实验动物学总结范文

导语：如何才能写好一篇实验动物学总结，这就需要搜集整理更多的资料和文献，欢迎阅读由公务员之家整理的十篇范文，供你借鉴。

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1、利用学校午会时间，对全校师生进行控烟知识的广播宣传教育，营造无烟校园环境。

2、各班围绕世界无烟日开展了一次黑板报展评活动，板报主题鲜明，内容生动活泼，通过黑板报的展示，同学们了解了许多关于禁烟的知识，从而更加增强了禁烟的意识。

3、5月31日前夕，组织各班开展”主题活动，使同学们了解吸烟对人类的严重危害性，从而从内心里远离烟草，保护自己的健康。

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关键词：角色互换法；教学；医学实验动物学

中图分类号：G642.4？摇 文献标志码：A 文章编号：1674-9324（2013）47-0245-02

实验动物学是一门综合性应用学科，其应用几乎涉及到生命科学的各个实验领域。短短几十年的发展，目前已经形成了自己独特的科学体系，对生命科学研究起着越来越重要的作用[1]。在医学院校的研究生的培养体系中，实验动物疾病模型是本门课的重点，对于研究生将来开展科研实验必不可少，因此，如何更好地提高教学效果，很多人都提出了各种教学方法，如开发实验动物学自助学习软件[2]、开展网络教学[3]以及建立三维医学实验动物学教学体系[4]等方法。而以上方法各有优缺点，可以增强学生自学能力，然而对于提高学生团队协作精神和提高学生口头表达能力方面有所欠缺。特别是作为医学院校，研究生对《医学实验动物学》课程内容最感兴趣的就是实验动物模型的建立，这也是他们将来最有可能接触和应用的。而研究生的专业众多，在讲解动物模型的时候教师不可能将每个专业的动物模型都进行讲解，因此，如何能让学生更好地掌握自己本专业的常用的动物模型，也让更多同学了解不同专业不同动物模型的制作方法和技巧，这是一个值得深思的问题。崔淑芳[5]提出了在《实验动物学》中实行错位教学法，可以更好地提高学生的主动性和语言表达能力，提高其自主性，笔者结合实践，尝试将此角色互换法应用于“实验动物疾病模型”章节的教学中。此方法就是让学生走上讲台讲解实验动物学知识，教师和同学们在下面共同学习的教学形式。通过让学生自己查阅文献资料，准备本专业的动物模型的具体制作方案，上台和大家分享，以达到更好地让学生掌握教学内容，促进学生未来科研水平的提高，提高教学效果的目的。

一、角色互换学法的实施

1.准备阶段。由于研究生教学是大课，不同专业的学生在一起，往往有100多人一个教室上课，因此首先将学生进行分组，将同一个专业的研究生分为一组，如果人数较多则可以8～10人一组，选出组长，让组长进行管理分配。教师可以提供一些网站和书籍让学生查阅，也可以讲解一些文献检索的方法，让学生自由发挥主观能动性，根据自己的专业查找相关文献资料，自己设计动物模型，然后制作幻灯片，每个组派代表上台讲解本专业的动物模型制作方法。

2.学生上台讲解动物模型。如果是设计问题法，则首先由组长派出代表上台针对问题进行讲解，每个小组10分钟，包括讲解6分钟，学生提问和回答4分钟。讲解完后是学生提问时间，课堂上的同学可以针对动物模型的制作细节进行具体提问或者补充，让大家能更好地理解其制作过程细节。通过讲解可以发现有的学生是亲自做个某些动物模型，因此讲解非常细致生动，能更好地把实验过程中可能遇到的问题和解决办法都讲出来，让此动物模型变得更加贴近生活和生动具体。当然，有的问题也不知道答案，这种情况可以让他下去查找答案，下次课回答。有时也会针对对方的观点进行反驳，双方唇枪舌剑，从而使课堂气氛进一步活跃起来。在讲解过程中，发现有的同学喜欢发言，不会控制时间，对技术简介和讨论进行长篇大论地阐述，这时教师要注意灵活驾驭课堂，提醒学生发言的时间，否则就会影响教学安排和进度。

3.教师进行补充和总结。教师在学生讨论或者讲解完毕后，可以补充介绍最新的动物模型制作的最新进展，如帕金森动物模型以及一些最新的计算机模拟模型，让学生对动物模型的未来和现状进一步了解。如2012年首个真正伤寒小鼠模型由哥伦比亚大学医学院建立，2013年3月11日，欧盟委员全面禁止在动物身上进行化妆品成分测试，并禁止销售含动物测试成分的新化妆品等。同时将“3R”原则引入动物模型，让学生注重保护动物福利。2013年，Junhee Seok及其同事研究了创伤、烧伤和来自例如大肠杆菌等细菌的毒素是如何影响病人的遗传应答的，发现小鼠模型的模式与人类响应模式匹配得不好，小鼠模型不能很好地模拟人类炎症疾病等。并讲解一些现实生活中某些研究生忽视动物福利造成动物痛苦的例子，并指出这种行为对实验结果的影响，从而让学生能更好地保护动物福利，使实验更加规范，实验结果也更可靠。教师需要对难点进一步地讲解分析，同时可以播放一些FLASH动画或者相关视频，才能使抽象的问题形象化，从而让学生轻松地理解其内容。最后，结合本次课堂内容，由教师进行总结归纳。同时也要指出学生演讲的不足之处，提出改进要求。

二、效果评价分析

通过让学生对角色互换学法的满意度进行问卷调查，认为可以提高积极性和兴趣的学生占94.5%，认为丰富了教学内容的占96.3%，说明绝大部分学生欢迎这种新的教学模式。通过学生亲自参与教学这种新形式，改变了过去教师提问、学生答的模式，让学生成为了“教师”，亲自参与到教学过程中，并上台进行讲解，能最大限度地发挥学生的创造性和积极性，解除厌学心理，同时锻炼学生的口才。学生们通过彼此分工合作，查阅大量书籍、网络和文献资料，开阔了眼界，并掌握了教学内容。而某些热点问题通过学生的讨论，丰富了问题的答案，也使教师得到启发，使师生在共同学习中提高了自己。

三、讨论

角色互换法是完全让学生自己去准备教学内容，可以极大地锻炼学生的自学能力和团队合作精神。而且通过上台演讲，锻炼了学生的口才，让学生真正地成为了学习的主人。而小组成员间的分工合作，使他们充分认识到团队的力量和智慧，也有效地锻炼了学生间的协作能力和团队精神。同时也要求教师有出色的课堂驾驭能力，熟悉多学科知识，具有较强的组织领导能力。教师也能从各个专业的动物模型中得到启示和灵感，不断改进教学方法，对今后提高教学和科研水平大有好处。其次，由于存在学生人数多的问题，因此很难使每个同学都能上台演讲。为了克服以上情况，需要教师不断提高自己的业务水平，结合多种教学方法，尽可能地让更多的学生有机会上台讲解，提高学生的逻辑思维和口头表达能力。最后，为了提高学生的理解和记忆，可以准备部分一些复习题发给学生，使其通过做题来更好地掌握内容，也有利于学生期末复习。

参考文献：

[1]汤球，江鹏亮，孙伟，等.医学实验动物学实验课教学改革探讨[J].西北医学教育，2008，16（3）：523-525.

[2]胡樱，杨斐，俞伊军，等.实验动物学自助学习软件的研发[J].实验动物与比较医学，2012，32（3）：228-233.

[3]刘宇，商海涛，唐欢，等.实验动物学网络教学改革初探[J].黑龙江教育：高教研究与评估，2011，（10）：41-43.

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【关键词】实验动物；安全管理

1实验动物的来源与共患病的防护

实验动物的来源是至关重要的。一些单位没有合格的实验动物生产许可，使用的实验动物只能外购。由于实验动物的条件要求严格，具备生产合格证的单位少，成本高，且使用条件有限，使实验动物在购买上也有一定困难，致使市场会出现一些无证的动物被销售。这样的动物不仅不能够保证质量，其提内携带的传染源也无法估量，可能带有一些共患病，随时危害实验动物工作者的人身安全。如兔、犬等可能会带有人假结核、狂犬病，大小鼠的流行性出血热，即使正规渠道的动物，我们也不能确定其是否完全健康。所以对外引入的动物，应进行隔离检疫。一般的隔离时间：大小鼠和兔一周，犬21天，在未知是否患有共患病之前，要按传染性动物进行操作和个人防护。

2实验动物环境的标准化与动物的健康管理

实验动物环境的标准也是影响实验结果的重要因素。清洁级或SPF级别的实验动物只能在相应的实验动物环境内生活，我们外购合格的实验动物，由于自身条件的限制，将其防如普通的环境中进行临时的饲养观察与检疫，这样就降低了实验动物自身的级别，自身免疫弱的动物可能会不能适应很快死亡，免疫强的动物即使生存下来体内也会带有一些其他的细菌、病毒或寄生虫，这样对工作者构成的一定的威胁，更影响了实验的准确性。在检疫期如发现病情，不能控制则坚决处死、彻底灭菌，消灭传染源。感染性动物使用过的笼具等设备要严格消毒，消毒水浸泡30 min，紫外灯照射约30min，放入储藏室备用。保证良好的合格的生活环境，营养条件，保证实验动物的健康。

3 进入实验动物设施内要高度重视消毒防护处理

在预防和控制传染病的工作中，主要切断血液中潜在的、具有传播性的病毒因子、被病原体污染的血液、体液、分泌物、组织器官以及其他感染性材料。要高度重视，提高警惕，自觉严格执行消毒、灭菌和隔离等各项规程制度，尽力阻断细菌病毒在人群中传播。为此，当工作人员进人控制区时，一定要戴口罩、帽子、穿一次性隔离衣。对动物的排泄物、血液、引流物及污水要及时进行清理并彻底消毒处理，严禁将非经消毒处理的废水直接倒人下水道。对污染垃圾、动物尸体要装黄色塑料袋，送专门处理机构焚烧。每个实验间每天应开紫外线灯消毒2次，每次约30 min，对地面要用消毒剂擦拭，用过的地板擦要浸泡在消毒液内。实验人员实验完毕后，定要按照制度要求自污染走廊出去，并将口罩、帽子、一次性消毒衣、鞋套脱掉放进指定的污桶内，然后换穿自己的衣服离开洁净区，重新洗手后离开。

4 动物实验时要警惕刺伤引起血源性疾病的感染

被污染的锐器损伤是导致血源性疾病传播、病毒扩散的主要途径。首先要预防锐器伤的发生，操作中需做到锐器不能直接用手传递，术中不允许将刀、缝针、剪刀直接递交到术者手里，需放在盘中传递，严防刺破皮肤。当手持针头和利器时，不要使锐器面对着人，以免刺伤他人。在实验狗的手术过程中，使用锐器的操作人员受伤时有发生，我院在上半学期手术学实验中，被器械伤到的学生不在少数。手术过程中传递刀、针、剪等锋利器械和清洗器械时，均可能被锐器损伤，使病毒直接进入人体血液而被细菌感染。

5 实验动物工作人员要提高自我保护意识

为了避免不必要的损害，使动物细菌、病毒不被扩散，从事实验动物的工作人员及研究者，必须进行自我保护教育，掌握常规的传播疾病知识，使每位动物实验工作者充分认识到它的危害性，了解其传播途径和危险因素，在思想上引起高度重视。建立安全的管理制度提高防御意识，推广有效防止动物性传播疾病的隔离方式，尽量减少操作人员致病的危险，积极推行既具科学依据，又有切实可行的标准预防手段。

参考文献

[1]李华、王禄增、史小萍、张景云、肖玉平、王太一.实验动物学。2006

[2]方喜业.医学实验动物学,1995

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关键词 动物资源；动物学实验室；开放；黑龙江大庆

中图分类号 Q915.81 文献标识码 A 文章编号 1007-5739（2012）03-0046-02

Discussion on Opening of Zoology Laboratory Based on the Condition of Animal Resources in Daqing City

YUAN Gai-xia YIN Ya-jie WANG Yang NIE Chun-yu XU Tai-hai

（School of Live Science，Daqing Normal University，Daqing Heilongjiang 163712）

Abstract Animal experimental material is the basis for opening of zoology laboratory. Based on the animal resources in Daqing City，the status and role of laboratory opening in zoology teaching were introduced，the precondition of laboratory opening，including the real situation of animal resources investigation in Daqing City and strengthen teachers team construction，in order to provide a way for permanently implement of laboratory opening.

Key words animal resources；zoology laboratory；opening；Daqing Heilongjiang

大学生的专业素质教育目标是增强学生的实践能力，培养其创新意识，强调知识、能力、素质的协调发展，而实验室开放项目是实现这一目标的重要途径[1]。动物学是生物专业的基础平台课，同时又是一门实践性很强的课程，在当今社会对人才的应用能力要求越来越高的形势下，实验室开放项目的实施无疑为动物学在应用型人才培养的目标上增添了力量。动物学实验室开放项目对提高教学效果及培养学生的专业能力已获得共识，关键的问题是动物实验材料的供给。实验材料是实验室开放的物质基础，是实验室开放项目能否进行、能否达到预期效果的决定因素之一。针对此问题，课题组以大庆本地动物资源为依托，在动物学实验室开放方面进行积极探索，经过多年的教学实践，积累了一定的教学经验，现总结如下，以供参考。

1 大庆市概况

大庆市位于松嫩平原腹地，海拔150 m 左右，为温带半干旱半湿润草甸草原黑钙土地带。气候属于东北高寒地带，冬季漫长、严寒干燥。草甸草原、内陆湿地和水域是该区的主要生态系统类型。现已建立了不同级别、不同类型的自然保护区12处，面积达2 622.88 km2 [2]。该地区不仅石油资源丰富，而且土地资源、草场资源、水资源、湿地资源、旅游资源、动植物资源也较丰富[3]。

大庆市在资源开发的同时，注重生态环境的再建设，在植树造林、园林绿化方面投入较大的精力，取得显著的效果。人均地区生产总值8.06万元，居全省第1位。立体交通体系初步形成，机场已建成通航，市内铁路、公路四通八达，为动物的运输交流提供了便利。

2 大庆市动物资源状况

大庆地区的动物资源包括天上飞的、地上跑的、泥土中藏的、水中游的、动植物体寄生的及市场销售的。参考刘凌云等[4]主编的《普通动物学》教材，其涵盖无脊椎动物中的原生动物门、腔肠动物门、扁形动物门、假体腔动物、环节动物门、软体动物门、节肢动物门、棘皮动物门门的动物，只有几个小动物没有发现，如多孔动物门、半索动物门、触手冠动物，由于这些动物绝大多数生活于海水中，又缺乏大众化的食用与观赏价值，在市场上没有销售[4-5]；涵盖脊椎动物所有的纲如圆口纲、鱼纲、两栖纲、爬行纲、鸟纲及哺乳纲。综合相关的研究粗略估计至少有800种，完全可以满足动物学的实践教学。但是，不足之处是：大庆地区由于冬季漫长，春、秋两季低温天气持续的时间相对较长，绝大多数野生动物的活跃期限制在4月下旬至10月上旬，严重制约了动物实验室开放项目长期、稳定的实施。

3 实验室开放在教学中的地位

实验室开放项目是指在实验课堂之外的实验内容，实验室开放是动物学实践教学的重要内容。动物学的实践教学内容一般包括实验、野外实习、实验室开放及毕业论文等4个方面。由于学习方式的不同，4个方面在实践教学中的作用各有侧重[6]。实验是动物学课程的必修内容，主要目的是培养学生实验操作的基本技能，在此基础上，延展实验思路和方法、启迪创新思维等。实习教学是在动物学课堂教学完成后又一独立的授课内容，是实验与理论课内容的补充与升华，是激发学生原始创新意识的源泉。实验室开放是实现个性化教学，满足学生求知、探索和创新的欲望，侧重于创新精神与能力的培养[7]，其特点是在实验时间、实验内容及教学方式上对学生开放。毕业论文是学生综合知识在动物学实践研究中的应用，一是对学生的专业知识及能力进行一次全面的考核；二是对学生进行科学研究基本功的训练。因此，实验室开放是实验、实习内容的延展与提升，同时又是毕业论文的演练。

作为生物专业的专业基础课，动物学在人才培养中具有举足轻重的作用，动物学的基本知识理论、动物资源信息及研究方法不仅是动物生理学、动物生态学等相关学科的重要基础，而且是学生学习后续课程如生物化学、微生物、细胞生物学、分子生物学、发育生物学、免疫学等学科的宝贵财富，因为后续课程或多或少、直接或间接以动物材料为基础。实验室开放随着后续课程的开设，以学生为纽带或者通过教师间的交流延续深入下去，为后续课程的实验室开放项目奠定基础。

4 实验室开放的先决条件

4.1 摸清地方动物资源状况，扩充实验开放项目

实验材料是进行实验室开放的首要问题，从开放项目的可操作性及实施效果上考虑，依托本地动物资源是解决实验材料的最佳途径。本土的动物一般分为两大类，一类是土生土长的野生动物；另一类是市场销售的动物，市售的既有当地产的也有外地运输来的。指导教师应根据专业特长及当地动物特点，以常见实验动物的种类调查为中心，结合研究团队的科研实力，以项目为载体有效设立研究内容。研究项目可以是教研方面的，也可以是科研方面。在研究的同时，穿插实验室开放，以研究带动实验室开放，以实验室开放促进研究。也可以全面启动实践教学的各个环节，使各教学内容互相促进，相得益彰。随着研究的推进，研究可以向纵深层次发展或非专业特长的领域逐渐渗透。研究内容丰富了，实验室开放项目就会源源不断地产生，实验室开放的个性化教育特色才能有展现的空间。由于种种原因，对大庆本土的动物资源研究较少，或者以前较好的采集点，由于环境的变化荡然无存。在此情况下，决定以当地无脊椎动物的研究为龙头项目，拟定了“大庆地区无脊椎动物适时实验材料”的研究，此项目又成功由校教改工程项目滚动为省高教学会项目。在此项目的带动下，课程组在建系的8年间，以当地的动物资源为主研究对象成功申报了1项国家青年基金项目、1项国家自然基金合作项目、1项省自然基金项目，2项省厅项目、3项校自然基金项目。这些研究极大地拓宽实验室开放的研究思路，为实验室开放提供了素材保障。

4.2 加强指导教师的队伍建设

在动物资源条件已经具备的情况下，指导教师的知识面及科研水平是决定学生实验室开放效果的主限因素之一。动物资源是客观的、呆板存在的，需要专业教师通过自己的知识水平与科研能力把它们激活，变为教学、科研及生产、生活的资源，使实验室开放有更宽广的思路与操作平台，从而更好地发挥其在应用型人才培养中的作用。同时，在实验操作中往往会涉及多个专业多个层次，会提出各种各样的问题，要求指导教师协助解决，这就要求指导教师有更多的知识储备和更高的实验技能，更加自觉地努力学习新知识，不断提高自身业务水平[8]。作为以应用型人才培养为目标的一名高校专业教师，只有注重知识的广与博，才能在应用型人才的培养中扮演好教师的角色，使人才培养目标真正落到实处。教师应在以动物学为核心的知识领域拓展知识面、开阔视野，在深层次的研究水平上更进一步，在教学与科研中，打破动物季节性分布的限制，科学研究、实验内容的安排、实验室开放及毕业论文不仅可以在动物生长旺季进行，而且同样可以在大庆漫长的冬季利用动物标本、室内动物或者在室内培养研究等进行。

5 结语

作为一名动物学指导教师，必须具备宽泛的动物资源知识及多样的实验技能，才能在学生的实验室开放教学中发挥充分有效的作用，才能避免环境条件的限制，连续为学生提供实验室开放的基础条件及思路。实验室开放是一个系统工程，它的实施，不仅依靠指导教师与学生双方面的共同努力，而且对实验室提供的条件、实验室对项目的管理、实验室开放的考核及相关的激励机制都有比较严格的要求。教育工作者在教学过程中，应较好地解决各方面的问题，以推动实验室开放项目在应用型人才培养中发挥更大的作用。

6 参考文献

[1] 顾福根.植物组织培养实验室开放式管理的实践体会与改进措施[J].实验室科学，2009（2）：142-145.

[2] 陈正言，马凤荣，宋秀娟.大庆市自然保护区现状与建设[J].国土与自然资源研究，2006（1）：34-35.

[3] 丁贵生，肖红，魏云慧.试论大庆市生态市建设的利弊因素及保障措施[J].科技信息，2008（7）：313.

[4] 刘凌云，郑光美.普通动物学[M].北京：高等教育出版社，2008.

[5] 袁改霞，徐长君，张国发，等.大庆市区常见实验无脊椎动物的种类调查[J].大庆师范学院学报，2008，28（2）：134-137.

[6] 袁改霞，聂春雨，殷亚杰，等.“蛾类外生殖器解剖”在动物学实践教学中的应用探索[J].四川动物，2011（1）：148-149.

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【关键词】 2型糖尿病；动物模型；研究概况

随着经济社会的发展，人们的饮食结构、生活方式等发生了很大改变，糖尿病发病率显著上升，尤其T2DM占了较高比例，大概占了糖尿病发病率的90%。T2DM是因人体胰岛素分泌相对不足或靶细胞对胰岛素敏感性降低继而引发糖、蛋白质、脂肪和水电解质等代谢紊乱所导致的疾病。患者典型表现为三多一少，即多饮、多食、多尿表现，同时还伴有身体消瘦、疲乏、烦躁、口渴等临床症状。

选择一些合适的动物模型进行动物试验成了我们研究糖尿病的良好途径，我们可以从中比较一些糖尿病药物的作用效果以及其药动学的特点，在临床用药上对评价某套治疗方案的可行性及预后等具有十分重要的参考意义。

目前研究的临床T2DM动物模型主要集中在大鼠上，这可能是由于大鼠作为T2DM动物模型相对较稳定且与人T2DM表现相似的优点。因此我们在下面综述近几年来国内外有关临床T2DM大鼠模型研究的情况。

总体上来说，目前临床T2DM研究的大鼠模型主要分为两类，一类是自发性T2DM大鼠模型，另一类则是实验性T2DM大鼠模型，考虑到成本及方便程度，目前以后者居多。

1 实验性T2DM大鼠模型

1.1 单纯高脂高糖引发的T2DM 在试验中，通过较长时间给予大鼠过量的高糖高脂饮食，发现能够诱导出较满意的T2DM大鼠模型，从而能为进一步研究奠定良好的基础。目前认为其机理可能是高糖高脂饲料会导致胰岛B细胞超负荷，进而使胰岛细胞发生损伤、萎缩甚至死亡，胰岛的功能因此下降，继而建立起伴胰岛素抵抗的T2DM模型。鲁瑾[1]等采用61%的高脂饮食，饲养大鼠7周后，大鼠就出现了高胰岛素血症，且形成了明显的胰岛素抵抗，是一个十分可靠的胰岛素抵抗模型。张丽锋[2]等给予W istar大鼠脂肪热比为59%的饲料, 喂养4周，均出现胰岛素抵抗，多项研究试验表明高脂饮食可以诱发产生可靠的糖尿病大鼠模型。

1.2 应用STZ药物诱导产生的大鼠模型 由于高糖高脂饲料相对用时较长，且饲料成本相应较高，因此合理使用链脲菌素(STZ)是目前许多研究者所推崇的造模方法。研究认为，STZ具有选择性破坏胰岛B细胞的作用，使大鼠产生胰岛素抵抗的糖尿病。

目前，利用这种方法诱导模型主要分为直接使用STZ注射建模以及配合高脂饮食建模两种，而后者又可以按照注射STZ前进食和注射STZ后进食分为两类。

王志刚[3]等将大鼠禁食16~ 18h 后尾静脉注射STZ( 25mgPkg) , 两周后, 做葡萄糖耐量实验, 发现动物已经出现糖耐量异常, 表明T2DM模型建立初步成功。

结合饮食和注射STZ的优点，可以缩短造模时间，提高模型的成功率现在是许多研究者所推崇的。洪丽莉等[4] 选SD大鼠, 先喂以高脂高糖饲料4周,饮3%的果糖水,导致胰岛素抵抗,继以小剂量STZ( 30 mg /kg)腹腔注射1次, 2周后诱导建立了稳定的T2DM模型。

当然也有研究者通过先注射STZ，然后再用高脂饮食培养建模，同样也获得了成功。刘欣秋等[5]在实验中采用这种方法，8周后成功建成T2DM大鼠模型。

目前这两种建模方法的优点和缺点尚在研究中，到底是先注射STZ好还是后注射好，仍亟待深入考察比较，以便为临床T2DM动物模型建立一定标准和指南，更快更好地促进生物医学的发展。

1.3 STZ诱导糖尿病大鼠模型的成功率影响因素研究现况 药物诱导糖尿病动物模型的成功率受诸多因素影响, 如给药剂量、给药方法、STZ的不同溶剂、大鼠品种因素等。目前STZ的剂量大小还没有统一认识, 造模成功率报道也不尽相同。

李桂云等[6] 将4周龄SPF级雄性SD大鼠高糖高脂饲料喂养4周, 分别按50mg/ kg 、40mg/kg、30mg/kg体重剂量腹腔注射STZ建立T2DM大鼠模型, 结果: 40mg/kg剂量组大鼠的成模率最高( 73.3% ), 成模大鼠具有胰岛素抵抗、高血糖、高胰岛素血症和血脂紊乱的T2DM临床特征。认为短期高糖高脂饮食联合STZ腹腔注射建立T2DM SD大鼠模型的STZ最佳注射剂量为40mg/kg。

而宋立江等[7] 研究了不同溶剂溶解STZ对造模成功率的影响。结果pH4. 5柠檬酸PBS造模成功率高达86. 7%, 认为pH 4. 5柠檬酸PBS可以作为理想的溶剂。郭学军等[8]W istar大鼠成模率和死亡率均高于SD大鼠。

1.4 转基因大鼠模型 转基因技术的应用极大地促进了动物医学研究的发展，将人类的基因片段或者是多肽、蛋白质等转到大鼠上，可以制备出T1DM或T2DM动物模型，且相比以上的较稳定，容易繁殖培育，同时因与人类具有同源性，更能反映基因作用的真实性，是目前较为先进的技术。

但这种方法的弊端有两个：第一，因人类的基因片段、蛋白质对大鼠来说，都是外源蛋白，由于作用环境改变，可能会造成相应的蛋白因差异而未能达到相应临床表型；第二，在诱导过程中，还需要有比较合适可靠的载体，以使基因片段能顺利移植到动物体内，进而克隆繁殖，这无论在时间、经济上还是技术上成本都是比较高的。

2 自发性T2DM大鼠模型

自发性2型糖尿病大鼠目前主要有中国地鼠、G /K 大鼠、OLETF大鼠、ZDF大鼠等, 这类大鼠多数肥胖, 有明显的高胰岛素血症, 类似人T2DM的发病特征, 国外研发口服抗糖尿病及并发症的新药多选用这类动物。[9]

2.1 中国地鼠自发性模型 原为我国黄河以北一些省份的优势鼠种。由美国Meier和Yer2ganian将黑线仓鼠通过近亲繁殖获得近交系,该类地鼠具有自发性、遗传性糖尿病特点，发病率可达90%，雌性多于雄性。以中轻度高血糖为特征, 血清胰岛素表现多样, 胰岛细胞的病变程度不一, 类似于人T2DM。

2.2 G/K大鼠 G/K 大鼠来源于日本,是一种常用的自发性非肥胖型T2DM实验动物模型, 具有高血糖、高胰岛素血症、胰岛素抵抗出现早的特点。认为其发病机制可能是由于骨骼的糖元合成酶不能有效地将多余的葡萄糖转化为糖元贮存起来, 从而使动物出现高血糖。其具有与人类T2DM 微血管并发症相似的改变。

Partha B认为G/K是研究糖尿病最好的动物模型, 但是其发病过程中B细胞数目降低后有一个增殖的过程, 这与人类发病情况有很大不同, 这也是人们限制G/K大鼠应用的关键[10]。

2.3 ZDF大鼠 肥胖Zucker大鼠其特征为肥胖、胰岛素抵抗、高胰岛素血症、高血脂、高血糖、高血压,受常染色体隐性遗传基因影响,其隐性基因名称为fa。有研究者发现其肥胖与血脑屏障上的瘦素载体减少有关, 瘦素与中枢神经系统受体结合能够启动调节摄食和机体能量平衡,此平衡被打破可导致肥胖发生。肥胖Zucker大鼠是研究糖尿病血管病变的理想模型[11]。

3 总结

综上所述，我们发现不同类型T2DM模型各有其优点和缺点，在选择临床T2DM动物模型的的过程中，应密切结合课题要求、实验室条件和经费状况等具体现状进行确定。

目前认为人工诱导产生的大鼠糖尿病模型具有价格便宜、稳定性强、并且容易诱导的特点，较受推崇。但是也可以看到，现阶段糖尿病动物模型的研究仍然处于一个发展阶段，许多技术还不成熟。有些指标还没有建立，各家有各家的说法，成功率的报道也是不尽相同，例如使用多少剂量的STZ合适等。具体我们列数如下：

3.1 使用多少剂量的STZ能够诱导出稳定的临床T2DM大鼠模型。

3.2 需要在何时搭配高脂饮食，使用STZ前或后，以便培养出更稳定的大鼠模型。

3.3 有没有更好的制剂能够替代STZ，从而缩短诱导时间。

许多研究者正在探索与人类糖尿病发病相似，且具有稳定可遗传等优点的大鼠模型。很多问题仍然需要解决和研究，相信随着现代科学技术的发展，以及人们对糖尿病的深入研究，其大鼠模型种类会呈现增长，它将成为人们研究T2DM的有力工具，为治疗糖尿病，造福人类发挥重要的作用。

参考文献

[1]鲁瑾,邹大进,张家庆.高脂饮食诱发大鼠胰岛素抵抗后肿瘤坏死因子2A的改变[J] .中国糖尿病杂志,1999,7(5):284~ 286.

[2]张丽锋,毕会民,王蜀鄂等.葛根素对胰岛素抵抗大鼠脂肪组织中糖原合成酶激酶3B表达的影响[J].中国临床药理学与治疗学,2005,10 (12): 1340~ 1343

[3]王志刚,岳辉.丹参对实验性2 型糖尿病大鼠肾损害的保护作用[J].牡丹江医学院学报,2005,26(1):20221.

[4]洪丽莉,许冠荪,申国明,等.SD大鼠2 型糖尿病模型的建立[J]. 实验动物科学与管理,2005,22(4):1~ 3

[5]刘欣秋,雷鸣.实验性非胰岛素依赖性糖尿病模型探讨[J]. 黑龙江医药科学, 2001,24(3): 18

[6]李桂云,吴正治等.深圳中西医结合杂志,2007,17(2):74

[7]宋立江,刘长青,郭金铭,等.不同溶剂在链脲佐菌素血糖模型的作用比较[J]. 现代预防医学, 2008, 35(17): 3454

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篇6

【关键词】 干燥综合征；白芍总苷；饮水量；唾液量；T细胞亚群；小鼠

干燥综合征（sj?gren's syndrome，SS）是一种以外分泌腺高度淋巴细胞浸润为特征的自身免疫性疾病，最常见的症状是口眼干燥。SS在中医文献中无相似的病名记载，目前多数学者将其归属中医学“燥证”范畴，气阴两虚、津血亏虚等是本病的致病因素，虚、疲、毒相互交结是本病的病理关键。目前，尚无根治性药物及方法，多采取替代及对症治疗以减轻口眼干燥等症状。白芍总苷（TGP）是白芍的主要有效成分，具有抗炎、镇痛、多途径双向免疫调节等作用[1]。有研究表明，TGP能改善SS患者口眼干燥症状[2]，但其作用机制尚不清楚。本课题组对TGP进行了一系列实验研究，现总结报告如下。

1 实验材料

1.1 实验动物 选择鼠龄为8周的BALb/C近交系小鼠60只，SPF级，雌雄不限，体质量20 g左右，购于重庆医科大学实验动物中心，合格证号SCXK（渝）2006104。严格遵循“3R”原则，实验动物饲养室自然光线，温度控制在18～19 ℃，湿度控制在40%～70%，动物自由摄食、饮水。实验结束以引颈法处死。

1.2 主要药物及试剂 TGP，宁波立华制药有限公司生产，生产批号060301；醋酸泼尼松，天津药业生产，生产批号20060512；百白破疫苗，北京天坛生物制品股份有限公司生产，生产批号2006060402；弗氏完全佐剂，Sigma USA生产，生产批号019k8719-81-2； PBS缓冲液，博士德生物工程有限公司生产，生产批号AR0030；CD4、CD8试剂，晶美生物制药有限公司生产，生产批号FG260611。

2 方 法

2.1 分 组 将60只小鼠随机分成空白对照组、模型对照组、TGP高剂量组、TGP中剂量组、TGP低剂量组、醋酸泼尼松组，共6组，每组10只。

2.2 动物模型的建立[3] 对模型对照组，TGP高、中、低剂量组，醋酸泼尼松组小鼠分别进行造模：各取10只同种小鼠，于无菌条件下取颌下腺，匀浆后加PBS稀释到1 000 μg・mL-1，加入弗氏完全佐剂，调整浓度为500 μg・mL-1，以每只1 mL的总量于小鼠的尾根部多点注射免疫，同时于背部注射百白破疫苗0.5 mL。在造模后第5周处死模型对照组小鼠2只，通过病理形态学观察，模型小鼠颌下腺发现特征性淋巴细胞浸润、腺体萎缩等SS典型病理改变，表明造模成功。

2.3 药物剂量换算 TGP成人每日用量为1 200 mg，

参照人和动物间按体表面积折算的等效剂量比值

表[4]，换算成小鼠用量180 mg・kg-1；醋酸泼尼松成人每日用量20 mg，换算成小鼠用量3.0 mg・kg-1，

一般以成人体质量为60 kg为基础计算。

2.4 给药方法 空白对照组正常饲养，不予任何药物；模型对照组予生理盐水灌胃；TGP高剂量组予TGP136 mg・d-1灌胃；TGP中剂量组予TGP 68 mg・d-1灌胃；TGP低剂量组予TGP 34 mg・d-1

灌胃；醋酸泼尼松组予醋酸泼尼松0.08 mg・d-1灌胃。

2.5 观察指标

2.5.1 小鼠饮水量的测定 每3天加水150 mL，3 d后称量水量，投入的水量分别减去剩余水量即为每3天每笼小鼠饮水量。

2.5.2 唾液量测定 灌胃2周后将无菌的脱脂棉球制成干重为5 mg的棉球，放入小鼠的后颊部，

5 min后取出，电子天平上称重。唾液分泌量（mg）=棉球湿重-棉球干重。

2.5.3 小鼠唾液腺T细胞亚群含量 小鼠眼眶取抗凝血2 mL，取20 μL CD4/CD8 FITC/PE标记抗体加入流式管底部，取100 μL EDTA抗凝的小鼠外周血加入5 mL流式管底部并轻轻振摇，使其与抗体充分混匀，室温避光孵育20～30 min，加入2 mL红细胞裂解液，混匀后避光放置10 min，溶解红细胞至液体透亮。将样品管以1 000 r・min-1离心5 min，充分倒去上清液，加入2 mL PBS洗液重悬细胞，1 000 r・min-1离心5 min，弃去上清液；

加入适量标记二抗，室温避光孵育20 min；加入2 mL

PBS洗液重悬细胞以1 000 r・min-1离心5 min，

弃上清液；加入0.5 mL PBS洗液重悬细胞，流式细胞仪检测。

2.6 统计学方法 采用SPSS 15.0软件进行统计分析。计量资料以表示，采用t检验，方差不齐用秩和检验，等级资料间比较采用秩和检验，计数资料用χ2检验，以P < 0.05为差异有统计学意义。

3 结 果

3.1 各组小鼠饮水量比较 各组小鼠饮水量在造模初期无差别，抗原注射后12 d小鼠饮水量显著增加，模型对照组小鼠饮水量逐渐上升直到实验结束，而TGP各剂量组和醋酸泼尼松组小鼠饮水量在一定程度上降低，并维持在一定水平。见表1。

3.2 各组小鼠唾液流量变化比较 造模2周后，与空白对照组比较，模型对照组小鼠唾液流量明显减少（P < 0.01）。各给药组与模型对照组比较，均能不同程度增加小鼠唾液流量（P < 0.01或P < 0.05）；以TGP中、高剂量组，醋酸泼尼松组作用较明显，TGP低剂量组作用较弱。见表2。

3.3 小鼠外周血中T淋巴细胞亚群检测 与空白对照组比较，模型对照组小鼠外周血CD4+T细胞、CD4+/CD8+明显升高，差异有统计学意义（P < 0.01）；

而CD8+T细胞平均含量虽降低，但差异无统计学意义（P > 0.05）。各给药组均能降低CD4+T细胞含量（P < 0.01或P < 0.05），以TGP中、高剂量组及醋酸泼尼松组的作用较明显，三组之间比较，差异无统计学意义（P > 0.05）；TGP低剂量组与TGP高剂量组、醋酸泼尼松组比较，差异均有统计学意义（P< 0.01）。各给药组对CD8+T细胞含量影响不大，差异无统计学意义（P > 0.05）。各给药组均有降低CD4+/CD8+比值的趋势。醋酸泼尼松组、TGP中剂量组、TGP高剂量组能明显降低CD4+/CD8+比值，与模型对照组比较，差异有统计学意义（P < 0.01），但与TGP低剂量组比较，差异无统计学意义（P > 0.05）。见表3 、图1。

4 讨 论

SS是一种以侵犯外分泌腺体为主的慢性自身免疫性疾病，临床表现以口眼干燥为特征，其病理表现主要为外分泌腺淋巴细胞及浆细胞局灶性浸润，淋巴细胞中又以CD4+T细胞为多，CD4+/CD8+T比例明显高于正常人，并与疾病严重程度有关，且B淋巴细胞的活性与T淋巴细胞缺陷有关[5]。人外周血T淋巴细胞根据细胞膜表面表达的受体分为三大不同亚群，临床通常检查CD3+、CD4+和 CD8+T 淋巴细胞亚群。CD4+T细胞又称辅 /诱导性T细胞（ T helper/ inducer，Th /Ti辅助细胞），主要功能是促进免疫细胞增殖、分化，协调细胞相互作用， 激发免疫应答。CD 8+T细胞又称抑制性/细胞毒性T细胞 （Tsuppressor /cy totox ic，Ts/Tc）抑制免疫应答。T淋巴细胞亚群可反映机体细胞免疫的基本状况，CD4+/CD8+被称为免疫调节指数，可在一定程度上反映机体的细胞免疫状态。

本实验研究显示，模型小鼠CD4+和CD4+/CD8+较正常小鼠明显升高，提示T淋巴细胞调节紊乱在SS的发生与发展中有重要作用，与众多研究结果具有一致性。对SS模型小鼠，予TGP灌胃后，均能不同程度地提高其唾液流量、减少其饮水量，尤以中剂量、高剂量效果明显，与醋酸泼尼松组相当。同时实验结果显示，各给药组均能降低SS模型小鼠外周血中CD4+T细胞及CD4+/CD8+T水平，以TGP中、高剂量组及醋酸泼尼松组作用明显，且TGP中、高剂量组对CD4+T细胞及CD4+/CD8+T比值的影响效果与醋酸泼尼松组相当。因此，我们推测TGP治疗SS的机制可能是通过抑制CD4+细胞活化，减少Th1/Th2细胞因子的产生，从而维持Th1/Th2平衡。

现代中医认为SS属中医学“燥证”范畴，其发病以气阴二虚为多，脾气虚和肝肾阴虚引起的津液生成和敷布异常是SS发病的关键。在SS的治疗方面，目前西医无有效的治疗办法，在急性期多采用激素治疗，长期服用副作用较大。中医主要采用滋阴润燥、健脾补血，结合清热解毒、活血化瘀、宣肺布津等方法，疗效颇佳。由于中医多是采用汤剂加减的方法治疗，效果虽好，但用药不便。白芍性凉，味苦酸，微寒，具有补血柔肝、滋阴润燥之功效，TGP是其主要有效成分，近年来对其药理作用的研究以及在风湿免疫病中的应用研究方面都取得了较大的进展[6]，研究者普遍认为TGP具有抗炎、镇痛、多途径双向免疫调节等作用。本研究显示，TGP对SS模型小鼠具有与激素相当的疗效，同时能改善其免疫学异常，可能替代激素在SS中的使用，从而避免其副作用，值得进一步深入研究。

5 参考文献

[1] 李俊，粱君山，周爱武，等.白芍总甙对B淋巴细胞增殖和白介素1生成的调节作用[J].中国药理学与毒理学杂志，1994，8（1）：53-54.

[2] 鲁静，沈晖，刘永斌，等.白芍总苷治疗干燥综合征的临床观察[J].中国现代医学杂志，2006，16（1）：

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[3] 肖林，杨军，暨兴华，等.干燥综合征动物模型的建立[J].重庆医学，2003，32（3）：306-308.

[4] 吴端生，张建.现代实验动物学技术[M].北京：化学工业出版社，2007：283.

篇7

【关键词】急性胰腺炎

doi:10.3969/j.issn.1006-1959.2010.05.333 文章编号:1006-1959(2010)-05-1328-02

动物急性胰腺炎(acute pancreatitis,AP)现已成为普通外科常见的急腹症,具有发病急,病情重,死亡率高的特点,至今仍是普通外科的一大难题。其中急性重症胰腺炎(severe acute panceratitis,SAP)由于常并发多器官功能衰竭和严重感染,死亡率进一步增高可高达30%[1]而对其机制尚无明确的结论,缺乏特效的方法阻止胰腺组织坏死的发生和发展,临床治疗也很棘手。所以,建立一种符合临床急性胰腺炎动物模型以便探讨发病机理,治疗显得尤为重要。大鼠作为动物模型有能比较准确地重现疾病、方便饲养和扑捉、容易存活、价格经济的特点现已被广泛应用。本文对大鼠急性胰腺炎模型的各种制作方法以及进展作一综述,以便实验研究中合理选择和采用。

1.AP动物模型常见的方法

1.1 胰胆管注射法:1980年Aho等首次采用切开大鼠十二指肠前壁,再经十二指肠插入塑料管,向胰胆管内逆行注射牛璜胆酸钠。从而制得了急性胰腺炎模型。但易导致肠出血和狭窄,使实验失败。该方法几年来不断地改进和完善,至1992年Schmidt采用的逆行胰胆管内注射甘氨脱氧胆酸(gly-codeoxychotic acid,GDOC)的方法。目前比较规范的制模方法:沿正中线切开腹壁,找到十二指肠,然后用细导管经由十二指肠降部的肠壁处,通过壶腹部逆行穿刺进入胰胆管,向胰胆管内推进5mm,见胆汁和胰液流出后,随即用细丝线在壶腹部开口处结扎防止注射液回流;同时于胆总管上段用小动脉夹钳夹闭,防止注射液上行流入肝内。通过调节GDOC剂量以及推注时间诱导出大鼠不同程度的AP。本模型在病因、致病机制及病理等方面与临床上的AP相似,可以模仿胰管梗阻和胆汁返流所致的AP。该方法有较好的重复性和可比性,缺点是操作费时以及药物的注射速度难以掌握,许永春等改用微量泵逆行胰胆管内注射药物,较好地控制了药物的注射速度,提高了模型的成功率[2]。

1.2 结扎法:结扎法是比较一种比较常见的方法。1980年Chetty预先在大鼠十二指肠内放置塑料管,用丝线将十二指肠结扎于塑料管两端,形成十二指肠闭襻,胃内容物通过塑料管下流。实验发现胰腺24h后出现水肿、出血、胰周脂肪坏死。该模型与人体胆汁返流AP相类似。其机制是十二指肠腔内压力增高,使胆汁返流入胰管,胆汁破坏了胰管上皮的黏膜屏障,返流入胰管的胆汁卵磷脂被胰液分解为可破坏细胞膜和导管的溶血卵磷脂,胰内蛋白酶被激活,导致胰腺组织的自我消化,造成胰腺水肿、出血和坏死。此法操作简便,损伤小,模型稳定可靠,可作为研究AP的发病机制理想动物模型。

1.3 胰腺被膜下注射法:1994年薛建国等[3]设计了在胰腺被膜下均匀注射5%牛磺胆酸钠制备大鼠AP动物模型的方法。2002年王单松等[4]改良了该实验,制模方法:经腹正中线入腹,提起脾和胰尾,用1号针头平面朝上沿胰被膜下均匀注射3%牛磺胆酸钠(sodium taurocholate),依次向胰管开口方向推进,缓慢注入牛磺胆酸钠1.0ml,使整个胰腺均匀隆起,30min即可检测血清淀粉酶明显升高,胰腺出现明显水肿和腹水。机制是胰腺被膜下注射牛磺胆酸钠后,早期牛磺胆酸钠直接化学刺激引起被膜下胰腺组织损伤,后期胆盐激活胰酶产生自身消化,使胰酶进一步损害。此方法简单,易于操作,省时省力,可快速大批地建立AP动物模型,可用于研究AP病因学、发病机制及评价药物治疗效果。同时,它克服了雨蛙素和结扎胆胰法诱导产生的胰腺炎变程度较轻,逆行胆胰管注射法病程发展快,死亡率高的不利因素,是大鼠急性胰腺炎比较理想的模型。

1.4 雨蛙素注射法:雨蛙素是胆囊收缩素(cholecystokinin,CCK)的肽类似物,能刺激胰腺的个分泌,使胰蛋白水解酶大量分泌,引起胰腺腺泡自溶。Njederau采用了多次皮下注射,发现间质炎症和胰腺细胞坏死在6h时就很明显,12h后达到高峰,因而推测雨蛙素诱导的AP的严重程度是剂量依存的。优点是:不需手术创伤小,操作简单,产生AP迅速,给药方式多。缺点是:病情较轻,不亦做SAP模型。

1.5 腹腔内注射大剂量L-精氨酸法:MuzummaL等采用静脉注射过量L-精氨酸,注射24h后引起胰腺细胞出血和坏死比较显著,电镜下见明显的酶原脱颗粒,内质网扩张。L-精氨酸由一氧化氮合酶催化生成NO,是机体内NO的唯一来源,该模型诱导AP的机制推测是过量的精氨酸使使腺细胞内的氨基酸失衡,减少了蛋白酶的合成,导致酶原被过度激活。该法优点:简单廉价,损伤小,重复性好。但该模型死亡率高,胰腺病理改变不一。

1.6 无胆碱乙硫氨酸(CDE)喂饲法[5]:无胆碱乙硫氨酸(chiline-deficient ethionine,CDE)可诱发AP。饲料配方包括蔗糖55.8%,猪油20%,大豆蛋白10%,3%乙硫氨酸,添加各种维生素和无机盐。模型动物可出现腹水、缺氧、低血容量、酸中毒等症状。机制推测是因乙硫氨酸干扰了细胞内的甲硫氨酸的代谢,从而干扰了细胞膜磷脂的合成,通过饮食中缺乏胆碱使这中作用得到加强,导致胰腺细胞外放作用受阻,雌激素在其中也起着重要的作用,所以一般均选择雌鼠制作这种模型。该模型的临床变化、生化过程及胰腺大体组织学特征与人体AP相似。该模型适用于AP病因及病理生理的研究。

2.观测指标

急性胰腺炎是胰酶自身消化胰腺引起的化学炎症。本病病因多系胆道疾病引起。此外,醺酒、高脂血症与高钙血症、感染等亦可诱发。急性胰腺炎动物模型制作后是否符合人类疾病模拟性表现,其观察以下几个指标:

2.1 胰腺组织大体观察。胰腺是否有胰腺炎的改变,是否有脂肪坏死、出血坏死、腹水、胸水等变化。

2.2 组织光镜观察。胰腺炎的炎症改变,是否随时间延长病变加重,出现间质水肿、灶性坏死、炎性细胞浸润、腺泡坏死等表现。

2.3 血清淀粉酶和脂肪酶的测定。是否血清淀粉酶和脂肪酶均明显升高。

3.AP模型的选择

由于对急性胰腺炎发病机制尚无明确的结论,所以迄今为止尚未有一种AP模型与人类AP发病过程完全一致,并可以全面解释AP的发病机制。每一种模型均只能在一定程度上反映AP某一病理生理学方面的改变情况。而理想的急性胰腺炎模型是:发病机制与人相似;重复性好;非侵入性;简便价廉;疾病进程、并发症、死亡率与人类急性胰腺炎相似且有相同的治疗反应[12]。通过复习文献,大多数文献采用了牛磺胆酸钠逆行胰胆管注射法和胰腺被膜下注射法,这是因为牛磺胆酸钠作为细胞毒性物质,其诱导胰腺损伤是有浓度依赖性的,便于控制胰腺损伤程度及累及器官数目不等的多器官损害的模型。

4.结论

综上所述,各种模型都有其特点,有些综合AP病因的研究,有些模型适用于发病机制的研究,有的适用于研究细胞因子和凋亡,研究者可根据需要来选择不同的模型。通过动物模型研究,可使我们更加了解胰腺炎的发病机制,为临床提供更好的治疗方法。因此随着对急性胰腺炎发病机制的不断深入研究,实验动物学等学科的不断发展,可以预见,会有重复性好,稳定性高,可以弥补不同模型方法的缺点,使其病理形态、生化改变及时间进程方面都与人类的急性胰腺炎相似的大鼠模型出现。

参考文献

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[3] 薛建国,王宇,许元第.建立大鼠急性出血坏死性胰腺炎模型方法的改进[J].中华实验外科杂志,1994,11(5):313.

篇8

ABSTRACT Aim To improve the collecting rate of the adult worms of Trichobiharzia.Methods The adult worms in vena portae and hepaticae interna were collected by the methods of exsomatization and retrograde pouring in vena of livers of ducks.The adult worms in livers，vena portae and vena mesenterica of ducks were collected by the method of pouring aorta descendens.Results A lot of non-traumatic living adult worms and non-traumat could be collected by these methords.The collecting rate of the pouring was significantly higher than that of other methords(p＜0.05).Conclusions The method of pouring was more simple，direct，practical and was better than that of dissection.

KEY WORDS Trichobiharzia adult worm pouring collecting method

毛毕属（Trichobilharzia）吸虫为鸟类血吸虫，其尾蚴可侵袭人体引起变态反应性皮炎，该属吸虫宿主较多，家鸭是毛毕属吸虫主要的终宿主之一［1～10］。从家鸭体内分离出成虫，是研究其形态、结构并进行分类的重要基础。作者在淮河水系毛毕属吸虫研究的过程中，对毛毕吸虫成虫的分离方法进行了初步研究，取得了较为满意的结果，现报道如下。

1　材料和方法

1.1　材料

1.1.1　病鸭　用毛毕属吸虫尾蚴（50条）人工感染的、并在院动物房内饲养30天以上的雏鸭（为当地居民孵化的家鸭）；购自当地居民（渔民及农民）于毛毕吸虫流行水域内放养1年以上的阳性家鸭。

1.1.2　药品器材　肝素（Ehter.批号：930407，上海浦江应用生物化学研究所。）乙醚（Diethylether，批号：960423，宜兴市第二化学试剂厂）、注射器、9号注射针头、吊瓶、解剖针、橡皮导管、玻璃导管、手术刀、剪等。

1.2　方法

1.2.1　肝门静脉、肠系膜静脉解剖法　将病鸭（其粪便经毛蚴孵化为阳性的家鸭）固定在解剖台上，用乙醚麻醉后，剖开胸腹部，将肝门静脉和肝静脉结扎，用眼科剪、解剖针和“0”号毛笔剖检肝门静脉和肠系膜静脉分离成虫。即从较细的肠系膜静脉开始，分段以解剖针刺破静脉，并以解剖针从静脉远端驱赶血液（成虫）从刺流出，用毛笔轻取流出血液至含有生理盐水的平皿中，用生理盐水反复清洗换水，直至虫体被洗净为止。最后在解剖镜下收集成虫。

1.2.2　在体肝脏灌注法　将病鸭（其粪便经毛蚴孵化为阳性的家鸭）固定在兔解剖台上，在翅根部静脉注射2ml肝素钠（12500U），随即用乙醚麻醉后剖开胸腹部，暴露内脏（操作中应避免划伤心脏和肝脏）。接着在肝静脉出口远端和门静脉起始端各作一切口，分别插入导入管和导出管（上述两管可由普通玻璃吸管替代，其长短、粗细根据鸭子的大小与静脉的粗细选用）。将含有生理盐水的500ml吊瓶，置于2.5m高处，通过输液皮条与导入管相连，接通生理盐水，生理盐水和成虫一起即可从门静脉导出管口流出（抬高导入端解剖台效果尤佳）。

当流出液中含有较多组织液和血液时，可在量杯中换水沉淀几次，每次5min。若流出液较清晰，立即吸入小培养皿内，在解剖镜下或用肉眼直接分检。

1.2.3　离体肝脏灌注法　将病鸭（其粪便经毛蚴孵化为阳性的家鸭）固定在解剖台上，在翅膀根部注射2ml肝素钠。随即用乙醚麻醉后解剖，暴露内脏。用止血钳或缝合线分别夹（扎）住肝静脉和门静脉起始端，仔细分离肝脏，并移至平皿内。然后将连有生理盐水吊瓶的吸管慢慢插入肝静脉内，接通生理盐水进行灌注，将门静脉流出液倒入300ml量杯内，沉淀，换水2次，缓慢弃去上液，沉淀液倒入小平皿内，在解剖镜下或手持放大镜用肉眼直接分检。

1.2.4　肝门静脉及肠系膜静脉同时灌注法　将病鸭（其粪便经毛蚴孵化为阳性的家鸭）固定在解剖台上，在翅膀根部注入2ml肝素钠，雏鸭酌减，用乙醚麻醉后，迅速打开胸腹腔，暴露内脏。用止血钳夹住肝静脉，将连有生理盐水吊瓶的9号针头插入降主动脉内，随后将门静脉起始端剪断，用一漏斗放于大、小肠的下方。接通生理盐水，流出液经尼龙网过滤，将阻留物翻入含生理盐水的培养皿中，直接镜检。

2　结果

2.1　肝门静脉系统和肠系膜静脉解剖法　分别解剖人工感染毛毕吸虫尾蚴的雏鸭和在当地流行区自然感染的家鸭各20只，共分离到完整的成虫388条（雌虫349条，雄虫39条）。其中从人工感染毛毕属吸虫尾蚴的雏鸭体内共分离成虫138条（雌虫127条，雄虫11条），每只雏鸭检获成虫数目不等，最少3条，最多26条，平均6.9条；从自然感染的家鸭体内共分离成虫250条（雌虫194条，雄虫56条），每只家鸭检获的成虫2～72条，平均12.5条。从40只家鸭体内均分离到活体成虫，此外尚有部分虫体断片。

2.2　在体肝脏灌注法　分别灌注人工感染毛毕吸虫尾蚴的雏鸭20只和在当地流行区自然感染的家鸭35只。共分离成虫2546条（雌虫1393条，雄虫1153条）。其中从人工感染毛毕属吸虫尾蚴的雏鸭体内检获成虫699条（雌虫249条，雄虫350条），每只雏鸭检获成虫5～38条，平均34.95条；从自然感染的家鸭体内共检获成虫1847条（雌虫932条，雄虫915条），每只家鸭检获成虫12～86只，平均52.77条。从55只家鸭体内分离到的成虫均为活虫。

2.3　离体肝脏灌注法　分别灌注人工感染的病鸭6只和自然感染的病鸭10只，共分离成虫2495条（雌虫1215条，雄虫1280条）。其中人工感染的病鸭检获成虫192条（雌虫95条，雄虫97条），每只人工感染的病鸭检获成虫22～41条，平均32条；从自然感染的病鸭检获成虫2303条（雌虫1006条，雄虫1297条），每只病鸭检获成虫186～315条，平均230.3条。从16只病鸭检获的成虫均为活虫。

2.4　肝门静脉及肠系膜静脉灌注法　分离人工感染的雏鸭10只和在流行区购买的阳性家鸭10只，分别检获成虫448条（雌虫197条，雄虫251条）和2554条（雌虫1231条，雄虫1323条）。每只人工感染的病鸭检获成虫22～56条，平均45条；每只购自流行区的阳性家鸭检获成虫194条～396条，平均255条。从20只病鸭所分离的成虫均为活虫。

3　讨论

毛毕属吸虫的终宿主主要为家鸭和绿头鸭、绿翅鸭、斑嘴鸭和斑背潜鸭、苍顶夜鹭等候鸟［1～10］，其中家鸭是人们研究毛毕属吸虫常用的实验动物，无论是研究其生活史、分类还是流行病学调查都用家鸭作为成虫的动物模型。据以往文献记载，从家鸭体内分离毛毕吸虫，多采用肝门静脉、肠系膜静脉解剖法，而肝脏灌注法收集毛毕吸虫成虫，尚未见报道。从本次研究结果可见，肝门静脉、肠系膜静脉解剖法手工操作分离成虫较慢，费时费力，从解剖1只病鸭到其中的成虫分离完毕，一个人要花4～6h，因虫体较小，又与血液混合在一起，分离时不易看清，易漏检，且血凝后无法进行操作。因此，该方法成虫收集率低。应用肝脏灌注法（无论是采取在体灌注，还是离体灌注），从解剖1只病鸭到成虫分离完毕，一个人仅需用1～2h。因此肝脏灌注法与常规的肝门静脉、肠系膜静脉解剖法相比较，具有省时、省力，所获成虫虫体完整、洁净、便于活体测量和操作简便等优点，且成虫收集率也明显增高。因为鸭肝静脉位于心脏的背面，粗而短；门脉位于肠系膜中，既细又短，在体灌注有一定困难。因此，离体肝脏与在体肝脏灌注两者相比，前者更便于操作。但在离体肝脏灌注时，若操作不熟练、分离肝脏的时间长，可导致肝门静脉内血液凝固，灌洗出的虫体包裹在血凝块中，检出率将大受影响、甚至检不出成虫。由于鸭肝很脆弱，易损伤，故在灌注前插管和分离肝脏时，应细心操作。若操作不慎，肝脏出现裂损，可降低肝脏内的灌注压力，从而影响灌洗效果，使虫体不能全部冲出。较高的灌注压力和完整无损的鸭肝是灌注成功的关键。

虽然肝脏灌注法大大地提高了收集成虫的效率，但是，寄生于肠系膜内的成虫无法冲出，采用肝门静脉和肠系膜静脉同时灌注法较好地解决了这个矛盾，无疑是毛吸虫分离方法上的一大进步。

由于灌注法具有常规肝门静脉、肠系膜静脉解剖法不可比拟的优点，建议此方法应用于家畜（牛、羊）体内东毕吸虫成虫的分离。常规收集家畜东毕吸虫成虫的方法有二种：一是牛或羊肝门静脉解剖法；二是将牛或羊肝用刀切数下而不切穿，放于筛筐内冲洗，同时用手挤压20min，将筛内容物洗入量杯，用水反复沉淀，取沉淀渣检查虫体，费力、费时。应用灌注法可能会克服上述不足，产生更好分离效率。

关于毛毕吸虫在鸭体内的寄生部位，根据唐仲璋，唐崇惕（1962）报道，毛毕吸虫除寄生在门静脉和肠系膜静脉外，还可以寄生于肺和心脏。解剖9只鸭子共收集毛毕吸虫成虫233条，其中186条（79.83％）寄生于肝门静脉和肠系膜静脉，25条（10.73％）和22条（9.44％）分别寄生于肺部及心脏。因此要计算鸭体虫荷的多少，应对病鸭进行较细致的解剖和灌注，才能较客观地了解其毛毕吸虫感染度。作者已初步尝试采用肝脏和肠系膜静脉灌注法及灌注后再对肺、心进行解剖分离家鸭体内的毛毕吸虫成虫，此项工作尚待进一步完善、总结。此方法对于了解毛毕吸虫的分布和不同部位雌雄虫的比例具有价值。

参考文献

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2.李朝品，等.淮河水系毛毕吸虫的研究初报.中国血吸虫病防治杂志.1999，11（1）：27.

3.李朝品，等.淮河水系尾蚴性皮炎流行畜学调查初报.中国寄生虫学与寄生虫病杂志，1998，16（5）：384.

4.杨士静，苏信生.自病兔获取血吸虫成虫灌注法的改进，上海医学院.

5.唐仲璋，唐宗惕.产生皮肤疹的家鸭血吸虫的生物学研究及其在哺乳动物的感染实验.福建师范学院学报，1962，2：1.

6.唐仲璋，唐宗惕.中国裂体科吸虫和稻田皮肤疹.动物学报，1976，22（4）：341.

7.刘忠.吉林省稻田皮炎的调查及集安毛毕吸虫生活史的观察.动物学报，1980，26（2）：153，

8.上海市稻田皮炎防治研究组.禽类血吸虫尾蚴皮炎调查和预防措施的研究.中华皮肤科杂志，1996，12（3）：131.

篇9

关键词：谷氨酰胺;烧伤;休克心;心肌细胞;线粒体

诸多研究显示，严重烧伤早期即出现心肌器质性损害。由于烧伤早期出现的心肌缺血缺氧损害，不仅引起心功能不全还可以诱发或使烧伤休克加重，成为烧伤早期缺血缺氧的重要启动因素之一，因此黄跃生等于2000年提出了“休克心”这一概念[1]。鉴于此，临床上开展对烧伤后“休克心”的防治研究具有非常重要的理论与临床意义。

近年来有研究表明，谷氨酰胺（glutamine，Gln）在烧伤营养中的作用已远远超出了传统非必需氨基酸的范畴。当机体处于烧伤、创伤、感染等应激状态时，机体发生一系列的代谢变化，需要补充外源性谷氨酰胺。谷氨酰胺作为肠道粘膜细胞代谢所必需的营养物质，能够促进胃肠道细胞增殖，维持免疫细胞的正常功能，提高烧伤、创伤的治愈率并且降低病死率。[2]。本研究中，我们将重点观察Gln对烧伤后心肌细胞线粒体的影响，以进一步阐明Gln保护烧伤“休克心”，维护心脏正常功能的作用机制。

1 材料与方法

1.1 实验动物及分组

健康成年Wistar大鼠90只，雌雄不限，体质量（220±30）g，由南华大学实验动物学部提供。随机分成3组，正常对照组（A组，n=10）、烧伤对照组（B组，n=40）和Gln组（C组，n=40）。分别观察伤前（ A 组） ，以及伤后3、6、12、24h四个时相点 （ B 组、C 组） ，每个时相点10只大鼠。

1.2 烧伤模型的制备

A组不予烧伤，其他2组大鼠烧伤前禁食12h，1%戊巴比妥钠（30mg/kg）腹腔注射麻醉，背部电推剃毛，置于92℃水浴中烫伤18秒，造成30%体表面积Ⅲ度烧伤（病理切片证实）。伤后按40ml/kg腹腔注射乳酸林格氏液进行液体复苏，创面涂以碘伏抗感染，每天2次。Gln组大鼠采用灌胃方式给予Gln 1.0 g / （ kg? d）。烧伤对照组给予同等剂量的甘氨酸， 使各组大鼠等氮、等热量。伤后动物自由进食，自由饮水。

1.3 心肌线粒体的制备

断头处死大鼠， 摘取心脏， 心肌线粒体的提取采用组织线粒体分离试剂盒（美国Pierce公司），操作按照试剂盒说明书进行。将新鲜的心肌组织（约50～100mg）置于已预冷的玻璃匀浆器中， 用眼科剪将心脏反复剪碎，直至剪成肉泥; 再加入800ml线粒体分离试剂A，小心匀浆约20次，将匀浆液转移至Eppendorf管中，再加入800ml线粒体分离试剂C，700g，4℃条件下，离心10min。取上清液在3000g，4℃条件下，离心15min。取沉淀加入500ml线粒体分离试剂C，在12000g，4℃条件下，离心5min。第三次离心后的沉淀即为心肌组织的线粒体。

1.4 心肌线粒体细胞色素C的测定

取两个比色杯，分别加入线粒体悬液适量，0.1mol/L磷酸缓冲液（pH7.4），10%去氧胆酸钠及10mmol/L K3Fe（CN） 6，测定杯中加入连二硫酸钠，记录波长540～630nm 处的氧化-还原光谱，取540～ 550nm 光谱差计算细胞色素C含量。

1.5 心肌线粒体SOD、 MDA和GSH-Px和含量测定

SOD活性测定采用黄嘌呤氧化酶法，MDA含量测定采用硫代巴比妥酸法，GSH-Px 活性测定采用二硫代二硝基苯甲酸比色法。具体操作方法按试剂盒说明书进行。

1.6 统计分析

数据用均数±标准差（用±s）表示，组间比较采用单因素方差分析，所有数据采用SPSS 13.0统计软件分析。

2 结果

2.1 Gln对烧伤大鼠心肌线粒体细胞色素C水平的影响

与对照组比较，烧伤组心肌线粒体细胞色素C在伤后3、6、12及24 h均呈显著性降低，其中伤后12 h下降幅度最大，Gln治疗组心肌线粒体的细胞色素C在烧伤后3、6、12及24 h 均较烧伤组有明显升高，见表1。

表1 心肌细胞线粒体内细胞色素C水平（±s）

组别

伤后时间

t/h

细胞色素c水平

/μmo l? mg - 1PRO

对照组（A组）

0.53±0.04

烧伤组（B组）

3

0.35±0.03#

6

0.29±0.05#

12

0.27±0.02#

24

0.33±0.04#

Gln组（C组）

3

0.47±0.07*

6

0.42±0.05*

12

0.35±0.06*

24

0.41±0.06*

与对照组比较， #P < 0.05;与烧伤组比较，* P < 0.05

2.2 Gln对烧伤大鼠心肌线粒体SOD、 MDA、GSH - Px含量的影响

由表2可见，大鼠烧伤后心肌线粒体SOD、GSH - Px活性在伤后均呈显著性下降，MDA含量有不同程度的升高。与烧伤组比较，Gln治疗组SOD、GSH - Px活性明显升高，MDA含量显著降低。

表2 心肌线粒体内SOD、MDA及GSH C Px的含量（±s）

组别

伤后时间

t/h

SOD

/U? mg - 1

MDA

/nmol? mg - 1

GSH-Px

/U? mg - 1

对照组（A组）

712.5±106.2

3.5±0.8

18.5±5.7

烧伤组（B组）

3

493.5±78.5#

5.6±1.1#

12.2±4.9#

6

441.1±72.8#

8.3±1.5#

9.7±4.5#

12

458.7±83.3#

7.9±1.3#

12.1±4.7#

24

480.2±88.4#

6.5±0.9#

13.4±5.5#

Gln组（C组）

3

696.8±74.6*

4.1±1.2*

16.9±5.2*

6

660.5±80.4*

4.7±1.5*

13.2±4.4*

12

682.1±77.2*

4.2±0.9*

15.8±5.3*

24

692.1±84.5*

3.9±0.8*

17.1±6.2*

与对照组比较， #P < 0.05;与烧伤组比较，* P < 0.05

3 讨论

研究表明心肌损害在严重烧伤的早期就已出现， 由于心脏的特殊重要性， 其损害不仅可引起心功能不全，还可成为造成或加重全身其它组织器官的缺血缺氧损害的推手，因此，烧伤后“休克心”的研究则具备了其必要性与重要性。严重烧伤早期出现的心肌器质性损害，主要表现如下： 1.心功能降低：烧伤后，心脏脉搏量（SV） 、脉搏指数（SVI） 、心排出量（CO） 和心排血指数（ CI）均降低;2. 心肌力学指标降低：烧伤后，主动脉收缩压（AOSP） 、主动脉舒张压（ AODP） 、主动脉平均压（MAP） 、左心室收缩压（LVSP） 、左心室舒张末期压（ LVEDP） 、左心室等容收缩期压力最大上升/下降速率（± dp/ dtmax）等均有所下降;3. 心肌细胞结构受损：烧伤后，肌球蛋白Ca2+ - ATP 酶活性降低，而血中肌球蛋白轻链1（ CM- LC1） 和肌钙蛋白T（ TnT ） 明显升高。心肌肌膜下出现空泡， 基膜与质膜分离，基膜缺损或质膜断裂。光镜下可见心肌横纹模糊不清，随着病程进展，还可出现心肌间质水肿、肌纤维断裂 、线粒体肿胀甚至空化等现象。 烧伤后“休克心”的发病机制较为复杂，主要总结为以下几个方面：1.心肌缺

血再灌注损伤;2.心肌组织水肿;3.心肌细胞氧利用及能量代谢障碍;4.失控性炎症反应。

心肌细胞线粒体的含量较为丰富，线粒体是为生命活动提供能量的重要细胞器。当机体受到外界等诸多致病因素的影响时，如烧伤、创伤、感染等应激情况，可引起线粒体结构与功能的改变[3]。SOD 是体内重要的抗氧化酶，能够清除体内的氧自由基，保护机体细胞和组织免受自由基的损害，而SOD活力下降也预示着机体清除自由基的能力降低。GSH-Px在细胞内能清除过氧化物代谢产物，阻断脂质过氧化连锁反应，从而起到保护细胞结构和功能的作用。SOD、GSH-Px的水平下降，机体对氧自由基的清除能力降低，可导致机体出现严重的脂质过氧化反应，损伤组织细胞。MDA是脂质过氧化的分解产物，是反映组织氧化损伤水平的指标之一，MDA含量增高说明机体氧化损伤加重。

大量研究显示： 烧伤后早期发生心肌线粒体结构与功能损伤，损伤的心肌产生大量的氧自由基，线粒体SOD、 GSH-Px 为了清除过多的自由基而导致消耗增多、活性下降。体内自由基增多导致导致组织过氧化反应，使得线粒体内MDA 含量升高。MDA含量增高能够影响线粒体的电子传递和磷酸化过程，导致ATP 酶活性下降， 使ATP 合成减少，能量供应不足最终影响细胞的功能。本研究中，我们给予烧伤大鼠Gln 后，增强了心肌线粒体SOD 和GSH-Px 的活性， 降低了线粒体脂质过氧化产物MDA 水平， 从而保证了线粒体的正常氧化和产能功能，明显减轻烧伤后导致的心肌损伤。

线粒体另一个重要的功能是进行生物氧化和提供细胞生命活动所需的能量。细胞色素C 是一种结构松散的水溶性膜外周蛋白[4]，细胞色素C缺失或者功能障碍，会导致线粒体呼吸链电子传递中断，导致ATP生成减少，细胞生命活动所需能量不足;另外，呼吸链电子传递障碍所致氧化不全也会造成ROS生成增多，从而损伤组织细胞。本研究显示，烧伤后心肌细胞线粒体内细胞素C 水平明显降低，Gln能显著提高烧伤后大鼠心肌细胞线粒体细胞色素C水平，有利于线粒体的生物氧化进而起到保护细胞的作用。

谷氨酰胺是一种中性氨基酸，它是含量最丰富的游离氨基酸， 60% 的游离氨基酸是谷氨酰胺。Gln是目前临床上应用得非常广泛的营养制剂，它具有保护肠道粘膜、提高免疫力、促进蛋白质合成、促进伤口愈合、抗抑郁、抗衰老等多种功能。业界认为，Gln属于条件必需氨基酸， 更是一种特殊的药物，因为它不仅能够作为营养物质提供氮源，还能强化机体免疫系统和抗氧化反应，目前已应用于骨髓移植和AIDS的患者。但是Gln 本身具有其局限性，溶解度低、稳定性差，难以做为常规静脉制剂，使其在临床上作为常规的急救药物应用于烧伤早期心肌损害的防治受到了限制，因此我们后续的研究有待进一步解决相关问题。

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关键词：实践；细胞生物学；教学效果

中图分类号：G642.0 文献标志码：A 文章编号：1674-9324（2013）46-0176-02

任何知识的学习都以学以致用为最终目的，必须做到理论联系实际，细胞生物学的学习也是如此，而且生物这门学科本身具有较强的实践性，我国在进行生物学教学的时候，也是将实验教学放在首要位置的，但是，我国基于实践的细胞生物学教学体系并不完善，需要对教学方法进行深入的改进，使细胞生物学的知识能在实践研究中得到更好的应用。

一、将细胞生物学教学与实践结合的重要意义

1.将细胞生物学教学与实践结合起来是学科本身发展的需求。细胞生物学是一门基础性的生命科学，主要任务是研究细胞的生命活动规律，通过对细胞生命现象的观察，总结出细胞生命活动的规律，进而采用合理的方法手段控制或者引导细胞向有利于人们身心健康的方向发展，近些年，全球癌症的发病率逐年上升，鉴于这种实际现状，世界上的细胞生物学开始尝试通过一定的物理或者化学手段，减少癌症的发病率、增强癌症患者的生命期，并且已经取得了良好的研究成果，所以，生物学本身的发展就要求理论与实践相结合。

2.将细胞生物学教学与实践结合起来是人才培养的需要。目前，根据我国生物科学的发展现状，生物学方面的学生就业方向主要是地方教育机构或者一些生物方向的厂家。对于地方教育机构来讲，随着我国教育事业的不断发展，现在的生物学教育理念已经发生了巨大的变化，现在的教育模式更倾向于课堂实验教学，老师通过课堂做实验，让学生对自己得出结论。

3.将细胞生物学教学与实践结合起来是提高教学质量的需求。细胞生物学的实践教学可以提高学生对事物的观察能力和操作能力，对未来的生物数据处理和实际应用生物理论解决问题能力也有很大的帮助，在进行有效的生物教学之前，学校必须首先为实践教学创造良好的硬件条件，购买一些先进的生物设备、根据实际需要建立具有一定规模的实习基地，社会对学生细胞生物学的检验标准不仅仅是依靠学习成绩，更多的是考查学生对实验内容、实验操作细节等的理解程度。实践是学好细胞生物学课程的基础，将细胞生物教学与实践结合起来对提高教学质量有很好的效果。

二、提高基于实践的细胞生物学教学效果的措施

我国的细胞生物学实践教学主要方式是课堂的实验教学，所以，要想提高基于实践的细胞生物学教学效果还得从提高实验教学效率入手，通过提高学生做实验的学习效率来达到提高生物屑教学效果的目的。

1.改变实验教学模式。以前我国的学校进行细胞生物学实验的方法是：老师将实验步骤、实验操作、注意事项在实验之前全部告诉学生，学生在老师设置的要求里用心完成课堂实验，造成学生在做实验的时候，对老师的指导形成了严重的依赖性，缺乏创新意识，不利于学生未来实践能力的培养。鉴于这种情况，我国开始改变实验教学模式，在保证学生生命安全的条件下，尽可能的将实验变成开放性实验，增强学生在实验过程中的自主性，学生根据自己的设想，用一定的实验方法去验证自己设想的可行性，老师的任务是现场监督实验的安全性，对一些存在安全隐患的实验方法进行制止，并在实验快要结束的时候，将课本上的实验方法进行讲解，并鼓励学生无论设想是否正确都要积极去做，科学的路上本来就充满挫折，失败是很正常的，使学生更加愿意按照自己的设想去做实验，久而久之增强了学生的实验设计能力和创新能力，从长远来看必将推动我国甚至世界生物科学的发展。

2.及时的更换实验内容。科学技术在不断的进步，生物科学也不例外。在生物学实践教学的路上必须不断丰富实验内容，及时的让学生学习到世界先进的研究成果或者优良的研究方法。学校可以根据本校学生的实际情况，适当增加实验的难度，在安排实验的时候尽量多一些创新性的实验减少验证性实验的比例，因为相对应于验证性实验，创新性的实验更加有利于培养学生的创新能力和生物研发能力，创新性实验提前不知道实验结果，学生带着问题和好奇去做实验，而验证性实验学生在做实验之前就已经知道了本实验的实验结果，只是通过一定的方法验证结论即可，此外创新性实验的实验结果不唯一，有利于培养学生的发散思维，根据自己对实验现象的不同理解，从不同的角度得出不同的实验结论。实验是一个实践性的教学，更改实验内容光从改变这些实验的理论是不够的，还必须要求实验硬件的配合，增加在实验方面的投资，购买一些先进的实验设备，聘请一些国内外知名的生物学教授来学校进行教师的培训或者办学生讲座，软件和硬件双管齐下才能达到更换实验内容目标，最终提高基于实践的细胞生物学教学效果。

3.老师根据学校现有的物质条件，合理的安排实验内容。虽然我们在细胞生物学的教学过程中，大力支持和发扬实践教学，也就是将课堂做生物实验作为教学的主要形式，学生通过做实验，将理论与实践结合起来，并从中锻炼自己实际解决问题的能力，甚至创造出一些科技成果来，但是，我们也不能盲目的追求实验教学，因为大多数实验尤其是生物实验需要非常先进的设备，有的还需要珍贵的材料做实验标本，这会无形之中提高学校的教学成本，不利于学校的可持续发展，所以，必须将实践教学与学校的实际办学条件紧密结合起来，老师根据目前学校目前拥有的先进设备和实验标本合理的安排实验，保证将现有的资源合理利用，对于那些必须的先进生物设备和实验标本老师应该向上级部门提出申请，希望学校能尽力满足。当学校的实际条件不允许的时候，老师不能将实验内容省略，而是可以对实验的实际环境和场景进行模拟，让学生尽可能的感受实验的过程，虽然模拟环境与实践环境有一定的差异，但是对学生未来的实践却有着不可忽视的作用。此外，提高生物学实践教学效果的方法还要求老师根据本校实际情况自编实验教材、在实验结束后开展实验讨论会、完善细胞生物学实验的考核制度等等。

理论联系实践是当代教育改革的一个重要任务，细胞生物学的教育也是如此，必须将生物知识通过具体的实验与实践联系，才能让学生真正的理解知识的内涵，增加对知识的理解深度，并积累丰厚的实践经验，为以后的实际工作打下坚实的基础。本文通过介绍细胞生物学实践教学的重要性，从如何提高课堂实验教学效率方面入手，对基于实践的细胞生物学教学做简要分析。

参考文献：

[1]樊廷俊，初建松，细胞生物学课程教学改革与教书育人的初步尝试[J].中国大学教育报，2003，（05）：25-25.

[2]闻亮，加强实践教学，注重学生创新精神和实践能力的培养[J].内蒙古师范大学学报，2009，（02）：46-48.