电一体化、电子产品的设计与制造、物联网、城市轨道交通控制等领域技术更新和发展的关键。

近几年来，传感器正处于传统型向微型化、数字化、智能化、多功能化、系统化和网络化等新型传感器转型的发展阶段，多传感器数据融合技术也正在形成热点。各种新型传感器的不断涌现和广泛应用对传感器及检测技术课程的教学和实验，如教学模式、实验内容、教学理念、教材开发、能力培养等提出了更新的要求。

（二）传感器教学现状

任何一种传感器在制造和装配完毕后都必须进行一系列的测试和实验，以确定传感器的基本特性，而目前传感器教学往往侧重讲授传感器的测量原理等基础知识，但未能联系实际，割裂了科学技术与社会的密切联系。课时安排中增加了实验的比重，锻炼学生的动手能力，但实验内容主要涉及测量原理，对实物缺乏感性认识，使得学生在学习了传感器与检测技术课程后却不认识实际使用的传感器、不会根据具体的检测任务选择合适类型、精度的传感器等。强调传感器的专业性强和应用性广，忽略了“标准”“规范”等德育教育；课堂教学的效率和质量大打折扣。

（三）国内外研究现状

针对目前的教学情况，国内外的专家学者展开了大量的研究。国内的研究课题主要集中于教学内容和教学方法的改革，如南京工业大学“传感器实验与理论教学改革的探讨和实践”，无锡机电高等职业技术学校“传感器教学信息化资源开发研究”都取得了一定的研究成果；而国外很多研究机构则主要针对学生在学习传感器时概念转变和能力考察展开研究：康科德教育研究组织Sharimecalf博士开发了一套基于传感器技术的教材，该教材以探究教学模式为理论基础，以基于标准的主题为活动内容，旨在能够最大程度的体现出传感器技术对于学生概念理解和能力培养方面的优势；美国斯坦福大学和著名的研究性教师MissyHolzer设计了基于传感器技术的开放式探究课程及学习活动，旨在为学生提供一种可持续探究和科学学习的方法。

二、立体教学软件包的构建与实施

本课题旨在立足于高职层次，精简传感器教学内容，以应用为导向，探索“建模―模块化”的教学模式，整合各类教学资源，开发课程的立体教学软件包，提高教与学的时效性和实效性。

（一）教学内容项目化

针对高职层次，针对专业方向，选取实际应用中涉及到的检测案例，例如生活中最常用的电子体重秤、轨道交通中的列车时速测量、列车运行定位，工业控制中的加热炉物料检测、压力监测，家用电子产品的温度测量等内容，细化为工作小项目，突出实践，强调测量与分析；再对现有的课程内容加以精简、优化和重组，使理论为实践服务，同时也可以引入科技新成果，以应用为导向，构建适应于高职层次的、不同专业需求的教学内容。

（二）教学方式立体化

走出教室，探索“建模（知识储备）―设计（检测电路的设计、仿真与制作）―试验（数据检测与分析）”的教学模式，将多媒体、教科书与视频、录像、实验设备等结合起来，将对传感器理论的学习立体化，提高教学质量与效率，进行创新型人才教育。

1.建模

通过展示实物、观看视频等方式提出检测任务，指导学生根据提出的项目任务分析检测要求，包括测量内容、测量精度、检测器件与工具等。对任务的分析需要学生去了解详尽的传感器资料，查阅一些专业文献，获得有价值的应用模型，再根据需要建立自己的电路模型，查找IC手册，选择合理的元件及型号等，这就是一个学生知识储备的过程。

2.设计

检测电路初步模型建立后，指导学生借助Protues、Matlab、EWB等仿真软件来设计传感器信号处理电路，通过仿真模拟运行，不仅可以使学生检查电路的工作点、校准测量，还可以直观地观察输出效果；也可以通过实验室中的传感器实验箱完成电路方案的论证，通过不断的仿真、查看、调整、优化，最终确定本项目需要的检测电路并制作。

3.试验

检测电路制作完成后，指导学生构建尽量贴合实际的测量情境，在实验室或者户外完成测量数据的采集，并对比仿真调试和实际调试的结果，分析并形成书面报告。

在整个从提出任务到得到数据的过程中，教师只是个“桥梁”，在学生从“建模”到“设计”之间搭建一个知识平台，提供参考资源、解答理论疑问等；在学生从“设计”到“试验”过程中提供仪器与工具、提供参考方案等。学生的主体地位得到充分发挥。

（三）教学资源多元化

在以上的教学过程中，资源的配备和使用是进行有效设计的前提。利用网络百科，特别是专题网站资源，将多媒体、仿真软件、虚拟实验室与实验仪器相结合，建立传感器与检测技术教学资源库，提高课程教学、课后辅学、学生自学的效率和效果。

1.课堂教学与微课相结合

制作传感器课程教学与实验的微课，以视频为主要载体，针对课程内容的某个重点或者难点，记录教师在课堂之外的教学指导或演示过程，弥补课堂教学时间和空间的不足。

2.专题网站资源与网络百科平台相结合

“传感器之家”“中国传感器网”等专题网站中有详细的传感器种类、型号、新动态、传感知识、传感论坛等模块。应用专题网站进行在线学习不仅可以减轻教师的教学压力，还能扩展学生的知识面，大大提高学习效率，训练学生信息检索、资料筛选的能力。

“百度百科”“维基百科”等网络百科平台是内容开放、自由的、涵盖各领域知识的信息收集与平台，应用这些网络百科作为传感器学习的知识平台，不仅可以通过网络获得知识来补充教学的不足，还可以参与到百科词条的建立、修改、交流和分享。

3.多媒体教学课件与视频录像结合

由于传感器的敏感元件检测比较细微，肉眼是很难看到诸如应变片的变形、磁电式磁场的变化等现象的，因此可以通过多媒体或者flash软件制作相应的动画，再配合视频录像，便于教学后学生对传感现象的理解。

4.虚拟实验室与真实仪器仪表结合

可以用于传感器仿真的软件主要有protues、matlab、EWB、Labview等，教学中可以通过仿真软件进行电路设计与模拟，再通过实验器材观察真实的实验现象，验证仿真结果，优化设计结论。

（四）课程评价实时化

研究建立一个知识、技能、素质综合考量的评价体系，评价过程贯穿于整个“建模”“设计”与“实验”过程，考核学生查阅资料，分析问题的能力，仪器仪表和仿真软件的操作使用能力，电路的设计与制作能力，设计文档的组织与撰写能力，对知识点的消化与吸收情况，自学与创新能力，以及团队合作能力。

三、教学案例

下面以测力的电子秤为例（图示1）说明立体教学软件包的使用与效果。

图1 传感器课程“电子称”学习与实践流程

以上过程可见，传感器立体教学软件包既能够指导学生进行知识学习，又能够指导学生进行实践设计，若在传感器的课堂学习过程中使用该教学软件包，那么教师的意义在于贯穿指导，锻炼学生的自学能力，引导学生进行创造性劳动。

传感器的教学涵盖了城市轨道交通控制、铁道车辆、电气自动化技术、机电一体化技术、应用电子技术、电子信息技术等诸多电子电气类和轨道交通类专业，如何针对不同专业、不同层次、不同需求进行传感器教学设计，提高课程教学的实效性和时效性，是本课题研究的重点。立足于高职层次，以应用为导向，利用各种教学资源，研究高职传感器与检测技术的教学内容、教学模式、能力培养，设计并开发的该课程的立体教学软件包，应用为教学、辅学和自学工具，最大程度地提高传感器学习的效率和效果，实现创新人才教育和德育培养。

【参考文献】

[1]徐天龙，李长城.传感器和检测仪表的现状及发展趋势分析[J].民营科技，2011（12）

[2]林云峰.论检测传感技术在机电一体化中现状、应用及其发展[J].制造业自动化，2011（33）

[3]陆光华.警惕传感器教学的几个误区[J].物理通报，2012（4）

[4]张红.结合传感器课程特点，推进创新型人才教育[J].高教论坛，2010（10）

篇5

【关键词】 川芎嗪注射液; 腹膜间皮细胞; 高糖; ⅰ型胶原; 基质金属蛋白酶?1; 基质金属蛋白酶抑制剂?1; 体外实验

zhu gs, he js. j chin integr med. 2009; 7(1): 65?69.

received june 18, 2008; accepted july 22, 2008; published online january 15, 2009.

indexed/abstracted in and full text link?out at pubmed. journal title in pubmed: zhong xi yi jie he xue bao.

free full text (html and pdf) is available at .

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doi: 10.3736/jcim20090110open access

effects of ligustrazine injection on high glucose?induced type ⅰ collagen, matrix metalloproteinase?1 and tissue inhibitor of metalloproteinase?1 expressions in human peritoneal mesothelial cells in vitro

gui?song zhu, jin?song he

department of nephrology, the affiliated drum tower hospital, nanjing university medical school, nanjing, jiangsu province 210008, china

objective: to investigate the effects of ligustrazine injection on type ⅰ collagen, matrix metalloproteinase?1 (mmp?1) and tissue inhibitor of metalloproteinase?1 (timp?1) expressions in human peritoneal mesothelial cells (hpmcs) cultured in high glucose conditions.

methods: hpmcs were isolated from human omenta by trypsin digestion method and subcultured. then, the hpmcs were divided into normal control group, high glucose group and high glucose plus low?, medium? and high?dose ligustrazine (10, 20 and 40 mg/l ligustrazine respectively) groups. semi?quantitative reverse transcription?polymerase chain reaction was used to detect the expressions of type ⅰ collagen, mmp?1 and timp?1 mrnas in hpmcs. proteins of type ⅰ collagen, mmp?1 and timp?1 in culture supernatants were measured by enzyme?linked immunosorbent assay (elisa). cell protein concentration was measured by trace bicinchoninic acid method to correct the elisa assay results.

results: ligustrazine injection could significantly decrease high glucose?induced type ⅰ collagen and timp?1 expressions in a dose?dependent manner both in protein and gene levels (p<0.05, p<0.01). in addition, medium? and high?dose ligustrazine injection could significantly increase mmp?1 expression which was inhibited by high glucose concentrations (p<0.05).

conclusion: ligustrazine injection does not only decrease type ⅰ collagen synthesis, but also promote its degradation by modulating unbalanced mmp?1/timp?1 expression in hpmcs cultured in high glucose conditions.

keywords: ligustrazine injection; human peritoneal mesothelial cells; high glucose; type ⅰ collagen; matrix metalloproteinase?1; tissue inhibitor of metalloproteinase?1; in vitro

腹膜纤维化是腹膜透析治疗的主要并发症，最终导致腹膜功能衰竭，这是腹膜透析患者退出治疗的主要原因［1］。腹膜纤维化以细胞外基质（extracellular matrix, ecm）的过度沉积为特点［2］。研究表明，ecm的过度沉积是由于ecm合成与降解失衡而引起［3］。ⅰ型胶原是腹膜纤维化中主要的ecm［4］，其降解过程受基质金属蛋白酶?1（matrix metalloproteinase?1, mmp?1）及其特异性抑制剂金属蛋白酶组织抑制剂?1（tissue inhibitor of metalloproteinase?1, timp?1）调控［5］。有研究证实，高糖能上调腹膜间皮细胞（human peritoneal mesothelial cells, hpmcs）ⅰ型胶原和timp?1的表达，降低mmp?1活性［3］。本研究通过观察川芎嗪注射液对高糖刺激下hpmcs ⅰ型胶原、mmp?1和timp?1表达的影响，探讨川芎嗪在防治腹膜纤维化中的作用及其机制。

1 材料和方法

1.1 试剂和主要仪器 川芎嗪注射液（江苏苏中药业集团股份有限公司，批准号为国药准字h20020630）；50％葡萄糖注射液（江苏方强制药厂，批号为200710111）。磷酸盐缓冲液（phosphate buffered solution, pbs）、胎牛血清（fetal calf serum, fcs）、trizol和rpmi?1640粉剂等（gibco公司）；胰蛋白酶和琼脂糖粉等（promega公司）；ⅰ型胶原、mmp?1和timp?1酶联免疫吸附测定（enzyme?linked immunosorbent assay, elisa）试剂盒（adl公司）；二喹啉甲酸（bicinchoninic acid, bca）蛋白含量检测试剂盒（南京凯基生物科技公司）；ⅰ型胶原、mmp?1、timp?1和β?actin引物，m?mlv第一链cdna合成试剂盒和taq酶等（invitrogen公司）；抗细胞角蛋白抗体、抗细胞波形蛋白抗体、第ⅷ因子抗体和抗白细胞cd45抗体（北京中山生物技术有限公司）。nu?2500e二氧化碳培养箱（nuaire公司）；全自动酶标仪（biobank公司）；生物电泳图像分析系统（上海复日科技有限公司）。

1.2 实验方法

1.2.1 hpmcs的培养与鉴定 取来自南京大学医学院附属鼓楼医院普外科择期腹部手术患者（排除尿毒症、腹膜炎）捐献的大网膜组织，按文献［3］方法原代培养hpmcs，按1?3传代，第3代细胞用于实验，每次实验均由来自3个患者的标本进行3次独立实验。倒置相差显微镜观察hpmcs呈多边形，似铺路鹅卵石样外观；免疫组化鉴定抗细胞角蛋白抗体和抗波形蛋白抗体染色阳性，抗第ⅷ因子抗体和抗白细胞cd45抗体染色阴性。

1.2.2 实验步骤和分组 hpmcs用含1％fcs的rpmi?1640培养液同步培养24 h后分为5组（每组设3个样本）：正常组（完全培养液）、高糖对照组（2.5％葡萄糖）和高糖（2.5％葡萄糖）加低、中、高剂量川芎嗪（10、20和40 mg/l）组。各组完全培养液均为含有15％ fcs的rpmi?1640培养液。细胞置于37 ℃、5％ co2培养箱培养48 h。

1.2.3 elisa法检测细胞上清液中ⅰ型胶原、mmp?1和timp?1含量 分组干预48 h后，离心收集上清液，按elisa试剂盒说明书检测ⅰ型胶原、mmp?1和timp?1表达水平。用0.1 mol/l naoh溶解细胞沉淀，bca蛋白检测试剂盒测定细胞沉淀中蛋白质浓度，用相应蛋白质浓度结果校正检测结果。

1.2.4 半定量rt?pcr 分组处理同上。采用trizol一步法提取总rna，2 μg总rna进行逆转录合成cdna，50 μl反应体系进行pcr扩增，以β?actin作内参照（引物序列及反应条件见表1）。1.5％琼脂糖凝胶电泳（110 v，15 min）进行pcr产物鉴定，电泳图像分析仪扫描分析，mrna相对含量用其pcr产物吸光值（absorance, a）与β?actin a值的比值表示。引物及pcr反应条件见表1。

1.3 统计学方法 实验数据用x±s表示，采用spss 15.0软件进行统计分析，组间差异比较采用单因素方差分析，两组间均数比较采用lsd?t检验。检验水准α=0.05。 表1 ⅰ型胶原、mmp?1、timp?1和β?actin引物序列及pcr反应条件

2 结 果

2.1 上清液中ⅰ型胶原、mmp?1和timp?1蛋白质水平 与正常组比较，高糖对照组上清液中ⅰ型胶原和timp?1含量显著升高（p<0.01），mmp?1含量显著下降（p<0.01）；与高糖对照组比较，低、中和高剂量川芎嗪组上清液中的ⅰ型胶原和timp?1含量显著降低（p<0.05, p<0.01），且两者均呈量效关系，中、高剂量川芎嗪组上清液mmp?1含量显著增加（p<0.01）。见表2。表2 各组上清液中ⅰ型胶原、mmp?1和timp?1蛋白质表达

2.2 hpmcsⅰ型胶原、mmp?1和timp?1 mrna的表达 与正常组比较，高糖对照组hpmcs ⅰ型胶原/β?actin mrna和timp?1/β?actin mrna分别上升（15.43±0.83）倍和（4.19±0.09）倍（p<0.01），mmp?1/β?actin mrna下降（86.9±0.44）%（p<0.01）；与高糖对照组相比，低、中、高剂量川芎嗪组ⅰ型胶原/β?actin mrna和timp?1/β?actin mrna表达水平均显著下调（p<0.05），两者均呈量效关系，中、高剂量川芎嗪组mmp?1/β?actin mrna表达显著增加（p<0.05）。见图1和图2。

3 讨 论

高糖透析液导致ecm过度沉积是腹膜纤维化的病理基础［2］，研究表明，高糖不仅增加hpmcsⅰ型胶原的表达，并且引起ⅰ型胶原降解酶系mmp?1/timp?1的表达失衡［3］。我们的研究结果与之基本相同，此外我们发现，川芎嗪能显著对抗高糖的上述作用。

在生理条件下，hpmcs可以产生一定量的ecm和mmps/timps［3, 6］。mmps是降解ecm的蛋白水解酶系，几乎能降解全部ecm成分。timps是内源性分泌蛋白，作为mmps的特异性抑制因子，其n'端可与相应的mmps催化活性中心的锌离子结合而抑制其催化活性［7］。本实验通过研究川芎嗪对hpmcs在高糖刺激下主要ecm ⅰ型胶原及其降解酶系mmp?1/timp?1分泌及表达的影响，旨在探讨川芎嗪对hpmcs在高糖环境下ⅰ型胶原的合成和降解的干预作用及其机制。结果显示，川芎嗪能显著降低高糖所致的ⅰ型胶原的过度合成，同时显著下调timp?1的表达，增加mmp?1的表达，提示川芎嗪亦能通过调节mmp?1/timp?1的平衡，从而促进ⅰ型胶原的降解，减少ecm沉积。由此我们推测，川芎嗪可能具有预防或延缓腹膜纤维化的作用。

川芎嗪是中药川芎的有效成分之一，属酰胺类生物碱，具有活血化瘀的功效。药理实验证明，川芎嗪具有扩张血管、改善微循环、调节免疫和钙离子拮抗的作用［8］。目前川芎嗪抑制ⅰ型胶原、timp?1和增加mmp?1表达的机制尚不清楚。以往的研究发现这可能与抑制转化细胞生长因子β1（transforming growth factor?β1, tgf?β1）表达有关［9, 10］。tgf?β1是重要的致纤维化细胞因子，参与了腹膜纤维化的病理过程［2］。tgf?β1可增加ⅰ型胶原的合成，并且抑制mmps的活性而激活timps，使ⅰ型胶原降解减少［3, 11］。有研究报道，川芎嗪能降低多种细胞如心肌细胞、肝细胞和血管内皮细胞的胶原合成和timp?1表达，而增加mmp?1的分泌和表达，进一步的研究发现这可能是通过抑制tgf?β/smads信号传导通路继而抑制tgf?β1表达的结果［9, 10, 12］。我们前期研究证实，川芎嗪能下调高糖致hpmcs tgf?β1的表达（文章待发表）。因此我们推测，川芎嗪抑制tgf?β1的表达可能是其抑制hpmcs ⅰ型胶原合成和调整mmp?1/timp?1表达平衡的机制之一，其具体机制将是我们下一步要研究的内容。

综上所述，川芎嗪能抑制高糖致hpmcs ⅰ型胶原的过度合成，并且通过调节mmp?1/timp?1的平衡，促进ⅰ型胶原降解，从而减少ecm的沉积，防止腹膜纤维化的发生和发展。因此，川芎嗪可能具有预防或延缓腹膜纤维化的作用，这对腹膜纤维化的机制及其防治的研究有一定借鉴和应用价值。

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