显微镜在医学检验中的重要性范文

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关键词：血液分析仪；血涂片；显微镜检查；血常规

Microscopic Examination of Bblood Smears on the Necessity of Analyzing Blood Tests

ZHANG Qun-ying,XIANG Jun-jun

(Longquanyi District Hospital of traditional Chinese Medicine,Chengdu 610100,Sichuan,China)

Abstract：ObjectiveTo investigate and demonstrate the need for microscopic examination of blood smears when the blood of the inspection . MethodsFebruary 2013-October 2013 period were 980 blood specimens using blood analyzers to check for compliance with inspection standards which 400 specimens of blood smear microscopy of blood samples from 400 blood smear microscopy check the results with the results of the use of the blood analyzer checks were analyzed. ResultsHematology analyzer test results with the results of microscopic examination of blood smears 259 cases (64.75%) match, 141 cases do not match (35.25%) embodied in: blood analyzer test results showed normal or elevated WBC, N rises, blood abnormal smear microscopy result was 18.25% (73/400), when the WBC normal or elevated or lowered, B, M count changes, abnormal results of blood smear microscopy was 11.5% (46/400), is about WBC normal or elevated or reduced, while RBC, HB, MCV, RDW and other indicators of abnormal red blood cell morphology changes significantly, mainly for the red blood cell size, high pigmented. ConclusionBlood smear microscopy can improve the accuracy of the test results of blood samples , can provide a more reliable basis for clinical diagnosis of doctors, attention should be paid .

Key words：Blood analyzer ; Blood smears ;Microscopy ;Blood

血涂片显微镜检查是指在普通光学显微镜下对血细胞分类及血细胞形态进行观察和检查的一种医学检验方法，是血液形态学检验的基本方法[1]。但如今随着检验人员工作量的增加，随着血细胞分析仪的普及，血涂片显微镜检查在血常规检验中逐渐被忽略[2]。白细胞分类检查是血常规检查中最重要的一项内容，但即使国内外最先进的五分类血细胞分析仪，对于白细胞分类检查也仅仅作为一种过筛手段，因此，无法完全取代血涂片显微镜检查，从而造成了血常规检查的误诊或漏诊[3]。本组研究笔者对2013年5月~12月980份血液标本中符合检查标准的400份血液标本的血涂片进行回顾性分析，

1资料与方法

1.1一般资料将2013年5月~12月共980份血液标本采用血液分析仪检查，对其中符合检查标准的400份标本进行血涂片瑞氏染色，瑞氏染液严格按照《全国临床检验操作规程》第3版要求配制[4]，染色后在显微镜下进行形态学观察，所用的血液分析仪为Mindray BC-5600全自动血细胞分析仪，所用显微镜为日本Olympus CX-21生物显微镜。

1.2方法本组研究中各种检查所用仪器均按要求进行日常维护，并做室内质控，保证检查结果的准确与可靠。将血液分析仪检测结果与血涂片显微镜检查结果进行对比分析。

2结果

血液分析仪检测结果与血涂片显微镜检查结果259例（64.75%）相符，141例不相符（35.25%），具体体现在：血液分析仪检测结果显示WBC正常或升高，N升高时，血涂片显微镜检查结果异常率为18.25%（73/400），当WBC正常或升高或降低，B、M计数改变时，血涂片显微镜检查结果异常率为11.5%（46/400），即将WBC正常或升高或减低， RBC、HB、MCV、RDW等指标异常时，红细胞形态有明显变化，见表1。

3讨论

近年来，随着血细胞分析仪的迅速发展，检测项目也从原来白细胞的二分类、三分类发展为目前的五分类，而且血细胞分析仪检测方法也不断在更新，因此，我国临床各级医院越来越依赖于血细胞分析仪，而且血细胞分析仪的出现给工作量极大的检验工作者带来了更高的效率。有调查结果显示，某市15所三级及二级医院，其中40%的医院基本不进行血常规检验的血涂片显微镜检查工作[5]。有研究显示，我国各级各类医院对血液标本进行血涂片显微镜下检查的重视程度也存在较大差异[6]。

血液分析仪显微镜检查包括白细胞分类、红细胞形态观察、血小板形态观察及分布等，迄今为止，即使再先进的血液分析仪的工作原理也是通过了解细胞大小、细胞所含固形物的多少、细胞所含固形物的成份等来对细胞进行分类，但这一过程易受到各种因素的影响。目前国内使用的Mindray BC-5600全自动血细胞分析仪对白细胞进行五分类是根据白细胞体积大小而分类的，不仅对嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞及幼稚细胞进行区分，而且对异型淋巴细胞及中性粒细胞毒性改变不能加以识别，更重要的是，这种分类方法会将小粒细胞作为中间细胞，大片成簇的血小板作为白细胞。总之，目前的血液分析不能对血细胞核大小、形态、核中染色质情况、核仁大小、形态及细胞内特殊物质进行准确判断，而且细胞具有的多态性、异型淋巴细胞及原始细胞等细胞的结构、形态及内含物质的变化，均是血液分析仪无法准确判断的[7]，因此，对于白血病、类白血病及传染性单核细胞增多症等细胞数量大小变化不大的疾病则难以诊断[8]。

血涂片显微镜检查是指血液经推片、染色后在光学显微镜下观察红细胞、血小板形态、进行白细胞分类及寄生虫检查等的一种人工检验方法，血涂片显微镜检查在临床诊断各种疾病中有着重要的作用，如白血病的初诊以血涂片显微镜检查中发现幼稚红细胞，并辅以组化染色等进一步检查以确定诊断，而血细胞分析仪对白血病细胞中出现的Auers小体则无法辨认[9]。再如严重感染、败血症、恶性肿瘤等情况下，中性粒细胞可表现为细胞大小不均、空泡变性、核左移、巨杆状核及中毒颗粒等，这些中性粒细胞的毒性改变，血液分析仪也是无法辨认的。本组研究显示，血液分析仪检测结果显示WBC正常或升高，N、B、M升高时，血涂片显微镜检查结果有较高的异常率，表现为中毒颗粒、空泡等现象，当RBC、HB、MCV、RDW等指标异常时，红细胞形态有明显变化，应警惕有无贫血的发生。

为了使血涂片显微镜检查结果准确，在血涂片显微镜检查中，应注意血涂片及其染色的质量，涂片时应厚薄适中，边缘整齐，血膜头、体、尾明显。总之，血涂片显微镜作为血常规检查的基本部分，是目前血液分析仪进行血常规检查一个重要的也是关键的补充，只有将血涂片显微镜检查与血液分析析检查有机的结合，才能为临床检验提供更为可靠的检测结果，有效的避免了误诊或漏诊，从而可以为临床检验及患者的疾病诊断提供更准确的参考依据。

参考文献：

[1] 宋颖,王青,李泳等.上海市2010年部分基层医院血液检验质量分析[J].检验医学,2012.

[2] 杨馥彦,黄江玲,邱少雄等.血涂片分析在血常规检验中的重要性[J].吉林医学,2013.

[3] 常新剑,任俊宏.全自动血液分析仪进行血常规检验时血涂片分析的重要性[J].医学信息 ,2013.

[4] 高丽娟.血涂片分析在血常规检验中的重要性[J].哈尔滨医药,2013.

[5] 戴怀玉.血涂片镜检在血常规检验中的重要性分析[J].中外医学研究 ,2013.

[6] 辛小明.血涂片镜检在血常规检查中的意义[J].基层医学论坛,2012.

[7] 李艳珍.血涂片显微镜检查在血常规检验中的必要性分析[J].中国药物与临床,2013.

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【关键词】医学高职高专 检验仿真实训室 仪器使用与保管

一、医学高职高专院校实训室仪器使用与保管存在的问题及分析

（1）学生的文化层次参差不齐，使得整体操作技能水平不高，对仪器的维护以及认知程度不足。

（2）教师对学生能正确使用仪器期望值过高。学生对实训室仪器充满好奇，想早点了解、熟悉。所以当老师介绍仪器使用时并没有认真听讲，但当进入实训室时发现了很多没有预想过的问题，学生上实验实训课人多、同时没在教师指导下使用仪器，很容易使仪器损坏。

（3）学生自身对仪器认识不到位。没有把仪器当作实验的重要实践技能工具，对仪器认识不透彻，不能将自己的兴趣与仪器很好的有机融合。习惯于被动的学习，不会主动的将仪器和技能、科研结合在一起。

（4）学校对实验实训人员队伍不够重视，管理实验实训仪器的实验教师队伍待遇低、自身责任心不强。实验实训教师没有对各类仪器进行培训，以为都是教师的事，不是自己的事。没有对新进仪器进行登记造册、档案管理。在实验者使用仪器后没有督促其登记。

（5）在学校进行教学的同时开展科研活动中，实验实训仪器故障后，没有及时登记故障原因、没有请工程师及时维修。使得实验实训室虽然仪器很多，但大多无法使用。主要是因为仪器当时故障时没有及时发现或没有及时登记进行维护。

（6）学生在学校没有很好的掌握实验实训仪器的原理、使用、维护，到医院实习、工作中会对仪器检测过程故障不好判断，会造成严重后果，检测结果发生误差，影响医生对病情的诊断。

二、实验实训仪器要加强管理及使用的重要性

（1）医学检验实验实训室仪器至关重要，不仅有助于学生在实训室得到技能培训。而且是医学生进入医院与在校学习实践的重要桥梁，如在实践中要求每个学生熟练地掌握普通单目显微镜到双目显微镜的使用技术，水平离心机与高速离心机使用技术，721、722分光光度计的使用，全自动血液分析仪、尿液分析仪、尿沉渣分析仪、全自动生化分析仪、酶标仪等仪器的正确使用，通过实验实训室使学生更好地走上临床。

（2）有助于仪器发挥更多的功能。医学检验仿真实训室的仪器比较贵重，如果损坏，不光造成经济损失，还会导致实验课的开出。因此，要对医学检验仿真实训室的仪器进行良好管理与维护。

（3）有助于提高学生的职业素质。降低学生在初学时因对仪器操作技术不熟练，标本对仪器污染的概率。通过严格的规章制度，增强了学生的对实训室仪器的正确使用观念和集体维护意识。

（4）在高职高专院校发展的今天，职业院校是当今的主流，教师在搞好教学的同时更注重自身的业务发展，进行学术交流、开展科研活动，更需要实验实训仪器。

三、高校、高职专科检验实训室仪器使用与保管的途径与方法

（1）建立仪器档案盒，强调仪器的重要性：一台新到实验室的仪器，首先要建立仪器的档案，具体要对仪器的名称、产品编号、生产厂家、使用试剂的名称、说明书、启用时间、使用情况、损坏情况、厂家工程师联系方式，以及在安装时出现异常情况等及时登记。并签下验收是否合格清单。

（2）制定班级分组组长、个人负责制：人手一台仪器时，在实验课前由组长到准备室领取仪器卡片，每四人一组，由组长按编号发给对应编号的学生。先由每位学生检查各自的显微镜是否完好，如没有问题签字，汇总交给组长后才能到准备室领取实验用品，实验教师通过组长汇总得知是否有仪器故障并及时排除。对于共用体积小的贵重仪器，在使用与管理时按班级学号分为4人一组，由组长到准备室签名领取实验仪器，才能上实验课，实验完毕后由组长清点完好后归还。

（3）在实验课中对学生要反复强调仪器在实验中的重要性，增强学生爱护仪器的意识，在仿真实训第一节实验课时，向学生讲清实验实训室实验中不同仪器使用与管理有不同的特点，各类标本的来源不同也对仪器具有不同的程度的污染性，实验中用到的显微镜、离心机、尿液分析仪、全自动粪便分析仪等各种仪器是仿真实训室使用时所需的必备仪器，要求学生在实验操作仪器时要像爱护自己的物品一样爱护它，对小的仪器要轻拿轻放，体积大的仪器避免碰撞，并且要严格按操作规程进行使用，如有不清楚的地方应及时请教实验教师。

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【关键词】 血涂片镜检；血常规检验；血细胞分析仪

随着现在社会的发展，人们的生活方式以及对于健康的重视程度也越来越高，去医院进行健康体检的频率呈现增加的趋势，导致实验室的工作人员工作量日益增加[1]。同时检验工作人员的工作量也因为血细胞分析仪的应用而得到了缓解，检验质量有所提高且报告时间有所缩短。但是对于自动分析仪的过分依赖导致了手工血涂片镜检越发不受重视，使得临床出现一部分的漏诊漏报情况，对医生在诊断还有治疗等方面，存在较大的影响。所谓血涂片镜检是指经过推片、染色等各种程序之后，通过光学显微镜对血液当中的白细胞进行分类，除此之外还需要观察血小板形态以及寄生虫等，通过对血液形态学的基础检查方式，使得疾病诊断在准确率方面能够有所提高。

1 资料与方法

1.1 标本来源 选自我院门诊以及住院患者血液标本689例。所有患者血液标本均使用EDTA-K2抗凝。

1.2 仪器与试剂 XE-2100血液分析仪以及相配套的原装试剂，双目光学显微镜以及瑞氏-吉姆萨复合染液。

1.3 方法

1.3.1 涂片制作、染色以及镜检 主要操作如下：①涂片制作要求：根据实际情况以及XE-2100血细胞分析仪本身性能，以其它相对比较先进的检验科室本身所带有的显微镜检查血涂片标准作为参照进行检查。仪器对于白细胞、血小板以及红细胞等三个方面的异常有报警提示；②涂片标准：本次使用的涂片需要达到头体尾三个部分划分明显，厚薄程度恰当，细胞分布平均以及血膜长度在玻片上面占据60%左右；③血涂片染色：染色是使用瑞氏-吉姆萨复合染液进行，染液的配置主要以《全国临床检验操作规程》当中相关标准作为参考；④血涂片镜检：首先使用低倍镜或者是高倍镜对涂片的全貌进行观察，观察内容主要是染色以及涂片是否符合要求，评估白细胞的数目和仪器结果是否一致，对外周血细胞在分布以及各类血细胞比例有大致的了解，其中涂片尾部是否有巨大或者是异常细胞要特别观察，在涂片体尾交界的地方有一处核细胞和红细胞不重叠，以此作为具有代表性的油镜区；⑤油镜观察：主要观察内容是细胞的形态、比例以及分类计数。

1.3.2 实验方法 主要操作如下：①EDTA-K2抗凝，通过真空采血的技术在患者的肘静脉采2ml血液，在室温放置并且在采血之后的2个小时之内按照仪器本身操作要求进行检测；②把使用XE-2100血细胞分析仪检测共689例报告进行分析，在所有报告中有114份标本符合涂片检查相关标准，进行涂片染色镜检。涂片染色镜检按照相关标准操作进行。观察内容主要为以下方面：白细胞分类计算以及形态；血小板大小以及形态；红细胞大小以及形态；对于如中毒颗粒或者是寄生虫等其它异常和检测结果是否一致。

2 结 果

在本次研究所收集的血细胞分析病例共有689例，血涂片镜检共有114例。其中发现异性淋巴细胞增多症有1例、传染性单核细胞增多症有2例、巨幼细胞性贫血有4例、缺铁性贫血共有5例、急性白血病2例，慢性粒细胞性白血病有1例，剩余99份血涂片镜检结果和血细胞分析仪结果一致。

3 讨 论

随着医学技术的发展，血细胞分析仪在临床上面的应用越来越广泛，对于全血细胞在分析质量、效率以及精密度上面有了很大的提升作用，但是我院使用的是五分类法，五分类法是通过各种物理以及化学的技术，对白细胞进行分析并且获得外周血液当中五种常见的白细胞类型，也就是嗜中性粒细胞、嗜碱性粒细胞、嗜酸性粒细胞、淋巴细胞以及单核细胞。对于幼稚细胞还不能够有效区分，更加不要说对异性淋巴细胞以及中性粒细胞毒性变等进行识别。这样的不足让我们知道血细胞分析仪在全血细胞计数分析当中只是一种过筛手段。如果遇到了可疑情况特别是病例条件之下，所检测出来的结果并不一定可靠，所以需要再通过人工涂片镜检来进行复查，当前很多医院没有复查的程序导致频繁出现医疗投诉或者是事故[2]。

全血细胞计数的检测结果，是需要用于临床患者的诊治以及预后当中，也有的是用于体检者健康状况的评估，当检测结果出现异常的时候需要使用血涂片镜检再次认真检查，将两种检测方法结果进行综合分析，这样能够有效的提高计数的准确率，更重要的是这样的复查能够让比较常见的贫血、感染性疾病以及白血病患者可以得到及时明确的诊断[3]。

参考文献

[1] 余苗苗，周丽杰，金辉.血涂片分析在血常规检验中的重要性探析[J].中国保健营养，2012（10）：154-155.

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【关键词】血液细胞检验，注意事项，质量控制

【中图分类号】R446.1 【文献标识码】B【文章编号】1004-4949（2014）04-0087-02

血常规检验不但为各种血液病的诊断及治疗提供了重要依据， 也对其它系统疾病的诊断和鉴别提供了许多重要信息。因此，，血常规检测的准确与否至关重要。在临床医学中，为了取得可靠、有效、准确的血液检验结果，预防漏诊及误诊，对血液细胞检验做了大量的临床试验研究。在血液常规检测过程中，要对血液标本采集、血液标本稀释、血液标本储存、血液检验过程以及血液分析仪等进行有效的质量控制。

1血液细胞检验概述

血液细胞检验是指对血液中的血红蛋白（HGB）、血小板（PLT）、红细胞（RBC）、白细胞（WBC）及相关数据进行的计数检测分析。血液细胞检验不仅能够有效诊断各种血液病，而且还能够为其他多种系统疾病的鉴别和诊断提供有用的信息。血液细胞检验是当前各大医院检验科室中最为多见的检验内容，也是临床医疗诊断最为常用的检验方法。传统的血液检验方法主要是采用人工显微镜对血细胞进行检验，现代的检验方法主要是采用自动血液分析仪对血液细胞进行检验，检验自动化、智能化程度不断提高。然而，无论是传统的镜检还是现代的血液分析仪，要获取可靠、准确的血液分析实验结果，都需要充分考虑实验室血液检验中的各种影响因素，并采取相应的质量控制措施。

2血液细胞检验的注意事项分析

2.1采集血液细胞样本应该注意事项

临床上主要是采集末梢毛细血管血液以及静脉血作为血液细胞检验的标本。静脉血的血样能最准确地反映人体的病变情况，是最为可靠的血液标本。与手指血相比，静脉血的准确性以及可重复性都较高，白细胞计以及血小板计数准确率都较高。基于此，在采集血液检验的标本时，应尽量采用静脉血作为标本。此外，不允许将患者输液的滞留针处或输液静脉同侧血管中采集到的血液作为检验标本，防止上述所采的血液被稀释，影响血液检验的准确率。同时，用止血带压迫止血的时间不宜超过1分钟，防止患者淤血及血液浓缩，导致血液检验结果不准确。

2.2血液细胞样本处理过程应注意的事项

采集到血液标本后，必须对标本进行抗凝剂抗凝处理，EDTA是目前使用较为普遍的抗凝剂，其对血小板以及白细胞形态的影响较小，适合用于血液细胞的检验。除了血液生理性因素以及采取部位等的影响外，血液标本的质量主要取决于抗凝剂与血液之间的比例。当抗凝剂的量不足时，血浆中会出现微凝血块，使用血细胞分析仪对具有微凝血块的标本进行检验时，微凝血块很可能会导致仪器阻塞，同时也会影响实验指标的准确性。

血液主要是由血浆及血细胞组成的红色黏稠混悬液。在对白细胞进行计数检验时，直接对白细胞进行血液计数是非常困难的，因而要在计数检验前要对血液进行合理的稀释处理。根据血细胞分析仪的基本原理，在对血细胞分析仪进行设计时，要将血液的计数容量及血液的稀释倍数充分考虑进去，作为重要的设计标准。

2.3血液细胞的储存时应注意的事项

抗凝剂因使用浓度以及使用时间的不同，会对血细胞的形态造成严重影响。国内外研究显示，用EDTA抗凝剂对静脉血液标本进行抗凝时，在血液标本采集后的5min内或30min以后，在室温下保存8h内对其进行检测，可以获得最佳检验结果。如果不需要对白细胞或者血小板进行分类的确切数据，血液细胞标本在2～8℃的环境下能保存24h。预稀释的血液细胞标本应尽可能在制备之后的10min内进行检测。如果在血液细胞稀释液中添加有细胞稳定剂，预稀释血液标本在常温下保存的时间也不可以超过4h。

3血液细胞检验的质量控制及措施

3.1制定完善的血液细胞检验质量控制管理机制

为了更好地提高血液细胞检验的质量，现代化的医疗机构应以先进的质量控制以及管理理念为指导，建立健全实验室检验质量控制机制，明确各工作岗位的检验人员的职责权限以及合理的奖惩制度。此外，还要制定严格的实验室操作标准，以规范实验人员的检验操作，使血液细胞检验工作的质量控制有据可循，为血液细胞检验的质量控制提供技术标准。

3.2优化血液细胞检验工作

优化血液细胞检验工作的流程，可以有效提高血液细胞检验的质量，为血液细胞检验的质量控制奠定基础。医院在对血液细胞检验结果进行质量控制时，应充分认识到检验工作流程对检验质量的提高以及质量控制的重要性。医疗机构应根据本院的血液细胞检验设备为基础，优化检验工作流程，促进医院血液细胞检验质量控制的顺利开展。

血液细胞检验过程的质量控制对血液细胞的检验质量有着重要的决定作用，在进行细胞检验前，应对仪器进行科学、准确得校验，并严格按照操作规程要求进行操作，以使检验质量满足临床诊断的要求，保证血液检验结果的精确度。

3.3血液检测分析仪的质量控制

血液分析仪细胞计数的最合适温度应保持在18～22℃之间，当温度过高或者过低时，都对测量结果产生影响；在打开血液分析仪后，首先要做实验室质控，并参与实验室间质评。实验室内的质量控制是血液细胞检验质量控制的重要环节；严格依照实验室操作程序对仪器进行操作，并采取相应的保养措施对仪器进行定期保养、清洗及浓缩冲洗，避免仪器发生堵塞现象；根据参数变化以及直方图确定细胞计数结果的准确性，所分析的准确性不高时，必须用显微镜进行复查；分析参数与实验结果之间的关系，将实验结果与临床分析相比较，判断二者是否相符，如果出现异常结果，应主动与临床实践相联系。

结语

总之，影响临床血液细胞检验结果的因素较多，要想取得科学、准确的检验

结果，对实验过程要应进行严格的监督及管理，确保实验室检验操作规范化。只有这样才能保证血液检测结果准确。

参考文献

[1] 张仲远，迟红梅.血液细胞检验中的注意事项及质量控制[J].实用医技杂志.2008（24）：52.

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关键词: 医学检验;标准化;实例分析

中图分类号: R197.6

1 医学检验标准化的重要性

医学检验是运用现代物理化学方法、手段进行医学诊断的一门学科,主要研究如何通过实验室技术、医疗仪器设备为临床诊断、治疗提供依据。在高等院校通过系统学习这门学科,使学生了解如何鉴定人的血型、确定一个人是否贫血、肝功能是否正常、怎样拍人体胸部及四肢的X线片,怎样进行CT扫描等等。标准化(standardization)是指某一个领域需要达到的统一的标准要求,是为在一定的范围内获得最佳秩序,对实际的或潜在的问题制定共同的和重复使用的规则的活动。如信息工作标准化,其目的是使文献工作走向标准化、系列化和通用化,达到信息交流和资源共享。国际标准化组织(ISO)的主要任务是制订国际标准、协调世界范围内的标准化工作。标准化的问题由来已久,中国自秦代开始,历代王朝都有法定度量衡标准以及法定违反标准的法则。中国现代标准化工作的任务是制定标准、组织实施标准和对标准的实施进行监督。为了发展社会主义商品经济,促进技术进步,改进产品质量,对工业产品、规格、质量、等级或者安全卫生等需要有统一的技术要求,使标准化工作适应社会主义现代化和发展对外经济的需要。

标准化的实质是通过制定、和实施标准,达到统一,从而获得最佳秩序和社会效益。统一就是为了保证事物发展所必须的秩序和效率,对事物的形成、功能或其他特性,确定适合于一定时期和一定条件的一致规范,并使这种一致规范与被取代的对象在功能上达到等效。标准化为科学管理奠定了基础。所谓科学管理,就是依据生产技术的发展规律和客观经济规律对企业进行管理,而各种科学管理制度的形式,都以标准化为基础。标准化是科研、生产、使用三者之间的桥梁。一项科研成果,一旦纳入相应标准,就能迅速得到推广和应用。因此,标准化可使新技术和新科研成果得到推广应用,从而促进技术进步。标准化应用于科学研究,可以避免在研究上的重复劳动;应用于产品设计,可以缩短设计周期;应用于生产,可使生产在科学有秩序的基础上进行;应用于管理,可促进统一、协调、高效率等。随着科学技术的发展,生产的社会化程度越来越高,生产规模越来越大,技术要求越来越复杂,分工越来越细,生产协作越来越广泛,这就必须通过制定和使用标准,来保证各生产部门的活动,在技术上保持高度的统一和协调,以使生产正常进行。所以说,标准化为组织现代化生产创造了前提条件。大量的环保标准、卫生标准和安全标准制定后,用法律形式强制执行,对保障人民的身体健康和生命财产安全具有重大作用。

2 医学检验标准化操作的实例分析

标准化操作,又称为标准操作规程(Standard Operating Procedure,SOP),是为有效地实施和完成某一临床试验中每项工作所拟定的标准而详细的书面规程。以医学检验中的痰液细菌检验为例,众所周知,传统习惯程序的痰标本细菌学检验其临床符合率并不高,传统程序的痰标本细菌学检验缓慢,很不适应临床诊断治疗的迫切性。究其原因,除了因为微生物和人体的相关性本身就具有复杂性:源自细菌的致病与条件致病的辨证性,如致病菌可能为正常携带,而细菌在肺通气功能异常病人的下呼吸道可以发生单纯定植或感染,要证明培养结果与感染的相关性是医学微生物学所面临的难题;还因为痰标本采集不规范导致的不合格标本带来的培养结果与病人感染不相符。因此,提出相应详细可行的令全国同行公认的统一规范的标准化操作程序(SOP)和完整的痰液培养的质量控制办法,建立规范而快速的痰液细菌学检验的SOP对于提高呼吸系统感染病的诊治水平和控制抗生素的滥用等问题均有重要的作用。

医学检验标准化操作实例:第一,标本接收筛选方案。目测黄色、灰色、血性、铁锈色、浑浊、稠厚、呈现团块状的标本为合格标本;而无色透明、有灰白片状物或黑色小点,有明显食物渣滓、纸屑灰尘的为不合格标本。经过目测筛选的标本,在洗涤前还需再经过显微镜下筛选,取约0.1ml痰液(黄豆大小)用接种环均匀涂布成2×2cm2大小的涂膜,在显微镜下,凡脓细胞大于25/LP且鳞状上皮小于10/LP的标本为合格标本,可进入下一步程序;而脓细胞小于10/LP但细菌数量大于+++或鳞状上皮大于25/LP的标本为不合格标本,应拒收。第二,标本预处理。先用20ml生理盐水洗涤两次,经过10ml生理盐水稀释后,加入1%的PH7.6的胰蛋白酶溶液消化90min后接种,并同时在洗涤后制作原始痰涂片,进行染色镜检。第三,读片。根据人体对细菌、真菌感染在早期主要以非特异性免疫的细胞免疫为主的特点,结合呼吸系统生理病理特点,阐述痰液形成过程和排出过程。在下呼吸道中感染中形成的炎性渗出、包裹物中存在与感染直接相关的病原菌,在自然排痰的过程中会被上呼吸道的正常菌群所污染,但污染菌位于炎性包裹物之外,且人体对正常菌群具有共生性保护因而不会产生吞噬现象。据此,将选择痰标本中脓细胞成团块状分布,集中而不稠密,且周围无鳞状上皮细胞或无大量成团状分布的细菌球的区域为读片区,认真收寻20-30个视野中脓细胞聚集处的脓细胞胞浆中有无吞噬的细菌及细菌的染色排列特征,菌体特征(如粗细、长短、扭曲)并作记录,将此作为确定病原菌的理论依据。第四,标本的接种培养。第五,读碟。第六,细菌鉴定。在痰标本的直接涂片镜检结果的指导下进行分离鉴定,根据痰液涂片直接镜检结果中被炎性包裹及脓细胞吞噬的细菌的革兰染色后的形态特征为指引,阅读平皿中菌落形态并作菌落细菌的革兰染色,选择与镜检结果一致的细菌(该步骤应该在经验丰富的高资历微生物检验老师的带领下进行),必要时进行纯培养,再根据该细菌在各种不同培养基上的生长情况及相应菌落特征进行初步鉴定和分群,随后在细菌革兰氏染色镜检特点、触酶、氧化酶等简单试验的进一步鉴定和分群到相关的科或属后采用相应的编码鉴定系统鉴定手工或自动化鉴定,对溶血性链球菌及肺炎链球菌在生化反应的同时采用乳胶试剂作为补充。为了缩短鉴定时间还可采用具有培养鉴定一体化作用的多功能培养基配合快速酶法编码鉴定系统进行鉴定。第七,药敏试验。按CLSI相关规定进行药敏试验,可采用特殊的药敏试验观察计算方法(如自动化仪器采用的光电浊度速率法、荧光速率法等)缩短药敏时间。向临床提供一份快速的初步报告。第八,结果报告。常规痰培养报告应包括完整的病人信息、临床诊断、抗生素使用情况(由临床医生在申请单上注明)、未染色标本直接涂片结果(有无脓细胞、脓细胞数量、上皮细胞数量、二者比例、有无真菌孢子/菌丝、有无寄生虫等)、Gram染色镜检结果(包括脓细胞数量、上皮细胞与胞外正常菌群数量与污染程度、脓细胞胞内吞噬细菌/真菌孢子的情况,炎性包裹物内细菌和真菌的存在情况、脓细胞和炎性包裹物内的细菌/真菌的染色特征、形态特征和排列特征)、所分离细菌的鉴定结果、耐药监测结果、一般药敏结果、该检验结果与临床诊断和治疗相关性的评述和建议。第九,质量控制。为保证细菌学检验结果的快速准确和临床符合率,应对全过程进行严格的质量控制。

3 结语

在经济、技术、科学及管理等社会实践中,对重复性事物和概念,通过制定、和实施标准,达到统一,更能获得最佳秩序和社会效益。统一是为了确定一组对象的一致规范,其目的是保证事物所必须的秩序和效率;统一的原则是功能等效,从一组对象中选择确定一致规范,应能包含被取代对象所具备的必要功能;同时,统一是相对的,确定的一致规范,只适用于一定时期和一定条件,随着时间的推移和条件的改变,旧的统一就要由新的统一所代替。

参考文献

[1] 吕珏.浅谈医学检验分析前质量保证[J].临床检验杂志,2007,(6).

[2]张志德.医学检验质量控制的方法[J].实用医药杂志,2007,(5).

[3]王志平.如何确保医学检验质量的可靠性[J].中国民康医学,2008,(2).

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关键词： 实验教学 动物传染病 课程改革

随着21世纪科技突飞猛进的发展及人们对兽医工作者服务质量及要求的提高，培养具有较强实践能力和创新素质的兽医人才已是当前农业大学刻不容缓的工作。动物传染病是兽医专业一门重要的专业必修课，实验教学作为该门课程的重要组成部分，其重要性不言而喻。就动物传染病实验课程的改革，我有以下几点想法。

一、密切联系实际，更新教学内容。

1.联合实际，不断更新实验内容。

在21世纪的今天，随着养殖业不断地规模化、集约化发展，虽然为社会创造了巨大的经济利益，但是同时也为动物传染病的发生和流行创造了条件。动物传染病的发生和流行有了新的特点：新发病的种类越来越多，且危害严重。我国近几年出现了不少严重危害畜禽业的传染病，如禽流感、高致病性猪蓝耳病等，这些传染病不仅严重危害了养殖业，造成了严重的经济损失，而且给食品安全带来了威胁。而我们的实验课程仍然沿用以前的教材，对于这些严重威胁国计民生的重要传染病的实验没有开设，这就需要我们对动物传染病的实验教材进行改革更新。针对当前形势，为了培养更优秀的人才，这些应当充实到实验教学内容当中去［1］。

2.联系行业企业，根据需要适时更新教学内容。

动物医学专业培养的是具有防治畜禽疾病的基础理论和实践技能，能胜任动物疾病及人畜共患病预防、诊断和治疗等工作第一线的高级技术应用型人才。既然培养的是一线的高级技术应用型人才，我们就应该密切联系行业企业，关注其需要，适时更新教学内容，使教学内容不至于与时代脱节。这样我们所培养的学生能满足行业企业的需要，也使毕业生在毕业后能很快地投入到第一线中去。

二、加强实验室硬件和软件的建设，使实验室建设更趋合理化。

1.加快实验室硬件建设，促进教学改革。

实验室环境与设备条件是实验教学的硬件部分，也是实验教学的基本保障［2］。近年来，我院对实验教学比较重视，对实验室建设所投入的经费很多，动物传染病实验室新添了荧光显微镜、全自动酶标仪、倒置生物显微镜等教学仪器设备，在很大程度上满足了实验教学的需要，也进一步促进了实验教学改革。实验室环境稍微有点欠缺，由于是借用的化学实验室，环境达不到标准，如面积不够，实验室内没有传染病实验室所需的紫外灯，等等。相信这种情况随着学院新校区的建设将会得到解决。

2.在加强硬件建设的同时，不能忽略软件的建设。

软件的建设其实就是实验室管理人员的合理配置和合理运用。由于实验室人员的工作量大，工作繁琐，实验课一直是理论课的附属课程，很多老师都不愿做这项工作，造成实验教师的流动性很大。这对实验室管理尤其是实验教学是一项很大的弊端。应该建立一系列措施改善这一现象，比如对实验系列老师的学科发展要有长远的考虑，对实验教师的职称评定有一定的优惠政策，尤其是应该把实验课独立出来，成为一门单独的课程。我们学院较重视教师的培养，实验教师都具有本科以上学历，但是值得重视的是实验教师在不断提高学历层次的同时，还应注意不断学习使自己的知识结构更趋合理化。

三、改进教学模式，增强学生主观能动性。

1.改变传统的教学模式，发挥学生在实验中的主体作用。

传统的实验教学模式分为3个步骤：教师讲、学生做、课后总结。这种教学模式中，老师发挥了主导作用，实验课前的预试和所用器材、试剂等均由老师一手包办，学生只负责操作。部分学生并不了解实验的设计思路和整个流程，只知道围着老师转，只知其然而不知其所以然［3］。因此，要根据动物传染病的课程特点，优化教学模式。比如巴氏杆菌病的诊断，先让学生自己预习，写出实验设计，实验课前要求学生认真预习，查阅相关资料、拟订实验方案、写出预习报告［4］［5］。了解巴氏杆菌病的诊断先要进行攻毒，还要制作鲜血培养基等。接着进行实验前的准备工作，准备所需器材及一些预实验。实验操作，清理实验室，实验后的总结。实验设计、实验材料准备、实验操作、实验后总结、清理等全部由学生自己完成。这样打破了传统的动物传染病教学模式，变老师主导为学生主导，老师在实验教学中起辅助作用。这使得学生在实验中发挥了主体作用，学习效果更好，积极性更高。

2.开放实验室，进一步提高学生学习积极性。

因为教学的需要，实验室紧张，实验室不可能全天不定时开放。学生想去实验室准备实验或做实验有一定的困难，这在一定程度上制约了学生的学习积极性，也不能满足学生的学习需要。面对这样的矛盾，我们应该根据教学的需要定期开放实验室以满足学生的学习需要。以后搬到新校区后，在实验室充裕的情况下可以实行一部分实验室满足上课的需要，一部分实验室面对学生全面开放。这样学生可以自主选择时间进行实验，必然会更好地调动学生的学习积极性。

参考文献：

［1］郑玉姝，赵朴等.动物传染病新形势引发的教学内容改革与思考［B］.黑龙江畜牧兽医，2010.05.0156-02：156-157.

［2］王建英，张义军等.面向21世纪谈我校实验室体制的改革与建设［J］.山西医科大学学报（基础医学教育），2002，4，（2）：151-152.

［3］王胜军，仝佳，苏兆亮等.临床免疫学和免疫检验的实验课程改革［B］.检验医学与临床，2007.10：1004-1005.

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随着《中华人民共和国献血法》和《血站管理办法》及相关法规规程的实施,标志着无偿献血已经走入正轨,并且逐渐被人们所认识和接受。我站流动采血车每天去街头采血,采血前对献血者HBV检测采取胶体金法进行快速筛选。现将结果报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料本组960名白城市无偿献血者。年龄20～52周岁。

1.2 试剂HBV试剂由厦门新创公司提供。

1.3 检测方法HBV快速胶体金法操作步骤:将试纸条取出粘贴于不干胶记录纸相应位置水平放置并作好标记,用加样器或毛细细管吸取60微升新鲜全血缓慢加于试纸条箭头下方的垫片上,为防止弱阳性标本漏检,加样后10分钟观察并记录实验结果。

1.4 复检方法采用ELISA法。

2 结 果

对960名献血者进行筛选分析,其中阳性63人,阳性率为6.56%。ELISA法检测HBV阳性为70份,阳性率为7.29%。胶体金法与ELISA法所检测结果比较,胶体金法阳性率低0.73%,假阴性为7.29%。

3 讨 论

HbsAg为乙型肝炎表面抗原。HbsAg不仅存在于血液中,而且还存在于许多体液和分泌物中,如唾液、尿液、乳汁、等。一般在乙肝患者转氨酶(ALT)升高前2～8周的血清中出现。患者进入恢复期后,HbsAg的滴度可逐步降低;当患者血中出现抗HBs时,HbsAg可消失。由此可见,HbsAg是乙型肝炎早期诊断的指标之一。临床发现,一部分患者HbsAg在血清中可持续存在,原因可能是编码HbsAg的病毒基因与患者的肝细胞DNA进行了整合。在这种情况下,即使HBV已从人体内消除,肝细胞仍能不断地复制HbsAg。

目前,国内最常使用的测定HbsAg的方法是酶联免疫吸附试验(ELISA),其次是放射免疫试验(RIA)。ELISA其原理是使抗原或抗体结合到某种固相载体表面,并保持其免疫活性。使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体,这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性,又保留酶的活性。在测定时,把受检标本(测定其中的抗体或抗原)和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与其他物质分开,最后结合在固相载体上的酶量与标本中受检物质的量成一定的比例。加入酶反应的底物后,底物被酶催化变为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据颜色反应的深浅刊物定性或定量分析[1]。由于酶的催化频率很高,故可极大地地放大反应效果,从而使测定方法达到很高的敏感度。ELISA进口试剂盒可测到的血清HbsAg最低浓度为0.2ng/ml,国产试剂盒目前能达到0.5ng/ml。

胶体金是一种常用的标记技术,是以胶体金作为示踪标志物应用于抗原抗体的一种新型的免疫标记技术,有其独特的优点。近年已在各种生物学研究中广泛使用。在临床使用的免疫印迹技术几乎都使用其标记。同时在流式、电镜、免疫、分子生物学以至生物芯片中都可能例用到。它主要利用了金颗粒具有高电子密度的特性,在金标蛋白结合处,在显微镜下可见黑褐色颗粒,当这些标记物在相应的配体处大量聚集时,肉眼可见红色或粉红色斑点,因而用于定性或半定量的快速免疫检测方法中,这一反应也可以通过银颗粒的沉积被放大,称之为免疫金银染色。

1971年Faulk 和Taytor将胶体金引入免疫化学,此后免疫胶体金技术作为一种新的免疫学方法,在生物医学各领域得到了日益广泛的应用。目前在医学检验中的应用主要是免疫层析法和快速免疫金渗滤法,用于检测 HBsAg、HCG 和抗双链DNA抗体等,具有简单、快速、准确和无污染等优点[2]。

从本组结果来看,胶体金法存在一定程度的假阴性和假阳性,但它具有快速操作简单标本量少的优点,同时缩短献血者等待血液检测时间方便献血者。从实际工作分析,还需要配合其他的方法进行复检,最大限度地降低所采血液的不合格率,减少血液资源浪费。除严格按照检验操作规程进行检测,选择较好的试验方法和试剂,提高检测的特异性和灵敏度,确保检测的准确性外,还应认真做好献血前的健康征询工作,加强献血前的宣传教育,进一步加大宣传力度,侧重宣传医学科普知识,宣传血液的检验、成分血的制备、血液利用的严格性和科学性,,使献血者进一步了解自己捐献血液的质量及所发挥作用的重要性。

【参考文献】

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【关键词】临床免疫检测；现代医学；设备管理；质量控制

1 引言

伴随着世界经济与学技术的蓬勃发展，医疗技术的发展在现当代取得了一系列举世瞩目的成就，就临床免疫学检验工作而言，已成为现代医院诊疗工中不可或缺的重要组成部分。随着现代医疗诊断技术的不断发展，如何有效地对临床免疫检验的质量进行控制已直接影响到临床的诊断结果的准确性，同时也间接影响到最终地临床治疗效果。由于在整个标本采集的过程中免疫检验标本从采集到结果的检验需经历的环节较多，这就对临床医师对患者的生理、病理情况以及争端方法的熟悉程度及综合技能提出了很高的要求；同时，也对与之相关地护理人员及检验人员对于整个临床免疫检验的所有与之相关的影响因素有全面系统地了解和认识的能力有了更为严格的要求，对于护理人员和医师及其检验人员要求将每一个环节的操作及其顺序须做到规范化和统一化，完全按照相关标准来严格执行，从而达到确保免疫检验的可靠性和准确性的要求，并提高临床治疗的效果。

2 临床免疫检验的质量控制

作为临床免疫检测以及质量控制的两个主要方面而言，室内质控和室间质量评价对于整个临床免疫检验是不可或缺的；室内质量控制主要是指用来监测样本测定准确度的措施，从而达到确保对检测结果一致性的目标；室间质量评价是指联合多家实验室对同一采样样本进行分析，并且对相关实验结果进行验证的一种处理措施，这种措施常常是在室内质控的基础上进行的，通过这种方法来对实验室的检测水平进行最终的评价，是实验室加强室内控制的基础。最近几年，随着质量控制在整个实验管理所占比重的不断增大，在将整个样本的检测准确度不断提高的前大提下，临床免疫检测人员对整个样本检测的所有步骤均需执行严格的质量控制措施，从而达到所取得的临床效果最大化的目的。

3 提高临床免疫检验质量的方法

3.1 标本采集与设备管理的优化

作为检验分析前对质量控制的要求来说，检验人员首先需要做到对标本的采集和保存工作；密切注意整个样本采集过程中的样本采集的时间、止血带的使用时间和方法、采血的姿势、抗凝剂和稳定剂的选用情况。免疫检验工作，首先要求检验人员注意对整个标本的采集和处理工作。不同的采样试验对所采集的标本的要求有所不同。对于大多数以病人血清为标本的免疫检验而言，采集血清的时间应在清晨被采集者未进食前为宜，保持针筒的干燥性，抽血完成后需要马上除去针头并将所采集到的血液注入到干燥的试管内，注意在整个注血过程中采样人员的注血速度不宜过快，不能对所采样本进行振摇等一系列不允许的动作，以防溶血。在将整个血清分离完成后，应及时送往检测，如需要求对所采试样进行保存的话，可将试样置于冰箱内冷藏，不宜速冻，以防止因为反复冻融而对整个检验结果产生不良的影响。作为对测定的血清标本的收集过程来说，激素类和治疗药物的使用要特别注意收集时间的变化以及检验人员的变化对整个测定结果的影响；其次，在采购人员对于相关仪器设备及试剂的选择方面也同样对整个测量结果有着十分大的影响；作为整个检验的执行者来说仪器设备性能的好坏将直接对检验结果的精确度造成非常大的影响。在整个检测结束后要注意地成套仪器的保养和维护工作，工作人员要经常对温度计、水浴箱、酶标仪、稀释棒、恒温箱、吸量管、分光光度计等临床免疫检验的仪器设备进行核定、校正以及检查等工作，从而确保仪器设备的使用性能，减少实验过程中因为仪器所引起的误差，继而来保证检验结果准确性的目的，最终为意识的治疗及患者的康复提供最有用的保障。对于当今品鱼龙混杂，质量不一的试剂市场来说，慎重选择且经常对试剂性能进行有关试剂的检定工作是保证检验成功的重要因素。

3.2 提高技术人员的素质

人是整个免疫检验过程中的主体，是整个免疫检验过程中最积极、表现最为活跃的因素。在免疫检验过程工作的所有环节，都需要靠人来对整个试验进行操作和把握，最终实现对整个临床免疫检验质量控制的目标。因此，在整个临床免疫检测过程中检验技术人员的综合素质与业务能力会对整个免疫检验的质量和结果产生重大的影响。因此，就要求临床免疫检验的工作人员要每天按时对相关检测设备进行消毒、搞好实验室的卫生；做好相关实验仪器的定期检查工作：如冰箱、恒温箱、水浴箱、酶标仪、荧光显微镜等，做好对整个实验仪器的记录使用情况，并如实填写实验报告，按规定进行免疫检验的质控工作，并分析情况做好记录，签字等工作。

4 小结

因此，对于整个临床免疫检验的过程而言，对免疫检验做好全面的质量管理是确保整个临床免疫检验结果准确性的重要保证。由于在对免疫检验标本进行采集到对标本进行检验的这个过程需经历很繁琐且比较复杂的一系列环节，因此，就要求临床医师必须要熟悉患者的生理、病理情况，同时，也要求护理人员及检验人员对临床免疫检验的各种影响因素要有全面系统的了解和认识，每一个环节的操作须做到规范化，完全按照标准进行，以确保免疫检验的可靠性和准确性，并提高临床治疗效果。

参考文献

[1] 马洪滨，王晗，刘立明，等.质量控制在临床免疫检验中的作用[J].医疗卫生装备，2012，33（4）.

[2] 董书民.临床免疫检验的质量控制效果分析[J].中国卫生产业，2011（8）.

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【摘要】 为了切实提高物理实验教学质量，培养学生实验能力，针对当前实际教学中出现的问题，对实验内容，教学方法和考核方式进行改革。

【关键词】 医学物理实验； 存在问题； 教学改革

在医学院校中，医学物理学是一门公共基础课，一般开设在大学第一学期，是高中生升入医学院校后进行专业学习的首要科目。它可以将学生从高中的物理知识逐步引入到专业医学中来，特别是医学物理实验作为实践课程，是学生系统的实验技能和方法训练的开端，对培养医学生实验技能和创新能力具有举足轻重的作用［1］。而在现今医学院校中，医学物理实验是薄弱环节，存在着一些问题，因此有必要对其进行教学改革。

1 医学院校物理实验教学存在的突出问题

1.1 实验安排陈旧，创新之处不足

在医学物理实验安排上，验证性实验多，设计性实验少；单一性实验多，综合性实验少；传统的实验内容多，反映医学物理学最新进展的实验内容少。实验内容陈旧、甚至个别内容与中学内容重复，内容多偏物理性与医学应用联系较少，不利于医学生个性发挥、创新能力的培养。

1.2 过分强调实验结果，忽视物理思想和过程

由于过分强调实验技能的训练，学生机械地进行仪器使用调整、实验步骤、数据的记录处理，得出符合理论的结果，对实验现象和结果进行的思考、分析、研究少。学生感到医学物理实验的收获不大，过一段再进行实验时，就没有了印象，教学效果不佳。

1.3 学生对实验教学重要性认识不足，缺乏实验兴趣

学生从思想上没有认识到物理实验对综合能力培养的重要性，认为纯物理性的实验与医学联系甚少，对医学的学习、发展缺少帮助。学生对实验中要求掌握的实验思维方法、技巧及实验作用等都没有清晰的认识，表现为学生实验技能较差，不愿意做实验，有相当一部分学生存在严重畏难厌学情绪，缺乏对物理实验的兴趣，学习状况不佳。

1.4 实验课教师讲的过多，灌的过多，学生学习效果不佳

实验的课时少，在这么短的时间内要求学生理解实验原理和仪器原理，掌握仪器的操作、使用并最终完成实验是相当难的。教师只有不厌其烦地将实验原理、步骤、仪器原理和使用，甚至数据处理交代清楚，学生按部就班地按照教师要求进行操作，没有自由发挥空间。随着大学扩招实验学生人数的增多，生源基础的多样化，教师工作量不断加大，学生对老师的依赖性较强［2］。

1.5 仪器设备陈旧，闲置时间长

由于经费投入不足，一些近代物理实验仪器、综合性实验仪器、研究性仪器很难配齐，有些亟待更新的实验由于资金短缺而不能实现汰劣纳新。物理实验安排上课时少，集中在一个学期，造成实验仪器短时间内集中使用，很容易出现故障，部分实验仪器设备陈旧老化，影响实验教学顺利进行。物理实验仪器闲置时间长，资源利用率低，不能使有限的教学资源充分发挥其效能，造成财力和物力的极大浪费。

转贴于 2 医学物理实验教学改革的探讨

2.1 实验内容的调整与革新

为提高实验教学的内涵，体现医学物理实验的特点，首先要取消一些内容陈旧、方法过时的实验，保留部分对训练学生基础技能行之有效的传统实验。如取消利用扭称测液体表面张力过时的实验方法，采用霍尔传感器测液体表面张力更为准确、方便。重点加强示波器及传感器应用的实验教学，介绍物理方面的测量仪器和测量手段在医学临床及科研中的应用，为学生进一步使用现代化实验仪器，独立进行实验打下良好的基础。其次在实验内容上开设设计性实验和综合性实验，这样就要求学生自己查资料，自己设计才能完成。如读数显微镜，过去只是利用该仪器测头发丝直径、毛细管直径，如今要求学生利用该仪器测透明液体的折射率，给学生提示利用几何光学中的单球面物像公式，学生们经过充分思考，最终测出了液体的折射率。这样的实验学生既动手又动脑，很有利于学生个性发展，又有利于学生灵活地运用物理基本理论，把知识转化为能力。最后应该注入一些新颖的、与现代医学联系紧密的实验内容。因为考虑到学生将来进入各大医院及医、药研究所、生产部门会遇到一些现代化设备和实验方法，因此在学生掌握基本物理实验方法和误差理论的基础上，尽可能多地接触现代化仪器设备及现代化的实验方法，如利用医用传感器测量脉搏波、呼吸波、心音、压力，利用原子光谱仪分析研究药物成分、结构以及进行医学检验。再如对血液粘度的测定、细胞流变性的测定和超声医学测量等实验。通过实验来说明物理学原理和技术应用于医学，不仅可以提高学生学习物理课的兴趣，对其后续课程内容的理解及今后的工作都是十分有益的。

2.2 教学方法的革新

培养学生的兴趣是进行实验教学的首要任务。建议在讲绪论课前组织学生参观医院的X射线放射治疗室、CT诊断室、B超室、彩色多谱勒诊断室等或者播放医学物理学的教学影片，让学生对医用物理学与现代医学及其手段的关系有个初步的感性认识，由此让学生感到好奇，激发学生学习兴趣。学生的学习积极性提高了，自然在后续实验时间中多做实验。教学过程中要求学生在每次进行实验项目前必须大量翻阅、预习讲义及有关资料、说明书等，让学生形成了良好的查阅资料、预习的习惯。这样可以减少教师讲授内容，改变以前罐的过多，学生自由操作时间少的问题。学生自己看书独立操作，独立读取数据，在教师指导下完成实验结果的分析讨论和实验报告内容，逐步提高了他们的独立思维及判断能力，这样学生会对实验内容、仪器操作留下深刻的印象，不会出现做了就忘，没有实验收获的现象。在教学手段上应用多媒体技术优化教学过程，引入文字、图片、声音和动画多种信息表达方式，可以节约板书时间，增加讲解的时间，提高教学效率，改善教学质量。

2.3 建立“半开放式”、“选修实验”教学方式

为了提高学生基本操作，增加学生对实验的兴趣，发挥学生主动性、积极性，根据实验室设备和教学情况，可以对学生开放部分实验项目［3］。由实验室提供仪器、设备和相关的资料说明书，让学生自学实验原理、仪器使用方法，独立进行教学要求的各环节内容。另外考虑到课时少，学习收获不足；满足学生浓厚的兴趣和求知欲；对最新实验仪器及实验方法的掌握；实验室经费资金短缺等一些实际问题，对学生开设选修实验课程。结合科研工作，选择一些物理实验目的明确、经过实践检验优秀、具有实际临床意义的实验作为选修实验项目，同时购置一到两台具有现代化水平且用于医学科研或临床诊断的仪器，作为示范操作实验。学生根据自己的兴趣自由选择实验项目。全年开设选修实验课程同时可以解决实验仪器闲置时间长，资源利用率低的问题。通过这些实验既可以让学生多了解物理原理在医学中的应用，掌握先进仪器的操作使用，又能培养学生独立进行科学实验的能力。

2.4 考核方式的改革

以往对于物理实验的考核是通过笔试理论成绩和平时实验成绩，平时实验成绩只是实验报告成绩。这样会造成学生重实验报告，轻实验操作，重理论，轻动手的弊病，不利于素质的培养。为督促学生认真做实验，真正考核学生实验能力，可将物理实验课成绩分为三部分：一是笔试理论成绩，考查学生对实验原理、实验方法以及实验注意事项的掌握；二是平时实验的成绩，这包括每次实验课学生出勤情况，具体操作情况以及实验报告情况，每次实验结束以后教师当堂给出成绩；三是期末操作能力的成绩，应采取对学生随机抽查的形式，同时对实验项目也进行随机选择，对学生平时的实验效果进行实际的检验。这三部分各占一定比例。这样的考核方式，既可以使学生重视平时的实验过程，调动起学生的积极性和主动性，又可以真正地提高学生实验操作及分析、解决问题的能力。

参考文献

1 喀蔚波，医学物理学教育的现状与思考.中国医学物理学杂志， 2002，19(4): 198～199.

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1 材料与方法

1.1 实验动物及分组

相同遗传背景的雄性SD大鼠（购自浙江省动物实验中心）72只，体质量300～350 g，随机（随机数字法）分为4组：Sham组（枕大池注生理盐水）、SAH组（枕大池注血）、SAH+SP600125组（SAH模型建立前枕大池注射SP600125）和SAH+DMSO组（SAH模型建立前枕大池注射DMSO）。

1.2 枕大池注血法制作自发性SAH模型

大鼠左右耳根连线中点枕外隆凸往下约0.5 cm可及一凹陷，5号半头皮针在此处以45°扎入0.5 cm左右，断尾取自体血0.3 ml以0.1 ml/min缓慢注入枕大池。保持大鼠俯卧位、头低30°，持续30 min，让血液靠重力作用下进入基底池。对于Sham组大鼠，则往枕大池内注入0.3 ml生理盐水，其余步骤均相同。造模完成后将大鼠放回笼中饲养，保证每天的饲料和饮水充足，观察大鼠的精神、行为和饮食等情况并进行记录[4]。

1.3 JNK抑制剂SP600125

将JNK抑制剂SP600125（美国Sigma公司）溶解在1 ml 100% DMSO（美国Sigma公司）中，SAH+SP600125组在注血前15 min以0.3 mg/kg缓缓注入枕大池，而SAH+DMSO组则注入相同剂量DMSO[5-6]。

1.4 脑组织含水量及BBB通透性测定

各组大鼠分别在SAH 24 h后迅速断头取脑，滤纸吸去表面血液和水分，分别用分析天平称湿质量（分度值0.1 mg），然后置入试管内，在105℃恒温干燥箱内烘烤至恒重（两次质量差≤0.2 mg）后取出称干质量，脑组织含水量=[（湿质量-干质量）/湿质量]×100%[7]。以0.5、1、2、4、6、8、10 μg/ml为伊文氏蓝标准浓度，绘制伊文氏蓝标准曲线。处死前1 h经右侧股静脉注射2%伊文氏蓝（5 ml/kg，美国Sigma公司），麻醉后常规灌注。迅速取脑，滤纸吸去表面血液和水分后称重，加入5倍体积的二甲基甲酰胺（广州金华大化学试剂有限公司），60℃水浴中孵育24 h，1500 r/min离心10 min，取上清液，用紫外分光光度计在伊文氏蓝最大吸收光谱620 nm处测吸光度，从标准曲线上查得伊文氏蓝含量，结果以μg/g脑组织表示[8]。

1.5 免疫组织化学染色

SP法行Claudin 5及JNK免疫组织化学染色，常规脱蜡至水；3%H2O2去离子水室温孵育20 min；微波炉加热法抗原修复；滴加正常山羊血清工作液封闭，室温孵育10～15 min；滴加兔抗Claudin 5及JNK抗体（1∶300），4℃过夜；滴加生物素化二抗工作液（IgG/Bio），37℃孵育20 min；滴加辣根酶标记链霉卵白素工作液（SA/HRP），37℃孵育20 min；DAB显色，显微镜下控制染色程度；苏木素溶液复染、1%盐酸乙醇溶液分化、1%氨水返蓝；梯度乙醇逐级脱水，二甲苯透明，中性树胶封片。其中，Claudin 5及JNK抗体购自Santa Cruz公司。

1.6 Western blot检测

将冰冻的脑组织用蛋白提取试剂盒提取总蛋白，定量试剂盒（BCA法）测定蛋白浓度。依次加入5×上样缓冲液煮沸、上样、电泳、转膜、封闭，滴加兔抗Claudin 5及JNK（1∶750）4℃摇晃12 h，PBST洗膜15 min×3次，滴加生物素标记的二抗（1∶2000），4℃摇晃3 h，PBST洗膜10 min×3次后行ECL发光5 min，应用胶片曝光，结果扫入凝胶成像系统进行吸光度分析。用目的条带与βactin条带的吸光度比值表示样本表达强度。其中，Claudin 5及JNK抗体购自Santa Cruz公司。

1.7 统计学方法

计量资料以均数±标准差（x±s）表示，采用SPSS 20.0统计软件对结果进行单因素方差分析，两两比较采用LSDt或SNKq检验，并对JNK与Claudin 5之间进行Pearson相关分析，以P

2 结果

2.1 脑组织含水量测定

干湿质量法测定脑组织含水量，与Sham组（76.93±1.30）%相比，SAH（79.61±1.32）%和SAH+DMSO组（79.30±1.09）%在SAH 24 h后脑组织含水量显著增加（P

2.2 BBB通透性测定

伊文氏蓝法评估BBB通透性，SAH组在SAH诱导后24 h可见各脑区伊文氏蓝明显外渗，为（9.92±0.88） μg/g脑组织，相对于Sham组（3.47±0.32） μg/g脑组织，差异具有统计学意义（P

2.3 免疫组织化学染色

免疫组织化学染色后可见JNK与Claudin 5均为胞浆表达。Sham组众多脑血管内皮细胞和室管膜上皮细胞胞浆棕褐色着色，为Claudin 5阳性蛋白表达，而几乎找不见JNK阳性蛋白表达。SAH诱导JNK表达，在SAH和SAH+DMSO组大脑半球可见很多胞浆深褐色着色，为JNK阳性表达神经元，却很难发现Claudin 5蛋白阳性表达。SP600125的干预则逆转上述过程。

2.4 JNK及Claudin 5的表达

SAH 24 h后JNK表达的吸光度值高达（0.58±0.05），较Sham组（0.12±0.02）显著升高（P

3 讨论

尽管2/3的SAH患者在出血的最初48 h内死亡，但是SAH急性期的重要性却仍然没有引起人们足够的重视，EBI的机制知之甚少，因此，到目前为止仍然没有有效的治疗措施。EBI的特点是颅内压的突然上升，紧接着脑灌注压和脑血流量的严重下降，从而导致全脑缺血，这些主要机制触发了诸如BBB破坏、脑水肿、急性脑血管痉挛等次要现象，同时在分子水平上表现为缺氧状态下的细胞呼吸作用、能量耗竭、兴奋毒性以及自由基生成等[9-10]。这些早期损伤机制都能成为潜在的干预治疗的靶点。EBI是SAH患者死亡的首要原因，这可能与颅内压上升及脑血流量下降所导致的脑缺血发挥的重要作用有关，然而，该急性期确切的潜在损伤机制仍然尚未确定。脑水肿作为SAH后EBI的重要组成部分，是BBB功能障碍的直接后果。Schller等[11]通过CT扫描后发现有8%的入院患者存在全脑水肿，同时，许多研究表明SAH被诱导后的24 h，双侧大脑半球的脑组织含水量明显增加，并且这种水肿性改变以同侧更为显著，因而本研究选择24 h作为观察的时间点。

Claudin蛋白家族至少有24个成员，促使TJ的形成。Claudin有两个细胞外环与毗邻血管内皮细胞上的Claudin相连，维持TJ的紧密性[12]。Claudin 3、5和12已被确定存在于BBB血管内皮细胞上[13]。Claudin 1也被证实存在于脑组织中，但是在体外与体内评估以及物种评价中存在差异性，目前仍有争议[14]。有证据表明Claudin 5特异性地涉及BBB小分子旁细胞通透性的活性调节。目前发现，上调Claudin 5表达的药物能增加跨血管内皮细胞电阻，并减少BBB通透性[15]。此外，缺乏Claudin 5基因的大鼠显示出BBB完整性的缺损，能增加相对分子质量小于800的大分子的脑摄取。

本研究发现SAH 24 h各脑区伊文氏蓝明显外渗，脑水肿明显，而与此同时，Claudin 5的表达亦显著降低。这些现象说明SAH抑制Claudin 5表达，使其丧失调节活性，从而导致TJ复合体装配紊乱，促使旁细胞通透性增加[16]。与此同时，JNK的表达则显著升高，说明SAH引起脑组织广泛的应激反应，从而激活数个细胞内信号转导通路，经过一系列连锁反应使JNK磷酸化而激活[17-18]，从而抑制了Claudin 5的转录和翻译，Claudin 5合成和降解之间的动态平衡被打破，从而破坏TJ复合体的完整性，导致BBB通透性增加，促使脑水肿的发生和发展。

JNK抑制剂SP600125是一种强效的ATP竞争性抑制剂，具有可逆性、选择性以及细胞渗透性。本研究发现，SAH和SAH+DMSO组在SAH诱导后24 h各脑区伊文氏蓝明显外渗，脑水肿明显，并出现脑组织结构破坏及神经元损伤。而SP600125则能逆转上述过程，抑制JNK磷酸化，解除其对Claudin 5表达的负性调节作用，恢复TJ的正常装配过程，维持BBB结构和功能的完整性。因而SP600125能有效缓解SAH后脑水肿的发生和发展，为SAH EBI的诊断和治疗提供新的靶点。

综上所述，SAH激活JNK信号转导通路，并通过负性调节Claudin 5的表达，破坏BBB结构和功能的完整性，促使脑水肿的发生和发展，出现脑组织结构破坏及神经元损伤，导致EBI，而JNK抑制剂SP600125则能在一定程度上逆转上述过程。

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