审批报告范文
时间：2023-03-31 13:26:28
导语：如何才能写好一篇审批报告，这就需要搜集整理更多的资料和文献，欢迎阅读由公务员之家整理的十篇范文，供你借鉴。
篇1
我局立即派市场股和稽查队的同志前往现场勘验：该经营场所设立在*县南外新*路“好吃街”西边临街的一层（约1800平方米），靠左为小区环路，靠右为新*路，正面为“好吃街”街面，该场所以下是地下停车场，屋顶以上一半是露天花园，另一半是居民住宅楼，顶部是整体全现浇水泥板。当时已在装修，包间墙面隔断已装好。
我局认为，一是从地理位置看：该场所的正面为“好吃街”街面，靠左为小区环路，靠右为新*路，街对面为拆迁楼，拟在20*年拆迁，规划为星级宾馆，该场所屋顶一半是露天花园，另一半是居民住宅楼，不属完全的居民区，其性质认定困难；二是从周边环境看：“好吃街”的商业星罗棋布，餐饮休闲业十分繁华，业主先入为主，已投入了大量资金装修，但会所屋顶居民户要求停止审批呼声强烈；三是从现状看：*州市还没有一家娱乐场所与居民住宅楼截然分开，该会所的装修又在*州市文化局关于《市城区暂停审批新设立娱乐经营场所的公告》前进行的，情况特殊。
但为了依法行政，我们于20*年1月11日发出了暂停装修通知书。20*年1月12日我局向附近居民住户张贴了公示，公示要求有异议者7天之内书面向我局反映，期内只有一女同志前来说在此开办娱乐场所不合适，没有收到书面反映。20*年1月12日，*州市“好吃街”物业管理有限公司对各住户张贴了承诺书，对噪声问题作出郑重承诺。同月19日县环保局出具了同意建设意见书，同时市消防支队出具了建筑内部装修防火审核意见书。至今，我局并未同意开办，而他们的装修仍在继续。
篇2
例1
加快推进行政审批制度改革是建设服务型、效能型、廉洁型政府的必由之路。党的xx大明确要求，深化行政审批制度改革，继续简政放权，推动政府职能向创造良好发展环境、提供优质公共服务、维护社会公平正义转变。作为一名来自区县政府的人大代表，结合多年的工作实践和体会，通过与部分省人大代表、相关专家进行交流，广泛借鉴省外成功经验，形成该调研报告。
一、加快推进四川行政审批制度改革迫在眉睫
(一)新形势迫切需要加快推进行政审批制度改革。当前，四川同全国各地一样，改革步入深水区和攻坚期。就政府自身建设而言，改革必须破除部门既得权力和利益格局形成的阻力，必须改变政府权力部门化、部门权力利益化的现象。政府部门的权力集中在行政审批领域。顺应群众的期盼和要求，必须加快推进行政审批制度改革，从而不断提高广大公民和法人的满意度。
(二)新目标迫切需要加快推进行政审批制度改革。四川省第十次党代会明确提出，今后五年要努力实现三个翻番、五个提升的奋斗目标。目标催人奋进，关键在于加快发展。四川要加快发展，重点是抓招商、增投资、上项目。只有栽下梧桐树，才能引来金凤凰只有优化服务，打造一流的政务环境，才能实现四川的快速发展。在制度上，就需要深入推进行政审批制度改革，通过简化审批流程、建立健全监督机制，进一步规范行政许可、审批权限，改进工作作风，提升工作效率。
(三)新成果迫切需要加快推进行政审批制度改革。实施行政审批制度改革以来，四川虽偏居西部，但通过各级各部门的齐心协力，取得较为可喜的成果。2016行政审批制度改革调研报告2016行政审批制度改革调研报告。2016年以来，全省先后10次对行政审批项目进行清理，取消和调整了一大批行政审批项目，省级行政审批项目由2906项减少到478项。同时，规范了审批行为,优化了审批程序，行政效率有所提高。但改革如逆水行舟，不进则退，当前我们既要巩固来之不易的成果，更要乘胜追击，扩大战果，因此不能须臾懈怠，不能半点停顿，否则可能前功尽弃。
二、四川行政审批制度改革需要解决的突出问题
(一)行政审批的项目有待进一步减少。调查发现，不少企业认为：相关政府部门虽然大幅削减了审批项目的数量，但多数是监管风险高或不收费的项目;对于涉及经济事务的可收费项目，却采取化零为整的方式加以保留。因此，减少行政审批的数量与政务服务水平的提升程度不成正比，审批项目仍有进一步缩减的空间。
(二)行政审批的流程有待进一步优化。一些政府部门对审批流程的改进缺乏系统性和整体性，缺乏与相关平级部门的沟通和协调，只是对本部门的行政审批制度作一些局部的改良。由于缺乏完善的制度设计，一些部门仍然存在审批的前置条件过多过细;审批流程重复、阻塞。以市政项目为例，在各项工作顺利的情况下，从立项、用地预审、选址、环评、节能、可研、规划许可、土地、消防、设计审批、概预算审批等需16个环节219个工作日，还未计入项目本身需要的勘察、规划、设计、其它资料准备、方案图纸修改和专题论证研究的时间。由于项目审批一环扣一环，若某一阶段不批，则下一阶段就无法实施，项目单位开展工作相当被动。更严重的是，部分审批甚至相互前置。例如：新上企业在生产经营前，应在发改部门进行备案登记，根据规定，办理备案登记证时需要提供工商营业执照，而办理工商营业执照需要环评批复意见，办理环评批复又需要提供备案登记证，发改、工商、环保三个部门的审批事项互为前置，又都有相关政策依据，因此无法办理相关证照，更无法投产运行。据了解，某地来川的客商投资一个项目，相关部门的公章盖了80多个。最后，该客商感慨四川是一个休闲的天府，却不是一个干事创业的好地方。此例子虽不一定具有代表性，但从一个侧面反映了审批流程的繁杂以及效能的低下。
(三)行政审批的授权有待进一步到位。一些地方的政务服务中心存在定位不明确，管理权限和职责不到位，对审批窗口授权不充分，不能实现窗口接件与部门审批的前后动，当场办结率低，甚至变成单纯的接件窗口。
(四)行政审批的监管有待进一步加强。目前一些政府部门只审批不监管，或重审批轻监管;有的监管手段单一，监管不到位;甚至有个别人受利益驱动滥用监管权。同时，虽然有些政府部门出台了行政审批的责任追究制度，但缺乏落实审批责任制度的可操作的程序和具体行动。公众反映最强烈、最难解决的3个难题拖、 卡、推现象便屡禁不绝。
三、省外成功经验
(一)浙江省行政审批向下放权。20xx年6月27日，浙江省委办公厅、省政府办公厅出台了《关于加强服务保障改善发展环境，大力推进浙江舟山群岛新区建设和XX市国际贸易综合改革试点的实施意见》。意见要求，进一步简化和规范审批程序，压缩办事时限，做到能放就放、能减则减、能快则快。20xx年9月24日，浙江省政府出台《关于下放部分省级行政审批和管理事项的通知》，省政府及其有关部门根据各地经济社会发展需要，以依法交办、委托等方式，向各设区市政府及其有关部门或县(市、区)政府及其有关部门下放406项省级行政审批和管理权限。
(二)海南省行政审批实行三集中。海南省政务服务中心实行审批事项、审批权力、审批人员三集中，其核心是审批权的集中。通过集中审批权，并配合监督制衡机制，海南实现了对行政审批事项和审批权的有序管理，提高了依法行政和政务服务水平。以海南省住建厅为例，该厅有48项审批事项，以前分散在7个内设处室，由3位领导分管，涉及53位审批工作人员，使用7枚行政审批专用章进行审批。进入省政务服务中心后，改为11人一个窗口对外，首席代表全权审批，只需1枚审批专用章。
(三)广东省行政审批先行先试。国务院批准广东行政审批制度改革先行先试，其主要思路是以取消为主、转移下放为辅，宽准入、严监管，其独特处在于部分中央设定的审批事项经向上汇报争取后也被改革掉。20xx年7月17日，广东省公布了省政府20xx年行政审批制度改革事项第一批目录，全部调整事项达到354 项，占省级政府现有实际审批项目的1/3以上。其中，明确取消的有179项、转移的有55项、下放的有115项、委托管理的有5项。20xx年11月23 日，印发《广东省十二五时期深化行政审批制度改革先行先试方案》，提出到20xx年，省内各级行政审批事项压减40%以上，办结时限总体缩短50%左右，网上审批办理率90%。
四、加快推进四川行政审批制度改革的具体建议
(一)科学确定目标。力争通过4-5年努力，实现西部地区透明度最高、效率最高和收费最少的目标。为了实现这一目标，省级相关部门有必要明确责任领导、责任处室，在制定本单位行政审批制度改革路线图的基础上，科学确定年度工作目标。
(二)设定基本原则。一是效率优先原则。要按照规矩服从效率、权限服从效果的要求，加大行政审批改革力度，下大力气削减审批事项，优化经济社会发展环境，加快推进全省在科学发展的轨道上实现跨越提升。二是注意中立原则。建议由省编办这个相对超脱的部门牵头审批改革，其他同属相对超脱的省委政研室、省政府研究室、省社科院协助，从而破除核心权力部门自我改革难题。三是社会协同原则。建议广泛召开企业、社会组织、行业专家座谈会，广泛发放调查问卷表，详细听取审批行为相对人的意见，打好一场行政审批制度改革的人民战争。
(三)选择合适路径。
1. 做好省级层面的顶层设计。对于依据省人大制定的有关法规而设立的相关审批，由于经济社会发展经论证不合理的，建议省人大修订有关法规，从而取消相关行政审批，为加快发展清除障碍。同时，建议省政府在加强调研论证的基础上，按照系统性、整体性、协同性的原则，尽快出台简化审批程序、提高行政审批效率的文件体系，如：《关于进一步改善投资环境简化建设项目审批程序提高行政效能的意见》、《关于优化政府投资建设项目、工业项目、旅游项目、房地产项目等四类建设项目联合审批流程实施方案》、《关于简化建设项目立项规划环评审批程序的实施方案》、《关于下放或委托市(州)审批投资建设项目有关审批事项的实施意见》、《关于重点建设项目用地保障机制的实施意见》等。
2. 突出重点深化改革。根据中央部署，结合四川实际，着力在三大领域推进行政审批制度改革。一是投资领域。与投资审批相关的企业登记注册，目前前置审批项目多、环节多。因此，建议改革企业登记审批制度，最大限度地激发企业的活力和创造力。二是社会事业领域。现在以审批代替服务的现象、政府大包大揽的现象仍普遍存在。对此，一方面要下决心减少或下放审批权限;另一方面，要积极引导社会组织健康有序发展，逐步把部分政府公共服务和社会管理职能转移给成熟的社会组织。三是非行政许可审批领域。按照《行政许可法》规定，临时性行政许可有效期只有1年，超过1年仍需实施的，必须上升到法规，如果1年之内没有上升到法规，就自动取消。
3. 再造审批办理流程。一是突出高效化，全面优化审批流程，做到减事项、减流程，特别是着力消除部分审批事项相互前置的羁绊。二是突出便民化，分领域编制业务手册和办事指南，内容涉及办理依据、办理机构、审批条件、审批数量、申请材料等，切实方便企业办事。三是突出集中化，建议借鉴海南模式优化省级部门机构设置，实行三集中。四是突出标准化，全面实行阳光审批，凡工作流程中不涉及的事项和材料，不得要求企业或相关组织提供。
4. 强化审批监管。加快创新和强化政府监管机制，建议省级各部门针对每一项取消、下放、转移的事项，紧密结合社会信用体系和市场监管体系建设，逐一制定相应的具体监管办法，充分发挥各类社会主体的作用，着力构建行政管理、社会自治和公众参与相结合的综合监管体系，防止出现管理真空。
(四)强化保障措施。
1. 强化组织领导。建议省政府成立高规格的领导小组，建立工作例会制度，及时研究行政审批制度改革工作中遇到的困难和问题。有审批权的省级部门主要领导要带头抓，带头深入基层、深入企业、深入群众调查研究，切实摆脱固有利益的束缚，还权于社会、还权于市场，换来四川加快发展的无限生机。
2.强化工作监督。省人大每年组织对行政审批制度改革的视察活动，听取省政府的工作报告，切实加强法律监督和工作监督，不断把改革推向深入。
3.强化技术保障。充分发挥现代信息技术的作用，加强电子政务建设，着力建设全川统一使用的通用审批系统，建立省、市、县三级联网审批服务平台，拓展完善网上审批服务大厅的功能，抓好人员培训，全面推行网上审批，促进审批提速提效。
4.强化社会评价。坚持开门搞改革，建议由省统计局、省监察局牵头，在广泛征求民意的基础上建立四川省行政审批制度改革公众评价体系，完善行政审批绩效考核制度，强化效能问责，做到审批提速不越轨、加快不违规，确保人民群众放心满意。
例2
为进一步深化行政审批制度的改革，创新大河西先导区行政审批管理及运行机制，提高政府工作的服务质量，根据市委、市政府对大河西先导区行政审批试点改革的总体要求，现就行政审批流程改革工作提出如下实施方案。
一、改革目标
通过行政审批流程再造，力争审批环节明显减少、审批行为得到规范、审批效率显著提高、审批监督机制进一步强化，构建科学、规范、透明、高效的行政审批快速通道。
二、审批原则
(一)集中原则。一是集中受理行政许可申报，先导区管委会设置一个专门的政务窗口，统一受理44项行政许可事项的报批卷宗，统一对外发卷。二是集中统征土地，先导区范围内征用土地，由先导区土地储备(交易)中心统一进行。三是涉及项目建设的行政事业性税费集中在三个环节收取，即所有土地税费统一在土地呈报批准后、用地审批发证之前收取，商品房项目报建费统一在商品房预售许可前收取(非商品房则仍在建设工程规划许可前收取)，房产契税统一在产权证发放前收取。
(二)公开原则。先导区所有行政许可事项的工作流程、项目申报条件、行政许可时限、办理责任人等内容将全部向社会公布，为办事人创造一个公开透明的办事环境。
(三)精减原则。先导区管委会将履行11个市级行政审批部门44项行政许可或审批工作职能。先导区建设项目审批以规划审批为主线，国土、建设、环保、房产等审批为辅线，其报建总时限利用大部委办公的平台，通过各审批环节的整合、并联，原体外环节的纳入、简化，统筹利用各部门资源来予以压缩，而并非简单的压缩某个办事环节时限，并力争单个审批项目报建总时限在原各部门承诺的总审批时限基础上再缩短50%。
(四)便民原则。为减少当事人往返行政审批机关的次数，降低项目报批成本，对当事人申报的行政许可事项所必需的资料，窗口工作人员须一次性告知。根据当事人的自主选择，对所有行政报批事项均可由先导区土地储备(交易)中心实行全程，跟踪服务。
(五)廉洁原则。在行政许可过程中，明确界定各级行政审批人员的职能职责，保持政策的刚性与连续性，实行电子化办公，建立部门之间、处室之间相互监督办事机制，健全社会监督机制和效能考核机制，真正做到精减廉洁，公开便民。
三、土地征用、转用、供应基本流程
(一)土地征用、转用、供地分三个阶段进行，即用地预审，土地征用、转用报批，土地供应。先导区所有用地均由先导区管委会土地储备(交易)中心【下称储备(交易)中心】统一征、转，统一储备，统一安置补偿，统一供地。
1、用地预审。由储备(交易)中心准备下列资料：
(1) 用地、规划申请表
(2) 选址意见书(由国土规划部规划处提供)、立项文件(由项目建设部提供)或土地开发利用方案【省级审批部门有要求的即需要该项资料】
(3) 1：500至1：2016地形图
(4) 土地规划调整批文(若需调整规划的)
(5) 其他相关资料
报国土规划部国土处审查，由国土处组织本部规划处、环境资源处进行用地预审，主要审查是否符合土地利用规划、是否有农用地转用计划、是否符合环保的要求、是否属禁止、限制供地范围(项目用地)等，审查通过出具预审报告，规划条件，划定规划定点蓝线。
2、土地征用、转用报批。由储备(交易)中心准备下列资料：
(1) 用地预审阶段的所有资料及预审报告
(2) 地籍调查表、土地权属汇总表及拟占土地权属证明(国土分局承担)
(3) 勘测定界技术报告和勘测定界图、土地利用现状图
(4) 预征土地公告(国土分局承担)
(5) 听证笔录(有听证要求的、国土分局承担)
(6) 补充耕地验收文件(占用耕地的)
(7) 相关部门意见
(8) 其他相关资料
报国土规划部审查，规划处审查合格发《规划用地许可证》，国土处审查合格划调查红线，编制一书四方案，环境资源处审查建设项目环境影响情况及压覆矿产、地质灾害等情况，各处审查合格签署意见后上报先导区管委会、省、国务院审批。
3、土地供应。上述地块经省、国务院审查批准后，交土地储备(交易)中心统一储备。根据土地开发进度，由储备(交易)中心协调区级政府搞好土地安置补偿工作。
4、土地划拨。地块符合划拨条件的，由项目申请人准备下列资料：
(1) 用地申请表
(2) 选址意见书(由国土规划部规划处提供)、立项文件(由项目建设部提供)
(3) 1：500至1：2016(下基层调研报告)地形图、红线图
(4) 测量测绘成果表
(5) 单位资质证书、工商营业执照
(6) 法人委托书原件
(7) 法定代表人及人身份证复印件
(8) 先导区管委会同意土地划拨批文
(9) 其他相关资料
报国土规划部国土处审查并上报先导区管委会审批后发划拨决定书及划拨土地红线图。
5、土地出让。地块进行招、拍、挂出让，由项目建设部就项目准入、投资强度等问题提出审核意见，由国土规划部规划处尽可能做好该地块的规划要点及控制性详规。规划一旦确定即不再变更，土地招、拍、挂出让后，不得改变土地性质，不得修改容积率，不得减少公共绿地，不得占用公共配套设施用地。特殊情况确需变更的，由用地人将土地交回管委会重新招、拍、挂。储备(交易)中心根据规划编制土地出让方案，测算土地出让金，测算土地供应后项目建设过程中所有税费，一并列入土地成本，报国土规划部国土处审批后，上报先导区管委会批准，由储备(交易)中心组织招、拍、挂出让，项目用地单位取得出让土地后在建设过程中不再向行政管理部门缴纳任何税费。
项目用地单位通过划拨、出让途径取得土地使用权，交清所有税费后，准备相关资料报国土处审查，核发《土地使用证》。
四、项目建设报批、预售、竣工验收
(一)项目建设报批分五个阶段，即核发建设用地规划许可证，建设工程设计方案审查，核发建设工程规划许可证(建筑工程施工许可证)，商品房预售，竣工验收。
1、核发建设用地规划许可证。由项目建设人准备下列资料：
(1) 建设用地规划申请表
(2) 土地权属资料(红线图、土地使用证、土地出让合同等)
(3) 总平面图
(4) 建设项目环境影响评价文件
经国土规划部规划处审查总平面图，环境资源处审查建设项目环境影响评价文件后，规划处发《建设用地规划许可证》。
2、建设工程设计方案审查。由项目建设人准备下列资料：
(1) 上一步骤中所有资料
(2) 相关设计文件和图纸
由建筑房产处牵头，规划处、环境资源处参与，审查合格后签发批复文件。
3、核发建设工程规划许可证(建筑工程施工许可证)。核发两证分别由规划处、建筑房产处牵头，环境资源处参与，同步进行。
4、核发《建设工程规划许可证》。由项目建设人准备各类设计图件报规划处审查，规划处审查上述资料，并组织相关部门进行联合审查，各部门同意，签署意见后，核发《建设工程规划许可证》。
5、核发《建筑工程施工许可证》。国家投资项目及国有(控股)企业先由项目建设部按照公开、公平、透明的原则，社会化运作模式组织工程招投标，工程监理招投标。再由项目建设人准备下列资料：
(1) 施工项目报批表
(2) 中标通知书(非公有制企业不须提供)
(3) 施工合同、监理合同
(4) 农民工工资保障金核实表及建筑工地计划生育管理登记表
(5) 建设工程施工图技术审查报告
由国土规划部建筑房产处审查上述资料，发《建筑工程施工许可证》。
6、商品房预售。由项目建设人准备以下资料：
(1) 房地产企业《营业执照》和《资质证书》
(2) 土地使用权证
(3) 建设用地规划许可证
(4) 建设工程规划许可证
(5) 建筑工程施工许可证
(6) 审查批准的报建图
(7) 工程进度证明材料
(8) 商业房预售及物业管理方案
篇3
一、基本情况
交通管理行政审批事项分为公路路政审批和道路运输审批两大类，具体分别由县地方公路管理站和县交通管理总站组织实施。
（一）公路路政行政审批事项有行政许可12项，没有非行政许可审批和公共服务审批事项。公路路政承担行政审批事项有：
1.占用、挖掘公路或者使公路改线的许可。
2.跨越、穿越公路修建桥梁、渡槽或者架设、埋设管线、电缆等设施的许可。
3.在公路用地范围内架设、埋设管道、电缆等设施的许可。
4.利用公路桥梁、公路隧道、涵洞铺设电缆等设施的许可。
5.利用跨越公路的设施悬挂非公路标志的许可。
6.在公路上增设或者改造平面交叉道口的许可。
7.在公路两侧建筑控制区埋设管（杆）线、电缆等设施的许可。
8.更新砍伐公路用地上的树木的许可。
9.在公路用地范围内设置非公路标志的许可。
10.铁轮车、履带车或其他可能损害公路路面的机具需要在公路上行驶的许可。
11.超过公路、公路桥梁、公路隧道或者汽车渡船的限载、限高、限宽、限长标准的车辆，确需在公路上行驶的许可。
12.在中型以上公路桥梁跨越的河道上下游各1000米范围内抽取地下水、架设浮桥以及修建其他危及公路桥梁安全的设施的许可。
（二）道路、水路运输行政审批事项有行政许可6项，没有非行政许可审批和公共服务审批事项。道路、水路运输承担行政审批事项有：
1、道路客运站经营许可。
2、道路旅客运输经营许可。
3、道路机动车维修经营许可。
4、机动车驾驶培训经营许可。
5、道路货运站（场）经营许可。
6、道路货物运输经营许可。
7、水路运输经营许可。
二、运行情况
1.在信息公开方面。县公路站、县交管站对所承担的行政许可项目向社会公开、并重新进行流程再造；有关审批事项、依据、数量、期限以及需要提交的全部材料目录和申请书示范文本等也逐项分类对外公示；依法依规公开准予行政许可决定。
2.在实施程序方面。实行了“一个窗口对外”制度；切实履行了“一次性告知制”，有关印章和书面凭证使用符合法律规定，在实施审批项目中没有增设违反上位法的其他条件，依法依程序实施行政审批，对有关需要依法举行听证的事项进行听证，行政许可变更与延续符合法律规定，办理期限符合承诺期限要求，在实施行政许可程序中符合法律特别规定，严格依法告知救济渠道和方式，对行政审批案卷立卷归档。
3.在许可费用方面。公路运输收费项目和标准是《关于调整我省占用损坏公路路产赔补偿费标准的通知》,并依法公开,对实施行政许可依法收取费用,收取的费用全部上缴国库,在对行政许可事项进行监督检查中不收取任何费用。道路运输许可不收取任何费用。
4.在监督检查方面。严格依法履行监督检查职能，并建立健全相关监督检查制度；许可核实工作人员持有效行政执法证件；撤销、注销行政许可符合法律规定；对被许可人违法从事行政许可事项的活动进行依法予以处理；对监督检查案卷进行分类、整理、立卷归档。
三、清理精简意见建议
篇4
政收费项目进行了清理，在方便企业、居民办事方面取得了一定成效，服务经济社会发展、服务企业、服务市民群众的水平明显提高。但在实际运作中，还存在着许多问题。为此，我们进行深入思考，借鉴先进地区经验，结合我县实际，探索我县行政审批制度改革的一些举措，供领导参考。
一、基本情况
审批中心为各窗口统一制作了审批流程图，印发了审批事项告知单和服务指南，实施了服务承诺八项制度，推进了政务公开，方便了办事群众。六是加强对入驻部门和窗口工作人员的考核监督。按市领导要求，借鉴南方经验，已将各部门入驻审批中心情况纳入全县重点工作目标管理考核范围，并占一定的分值;在发展党员、评先、评优、评模、选拔后备干部、提拔干部等方面，应将审批中心单列并在中心进行考核，使表现突出的窗口工作人员能得到奖励、提拔和重用。七是贯彻落实好全市行政审批服务工作会议精神。全市行政审批服务工作会议之后，审批中心按照上级会议要求，迅速开展工作。中心领导多次深入有关入驻部门，与部门主要领导进行沟通、协商，就审批项目进驻、人员落实、电脑配置等问题研究解决办法，在审批中心的积极运作下，有些单位近期将审批项目纳入审批服务大厅集中办理。八是发挥审批中心平台作用，切实加大招商引资工作力度。经过我们确定专人、多方寻找门路、积极运作，已初步与长春一家客商达成投资协议，并在乌鸦泡镇建一木材加工企业，投资金额200万元。九是认真总结并在全市会议上介绍了我县审批中心建设经验。我县是哈市各县(市)中首家正式揭牌对外办公的行政审批服务中心，市政府有关领导认为**县委、县政府对审批中心建设高度重视，起步早、进度快，工作推进力度大、效果明显。在今年全市行政审批服务工作会议上，市领导在讲话中对我县工作给予了充分肯定，我县《依法行政 便民利商 开启行政审批绿色通道》的工作经验在会上作了交流。
二、存在的主要问题
目前我县行政审批改革工作的整体情况而言，虽然运行较为平稳，但与先进发达地区相比，与我县经济发展相比，与投资者、居民的期望相比，与县委、县政府的要求相比，还存在较大差距，致使改革缺乏一定的深度和广度，多数企业和民众对行政收费项目之多、手续繁杂问题意见较大，主要表现在以下几个方面：
1、少数单位认识不够到位，缺乏改革热情。少数单位负责人大局意识、组织纪律意识淡薄，过多地强调困难性、习惯性，对县委、县政府有关审批项目进驻和办理政策、规定执行不力、落实不到位。
2、行政服务中心管理的职能不强。行政服务中心与各窗口单位只是一种协调服务的关系，虽然县委、县政府赋予了一定的管理权力，但实际上很难运用到位。
3、前店后坊现象仍然存在。有些单位没有在中心设立窗口进行集中办公、公开办事。少数单位为保住自身的审批权力，对一些重要的审批事项仍未做到应进尽进，存在小权进、大权不进，将重要的服务项目、关键的办事环节，仍放在本单位办理，把行政服务中心窗口作为收发室，两头受理、收费标准不一的现象依然存在，严重弱化了中心的服务功能和服务质量。如地税部门在行政服务中心设立了窗口，而国税却没有。地税进中心，但税务登记却没有进。
4、项目设置不合理，综合功能发
篇5
一、加强思想作风建设，牢固树立服务意识
切实以《行政许可法》为依据，以改革创新为动力，以“两集中、两到位”为主题，构建“审管分离、权责挂钩”和“审批一条龙、服务一站式”的行政审批工作新机制。科室人员能坚持以正确的思想为先导，不断地加强政治理论学习，牢固树立为民办事、为企业服务的意识。在全年工作中，我们始终把提供优质服务放在首位，耐心解答电话及现场的各项业务咨询。认真办理各项审批工作事务，真正做到以 “便民、高效、廉洁，规范”为标准，努力提高工作能力，提高服务水平，得到了广大服务对象及相关群众的普遍赞誉。
二、强化理论学习，提高业务理论水平
窗口工作是直接面对群众的前沿岗位，业务的熟练与精通将直接影响到办事的效率乃至窗口单位的形象。为此，我们在工作有侧重和分工的基础上，严格按中心规定实行AB岗工作制度，不因人员的变动而耽搁工作。同时狠抓科室人员的日常学习，始终把业务理论的学习放在工作首位，尤其对政策性及法律性要求强的有关业务，我们始终能保持前后方的学习和交流，切实形成科室内部人员以及与其他科室人员之间的相互学习、虚心请教的良好氛围，不断提高自身的素质和修养。全年工作中我们从未发生因业务能力的不足和人员变动而拖延、缓办办件的事件发生。并遇有重大事务及时向汇报，确保了各项审批和转报工作顺畅有序地进行。
三、强化作风建设，恪守行业规范
我科室始终把“以服务企业、方便群众、奉献社会”作为自己在窗口工作的职业观念和宗旨。爱岗敬业，积极履行岗位职责。一年来，我们本着“便民、高效、廉洁、规范”的宗旨，用最大的热情和友情为群众服务。因此，在窗口工作时，我科室始终把“打造诚信窗口，争做文明职工”作为我窗口工作的最高准则。工作中我们严格按照办事程序办理各项业务，杜绝了各种吃、拿、卡、要的情况发生，真正做到“情为民所系，权为民所用”，使前来办事的群众有如沐春风之感。此外，我局领导始终致力于行政审批的改革，在水利局和行政审批服务中心的共同努力下，局领导对行政审批科下放了审批权限、进行了不断的提速。工作中我们始终坚持想群众所想，急群众之所急，如一些村级二三产项目、涉河基础建设项目等，因特殊的原因、时间限制和涉及相关部门的有关业务时，为提高办事效率，方便前来办事的群众，我们主动提供初步的规划河道岸线以及相应的意见，让群众能在规定的时限内办理相关部门的手续。全年工作中我们没有发生一起因服务不到位而耽搁企业业务，给企业带来损失的事件发生。
四、规范受理办结，争创一流窗口
五、严格遵守各项规章制度，充分展示水利服务风貌
篇6
市民管办
接到关于对全市2008年以后取消和调整行政审批事项落实情况进行专项检查和清理行政监管事项的通知以后，我局领导高度重视，按照《关于对全市2008年以后取消和调整行政审批事项落实情况进行专项检查和清理行政监管事项的工作方案》的要求，对我局2008年以后取消和调整行政审批事项和行政监管事项中有关社会组织的事项认真进行了梳理和自查，现将有关情况汇报如下：
一、 目前尚保留的行政审批事项：1、申请筹备成立社团审查（行政许可）2、社会团体及其分支机构、代表机构成立、设立、变更、注销登记（行政许可）；3、民办非企业单位成立、变更、注销登记（行政许可）
篇7
***省卫生厅中医药管理局：
我院创建于1987年10月，二十多年来，在省、市、县卫生行政部门的重视支持下，突出中医特色，重视专科专病建设，狠抓人才培养，医院发展规模和诊疗水平得到了很大提高，已发展成为一所集医疗、科研、教学为一体的综合性二级乙等中医医院。全院现有职工104人，其中副主任医师8人，中级职称21人，开设病床100张，有临床科室13个，医技科室7个，开设骨伤科、妇产科、外科、内儿科病区4个，有CT、彩超、500mAx 光机C型臂等大型医疗器械 68台件。2007年接诊门急诊病人5万多人次，收住院病人2300多例，业务收入879万元。我院骨伤科创建于1987年10月，经过二十多年努力，已形成了具有一定中医特色优势和诊疗体系的特色专科，在1996年等级医院和1998年全国农村中医工作先进县建设达标验收中，骨伤科作为重点专科通过了上级验收；2004年12月被***市卫生局验收命名为“市级重点中医专科”。为了进一步加大我院重点科室骨伤科建设力度，特申请其四批省级重点中医药专科建设单位，现根据《***省重点中医专科（专病）建设检查标准》，将自查结果报告如下：
一、 科室规模（5分，实得分4分）：
骨伤科设有病床20张，有医护人员13个，其中中医骨伤科副主任医师1名，主治医师1名，初级职称人员9名，其比例为1：1：9。
二、专科业务量（20分，实得分10.7分）：
我院骨伤科年接诊门（即）病人5800多人次，收住院病人368例，年业务收入102万元，专科门诊、住院人次占全院门诊、住院人次的比例分别为11.6%和16%，门诊病人比例低3.4%，扣3.4分；其中外县、市门诊、出院病人分别占专科病人的比例为14.3%和12.5%，扣2.5分；专科门诊住院收入合计为102.4万元，占全院业务收入的11.65%。
三、技术质量（43分，实得分33.5分）：
1.医疗指标：门诊中医治疗率90%，住院病人中西医结合治疗率95%，入院三日确诊率95%，入、出院诊断符合率98%，治愈好转率88.5%，比标准要求低7.5%，扣1.5分，病床使用率49.3%，比标准要求低35.7%，扣3分；甲级病历率93.8%，本可制剂收入占药品收入的13.52%，扣3分。
2.本专科临床二级临床科室有2个，骨伤科有颈肩腰腿痛科、牵引理疗室、按摩室，有甲级单病种1个，乙级2个，扣1分。
3.能接受同级中医机构或其它医院在专科方面的会诊、转诊。
4.能运用中医传统疗法诊疗该专科范围的常见病、疑难病，在治疗腰椎间盘突出症，颈椎病等方面已形成了较为完整的诊疗常规。
5.专科制剂：骨伤科现有临床较好的专科制剂，神经痛丸、接骨胶囊、活络定痛膏、生肌玉红膏、上肢洗剂、下肢洗剂，近3年未开发新制剂，扣1分。
6.护理技术：能开展整体护理和专科特殊护理；能开展中医传统的护理项目，如针灸、推拿、按摩、拔火罐、中药换药、中药坐浴；护理技术操作合格率≥95%；五种护理文件书写合格率≥96%，能开展单病种护理。
四、科研学术水平（14分，实得分12分）：
1.每年进修培训2名以上学科带头人，每年进行学术讲座8场次；
2.能承担中专以上学生的临床实习和培训基层中医专科人才的学习任务，但住院医师规范化培训无记录。
3.近三年来有地厅级以上新成果及新技术，引进新技术3项，无地厅级以上新成果扣2分。
4.每年有专科方面的经验总结，近3年在国家级及省级刊物4篇。
五、医疗设备(6分，实得分5分)
病区设备每年每床单元设施和专科设备能达到分级管理标准要求，能适应专科需要和专科技术发展的要求，每床单元设备平均值在1万元以上设备完好率90%；C型臂常发生故障。
六、管理（12分，实得分9分）：
有重点中医专科的发展规划和年度实施计划及总结，有专科经费；有专科医疗文件管理、考评制度，并对医护质量进行评估，实行质量监控；有专科专业委员会组织，进行有专科特色的学术检验研究、总结、推广工作；建立了三个以上单位参加的学术网络，但开展活动不够扣1分；科内有计算机2台，但相关程序不配套扣2分。
综上所述，根据《***省重点中医药建设检查标准》自查，结果得分74.2分，特申请***省第四批重点中医药专科建设单位，望审批为盼！
篇8
一、基本情况
我市第三批深入学习实践科学发展观活动自2009年
二、主要做法
（二）立足实际，深入分析检查。一是开展三项活动，找准查透问题。广泛开展“调查征求意见”活动，通过集中座谈、实地访谈、网络论谈等形式，听取民声，吸纳民意；认真开展“县乡村干部大走访”活动，组织党员干部深入村组农户、田间地头、企业学校，宣传惠农政策，破解发展难题；深入开展“科学发展大家谈”活动，主动邀请“两代表一委员”、基层群众、服务对象等进行“零距离”沟通交流，进一步找问题、挖根源、谋发展。二是落实三项要求，开好民主生活会。各参学单位把民主生活会和组织生活会搬到村组院落、田间地头、企业生产一线召开，让党员干部与群众面对面交流，主动接受群众的监督和评议；单位主要负责同志带头谈心交心，深挖思想根源，深刻分析检查；广大党员干部坚持说真话、讲实情，积极亮言亮丑，确保了民主生活会的质量和效果。三是采取三项措施，形成分析检查报告。在起草撰写分析检查报告前，各参学单位充分运用征求意见和民主生活会成果，对查摆出来的问题逐一进行梳理归类，切实做到找得准、梳理清、不漏项；为高质量撰写形成分析检查报告，各参学单位主要领导亲自指导、参与报告的起草，市活动办采取以会代训的形式，进一步细化内容，统一标准，明确要求，市委指导检查组逐一对参学单位分析检查报告进行严格审核；分析检查报告形成后，各参学单位通过深入基层走访座谈、设置公示栏、开设网上论坛等方式，认真组织群众评议，反复修改完善，努力使分析检查报告切合实际、长效管用。
（三）完善措施，大力整改落实。各参学单位围绕查摆出的涉及思想观念、工作作风、结构调整、环境卫生、社会事业、改善民生和基层党建等20个方面200多项影响科学发展的突出问题，采取领导带头“点题整改”的方式，带动参学单位和参学党员积极整改落实，推动整改由点到面；采取建立台账“量化整改”的方式，明确整改措施和目标，推动整改由粗到细；采取公示结果“阳光整改”的方式，及时通过乡村广播、工作简报、公开栏等将整改情况向群众通报，接受群众的监督和评判，推动整改由虚到实。同时，采取广泛征集民意、形成建议议案、反复征求意见、表决形成草案、印发文件执行“五步法”，对查摆出来的制度、机制问题进行全面分析，通过发放调查问卷、召开座谈会、设立意见箱等形式，向社会各界征集意见及建议，并组织召开专家会议讨论形成建议议案，制度、机制草案经公示后以文件形式印发执行。目前，各参学单位累计建立制度、机制323个，修改完善规章制度458个，清理废止规章制度226个。
三、基本特点
个，并通过理论考试、演讲比赛、文艺演出等丰富多彩的形式，在全市营造了学习实践活动的浓厚氛围。
（三）坚持督促检查，狠抓工作落实。市委指导检查组采取定期例会、日报周报等办法，了解情况，把握方向，及时指导，每个阶段都制定了《序时进度一览表》，细化活动安排，量化活动内容，并及时对活动开展情况重点抽查，综合指导，使活动开展指导有方、督导有力、推进有效。
（四）坚持开门搞活动，扩大群众参与。学习调研阶段，积极组织领导干部深入基层、深入群众集中开展“蹲点调研”；分析检查阶段，通过问卷调查、邀请“两代表一委员”座谈、组织民主评议等多种形式向广大群众征求意见；整改落实阶段，尽心竭力帮助基层和群众解决实际困难，并组织群众开展满意度测评，使活动的每一个阶段每一个环节都积极吸收群众参与。
四、取得成效
（一）进一步提高了思想认识。广大参学党员干部通过学习实践活动，提高了对科学发展观的认识，增强了贯彻落实科学发展观的自觉性和坚定性，在推动科学发展的理念和思路上形成了共识，进一步坚定了“把新密建设成为干净整洁、结构优良、富足文明、风清气正的现代化新兴中等城市”的奋斗目标。
篇9
【关键词】 高尿酸血症 尿酸 有机阴离子转运子 免疫组织化学
［ABSTRACT］ Objective To observe the expression of organic anion transporter 3 (OAT3) in renal epithelial cells of Wistar rats with hyperuricemia. Methods Twenty male Wister rats were evenly pided into control group and hyperuricemia group in random. The hyperuricemia group was administrated with adenine 100 mg/ (kg·d) by gavage and richyeast forage. Blood UA， CR， BUN were detected regularly. The expression of OAT3 was detected by immunohistochemistry. Results On day 14， blood uric acid level of rats in hyperuricemia group was higher than that of the controls (P
［KEY WORDS］ Hyperuricemia; Uric acid; Organic anion transporters; Immunohistochemistry
近年来高尿酸血症的患病率逐年上升，且随年龄增加而升高，已成为危害人类健康的公共卫生问题[1]。业已证实，约90%以上原发性高尿酸血症是因肾近端小管对尿酸的重吸收增加和（或）分泌减少所致。有机阴离子转运体3（OAT3）参与了肾近端小管对尿酸盐的转运[2～4]，其表达及功能缺陷可能为原发性高尿酸血症重要的发病机制之一。本实验选用雄性Wistar大鼠制备高尿酸血症模型，观察模型大鼠肾脏近端小管上皮细胞OAT3 蛋白的表达水平，以期明确OAT3在高尿酸血症状态下的变化，为研发治疗高尿酸血症药物提供新的作用靶点。
1 材料和方法
1.1 材料
1.1.1 实验动物
8周龄雄性Wistar大鼠共20只，体质量（250±10）g，由青岛实验动物基地提供， SPF级实验动物房饲养。
1.1.2 仪器
Sysmex CHEMIX180型全自动生化分析仪（日本）；Simple PCI图像分析仪（Comp ix，美国）。
1.1.3 药品和试剂
UA、CRE、BUN检测试剂盒购自青岛益信公司；一抗为兔抗大鼠OAT3多克隆抗体，由北京博奥森公司制备，按1∶50配成工作液；二抗（PV6001）及 DAB 显色试剂盒均购自北京中杉金桥公司，二抗为羊抗兔IgG，为工作液。其他试剂均为进口或国产分析纯。
1.2 方法
1.2.1 高酵母饲料的制备
酵母干粉均匀拌入粉碎的大鼠颗粒饲料中重新压粒成型，控制其在饲料中的质量分数为0.10。
1.2.2 动物模型的建立及分组
根据奚九一等[5]的造模方法，动物购入后，让其适应环境1周，自由饮水进食。然后将动物随机分为对照组和高尿酸血症组（实验组），每组10只。实验组饲以高酵母饲料，并给予腺嘌呤100 mg/(kg·d）灌胃，以制备高尿酸血症模型。对照组饲以普通大鼠颗粒饲料，并给予同体积的蒸馏水灌胃。两组动物自由饮水。
1.2.3 生化指标的监测
定期内眦静脉采血，分离血清后，在全自动生化分析仪上测定尿酸（UA）、肌酐（CR）和尿素氮(BUN)，监测大鼠高尿酸血症模型的建立情况及造模对大鼠肾功能的损害情况。
1.2.4 动物处死及标本处理
待血尿酸出现显著差异时处死大鼠，术前禁食14 h， 体积分数0.10的水合氯醛3 mL/kg腹腔麻醉，开腹后分离肾脏，切除肾组织用40 g/L甲醛固定，石蜡包埋， 全部标本均1 μm厚连续切片，分别进行苏木精伊红染色和免疫组织化学染色。
1.2.5 免疫组化检测
石蜡切片脱蜡至水，体积分数0.03的H2O2室温孵育10 min，以清除内源性过氧化物酶的活性；抗原微波热修复；体积分数0.10的正常山羊血清封闭非特异性位点；倾去血清，滴加一抗工作液， 37 ℃孵育3 h；滴加二抗工作液，37 ℃孵育30 min；DAB染色；苏木精复染细胞核；封片。以PBS代替一抗作阴性对照。
1.2.6 图像分析和统计学处理
对肾小管上皮细胞基底膜上OAT3免疫组化着色强度， 用Simple PCI软件测定其阳性信号灰度值及吸光度值。所得数据用SPSS 11.5 统计软件处理，各指标以±s表示，组间数据比较采用t检验。
2 结 果
2.1 两组UA、CR及BUN水平比较
造模后第14天，高尿酸血症组UA、CR、BUN水平与对照组相比均升高，差异均有显著性（t′=-15.00、-9.13、-17.59，P
2.2 大鼠肾脏组织切片苏木精伊红染色光镜观察
对照组大鼠肾脏切片， 光镜下肾小球囊腔内未见异常物质，肾曲小管、集合管亦未见异常病变，间质有轻度瘀血；高尿酸血症组大鼠肾脏切片，光镜下肾小球囊内有红细胞，伴红染物质，肾小管浊肿，肾小管及间质部位有较多的尿酸盐结晶沉积，间质有出血及大量炎性细胞浸润，尿酸盐结晶呈针状、双折光放射形排列。
2.3 肾近端小管上皮细胞OAT3表达水平
免疫组织化学染色结果显示，对照组及高尿酸血症组大鼠肾脏近端小管上皮细胞均有OAT3的表达，但高尿酸血症组大鼠OAT3的表达较对照组显著减少。Simple PCI软件分析结果显示，高尿酸血症组OAT3的吸光度值（0.202 2±0.014 3）较对照组(0.217 7±0.015 8)明显降低（t=3.299，P
3 讨 论
高尿酸血症和痛风是一种嘌呤代谢紊乱性疾病，受遗传和环境因素的影响，目前其发病机制仍不确切。约90%原发性高尿酸血症是因尿酸排泄减少所致，每日排出体外的尿酸2/3通过肾脏排泄，1/3通过肠道排泄。肾近端小管对尿酸的重吸收增加和（或）分泌减少是尿酸排泄减少的主要原因，但导致肾近端小管尿酸排泄减少的分子机制目前仍不确切。目前研究表明， 肾近端小管上皮细胞有尿酸分泌和重吸收的转运体，参与肾脏对尿酸的排泄。其中，OAT3在肾脏主要位于肾小管上皮细胞基底膜，它是一个有机阴离子二羧酸盐转运子，其底物亲和性很广，包括雌激素硫酸盐（ES）、对氨基马尿酸(PAH)、非类固醇类消炎药、利尿剂、磺溴酞、胆盐、青霉素、西米替丁以及抗高血压药溴化四乙胺，同时它还参与肾小管管周细胞对尿酸盐的摄取，从而有利于尿酸盐的分泌[3，4]。
本实验选用雄性Wistar大鼠饲以高酵母饲料加腺嘌呤灌胃，制备高尿酸血症模型，观察高尿酸血症状态下大鼠肾脏近端小管上皮细胞OAT3 蛋白表达水平的变化。实验第14天，高尿酸血症组血尿酸水平显著高于对照组（P
此外，OAT3在肾脏对尿酸盐及一些药物的排泄中占有重要地位，在高尿酸血症病人中，OAT3的表达及活性降低，提示高尿酸血症并发其他疾病的临床治疗中，应注意一些有机阴离子药物的用法及用量调整，以防药物排泄减少导致蓄积。高尿酸血症及痛风发病机制复杂，为多基因遗传病，有多种尿酸盐转运体参与肾近端小管上皮细胞对尿酸的重吸收和分泌[6]，对其发病机制及治疗的研究应综合多种相关基因及其表达活性进行进一步研究。
【参考文献】
[1]ARROMDEE E， MICHET C J， CROWSON C S， et al. Epidemiology of gout: is the incidence rising[J]. J Rheumatol， 2002，29:24032406.
[2]KUSUHARA H， SEKINE T， UTSUNOMIYATATE N， et al. Molecular Clonin and characterization of a new multispecific organic anion transporter from rat brain[J]. J Biol Chem， 1999，274(19):1367513680.
[3]BAKHIYA A， BAHN A， BURCKHARDT G， et al. Human organic anion transporter 3(hOAT3) can operate as an exchanger and mediate secretory urate flux[J]. Cell Physiol Biochem， 2003，13(5):249256.
[4]CHA S H， SEKINE T， FUKUSHIMA J I， et al. Identification and characterization of human organic anion transporter 3 expressing predominantly in the kidney[J]. Mol Pharmacol， 2001，59:12771286.
[5]奚九一，赵兆琳，鲁培基，等. 高尿酸血症肾病的实验动物模型研究[J]. 上海中医药杂志， 2001，10：1214.
篇10
【摘要】 目的: 探讨p38 MAPK在高糖诱导的肾小管上皮细胞转分化中的作用. 方法: 将体外培养的人肾小管上皮细胞（HK2）分为正常对照组（NG）， 高糖组（HG）， 无关siRNA转染组（RG）、转染p38 MAPK siRNA 24 h组(24hG)、转染p38 MAPK siRNA 48 h组(48hG). 免疫细胞化学法检测α平滑肌肌动蛋白(αSMA)和细胞角蛋白(CK)的表达，RTPCR法检测CK mRNA的表达，Western Blot检测p38 MAPK的活化及αSMA的表达. 结果: p38 MAPK siRNA能显著抑制高糖诱导的p38 MAPK过度活化；高糖刺激后肾小管上皮细胞αSMA蛋白表达明显高于正常组（P
【关键词】 p38 丝裂原活化蛋白激酶类；肾小管；上皮细胞；上皮间质转分化
0引言
糖尿病肾病(DN)是糖尿病的主要微血管并发症，而肾脏纤维化是糖尿病肾病进展为慢性肾功能衰竭的病理基础. 研究发现，肾小管上皮细胞转分化为间充质细胞(epithelialmesenchymaltransition， EMT)是肾间质纤维化发生机制之一［1］. p38丝裂素激活蛋白激酶(p38 MAPK) 是脊椎动物体内广泛存在的丝氨酸／苏氨酸蛋白调节激酶，在糖尿病肾病的发生和发展中发挥重要作用［2-3］. 我们应用RNA干扰技术(siRNA) 抑制肾小管上皮细胞p38 MAPK基因的表达，观察其对高糖诱导的肾小管上皮细胞转分化的影响，以探讨DN肾间质纤维化的机制，为糖尿病肾病的基因治疗提供实验依据.
1材料和方法
1.1材料人近端肾小管上皮细胞株2(HK2)(美国ATCC). 鼠抗人αSMA(美国Santa Cruz公司)， 鼠抗人CK抗体(北京中杉公司)， p38和磷酸化p38(Pp38)抗体(cell signaling公司)，通用型RTPCR试剂盒(日本TaKaRa公司)， LipofectamineTM2000(美国Invitrogen公司).
1.2方法
1.2.1p38 MAPK siRNA转染人p38特异性siRNA序列：Sense， 5′GAAGCTCTCCAGACCATTT3′; Antisense，5′AAATGGTCTGGAGAGCTTCTT3′. 用Blast搜寻EST基因库，对选中的siRNA序列同源性分析. 将适量HK2细胞接种于培养板，分别转染重组PshRNAp38 MAPK和无关对照质粒，依LipofectamineTM2000转染试剂盒说明书进行操作.
1.2.2细胞培养及分组HK2用含100 mL/L FCS的DMEM培养液传代培养. 分为5组：①正常对照组(NG): 培养液中含D葡萄糖(5.5 mmol/L);②高糖组(HG):培养液中含D葡萄糖(30 mmol/L);③无关siRNA转染组(RG):无关pshGSP转染细胞24 h后， 再给予D葡萄糖(30 mmol/L);④转染p38 MAPKsiRNA 24 h组(24hG):pshRNAp38 MAPK转染细胞24 h后，再给予D葡萄糖(30 mmol/L);⑤转染p38 MAPK siRNA 48 h组(48hG):pshRNAp38 MAPK转染细胞48h后，再给予D葡萄糖(30 mmol/L). 每组均加入等量脂质体，给予D葡萄糖作用48 h后收集细胞和培养液用于各项检测. 各组细胞分别用相差显微镜和透射电镜进行观察.
1.2.3免疫细胞化学法检测CK和αSMA表达HK2细胞爬片，待细胞长至亚融合状态，以无血清培养基继续培养24 h使其同步化，分组如前述. 根据SP试剂盒所示方法检测CK，αSMA的表达. 生物医学图像分析系统进行图像分析，用平均吸光度表示阳性物质的相对含量.
1.2.4RTPCR实验各组按照Trizol说明书提取总RNA，根据260 nm吸光度值计算RNA浓度. 取总RNA 1 μg作逆转录，步骤参照试剂盒说明. CK引物正义链：5′CCCAGAGCCTTGAGATAGAAC3′，反义链:5′CACGACCTTGCCATCCAC3′. βactin引物正义链5′CACCAACTGGGACGACAT3′，反义链:3′GCAACGATAGGTCCGACA5′. 反应参数:变性94℃ 2 min，变性94℃ 30 s，退火55℃ 30 s，延伸72℃ 2 min，35个循环. PCR产物琼脂糖凝胶电泳，CK mRNA表达以βactin作为内参照物调整后进行半定量分析.
1.2.5Western Blot检测收集细胞，提取蛋白，考马斯亮蓝法测定蛋白浓度. SDS聚丙烯酰胺凝胶上样，积层胶电压50 V电泳，分离胶60～65 V电压电泳， 50 V转膜2 h， BSA封闭l h，一抗p38，Pp38(1∶1000)或αSMA(1∶200)，βactin(1∶2000)孵育过夜，洗涤后加二抗(1∶2500) 室温反应1 h，曝光、显影. 凝胶成像和化学发光分析系统进行灰度分析.
统计学处理：数据用 x±s表示，采用统计学软件SPSS11.0进行统计学处理，多组计量资料经检验方差齐同，采用单因素方差分析，组间多重比较采用LSDt检验，P
2结果
2.1细胞形态学改变倒置显微镜下，正常HK2细胞为椭圆形贴壁生长. 高糖刺激后，细胞间隙增大，呈梭形，失去鹅卵石样形态. 转染p38 MAPKsiRNA后，部分细胞为椭圆形，部分转变为梭形. 透射电镜下，正常对照组细胞表面微绒毛积聚，细胞内线粒体丰富，粗面内质网少. 高糖组和无关转染组与正常对照组相比，细胞表面微绒毛明显减少，胞质内粗面内质网丰富，线粒体极少. 而转染p38 MAPKsiRNA组与高糖组和无关转染组相比，细胞表面微绒毛增多，细胞内粗面内质网减少，线粒体增多(图1). A:正常对照组; B:高糖组; C:无关siRNA转染组; D:转染p38 MAPKsiRNA 24 h组; E:转染p38 MAPKsiRNA 48 h组.
图1各组HK2细胞超微结构改变
2.2p38 MAPKsiRNA对肾小管上皮细胞p38 MAPK表达的影响Western Blot检测显示，高糖组和无关转染组p38 MAPK被磷酸化激活，与正常对照组相比差异有统计学意义（P
1:正常对照组; 2:高糖组; 3:无关siRNA转染组; 4:转染p38 MAPKsiRNA 24 h组; 5:转染p38 MAPKsiRNA 48 h组.
图2各组HK2细胞p38 MAPK的表达
2.3p38 MAPKsiRNA对肾小管上皮细胞CK和αSMA表达的影响免疫细胞化学结果显示，与正常对照组相比，高糖组和无关转染组CK表达显著降低，差异有统计学意义；p38 MAPKsiRNA转染组，与高糖组和无关转染组相比CK表达显著增加(P
3讨论
肾脏纤维化是糖尿病肾病（DN）进展为慢性肾衰的病理基础，细胞外基质过度聚积是肾脏纤维化的主要原因. 研究证实，肾小管上皮细胞转分化是肾间质纤维化发生的重要机制之一［4-5］. 深入了解转分化的发生机制，对于早期防治糖尿病肾病具有十分重要的意义.
M:marker;1:正常对照组; 2:高糖组; 3:无关siRNA转染组; 4:转染p38 MAPKsiRNA 24 h组; 5:转染p38 MAPKsiRNA 48 h组.
图3各组HK2细胞CK mRNA表达的水平
1：正常对照组; 2:高糖组; 3:无关siRNA转染组; 4:转染p38 MAPKsiRNA 24 h组; 5:转染p38 MAPKsiRNA 48 h组.
图4各组HK2细胞αSMA蛋白表达的影响
αSMA是肌成纤维细胞的标志性蛋白，肌成纤维细胞是活化的成纤维细胞，具有很高的合成细胞外基质的作用，是引起肾间质纤维化的主要原因［6］. 正常情况下，肾小管上皮细胞表达其标志蛋白CK，不表达αSMA. 我们实验发现，高糖可以刺激HK2细胞发生形态学改变，细胞逐渐由卵圆形拉长成梭形，微绒毛明显减少，粗面内质网明显增多；这提示细胞失去了上皮特性而表现为成纤维细胞特性. 同时，正常对照组几乎无αSMA的表达，但高糖作用下αSMA高表达，而HK2的标志蛋白CK的表达明显下调，表明高糖诱导肾小管上皮细胞表型转化，可能是糖尿病肾病肾间质纤维化的重要机制之一.
p38 MAPK为信号转导通路的交汇点，在糖尿病肾病的发生发展起到重要的作用［7］. 本实验成功构建pshRNAp38 MAPK表达载体，能有效抑制p38 MAPK的表达. 转染pshRNAp38 MAPK后， p38 MAPK的表达被抑制，HK2细胞αSMA的表达明显低于高糖组和无关转染组，而HK2的标志蛋白CK的表达较高糖组和无关转染组明显增加. 同时形态学检查显示，p38 MAPK siRNA转染组细胞形态介于对照组与高糖组之间，部分细胞为椭圆形，部分转变为梭形，同时细胞表面微绒毛较高糖组明显增多，胞浆内粗面内质网较高糖组减少. 表明高糖可通过p38 MAPK活化诱导肾小管上皮细胞转分化，参与糖尿病肾病的纤维化进程.
本研究表明，高糖能够导致肾小管上皮细胞p38 MAPK通路的激活，下调CK表达，同时导致αSMA等间充质细胞表型的表达，诱导其表型转化，而p38 MAPKsiRNA能有效抑制其发生，p38 MAPK作为肾小管上皮细胞转分化中的重要因子，成为糖尿病肾病纤维化干预的中心环节，该研究为应用RNAi糖尿病肾病的基因治疗提供实验依据.
参考文献
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