保险学习心得范文

时间:2023-03-21 05:29:40

导语:如何才能写好一篇保险学习心得,这就需要搜集整理更多的资料和文献,欢迎阅读由公务员之家整理的十篇范文,供你借鉴。

保险学习心得

篇1

 

 

到黄州学习了三天,虽说天气炎热,感觉有点累,但是很值得,比任何一次的学习收获都要多,真的是受益匪浅。不但学到了很多专业知识,还有优秀的同仁们展业经验的精彩分享,最重要的是谈教授的讲课深深的打动了我,吸引了我。

        很多人都说做保险是靠关系,很难,不好做,要求人,没面子,其实最重要的是自己的观念,任何行业只要做的成功就有面子,保险是一种具有责任与爱心的事业。它富有挑战性,能使人充满激情,重塑自信自强的个性,在协助他人做出决定,帮助他人在实现生命和健康保障的同时实现财富保障的递增,同时也给自己带来收入,帮助了他人,快乐了自己,使自己有了成就感,实现人生辉煌,体现自己的人生价值。何乐而不为呢?

       还有自己的内在形象也很重要,要想做好保险,除了学好专业知识,还要先学做人,先献爱心,先交朋友,先做服务,后做保险。所以我们寿险营销员一定要记住的圣经:交天下朋友,结天下善缘;知天下人心,保天下太平; 造天下大福,积天下大善;播天下仁爱,济天下苍生。

      最后就是;坚持 !相信!你相信什么,你就做什么;你相信多少,你就成功多少;你相信多久,你就成功多久;你永远相信, 你就永远成功。

篇2

1故障现象

血线灯点亮成红色,故障报警灯亮起,声音报警急促,血泵停止。

2故障代码

C COFB 088 042; C COFB 088 043; C COFB 088 044; C COFB 088 045; C COFB 088 046; C COFB 088 047; C COFB 088 048; C COFB 088 049。其中以C COFB 088 048最为常见。

3原理分析

血线探测器的原理是对红外线进行探测,也就是通过计算接收到红外线强度的大小来判断血路中是否有漏血,实际电路中就是有一个红外发光二极管提供红外线,通过两段透明的管道,让光线穿过其间夹着的血路,然后到达红外接收管,检测到的光信号会转换成电信号,通过后续的转换电路会送到电脑芯片参与计算,与电脑中存储的数据进行比较,然后做出相应判断。

4故障排除

4.1硬件处理:用酒精棉签或蘸清水擦拭血线探测器表面,去除可能附着的盐水或血液留下的脏污,开机,如果不再报警,则进入调校程序进行校准;如果还报警,则需要关闭机器,打开机器上面的盖子,拔下探测电路的插头,把探测电路拆下来,对发射管和接收管进行清洁,对光路传输的两段透明管路的表面进行清洁,然后装好机器,开机,进入调校程序校准,大多数故障经过这样处理就会得到解决,然后机器正常运转。极少数情况下,这样处理后还不能排除故障,那么存在的原因则是:①电路板本身存在脏污,则用无水酒精去除;②发光管能量不足或损坏,则更换发光二极管;③接收管故障,更换接收管;④其他可能存在的故障,则只有联系服务商了。

4.2程序校准:在显示窗口处于暗的状态时,同时按压操作面板上方中间两个没有标识的键(暗键)和左下角的确定(箭头)键,3~5秒后,显示窗亮起,通过调节SET旋钮选至Service/Preset,按“确定”进入,在40秒内输入机器维修代码(58,96,44或16,90,00),选择Service后按“确定”进入,再选择Calib进入,选择Transd,然后选Extern进入,通过旋转SET旋钮找到PRIMING DETECTOR,按确定键,把提前准备好的干净透明的透析管路插入探测器后,按确定键,等待2~3分钟,机器会自行检测并计算数据,存储入EEPROM,然后提示按“HOLD”键退出,再按“HOLD”三次,退至SELECT SERVICR MODE选EXIT后进入MAINTENANCE SELECTION,选Fch按确定键进入机器自检。至此,完成程序校准。

篇3

通过一段时间的“保持***员的先进性教育”学习活动,学习十六大通过的中国***新及中央保持***员的先进性教育活动办公室编写的《保持***员的先进性教育读本》等理论书籍,对县委提出的党员先进性学习讨论题进行了深刻思考,认识到要想始终保持***员的先进性,就必须时时刻刻加强对党员的学习教育,加强对党员的制约。具体来讲,我认为保持党员先进性必须做好以下四个方面:

1、正确认识“三个代表”重要思想。一个真正的***员,要想具有先进性,保持先进性,就必须在政治、思想、道德、文化等方面用****道德要求自己,使自己在现实生活中成为高尚道德的行为主体。首先,在个人要求方面,党员既要模范执行党的现行政策,又要发挥高尚道德风格。党的现行政策是党依据当前的任务和现实客观条件制定出来的,其目的是调动绝大多数人积极性,促进社会生产力发展,其着眼点是对整个社会行为的规范。***员作为社会中的一员,理所当然应该模范执行党的现行政策,这本身就有道德示范的意义。在执行党的现行政策的前提下,当出现同样的机会谁先占,应得的利益谁多得、社会的弱者谁照顾、必要的牺牲谁承担等政策规范不到的问题时,***员就要发扬高尚道德风格,先人后己,必要时放弃自己的利益,无私奉献,甚至牺牲自己的生命。就像在惊心动魄的关键时刻,***员要发对党和人民高度负责的精神,指挥在第一线、冲刺在第一线、奋战在第一线、奉献在第一线;必须发挥中流砥柱的作用,处变不惊,力挽狂澜,以解倒悬之急;必须摆正国家、集体、个人三者之间的关系,在进退去留的考验中显示自己的大气魄,在是非善恶的考验中显示自己的大智慧,在荣辱得失的考验中显示自己的大气量。这样的党员不正是体现了先进道德文化的示范性?其次,在道德教育方面,党员既要讲党性,又要讲良心,不能把自己的道德等同一般群众的道德。道德是有其内在支配机制的,以是非感、正义感、责任感、同情感和自尊、自爱、自重等为表现的道德良心,对道德选择的确定,道德目标的追求和理想人格的形成有重要影响作用。党员以最纯洁的良心支配自己的道德行为,在群众中树立起既高大,又亲近的道德榜样。

2、正确处理个人利益和公共利益的关系,增强党员全心全意为人民服务的观念。***同志指出:“我们党来自于人民,植根于人民,服务于人民,建设有中国特色社会主义的全部工作的出发点和落脚点,就是全心全意为人民谋利益。”要保持党员的先进性,就必须在如何全心全意为人民谋利益上下功夫。为此,党员就必须在工作和生活的各个方面严格要求自己。我认为,关键的就是要树立以下四个观念:第一,当官不为发财的观念。***是执政党,领导是人民的公仆。因此,当官不是发财的岗位,想发财,就不要做官;想做官,就不要想发财。第二,为民不遗余力的观念。以人民群众的呼声为第一信号,以人民群众的需要为第一选择,以人民群众的利益为第一追求,以人民群众的满意为第一标准。第三,办事不图回报的观念。为人民群众办事是党员干部的天职,个人不应该指望得到什么奖励,什么报偿。只要合乎条件,人民群众要做什么,我们就给予什么方便,没有什么价钱好讲的,也没有什么理由好推辞的,更没有什么物质好索取的。“办事图什么?”办事只图功效,只图人民顺心,人民满意。资本主义国家的公务员尚能如此,***的党员又怎能落后。第四,工作不带私心的观念。无数事实证明,有了私心就没法全心全意为人民谋利益,就会变成只说不做,虚伪的人。有了私心,就不能头脑清醒,就不能秉公办事,就不能理直气壮,就不能得到人民群众的信赖。

3、努力提高党员的业务素质。衡量和判断一个党员先进还是落后,其先进程度如何,最根本的是看党员在推动社会生产力发展中的作用。对先进生产力的发展有多大的贡献,是否顺应社会发展的一般规律,始终站在历史发展的最前列,在代表最广大人民群众的根本利益的同时,是否使自身成为社会的先进部分。“谁是***员要让人民在众一眼就能看出来。”党员要使自身成为社会生产力的先进部分,就必须不断地学习,不断提高自身的业务素质。

4、着力强化党员管理机制。完善规章制度,没有规矩不成方圆,为始终保持党员的先进性,还必须建立一套保持党员先进性的处理、约束、管理机制。这样做是有充分理由的,既然规定党员必须有先进性,既然我国的权力属于人民,我认为,党员有没有保持先进性,就应当让人民群众来评定,对于那些自始就没有先进性或者没有保持先进性的党员、党员干部就可以说“不”,而且说了“不”就应该起作用。否则,再好的道德教育,再高的科学文化素质,都无法保证党员的先进性。***曾经指出制度问题“更带有根本性、全局性、稳定性和长期性”。有了完善的制度,可以避免党员少犯错误或不犯错误错误,更好体现先进性。那么,我们在推进行政工作中,坚决做到在公开、公平、公正的发展环境中按程序实施行政执法责任制,切实保护公民、法人和其它社会组织的合法权益, 努力做到全心全意为人民大众服务。

篇4

人们常说,教师是人类灵魂的工程师,是燃烧自己照亮别人的蜡烛。当杨大山老师走上讲座席的时候,我惊奇地发现他是一位残疾人。

可是他依然一瘸一拐地走上台中间给我们讲述他的经历,看到这一幕,我的心深深地震撼了,作为一个身体健全的年轻教师来说,有什么理由不去做好教师这个工作呢?结合学习有感而发,谈谈自己的一些体会:

杨大山老师的事迹为我做出了学习的榜样,我在思考,如何更好地将这种精神融入到我日常工作中?为此他也为我们年轻的教师提出了“十多十少”的建议:多接触学生,少高高在;多循序善诱,少严词呵斥;多提前预防,少亡羊补牢;多埋头苦干,少闲言埋怨;多接受意见,少一意孤行;多自己成为,少上交学校。多表扬鼓励,少溺爱袒护;多赏识发扬,少恶语打击;多慈母心怀,少严父尊容。多平等对待,少偏护偏爱。从杨老师的简短的总结中,我深刻地体会到了“教育的真谛就是爱,爱是教育的出发点和归宿”这句话的深刻意味。告诉我要以赤诚的爱心、事业心、责任心和一颗平常心,在自己的岗位上兢兢业业、勤勤恳恳、扎扎实实地工作,正如他所说的那句话“既来之,则安之”、“干一行,爱一行;爱一行,钻一行”。还要求我们平等对待每一个学生,不歧视差生,用心去和学生交流,用爱去和学生碰撞。

吕正强老师是一位年轻的教师,只有三十出头,如今也已是模范教师的代表了,听了他的事迹后,敬佩之情更是油然而生。他说当他刚师范学校走出来的时候,参加了教师招聘考试,接着被分配到了农村,更让他没有想到的是一干就是十几年。期间他也感受了教师的无奈与艰辛,自己的思想也被动摇过,但有一种信念确让他坚持走了下去,就是“爱学校、爱学生、爱教育”。就是因为这种深深的爱让他成就了今天的事业。

篇5

关键词:大学生;创业;信息环境;现状

一、信息环境的意义

信息环境是一个意义十分宽泛的概念,它是指与人类信息活动有关的一切自然、人类、社会和心理因素的总和。创业信息环境即是指大学生自主创业的外部信息环境,包括围绕在大学生周围的创业相关信息,及其大学生获取信息的渠道和相关场域。

大学生的任何创业活动都需要在一定的社会环境之下进行,而创业活动本身作为一项复杂的社会活动,对于缺乏实际操作经验和社会历练的大学生而言,信息的数量和质量要求尤为重要。信息环境在某种程度上已成为衡量创业环境的重要指标,优化创业环境,在一定程度上就是优化大学生自主创业的信息环境。完善大学生自主创业的信息环境建设,对于推动更多的大学生走上自主创业之路,具有强大的推动和支持作用。

二、信息环境的现状

(一)政府信息化改革滞后对信息环境的制约

1、角色定位的偏差

政府的角色定位至今没有完全实现服务导向的转变。由于角色定位上的偏差,政府仍然在被动的向社会提供信息,被动的与信息受众进行交流互动,大大增加了有志于创业的大学生主动了解政府有关创业相关信息的难度。与此同时,由于缺乏信息交流互动平台,政府在制定相关政策时没有相应的信息收集和论证过程,政策的出台就有可能脱离大学生创业的实际需求。

2、信息孤岛的制约

由于历史的原因,政府在信息化的过程中存在着较为普遍的“信息孤岛”问题,与大学生创业相关的工商、税务、社保、卫生等相关部门的信息得不到整合,政务信息资源处于一种半开放状态,大量的有效资源没有得到充分的利用。大学生在缺乏一个有效获得完整信息机制的情况下,自发收集的信息难免造成缺漏、错误等情况,从而影响大学生自主创业的顺利实施。

3、简单信息化的障碍

目前,一些地方政府的信息化建设还仅仅处在一个通过互联网门户网站简单信息的阶段,缺少必要的信息反馈机制和互动平台,相关的咨询功能也较为匮乏。同时,现行的行政审批、税收等等与大学生创业息息相关的制度却没有根本性的改变,尤其是在对大学生创业贷款项目的扶持和审核上,没有相应的制度和规范,缺乏固定的运作程序和明确要求。不少怀着创业梦想的大学生,面对层层人为的障碍,只能望而却步。

(二)高校创业教育模式对信息环境建设的忽视

1、信息环境对大学生创业心态、创业能力的作用得不到发挥

课题组的调查结果显示,保定市部分高校大学生的创业想法,来源于高校的不足20%,更多的大学生,受到的是来自媒体和生活环境中创业人物和事迹的影响。同时,他们对创业的理解亦过于狭隘,多是将创业单单定义为创办企业等高目标,或者对创业资金决定论有着盲目的崇拜,认为资金是决定创业成功与否的唯一要素。部分大学生则认为创业只是一些具有技术专长的,或者是经管专业学生的出路。这些想法和观念上的误区,与他们学习和生活的环境,尤其是信息环境是密切相关的。

缺乏正确的信息导向,从单一、零散的信息环境所获取的不完整信息,直接导致了大学生创业认知误区的形成。高校的创业教育忽视了信息环境的建设,既没有形成一个有利于创业的舆论氛围,也没有建立一个集创业相关信息为一体的信息系统。创业的舆论氛围,应该包括什么是创业,创业要求哪些精神和品质,创业需要哪些条件和支持等等,而创业的信息系统,应是整合了高校硬件资源与教师资源的综合信息平台,为学生提供必要的技术支持和知识支持的配套服务体系。由于高校的创业教育在引导形成正确的创业认知方面缺少有力的调试手段,以至于在大学生创业思维的形成阶段,许多有志于自主创业的大学生陷入了认识上的泥沼,从而难以取得创业实践方面的较大突破。

2、信息检索和处理能力是创业教育中的薄弱环节

即使有了良好的信息环境和信息服务体系,面对浩瀚的信息海洋,如何从中甄别筛选出符合自己需要的信息,是对大学生信息搜集能力的一大挑战。近些年来,不断有不法分子利用大学生浅薄的社会经验和焦急的就业心态,一些所谓的加盟创业等信息,行骗屡屡得手,一方面是政府对信息监管力度的不够所致,另一方面,大学生缺少必要的信息检索、甄别和筛选的能力。现行的高校创业教育,多集中于创业流程方面,反而忽视了对大学生创业基本素质和心理品质的磨练和培养,舍本逐末,使得大学生真正走上创业之路时步履维艰。

具备良好创业素质的大学生,应该掌握较高的信息检索和处理能力,不但能够从纷繁复杂的信息中筛选出符合需求的信息,同时能够初步鉴别信息的真伪,将大量相似的信息提炼加工,并根据自己创业目标和创业规划加以重组整合。随着社会信息化进程的加快,信息的重要性日益凸显,信息已经渗透到社会生活各个领域,成为人类社会不可缺少的重要资源。人们的一切行为决策,都要建立在相关信息获取分析的基础上。可以说,掌握了信息,就掌握了创业的时机和发展方向。

(三)信息环境中的社会资本因素

布尔迪厄(Pierre Bourdieu)于1980年首次提出了“社会资本”这个概念,经过20年不断的研究和争论,其内涵大致上得到了统一,即指嵌入个人社会关系网络中但不为个人所直接占有,而通过个人的直接的或间接的社会关系而获取的各种有用资源。对于具有创业热情的大学生而言,专业知识、技能的优势仅仅是找到成功创业的一方面因素,学生自身的“关系网络”、家庭的经济和社会地位及社会关系等也异常重要,且是常被学生所用的因素。而这些,对于个体来说,就是他们自主创业所必须的社会资本。信息环境,则是将这些有用社会资本综合在一起的纽带。

中国仍然是一个传统的人情社会,与西方历经数百年的制度社会有着本质上的区别,人与人之间的关系常常凌驾于规则和制度之上,这对于大学生创业有着不可替代的影响。仅就大学生创业的资金获取渠道而言,课题组的调查情况表明,由于我国政策性贷款和商业性 贷款制度的制约,大学生的创业启动资金绝大多数来源于他们的社会资本——家庭、亲朋好友的借款。非制度性的资金保障,恰恰是大学生自主创业迟迟不能全面发展的重要因素。虽然一部分人可以获得创业基金的支持,但是由于我国的创业投资仍处于起步阶段,各种信息咨询服务机构良莠不齐,投资资金不充足,创业融资相当困难。而且在创业投资基金与大学生创业项目之间还存在着严重的信息不对称,种种因素,使得许多优秀的创业计划难以付诸实践。

此外,有上海、浙江、江苏等经济发达地区的调查表明,最终成功创业的大学生,大多是家庭环境较为优越,具有丰富的社会关系和融资渠道,以及父母亲朋具有丰富的创业经验的群体。[1][2][3][4]他们的生活环境充满了创业氛围,对机遇有着独特的洞察力和判断力,具备对创业风险的专业化评估,等等。他们的社会资本,为他们营造了一个得天独厚的创业温室。因此,社会资本对我国大学生自主创业的影响,不应该被忽视。

三、信息环境——充分发挥大学生自主创业社会效益的助推器

河北省地处大渤海经济区的中心地带,环抱两大直辖市,而保定地处河北省中部核心区域,良好的区位优势,为大学生自主创业提供了多彩的舞台和丰富的资源。完善信息环境建设,才能创造更好的创业氛围,鼓励创业行为,发展经济,促进创业带动就业,缓解大学生就业压力。

而从保定市企业角度来看,整合信息资源,开发信息环境,有利于更多的创业者和初创企业管理人员吸收创业资源,尽可能多地争取外部环境的支持,保证创业活动的顺利进行。

对于高校的创业教育而言,只有不断提高信息环境质量,才能为高等院校提升创业教育的针对性与适用性,培养具有创新意识与创业能力的人才,提供丰富的实际范例与社会资源。

信息环境的改善,还能大大提升大学生的就业信心和就业能力。通过对创业信息环境的分析,使大学生对创业客观实际情况有更加清晰的认识,在学习中更具针对性更为合理而科学地确定自己的奋斗目标,增强自己分析问题与解决问题的能力,提高自身市场竞争力,为适应未来工作打下坚实的基础。

参考文献:

[1]杰弗里·蒂蒙斯,小斯蒂芬·斯皮内利.《创业学》,人民邮电出版社,2005年9月.

[2]马林斯.《创业测试》,中国人民大学出版社,2004年4月.

[3]应金萍.大学生创业取向及其对环境与政策的诉求社会科学战线2009(10).

篇6

11月16日,在瑞金三中汇报厅我有幸听了瑞金市教育系统2018年“四爱”好园丁宣讲报告会的十位成员先进事迹演讲后,我受益匪浅,让我深深懂得:教师是知识的化身,是智慧的灵泉,是道德的典范,是人格的楷模,是学生们人生可靠的引路人。换而言之,教师是学生美好心灵的塑造者。因此,我要时刻以"德高为师,身正为范"这八个字提醒自己。无私奉献、以德立教、以身示教,用高尚的人格为每颗纯洁心灵的塑造而竭尽全力。

一、树立事业心,增强责任感热爱教育事业。

教书是手段,育人是目的。因此,我们教师在任何时候都不能忘记,自己不单单是为教书而教书的“教书匠”,而应是一个教育家,是人类灵魂的工程师。

“以情育人,热爱学生;以言导行,诲人不倦;以才育人,亲切关心;以身示范,尊重信任”。尊师爱生,是一种理性化的高尚情感,对待学生,管而不死,严而不厉,爱在其中。教育是爱的共鸣,是心和心的呼应。教师只有热爱学生,才能教育好学生,才能使教育发挥最大限度的作用。可以说,热爱学生是教师职业道德的根本。对学生冷漠,缺乏热情,决不是一个有良好师德的好教师。教师爱学生体现在“严”和“慈”上。常言道:“严师出高徒。”又说:“严是爱,宽是害”。对学生不严格要求,严格训练,是难以培育出跨世纪的可靠接班人和合格的建设者。“自古雄才多磨难,从来纨绔少伟男”。所以,对学生不严不行。当然,严要得法,严要有度。慈,就是对学生要关心、爱护、宽容、尊重。充分鼓励学生的自尊和自信,关心学生的学习和成长进步,使学生全面发展。教师要与学生平等相处,尊重学生、信任学生、爱护学生、保护学生。教师对学生的爱,即是敬业精神的核心,又是教师高尚品德的自我表现,既是育人的目的,又是教师教书这个职业的具体表现。

二、用无限的师爱,开启每个学生的心灵。

高尔基说过:“谁不爱孩子,孩子就不爱他,只有爱孩子的人,才能教育孩子。”师爱是教师必须具备的美德,也是教师的天职。无限的师爱,可以开启每个学生的心灵。因此,在教育工作中,我把信任和期待的目光洒向每个学生,倾听学生的意见和呼声,和学生产生思想和情感上的共鸣,让一切学生的心灵都感受到师爱的温暖。

三、用规范的言行,净化每个学生的心灵。

“无德无以为师。”真正优秀的教师。一定是以身作则、率先垂范的人。他对祖国的爱,对学生的爱,对事业和未来的爱,都表现在他对自己的高标准要求的落实上。率先垂范就是对学生真正的负责,就是潜够默化、影响深远的教育。作为小学教师的我们,肩负着培养教育下一代,为祖国的未来夯实基础的重任。这就要求我们本身要有一定的人格魅力,而这种人格魅力表现为教师必须要有敬业精神,必须具备健康的价值观和高尚的道德情操。

四、用奉献的人格,塑造每个学生的心灵。

篇7

关键词 信息技术;珠宝类专业教学;互联网

中图分类号:G642.4 文献标识码:B

文章编号:1671-489X(2016)04-0148-02

Application of Teaching Mode Supported by Information Tech-nology of Jewelry in Modern Education//XING Yingying

Abstract Combined with jewelry major, through the Internet + education example, discusses the application of information technology teaching mode to the modern education.

Key words information technology; jewelry education; internet

根据乔伊斯和韦尔给出的定义,所谓教学模式是指“一种可以用来设置课程、设计教学材料、指导课堂或其他场合教学的计划或范型”。由于传统教学模式一系列的缺点,大量新型的教学模式被提出,如交互式教学模式、层次教学模式等,这些颠覆传统的教学模式为传统教学注入新的血液。尤其随着近几年的发展,信息技术支持下的互联网、多媒体等迅速融入教学过程,为实施教学模式创新、实现新型教学目标创造了必不可少的条件。

随着信息技术的快速发展,移动互联网技术悄然改变了传统教育模式。移动互联网教育自2012年移动互联网大会后逐渐兴起,正影响着传统课堂教学。《国家中长期教育改革和发展规划纲要(2010―2020年)》中指出:“强化信息技术的应用,更新教学观念,改进教学方法,提高教学效果。”2012年3月教育部颁发的《教育信息化十年发展规划(2011―2020年)》中着重强调信息技术要与高等教育教学模式深度融合,创新人才培养模式[1]。本文基于当前移动互联网时代环境,结合华南理工大学广州学院珠宝类专业教学,探讨移动互联网在教育教学中的应用。

1 行业现状

改革开放以来,以广州为代表的南部中心珠宝加工制造业已占我国的70%~80%,其中进出口额上升到全国的72%,特别是翡翠销售占全国销售量的80%以上,已成为全国最大的珠宝玉石(翡翠)集散地和销售中心。产业的高速发展促进了珠宝教育的办学规模逐渐壮大,目前开设珠宝研究生、本专科及职业教育的院校高达20多所。经过一段时间的办学实践,珠宝教育的主体由过去的主要为重点院校向一般院校逐渐转移,这些学校各自形成其独特的办学风格,职业学院主要培养应用型人才,而重点本科院校则承担了研究型人才的培养任务。

但是无论珠宝类教育的培养目标如何各有侧重,信息化在其中的使用还是甚少,特别是各大院校联合建设信息化教学平台更是无人提及。信息化技术的欠缺无疑制约了珠宝类教育的发展速度,也是目前教育界亟待重视和解决的问题。

综观高等院校中的其他专业,信息化教学模式建设为改变以课堂讲授为主的传统教学模式创造了条件,使教学环境、资源、形式、方法、评价等形成互联网化、多媒体化的多元新变革,引导学生面对多元化的新变革应学会如何思考,不盲学,如何为突破已知而学,如何培养创新素质的教育新理念,转变了我国教育长期以来教师如何教、学生就如何学,教学如何考评、教师就如何教的教学模式。

2 信息化技术教学模式的现状

目前,很多高校在互联网+思想的影响下,实施一系列新型的教学模式。与传统教学中教师一直讲、学生被动听的“填鸭式”教学相比,基于网络的开放式教学模式充分利用现代网络技术,与先进的教学方法相结合,逐步启动了教学内容新颖化、教学形式多样化和考评方式立体化的新局面。移动互联网教育是一种“O2O模式(Online to Offline)”,最大特点是可以跨越时空,能克服师生互动交流障碍。因此,基于移动互联网的教学可实现线下传统课堂讲授新知,线上学生间交流、师生互动,线下问题线上答疑,形成线上教学有效地弥补传线下传统课堂教学的教与学的闭环模式[1]。

虽然基于信息化技术的新形式教学极大改善了仅依托于课堂封闭式教学的若干缺陷,但其自身仍存在需要改进之处[2]。首先,目前的网络教学模式无法提供连续性教学的软硬件。目前高职院校采购的软件和硬件都有一定的局限性,使用1~2年可能就用不了了,原因主要是很多教学内容无法进行连续性更新,内容很分散,前后断开,学生学习的时候找内容很困难。由于网络环境的不同,教师和学生在访问和使用的时候遇到很多问题,比如在学校以外无法访问校内服务器。同时,各个专业搭建自己的网络平台,造成资源的极大浪费。另外,互联网教学模式无法提供随时随地的教学,还有教学资源的浪费、传统教学模式的融合,这些都是信息技术应用的瓶颈。

3 信息化技术的教学模式在珠宝类专业中的应用

目前,珠宝类专业引入信息化技术的教学模式还较少,在信息技术如此迅猛发展的时代,教学中如何加快信息技术的利用和信息化人才的培养都是当前面临的问题。对于教师,教学资料大量信息化,教材、课件、教案、教学要求、教学参考资料等上传院校构建的FTP网站,甚至构建了学生自主学习的网站和训练题库。总而言之,教学利用多媒体构建了教学内容的结构化、动态化、形象化。对于学生,由于信息技术的应用,几乎颠覆了传统教育中学生对书、笔、纸的依赖,网络和多媒体技术为他们构建了更加丰富的学习环境,提供了学习资源、学习工具全球化的共享资源,包括教育网站、电子杂志、虚拟图书馆、各种期刊网、数据库等。这些都需要珠宝类专业教师去学习并与专业教育相结合。

目前,华南理工大学广州学院率先与深圳市百变美金珠宝有限公司自主研发的“月光宝盒・微饰界”进行合作,使“月光宝盒・微饰界”与学校产品设计(珠宝首饰设计与加工)专业中的课程相结合,使学生有个一展才华的平台。通过合作,学生的创作能够变成实物并通过该平台展示在大众面前,使其在设计之初就较好地与市场相结合。这种方式较为灵活,以学生自主学习为主,学生通过这种“互联网+教育”的模式开拓了思路,促进了学习主动性,使教学效果得到极大的提升。

4 “互联网+教育”的应用模式

基于移动互联网教育的小、灵、快的特性,可借鉴John M. Keller教授提出的ARCS动机学习模式,即从注意(Attention)、关联(Relevance)、自信(Confidence)和满意(Satisfaction)四方面激发学生的学习动机。

激发学习动机的首要条件是吸引注意力,那么如何吸引学生注意力是教、学的关键。教师要充分结合“90后”大学生的特点,利用学生对新鲜事物的好奇心理,1)通过新奇的教学情境吸引学生;2)通过变化的教学元素,如变换的教学多媒体方式,保持学习兴趣;3)通过提出问题、引导思考问题、最终解决问题,激发学生的学习探究力。

关联性是指在教学中要以学生为主体,把教学内容与学生的学科基础背景、生活学习环境和个性需求联系起来。首先,教学初期通过案例向学生介绍教学内容、学习目的价值,引导学生制定学习目标;其次,教学中采用通俗易懂、与学生基础相关的术语、案例和语言习惯等,把学生的知识整体关联起来;最后,通过合适的教学策略,把学生的个性化需求匹配起来,如学生可以根据自己的空余时间、地方、兴趣完成课后论题。

树立自信心是激发学习动机的关键条件,教师应积极通过各种方式培养学生的学习信心。教师可以通过给予学生明确的学习要求和评价准则,制定多元的学习成果和及时反馈等提高学生的学习积极性。研究表明,移动互联网上的学习者之间会主动地沟通交流,能以良好的表现获得同行的肯定,并会产生强烈的优越感。对于一些不善于面对面交流、比较内向的学生来说,因移动互联网教育的时空独立性进行的不同形式的学习而取得良好的学习成绩。

让学生感受到学习的快乐和价值,体验到学习的满足感是持续学习的内在动力。首先,教师创设真实或模拟性的情境,让学生运用学到的知识,旨在学生体验到学以致用的满足感,激发学习动力;其次,对学生的习得成果给予充分的表扬和激励,维持学习动力;最后,按照统一的标准评价全体学生,不管是课堂上的学习还是移动互联网上的习得,都让学生感受到教师的公平公正性。

笔者认为,移动互联网环境下的学习具有动机的自发性、内容的碎片化、时空的跨越性和目标的自适应,教师应设计有效的移动互联网化的课堂教学,充分考虑自主学习的形式和学生个性,积极引导,探索协助学习、知识共享、个人探究的新型学习方式[1]。

信息技术的发展带来新的教学模式,是高新技术与教育教学深度融合的新契机,是3G/4G移动通信技术、Internet技术和新媒体技术在现代教学上的有机结合和运用。教师在移动互联网平台上提供学习资源,学生不受时空限制地通过智能移动设备在平台上获取资源,并建立师生有效互动。当然,移动互联网下的教学不论在技术上还是教学理念上都还有待探索,普及运用更需时间。但随着云计算、大数据、移动互联网技术的发展,移动互联网作为传统课堂教学的有益补充、智慧校园建设的重要组成,在高校必将有很大的应用潜力。

参考文献

[1]李艳琴.移动互联网在教学中的应用探究[J].文教资料,2015(3):149-150.

[2]胡志明.高职教育移动互联网教学模式的探索与实践[J].产业与科技论坛,2014(7):169.

[3]游碧蓉.互联网教学与传统教学的优势整合[J].企业与教育,2015(2):56-57.

篇8

1、牢固树立“安全第一”思想通过这次几起事故案例的观看和学习,应加大安全宣传教育力度,执行严格的安全考核制度,使职工牢固树立“安全第一”思想,提高安全意识,把安全工作放在重中之重,使安全工作在整个日常工作中置于首位。

2、完善和落实各项安全管理制度。通过这次事故案例的学习,应建立健全符合本所实际的、切实可行的安全管理制度,严格执行煤气系统多年以来行之有效的规程、制度,大力开展安全分析会、安全日活动、班前班后会、安全检查活动等安全生产例行工作,规范生产作业场所安全管理,切实把安全措施和安全工作落实到位,提高生产车间整体安全管理水平。

3、加强安全教育培训,提高职工安全意识和技能通过这次几起事故案例的学习,在安全生产中,事故发生的直接原因往往是人的不安全行为,人为失误占较大的比例,因此,加强安全生产教育培训,提高员工安全意识和安全素质,是防止产生不安全行为,减少人为失误造成事故的重要途径。要提高我所安全水平,就必须加强安全教育和培训,通过各种安全知识的培训、考试和考核,职业道德和安全责任心教育,安全活动日学习等方法,帮助职工正确认识和掌握安全生产规律,提高职工的安全素质,使职工熟悉必要的安全技术知识,熟练掌握本岗位所需的安全操作技能,把安全生产的理念融入职工的思想,变“要我安全”为“我要安全,我会安全”,将安全潜移默化为自觉行动和良好习惯,使职工形成良好的安全意识,自觉贯彻执行党和国家的安全生产方针、政策和法律法规,遵守企业有关安全的规章制度,杜绝违章指挥、违章作业和违反劳动纪律的行为,从根本上保证生产安全。

4、完善并落实安全生产责任制和安全考核制度通过这次事故案例的学习,如:没有严格的考核;安全工作制度落实机制薄弱,安全监督、安全保证和安全激励机制不到位,以制度约束人、激励人的良好机制没有很好地形成等。安全生产,人人有责,要提高我所安全生产水平就必须在落实安全生产责任制上下功夫,建立健全安全生产工作机制,制定全面、完善、合理的安全生产责任制,并运用相应的考核制度来保证责任制的严格执行,使每个专责、每个员工都能明确知道本职责、本岗位应负的安全责任并且认真地履行。

篇9

[关键词] 前列康片;头孢呋辛酯片;慢性前列腺炎;血清细胞因子

[中图分类号] R697.3 [文献标识码] A [文章编号] 1673-9701(2017)14-0028-04

[Abstract] Objective To investigate the influence and therapeutic effect of Qianliekang tablets combined with cefuroxime axetil tablets on serum cytokines in patients with chronic prostatitis. Methods 148 patients with chronic prostatitis who were admitted to our hospital from January 2013 to December 2015 were selected and randomly divided into two groups. The patients(n=74) in the observation group were treated with Qianliekang tablets combined with cefuroxime axetil tablets and 74 patients in the control group were treated with cefuroxime axetil tablets.The influence and therapeutic effect of Qianliekang tablets combined with cefuroxime axetil tablets on serum cytokines in patients with chronic prostatitis were explored by comparing the clinical symptoms improvement, Chinese medicine symptoms and the changes of secretory immunoglobulin A (SIgA),vascular cell adhesion molecule-1 (VCAM-1) and serum VCAM-1 between the two groups. Results The clinical total effective rate was 94.59% in the observation group, higher than 78.38% of the control group. The difference was statistically significant(P

[Key words] Qianliekang tablets; Cefuroxime axetil tablets; Chronic prostatitis; Serum cytokines

慢性前列腺炎是泌尿生殖疾病的一种,约有一半男性会在某个时期受其困扰,严重影响男性健康[1-2]。慢性前列腺炎可分为慢性细菌性前列腺炎和慢性非细菌性前列腺炎,细菌性前列腺炎的病因主要为葡萄球菌属感染,临床多表现为反复发作的尿路感染[3-4]。非细菌性前列腺炎致病因较为复杂,由多种原因共同导致,临床多表现为骨盆附近疼痛。慢性前列腺炎治疗时间长,久治不愈可能会导致患者生活质量下降,影响患者身体及心理健康。针对性治疗慢性前列腺炎,不少药物取得了一定的成效,包括头孢呋辛酯片、前列舒通及宁泌泰胶囊等。有学者研究发现[5-6],中医药治疗慢性前列腺炎有较好疗效,其中采用前列康片治疗慢性前列腺炎更是拥有独特优势。本研究以我院2013年1月~2015年12月接诊的148例慢性前列腺炎患者作为研究对象,通过比较两组患者临床症状改善、中医症候及前列腺液中SIgA、VCAM-1及血清VCAM-1变化,讨论前列康片联合头孢呋辛酯片对慢性前列腺炎患者血清细胞因子的影响及疗效,现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择我院2013年1月~2015年12月接诊的148例慢性前列腺炎患者,随机分成两组各74例,观察组患者给予前列康片联合头孢呋辛酯片治疗,对照组患者给予头孢呋辛酯片治疗。其中,观察组74例,年龄为22~50岁,平均(32.4±7.1)岁;体重52~89 kg,平均(64.7±11.4)kg;病程3~48个月,平均(23.6±10.4)个月。对照组74例,年龄为21~49岁,平均(34.1±8.4)岁;体重53~87 kg,平均(66.2±11.8)kg;病程3~47个月,平均(23.8±10.3)个月。本实验经医院伦理委员会审批通过,患者知情同意并签署知情同意书,纳入排除标准参照国际泌尿外科前列腺炎症诊断标准[7],所有患者诊断均符合慢性前列腺炎,两组患者的年龄、体重和病程等一般资料无统计学意义(P>0.05),具有可比性。

1.2 方法

对照组:给予头孢呋辛酯片治疗,头孢呋辛酯片规格型号0.25 g×6 s,生产企业Glaxo Operations UK Limited(英国),批准文号H20130343,口服1次1片,一日2次。连续服用1个月。观察组:在对照组的治疗基础上加服前列康片,前列康片规格0.5 g×60片,浙江康恩贝制药股份有限公司,国药准字Z33020303,口服一次4片,每日3次。两组均治疗30 d为一个疗程。

1.3 观察指标

观察患者治疗前后疼痛或不适、排尿异常及生活质量改变,监测前列腺液中SIgA、VCAM-1及血清VCAM-1变化,记录中医证候治疗前后积分及疗效。

1.4 评定标准

①临床疗效评定[8]:临床控制:连续两次检查正常及症状积分减少90%以上;显效:白细胞计数减少及症状积分较治疗前减少60%以上;有效:白细胞计数减少及症状积分较治疗前减少30%以上;无效:白细胞计数减少及症状积分较治疗前减少30%以下或都没减少。②NIH-CPSI指数:是美国国立卫生研究院慢性前列腺炎症状指数[9],根据评分表评分,用于患者治疗前后比较。③中医证候疗效评定:治愈为中医证候积分减少≥90%,显效为中医证候积分减少≥60%且

1.5 统计学分析

选用软件SPSS 19.0进行数据统计[11],数据运用(x±s)来表示,计量资料比较采用t检验,计数资料运用[n(%)]表示、采用χ2检验,等级资料比较运用Wilcoxon两样本比较法,P

2 结果

2.1 两组患者临床疗效比较

观察组临床疗效总有效率94.59%,高于对照组临床疗效总有效率78.38%,两组比较差异有统计学意义(P

2.2 两组患者治疗前后NIH-CPSI指数比较

两组治疗前NIH-CPSI指数没有明显差异,两组治疗后NIH-CPSI指稻有显著改善,观察组的改善更优于对照组,两组比较差异有统计学意义(P

2.3 两组患者中医证候治疗前后积分及疗效比较

两组治疗前中医证候积分没有明显区别,治疗后均有所减少,观察组的减少大于对照组(t=3.0447,P=0.0033)。观察组中医证候疗效总有效率91.89%,高于对照组中医证候疗效总有效率72.97%,两组比较差异有统计学意义(P

2.4 两组患者治疗前后前列腺液中SIgA、VCAM-1及血清VCAM-1的比较

两组治疗前前列腺液中SIgA、VCAM-1及血清VCAM-1均无明显差异,治疗后均有降低,观察组的改善更优于对照组,两组比较差异有统计学意义(P

3 讨论

慢性前列腺炎是常见的男性疾病,通过了解详细病史、体格检查、实验室及器械检查等可以诊断,常应用NIH-CPSI指数对患者症状进行评分[12]。慢性前列腺炎病因众多,炎症感染、盆底肌功能损伤、免疫能力下降、神经病变及神经行为失常等因素作用,都可能引起前列腺组织炎症,导致慢性前列腺炎发生[9]。炎症反应调节中血清细胞因子起到了重要作用,SIgA由泌尿生殖道中浆细胞分泌到前列腺液中,抑制微生物黏附细胞组织,对黏膜免疫及炎症发生发展起到重要作用[13-14]。VCAM-1根据结构属于免疫球蛋白超家族,与其他粘附分子一起引导淋巴细胞或白细胞,穿过血管壁进入组织,常通过有活化的神经元细胞、内皮细胞、平滑肌细胞等表达。VCAM-1的表达不仅与免疫和炎症反应有关,还与血管生成有关,随VCAM-1的表达增加,血液中VCAM-1含量也增加,VCAM-1在血液中测定较容易,临床实用价值较大。

慢性前列腺炎属中医学的“精浊”、“白”、“劳淋”等范畴[15-16]。慢性前列腺炎病因复杂、病机多样,临床应根据慢性前列腺炎患者的病因及病机特点,针对病变的关键,阻止疾病发展,对症下药从而达到治愈的目的[17]。对不同体质患者,在药物剂量上,应不同斟酌;在化湿清热药物中,配伍温阳益气药物;以药物属性来治疗疾病属性,即“实者泻之”,“虚者补之”等[18]。研究表明,前列康片在一些男性疾病治疗中,得到广泛应用,对慢性前列腺炎、男性不育等疗效显著[19]。前列康片中:丹参有活血祛瘀,通止痛,清心除烦功效;水蛭有破血逐瘀,祛邪扶正功效;红花有活血化瘀,散湿去肿的功效;桃仁有活血祛瘀,润肠通便功效;黄柏有湿热泻痢,止痒止痛功效;失笑散有活血祛瘀,散结止痛功效;川牛膝有逐瘀通经,利尿通淋功效;穿破石有祛风利湿,散瘀止痛功效;红景天有补气清肺,益智养心功效;牡蛎有安宁心神,平肝潜阳功效;黄芪有增强免疫,保肝利尿功效[20]。

本研究通过比较患者临床疗效发现:观察组临床控制24例、显效28例、有效18例、无效4例、总有效70例,对照组临床控制16例、显效32例、有效10例、无效16例、总有效58例。前列康片联合头孢呋辛酯片治疗患者临床疗效总有效率94.59%,高于头孢呋辛酯片治疗患者临床疗效总有效率78.38%。比较患者治疗前后NIH-CPSI指数发现:治疗前所有患者疼痛或不适、排尿异常及生活质量没有明显差异,治疗后疼痛或不适、排尿异常及生活质量都有显著改善,前列康片联合头孢呋辛酯片治疗患者的改善优于头孢呋辛酯片治疗患者。以上结果表明,前列康片联合头孢呋辛酯片治疗使患者症状改善更佳,疗效更好。

本研究通过比较患者中医证候治疗前后积分及疗效发现:治疗前所有患者中医证候没有明显差异,治疗后均有所改善,前列康片联合头孢呋辛酯片治疗的患者改善大于头孢呋辛酯片治疗患者。前列康片联合头孢呋辛酯片治疗患者中医证候疗效总有效率91.89%,高于头孢呋辛酯片治疗患者中医证候疗效总有效率72.97%。比较患者治疗前后前列腺液中SIgA、VCAM-1及血清VCAM-1变化发现:治疗前所有患者前列腺液中SIgA、VCAM-1及血清VCAM-1均无明显差异,治疗后均明显降低,前列康片联合头孢呋辛酯片治疗患者降低大于头孢呋辛酯片治疗患者。以上结果说明,前列康片利用其中医药特性,有效改善中医症候,作用于前列腺液中SIgA、VCAM-1及血清VCAM-1,对调节血清细胞因子抑制炎症起到较好效果。

综上所述,前列康片联合头孢呋辛酯片的治疗方法,能有效调节血清细胞因子控制炎症,对慢性前列腺炎治疗起到较好效果,值得临床应用。

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篇10

[关键词]肝细胞生长因子;骨髓间充质干细胞;颗粒脂肪移植;血管形成;基因转染

[中图分类号]R62 [文献标识码]A [文章编号]1008-6455(2014)15-1260-04

Experimental study of transplanted mesenchymal stem cells transfected with adenoviral ventor mediated HGF gene enhance angiogenesis of grain fat grafts

WANG You-hu1,LIU Yi2

(1.Department of Otorhionolaryngology,Nead and Neck Surgery,The First Hospital Lanzhou University,Lanzhou 730000,Gansu,China;2.PLA Center of Plastic Surgery,Lanzhou General Hospital of Lanzhou Command, Lanzhou 730050,Gansu,China)

Abstract: Objective To investigate the angiogenetic effect of transplanting mesenchyma stem cells (MSCs) transfected with HGF gene on fat grafts. Methods MSCs of male Wistar rats were collected and cultured in vitro,and were transfected with Ad - GFP or Ad-HGF.The transfection infectivity of Ad - GFP to MSCs was assayed by fluorescent microsopy and flow cytometry.150rats were randomly divided into 5groups: control group (group A,30rats),MSCs group (group B,30 rats),Ad-HGF group (group C, 30rats),MSCs transplanted with Ad-GFP group(groupD,30rats), MSCs transplanted with Ad-HGF group(groupE, 30 rats).Then free fat tissue from inguinal region,mixed with MSCs,Ad-HGF,MSCs transplanted with Ad-GFP and MSCs transplanted with Ad-HGF respective,were transplanted to rats back, but control group were only mixed with DMEM-LG. fat grafts were obtained on day 3,5,7,14,28,60 implantation,The expression of CD34 in fat grafts were detected by immunohistochemistry. Results Transfection efficiency was correlated with the multiplicity of infection (MOI)and a highest transfection efficiency (86.4)could be achieved at MOI of 100.MSC expressed HGF at a high level after being transfected with the Ad-HGF for 48h .The HGF expression could maintain for at least two weeks.Microvesselquantity in group E was much more than that in other group (P

Key words:HGF;MSC;Fat grafts transplant;angiogenesis;gene transfection

Traktueue等[1]预测脂肪移植将来在修复组织缺损中将扮演重要的角色,但是颗粒脂肪移植后存在最大问题是移植脂肪因缺血、缺氧后液化坏死,易被吸收或形成囊肿、纤维化,从而影响远期效果。因此,脂肪移植要取得进一步的进展,就要深入研究脂肪移植后的再血管化[2-3]。

骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)是一类重要的干细胞,可跨胚层分化为各类细胞。其容易分离和培养扩增,同时具有可移植性,易于外源基因转染和表达,是基因治疗理想的载体细胞。肝细胞生长因子( hepatic growth factor,HGF)是一种多功能的细胞因子,其生物学活性通过单一受体c-Met(c-met protoncogene product) 介导,引起细胞内一系列信号转导途径的级联激活,从而调节细胞的增殖、分化、运动和血管生成等。基于此,我们用腺病毒为载体,把HGF基因导入骨髓间充质干细胞,然后与颗粒脂肪混合移植,充分发挥MSCs多项分化潜能和HGF强大的血管效应,旨在为颗粒脂肪移植建立新生血管诱导生物组织工程模式。

1 材料和方法

1.1实验材料:Ad-GFP(携带绿色荧光蛋白的重组腺病毒)和Ad-HGF(携带人肝细胞生长因子基因的重组腺病毒),兰州总医院哈小琴老师惠赠;Percoll试剂(Amersham Pharmacia Biotech公司);兔抗人CD34多克隆抗体及SP试剂盒(武汉博士德生物工程公司);DMEM-LG培养基(Gibco公司);OLYMPUS XT70型荧光倒置显微镜(OLYMPUS公司,日本);流式细胞仪(BD公司,美国);Imge-Pro Plus 图像分析软件(Version 4.1)(美国Media Cybernetics公司)。

1.2MSCs的分离、培养与扩增:应用Percoll(1.073g/ml)密度梯度离心法从健康雄性Wistar大鼠(体重120g)的骨髓中分离得到单核细胞,接种于含10%胎牛血清的DMEM-LG培养液中,置于37℃、5%CO2 条件下培养,72h后换液。原代培养6d左右形成细胞克隆,约10天形成贴壁细胞层。胰蛋白酶消化后传代扩增,第3~5代用于实验。

1.3重组腺病毒介导GFP基因/HGF基因转染MSCs:将细胞以1×106 接种于6孔板,贴壁后,弃去培养上清,加入含不同感染强度的Ad-GFP病毒颗粒的DMEM-LG培养基(0、25、50、100、200pfu/ cell)孵育2h,换含5%血清的培养基继续培养48h检测荧光。转染48h后在荧光显微镜下观察绿色荧光强度并用流式细胞仪检测转染效率。Ad-HGF感染采用Ad-GFP转染率最高的病毒强度。

1.4实验动物分组处理及指标检测

1.4.1实验动物分组处理:150只雌性Wistar大鼠(兰州总医院动物实验科提、供)随机分为:空白对照组(A组 n=30)、Ad-HGF组(B组 n=30)MSC组(C组n=30)、Ad-GFP感染MSC组(D组 n=30)、Ad-HGF感染MSC组(E组 n=30)。用3%的戊巴比妥钠腹腔注射麻醉(40mg/kg)取腹股沟区脂肪1ml,均匀剪成小块,用生理盐水冲洗。A组 颗粒脂肪1ml+0.4mlDMEM-LG;B组 颗粒脂肪1ml+0.4ml DMEM-LG+1х108pfuAd-HGF液;C组颗粒脂肪1ml+0.4mlDMEM-LG+1×106MSC;D组颗粒脂肪1ml+0.4ml DMEM-LG+1×106MSC(携带GFP基因);E组颗粒脂肪1ml+0.4mlDME-LG+1×106MSC(携带HGF基因)均匀震动5min,用注射器接12号针头注射于背部的皮肤与肌肉之间。3、5、7、14、28、60天每次各组取5只脱颈处死,并沿被膜分离出移植物,标本用10%富尔马林固定,规制成石蜡切片, HE染色进行组织病理学观察。

1.4.2 血管染色和血管计数方法:按照免疫组化SP法操作步骤进行,工作液浓度为1:150。每张切片分别在周边区和中央区各选3个高倍(×4OO)视野,每个视野中进行微血管计数,然后求其均值。凡是染成棕色单个内皮细胞或内皮细胞簇均作为1个血管计数。

1.5统计学分析:所有数据采用SPSS11.5统计学软件进行处理,数据用均数±标准差(x±s)表示, 并进行单因素方差分析和多个样本均数之间的多重比较,P

2 结果

2.1MSCs 的体外培养:从骨髓中分离获取的单个核细胞培养24h后逐渐出现贴壁细胞,换液逐渐除去未贴壁细胞,培养4天可见似分裂中的成纤维样细胞,6天可见多个细胞克隆形成似,12~14天细胞形态不一、多呈梭形,90%以上融合。传代细胞于24h内贴壁,10~12天融合。

2.2GFP基因/HGF基因在MSC中的高表达:Ad-GFP转染对数生长期MSCs 48h后在荧光显微镜下观察,在低倍的视野下呈“满天星”状,在高倍视野发绿色荧光的MSC,呈不规则形,有些细胞的轮廓清晰可见,有些融合成片(如图1)。当MOI=100时,用FCM检测GFP表达率89.6%,感染效率最高,说明重组腺病毒能够有效的感染MSC。ELISA检测HGF分泌量结果显示,感染MSC后HGF基因可在短期内高效表达,48h表达量最高(如图2)。

2.3 移植颗粒脂肪组织的病理学变化:所有移植体均被纤维被膜包裹。移植后5、7天,E组有大量的血管长入移植物(如图3)。镜下,早期脂肪移植物内及周围有单核细胞、淋巴细胞、浆细胞及中性粒细胞浸润,其中A、B、C、D中央液化坏死明显,只有周边脂肪组织结构完好;而E组坏死较少,且新生血管丰富,有些血管呈垂直状向移植物延伸移植物。移植后26、60天E组包裹纤维被膜厚,而间隔较薄,体积保持明显好于其他4组,细胞分化成熟。

2.4平均微血管密度记数:免疫组化染色后血管呈棕黄色,切片背景清晰,微血管形态不规则,管腔由染成棕黄色的内皮细胞围成(如图4)。腔内可见红细胞,部分血管无明显管腔呈条索状,有的只见到单个或成团的内皮细胞, Ad-HGF转染MSC组7天新生血管达到高峰,14天后趋于稳定。与其他4组相比较,在第3天无差异,但在术后5、7、14、28、60天时均有差异(P

3 讨论

随着目前分子生物学、基因转染等技术的发展,为加速颗粒脂肪移植后血管的重建提供了新的思路。

HGF是一种特异的促内皮细胞生长因子,具有很强促血管内皮细胞有丝分裂、增生,抑制凋亡作用。在兔与小鼠缺血模型中,HGF 能刺激新生血管生成,且不论在体内还是体外试验HGF 的血管生成活性比血管内皮生长因子(VEGF)及碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)更为强大[4]。但是,HGF半衰期短,费用高,局部给药困难等缺点而难以推广应用。而我们在HGF基因加速创面血管新生方面已取得了一定的进展[5]。

本实验以腺病毒为介导,将HGF基因导入体外培养的MSCs中,和大鼠自体颗粒脂肪混合移植到其背部,发挥HGF强大的血管作用和MSC多项分化作用,共同协同促进颗粒脂肪移植体的新生血管。实验结果显示,Ad- HGF转染MSC组新生血管生成7天达高峰,提前于其他四组和文献报道[6]的14天,且无论在早期还是长期移植体血管的数量明显多于其他4组(P

MSCs不仅免疫毒性很低,易于外源基因转染和表达等优点,而且移植后可促进新生血管的生成,其途径:①MSC产生VEGF、bFGF、PDGF血管生成素;②能分化成血管内皮细胞和平滑肌细胞[9]。实验结果也显示MSC组的新生血管平均数量多余空白对照组。至于MSC是否像文献报道那样能分化成血管内皮细胞和平滑肌细胞,有待进一证明。

本实验选用腺病毒为载体,该病毒有以下优点:安全、无致畸,致病及致癌性;对分裂细胞及癌细胞株的转染效率达到90%~100%;腺病毒感染细胞时DNA不整合到宿主细胞染色体中;腺病毒容易制备、纯化和浓缩,可达到较高滴度;腺病毒载体插入外原基因的容量较大。实验结果显示通过腺病毒介导,GFP基因/HGF基因成功导入MSCs,并高效表达。

综上所述,骨髓间充质干细胞经转染肝细胞生长因子基因后能持续的表达HGF,从而有效的促进自体颗粒脂肪移植后新生血管的生成,有望提高脂肪移植的远期效果。但是要将基因治疗与干细胞移植真正应用于临床,必须进一步研究这种促血管生物工程模式的安全性、稳定性和可控性。

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