大学毕业感想范文

导语：如何才能写好一篇大学毕业感想，这就需要搜集整理更多的资料和文献，欢迎阅读由公务员之家整理的十篇范文，供你借鉴。

大学毕业感想

篇1

1、简单感悟。对于自己这些年的学习生活进行一个很真挚的总结，从而更多的把自己的想法与感受融入其中。

2、学习回顾。对于自己的学习生活进行一个很好的回顾，每一年可以分为一个段落，把重点部分呈现出来，让人感动的一个个故事。

3、精彩片刻。学习生活肯定有很多的事情发生，把大家都有共同感受的事情重点写一下，这会很吸引人，也会引发共鸣。

4、总结。在最后的一段中进行总体的描述，回忆过去的同时再展望一下未来吧，让未来的美好去引发众人的想象。

（来源：文章屋网）

篇2

【摘要】

【目的】探讨原癌基因hccr mrna、fbi?1 mrna在肝癌相关患者血液中的表达及其与临床指标的关系。【方法】采用荧光定量聚合酶链反应(pcr)技术,检测41例肝细胞癌、3例肝硬化患者术前血液标本及10例健康者血液标本中hccr mrna、fbi?1 mrna 含量,分析其与临床指标的关系。【结果】肝细胞癌患者血液中hccr mrna、fbi?1 mrna 水平高于肝硬化患者,健康者血液中未发现两基因的mrna 表达。同时发现,血液中fbi?1 mrna 与甲胎蛋白(afp)水平显著相关(p＜0?01),fbi?1 mrna 与hccr mrna 的表达水平显著相关(p＜0?01)。【结论】肝细胞癌、肝硬化患者血液中hccr mrna、fbi?1 mrna表达异常增高,fbi?1 mrna 表达与afp水平显著相关。

【关键词】肝肿瘤基因表达相关分析

abstract:objectiveto investigate mrna expression of proto?oncogene fbi?1 and hccr in the blood of hepatocellular carcinoma and liver cirrhosis, and to explore their relation with clinic parameters. methodsquantity real?time fluorescence polymerase chain reaction (pcr) was used for the detection of fbi?1 and hccr mrna expression in the blood of 41 hepatocellular carcinoma patients before surgery, 3 liver cirrhosis patients before surgery, and 10 healthy volunteers. the relationship of fbi?1 and hccr mrna expression with clinic parameters was analyzed by fisher?s exact test or spearman?s analysis of correlation. resultsthe level of fbi?1 and hccr mrna expression was higher in the blood of hepatocellular carcinoma patients than that in hepatic cirrhosis patients. fbi?1 and hccr mrna expression was negative in the blood of the healthy volunteers. fbi?1 mrna expression was positively correlated with alpha fetoprotein (afp) level (p<0?01), and also positively correlated with hccr mrna expression (p<0?01). conclusionabnormal increase of fbi?1 and hccr mrna expression occurs in the blood of hepatocellular carcinoma and liver cirrhosis patients. fbi?1 mrna expression is positively correlated with afp level．

key words: liver neoplasms；gene expression；correlation analysis

原癌基因fbi?1(factor that binds to inducer of short transcripts?1),其编码的蛋白具有特殊结构,即其氮末端具有poz(poxvirus zinc finger)区,碳末端具有由k型锌指结构组成的蛋白结合区。研究发现fbi?1可以通过其特殊蛋白结构特异结合p14arf启动子,以及抑制p53通路参与肿瘤的发生［1］。其蛋白在、肺、膀胱、前列腺、肝脏等肿瘤中有异常高表达［1-3］。原癌基因hccr(human cervical cancer oncogene)最先在人宫颈癌中分离。研究显示,hccr是p53基因的负调控因子,能下调p21waf1基因启动子活性,其蛋白在人乳腺、肾、淋巴、胃、结肠、卵巢等肿瘤中异常高表达［4-6］。本研究检测了肝癌相关患者血液中hccr 及fbi?1基因mrna的表达情况及探讨其与患者临床指标的联系,现报道如下。

1　材料与方法

1.1　标本及来源

肝细胞癌(hcc)患者术前血液标本41例,肝硬化(lc)患者术前血液标本3例,均取自中山大学附属第一医院、中山大学肿瘤防治中心。各患者的临床指标都收集于中山大学附属第一医院、中山大学肿瘤防治中心检验科的检测记录。3例正常肝组织来源于肝移植的健康供体肝。10例健康者血液标本取自广东省东莞市中心血站,来源于健康献血者,年龄22～40岁,均排除肝肾疾病。

1.2　主要试剂与仪器

trizol(invitrogen 公司)，逆转录试剂盒(fermentas公司)，荧光定量聚合酶链反应(pcr)所用试剂盒(达安基因诊断公司)，引物、探针(invitrogen 公司合成)，pmd18?t载体(takara公司)， uvmini?1240型紫外分光光度计(日本岛津公司)，7000型荧光定量pcr仪(美国abi公司)，9700型普通pcr仪(美国abi公司)。

1.3　标本rna的提取和cdna第1链合成

临床取来的血液标本用乙二胺四乙酸(edta)抗凝管4℃保存,并在1 d内提取rna,提取时1 ml血液用9 g/l nacl对倍稀释后,缓慢加入已装有2 ml淋巴细胞分离液的离心管中,2 500 r/min离心10 min,吸取中间单个核细胞层置于1?5 ml ep管中,5 000 r/min离心5 min,弃上清,在沉淀中加入trizol提取rna。临床取来的其他组织标本马上-80℃冷冻,提取时加入液氮碾磨,之后用trizol提取rna。所有rna用紫外分光光度计测出光密度d260与d280比值,并使用普通pcr仪、逆转录试剂盒合成cdna第1链,其在普通pcr仪上的运行条件为：37℃、60 min,95℃、5 min。cdna第1链-80℃保存备用。

1.4　荧光定量pcr检测fbi?1 mrna、hccr mrna

1.4.1　引物探针设计

根据genebank上fbi?1、hccr?2和人β?actin mrna序列,应用primer express 2?0(applied biosystems company)设计。引物探针序列见表1。表1荧光定量rt?pcr所用的引物和探针（略）

1.4.2　荧光定量pcr检测fbi?1 mrna、hccr mrna方法建立

用forward primer、reverse primer扩增cdna第1链,所得基因片段克隆入pmd18?t载体。提取重组质粒经测序证实后,通过光密度(d)值算出拷贝数,并用三羟甲基氨基甲烷—盐酸乙二胺四乙酸溶液(tris?hcl edta, te缓冲液)倍比稀释后作为系列标准品。将fbi?1、hccr、β?actin系列标准品和待测样本cdna同时在荧光定量pcr仪完成以下程序：93℃预变性2 min，93℃变性30 s,55℃退火45 s,共40个循环。反应结束后,将样本与各基因标准曲线进行对比分别得到fbi?1、hccr、β?actin的原始拷贝数后,用fbi?1原始拷贝数除以β?actin原始拷贝数即得fbi?1的相对表达量。用hccr原始拷贝数除以β?actin原始拷贝数即得hccr的相对表达量。

1.5　统计学方法

所得数据应用spss 11?0统计软件包处理,对于2个均为计数资料的采用卡方检验fisher精确概率法进行分析；对于1个为计数资料1个为计量资料的,将计量资料以其中位数分为2类后,使用卡方检验fisher精确概率法进行分析；对于2个均为计量资料的采用spearman 相关分析。

2　结果

2.1　荧光定量 pcr检测fbi?1 mrna、hccr mrna方法建立

所有提取rna的 d260与d280均在1?8～2?0之间。各基因荧光定量pcr扩增动力曲线图和标准曲线见图1、图2,从扩增动力曲线图可见不同模板浓度(101～108 copies/ml)扩增曲线的上升起始点不同,但都呈形状相似的“s”型曲线,分布均匀。从标准曲线图可见不同梯度模板浓度的对数值与阈值(ct)之间有非常好的线性相关关系,标准曲线的直线回归相关系数r都大于0?990,表明标准品与ct值有着良好的线性关系。而阴性对照或阴性样本的扩增曲线不是“s”型,而且都处于基线以下。

2.2　血液中fbi?1、hccr基因的表达情况

应用已建立的荧光定量法检测fbi?1、hccr表达,测得fbi?1、hccr在hcc患者、lc患者、以及健康者血液中的表达情况见表2。在大部分患者血液中两者都有表达,其中hcc患者不仅两者的阳性率略高于lc患者,两基因的表达水平也高于lc患者。而在10例健康者血液中均未检测到hccr、fbi?1的表达,即hccr mrna、fbi?1 mrna在正常人血液当中的阳性率为0％。表2各组血液中fbi?1、hccr表达情况（略）

2.3　hcc和lc患者血液中fbi?1、hccr表达水平与临床指标的关系

表3结果显示,fbi?1 mrna、hccr mrna表达水平与大部分临床指标的关联均无统计学意义,但fbi?1 mrna与hccr mrna水平及fbi?1 mrna与afp水平的相关分析均有显著性意义(p<0?01)。表3肝癌相关患者血液中fbi?1 mrna、hccr mrna表达水平与临床指标的关系（略）

3　讨论

3.1　肝癌相关患者血液中fbi?1 mrna的表达

本研究中设计了更为严格的健康者血液标本的入选标准,即来源于血站的献血者，且确定排除了肝、肾疾病和肝炎病毒感染,从而尽可能的排除未知因素对实验结果的影响。结果显示健康者血液中fbi?1 mrna均为阴性,而肝癌、肝硬化患者血液中大多有不同程度的fbi?1 mrna表达,提示fbi?1 mrna具有作为一个肝癌相关标记物的可能。本研究选用甲胎蛋白(alpha fetoprotein,afp)数值作为临床指标参与统计,发现患者血液中fbi?1 mrna表达与afp水平显著相关,而afp数值的动态变化与患者肝癌病情发展有关［7］。本研究还发现肝癌患者血液中fbi?1 mrna水平高于肝硬化患者,结合已有研究结果［8］认为：fbi?1 mrna在hcc远端转移患者血液中的表达量远高于其他人群,提示血液中fbi?1 mrna的水平高低可能与hcc患者的病情发展有关。

3.2　肝癌相关患者血液中hccr mrna的表达

hccr有2种不同的剪接方式,即hccr?1和hccr?2,研究发现hccr?2更多与肿瘤形成有关［4］。因此本研究根据hccr?2设计并建立血液中hccr mrna 检测方法。研究发现hccr可增强p53蛋白稳定性，但降低了p53蛋白调控功能,并可下调p21waf1基因启动子活性［4］。而fbi?1是通过结合并抑制p14arf基因启动子活性,参与影响p14?p53基因信号旁路［1］。说明hccr、fbi?1均参与了p14arf～p53～p21waf1通路。本研究发现,hccr mrna的水平与fbi?1 mrna水平显著相关，这说明hccr和fbi?1在致癌机理上可能有一定的相关性。而fbi?1参与作用的p14arf～p53位于该通路上游,所以可能是hccr基因参与了fbi?1基因所引起的后续反应。

另基于本研究中发现fbi?1与hccr及afp均显著相关,但hccr与afp不相关,提示fbi?1基因所引起的后续反应中是否不仅包含hccr基因参与的一条路径,可能还包含其他途径,有待进一步研究证实。

3.3　两基因联合检测肝癌的可能性

本研究发现血液标本中两基因均未检出mrna的患者共有4例,都属于hcc病例。因此在本实验中,两基因联合检测hcc的阳性率(检出率)为90%(37/41)。而因为健康者血液中均未检出两基因的mrna,因此其特异性为100%。同样,肝硬化患者的检出率(3/3)和特异性均为100%。这说明fbi?1 mrna、hccr mrna联合检测有可能用于检测肝癌,但其是否能作为一种新的检测方法,则需要更多的hcc、lc患者及其他肝病或其他疾病患者以及健康者的血液标本进行进一步的验证和研究,为中医药治疗肝癌提供新靶点。

【参考文献】

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［3］计勇,何晓顺,马毅,等. pokemon在肝细胞癌及癌旁、癌以远组织、肝硬化组织及正常肝组织中的表达［j］. 中华实验外科杂志,2007,24(2)：187．

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［8］计勇,何晓顺,马毅,等. pokemon在肝细胞癌、肝细胞癌远处转移、肝硬化和健康人群外周血中的表达及意义［j］. 中华实验外科杂志,2007,24(11)：1320．