医学分子生物学重点汇总范文

导语：如何才能写好一篇医学分子生物学重点汇总，这就需要搜集整理更多的资料和文献，欢迎阅读由公务员之家整理的十篇范文，供你借鉴。

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关键词：突发公共卫生事件；病例定义；假说

1 突发公共卫生事件的分类

1.1重大传染病疫情 短时间内发生，传染范围广，出现大量的病死或死亡，其发病率超过往年水平。例如，青海市2004年发生的鼠疫疫情，上海1988年发生的大规模感染甲型肝炎。

1.2重大食物中毒和职业中毒事件 是指由于食物被污染或者职业危害的原因，导致人数众多的伤亡中毒事件。2002年在保定市发生一起苯中毒事件，箱包生产的数名生产工人出现中毒症状，并有6例工人死亡，这就属于职业中毒事件。2002年南京发生一起特大投毒事件，导致395例食物中毒，42例死亡。

1.3群体性不明原因疾病。是指在某一区域内连续出现相同的临床表现，短时间内不能明确诊断该疾病，同时病例人数逐渐增多，范围也在扩大。我国2003年爆发的非典，发病之初并不明确病原体，非典传播速度很快，很多患者都出现相同的临床症状，这起事件就属于群体不明原因疾病。

1.4新发传染性疾病 是指一个国家或地区新发生的、新变异的或新传人的传染病。世界上新发现的32种新传染病中，有半数左右已经在我国出现，新出现的肠道传染病和不明原因疾病对人类健康构成的潜在危险十分严重，处理的难度及复杂程度进一步加大[2-3]。

1.5群体性预防接种反应和群体性药物反应 是指接种疫苗或者服用药物以后出现异常反应，出现该事件可能是由于药物疫苗存在质量问题，或者是人体自身生理过敏反应。

1.6重大环境污染事故 是指化学品在生产、运输、使用、废弃物处理等因管理不当，出现化学品污染环境造成人员的伤亡。

1.7自然灾害 因为自然力引起的设施破坏、严重经济损失、人员伤亡、人的健康状况及社会卫生服务条件恶化超过了所发生地区的所能承受能力的状况。

1.8核事故和放射事故。是指核泄露、放射物质泄露威胁到公众的生命健康。

2 突发公共卫生事件的现场调查步骤

2.1初步调查 首先要进行核实诊断，有些突发事件的临床症状是以前未曾出现过的，情况较为特殊。事故发生后要第一时间到现场了解患者的情况，主要了解患者的临床症状、体征，还有现场的环境情况，本地的流行病史，患者的年龄、职业、人群预防接种情况，患者的各项检查指标。不同类型的突发事件核实诊断的方法有差异，要根据具体情况做调整。同时对周围居民、群众进行调查，了解发病的情况，当地居民对环境比较熟悉有助于工作人员进一步了解事件发生的原因。登记在现场群众的个人资料，如果该事件属于传染性疾病，可以尽早对可疑患者进行诊断治疗。突发事件一般比较突然，现场群众和附近居民心理会恐慌，相关工作人员要对群众进行心理疏导，帮助有需要心理辅助的人员，同时在场有专业人士回答群众的疑惑，避免群众出现盲目的恐慌心理，群众的积极配合有利于突发事件的控制。

2.2收集病例及相关资料 登记患者的基本资料，姓名、年龄、居住地、民族、联系方式，重点了解患者的发病情况、临床症状、发病时间。还包括当地地区单位静态人口资料，人口总数，对于流动人口较大的区域要了解爆发前的人口数。比较发病者和不发病者相关因素有何不同，从中可以寻找发病的原因。

2.3建立病例定义 通过前面的调查了解，可以比较清楚发病患者有何临床特征，建立准确的病例定义有利于发现疑似患者，有利于疾病的控制。病例定义主要包括两个方面，一个是描述突发事件的信息，包括时间、人群、地区分布、具体的地理环境。另一个是描述患者的症状、体征、实验室检测指标。定义的语言尽可能的简单、方便应用，对于不明原因的疾病要避免武断的病例定义。建立病例定义是可以参考一下几点：①临床症状明显和不明显的比例是多少；②是否有比较明显的临床症状或体征，可以和其他疾病有区别的；③哪种诊断方法最简单、实用，例如微生物学、化学分离鉴定、血清学方法等[3]。

2.4提出假说 根据事件资料的汇总，对患者的发病特征、现场的环境，再结合文献回顾性分析，提出突发卫生事件的原因。例如该地区发生大规模的传染性疾病，可以假设这一传染病是由某种微生物所引起的。经过初步调查对事件的发生还不是很深入了解，提出假说可以为进一步研究指明方向。

2.5深入调查，验证假说 观察现场环境，对可以传播的方式、传播因素进行现场勘查，以了解疾病暴发的原因。分析患者的各项检测指标如血清学、病原微生物。例如，假说提出本次突发卫生事件是由流感病毒传染所引起的，研究员可以通过采集患者的呼吸道样本，对采集样本进行病毒学实验鉴定，最后可以判断患者是否是感染流感病毒。

2.6采取控制措施 特别是针对传染性疾病，要控制传染源、传播途径和易感人群[4]。对于化学污染等情况，要尽快的清楚污染物，保护水源，已经被污染的水源要实时监控禁止居民使用污染水，防治再次发生中毒事件。同时要加强群众对突发公共卫生事件的认识。

3 完善现场调查检验方法

为了完整、准确评价流行爆发的流行特征，需要寻找更多的病例，更加准确的评价一个新的检验方法的检出病例的技术，提高病例鉴别的敏感性和特异性。后续，研发诊断试剂盒、检测仪器，可以更加高效的诊断。新发传染性疾病可能是由于病毒变异所引起的，根据临床症状不能很准确的诊断疾病，近年来兴起分子生物学诊断试剂盒。其原理是根据病毒特异性抗体，生产能特异性检测该抗体的试剂盒，还有一种方法是根据病毒的特异性核酸序列，研发检测序列的试剂盒。传染病的流行是和季节有关的，下次疫情再次发生的时候诊断试剂可以及时对疾病进行监控，对感染患者尽早治疗，控制疾病大流行。分子生物学诊断和临床症状诊断想比较，分子生物学诊断特异性更好，诊断时间快，准确性高。

参考文献：

[1]郭存三.突发公共卫生事件的流行病学调查与应急处理[J].中国预防医学杂志，2004，38（1）：65-67.

[2]谷亚红，张智斌，李长红.学校突发公共卫生事件研究综述[J].疾病控制，2011，8（36）：129-131.

篇2

[关键词] 肺结核；PCR；抗酸染色法；诊断

[中图分类号] R4 [文献标识码] A [文章编号] 1674-0742（2016）05（c）-0077-02

[Abstract] Objective To compare the accuracy of PCR technique and acid-fast staining in diagnosis of pulmonary tuberculosis pathology. Methods 60 cases of patients suspected with pulmonary tuberculosis treated from March 2014 to October 2015 were selected， and the lung alveolar fluid and lesion tissue strips were obtained by the ultrasonic fiber bronchoscope， and then sent for PCR technique and acid-fast staining. Results Of the 43 cases with pulmonary tuberculosis， the positive rate of PCR technique is superior to that of acid-fast staining （83.72% vs 41.86%）， and the difference had statistical significance， （χ2=16.125 0， P

[Key words] Pulmonary tuberculosis； PCR； Acid-fast staining； Diagnosis

肺结核病是有结核分枝杆菌引起的一种肺部感染性疾病，该病传播性强，致残率高，严重影响人民健康，是我国重点防治疾病之一[1]。在肺结核病的治疗中，尽早治疗可避免肺功能下降，而目前随着结核杆菌对耐药性的增强，在临床上如何建立快速、准确的结核分支杆菌菌种的鉴别，根据检测结果选择敏感性药物，是治疗和控制结核病的必要前提[2]。PCR技术、抗酸染色是肺结核病常用诊断方法，该研究方便选择2014年3月―2015年10月该院收治的60例疑似肺结核病患者，观察和比较上述两者优缺点，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

方便选择2014年3月―2015年10月该院收治的60例疑似肺结核病患者，其中男38例，女22例，年龄16～76岁，平均年龄（39.4±8.9）岁，经临床病史、影像学分析及病理组织学检测，最终确诊为肺结核病43例，非肺结核病患者17例，包括弥漫性肺炎12例，肺癌4例，肺气肿3例。该研究经该院伦理委员会批准，所有纳入研究者均签署知情同意书。执行操作时无一例退出。

1.2 方法

在超声纤维支气管镜下，寻找病灶，用细针先注入10～20 mL生理盐水，再回抽获得肺泡灌洗液；用切割活检针获得条状组织，将后者冲洗后石蜡包埋。抗酸染色法：将部分肺泡灌洗液离心处理，或将获得的石蜡切片脱蜡处理，初染用石炭酸品红，在70 ℃下孵育30 min，酒精脱色，复染用0.5%亚甲蓝，水洗后用无水酒精脱水，二甲苯透明封固，放置于高倍镜下观察。于巨噬细胞周围发现微细杆状红染现象则为阳性。PCR法检测：选用7900实时荧光定量PCR基因扩增仪，由PCR热循环仪、荧光检测系统、温度控制系统及反应板组成，由新加坡 LIFF THECHNOLOGIES HOLDINGS PTE LTD 生产，公司地址Block 33，Marsiling Industrial Estate Road3，#05-03，Singapore739256，英潍捷基（上海）贸易有限公司，国食药监械（进）字2010第3401880号，先将获得的肺泡灌洗液与2倍4%NaOH溶液混合，或将石蜡切片脱蜡、液化后再与2倍4%NaOH溶液混合。将上述混合液离心、沉淀，加入50 μL 的DNA提取液混匀，100 ℃煮沸10 min，1.2×104转离心10 min，取2 μL上清液，用于基因扩增。预变性93 ℃2 min，变性93 ℃ 45sec，退火、延伸55 ℃120sec，上述过程共执行30个循环。CT值

1.3 统计方法

所有数据均采用SAS9.2统计学软件处理。两种检测方法准确性比较采用%表示，组间比较采用χ2检验。P

2 结果

最终确诊为肺结核病43例中，PCR法结果阳性为83.72%高于抗酸染色法结果阳性为41.86%，差异有统计学意义（P

3 讨论

细菌培养法是结核分枝杆菌确诊的金指标，但其耗时较长即便是快速培养，也需要7～10 d[3]。抗酸染色法具有简便、廉价、对设备要求不高等特点，但该法检出率较低。赵晶等[4]报道在88份痰标本中仅有20例显示抗酸染色阳性，这表明抗酸染色敏感性较差。分子生物学检查是近年来发展起来的快速、准确诊断技术，常见的检测方法包括聚合酶链式反应-单链构象多态性分析、反向斑点杂交法、、聚合酶链式反应-限制性片段长度多态、环介导等温扩增技术[5]等，但上述步骤繁琐、容易产生污染，故不利于临床广泛应用[6]。荧光PCR技术是融合了核酸扩增技术、DNA杂交技术和光谱技术，首先将特异性目的基因片段在数小时内扩增数百万倍[7]，然后利用特异性探针，对目的基因片段进行识别，这就大大提高了诊断的敏感性，在细菌培养困难较大的案例中其诊断价值更为突出。此外，该研究采用标本是通过超声纤维支气管镜获得的病灶组织条及肺泡灌洗液，因直接取材于病灶处及周围支气管肺泡，肺泡灌洗液中的细菌含量较高，污染几率低，该标本检测的优势还包括适用于在痰培养结果为阴性但仍有证据怀疑为肺结核案例，肺结核与其他类肺部病变及无痰者[8]。

该研究结果显示60例患者中PCR法诊断符合率88.33%优于抗酸染色法58.33%，43例肺结核患者汇总PCR的检出率83.72%，略低于吴国兰[8]报道的86.7%，但差别不到。该研究结果提示与抗酸染色法相比，PCR技术的检出率较高，可在肺结核早期诊断与治疗中发挥更大作用。另外，PCR法的诊断仍不能达到100%，对其漏诊率的分析对PCR法的改进及辅助临床诊断有重要意义，值得进一步研究。

[参考文献]

[1] 中华医学会结核病学分会.肺结核诊断和治疗指南[J].中国实用乡村医生杂志，2013，20（2）：7-11.

[2] 阿米娜古丽・塔西铁木尔，胡昕，王晶，等.传统方法和PCR法在结核分枝杆菌复合群菌种鉴定中的对比研究[J].中国防痨杂志，2013，35（2）：103-107.

[3] 刘小文，欧阳冬英.实时荧光定量PCR检测痰中结核分枝杆菌临床评价[J].中国现代医药杂志，2014，16（1）：24-26.

[4] 赵晶，葛存兴，王宏志，等.荧光定量基因扩增法与萋-尼抗酸染色法检测结核分枝杆菌的比较[J].中国实用医药，2015，10（3）：74-75.

[5] 陈效友.肺结核诊断的研究进展[J].中国临床医生，2013，41（3）：11-14.

[6] 王冰冰，郭明日，肖红侠，等.荧光 PCR 熔解曲线法在结核分枝杆菌耐药检测中的临床应用[J].国际检验医学杂志，2015，（5）：608-609，612.

[7] 黄泽亮，桂福.FQ-PCR检查痰中结核杆菌对肺结核诊断的临床价值[J].中南医学科学杂志，2013，41（4）：389-391.