遗传学核型分析范文

导语：如何才能写好一篇遗传学核型分析，这就需要搜集整理更多的资料和文献，欢迎阅读由公务员之家整理的十篇范文，供你借鉴。

篇1

【摘要】：目的 通过对1521例遗传咨询者外周血染色体核型进行分析，总结发现染色体畸变类型特点，为人类遗传性疾病的诊断寻找病因提供科学依据。方法 对咨询者进行外周血淋巴细胞培养，制备染色体标本，分带染色处理后显微镜下计数、分析细胞核型得出结果。结果 分析1521人，检出染色体畸变（包括多态性变异、性别鉴定）202人，畸变率13.3%，其中年龄14岁及14岁以下的新生儿及儿童组分析213人，检出核型畸变96人（6人为性别鉴定），畸变率为45.1%，其中数目畸变77人，占畸变核型的80.2%，结构畸变13人，占畸变的13.5%，性别鉴定6人占畸变的6.3%。成人组分析1308人，检出核型畸变106人，畸变率为8.1%。其中数目畸变9人，占畸变染色体的8.5%，结构畸变34人，占畸变染色体的32.1%，多态性变异63人占畸变的59.4%。结论 在智力低下、生长发育异常、异常生育史患者中染色体发生畸变的概率较高，且染色体数目畸变主要发生在婴幼儿及儿童组，结构畸变主要发生在成人组，染色体多态性变异在异常生育者中所占比例也较大，与异常生育间存在较大相关性。

【关键词】 遗传咨询者外周血染色体核型分析

染色体核型分析是根据染色体的长度、着丝点位置、臂比、随体有无等特征，借助分带技术对生物的染色体进行分析、比较、排序编号的过程。

1对象与方法

1.1分析对象在我院就诊及咨询的智力低下、生长发育异常、性别无法辨认的14岁及14岁以下婴幼儿及儿童；原发闭经、原发不孕不育、异常生育流产、死胎、死产、畸形胎儿生育史；弱精、少精、无精症患者，年龄1天至46岁。

1.2方法取患者静脉血0.2—0.5ml至5ml1640培养基中，37*C进行淋巴细胞体外培养24小时，按常规方法收集外周血染色体分裂相，制片、胰蛋白酶消化处理、吉姆萨染色，制备G带染色体标本，干燥后显微镜下计数30个分裂相，分析5—10个核型得出核型分析结果。

2结果

2.1分析染色体标本1521人，检出畸变染色体202人，畸变率：13.3%，其中数目畸变89人，占畸变染色体的44.1%，结构畸变44人，占畸变染色体的21.8%，多态性变异63人，占畸变染色体的31.2﹪，性别鉴定6人，占畸变染色体的3.0%。

2.2在1521例染色体标本中婴幼儿及儿童组分析核型213人，检出染色体核型畸变96人，畸变率为45.1%。其中染色体数目畸变77人，占畸变染色体的80.2%，核型类型主要包括单纯21三体69人，占数目畸形的89.6%，单纯18三体3人，占数目畸变的3.9%，嵌合体21三体3人，占数目畸变的3.9%，X或Y染色体数目增减异常2人，占数目畸变的2.6%。结构畸变13人，占畸变染色体的13.5%，核型类型主要包括46，xy（xx），rob（14；21）3人，占结构畸变的23.1%，46，xy，rob（21；21）1人，占结构畸变的7.7%，46，xx，rob（13；21）1人，占结构畸变的7.7%， 46，xx，t（16；21）1人，占结构畸变的7.7%，46，xy，r（14），46，xx，r（18）各1人，占结构畸变的15.4%，46，xy，rob（14；15）1人，占结构畸变的7.7%。47，xx，+mar，47，xx，+mar各1人，占结构畸变的15.4%，46，xx，inv（9），46，xx，2q+各1人，占结构畸变的15.4%。性别鉴定6人，占畸变染色体的6.3%。

2.3成年组分析染色体核型1308人，检出畸变核型106人，畸变率为8.1%，其中数目畸变9人，占畸变染色体的8.5%，核型为单纯X或Y的增减，嵌合型X或Y的增减。结构畸变34人，占畸变染色体的32.1%，核型类主要包括各种平衡易位及D组染色体的罗伯逊易位。多态性变异类型主要包括Y染色体的大小变化，染色体次缢痕加长，9号染色体臂间倒位，端着丝粒染色体短臂加长及随体加长等。

3讨论

染色体畸变包括数目畸变和结构畸变，同时染色体畸变也可分为常染色体畸变和性染色体畸变。通过结果观察，我们发现在智力低下，生长发育异常，性别无法辨认的婴幼儿及儿童中染色体发生畸变的检出率较高45.1%，特别是染色体畸变以21三体，18三体的检出较显著。所以染色体核型分析是儿科排除患儿生长发育异常、智力低下，是否为遗传因素引起的重要手段，同时通过染色体核型分析结果的总结，我们也可以看出产前筛查和产前诊断在孕期保健是非常重要的检查，它可以有效的阻止唐氏患儿，18三体患儿的出生造福社会。

染色体结构畸变主要发生在成年人中，它的常见类型有平衡易位、倒位、缺失、罗伯逊易位、多态性变异等。因平衡易位无遗传物质的明显丢失或增加不致命，所以生物个体的遗传性状无明显或较大改变，从文章结果中我们可以看出，染色体结构畸变在异常生育、原发闭经、不孕不育、流产、死胎、死产、畸形胎儿生育史中检出率较高。多态性变异在异常生育者中检出率也较高，与异常生育间有较大相关性。所以通过染色体核型分析可以达到帮助诊断疾病，指导优生优育的目的。

参考文献

[1]夏家辉，李麓云 染色体病【M】北京，科学出版社.

[2]1570例遗传咨询者外周血染色体核型分析.林峰，贺爱军等，《中国妇幼杂志》2002年第17卷第6期，378，379.

篇2

【关键词】自然流产;染色体;倒位;平衡易位

自然流产是妇产科临床最常见疾病之一,严重影响患者夫妇的身心健康，病因复杂，如子宫畸形、子宫内膜感染、染色体异常、精神因素、内分泌异常等。近年来由于细胞遗传学的进步,发现染色体异常是自然流产的重要原因之一,本研究对25对反复流产夫妇的染色体进行了分析,并结合有关文献进行探讨。

1 对象与方法

1．1 研究对象 2006-2007年,两年以来进行外周血染色体分析的25对夫妇,他们均有2次或2 次以上妊娠3 个月以内的自然流产史,对流产原因均未作过系统的检查。

2．1 方法 采集患者外周血进行淋巴细胞培养,按常规方法收获细胞,制片,G显带观察,对受检者每例核型计数30~90,分析核型8~20 个进行核型分析,并进行摄影剪贴、保存。

2 结果

检测结果发现7例异常染色体,占受检人数的28%，检出倒位、易位携带者5例,其中男2例，女3例。 占异常核型总数的71．4%。

案例1 患者，男，33岁，婚后10年，其配偶第一胎足月男婴，智力正常，发育良好，第二胎因计划生育行中孕期引产，第3、4、5胎均无原因自然流产。染色体核型分析结果:46，XY，t(10；20)(10pter10q26::20q13．120qter;20pter20q13．1::10q2610qter)，配偶核型46，XX。男孩核型同父。

患者，女，31岁，婚后7年，妊娠5胎均自然流产。核型分析结果:46，XX/46,XX,t(1；15)(1qter1p36::15q2215qter;15pter15q22::1p361pter)，异常核型占83．33%，正常核型占14．17%。

案例1 2患者，女，26岁，G4P1，第1、3、4胎无原因自然流产，第二胎足月分娩一男婴为先天痴呆儿，8个月后死亡。染色体核型分析结果:46,XX,16qh+。家庭成员中父与小妹核型与例3相同，G显带标本分析:测量5个核型的16 h+号染色体结构异染色质，计算结果，16q+异染色质为正常染色体的异染色质的2倍。

案例1 3患者，女，27岁，婚后5年自然流产3胎，核型分析结果:45，XX,t(13;13)(q11;q11)。

案例1 4患者，男，25岁，婚后5年，其配偶妊娠5胎均不明原因自然流产，染色体核型分析结果:45，XY,t(13;14)(q11;q11)。

3 讨论

染色体异常是不良生育的重要原因之一,在自然流产夫妇中占3%~10%，而引起自然流产的染色体异常以平衡易位最为常见,本文倒位，易位5例,占染色体异常的71．4%,占受检总人数的20%,说明倒位，易位是引起自然流产的重要细胞遗传学病因。 平衡易位源自染色体断裂与易位重接,包括相互易位、罗伯逊易位、整臂易位等类型。不同类型易位携带者,其临床表现不一致[1]。根据经典遗传学规律,平衡易位携带者理论上可形成18种类型配子。当其与正常配子结合,则可形成18种类型合子。除其中1种正常,1种为表型正常的易位携带者外,其余16种,因遗传物质的不平衡(丢失或重复),均导致胚胎停止发育而流产,或分娩低能儿、畸形儿。平衡易位携带者染色体保留了原有基因总数,只发生了基因在染色体上相对位置的变化,对基因的作用和个体发育一般无严重影响,但是生殖细胞经过减数分裂过程中的联合和互换可产生各种不平衡重排配子,造成遗传物质的增加或减少。平衡易位携带者在成年前常不易被发现,而且表型正常,但是与正常人结婚生育子女,其后代可以从亲代接受一条易位型(重新排列)衍生染色体和1条正常染色体,其余大部分都是单体或三体,造成基因的缺失或多余,从而破坏了基因的平衡,引起胎儿畸形或反复流产等[2]。

一般而言,染色体倒位片段越短,产生不平衡配子的重复或缺失的部分越大,其配子和合子正常发育的可能性越低,临床上表现的婚后不育,月经期延长,早期流产及胚胎停育的比例越高,娩出畸形儿的可能性越低;若倒位片段越长,则重复和缺失的部分越短,其配子与合子正常发育的可能性越大,娩出畸形儿的可能性越高。关于大Y和小Y与自然流产的关系,各学者说法不一。有很多学者认为Y染色体长臂上的长短变化是一种正常变异,无临床意义。但有文献报道，Y染色体长臂异染色质区延长或短缺,能导致发生障碍。也有学者认为Y染色体是异染色质DNA过度复制所致,这些重复的DNA可能使有丝分裂发生错误或干扰基因调节,通过影响Y染色体上的产生或其他相关基因的表达或调控,使其产生形态异常的频率增加,从而导致畸精症,其配偶有较高频率的反复流产或死胎。

例1即属于平衡易位携带者，致使配偶流产三胎，其表型正常的儿子从父亲那里得到一异位的10号与20号染色体，个体总基因保持平衡，所以表型正常，这又是一个平衡易位携带者。例2核型中，平衡易位嵌合体的形成是由于发生在合子卵裂期的四细胞时期，与卵子正常受精形成正常的受精卵，受精卵第一次分裂为两个正常体细胞，其中一个体细胞正常分裂，其片段发生交换，这种交换便形成46XX,t(1;15)(p36;q22)核型，细胞继续分裂形成该细胞系，从而体现个体既有平衡易位核型，亦有正常细胞核型。

人类染色体的多态性表现在结构异常的染色质的数量与位置的改变。我院发现一例16号染色体另一种新变异型，即16qh+,G显带中可见其中一条16号染色体，q11与q12带之间增添一条窄浅色带和一条深带，深带着色同q11,异常16号明显比另一条增长。核型中其他染色体均无缺失，在G带标本中16qh+结构异染色质为正常16号染色体q的异染色质的二倍，故16ph+G带中增多的两条带纹即是结构异染色质。一般认为，这种结构异染色质的多态性在一个个体内是一种稳定的特性。案例3中，父亲与小妹表型均正常，说明这种多态性可能不影响机体正常发育，另根据报道这种变异型与流产和先天畸形有关[3]。该例患者第1、3、4胎均流产，第2胎分娩先天痴呆患儿，其父虽为16qh+，但其母无异常孕产史，所以这种多态现象临床意义有待进一步研究。

案例4为同源染色体罗宾孙易位携带者通过减数分裂所产生的配子其相应的染色体增多或缺失一条，即是与正常配子结合，也将形成相应的染色体三体型或单体型是关键，胚胎体形成建立及基本器官形成期，细胞由分子水平的化学变化引起明显的形态变化，体节变化，颜面形成，肢芽及感官出现，主要器官系统的原基初步建立，脑、心脏、肝、四肢、耳鼻及眼等结构形成，使胚胎变成具有人类形态特征，第三期胎儿期，在卵受精后的9~40周，此期胎儿迅速生长，功能建立，由此说明，夫妇双方有一方染色体异常如平衡异位，其配子就有可能产生大片段缺失的畸形，此种受精卵绝大多数不能完成正常胚胎发育，而在胚胎期导致死亡，故孕早期，因染色体畸变致流产的概率最高[4]。

案例5为男性非同源染色体RT携带者，RT是男性不育的一个原因，本例患者由于配子异常致爱人流产5胎，非同源染色体RT者也可有正常配子与正常异性配子结合形成正常合子[5]，其配偶妊娠应该做产前检查。

所以,对不明原因先兆流产的孕妇应劝其终止妊娠,自然流产是检出染色体平衡易位携带者的重要临床指征。对自然流产夫妇进行细胞遗传学检查,不仅可以明确其流产的原因,还可通过家系调查检出携带者,并对其婚姻生育进行咨询和指导[6]。若女方为同源染色体罗氏易位携带者，应劝其终生避孕或实施绝育术，若男方为同源染色体罗氏易位或易位携带者，应对女方进行人工授精，对其他染色体异常或携带者再次妊娠后14~20周抽羊水进行细胞培养，制备染色体标本进行分析，以确认胚胎胎儿的弃留，从而预防染色体异常患儿的出生。因此,细胞遗传学检查对优生优育有着重要的意义。

参考文献

［1］ 杜传书,刘祖洞.医学遗传学.人民卫生出版社,1992:166-230.

［2］ 夏家辉,李麓芸.染色体病.科学出版社,1989:264,273-276.

［3］ 魏文祥.16号染色体的一种新型变异.国际遗传学杂志，1988，3：468.

篇3

关键词: 羊水细胞染色体核型分析 产前诊断

染色体病是由于染色体数目或结构即便导致的疾病，是导致人类出生缺陷的主要原因。在妊娠中期，于超声引导下行羊膜腔穿刺术进行羊水细胞遗传学检查是产前诊断胎儿染色体疾病的主要方法之一，该方法具有安全性较高的优点，在临床上具有广泛的应用。本文收集了2011-2013年1292例在本院进行妊娠中期羊水细胞染色体核型检查的孕妇资料，通过分析胎儿染色体异常的发生率、主要类型等情况，以探讨其在遗传咨询中的意义。

1、对象与方法

1.1对象

2011年1月至2013年12月来我院产科就诊的有唐氏综合征筛查高风险、高龄、超声异常、父母为平衡易位携带者等产前诊断适应症的孕妇共1292例。年龄19-45岁，于孕16-24周抽羊水行产前诊断，培养成功1288例，具体指征主要包括胎儿超声筛查异常（包括结构异常和软指标异常）、唐氏筛查高风险、高龄、无创性产前基因检测高风险、不良生育史、父母染色体异常等。

1.2 方法

首先，指导孕妇进行适当活动，常规消毒铺巾后，在B超监视下，用一次性羊水穿刺针经腹部抽取20ml羊水，分别装于两只10ml无菌离心管中。将上述离心管以1000 r/min的转速离心10 rnins，弃上清液，保留0.5 ml细胞层，用吸管将其混匀后等分为2份，分别接种于2个25ml无菌培养瓶中，再加入羊水培养液(Gibico)5 ml，混匀，拧松瓶口，置于5%CO2、37℃培养箱中培养，第6天观察细胞贴壁生长情况，并更换新鲜培养液后继续培养。以后每天连续观察细胞贴壁生长情况，当在倒置显微镜下观察到有多个较大的、生长良好的贴壁生长的梭形细胞克隆时，加入秋水仙素使细胞分裂终止于有丝分裂中期，再用胰酶消化，使贴壁细胞从瓶壁上脱落，将其移至无菌10ml离心管内，再用吸管反复吹打均匀 ， 2000 r /min离心 10 min三，弃去上清 ，加入 37℃ 预热的0.075 mol /L氯化钾 8 ml，用吸管轻轻吹打数十次， 37℃水浴3 mins，加固定液 (甲醇：冰乙酸 = 3：1 ) 1 ml预固定5mins，2000 r /min离心10mins，弃去上清，加固定液8ml，静置 30mins。离心、弃上清后再重复固定1次，常规制片，烤片后吉姆萨染色，镜下观察、记数分散良好的中期分裂相30个，分析3个，显微镜下拍取照片。细胞染色体核型分析按照人类细胞遗传学国际命名体制 ( ISCN 2009)标准进行核型分析诊断。

2、结果

2.1产前各种高危指证与染色体异常检出率的关系见表1。

表1产前诊断指证

*其他包括：孕期病毒感染、药物使用、接触致畸物质、不良生育史等指标。

2.2 染色体异常核型的分布

1165例培养成功羊水标本，其中发现21三体14例，18三体5例，结构异常32例，其他染色体数目异常5例，嵌合体5例，其余染色体核型均正常(表1)。

3讨论

染色体异常分为数目异常和结构异常两种类型，数目异常以21三体、18三体、13三体、性染色体数目异常最常见。三体的发生机理一般是因为生殖细胞在减数分裂中染色体不分离所致，随母亲怀孕年龄的增高，其生殖细胞发生异常的机率增加，从而使高龄孕妇的胎儿数目异常发病率也增加[1]。但是很多研究表明，年龄低于35岁的妇女，具有年龄以外的产前诊断指证时，三体发生率和高龄初产组发生率差异并无显著差异，因此对非高龄孕妇进行产前筛查（包括唐氏筛查及超声筛查）是必须的。 本研究共发现21三体14例，18三体5例，性染色体数目异常共4例，占染色体异常的37.7%，经遗传咨询后，该23例病例均作了引产。 据报道约75%的18三体和90%的13三体以多发畸形为特征，超声检查即可发现异常。而21三体综合征超声特征不明显，只有经验丰富的超声医师才能分辨出颈部透明带厚度是否增厚或鼻骨有无缺失等[2，3]。通过脐血、绒毛羊水培养染色体分析可有效增加21三体的检出率，减少社会和家庭的负担。

胎儿染色体平衡易位者，多数来自于父母，本研究发现8例平衡易位核型，均来自父母之一。染色体平衡易位携带者，由于其遗传物质没有丢失或重复，其表型无异常，但是其配子在形成的过程中，可以形成正常配子，也可以形成部分重复或部分缺失的异常配子，与正常配子结合形成的下一代中，可以形成部分三体或单体，从而导致胚胎异常，临床上表现为胚胎停育、自然流产、胎儿畸形等情况 [4]。因此父母中一方为染色体异常者必须进行胎儿染色体检查。

本研究发现一例18号染色体部分缺失的情况，由于一条染色体部分缺失会导致很多有关基因的丢失，从而导致智力低下及体格发育异常，经遗传咨询后，该病例也做了引产。

染色体的多态性以9号倒位最为常见，本研究共发现14例9号倒位，占染色体异常的22.9%，该13例病例检测其父母双方的染色体，均来自其父母，产后随访未见异常。群体中9号染色体倒位见于1.8%的人群[5]，目前多数报道认为不会导致胚胎发育异常，可以继续妊娠，也有报道表明inv（9）可能与不孕不育有关[6]。另外，大Y(Y≥18号染色体)和小Y也是较常见的染色体多态性，本研究共发现4例大Y和一例小Y，关于染色体结构多态性是否产生临床效应，目前尚无定论。有学者指出，大Y染色体在汉族男性群体中占13.8%，并无遗传效应[7]。也有报道指出，大Y异染色质中DNA过多的重复，有可能产生剂量效应或微小变异，能使有丝分裂发生错误或影响基因调节和细胞分化，干扰相邻常染色质区以及生成和发育有关基因功能的正常发挥，从而导致生殖异常[8]。本研究4例大Y均遗传自父亲，目前随访未见异常。有关小Y染色体的研究相对较少。程烽等[9]报道了5例小Y染色体者无精或异常引起的不育。本研究中胎儿的小Y遗传自父亲，说明小Y不一定导致发生异常，也可以正常生育，胎儿出生后随访未见异常。

据报道，具有产前诊断指征的高危孕妇胎儿染色体异常检出率为3.8%[10，11]。本组胎儿染色体异常检出率为4.7%，与报道相近，均高于一般人群染色体异常发生率0.5% [12]。由此可见，对有产前诊断指征的高危孕妇进行产前诊断，能有效检出染色体异常的胎儿，增加有创检查的目的性。本研究发现，夫妇平衡易位组中胎儿染色体异常的发生率较高，占该指征的66.7%，充分体现了染色体平衡易位携带者是行产前诊断的重要指证；超声检查异常组胎儿染色体异常的检出率位于第2位(6.9%)，说明超声检查胎儿异常是进行产前诊断的另一个重要指征；唐氏高危组、高龄组与高龄加唐氏高危组胎儿染色体异常检出率差别不大，说明高龄（35岁及以上）可以作为一个独立的产前诊断指征，先进行孕妇血清筛查，再根据筛查结果进一步判断是否行产前诊断既浪费人力物力，有时还会延误抽羊水行产前诊断的最佳时机。自2011年以来，随着无创性产前基因检测技术在临床的应用，胎儿染色体异常的筛查进入一个崭新的阶段，本院应用该方法检测近千份孕妇外周血，对其中3份阳性病例行羊膜腔穿刺检查胎儿染色体，结果完全一致。这显示了该项技术针对染色体非整倍性检测的特异性和敏感性非常高，随着该项技术成本的不断降低，在临床的应用有望愈来愈广泛。

总之，随着分子遗传学技术的飞速发展，应用微阵列比较基因组杂交等技术，可以检出常规G显带无法识别到的为微小缺失和重复，并且检测周期短，不需要进行细胞培养，在羊水细胞检测中联合应用细胞遗传学和分子遗传学技术，将会有助于产前诊断胎儿染色体病，对于预防出生缺陷和提高人口素质具有重要意义。

参考文献:

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[2] TaslimiMM,Acosta R,Chueh J,et al .Detection of sonographic markers of fetal aneuploidy depengds on maternal and fetal characteristics[J],J Ultrasound Med,2005,24:811-815.

[3] 钟银环，尹爱华，付文婷，等.2046例胎儿脐血染色体检查的结果分析[J] .中华医学遗传学杂志，2014，31:113-114.

[4] 夏家辉,李麓芸.染色体病, 北京：科学出版社,1989,226.

[5]Kuehinka BD，Barritt U,Moya G et aL Two cases of confined platental mosaicism for chromosome 4,inclding one with maternal uniparental disomy.Prenat Diagn,2001,21：36-39

[6] 蔡美英,徐两蒲,李英等.155例孕中期胎儿羊水细胞染色体多态性分析[J].中华医学遗传学杂志,2012,29:100-101.

[7] 沈婉英.对男性大Y染色体相对长度分析152例.遗传与疾病，1990，7(1)：37-38.

[8] 石化金.Y 染色体异常的临床表现及遗传学研究. 中华医学遗传学杂志，1992 ，9（5 ）：30-31.

[9] 程烽，张宝珍，朱忠勇.507例男性不育患者细胞遗传学分析.中国优生与遗传杂志，2001，9(3)：38-39.

[10] 方群，游泽山，王彩玲，等.妊娠中晚期300例胎儿脐血染色体核型分析.中华医学遗传学，2010，17(1)：16-19.

篇4

【关键词】 慢性粒细胞白血病; Ph染色体;DCDF-FISH;BCR/ABL

Significance of BCR/ABL DCDF-FISH signal pattern and karyotype in chronic myeloid leukemia

DU Qing-hua,YING Yi,CHEN Xiao-yan.Department of Hematology, the First People’s Hospital of Guangzhou,Guangdong 510180,China

【Abstract】 Objective To investigate the relation between the BCR/ABL DCDF-FISH signal pattern and karyotype in chronic myeloid leukemia(CML).Methods 65 cases of CML were performed FISH and karyotyping.Results In 65 cases CML.43 cases were Ph positive,1 case was Ph negative,21 cases had no performed karyotyping analysis.All of 65 cases were FISH positive,9 cases with ASS gene deletion,5 cases with complex variant translocation,1 case with(+)Ph and ASS gene deletion.Conclusion More precise analysis can be got by combining the result of FISH and karyotyping.

【Key words】 CML; Ph CHROMOSOME; DCDF-FISH; BCR/ABL

费城染色体(Ph)是慢性粒细胞白血病(CML)的遗传学特征。通过染色体核型分析,能观察到该染色体源于与9号染色体易位后的22号染色体。荧光原位杂交(FISH)的出现则使人们能从分子水平上检测该易位导致的BCR/ABL融合基因[1-3]。这些检测手段都为CML的发病、诊断及治疗提供了重要的依据。本研究通过使用DCDF探针对65例CML进行FISH检测,并且结合染色体核型进行分析及对比,结果如下。

1 材料与方法

1.1 临床资料 65例病例为2006~2009年来我院就诊CML患者,其中男50例,女15例,平均年龄44岁。诊断参照《血液学诊断及疗效标准》[4]。

1.2 试剂及仪器 仪器: ZEISS AXIOPLAN2荧光显微镜;标本采集: 取患者骨髓标本2 ml,以肝素抗凝。以终密度1×106/ml接种于10 ml 1640(含20%胎牛血清)中。培养24 h后加秋水仙碱(终浓度0.05μg/ml)作用30 min,用0.075M KCl低渗处理半小时,再以3:1甲醇、冰醋酸固定三次。固定后标本放-20℃保存待检。

1.3 细胞遗传学分析 核型以G显带技术分析20个分裂相,核型根据《人类细胞遗传学国际命名体制2005》(ISCN 2005)进行描述。

1.4 荧光原位杂交 FISH探针使用BCR/ABL DCDF探针(Vysis)。取固定后的标本滴于玻片上,气干后标记杂交区域,并于55℃温箱老化30 min。取1 μl探针2 μl去离子水及7 μl杂交缓冲液共10 μl混匀,滴加于杂交区,加盖玻片以树胶封固,然后置于杂交仪中,运行的杂交程序为75℃2 min,37℃16 h。去除盖玻片,以含0.1%NP40的0.4×SSC洗涤、晾干,然后加10 μlDAPI于杂交区并以盖玻片封片,在荧光显微镜下观察。蓝色(DAPI)作为衬染,染的是细胞核;红色(Red)是9q上的ABL基因;绿色(Green)是22q上的BCR基因;2红2绿互相分离为阴性,若红色信号与绿色信号相连甚至重叠则认为是融合信号。计数200个细胞,并记录其信号特征。

2 结果

2.1 核型及FISH的检出率 65例CML患者 FISH均为阳性,核型43例阳性,1例阴性,其余21例未行核性检查或无可分析分裂相,FISH检出率为100%,核型检出率为97%。

2.2 DCDF探针信号表现 1红1绿2融合(1R1G2F)31例,为典型阳性信号;1红2绿1融合(1R2G1F)5例,为BCR/ABL伴ASS基因缺失;2红2绿1融合(2R2G1F)5例,一般为复杂变异易位。

3 讨论

染色体核型分析是Ph的检测重要方法,但由于需要制备分裂中期的细胞,实验的成败取决于分裂相的数量与质量。FISH技术可对分裂中期及间期的细胞进行分析,因此其分析细胞数量多,且能更真实地反映标本中阳性细胞的比例。而且对于某些核型无法分辨的隐匿易位,FISH也能敏感地检出。

本实验43例Ph阳性,1例阴性,而其FISH检测结果均为阳性,可推测该1例Ph阴性患者 可能存在隐匿易位。

BCR/ABL DCDF探针中的abl探针自ASS基因的着丝粒端至ABL最后一个外显子,长650 kb,BCR探针自编码免疫球蛋白λ轻链区开始往端粒端延伸约1.5 Mb;BCR/ABL ES 探针中的abl探针与DCDF探针相同 ;BCR探针从M-bcr外显子2和3开始延伸超过m-bcr之外,总长300 kb。

结果中可见9例DCDF探针信号表现为1R2G1F。这种情况是由于t(9;22)中衍生9号染色体-der(9)上9q34片断ASS基因的缺失所致。DCDF探针原应在der(9)上形成融合信号,但由于9q34的缺失令红色信号的探针无法与der(9)结合,使der(9)仅剩绿色信号。由于缺失片段较小,核型无法反映该异常,故核型为单纯t(9;22)。该9例BCR/ABL阳性伴9q34缺失均为CML,占CML病例的14%,与王莉等报道16%[5]相当。

而表1中有5例信号表现为2R2G1F均为CML,该5例均为复杂变异易位。这种情况下,9号的abl的片断易位到22号染色体上,形成了一个融合信号。而22号上BCR片断并没有易位到9号上,而是易位到其他染色体上,所以造成原本der(9)上的融合信号分离(见图1图2)。本研究中约7%CML为复杂变异易位,略低于薛志科等报道的11%[6]。

特别的是表1中有1例DCDF-FISH信号表现为1R2G2F,其核型为47,XY,add(7)(p22),t(9;22)(q34;q11),+der(22)t(9;22)(q34;q11)。结合核型与FISH结果,由于增加了一条Ph染色体,融合信号应该增加一个,而DCDF探针仅比普通阳性增加一个绿色信号,是因为伴有9q34的缺失。

DCDF-FISH能检测ASS基因的缺失,而染色体核性因分辨率不足而不能发现该异常。染色体核性与DCDF探针均能提示复杂变异易位。但染色体核型能明确核型的异常,而FISH仅能提示与BCR/ABL相关的变化。综上所述,以上两者均有其特点及适用范围,不能相互替代。

参考文献

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[4] 张之南.血液病诊断及疗效标准.科学出版社,2007:134-1386.

篇5

【摘要】 目的 探讨羊水细胞培养染色体核型分析技术在细胞遗传学产前诊断中的应用价值。 方法 普通培养法对350例羊水标本进行细胞培养染色体核型分析。结果 350例羊水标本一次培养成功340例，一次培养成功率约97.1%。其中引产羊水标本60例，染色体核型分析未见异常；35岁或35岁以上的高龄孕妇羊水标本158例，染色体核型分析发现异常核型有1例47，XY，+21，1例47，XXX；1例46，XY，15p+。异常核型约1.9%；产前筛查唐氏高风险孕妇132例，核型分析结果异常有2例47，XY，+21；1例46， XY ，t(6;19)（q12;q134）。异常核型约2.3%。结论 羊水细胞培养染色体核型分析技术在细胞遗传学产前诊断中具有较高的应用价值。

【关键词】 细胞遗传学 产前诊断 羊水细胞培养 染色体核型分析

【Abstract】 Objective To discussion amniotic fluid cell raise karyotype analysis technology in cytogenetics pre-natal diagnosis application value.Methods The ordinary culture bottle law carries on the cell culture chromosome analysis to 350 example amniotic fluid specimen.Results 350 cases example amniotic fluid specimen one time raises the successful 340 examples， a raise success rate of about 97.1%.And induces labor the amniotic fluid specimen 60 examples， the chromosome karyotype analysis has not seen exceptionally; 35 year-old or 35 year-old above advanced age pregnant woman amniotic fluid specimen 158 examples， chromosome karyotype analysis abnormal result: 1 example is 47，XY，+21， 1 example is 47， XXX; 1 example is 46， XY，15p+， Abnormal karyotype approximately 1.9%; Prenatal screening DownSyndrome high risk pregnant woman 132 examples， karyotype analysis abnormal result: 2 example are 47，XY，+21，1 example is 46， XY， t (6; 19) (q12; q134). Abnormal karyotype approximately 2.3%.Conclusion The amniotic fluid cell raise karyotype analysis technology has the high application value in the cytogenetics pre-natal diagnosis.

【Key words】 Cytogenetics Prenatal Diagnosis Amniotic Fluid Cell Culture Karyotype Analysis

羊水细胞培养染色体分析技术是细胞遗传学产前诊断的金标准。但在羊水细胞培养过程中，存在易污染、染色体标本片的制备难度大，分裂相较少，对操作人员的素质和技术要求高等问题，难以在基层临床实验室普及和应用。羊水细胞培养染色体核型分析是产前诊断胎儿染色体病的主要手段，我们为了掌握该分析技术，经两年的研讨，已将该技术运用于细胞遗传学产前诊断。现将结果报道如下。

1 材料与方法

1.1试剂 (1)羊水培养基；(2)25cm2羊水培养瓶；(3)低渗液；(4)秋水仙素为10μg/ml；(5)其他试剂为磷酸盐缓冲液、牛胰蛋白酶、吉姆萨染液。

1.2仪器 (1)CO2恒温培养箱；(2)BCM-1000型生物净化工作台；(3)离心机；(4)恒温干燥箱；(5)恒温水箱；(6) YJTF-2A型通气柜; (7) OLYMBUS BX51型倒置显微镜；(8)显微成像染色体分析系统。

1.3羊水标本 (1)羊水标本均来自我院2007年12月-2009年12月经引产、产前筛查和产前诊断的孕妇，年龄19-45岁，共350例。其中引产孕妇60例，孕期19-28周；高龄孕妇（年龄≥35岁）158例，孕期17-24周；产前筛查高风险孕妇132例，孕期17-24周。

(2)羊水采集:经B超定位后，常规消毒，采用22号PIE穿刺针穿刺，最初用5ml注射器抽取约2ml羊水弃去，再换20ml注射器抽取羊水约20ml，无菌操作注入2个一次性使用无菌刻度离心管中，盖好管帽，立即送实验室接种培养。(3)羊水标本状态：严重血性羊水标本15例，正常羊水标本335例。

1.4方法 普通培养法:将采集的羊水离心沉淀，再将其沉淀物转入羊水培养瓶内，并加入一定量的羊水培养基进行培养。经更换培养液、再培养后，羊水细胞生长良好，此时，向培养瓶内加入一定量的秋水仙素，使羊水细胞的分裂停止在其分裂中期，再经低渗、固定、制片、显带、染色处理，即可得到可用于染色体核型分析的羊水细胞标本片。羊水细胞传代：用无菌吸管吹打待传代的培养瓶内的活细胞，使其在外力作用下脱离培养瓶底，并悬浮于培养液里，然后将该培养液直接转入新的培养瓶内进行传代培养，培养3-5天后即可换液，再培养3-5天后羊水细胞生长良好，收获可得到理想的染色体分裂相。

2 结果

共350例羊水标本，一次培养成功340例，一次培养成功率97.1%。其中引产60例，一次培养成功59例，一次培养成功率98.3%。羊水细胞核型分析结果未见异常；唐氏筛查高风险132例，一次培养成功128例，一次培养成功率97.0%。羊水细胞核型分析结果2例47，XY，+21， 1例46，XY，t(6;19)(q12;q134)；35岁或以上158例，一次培养成功153例，一次培养成功率96.8%。羊水细胞核型分析结果1例47，XY，+21，1例47，XXX，1例46，XY，15p+。

3 讨论

羊水细胞培养、染色体标本片的制备难度大，技术要求高。要制作出较好的羊水细胞染色体标本片，首先要保证羊水培养成功。我们的一次培养成功率约为97.1%。要保证羊水培养具有较高的成功率，必需掌握下列关键技术：(1)无菌操作技术：实验室微生物污染是细胞培养中的难题之一，所以从羊水标本的采集、离心沉淀细胞、接种培养、换液、传代等每一操作步骤都须要严格无菌操作，避免微生物污染才能保证羊水细胞培养成功。(2)被血液稀释的羊水标本的处理技术：据文献报道，不同的实验室处理方法也不尽相同。我室对血液严重稀释的羊水标本加入适量抗凝剂以防止红细胞凝集而不做其他任何特殊处理，与一般羊水标本一样培养到6-8天后换液，用无菌生理盐水洗涤2-3次后，再加羊水培养基3ml，3-5天后羊水细胞生长良好，收获可得到理想的染色体分裂相。据文献报道红细胞的存在会影响羊水细胞的生长，但我们的检测结果未证实这点。(3)羊水细胞传代技术：一般采用胰酶消化法传代。我室采用无菌吸管吹打法传代。这可避免因过多的操作环节造成的污染。(4)羊水细胞的收集：一般采用胰酶消化法收集羊水细胞。我们采用一次性使用弯曲吸管吹打、刮取贴壁生长的羊水细胞，使其脱落，然后将其收集于刻度离心管内。

在我们的研讨中有1例孕期28周的羊水标本一次培养未成功，原因可能是孕期超过25周后，羊水中的有毒物质如胎脂、胎粪等增多，这些有毒物质要抑制羊水细胞的贴壁生长，使羊水培养不成功。1例产前筛查高风险羊水标本二次培养未成功，可能与其羊水中活细胞相对减少有关。

羊水细胞来源于胎儿，因此，羊水细胞培养染色体核型分析就是对胎儿染色体核型分析，可对胎儿是否患有染色体病做出明确诊断，达到产前诊断的目的。染色体病是由于染色体数目或结构异常而发生的疾病，染色体数目异常比结构异常更为常见。我们的检测结果既有染色体数目异常如47，XY，+21， 47，XXX；又有染色体结构异常如 46，XY，t(6;19)（q12;q134）。在数目异常中主要是21三体，称为先天愚型。胎儿多余的21号染色体破坏了基因组遗传物质间的平衡，导致出生后发育异常。其临床表现多样，以智力低下最为突出。该病是细胞遗传学产前诊断中最常见的疾病，其在新生儿中的发病率为1/600，而我们检测胎儿的结果是3/350。其次为性染色体数目异常，如47，XXX。我们的检测结果是1/350。染色体结构异常中最常见的是染色体易位，易位又分为平衡易位、罗氏易位和单向易位。如我们检测到的46，XY，t(6;19)（q12;q134）属于平衡易位。这在各号染色体间均可发生，新生儿的发生频率约1-2/1000。平衡易位携带者虽然表型正常，但其可产生异常的和卵子，当异常的或卵子与正常的卵子或结合后，即可产生染色体异常的胚胎，从而导致染色体异常儿的出生。46，XY，15p+，一般认为如果胎儿父母之一为15p+，胎儿15p+属正常，我们对胎儿的父母做了血液染色体核型分析，结果未见15p+，那么胎儿15p+从何而来！这只能认为异常。

综上所述，只要能保证羊水细胞培养成功，并制作出较好的染色体标本片，就能对胎儿羊水细胞染色体是否存在数目异常或结构异常做出明确诊断。因此，羊水细胞培养染色体核型分析技术在细胞遗传学产前诊断中具有较高的应用价值。

参 考 文 献

[1]CastroVolio I， SanderMangelK， VargasPradoM， et al. Cytogeneti-cal prenatal diagnosis by amniocentesis during the II and III gestationtrimesters in Costa Rica[J].Rev BiolTrop， 2001， 49: 1227-1236.

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[4]李从青，丛林，姚洁等.117例羊水细胞培养结局及影响因素的探讨[J].安徽医科大学学报，2009，(06):769-771.

[5]剡红民，强荣，陶囡等.羊水细胞培养技术在产前诊断的应用[J].实用医技杂志，2006(23):35-37.

篇6

[关键词] 先天愚型;染色体;核型分析

[中图分类号]R715 [文献标识码] C[文章编号] 1673-7210(2010)01(b)-125-02

先天愚型又称21三体综合征或Down综合征, 是最早被人类认识的染色体畸变,也是最常见的常染色体疾病,同时也是引起儿童智力低下的病因之一。目前对先天愚型患儿还缺乏有效的治疗手段,一旦生下此类患儿,无论在精神上还是经济上都将给家庭、社会带来沉重的负担,因此引起人们的高度重视。本文对我室1997年7月～2007年9月的695例先天愚型患儿的染色体核型进行总结分析,现报道如下:

1 对象与方法

1.1 对象

所有患儿均来自遗传咨询门诊、内科、外科、内分泌专科门诊及住院儿童。就诊原因包括智力低下、先天畸形、身材矮小、两性畸形等,其中年龄最大17岁,最小24 h。

1.2 方法

采用外周血淋巴细胞培养,常规制片及G显带计数30个核型,分析3～5个显带核型,对异常者加倍计数核型,针对不同的病例行相对的C带、N带及高分辨方法核型分析。

2 结果

经染色体核型分析确诊先天愚型患儿695例,其中男441例,女254例,男女之比为1.74∶1。单纯型先天愚型患儿624例,占89.7%;易位型41例,占5.93%;嵌合型27例,占3.95 %;其他3例,占0.42%。对易位型先天愚型患儿的双亲要求做染色体检查,以了解异常染色体的来源。695例先天愚型患儿染色体核型结果见表1。

3 讨论

先天愚型是最常见的常染色体疾病,1959年Lejeune等证实该病患儿体内多了1条21号染色体。额外的21号染色体导致某些基因增强表达和某些正常基因产物过剩,造成一些重要的生化代谢不平衡,从而导致胎儿发育异常,表现出多种不同的临床特征。该病在智力低下疾患中占10%～15%,男性多于女性,其原因可能是在受精过程中含有Y染色体的易与不分离的卵子结合。

先天愚型患儿染色体核型主要表现为3种型别:①单纯型,占92.5%;②易位型,占4.8%;③嵌合型,占2.7%,本文与此较接近。单纯型是父母生殖细胞在减数分裂时发生了第21号染色体不分离的结果。本文695例患儿中此型有624例,占89.7%,由此可见单纯型是先天愚型最主要的类型。易位型先天愚型发生的原因大多数是由于亲代生殖细胞形成时发生了易位,最常见的是D/G易位,其次为G/G易位。本文41例易位型患儿中,其核型为46,XX,-14,+t(14;21)7例;46,XY/46,XY,-7,+der(7)t(7;21)(p22∶q13)1例;46,XX,t(1;21)1例,均与母亲染色体核型一致,也说明大部分易位核型均为新生易位。嵌合型为受精卵在早期进行有丝分裂时21号染色体不分离所致,其表型变化很大,不一定完全具备典型的愚型征,一般21-三体细胞占9%以上时才出现临床症状,本文27例嵌合型患儿也是随着21-三体细胞数增多而症状更重。有报道先天愚型患儿偶有能生育的,但后代中约有1/2将发育成先天愚型儿,本文2例先天愚型的女性,结婚后所生子女均为先天愚型儿。另有一例核型为46,xy/46,xy,psu,dic(21;21)(21q21;21q22)的患儿,具有先天愚型的全部典型症状,实属罕见,由于患儿父母拒绝检查,所以无法确定该染色体核型的来源。

既往的研究证实,母亲年龄与先天愚型高度相关,高龄孕妇容易发生纺锤体异常而引起染色体不分离。 但从笔者的资料看,521例患儿母亲年龄35岁者仅83例(12%),与文献[1-3]报道较接近。随着计划生育政策的实施,我国许多家庭生育观念发生了变化,年轻母亲比值明显增加,但先天愚型患儿出生率并未降低,说明除了孕妇年龄因素外,其他如遗传因素,妊娠时用药及环境的物理、化学、放射线等致染色体突变因素也不容忽视。

先天愚型患儿多伴有先天性心脏病和其他严重的多发畸形,急性白血病的患病率较同龄儿童高10～20倍。本室至今未检出先天愚型伴白血病患儿,但伴先天性无肛的患儿有6例(0.86%),与文献报道的先天性无肛畸形患儿中21-三体综合征的发生率远高于普通人群发病率(0.15%)[4]较一致。先天性无肛畸形是发病原因复杂的先天性疾病,有研究发现HoxA-13基因可能是某些先天性无肛畸形的致病基因之一[5]。

先天愚型已严重影响我国国民经济发展和人口素质提高,为减少该类患儿的出生,应加强优生优育宣传,做好产前诊断和筛查工作,以提高出生婴儿质量。笔者认为对先天愚型患儿,无论是单纯型、易位型或嵌合型均应做家系染色体分析,以便提供更多、更完整的细胞遗传学资料。

[参考文献]

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[4]Torres R, Levitt MA, Tovilla JM. Anorectal malformation and Down,s syndrome [J]. J Pediatr Surg,1998,(33):194-197.

篇7

[关键词] 代谢综合征；脉搏波传导速度；尿β2微球蛋白；血清胱抑素C

[中图分类号] R589 [文献标识码] B [文章编号] 1673-9701（2011）22-34-02

The Correlation Analysis of baPWV、Urinary β2-MG and Serum Cys-C in Patients with Metabolic Syndrome

HUANG Hefei CHEN Aimin LIU Chunxia QIAN Anbin

Department of Cardiology，Xinchang People's Hospital of Zhejiang Province，Xinchang 312500，China

[Abstract] Objective To observe the changes of brachial-ankle pulse wave velocity（baPWV），urinary β2-microglobulin（β2-MG），serum cystatin C（Cys-C） in patients with metabolic sydrome（MS），and correlation of them in evaluing the early renal damage. Methods A total of 80 objects was divided into MS group（40 cases） and health controls group（40 cases），the baPWV，urinary β2-MG，serum Cys-C and BUN，CREA，UA，blood glucose（GLU），cholesterol（CHOI），Body mass index （BMI），were measured，estimated glomerular filtration rate（eGFR）was calculated and compared between two groups. And analysed the correlation of baPWV with the other variou indexes of renal impairment. Results The value of baPWV，urinaryβ2-MG，serum Cys-C，GLU，CHOI，UA，BMI in MS group were higher then the controls group（P＜0.05 or P＜0.01）， eGFR was lower then the controls group（P＜0.01），while there were no differences between two groups in BUN and CREA. baPWV was positively correlation with urinaryβ2-MG and serum Cys-C（P＜0.05 or P＜0.01）. Conclusion MS is associated with artery elasticity decline，stiffness increasted，and the baPWV is positively correlation with urinaryβ2-MG and serum Cys-C. These prompt that artery stiffness increasted may induce the early renal damage.

[Key words] Metabolic syndrome；Brachial-ankle pulse wave velocity；Urinary β2-microglobulin；Serum cystatin C

代谢综合征是（MS）心血管病的多种代谢危险因素在个体内集结的状态，其中心环节是肥胖和胰岛素抵抗，主要组成部分为肥胖症尤其是中心性肥胖、2型糖尿病或糖调节受损、血脂异常以及高血压，目前基本病因和机制仍未完全阐明。其中每一种因素都可导致血管内皮功能障碍，促进和加速动脉硬化，导致早期重要靶器官如肾脏、大血管等的损害，如何早期发现和评价早期损害对指导治疗具有重要作用，本文通过观察MS患者脉搏波传导速度（baPWV）、尿β2微球蛋白（β2-MG）及血清胱抑素C（Cys-C）等变化及相关性，为早期发现重要靶器官损害提供依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择2010年6月～2011年2月在我院门诊和住院的MS患者共40例，其中男24例，女16例；年龄34～62岁，平均（46.5±9.3）岁；均符合2007年《中国成人血脂异常防治指南》中MS的诊断标准：①腹部肥胖：腰围男性＞90cm，女性＞85cm；②血甘油三酯≥1.7mmol/L；③血高密度脂蛋白＜1.04mmol/L；④血压≥130/80mmHg；⑤空腹血糖≥6.1mmol/L或糖负荷后2h血糖≥7.8mmol/L或有糖尿病史。具有以上三项或三项以上者可诊断为MS。以健康体检者40例作为对照，其中男30例，女10例；年龄30～60岁，平均（43.2±10.8）岁。入选者排除糖尿病酮症酸中毒、急性心肌梗死、心力衰竭、严重感染、脑卒中、慢性肾功能不全等患者。

1.2 研究方法

1.2.1 各指标的常规测量 所有受试者常规测量身高、体重、腹围、血压，计算体重指数（BMI）及脉压（PP），行血肌酐（CREA）、尿素氮（BUN）、血糖（GLU）、血胆固醇（CHOI）及尿酸（UA）等检查，并采用Cockcroft-Gautt方程估算肾小球滤过率：eGFR（mL/min）=[（140-年龄 岁）×（体重kg）×（0.85女性）]/[72×血肌酐（mg/dL）]。

1.2.2 baPWV检测 由日本欧姆龙公司生产多功能血管病变诊断仪（OMRON COLIN VP-1000）分别在室温25.0℃对以上人员行肱-踝动脉段的PWV测量（baPWV），参考值为小于14m/s。

1.2.3 血清 Cys-C和尿β2-MG测定 所有患者均禁食8h后于清晨抽取肘静脉血4mL，3000r/min离心10min，分离血浆－70℃冰箱保存待测。血清 Cys-C测量采用胶乳增强免疫比浊法（试剂盒由浙江新昌康特生物科技有限公司提供），参考值为（0.55～1.55）mg/L。Cys-C、CREA、BUN、 GLU、CHOI、UA均在HITACHI 7080型全自动生化仪上进行检测。尿β2-MG采用速率散射免疫比浊法，参考值为（0～2.0）mg/L。

1.2.4 相关性 分析MS组患者的baPWV值与Cys-C和β2-MG、CREA、UA、BUN、 eGFR等值的相关性。

1.3 统计学处理

用SPSS13.0统计软件包进行统计学处理。计量资料以均数±标准差（χ±s）表示，两组间比较用t（t’）检验，使用线性相关分析对baPWV与尿β2-MG、血清Cys-C、UA、eGFR以及BUN、CERA相关性进行分析，以P＜0.05为差异有统计学意义，P＜0.01为差异有显著性统计学意义。

2 结果

2.1 MS组与对照组各指标的比较

MS组baPWV、尿β2-MG、血清Cys-C、GLU、CHOI、UA、BMI、PP值明显高于对照组（P＜0.05或P＜0.01），eGFR明显低于对照组（P＜0.01），而BUN、CREA值两组比较无显著性差异。见表1。

2.2 相关性分析

MS组baPWV值与尿β2-MG、血清Cys-C、UA、eGFR值有显著相关性（P＜0.05或P＜0.01），而与BUN、CREA无相关性，见表2。

3 讨论

代谢综合征的主要后果为心血管损害，目前主要发病机制尚不明确，胰岛素抵抗、高胰岛素血症、超重和内脏型肥胖是代谢综合征发病的重要环节。MS患者早期就可以出现动脉弹性、顺应性减退，动脉僵硬度增加，成为心血管疾病的重要危险因素之一。胰岛素抵抗时高浓度的胰岛素长时间作用于内皮细胞使内皮细胞源性的NO生成减少，依前列醇合成障碍， 舒血管物质减少，内皮素、血管紧张素Ⅱ等缩血管物质增多，导致血管舒缩功能障碍[1]，高血压状态下由于血管痉挛收缩引起内皮细胞缺血缺氧， 引起内皮结构和功能的损伤，进一步影响血管活性物质的合成和分泌，加重内皮依赖性舒张反应的减退；同时，高血压患者超氧化物歧化酶水平显著下降， 超氧阴离子和自由基增加，氧化反应增强及抗氧化能力降低， 从而使一氧化氮失活，加重内皮依赖性血管舒张功能减退[2]，另外，高脂血症、腹型肥胖等均可由于脂质代谢异常、炎症等原因损伤血管内皮，进一步加重了血管内膜损伤，导致动脉壁结构和功能异常，顺应性减退。早期发现和干预亚临床期血管病变的进展才是延缓和控制心脑血管事件的根本措施，近年来提出把baPWV作为判定是否具有心血管风险的指标之一[3]。而且baPWV能发现早期动脉硬化，并与心血管危险因素紧密相关[4]。本研究中MS的baPWV值明显高于健康对照组，提示血管顺应性减退，发生心血管疾病的危险性较高，需早期积极干预。

同时，MS由于高血压、糖尿病和胰岛素抵抗，导致肾动脉硬化、肾小球内膜受损，出现早期的肾功能损伤，倪银星[5]等发现代谢综合征早期肾脏损害较单纯高血压和糖尿病明显，提示多种因素共同作用更易导致肾功能损害，故早期发现和诊断肾功能损害，对改善患者预后至关重要，据研究，高血压早期肾损害是以尿微量蛋白为特征近曲小管的功能异常[6]，目前大多通过检测尿微量蛋白，如β2-MG来早期发现肾功能损害。血Cys-C是一种低分子量蛋白质，是胱氨酸蛋白酶抑制剂超家族的成员之一，所有有核细胞都能稳定地产生Cys-C，无组织学特异性，它存在于所有的体液中，Cys-C可经肾小球自由滤出，在近曲小管被重吸收并降解，肾脏是清除循环中Cys-C的惟一器官，血浆或血清中Cys-C浓度主要由肾小球滤过率（GFR）决定，因此Cys-C是一种理想反映GFR的内源性标志物。本研究中，MS组β2-MG和血清Cys-C均明显升高，eGFR明显降低，而血肌酐，尿素氮无明显变化，提示二者和肾小球率过滤一样，均可评价早期肾功能损害。

MS患者由于血管顺应性减退，动脉硬化等导致脉压增大，脉压或收缩期高血压与尿微量蛋白阳性率有较强的相关性，脉压或收缩压增加引起血流剪切力的改变可导致并加重肾血管壁内皮细胞损伤[6]，而尿微量蛋白阳性者更易出现颈动脉硬化及斑块形成[7]，提示动脉硬化与肾功能损害密切相关。同时动脉硬化进一步导致血压升高，加重了肾小球内高压、高灌注、高滤过，肾脏血流自身调节紊乱，使血管收缩，肾小球基底膜损害，导致早期肾功能损伤。本研究中，评价早期动脉硬化的指标baPWV与尿β2-MG，血清Cys-C及eGFR水平明显相关，提示通过测定baPWV可以早期了解肾功能损害，而baPWV是一种无创检查，便于患者接受，故可广泛应用于临床作为发现代谢综合征患者早期血管及肾功能损害的重要方法。

[参考文献]

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篇8

关键词 稀有白甲鱼；染色体；核型

中图分类号 S917.4 文献标识码 A 文章编号 1007-5739（2014）08-0242-02

Chromosome Karyotype Analysis in Endangered Species Onychostoma rara

RAN Guang-xin 1 DAI Ying-gui 2 LUO Hao-xiang 1

（1 Southwest Guizhou Vocational & Technical College For Nationalities，Xingyi Guizhou 562400； 2 College Of Animal Sciences，Guizhou University）

Abstract Karyotype of Onychostoma rara was studied with chromosome samples prepared from head kidney by PHA，colchicine injection and air-dried method.The results showed that there were 50 chromosomes in O.rara and its karyotype formula was 2n=50，12m+16sm+10st+12t，NF=78.There was no evidence of heterotypical chromosome，satellites or secondary constriction.The karyotype of O.rara was in accordance with the lower group of fish evolutionary taxonomy.

Key words Onychostoma rara；chromosome；karyotype

稀有白甲鱼（Onychostoma rara）隶属于鲤形目鲤科亚科的白甲鱼属，其仅分布于我国长江中游沅江水系和西江水系。该鱼类属中大型淡水食用经济鱼类，常栖息于河流中下层，以锐利的下颌角质缘刮食砾石表面的藻类为食，其肉味鲜美，营养价值较高。稀有白甲鱼作为一种野生淡水经济鱼类，其具有较高的食用经济价值和营养价值以及较大的驯养开发潜力[1]。

迄今，有关鱼类染色体核型的研究，已有较多的报道[2-7]。鱼类核型的研究，旨在了解鱼类遗传学特征、鱼类的分类地位及其演化历程，而目前对稀有白甲鱼核型的研究尚未见报道。该文开展稀有白甲鱼的核型研究，确定其染色体数目及其核型模式，拟为研究稀有白甲鱼的进化地位、遗传育种和种群关系以及对其保护和利用提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 试验材料

试验所用材料于2010年10―12月采自沅江水系贵州境内清水江，为性腺发育成熟的野生稀有白甲鱼9尾，体长为（225.6±12.8）mm，体重（410.8±36.2）g，均为雄性。

1.2 试验方法

1.2.1 预处理。按6 μg/g・体重，向试验鱼腹腔注射PHA，注射后在室内暂养20 h，最后按2.5～3.5 μg/g・体重向鱼体腹腔注射秋水仙素，再培养6 h。

1.2.2 细胞收集。将试验鱼进行尾部放血致死，然后打开腹腔，取其头肾于装有0.75 %鱼用生理盐水的培养皿中。用镊子将肾组织反复清洗至生理盐水无血色，再取出置于10 mL离心管，用镊子反复撕夹，使其中的游离细胞全部释放出来以制成细胞悬液，用尼龙纱绢过滤，再用吸管吸取细胞悬液于另一离心管中。

1.2.3 低渗。将收集于离心管的细胞悬液离心（离心速度1 000 r/min）30 min，离心后弃去上清液，加入0.075 mol/L KCl低渗液用吸管吹打均匀，然后低渗60 min。低渗结束直接离心（离心速度1 000 r/min）20 min。

1.2.4 固定。弃去上清液，然后顺管壁加入新配制的固定液，用吸管吹打均匀，置于室温条件下固定45 min，离心（离心速度1 000 r/min）20 min，弃去上清液，然后再固定，离心。

1.2.5 滴片。离心后，吸去上清液，加入5 mL固定液，用吸管吹打均匀后，吸取滴片。

1.2.6 染色。用pH值=7.2的磷酸盐缓冲液按10%的浓度配工作染液。将干燥过的滴片置于染色缸染色，时间60 min。

1.2.7 镜检拍照分析。将染色后的玻片镜检并拍照；按Levan等[8]的染色体分类标准作核型图分析。

2 结果与分析

2.1 稀有白甲鱼染色体数目

选取清晰的染色体中期分裂相（图1）计数确定染色体众数。在显微镜下对215个中期分裂相进行计数、统计。结果表明，82.79 %的中期分裂相染色体数目为50（表1），据此可确定稀有白甲鱼二倍体染色体众数为50，即2n=50。

2.2 稀有白甲鱼染色体组成

选取30个分散效果良好、着丝粒清晰、长度适中、2条染色单体适度分开的中期分裂相放大、测量、统计。根据Levan等[8]的分类标准统计染色体的相对长度和臂比以及染色体类型，结果见表2。稀有白甲鱼核型公式为2n=50， 12m+16sm+10st+12t，NF=78。染色体对的相对长度范围为（2.84±0.30）%～（4.57±0.56）%。

2.3 稀有白甲鱼核型模式

按Levan等[8]分组排列标准，并依据染色体的相对长度、臂比及染色体形态类型，将稀有白甲鱼50条染色体排列如图2。

从表2、图2可以看出，稀有白甲鱼50条染色体中第1～6号为中着丝粒染色体，第7～14号为亚中着丝粒染色体，第15～19号为亚端着丝粒染色体，第20～25号为端着丝粒染色体。未发现异型染色体、随体染色体和次缢痕。

3 讨论

3.1 鱼类核型研究方法的比较

鱼类染色体标本制备有许多种方法，例如外周血细胞培养或肾细胞PHA短期培养[9-11]、细胞系细胞培养[12]、活体组织和胚胎细胞分裂增殖能力强的器官组织[13-14]。目前，鱼类染色体标本制备多采用头肾-PHA注射法[15]，头肾-PHA注射法具有制备标本快速、方便、易于操作的特点，可获得大量可供分析的中期分裂相细胞。而组织细胞增殖或细胞系细胞培养法对于小型鱼类染色体标本的制作则显示出一定的优越性，特别是越小鱼类或鱼苗[16]，但该方法耗时较长，细胞丢失严重，标本制作质量较差且保存时间短。该试验以稀有白甲鱼头肾为材料，采用腹腔注射PHA-秋水仙素法，制片效果良好。对制好的稀有白甲鱼染色体标本进行仔细对比和观察，未发现异型染色体、随体染色体和次缢痕。

3.2 稀有白甲鱼与白甲鱼属其他鱼类核型特征的比较

迄今，有关文献记载了4种白甲鱼的染色体核型，它们是南方白甲鱼（Onychostoma gerlachi）2n=50，12m+12sm+14st+12t，NF=74[17]；细长白甲鱼（Onychostoma elongatus）2n=50，12m+12sm+14st+12t，NF=74[17]；白甲鱼（Onychostoma simus）2n=50， 10m+16sm+16st+8t，NF=76[2]。在已记载染色体核型的白甲属14个种（亚种）鱼类中（包括本研究在内），约占白甲鱼属28.57%（4/14）。稀有白甲鱼与上述白甲鱼属染色体特征比较见表3。可以看出，白甲鱼属4种鱼的二倍染色体数（2n）均为50；南方白甲鱼和细长白甲鱼的核型相同，稀有白甲鱼、南方白甲鱼、细长白甲鱼的m染色体数目相同；染色体臂数最高则是稀有白甲鱼。上述研究表明，白甲鱼的二倍染色体数目都为50，在自然界中未出现多倍现象。分析白甲鱼属的核型特点，其2n数不变，有差异只是染色体臂数NF不同。染色体臂数的不同，说明了其在进化程度的差异。导致这一差异的原因可能是其自身遗传因子所决定，也可能是其分布地理差异引起的[18]。

3.3 稀有白甲鱼的进化地位

稀有白甲鱼隶属于鲤形目鲤科亚科，根据余先觉等[19]认为亚科染色体的基本二倍体数为2n=50，该研究中稀有白甲鱼染色体基本二倍体数目均与之相符。而亚科的另一些种、属2n数为96～100，被认为是多倍体类型[20-21]，对此昝瑞光等[22]曾做过阐述。鲤科亚科鱼类其染色体数目的进化是十分保守的，而其染色体臂数逐渐增加是这些鱼类核型进化的一个主要趋势[23]。因此，究其稀有白甲鱼染色体数目，其进化也是比较保守的，而其染色体臂数与其他白甲鱼染色体臂数相比，则有相对的进化。李树深[24]认为，在特定的分类群中，具有较多端部着丝粒染色体的种类为原始类群，而具有较多中部或亚中部着丝粒染色体的是特化类群，即染色体臂数多的类群比染色体臂数少的类群更为特化。表3所列的4种白甲鱼进化程度南方白甲鱼、细长白甲鱼、白甲鱼稀有白甲鱼的顺序递增。鱼类细胞系在一个成熟的细胞系中会发生成千上万的染色体变异，这些变异受来自于自然发生的变异或受环境条件影响发生的变异而不影响到细胞系的存活[25]。白甲鱼属种间这种染色体特征的变异差异，显然是受自身遗传变异和不同地理差异引起的。而王世峰[26]则指出进化程度变高原因可能是染色体结构的进化是原始核型经染色体易位、倒位等染色体重组进化形成的。因此，西江种群稀有白甲鱼是较为原始的类群，但是比其他几种白甲鱼属的鱼类进化程度相对较高。

4 参考文献

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篇9

关键词：超声；胎儿异常；染色体；拷贝数变异

中图分类号：R714.5；R445文献标识码：ADOI：10.3969/j.issn.1006-1959.2020.11.052

文章编号：1006-1959（2020）11-0161-02

随着科学技术的快速发展，超声检查的应用越来越广泛，其可以检测出不同胎儿异常，包括结构异常和微小异常，后者也被称为超声软指标[1，2]。胎儿超声软指标包括胎儿颈后透明带（NT）、颈后皮褶厚度（NF）、鼻骨缺失或鼻骨发育不良、侧脑室增宽、后颅窝增宽、心内强回声、肠管强回声、肾盂增宽、单脐动脉、长骨短、脉络丛囊肿等。胎儿超声异常中部分是由于染色体核型或基因组拷贝数变异（copynumbervariations，CNV）造成的[3]，需进行胎儿染色体产前诊断，其作为有创性诊断，导致的流产率可达0.5%～1%[4]。孕妇及家属更倾向于非侵入性检查，而超声具有及时、迅速、直观、无创等特点，当超声提示胎儿不同异常时胎儿染色体异常率不同。本研究结合2017年1月～2019年4月我院515例因超声示胎儿异常而行产前诊断孕妇的临床资料，探讨妊娠期胎儿不同种类的结构畸形及其与染色体异常的关系，为临床提供更有价值的遗传咨询

1对象与方法

1.1研究对象收集2017年1月～2019年4月河北医科大学第二医院515例因超声提示胎儿异常行胎儿染色体产前诊断孕妇的临床资料，孕妇年龄20～43岁，平均年龄30岁；孕周19～28周，平均孕周24周。所有孕妇均在知情同意的前提下行超声引导下羊膜腔穿刺术，进行染色体核型分析和染色体拷贝数变异检测。

1.2方法

1.2.1羊膜腔穿刺术所有孕妇均在超声引导下经腹壁抽取羊水30ml（20ml用于羊水细胞培养检测胎儿染色体核型，10ml用于高通量测序检测胎儿染色体拷贝数变异）。

1.2.2胎儿染色体核型检测抽取的20ml羊水分装到2个培养瓶中，在37℃培养箱培养7～9d，制片，染片，上机。每例计数30个分裂相，分析5个分裂相。

1.2.3胎儿染色体拷贝数变异检测首先用10ml羊水提取全基因组DNA，基因組DNA浓度>10ng/Ul。然后构建测序文库，纯化文库DNA浓度不低于25nM/Ul，然后进行测序检测，最后通过生物信息分析软件分析所测数据，检测出染色体拷贝数变异。

1.3观察指标胎儿超声异常中分为2大类，胎儿超声软指标异常：NT、NF、鼻骨缺失或发育不良、其它超声软指标；胎儿超声结构异常：心脏结构畸形、神经系统结构畸形、消化系统结构畸形、泌尿系统结构畸形、呼吸系统结构畸形、骨骼结构畸形、唇腭裂、胎儿水肿、多发畸形。统计各种超声异常的病例数，及在各种超声异常项目中核型异常数，拷贝数变异数及染色体异常率。

1.4统计学方法将数据录入Excel中进行分析，计数资料以（n）进行描述。

2结果

2.1胎儿超声异常情况515例胎儿超声异常中，胎儿超声软指标异常362例，占70.29%。胎儿超声结构异常153例，占29.71%。

2.2胎儿遗传学结果发现胎儿染色体核型异常42例，检出率为8.16%，其中数目异常32例，结构异常10例。染色体拷贝数变异检测出57例，检出率为11.07%。超声软指标中鼻骨缺失或发育不良染色体异常率最高，占20.93%。胎儿结构异常中，胎儿多发畸形染色体的异常率最高，占50%，其次为心脏畸形，占18.82%，见表1。

3讨论

染色体是基因的载体，胎儿染色体异常，可影响胎儿的发育，引起胎儿结构的异常及不同程度的智力低下。确诊染色体病的“金标准”是羊水培养染色体核型分析，但染色体核型分析具有培养周期长，不能检出<5Mb的染色体片段结构异常的缺陷[5]。基于高通量测序技术的拷贝数变异（CNV）检测很大程度上弥补了这一缺陷，但胎儿染色体产前诊断可能会导致流产[4]。超声检查是一种无创、安全的检查方法，可重复性操作，成为筛查胎儿畸形的首要检测方法。本研究中515例超声示胎儿异常中，检出胎儿染色体核型异常42例，检出率8.16%，而检出染色体拷贝数变异57例，检出率为11.07%，较单纯羊水培养检出染色体异常率增加了2.91%。有文献报道[6]，在超声结构异常而核型分析正常时，6%的病例可被检出致病性拷贝数变异。因此在孕妇及其家属同意的条件下，因超声示胎儿异常行羊穿时尽量检测胎儿染色体核型和拷贝数变异两项，以减少染色体异常儿的出生，但如果检出不明意义的拷贝数变异，也会给临床咨询带来困扰和挑战。

超声软指标是指胎儿微小的一过性、非结构改变性异常，可作为判断胎儿是否出现染色体异常的一项危险因素[7]。研究表明[8]，NT增厚、鼻骨缺失与染色体疾病尤其是21-三体综合征密切相关。21三体综合征在临床上表现为特殊面容、眼裂小、眼距宽、伸舌、鼻梁低平，由英国医生LangdonDown首次提出，故也称为Down综合征，是导致胎儿智力低下最常见染色体异常之一。本研究超声软指标中鼻骨缺失或发育不良染色体异常率最高，占20.93%；且胎儿NT染色体异常率为12.35%，胎儿NF染色体异常率为13.33%，而其它超声软指标染色体异常率为3.93%。因此，联合胎儿鼻骨、NT、NF超声检测，当任一项异常时，行产前诊断可以很大程度上减少染色体异常胎儿的出生，提高人口出生质量。

篇10

【摘要】 目的对长白山地区分布的关玉竹体细胞染色体计数，对其进行核形态学研究。方法采用常规压片法。结果关玉竹的染色体数目为2n = 20，核型公式为K(2n) = 2X = 2sm（2SAT） + 8sm + 10m，属“2B”类型，核型不对称系数为61.71%。结论基于观察结果分析了关玉竹染色体对称程度、类型及染色体组成。关玉竹染色体的随体结构为首次报道。

【关键词】 关玉竹；染色体；核型分析

Abstract：ObjectiveTo study the karyomorphology of Polygonatum odoratum (Mill.) Druce. from Changbai mountain. MethodsConventional pressed slice method was employed. ResultsThe chromosomal number of S. chinensis was 2n = 20， the karyotype belonged to “2B” and was formulated as K(2n) = 2X = 2st + 8sm + 10m， the asymmetry index was K%=61.71%. ConclusionDetailed analysis was consequently displayed on symmetrical degree， chromosomal type and compositions of P. odoratum. The chromosomal morphostructure of P. odoratum was reported for the first time.

Key words：Polygonatum odoratum (Mill.) Druce; Chromosome; Karyotype analysis

玉竹Polygonatum odoratum (Mill.) Druce为百合科黄精属多年生草本植物，其根茎的应用历史久远。关玉竹是辽东山区农业发展产业的重要植物。关玉竹富含各种营养物质，而且对人体有益的营养物质和活性物质含量都较高，常作为原材料销往国内和国外市场。关玉竹既可作为一种野菜新品种进行开发利用，又可作为药用植物资源进行研究发展。因此，关玉竹资源的发展前景广阔。植物染色体是植物细胞学特征的最稳定因素之一，关于玉竹染色体的核型研究在近年有些许报道，但未见其染色体随体形态结构报道。本实验对关玉竹染色体的核型进行了详细分析，为进一步对关玉竹的遗传育种研究提供细胞学理论依据，也为辽东山区关玉竹分类研究奠定基础。

1 材料

本试验种子来源于辽宁省丹东市宽甸县玉竹生产基地，经沈阳农业大学宁伟教授鉴定。

2 方法

试验采用常规后熟处理方法完成关玉竹种子后熟，即将采收种子1∶3沙沉处理于25℃恒温箱中30d有待萌发。待根部生长至1～2 cm时，进行取材。用0.004 mol·L-1 8-羟基喹啉处理4 h，然后再用卡诺氏固定液（无水乙醇∶冰醋酸=3∶1）在4℃条件下固定24 h。经乙醇溶液梯度洗涤，存放于70 %乙醇溶液中，于4℃条件下可长期保存。取固定过的根尖在60℃条件下，1mol·L-1盐酸中解离10 min，然后经卡宝品红染色，常规压片，显微镜观察，拍照，制作永久封片。选取染色体数目清晰的细胞进行统计，以80 %以上细胞的染色体数目为标准，确定关玉竹染色体的数目。挑选分裂好的体细胞中期染色体，根据李懋学和陈瑞阳的标准进行染色体核型分析，按Stebbins的方法做核型分类［1］。

3 结果

3.1 关玉竹染色体形态及数目

从图1可以看出，关玉竹体细胞染色体数目为2n = 20，有随体。染色体总长度为19.31 μm，绝对长度范围从1.34～2.79 μm，染色体绝对长度范围差异为1.45 μm。相对长度范围从6.94%～14.43%，染色体长度比为2.08，以上数据说明关玉竹染色体相对较大，且染色体长短差异很大。

由表1可以看出，第1，5，7，9，10对同源染色体的臂比在1.0～1.7之间，属于M型（中间着丝点）染色体；第2，3，4，6，8对同源染色体的臂比在1.7～3.0之间，属于SM型（亚中间着丝点）染色体，其中3号染色体为随体染色体，说明关玉竹染色体着丝点位置相对稳定［2］。表1 关玉竹的核型数据表（略）

3.2 关玉竹染色体核形态学研究

关玉竹同源染色体之间差异较小，长短臂相似性较高，而且，关玉竹异源染色体之间相似度也很高，不存在明显差异（见图2）。

将一个染色体组的全部染色体逐条按其特征画下来，再按长短、形态等特征排列起来的图称为核型模式图，它代表一个物种的核型模式。核型模式图消除了由于分裂时期的不完全一致而带来的细胞之间染色体收缩程度上的差异以及制片等因素造成的染色体扭曲、拉长等误差，因而能更准确、真实地反应物种的核型。所以对物种（类群或个体）一般都以核型模式图来进行比较。关玉竹染色体核型模式以同源染色体的平均绝对长度绘制。横坐标为染色体的编号，与表1的染色体编号相对应，纵坐标为染色体的绝对长度，其中纵坐标0点处为着丝点（见图3）。

综合核型公式和核型分类分析的结果，将关玉竹的核型写成一个公式：K(2n) = 2X = 2sm（2SAT） + 8sm + 10m，参照Stebbins的核型分类方法，关玉竹的染色体组中最长染色体长度与最短染色体长度之比大于2，臂比大于2的染色体数目占全部染色体数目的比例为0.10，故关玉竹染色体的核型类型属于“2B”型。按照Arano的计算标准，计算出关玉竹核型不对称系数(As.k%)为61.71%，说明关玉竹染色体属于原始类型［3，4］。

4 讨论

4.1 关玉竹染色体特点分析

本研究在完成关玉竹种子后熟的条件下，对关玉竹种子进行染色体核型分析，确定了关玉竹种子的最佳后熟条件。并使试验在长期摸索中确定了预处理液0.004 mol·L-1 8-羟基喹啉浸泡4 h条件下关玉竹体细胞中期分裂相染色体分离最佳。首次对关玉竹染色体随体的形态结构进行报道。有相关报道称玉竹核型公式为：2n = 2x = 20 = 14m + 6sm，这与本实验有一些出入。造成差异的原因主要是处理条件不同导致染色体分裂程度不同而引起分析上的误差和玉竹不同居群产生的种内核型多样性。可以搜集各地不同生态型玉竹品种进行细胞生物学研究，有待于今后的进一步探讨［5］。

4.2 关玉竹染色体结构对其遗传学演化影响

植物染色体数量和形态性状在其进化过程中都是相对稳定的，不易受环境因素影响。由于染色体方面的变化应当比其它任何变化更与遗传进化过程直接相关，所以染色体的研究能证明该类群中所发生的进化过程的性质和进化趋势，可以作为研究物种起源和进化的一个指标。

在植物的进化过程中，核型一般是由对称型向不对称型发展的，即原始的核型比较对称，而演化的核型相对来说是不对称的。本实验证明了关玉竹染色体核型是原始对称核型，而且通过对关玉竹染色体核型分析，得出了关玉竹同源染色体相似度很高，异源染色体间相对差异较小；着丝点位置相对稳定，均处于染色体相对中部，说明了关玉竹染色体遗传稳定性较高，不易受外界环境影响而改变关玉竹遗传性状［6～10］。实验证明了在辽宁东部山区关玉竹生态型遗传性比较稳定，有利于关玉竹优良特性的保持。通过本实验研究，不仅从细胞水平验证了关玉竹的核型分类地位，同时也为关玉竹多倍体育种奠定了细胞学基础。

【参考文献】

［1］赵鑫，马小军. 阜康阿魏的核型分析研究［J］.中国中药杂志，2006，31（2）：114.

［2］孙培业，周翔. 谷子的细胞遗传学研究［J］.遗传，1996，16（3）：24.

［3］李畅，陈发棣. 切花菊14个品种的核形态学研究［J］.园艺学报，2007，34（5）：1235.

［4］庄东红，曲 莹. 蝴蝶兰若干品种（系）的染色体数和形态分析［J］.园艺学报，2007， 34（5）：1257.

［5］张新忠，闫立英. 2n配子在植物育种和种质创新中利用的研究进展［J］. 华北农学报，2003，18：30.

［6］刘永安等. 植物染色体核型分析常用方法概述［J］.贵州农业科学，2006，34(1)：98.

［7］于立华，王胜利. 野大麦染色体的核型分析［J］.内蒙古草业，2004，16(1)：24.

［8］戴艺民，卢川北. 福建斑茅核型分析初报［J］.福建农业学报，2002，17(3)：148.