校庆校友发言稿范文

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篇1

关键词：烟青虫；初孵幼虫；快速收集法

中图分类号：S436.412.2+1 文献标识码：A 文章编号：1001-3547（2016）20-0083-04

烟青虫（Helicoverpa assulta）又称烟草夜蛾，属鳞翅目（Lepidoptera）夜蛾科。烟青虫在田间主要为害烟草和辣椒，为害辣椒时，以幼虫蛀食辣椒的叶片和花果，常年蛀果率为20%～30%，严重为害时，蛀果率高达30%～50%[1，2]，经济损失严重；幼虫可钻入果内，啃食果皮、胎座，并在果内缀丝，排留大量粪便，致使果实不能食用，降低商品价值。

为了降低田间烟青虫为害，为高效防控烟青虫提供科学基础和理论指导，实验室内需要开展针对烟青虫生物学和生态学研究、对化学药剂的敏感度及其变异测定及毒理学参数等试验，因此需要室内继代饲养和繁育烟青虫试虫种群，而抗药性研究中还需要长期保存敏感和抗性或亚致死处理种群

等[3]。目前采用人工饲料进行烟青虫室内大规模繁育和继代保种技术已经成功实现，并进一步改进[4]，节约了大量的人力和物力。但是在烟青虫的种群扩繁过程中，其成虫通常在纱布上产卵，当卵孵化后，需要用细小毛笔将初孵幼虫非常小心地从纱布上挑取到人工饲料上饲养，这个过程中存在较多的问题，一是人工挑虫要特别小心，且耗时较长；二是即使非常小心，用毛笔挑取也很容易伤害或者致死初孵幼虫，降低后代饲养数量；三是如果卵在夜晚孵化，则无法及时挑取初孵幼虫到人工饲料上，而幼虫孵化后6 h内接触不到饲料即饿死。因此，如何自动无伤害地收集初孵幼虫一直是烟青虫乃至其他鳞翅目昆虫种群扩繁的制约因子之一。

在实验室饲养烟青虫时，常将装有卵布的塑料袋放置在实验台上，发现孵化后的幼虫清晨全部集聚在朝向窗户一侧，由此推测烟青虫初孵幼虫的趋光性较强。基于此，拟设置黑暗的卵孵化环境，正常环境的装有人工饲料的塑料盒作为幼虫收集盒，二者之间采用玻璃管相通，从收集时间、幼虫存活率和烟青虫蛹质量3个指标研究比较了该方法与常规人工收集方法的不同、优势以及是否适合用于烟青虫初孵化幼虫的收集。

1 材料与方法

1.1 试虫及人工饲料制作

试验用虫为采集自烟草田的烟青虫幼虫，室内在人工饲料上饲养超过3代。人工饲料的配方参照董钧锋等[4]的方法，具体成分及用量见表1。

其中，大豆粉在用前经高压灭菌锅灭菌处理30 min，蒸熟后自然晾干，用粉碎机再次粉碎备用。麦胚粉制作方法：将小麦粒洗干净，铺于玻璃槽内薄薄一层，每隔12 h洒水1次，保持小麦潮湿，当小麦根长超过种子长度时，再次洗净后放入电热恒温鼓风干燥箱中60℃干燥，最后加工成粉末备用。

人工饲料的具体制作方法如下：按表1所示份量，分别称取各组分。先将琼脂粉倒入不锈钢锅中，然后加入500 mL蒸馏水并在电磁炉上加热，同时不断搅拌，以确保琼脂粉充分溶解。琼脂粉煮沸3次后倒入九阳料理机中，加入称量过的麦胚粉、辣椒粉、麦麸、酵母粉、熟大豆粉及亚油酸，搅拌1 min。搅拌均匀后放在超净工作台内吹风辅助降温，待温度降到50～60℃时，加入山梨酸、尼泊金、抗坏血酸等再次搅拌1 min，最后将搅匀的饲料倒入直径

18 cm的灭菌玻璃培养皿中，置于超净工作台中冷却凝固，然后放入4℃冰箱中备用。

1.2 烟青虫饲养过程

试虫在养虫室内不接触药剂的情况下一直饲养在人工饲料上。养虫室室内温度（27±2）°C，湿度（60±10）%，光暗周期比为L/D=16 h/8 h。具体饲养过程如下。

①带卵纱布消毒 将带卵纱布放入500 mL烧杯中，加入4%甲醛溶液浸泡10～12 min，清水漂洗2～3次，置于超净工作台内微风吹干表面水分后放入保鲜袋中，然后放入光照恒温培养箱中等待孵化。

②幼虫饲养 初孵幼虫群体饲养，卵孵化4 h内，用软毛笔将初孵幼虫小心接入灭菌的装有足够人工饲料的指形管（平底）内，每管接5头。用灭菌的脱脂棉塞住指形管，幼虫进入3龄后分管饲养，直至幼虫在试管中化蛹，饲料视情况更换。

③蛹 老熟幼虫化蛹后第3 天，将健康蛹从指形管内取出来，并将雌、雄蛹分别放入标记过的塑料培养皿中（直径90 mm）。随后，放进500 mL烧杯中，加入4%甲醛溶液浸泡10～12 min，用自来水冲洗并晾干后，按照雌雄分别放入羽化笼内。

④成虫 成虫羽化后转移到笼中，并放入浸蘸10%蜂蜜水的脱脂棉供其补充营养。成虫开始在纱布上产卵后，每天更换卵布。

1.3 烟青虫初孵幼虫收集

①常规人工收集法 带卵纱布上出现初孵幼虫后，在卵孵化4 h内，用软毛笔将初孵幼虫人工接入养虫盒内，养虫盒内加入足够的人工饲料，每盒接100头进行群体饲养。该部分由2位测试者（一位是在实验室工作超过2 a的熟练工人，另一位是在实验室工作不超过半年的非熟练工人）分别采用毛笔人工收集幼虫，再转移到人工饲料上。每个测试处理重复3次。

②快速收集法 用1个四周包上黑布的黑色塑料盒子作孵化盒，将消毒后的带卵纱布放入孵化盒中；设置第二个装有人工饲料的幼虫收集盒，孵化盒和幼虫收集盒分别在接近底部的侧面部位开1个圆孔，2个盒子之间用一根棕色玻璃管连接，初孵幼虫白天基于趋光性从玻璃管中间自行爬到幼虫收集盒的人工饲料上去取食；夜间在幼虫收集盒旁边放置一盏打开的LED台灯，借助灯光诱导夜间孵化幼虫爬行到幼虫收集盒中，每个收集盒中初孵幼虫数量达到100头左右时及时更换另外一个新的幼虫收集盒。该处理重复3次。

③幼虫存活率和蛹重 将2种方法收集的烟青虫初孵幼虫分别饲养在人工饲料上，饲养8 d后（3龄幼虫阶段），计算存活率，存活率（%）=（初孵幼虫数量-生长至3龄幼虫的数量）/初孵幼虫数量×100%。将存活幼虫转至指形管内单头饲养至化蛹，化蛹3 d后称取蛹质量；每个处理测定雌、雄蛹质量各20头，设3次重复。

1.4 数据处理

用Sigmaplot 12.0作图、SPSS 19.0软件分析差异显著性（p

2 结果与分析

2.1 不同收集方法耗费时间比较

3种处理耗时差异很大。非熟练工人采用毛笔挑取100头初孵幼虫到饲料上需52.67 min，熟练工人挑取100头初孵幼虫到饲料上需31.33 min，而采用快速收集法更换幼虫收集盒（约计100头/盒）1次，100头幼虫从孵化盒中爬行到幼虫收集盒中耗时13.43 min（图1）。结果表明，对于收集同样数量的幼虫而言，快速收集法将幼虫转移到人工饲料上所需时间显著少于人工挑虫法，可节约大量人力。

2.2 不同收集方法的幼虫存活率比较

由表2可以看出，熟练工人挑虫的存活率平均为83.67%，个别超过85%，非熟练工人挑虫成活率低于50%，平均为46.00%，二者之间差异显著；而人工快速收集方法的初孵幼虫存活率达96.33%，远高于非熟练人工挑虫处理的，但与熟练工人挑虫的存活率之间差异不显著，说明该快速收集法能大大提高初孵幼虫的存活率。

2.3 不同收集方法的蛹质量比较

由表3可以看出，快速收集法的雌雄蛹质量均略高于人工挑虫处理，但不同收集方法的雌性蛹质量之间、雄性蛹质量之间均无显著差异。从标准差数据来看，快速收集法不同蛹质量之间的差异较小，而人工挑虫法蛹质量之间差异较大，说明快速收集法得到的烟青虫蛹更加整齐。

3 小结与讨论

烟青虫成虫趋光性强，很早就有报道[5]，田间也常利用该特点采用频振式杀虫灯有效诱杀烟青虫成虫，降低成虫落卵率，抑制烟青虫的繁殖[6，7]；而关于幼虫趋光性的报道较少，张汉鹄[8]报道，大袋蛾（Clania variegata Snellen）幼虫具有喜光性，常在灌木、矮树等上聚集为害，但未明确不同龄期幼虫间喜光性是否存在差异；另有研究发现，文山松毛虫（Dendrolimus punctatus wenshanensis）幼虫的趋光性强，但不同龄期幼虫对光的敏感度差异及光源强度的高低尚需要进一步研究[9]。

基于前期实验室内的多次观察，确定烟青虫初孵幼虫具有朝向光源的特性，由此设计光源通道，让初孵幼虫自行爬向具有人工饲料的幼虫饲养盒内，大大降低了人工挑虫耗费的大量时间和精力，同时减少了人工操作带来的不可避免的伤害。同时，由该方法得到的初孵幼虫存活率高，后期发育的蛹整齐度高；另外，该法可实现初孵幼虫的优胜劣汰，淘汰不能成功爬行至收集盒内的弱小幼虫；而夜间开启的LED灯还可诱导夜间孵化的幼虫及时爬行到人工饲料上取食，保障了实验种群的大量优质扩繁。该方法可以扩展到其他具有相同特性的鳞翅目昆虫的室内种群饲养及扩繁工作中。

本研究表明，烟青虫低龄幼虫的趋光性强，且证实了初孵幼虫高效快速收集方法的可行性。田间观察也发现，1～2龄烟青虫幼虫通常在叶片和花果向阳的一侧取食，3龄后为害辣椒时则多蛀食果实。生产上可利用此特点，抓住3龄幼虫前这一关键时期，喷施无内吸性的病毒制剂、白僵菌和微孢子虫等生防制剂，或者释放棉铃虫齿唇姬蜂（Campoletis chlorideae Uchida）[10]、中红侧沟茧蜂（Microplitis mediator Halidag）等防治烟青虫，效果良好。

参考文献

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篇2

【关键词】抗氧化剂；氧自由基；消化性溃疡；治愈率；复发率；临床研究

消化性溃疡（PU）是人类的常见病与多发病[1]，也是一种具有反复发作倾向的慢性疾病。其发病机制迄今尚未阐明。尽管H2受体阻滞剂（H2RB）、质子泵抑制剂（PPI）、抗幽门螺旋杆菌（HP）的应用使PU的治疗取得很大的进步，但停药后复发、难以根治溃疡仍是临床面临的重大问题[2]。氧自由基（OFR）近年来在诸多疾病的病理生理过程中的重要作用日渐被发现，其在消化系统疾病中的作用也得到了进一步的揭示[3]。本次研究通过 PPI联合抗氧化剂VitE治疗消化性溃疡，通过在临床获得的数据资料研究、分析、归纳，总结出最佳的治疗方案，为通过清除氧自由基降低消化性溃疡高复发率这一临床难题提供参考。现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2009年10月-2012年12月我院收治的消化性溃疡患者75例，所有患者均有不同程度的反酸、嗳气、中上腹痛/胀等消化道症状，行电子胃镜（富士EG250-WR5）、14C呼气试验（采用海得威HUBT-20A幽门螺旋杆菌测试仪）及活性组织检查确诊为Hp阳性良性消化性溃疡，实验前1周内未行抗溃疡治疗，经实验室、B超、CT等检查排除肝、胆、胰等器质性病变及其他全身性疾病。其中男42例，女33例；年龄18-75岁，平均（43.6±5.1）岁。十二指肠球部溃疡45例，胃溃疡30例。按畸田隆夫的溃疡分期法（A、H、S）均为A期溃疡，其中A1期31例，A2期44例。

1.2分组方法 将75例患者按治疗方法的不同平均分为2组，治疗组，n=35：采用PPI+抗氧化剂治疗；对照组，n=40：仅予PPI治疗。2组患者在一般资料上具有可比性（P>0.05）。

1.3 治疗方法 所有患者均予胃粘膜保护剂（果胶鉍/丙谷胺）和常规对症治疗（如腹胀加用胃肠动力药）。抗Hp治疗：阿莫西林胶囊（珠海联邦制药股份有限公司） 1.0g bid+克拉霉素（山东新华制药） 0.5g bid，均为餐后服用。治疗组：奥美拉唑肠溶胶囊（河南羚锐制药股份有限公司）20mg ，bid；维生素E软胶囊（广东三才石歧制药有限公司）100 mg，tid。对照组：奥美拉唑肠溶胶囊（河南羚锐制药股份有限公司）20mg，bid。2组患者均规范用药8-12周。治疗期间嘱患者忌辛、辣、酸、冷食物，按时休息，禁服其他药物。

1.4 疗效观察 根据治疗前后的临床症状变化和电子胃镜检查结果评定疗效[6-7]。1）治愈：临床症状（上腹痛、反酸、呃逆）消失，胃镜复查示溃疡完全消失或仅留瘢痕；2）有效：临床症状消失或明显缓解，胃镜复查示溃疡面积缩小≥50%；3）无效：临床症状无明显改善或加重，胃镜复查示溃疡面积缩小

1.5统计学处理 应用SPSS 13.0统计软件处理，计量资料以（ ±s）表示，结果采用t检验，计数资料采用X2检验，以P

2结果

2.1 2组患者症状缓解时间、溃疡愈合时间比较 治疗组的症状缓解时间、溃疡愈合时间均显著短于对照组，差异均有统计学意义（P均

表1 2组患者症状缓解时间、溃疡愈合时间比较（d， ±s）

组别 N 症状缓解时间 溃疡愈合时间

治疗组 35 11.92±5.41* 41. 83±11.01*

对照组 40 24.17±6.95 69.46±20.34

t 12.351 15.847

P 0.026 0.018

注：*与对照组相比差异均有统计学意义（P均

2.2 2组患者临床疗效比较 治疗组的疗效显著优于对照组（P

表2 2组患者临床疗效比较[n（%）]

组别 N 治愈 有效 无效 总有效率

治疗组 35 27（77.14） 5（17.54） 2（5.71） 94.29%*

对照组 40 22（55. 00） 8（20.00） 10（25.00） 75.00%

X2 8.218

P 0.352

注：*与对照组相比差异有统计学意义（P

2.3 2组患者复发率比较 所有患者均随访1年，其中，治疗组复发5例（14.29%），对照组复发15例（37.50%）。两组复发率差异有显著性（P

3 讨论

大量的研究和实验已揭示：OFR的产生过多与溃疡的复发有密切的关系。Naito et al[8]通过研究证实给予OFR清除剂治疗能提高溃疡愈合质量。抗氧化剂治疗消化性溃疡，在文献中有报道，但联合抗氧化剂治疗消化性溃疡，探讨症状缓解时间、溃疡愈合时间、溃疡复发率、疗效与经济关系的综合研究在国内外罕有报道。尤其是溃疡复发这一临床难题尚未得到解决。通过PPI联合抗氧化剂VitE治疗消化性溃疡，在随机病例中开展对照临床研究，探讨症状缓解时间、溃疡愈合时间、尤其是消化性溃疡复发率问题，具有新颖性、可行性和实用性。

VitE是一种良好的天然脂溶性维生素，在体内可保护易被氧化的物质，减少过氧化脂质的生成。新近有研究表明[9]，溃疡病患者胃粘膜抵抗力差与脂肪过氧化作用紊乱有关。VitE可起调节脂肪氧化、清除氧化自由基的作用，而保护细胞不受氧化剂的损害。同时，大量的VitE又可促进毛细血管和小血管增生[10]，并改善周围血液循环，增加组织中氧的供应，从而给溃疡面愈合创造良好的营养条件。此外，尚可抑制Hp的生长，使溃疡病愈合后的复发率降低。本次研究中，治疗组的症状缓解时间、溃疡愈合时间及治疗有效率均显著优于对照组，差异均有统计学意义（P均

除了VitE之外，目前临床应用的许多药物都有抗氧化作用，如VitC、心血康、别嘌醇等。本次研究仅针对联合VitE治疗消化性溃疡的效果进行研究，而其他抗氧化剂在清除氧自由基提高消化性溃疡治愈率及降低其复发率的临床价值是今后需要进一步研究探讨的课题。此外，抗氧化剂降低消化性溃疡的远期（3年、5年）复发率也是值得研究者深入思考的问题。

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