教练合同范文

导语：如何才能写好一篇教练合同，这就需要搜集整理更多的资料和文献，欢迎阅读由公务员之家整理的十篇范文，供你借鉴。

篇1

乙方(受聘人) ： (以下简称乙方)

甲乙双方根据国家和本市有关法规、规定，按照自愿、平等、协商一致的原则，签订本合同。

第一条合同期限

1.合同有效期：

(1)自 ，合同期为 年。合同期满聘用关系自然终止。

2.聘用合同期满前一个月，经双方协商同意，可以续订聘用合同。

第二条 工作岗位

1.乙方受聘为兼职 ,全面负责教练部业务及管理工作。

2.根据工作需要及乙方的业务、工作能力和表现，甲方有权调整乙方的工作岗位。

第三条工作条件和劳动保护

1. 甲方实行每周工作 时，每周6天的工作制度。

2. 甲方为乙方提供符合国家规定的安全卫生的工作环境，保证乙方的人身安全及人体不受危害的环境条件下工作。

3. 乙方一旦受聘,为了便于宣传推广包装,甲方有权免费使用乙方图片及视频作为永久宣传使用。

第四条工作报酬

1. 经甲乙双方协商，乙方的工作岗位是兼职健身教练，每月工资参照绩效制度，每月发工资时间为次月的15号。

第五条工作纪律、奖励和惩处

1.乙方应遵守国家的法律、法规。

2. 乙方应遵守甲方规定的各项规章制度和劳动纪律，自觉服从甲方的管理、教育。

3. 乙方如违反甲方的规章制度、劳动纪律，甲方按市府和单位的有关规定给予处罚。 第六条聘用合同的变更、终止和解除

1.聘用合同依法签订后，合同双方必须全面履行合同规定的义务，任何一方不得擅自变更合同。确需变更时，双方应协商一致，并按原签订程序变更合同。双方未达成一致意见的，原合同继续有效。

2.聘用合同期满或者双方约定的合同终止条件出现时，聘用合同即自行终止。在聘用合同期满一个月前，经双方协商同意，可以续订聘用合同。

3.甲方单位被撤消，聘用合同自行终止。

4.经聘用合同双方当事人协商一致，聘用合同可以解除。

5.有下列情形之一的，甲方可以解除聘用合同，但应提前十天以书面形式通知受聘人。

A.乙方患病或非因工负伤医疗期满后，不能从事原工作，也不愿从事甲方另行安排适当工作的。

B.乙方不能胜任该工作岗位,连续两个月不能完成私教绩效任务的。

C. 乙方不履行聘用合同的。

6.有下列情形之一的，甲方不能终止或解除聘用合同

A.乙方患病或负伤在规定的医疗期内的;

B.女职工在孕期、产期、哺乳期内的(符合《实施意见》第三条第5款规定者除外);

C.法律、法规规定的其他情形。

7. 乙方要求解除聘用合同，应当提前三十天以书面形式通知甲方。并且乙方负责协助甲方招聘相应人员代替乙方工作方可执行。

第七条违反和解除聘用合同的经济补偿

1.乙方不能胜任工作，经过调整工作岗位仍不能胜任工作，由甲方解除聘用合同的，甲方扣除相当于半个月的工资作为乙方给甲方的经济补偿金。

2.乙方需遵守竞业规则，若乙方在职期间或离职后去同行业其他公司，乙方不得以任何原因引导教练员及私教客户去他方，否则乙方须赔偿五万元作为甲方的经济损失补偿，同时，甲方保留追究一切经济损失的权利。

篇2

一、根据学生的年龄特点采取合适的发声训练

合唱队在发声练习时要求要以姿势、口形、呼吸、发声等方面进行严格的训练，通过训练达到掌握一定的技能技巧，并运用到歌曲演唱中去。但每次发声练习的时间不能过长，一般在10―15分钟左右。

姿势――不论坐和站，头部要保持正直，脖颈自然放松，不可伸长，以免影响喉部器官的正常运用。上身挺直，有精神，双肩自然放松，稍向后但不耸肩，使胸腔不受拘束和压力。腿不弯曲，不跷不歪。

口形――不能过扁过宽，而要象竖着的鸭蛋，下颚要完全放松，不使运动过度而妨碍发声。嘴唇要灵活有弹性和舌头配合演唱，比说话时的动作稍稍夸张一些。

呼吸――呼吸是唱歌发声的基础动力，歌者应运用正确的呼吸动作并进行呼吸练习，由浅入深逐渐引导大家掌握好强、弱、快、慢各种气息的运用。歌唱的呼吸要深一些，气息控制在下肋周围，形成歌唱发声的支持点。要经常纠正呼吸紧张，吸气过多，发出声响，耸肩颈粗等不良习惯。

发声――发声练习要以中声区为主。低声区的训练比较容易见效，因为练低音的呼气压力较小，声带很自然地放松，用“mo”的母音下行练习，再用“ha”、“ho”母音从弱到强找准位置扩大共鸣。在掌握了一定的方法之后，再逐步向高音扩展。高声区的训练难度较大，因为声音愈高呼气压力愈大，容易造成声带和喉头紧张，此时必须打开喉咙，抬高软腭，用半音向上的方法，和“lu、lo、lü”的母音，轻声高位地寻找头腔共鸣位置，不断巩固、扩大音量。声音要求圆润明亮，位置集中稍靠里一点，即高位置发声练唱。发声练习要从柔和的富有弹性的音阶练习开始，经常注意克服喊叫、喉音等坏习惯。

二、要有针对性地进行视唱练耳，难度要适宜

视唱练耳是解决识谱、音准、节拍、节拍感的一种练习。它要求由易到难，循序渐进。先从简单的音阶练习到各种节拍的练习曲，包括音程和声的练习，还可选择一些声部合唱练习，根据合唱队的水平自选自编，长期系统地练习。在合唱训练中，练习曲的难易程度在很大程度上决定了学生练习时的情绪，在经过学生练到三遍能基本掌握时，学生学得比较开心，兴趣地高了，因为他们体会到了收获的喜悦；当一首曲子唱上四五遍还未能掌握时，他们就开始显得浮躁、不耐烦，产生了厌烦的情绪；反过来，太简单一唱就会的学生会感到乏味。因此，在视唱训练中，练习曲的难易程度一定要适当。

三、二声部合唱的练习要有针对性

1．加强音准训练。统一和谐是合唱对声音的要求，所以合唱对音准的要求非常高。童声合唱的音准训练应由浅入深地进行，先练习音阶、音程、旋律。通过训练使学生的音准能力得到提高，为二声部训练打下扎实基础。快速时要防止音趋高，慢速时注意音偏低；强音要防止音趋高，轻声注意音偏低；遇到难唱的音程，必须重点突破，把好音准关。

2．辅助训练，在教学中二声部合唱可以先由老师担任第二声部，与第一声部的学生合作。第二声部的学生先轻唱，再慢慢放开声音跟老师唱，渐渐地让两声部合起来。

四、培养学生对合唱的兴趣，使学生在歌唱时始终保持专注投入的精神状态

为了更好地表现合唱艺术作品，除了要对学生加强发声、视唱、练耳等基础性的训练之外，还应要求学生在歌唱时，始终保持专注投入的精神状态。

1．教师要对学生倾注自己满腔的热情和真挚的爱，使学生乐意与教师进行交往，并在教师那里找到温暖和鼓舞。

2．合理地安排各种演唱形式，给学生一些实践的机会，进行一些观摩和学习活动。如观看专业童声合唱团的录像、光盘或对录音进行欣赏学习等，开阔学生的视野，提高他们的欣赏水平。从而使学生始终保持对合唱浓厚的兴趣和旺盛的活力。

篇3

2021年半年来，我执法大队治理车辆超限超载工作在县委、县政府、县交通局的正确领导下，认真贯彻落实《交通运输部办公厅公安部办公厅关于印发规范公路治超执法专项整治行动工作方案的通知（交办公路〔2017〕130号）》以及《省交通运输厅、省公安厅关于印发治理车辆超限超载联合执法常态化制度化工作方案的通知》（黔交政法〔2018〕2号），积极推进部门联动执法，有力推动治超各项工作持续深入开展，有效打击了车辆超限超载违法行为。现将我执法大队治超有关工作情况报告如下：

一、主要做法及成效

（一）落实工作责任，制定方案。

2020年9月，我局和县公安局结合实际，研究制定《黎平县治理车辆超限超载联合执法常态化制度工作方案》，明确责任主体职责,强化交通执法工作的职能，及时与货运源头企业签订目标责任书，将源头治超任务分解落实到位。并组织执法人员深入货运源头企业，强化货运源头监管，组织执法人员深入重点建设项目工地和沙石场开展货运源头治超监管，与企业签订责任书，使治超工作顺利开展。

（二）加大宣传力度，营造社会氛围。

通过悬挂宣传标语、派发宣传单、召开座谈会等多种形式开展宣传活动，在全县主要治超路段和源头企业共悬挂治超横幅20多条，向广大车主派发宣传单1000多份，利用县新闻中心在有线电视网络宣传治超工作相关政策等方式，把宣传工作贯穿治超工作的全过程，形成正面引导，做到群众理解、社会支持和车主配合，营造了良好的治超氛围。

（三）强化源头管理，全面推进治超工作。

1、各方联动，推进源头治理。我大队认真落实源头单位巡查制度，经常深入货运、物流、维修企业及大型厂矿企业开展日常巡查，分别与15家货运源头单位签订了治超责任书，组织执法人员到货运企业开展源头治超宣传，加强对道路货物运输源头的监督管理。组织人员深入到重点建设项目工地和沙石场开展货运源头治超监管，明确路政执法中队管辖区域及责任，加强了对企业的巡查监管，对装载量较大的货源单位进行了排查摸底，为货源单位公示工作打好基础。同时我局与公安局各负其责，各司其职，明确各自分工，共同做好治超工作。

2.突出工作重点，加大执法力度。我局加强动静态监控，坚持以流动治超为依托，重点加大对G356线、S242线等地方的治超力度，特别是三什江以及矮枧等重要路段的打击力度。我大队通过加强部门联动，以流动巡查和举报相结合的执法方式打击超限超载车辆，逐步形成全县监控治理网络，同时严格执法处罚，认真执行省交通运输厅新颁发的超限超载认定标准进行处罚。半年来共出动治超执法人员64人次，出动执法车辆8辆，检查车辆163辆次，卸载42吨。未发“百吨王”货车。

二、下步工作措施

（一）继续强化工作领导。按照“政府主导、部门联动、齐抓共管、综合治理”的总体要求，贯彻落实省、市、县决策部署，把治超工作责任落实到有关部门，加强治超工作领导，把治超工作列入年度计划，作为一项重要工作任务来抓，明确职责，制定方案，实行目标责任制和责任追究制度，坚持综合治理，推进治超工作有序开展。

（二）进一步落实联合执法机制。贯彻落实全国治超整治专项行动的新规定，加强交通运输执法部门与公安交通管理部门协调沟通，相互支持配合，制定细化执勤计划，合理调配执法力量，做好相关的执法衔接工作，按照各自职责分工，落实工作流程的每个环节，做到紧密协作。

（三）进一步强化路面治理力度。坚持路面执法与源头监管并重的治超方针，交通、公安等部门积极配合，采取部门联动与区域联合相结合的方式，加强对主要干线、危桥及其他车辆超限超载严重、群众投诉多的地点和路段。着重加强对车货总重超过49吨以上的违法超限超载车辆的查处，保持严管态势。

篇4

随着现代生活节奏的加快，父母们开始变得忙碌了，特别是农村孩子的父母们，为了改善生活条件，背井离乡，外出务工挣钱，像我们2014级中班，就有80%的幼儿家长外出打工，留守在家的儿童就由爷爷奶奶或是外公外婆照看了。

由于爷奶辈所具有的育儿观念陈旧，幼儿的生活卫生习惯养成较差，农村的爷爷奶奶们除了照看接送孙子外，为了生计，还要忙着田间地头的农活，孩子无人接送，有的是一个村的孩子的家长轮流接送，或者托邻居接送，家长来幼儿园的次数少，与老师的联系就少了，给老师的家园联系工作带来一定的困难。

记得开学的第一次家长会，家长们像逛自由市场一样，有的早早的来了，有的中途来，还有的家长散会了才来，更离谱的是还有一位家长在家长会后三天才来问：“老师，听说要开家长会？”

不与老师联系的家长是少数的。对于这些家长，我们通常采用电话通知联系，要求家长再忙也要到幼儿园参加活动，如果家长没有电话，就用小纸条的形式通知，使得家长的到会率尽可能的提高。当然，为了更好的吸引家长参与幼儿园教育，最大限度的调动家长的积极性，更新家长的育儿观念，指导家长科学育儿，使得家庭、幼儿园、社区教育形成合力，我在家园合作中进行了以下几个方面的努力。

召开班级家长会

每期在开学和期末各召开一次班级家长会。

开学时的家长会主要向家长介绍本期的保教工作计划和目标，建立家长委员会，听取家长对幼儿教育工作的要求，同时向家长宣传科学育儿知识，讲解《3-6岁幼儿学习与发展指南》，推进提出课题要求和目标，要求家长在卫生、安全、保健方面配合幼儿园教育孩子。

期末的家长会则是向家长回报本期工作情况，让幼儿展示本期所学知识和本领；评选表彰好家长；听取家长的呼声和意见，同时也宣传科学育儿知识和安全保健常识。

举办家长学校讲座

农村家长，特别是爷爷奶奶们受的教育少，他们大多不识字，吃了不识字的苦头，他们就想自己的孙子来上幼儿园了，要多认几个字，早点会做几道算术题。他们疼爱孙子，但往往是方法欠妥，有的溺爱过头，对孙子的要求百依百顺；有的信奉“黄棍下出好人”，动辄拳脚棍棒相加，对孩子的教育方式简单，方法粗暴。通过老师有目的、有计划的宣传与介绍，帮助家长树立正确的家教观念，同时也向家长进行保教知识宣传，提高家长的教养质量，对切实保护幼儿生命，维护幼儿健康起到了良好的退进作用。三、精心创设家园联系栏。

我根据本班的具体情况和学期教学教育内容，在家园栏中创设有“家教快讯”、“故事车厢”、“周日计划”、“主题活动网络图”“月计划”、“小喇叭”和“夸一夸”等栏目，可以让家长及时了解幼儿园的教育内容和保教方法，使得家园教育取得同步。如“周日计划”了解本周的教育目标和每天的保教内容，月计划让家长对每月的工作有所了解，“主题活动网络图”让家长参与主题进程。“小喇叭”可以发动家长收集主题活动所需材料。通过小喇叭的宣传发动，有很多家长积极参与幼儿园组织的活动，支持幼儿园的保教工作。我班邓鑫小朋友的外婆心灵手巧，她结合本期主题活动“伞的世界”给我班小朋友制作了几把精美的纸伞，把教室装扮得十分漂亮，其他的家长也做了很多玩具到幼儿园供小朋友玩耍，极大的丰富了孩子们的活动材料，也激发了其他家长的参与热情。

针对个别幼儿，及时进行家访

在发现有不良行为习惯的幼儿，老师就及时家访，与家长交换意见、看法，达成教育共识，及时矫正幼儿的缺点与错误，让其根正苗红。有一段时间，我班的刘翼翔小朋友总爱打人，放学路上欺侮其他小孩，还有一次把粪便涂到了胡汉小朋友的衣裤上，胡汉小朋友的家长很气愤，来找老师评理。我及时进行家访，与刘翼翔小朋友的家长交谈分析原因，同时对胡汉的家长做解释工作，是孩子淘气瞎玩。最后家长与老师共同对刘翼翔指出“这样做是不对的，以后绝对不可以了”，要求他改正错误。经过家长与老师的共同努力，刘翼翔小朋友改正了错误，不再攻击其他小朋友了。

电话沟通联系

现代通讯的发达为老师与家长沟通搭起了方便的桥梁。在每学期开学，认真的登记好每一位幼儿家长的电话号码，遇到有孩子缺席了、生病了，就可以及时的打电话向家长了解情况，如果孩子在幼儿园生病了，也能及时的通知到家长。一次，我班的李雄林小朋友没有入园，我就翻出电话号码本，向家长打电话询问，结果家长说“孩子一早就出门上幼儿园来了”。我说：“幼儿园没有孩子，一定在路上玩了。”让家长去找。家长及时发现了，把孩子找到了。我班上有小朋友生病了，老师通过电话询问孩子的病情，并告诉幼儿，说“老师和小朋友都很想你”。小朋友病好了特别喜欢上幼儿园了。

QQ空间沟通联系

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【关键词】高校；合唱；声音统一

合唱是高等院校中一项重要的活动，很多校园晚会及其他活动中都会安排合唱节目。但是合唱表演的参加者往往来自不同的院系，其中绝大多数同学都并非音乐专业出身，甚至很多人都没有系统学习过音乐知识。因而如何保证合唱中的声音统一性就成为了一个教学和表演中的难点。以下我们对此问题加以讨论，希望能够对相关的教学和演出实践有所帮助。

一、高校合唱表演对声音的要求及其难点

合唱是多声部音乐的一个品种，其表演的基本形式是群体歌唱。这种声乐表演形式所追求的是差异性和一致性的有机统一。一方面，它要求参加的成员将各种不同的声音组合成一个有机的整体；另一方面，这个整体又并不是由完全一样的声音构成的，不同成员声音的差异依然存在。从这个角度来说，合唱这种艺术形式带有一定的辩证性。但这种差异性是服从于一致性的。首先，合唱声音中不应出现基础性的问题，音准、节奏必须准确无误，各个不同声部的声音可以被清晰地分辨出来；其次，参加者不同的音色应凝成一个有机的统一体，圆润饱满，而不显得突兀。进一步来说，则是对声音的层次感和对比性有要求。不同的声部应该层次分明，不同的音色、力度、速度之间形成对比，和声部分应充盈、坚实，对旋律线条起到有力的支撑作用。但这样的表演要求在高校的合唱演出实践中却并不容易达到。由于参加演出者绝大多数都并非音乐专业出身，甚至缺乏一定的音乐训练，因而很多同学在基本的音准、节奏上都存在一些问题，更不要说追求音乐表现力了。在实际演出中，我们经常能够遇见声部混乱、音高不一致、节奏不稳的情况。简单地说，合唱中的声音统一对高校合唱演出来说是一个必须正视的重要问题。这就要求我们在教学与排练中有针对性地进行训练，从而弥补这一缺陷。

二、高校合唱中声音统一训练的具体方法

（一）气息训练

合唱歌曲中经常会出现一些比较长的乐句，有时因为表现力的需要，还要在同一个乐句中变换节奏的快慢和力度的强弱。在这类乐句的表演中，演唱者应保证自己气息的平稳，不能因为换气影响歌曲的表演。这就对表演者控制气息的能力提出了一定的要求。对于非音乐专业而且又没接受过相关的专门训练的同学来说，这样的要求并不容易达到。因而我们有必要在事前的教学、排练中对此进行专门的训练。相关的训练方法很多。比如可以让学生想象自己的面前有一朵花，然后模拟出自己在吸气闻花的香气的状态，以此来让学生熟悉声乐表演中的吸气方式。在呼吸的节奏上，可以让学生伴随着节拍进行吸气——呼气的练习，要保证吸气的量和呼气的量相等。节拍可以先从简单的拍子如二二拍、二三拍等开始。在学生能够伴随着特定的节奏进行有规律的呼吸后，再逐步提升拍子的复杂程度，如使用四四拍等。同时，在训练的初期，可以让学生双手叉腰作为辅助。在学生能够按照特定的节奏进行吸气——呼气之后，可以让他们增大吸气和呼气的量。再进一步，则可以让他们在呼气时放慢速度，做到速度慢、均匀、稳定。在具体的呼气方式上，让学生微微张开嘴，用舌尖抵住上排的牙齿，发出“S”的声音。通过这样的练习，可以让学生掌握声乐表演中基本的呼吸技巧，从而在实际表演的过程中不会因为换气的问题而影响演出的效果。另外，需要注意的是，上面所说的吸气——呼气练习一定要在特定节拍的配合下进行。目前很多高校的合唱训练中都忽视了这一点，这是不正确的。因为参加合唱表演的学生绝大多数都没有接受过专业的音乐训练，所以他们对节奏的感知能力比较弱。或者说，他们对节奏的认知带有很强的主观性，不同的同学所理解的节拍是不同的。如果只是单纯进行吸气——呼气的练习而没有和节拍结合起来，那么在排练及实际演出的时候，就很容易出现大家呼吸的节奏不一致，从而影响歌曲的节奏的情况。

（二）音准及节奏训练

不论是声乐还是器乐，音准及节奏都是音乐表演中的核心内容。离开了音准、节奏，也就没有音乐可言了。我们说音乐是一门时间的艺术，而在时间中流动并带给听众艺术享受的，就正是音准和节奏。由于参加高校合唱表演的同学大多没有接受过专业的音乐训练，所以他们对音准、节奏的认知能力并不强。事实上，绝大多数同学都只是凭借自己的直觉来认知音准、节奏。有些同学可能相关的天赋比较高或是平时受到的影响多一些，感知能力就好一点；反之，则会差一点。因而，我们在进行合唱教学、排练时，一定要重视音准、节奏这样的基础性练习。音准方面，可以让学生分成几组，跟随钢琴演唱音阶。考虑到现实中合唱曲目的选择，这里演唱的音阶不需要很长。也就是说，并不要求学生具有多宽广的音域。特别是在高音和低音上，教师不必做出过高的要求。而应该把重点放在音准问题上。即学生跟随钢琴声唱出的音阶在音高上必须准确无误。节奏方面的训练也与此类似。在讲清楚了基本的节奏型之后，可以让学生分成若干组，分别跟随着教师的手势发出“啊”的音。在实际训练中，可以先从简单的拍子开始，循序渐进，由浅入深。考虑到合唱曲目的特点，一切比较复杂的节奏型，如混合拍子、散拍子都可以不做要求。这方面需要注意的是重音的问题。有些教师在进行节奏方面的训练时，往往只在意学生对不同节奏型的理解和掌握，而对节奏中的强弱问题重视不够。这是不正确的。缺乏强弱变化的节奏是不能够传达出艺术感染力的。因而，在指导学生进行节奏练习之初，教师就应该加强节奏型中强弱音的练习，如三拍子的“强——弱——弱”、四拍子的“强——弱——次强——弱”等。只有让学生在这方面养成了习惯，将强弱变化与节奏型结合在一起，他们才能在实际演唱的过程中自觉地将节拍中的强音和弱音表现出来。

（三）音量及音色训练

很多学生由于没有接受过相关的训练，而且也缺少登台演出的经验，所以在表演合唱时往往不能很好地控制自己的音量。而且学生自身的性格因素也会对此有所影响。如有些学生性格外向，乐于表现自己，就会在合唱时音量比较大；而有些学生性格比较腼腆，就会声音小一些。作为教师，应该在教学及排练的过程中对此进行很好的协调，让参加表演的同学们控制好自己的音量，以免过于突出，以至于影响整体的演出效果。音色方面的训练也很重要，同时这也是很多教师容易忽略的一点。从声学的角度来说，音色的不同与振动发声的物体的材质有关。由于每个人的天然条件不同，因而他们所展现出来的音色也必然各不相同。教师应该让学生对合唱这一艺术形式有明确的认识，知道合唱是一种群体性表演的艺术，个人的声音应服从于整体的需要，不能让自己的声音过于明显、突兀，以至于破坏整体的艺术效果。

（四）多声部训练

在合唱演出中，通常都会用多声部的结构，以此来提升音乐表演的层次感、立体感和艺术性。相比齐唱，这也是一个难点所在，因为很多同学并没有相关的演唱经验。这就需要教师在这方面进行特别的训练。首先，要让合唱的参加者对歌曲的结构和表演形式非常熟悉，让他们知道自己所要演唱的段落应该在什么时候开始，这样才不会出现衔接不当的情况。此外，每个演唱者也应牢记自己所属的声部，不要在表演时声音过高或过低，以至于影响整体的演出效果，而应该控制好音高、音量，这样才能很好地表现自己所在声部承担的歌曲内容。在具体的训练方式上，教师可以在钢琴上随机弹出将要演出的歌曲的某一片段，让学生来分辨这是属于哪一个声部的。这种方法可以很好地检验以及提升学生对歌曲的熟悉程度。此外，还可以让学生经常观摩多声部音乐的演出视频，以此来强化他们对这种音乐表演形式的认识。另外，需要特别说明的，就是在高音声部，一定要设置统一的标准。有些女生因为自身条件较好，音域较广，能唱出的最高音比其他人要高一些。这时一定要强化其音准观念，做到整个声部协调一致，不能在演出时出现声部中某几个人的声音特别高的情况。

三、结语

各个参加者的声音协调统一是合唱这一群体性音乐表演形式的内在要求。由于高校合唱中的很多参加者之前缺少相关的音乐训练，因而教师需要在这方面特别地加以注意。既要让每个同学都能够把自己的音乐才能发挥出来，又要维持整体艺术表现的和谐统一。

参考文献：

[1]毛为.普通高校合唱训练基本方法探究[J].当代音乐,2019,(08).

[2]王茜婷.合唱艺术形式的审美研究[D].湖南师范大学,2014.

[3]翟晓勇.统一性原则在合唱实践中的运用[J].交响•西安音乐学院学报,2005,(03).

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连线报道也可以称为电话连线采访报道，是以声音为主要传播载体。电话为媒介，由广播记者在新闻现场以口述或是互动对话的形式。把新闻信息通过直播间直接播报出去。作为与广播消息稿、录音报道并用的一种手段，以记者口语化的描述，勾勒出新闻事件的画面，把现场氛围呈现出来，使听众如临其境，具有现场感，增强了广播新闻的吸引力和感染力。

首先，“交通广播”连线报道，经验的总结。作为“交通广播”记者，在近几年的采访报道中，深刻体会到了，连线报道在制作程序上比录音报道更简便，表现形式比消息稿更加生动，所以成为当下广播新闻的重要表现样式。

1.“交通广播”连线报道要讲究策划。现场连线，虽然只是一种简单的现场采访形式。但是要做好这种连线。也需要我们前期有一个相对完整的策划。在实践中，每一次与对方的接触都是采访过程，做访谈、做录音采访要提前做好充分准备，同样，“交通广播”连线报道现场连线也需要我们策划。记者需要按照访谈的内容来做准备，经过现场了解从中进行筛选，找出最有现场连线价值的内容。再进行连线。

2.“交通广播”连线报道要注意发挥。在实践操作中，我们经常会遇到一些突况，尤其是“交通广播”连线报道做现场连线，有些事情是我们不可预知的，这时一个记者的现场发挥能力就显得尤为重要。“交通广播”连线报道每一次成功的现场连线，背后都是记者现场发挥能力的体现，现场发挥有时候要比准备的内容更丰富、更精彩。“交通广播”连线报道对突发新闻而言，抢占时间上的制高点非常重要。广播记者必须时刻牢记的就是连线意识，当记者到达一个突发现场时，在对事件进行采访、了解事件的来龙去脉后，就应该立即理清思路、组织语言，第一时间发回连线报道。

3.“交通广播”连线报道要有层次感、完整性。现场连线，它不是一个简单事实的陈述，需要我们对各种因素进行重新过滤，然后筛选出有一组有层次感，相对完整的内容。如：为了方便驾驶员对道路状况的了解。在城管监控指挥中心的大屏幕。每天记者通过十一次电话连线报道，针对哈尔滨市区各主要路段的交通通行状况，中山路、尚志大街等机动车密集的地方，现场通过连线报道，介绍交通流量与行车情况。把驾驶员最需要最关心的路面出行信息。“交通广播”连线报道第一时间更直观更可信的传播出去。使信息性新闻鲜活生动起来。也使得交通广播新闻更加富有层次感。

4.“交通广播”连线报道要注意沟通。不仅是与采访对象的沟通，包括采访前、采访中和采访后，而且还是与主持人的沟通。现在，做“交通广播”连线报道，现场连线我们也经常会发现一些沟通不畅的情况，这一来是主持人与记者默契程度不够。二来是沟通太少。主持人不知道现场情况，记者不知道主持人介绍情况。三来是配合失误，有些是很小的错误，却可能出现非常不好的效果。如：“交通广播”连线报道，采访前与采访对象的沟通，在连线报道前把要做连线报道将要提出的问题一一列出，消除采访对象的紧张感，使得连线报道更顺利。“交通广播”连线报道与主持人的沟通，可以先通过导播沟通，导播在导播间的电脑同屏显示功能可以传达给主持人将要连线报道的情况和交流内容。这样可以充分减少连线报道带来的小错误，从达到良好的播出效果。体现“交通广播”连线报道的可听性。

其次，“交通连线”对记者的素质要求更高。连线报道并不是记者到了现场随便讲几句，以证明自己到过现场，是对记者提出了更高的要求。由于突发事件发生的不可预测性，事先很难做准备。记者没有现成的稿子可念，而必须在现场口头描述自己的所见所闻。连线报道具有即时性、一次性以及不可剪辑的特点。简单来讲，连线报道也是记者口头“撰写”的一则新闻稿，同样必须具备新闻的基本要素。“交通广播”连线报道最重要的就是要有现场感，最简单与最常用的做法是在有背景声的现场直接播报。

记者做“交通广播”连线报道时也并非现场声响越多越好。如果现场非常嘈杂。完全掩盖了记者的声音或是记者需要声嘶力竭地播报是不合适的。“交通广播”连线报道的场地选择也检验着一个广播记者的经验和能力。记者在事件现场不仅要采集声音、观察环境，在相对混乱的状况下找到当事人或是知情者。在各种不利采访因素的干扰下获得有用的信息。在获得一手新闻素材后，还要立即整理这些素材，形成稿子，很快就要用语言生动地作直播报道。这就是广播记者不仅要具备最基本的新闻采访基本功、新闻敏感性、政策理论水平、迅速的文字组织能力。还要具备生动流畅的语言表达能力。连线时口语化的语言。尽量通俗易懂，多用现在进行时态来报道新闻。要做好连线报道，要注意大量细节描述。“交通广播”连线报道，多路记者在繁华地区、路面地势低洼地区、车辆集中地区进行现场报道时，再加上些细节：某地积水已经没过膝盖了。几十人正在水中相扶的通过街道；地道过往车辆进水熄火多少台车了，请驾驶员师傅注意不要再向这个地区行驶了；路人打着伞，身上全被淋湿等细节描述，这样就让听众感同身受了。

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[关键词] 腰-硬联合麻醉；分点法；剖宫产术；硬膜外术后镇痛

[中图分类号] R614 [文献标识码] C[文章编号] 1674-4721（2011）07（b）-075-02

腰-硬联合麻醉（CESA）近年来在剖宫产术中广泛应用，它具有腰麻和硬膜外麻醉的双重特点，起效快，肌松好，阻滞完善，毒性作用小，时间可控，不良反应少[1]等特点，但是传统的腰-硬联合麻醉大多采用一点法，腰麻药用量大，麻醉阻滞范围过广，产妇会快速出现一系列症状如：血压迅速下降超过基础值的30%、心率减慢、呼吸抑制、头昏、恶心、呕吐、晕厥等，给产妇和胎儿带来生命危险。本院近年来改进了传统的CSEA，将一点法CSEA改成了分点法小剂量CSEA，它大大减少一点法CSEA的并发症，使得产妇和胎儿在围生期更安全，现报道如下：

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择2008年11月～2011年1月急诊或择期行剖宫产手术的孕妇200例，年龄20～40岁，ASAⅠ～Ⅱ级，无出凝血疾病，无椎管内麻醉禁忌证。随机分为一点法传统腰-硬联合麻醉组（A组）和分点法改良小剂量腰-硬联合麻醉组（B组），每组各100例。

1.2 麻醉方法

产妇入室后开放上肢静脉，林格液维持，麻醉中连续监测ECG、BP、呼吸、脉搏、SpO2。A组选择L3～4为一点法CESA穿刺点。产妇取侧卧位，用BD型联合穿刺针正入路穿刺，硬膜外穿刺成功后，置入针内腰麻针，见脑脊液回流通畅后缓慢注入重比重液（0.75%布比卡因2 ml加10% GS 1 ml）2.5～3.0 ml，注入完毕后退出腰穿针，经硬膜外腔向头置硬膜外导管3～4 cm备用。B组为分点法，产妇侧卧位，选择L1～2经硬膜外腔向头侧置硬膜外导管3～4 cm固定，然后选择L3～4为腰麻穿刺点，穿刺方法同A组，成功后缓慢注入重比重液（0.75%布比卡因 1 ml加10% GS 0.5 ml）约1.5 ml。两组产妇均在穿刺成功后取仰卧位，根据测试的麻醉平面，调整手术床的位置并控制麻醉平面，当腰麻作用差或手术时间超过1.5 h时，可经硬膜外腔注入2%利多卡因以维持麻醉。术后两组均采用硬膜外自控镇痛。镇痛配方和方法相同。

1.3 观察指标

①麻醉效果，肌松效果；②产妇麻醉前，麻醉后5 min，麻醉平面固定时的ECG、血压、呼吸、脉搏、SpO2及不良反应；③术后硬膜外镇痛（PCEA）效果。麻醉效果分为：优，患者无痛感，腹肌松弛；良，患者无痛感，腹肌稍紧；差，患者有痛感，腹肌紧张；无效，需改用其他麻醉方法。不良反应有头昏、眼花、心慌、恶心、呕吐及麻醉后头痛。

1.4 统计分析

用SPSS 12.0软件包，计量资料采用均数±标准差（x±s）表示，采用t检验。

2 结果

麻醉效果：A组优为100%，B组优为100%，两组差异无统计学意义（P>0.05）。肌松效果：A组优为98%，2例肌松效果良；B组优为97%，3例肌松效果良。两组差异无统计学意义（P>0.05）。对循环影响：两组SBP、DBP有所下降，但A组较B组更明显（P

3 讨论

产科手术的麻醉力求安全、简捷、适应手术需要，因此它除了要满足手术操作的需要，还要考虑到产妇、胎儿的安全。由于围生期孕妇椎管内静脉丛怒张，硬膜外间隙变窄和蛛网膜下腔压力增高，增加了局麻药阻滞范围过广的危险[2]。因腰麻操作简单，效果确切，起效快，术中舒适，肌松良好，故常用于剖宫产术[3]。但腰麻主要不良反应为麻醉后低血压，剖宫产妇尤其突出。如A组腰麻药用量大，麻醉平面过高，机体在短时间内难以代偿血管床容量的迅速增大，易引起血容量相对不足性低血压[4]，因此产妇术中大多会出现低血压、头昏、恶心呕吐等症状。硬膜外穿刺点低，硬膜外术后镇痛药扩散不够，镇痛效果差。且时间长的手术追加局麻药后效果不明显，不能满足手术要求，从而增加了产妇及胎儿分娩过程的不安全因素。B组腰麻用药量只有非孕妇的1/2～2/3，麻醉平面不会过广，且能充分满足手术需要，产妇麻醉后不适感少，心率、血压基本稳定，它选用L1～2硬膜外置管，腰麻穿刺点与硬膜外导管相距远，没有局麻药经穿刺孔渗入到蛛网膜下腔的顾虑，硬膜外可以随时追加局麻药，可控性强、还可用于术后自控镇痛[5-7]。上述结果虽然显示两组麻醉起效均快，镇痛肌松效果佳，但B组对呼吸循环干扰小，麻醉后血流动力学稳定，孕妇术中生命体征平稳，术后硬膜外自控镇痛效果好，术后镇痛药进入蛛网膜下腔的概率比A组更少。它更适合产科手术的麻醉，是一种值得推广的安全可靠的产科麻醉方式。

[参考文献]

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[2]刘俊杰,赵俊.现代麻醉学[M].3版.北京:人民卫生出版社,1998:681-688.

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[4]皋沛.羟乙基淀粉对脊麻剖宫产产妇血流动力学的影响[J].临床麻醉学杂志,2010,26(2):143-144.

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[6]杨壮.腰-硬联合麻醉在妊娠高血压综合征剖宫产手术中的应用[J].广西医学,2010,32(5):576-578.

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1.使用“硝酸戊四醇酯+复方丹参滴丸”预防心绞痛发作

李女士今年54岁，患心绞痛已经5年了。每当到了秋冬季节，她的病情就会频繁地发作。去年夏天，她来我科进行诊治时，我让她同时服用硝酸戊四醇酯和复方丹参滴丸来预防此病的发作。李女士在坚持服用这两种药物一段时间后，心绞痛发作的次数明显地减少了。

硝酸戊四醇脂也叫硝酸季戊脂，属于长效硝酸脂类抗心绞痛药。此药是预防心绞痛复发的首选药，其功效与硝酸甘油相似，但起效缓慢、药效持久。硝酸戊四醇脂的用法是：每次服10―30毫克，每天服3―4次。复方丹参滴丸是由丹参、三七、冰片制成的中成药，具有扩张冠状动脉、增加心肌供血量、增强心肌收缩力的作用。此药比复方丹参片更易被人体吸收，其药效持久，副作用很小，在与硝酸戊四醇脂合用时可起到理想的预防心绞痛复发的作用。复方丹参滴丸的用法是：每次服10粒，每天服3次。除了使用“硝酸戊四醇脂+复方丹参滴丸”进行治疗外，心绞痛患者还可选用“布库洛尔+复方丹参片”、“丁四硝脂+心脉宁”、“消心痛+心血康”等联合用药的方法来预防心绞痛的发作。

2.使用“硝酸甘油+心得安”治疗心绞痛合并心率增快

王先生今年57岁，患心绞痛已经两年了。半个月前，他因天气变冷而诱发了心绞痛，并出现了心率增快的症状，服用硝酸甘油后其病情未能缓解。来我科检查后，我建议他同时服用硝酸甘油和心得安进行治疗。在用药5分钟后，王先生心绞痛和心率增快的症状就得到明显缓解，在20分钟后这些症状就全部消失了。

硝酸甘油属于血管扩张药，具有松弛血管平滑肌、扩张全身血管、减少心脏的前后负荷和心肌的耗氧量、降低左心室的压力、改善心内膜的血液循环等作用。在临床上，此药常用于治疗急性发作的心绞痛。硝酸甘油兼有降压的作用，因此非常适合同时患有高血压的心绞痛患者使用。此药的用法为：每次舌下含服300―500毫克，在用药无效时可每隔30分钟再服药一次。心得安也叫普萘洛尔，属于β-受体阻滞剂，具有良好的减慢心率的作用，其用法为：每次服10毫克，每天服3次。将此药和硝酸甘油联合起来使用，可有效地治疗合并心率增快的心绞痛。除了选用“硝酸甘油+心得安”以外，心绞痛合并心率增快的患者还可选用“心痛定+维拉帕米”、“尼群地平+异搏定”或“洛尔地平+心律平”进行治疗。

3.使用“心可定+安定”治疗心绞痛合并早搏

刘先生今年45岁，患心绞痛已经两年了。不久前，他因工作压力大，精神过度紧张而出现了心绞痛急性发作和早搏的症状，经自服硝苯地平其症状未能缓解。来我院进行检查后，我建议他同时服用硝苯地平和安定进行治疗。在服用这两种药物30分钟后，他的病情明显好转。在用药1个小时后，他的临床症状就全部消失了。

心可定也叫双苯丙胺，是治疗心绞痛合并快速型心律失常（如早搏、心动过速等）的首选药。此药具有抑制心肌的收缩力、松弛血管平滑肌、增加冠状动脉的血流量、降低冠状动脉的耗氧量、促进侧支循环形成等作用。在临床上，此药主要用于治疗心绞痛，尤其在治疗伴有早搏、室性心动过速的心绞痛时效果最佳。心可定的用法是：每次服15―30毫克，每天服3次（在症状缓解后可改为每次服15毫克，每天服2―3次）。安定属于苯二氮卓类镇静剂，具有抗焦虑、镇静的作用，是缓解精神紧张的首选药。此药的用法是：每次服2.5―5毫克，每天服3次或在睡前服1次。将此药与心可定联合起来使用，可有效治疗因精神紧张而诱发的早搏和心绞痛。除了使用“心可定+安定”进行治疗以外，合并早搏的心绞痛患者还可选用“香豆丁心安+苯巴比妥”、“双环己哌啶+利眠宁”、“尤心利安+安宁”进行治疗。

4.有咳嗽、咳痰症状的心绞痛患者可联合使用“硝酸甘油+毛冬青”进行治疗

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关键词 寡核苷酸； 药代动力学； 定量； 核酸杂交； 酶联桥接分析系统

1 引 言

反义（Antisense，AS）寡核苷酸（Oligodeoxynucleotide，ODN）、免疫刺激基序（CpG）ODN等分子，在抗肿瘤、抗病毒治疗等基因治疗领域中占据重要地位。迄今，ASODN与CpG ODN类药物经美国FDA批准上市，已有多种该类药物处于临床前和临床试验阶段\。

目前，生物样品中ODN药物的定量分析方法最为成熟，其中应用最多的是非放射性同位素标记定量分析方法， 包括毛细管电泳（Capillary electrophoresis， CE）和高效液相色谱法（High performance liquid chromatography， HPLC）。CE方法对于ODN的检测具有高分辨率、可分辨相差一个核苷酸的ODN，其在血浆基质中对ODN的最低定量限（Lower limit of quantification， LLOQ）约在70 g/L（约12 nmol/L）\水平。本课题组曾利用改良的毛细管非胶筛分电泳方法对硫代修饰ASODN进行药代动力学研究\，可描述5 mg/kg以上剂量给药后猕猴的血浆动力学行为，但该方法对于末端消除相数据的获得不甚理想，对于更低剂量下（如1 mg/kg）给药后的药时曲线描述更是无能为力。HPLC方法的分辨率和灵敏度与CE方法相比略低。目前ODN类药物通常在较低剂量下（≤1 mg/kg \）给药即能发挥药效，这对定量分析方法学的灵敏度提出越来越高的要求。上述方法的灵敏度难以达到对ODN在血浆和组织中药代动力学（Pharmacokinetics，PK）终末消除相的定量能力（浓度通常低于10 nmol/L） \。此外，上述两种主流分析方法还有一个共同的缺陷，即样品前处理过程相当复杂，绝对回收率低，分析周期长、成本高，应用受限\。

核酸分子杂交的酶联桥接（Enzymelinked bridging assay，ELBA）法基于核酸杂交原理，利用一个锚定的、3′端与待测反义寡核苷酸（Test ODN）序列互补的俘获探针俘获生物基质中的Test ODN，再通过连接酶将检测探针（序列与俘获探针5′端互补，3′端偶联酶标显色系统）与上述核酸杂交复合物相连，建立桥接体系。S1核酸内切酶是单链特异性的核酸内切酶，可以降解双链核酸中的单链或缺口处切割双链 DNA，在上述桥接体系中，可以通过酶切将不能与检测探针连接从而构成完整双链的差减ODN序列（即ODN的降解产物，其3′端与检测探针5′端之间有1个以上的碱基缺口）去除，以保证桥接系统的序列长度特异性。最终利用检测探针3′端偶联的酶标显色系统，对Test ODN原形进行定量。酶联桥接分析系统的的原理如图1所示。该方法在灵敏度、特异性以及适用性上均较传统的定量分析方法具有优势\，因此，基于核酸杂交的ELBA系统在寡核酸类药物PK研究中具有巨大的应用前景。本研究对所建立ELBA系统中的诸多条件，包括亲和素包被、俘获探针与检测探针浓度比、T4连接酶及S1核酸酶用量、生物基质效应、稀释效应以及显色系统等进行了细致的优化，使系统更具稳定性与通用性。

图1 酶联桥接分析系统的原理

Fig．1 Principle of enzymelinked bridging assay （ELBA）

2 实验部分

2.1 仪器与试剂

HeraeusBB5060培养箱（上海贺利氏公司）；超纯水系统（美国MILLIPORE公司）；微量振荡器（国华电器有限公司）；微量加样器（美国Gilson公司）；电热恒温水浴锅（北京长风公司）；MK 3酶标仪（德国Thermo公司）。

链霉亲和素（Streptavidin，SA, Promega公司）；链霉亲和素包被酶标板（StreptavidinCoated 96well plate, Cayman Chemical公司）；T4 DNA 连接酶（NEB公司）；S1核酸酶（Invitrogen公司）；酶标抗地高辛抗体（Antidigoxigeninalkaline Phosphatase，ADAP, Roche公司）；中性亲和素包被的酶标板（ReactiBind NeutrAvidin Coated），封闭液（SuperBlock Blocking buffer）和显色液（pNitrophenyl phosphate，PNPP）均购自Pierce公司。

本研究中采用ODN及其核酸探针由上海生工生物工程技术服务有限公司合成，其序列结构见表1。其它生化试剂：TrisHCl, HCl, Na2HPO4，NaCl, NaHCO3, Tween20, EDTA和曲拉通等均为分析纯试剂。

L，加入反应孔中，18 ℃过夜连接。洗涤后加入一定酶活单位的S1核酸内切酶，37 ℃酶切1.5 h后洗板。

2.2.3 显色反应 封闭液在37 ℃反应30 min后，加入酶标抗体（1∶1500稀释于2%牛血清白蛋白中），室温振荡反应30 min。洗涤后加入新鲜配制PNPP显色液，37 ℃反应15～30 min。加入2 mol/L NaOH终止，用酶标仪检测405/630 nm处光吸收值（Optical density，OD）值。

2.3 实验条件的优化

2.3.1 亲和素包被的条件选择 100 nmol/L Test ODN经二次蒸馏水（ddH2O）倍比稀释至0.39 nmol/L，随行零对照，各浓度复孔，重复3次。考察了4种亲和素包被条件对灵敏度和响应值的影响：（1）Pierce公司中性亲和素包被酶标板；（2） CAYMAN CHEMICAL公司链霉亲和素包被酶标板；（3） 链霉亲和素25 mg/L和50 mg/L包被的96孔板（包被缓冲液：15 mmol/L Na2CO3，35 mmol/L NaHCO3，pH 9.6）。

2.3.2 优化探针浓度 从两个角度优化俘获探针和检测探针浓度: （1）Test ODN浓度为5 nmol/L时，考察俘获探针在100 nmol/L条件下，不同浓度（50，75，100，150和200 nmol/L）检测探针对应OD值变化曲线，反之考察俘获探针的最优浓度。（2）倍比稀释12.5 nmol/L Test ODN至0.78 nmol/L，检测探针与俘获探针比例分别为150∶100，150∶150 和 150∶200对方法线性的影响。

2.3.3 优化PNPP显色时间 猕猴血浆倍比稀释12.50 nmol/L Test ODN至0.39 nmol/L，按照优化后的反应条件，考察PNPP显色步骤中不同显色时间（15， 20和30 min）对定量曲线线性的影响。

2.3.4 S1酶用量的优化 猕猴血浆倍比稀释 Test ODN 12.50 nmol/L至0.39 nmol/L，加零对照，考察S1酶不同加入量（5，10，20，40，80和100 U/孔）对线性的影响。

2.4 生物基质的影响

分别以猕猴全血浆和ddH2O为基质倍比稀释12.5 nmol/L Test ODN至0.39 nmol/

L，并将另行配制的两份同浓度的血浆样品稀释1倍和10倍，对比考察生物基质对检测结果的影响。

2.5 利用ELBA和CE方法对猕猴体内低剂量给药PK研究

4只猕猴单次静脉滴注（v.d.）1 mg/kg Test ODN，30 min内恒速静脉滴注完毕，分别于给药前（0 min）以及滴注开始后0.2，0.3，0.5，0.35，0.75，1.0，1.25，1.5，2.0，2.5，3.0，4.0，6.0 和8.0 h，在给药部位对侧后肢静脉取血，血样均用EDTAK2抗凝管采集，3000 g 离心收集血浆样品于80 ℃保存待测。ELBA对样品测定时同板随行标线和质控样品，根据标线对生物样品中 Test ODN进行定量分析。

CE定量的样品前处理和测定方法参见文献\。单次静脉滴注5 mg/kg Test ODN，给药方式和血样采集同ELBA方法。

血浆样品中对Test ODN 原形、3′N1和5′N1降解产物进行12.5 nmol/L至0.39 nmol/L的倍比稀释，通过计算交叉反应性确定该方法针对原形药物测定的特异性，计算公式为：降解产物的半数效应浓度（EC50）/Test ODN 原形的半数效应浓度（EC50）。

2.6 数据处理

用EXCEL2007对所得数据进行整理并用ORIGIN 5.0对整理后数据进行拟合作图，药代动力学参数使用WinNonlin进行计算。3 结果与讨论

3.1 实验条件优化

3.1.1 不同包被条件对定量范围的影响

链霉亲和素包被酶标板（CAYMAN CHEMICAL公司）与自制两种链霉亲和素包被量的酶标板反应性能相同，在10 ～100 nmol/L较高浓度范围可呈良好线性，提示增加链霉亲和素包被量并不能提高灵敏度。与链霉亲和素包被相比，中性亲和素包被酶标板（Pierce公司）本底较低，灵敏度高；在0.5 ～7.5 nmol/L可呈线性递增趋势（图2A）。中性亲和素和链霉亲和素分子量相同，均可与生物素结合，但是前者与生物素结合时非特异性结合最低，可以大大提高特异性和灵敏度。本研究以建立高灵敏度的定量分析方法为目标，选择Pierce公司中性亲和素包被的酶标板进行后续实验。

3.1.2 优化探针浓度 固定 Test ODN浓度为5 nmol/L，检测探针浓度为100 nmol/L的条件下，俘获探针在100 nmol/L 以下信号值与浓度呈明显正相关，大于100 nmol/L呈饱和趋势，同样在固定 Test ODN为5 nmol/L，俘获探针在100 nmol/L的条件下，检测探针浓度在100 nmol/L以下信号值与浓度呈明显正相关，到达100 nmol/L后呈饱和趋势（图2B）。俘获探针与检测探针的不同浓度比例对该方法定量范围的影响结果表明，当两者比例为2∶3时， Test ODN浓度在0.78 ～12.5 nmol/L范围内与响应值呈正相关关系，且响应值较高（图2C）。

图2 实验条件的优化

Fig．2 Optimization of experiment conditions

A． 不同包被条件对响应值的影响 （Effect of different coating conditions on response）; B． 俘获探针和检测探针浓度的优化 （Optimization of concentrations of capture probe and detection probe）; C． 俘获探针和检测探针最佳比例 （Optimization of concentration ratio of capture probe and detection probe; D. PNPP显色时间的优化（Optimization of pnitrophenyl phosphate （PNPP） coloration time）。

3.1.3 优化PNPP显色时间 PNPP显色时间延长可以增强各浓度标准品下的信号强度，但是对标准曲线的线性影响较大，因此检测中将显色时间定为15 min（图2D）。

3.1.4 优化S1酶用量 S1 核酸酶的用量是影响所建方法的线性范围和特异性（原形和降解产物的区分）的关键因素。S1酶用量过少不能完全去除单链检测探针以及降解产物引起的背景信号，过多则会对结合的双链杂交分子非特异降解，原形ODN的信号值下降明显，且线性较差。根据优化结果，本研究在Test ODN在40 U/孔的酶量下，可以获得最优线性范围（图3），并具有良好的特异性，能区分原形和降解产物。S1酶对3′N1降解产物的作用更为特异，交叉反应性＜10%，对5′N1降解产物的交叉反应性＜25%（图4），而生物体内ODN的大部分降解产物均由3′外切核酸酶产生ODN，即以3′端降解产物为主。

图3 S1酶用量的优化

Fig．3 Optimization of S1 nuclease amount

图4 Test ODN原形与其3′N1 和5′N1降解产物的区分

Fig．4 Distinction between parent ODN and its 3′N1 and 5′N1degradation products

3.2 生物基质对定量分析的影响

生物样品中定量分析的难点在于生物基质的干扰效应，常规解决办法是对样品进行适当稀释以降低信噪比，提高响应值。本研究发现，低浓度生物样品进行稀释处理会导致灵敏度下降无法检测，与以ddH2O为基质相比，100%猕猴血浆中同浓度 Test ODN的响应值并未受到影响（图5），证明ELBA方法不受血浆基质干扰，反义寡核苷酸血浆样品不需任何样品前处理可直接应用ELBA方法进行定量分析。

3.3 方法学确证

3.3.1 定量范围、精密度、准确度 猕猴血浆中配制标准品（12.5， 6.25，3.13，1.56，0.78，0.39，0.20和0.10 nmol/L）制备标准曲线，批间重复5次。随行配制高（5 nmol/L）、中（0.50 nmol/L）、低（0.15 nmol/L）质控样品考察精密度和准确度。ELBA方法对Test ODN在猕猴血浆中的定量范围为0.10～6.25 nmol/L（R2＞0.99）（图6），较CE方法的灵敏度提高了近1000倍。 5批样品的批内和批间质控样品测定结

图5 生物基质对ODN定量分析的影响

Fig．5 Effect of biological matrix on quantitative analysis of ODN

图6 血浆中Test ODN定量标准曲线

Fig．6 Standard curve of quantification of Test ODN in plasma by ELBA

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关键词：供电分区、分界点开关、联络开关、分界点、备自投装置

1．中压供电网络系统概述

中压供电网络是城市轨道交通供电系统的重要组成内容，由中压电缆构成，将主变电所或电源开闭所和牵引、降压变电所联系起来，用于输送和分配电能，在供电系统起着桥梁和纽带的作用。中压供电网络的设计涉及到外部电源方案、主变电所或电源开闭所的位置与数量、牵引、降压变电所的数量与主接线、 中压供电网络系统运行方式和变电所开关的联锁关系。

中压供电网络系统有两种属性，其一为电压等级，其二为构成形式。

我国中压电压等级基本为三种，即66kV、35kV和10kV，不同电压等级构成的中压供电网络均存在多种形式，如开式结线和闭式结线等。对于城市轨道交通两种中压等级在供电网络中同时存在时，又可形成牵引供电网络和动力照明供电网络，如上海地铁一号线工程。供电网络中为一种电压等级时，一般为牵引动力照明混合供电网络，如北京地铁工程。

2．双环网供电网络

环网供电方式属于闭式结线，可分为开环和闭环方式。由于闭环方式继电保护整定困难，因此环网供电方式基本为开环方式运行。在开环方式中，又可分为“单线单环”、“双线单环”和“双线双环”的形式。城市轨道交通中“双线双环”即双环网的一种接线形式见图1。

图中K1～K4为电源开闭所供电分区间分界点开关，在运行方式分析中也称为联络开关。

双环网相对于开式结线的放射式供电能使供电线路简化、减少线路走廊、运行方式灵活，但联锁关系和继电保护整定复杂。

3．轨道交通双环网的运行方式

由于供电系统在轨道交通运行中的重要性，中压供电网络的设计需要满足故障自救功能和防止误操作的功能等要求。采用双环网接线，在故障运行方式下通过改变分界点开关的状态，保障故障区段供电的连续性。在应急运行方式时，通过调整分界点开关的位置，可改变主变电所或电源开闭所供电区的划分，可满足轨道交通继续运行的要求。双环网接线可灵活实现各种运行方式的转换。

通过设置各种联锁关系，可防止各种运行方式下的误操作，使系统安全可靠运行。

3．1变电所主接线形式

城市轨道交通一般有以下几种变电所类型：主变电所或电源开闭所、牵引变电所或牵引降压混合变电所、降压变电所或跟随式降压变电所等。在下文中以电源开闭所、牵引变电所、降压变电所为分析对象。

各变电所主接线形式如下：

电源开闭所为单母线分段接线形式，设母线分段开关，母线分段开关设有备用电源自动投入装置，具有“失压自投、过流闭锁”功能。

牵引变电所为单母线分段接线形式，设母线分段开关，母线分段开关设有“失压自投、过流闭锁”功能。也可不设母线分段开关，下文将分别讨论。牵引变压器集中设于一段母线上。

降压变电所为单母线分段接线方式，不设母线分段开关。配电变压器分别设于两段母线上。

变电所各进线开关、馈线开关、联络开关、母线分段开关均采用断路器。变电所低压配电系统均为单母线分段接线，设母线分段开关，并具有“失压自投、过流闭锁”功能，此功能可采用PLC装置实现。

3．2中压系统备用电源自动投入装置的工作原理

中压系统保护采用微机保护装置，母线PT、线路PT或配电变压器二次侧的电压信号均引入备自投装置，共同作为判别电源线路是否有电的条件，当两路引入线电源发生任一单电源故障，变电所进线线路失压，经备自投装置判别，确定非过流、零序等故障状态后，由备自投装置对进线开关和母线分段开关实施“失压自投、过流闭锁”的控制过程，由另一路中压电源供给变电所全部一、二级负荷。由正常运行方式转为故障运行方式。

当单电源故障发生在开闭所时，通过对开闭所和下级变电所的母线分段开关自投时间的适当整定，保证只有开闭所的分段开关将进行“失压自投、过流闭锁”的控制过程，由另一路中压电源供给供电区内全部负荷。

备自投装置的状态可分为启动状态、投入状态和退出（闭锁）状态。当两个电源电压正常，且进线开关均处于合闸状态时，备自投装置处于启动状态。当具备备自投装置投入条件时，备自投装置进入投入状态，完成开关的转换过程后，备自投装置为退出状态。当进线开关非失压跳闸，如故障跳闸或手动操作分闸，装置被闭锁，处于退出状态。

3．3运行方式分类

轨道交通中压供电网络的运行方式分为三种：正常运行方式、故障运行方式和应急运行方式。

正常运行方式是系统在正常电源条件、线路条件和设备条件下的运行方式。

故障运行方式是上述三个条件中任一个出现一个故障情况下的运行方式，如一个电源故障或一条线路故障或一台设备故障。

应急运行方式是上述三个条件中任一个出现两个故障情况下的运行。

3．4运行方式分析

3．4．1正常运行方式（见图1）

电源开闭所由城市电网引入两路中压电源，并供给开闭所供电范围内的车站变电所。正常运行时两个电源同时供电，分列运行，开闭所两个进线开关为合闸状态，母线分段开关为分闸状态，备自投装置处于启动状态。

2＃和4＃变电所的联络开关K1～K4为分闸状态。1＃开闭所除承担本身负荷外，还提供1＃、2＃变电所负荷。2＃开闭所除承担本身负荷外，还提供3＃、4＃变电所负荷。

3．4．2故障运行方式：（见图1）分析电源（电缆）的故障情况，开关设备的故障本文中不做讨论。

（1）开闭所单电源故障运行方式

当开闭所引入的一路电源或电缆故障，造成开闭所一路进线电源失压，经备自投装置判别，确定非过流、零序等故障状态后，由备自投装置对进线开关和母线分段开关实施“失压自投、过流闭锁”的控制过程，由另一路电源供给开闭所的全部一、二级负荷。此时开闭所电源失压的进线开关为分闸状态、另一路进线开关和母线分段开关为合闸状态，备自投为退出状态。开闭所供电分区内各变电所的开关状态没有变化，即进线开关为合闸状态，母线分段开关为分闸状态，联络开关为分闸状态。

（2）降压变电所单电源故障运行方式

当降压变电所如1＃变电所引入的一路电源或电缆故障，1＃开闭所相应馈出线开关为分闸，造成1＃变电所一路进线电源失压。由于降压变电所中压系统没有设置母线分段开关，也没有备自投装置，而低压配电系统设有母线分段开关。低压进线开关和母线分段开关具有“失压自投、过流闭锁”功能，此时中压系统开关状态不变，电力调度遥控使失压进线开关分闸，将故障段切除。低压配电系统电源失压的进线开关为分闸状态、另一路进线开关和母线分段开关为合闸状态，一路中压电源和一台配电变压器提供降压变电所的全部一、二级负荷。

（3）牵引变电所单电源故障运行方式

当牵引变电所如2＃变电所引入的一路电源或电缆故障，1＃开闭所相应馈出线开关为分闸，造成2＃变电所一路进线电源失压。

当牵引变电所设有母线分段开关和备自投装置时，经备自投装置判别，确定非过流、零序等故障状态后，由备自投装置对进线开关和母线分段开关实施“失压自投、过流闭锁”的控制过程，由另一路电源供给牵引变电所的全部一、二级负荷。此时电源失压的进线开关为分闸状态、另一路进线开关和母线分段开关为合闸状态，备自投为退出状态。

当牵引变电所不设母线分段开关和备自投装置时，若失压母线为I段，则低压配电系统实施“失压自投、过流闭锁”的控制过程，电源失压的低压进线开关为分闸状态、另一路进线开关和母线分段开关为合闸状态。一路中压电源承担牵引变电所牵引负荷和动力照明一、二级负荷。

若失压母线为II段，连接在该段母线上的两台牵引变压器和一台配电变压器将失电。当确认非过流、零序等故障状态后，可进行倒闸操作，恢复对失压母线的供电。由于倒闸操作过程的时间级为“分钟”级，而低压配电系统实施“失压自投、过流闭锁”的控制过程为“秒”级，因此在倒闸操作过程中低压配电系统已恢复对动力照明一、二级负荷的供电；牵引供电系统通过本牵引变电所直流母线使相邻两个牵引变电所构成大双边供电。

变电所为无人值守时，电力调度远方倒闸操作分为停电操作过程和送电操作过程。手动操作两台牵引变压器中压开关分别分闸；操作配电变压器中压开关分闸；然后操作II段母线进线开关分闸并确认，此时停电操作过程结束。进行送电操作过程，操作联络开关K2合闸并确认，分别操作各变压器中压开关合闸。

此时II段母线进线开关断开，K2联络开关闭合；I段进线开关闭合，K1联络开关断开。再次明确此时没有设置母线分段开关和备自投装置，不存在误操作母线分段开关造成电源合环问题。

3．4．3应急运行方式（见图2）

（1）开闭所双电源故障应急运行方式

城市电网提供开闭所的两路电源中一路电源或线路故障后，另一路再次发生故障时，两路电源均失压。经“秒”级延时后，备自投装置向母线分段开关和电源失压的进线开关分别发出跳闸命令。开关分闸后，备自投装置处于退出状态。

北京城市铁路工程参考各方面的意见，采用的是第二路电源也失电时，开关的状态维持一路电源失压后的情况，即一路电源的进线开关为分闸，另一路的进线开关和母线分段开关为合闸。方便之处在于外电源波动造成失压的快速恢复供电。鉴于轨道交通工程供电为自成系统，系统本身具有故障自救功能，外电源故障对系统的影响可通过系统本身的自动或手动操作恢复系统故障区段的供电，此时应断开与外部电源的联系。因此在开闭所双电源或双线路故障时，进线开关和母线分段开关均分闸。

若正常运行时，发生双电源同时故障造成进线失压，经“秒”级延时后，备自投装置向两台进线开关同时发出跳闸命令，不向母线分段开关发命令，母线分段开关仍保持正常分闸位置。

经上述分析可知，开闭所双电源故障无论同时发生，还是不同时发生，开闭所的进线开关、母线分段开关均处于断开位置，且母线分段开关的合闸回路被进线开关闭锁，备自投装置为退出状态。开闭所承担的供电分区全部失电。

根据《地铁设计规范》的要求，地铁用电设备负荷等级为一级，两个电源供电即满足供电要求，由于城市轨道交通已成为老百姓上班、出行的重要交通工具，是解决城市道路交通拥堵的重要手段。城市轨道交通的重要性决定了供电系统的可靠性非常重要，一旦停电造成停运，将造成较大的经济损失和较坏的社会影响。因此轨道交通供电系统的中压供电网络设置了电源联络线。

在这种故障应急运行方式下，通过倒闸操作改变原有供电分区的划分，利用中压供电网络设置的联络开关，由相邻供电区提供电源。为避免电源合环，需要重新设置分界点，本文推荐开环点设于开闭所，根据两侧供电区的负荷大小，将开闭所列入负荷较小的供电区，原开闭所的馈线开关成为新的分界点开关。

如图2所示，假设1＃开闭所正常运行承担的负荷，小于3＃开闭所承担的负荷。当2＃电源开闭所引自城网电源的两个进线电源全部故障，其进线开关和母线分段开关全部断开，引至4＃变电所的馈出开关K3’和K4’被进线开关联跳（或电力调度遥控分闸）并闭锁（当任一进线开关合闸时，闭锁关系解除）。

此时电力调度（或变电所控制室人员）解除2＃变电所的两络开关K1、K2与本变电所进线开关的“软联锁”，经调度令就地手动或遥控操作合闸（保护整定躲过励磁涌流），两路中压电源由2＃变电所两段母线引至3＃变电所，并再至2＃开闭所，使故障区段的3＃变电所、2＃开闭所恢复供电故障；同理解除4＃变电所的两络开关K3、K4与本变电所进线开关的“软联锁”，经调度令就地手动或遥控操作合闸，两路中压电源由5＃变电所两段母线引至4＃变电所，使故障区段的4＃变电所恢复供电。故障供电区均得到两路联络电源。

此时供电分区进行了重新划分，1＃开闭所负责为1＃变电所～2＃开闭所共5座变电所一二级负荷的供电；3＃开闭所负责为4＃变电所～6＃变电所共4座变电所一二级负荷的供电。当高峰小时负荷超出开闭所的供电能力或中压供电网络的电压损失7％要求时，可结合运营组织方案限制高峰小时列车密度。

（2）降压变电所双电源故障应急运行方式

以附图2中2＃降压变电所和5＃变电所分别进行分析。

降压变电所没有设置母线分段开关和备自投装置，当1＃开闭所提供给2＃变电所的两路电源失电后，经电力调度令或电力调度遥控将2＃变电所进线开关分闸，同时也解除了联络开关K1、K2与进线开关的联锁。依次手动遥控使联络开关合闸，两路中压电源由3＃变电所两段母线引至2＃变电所，使故障区段的2＃变电所恢复供电。开闭所供电分区进行重新划分，2＃变电所原进线开关为新的分界点开关。

当3＃开闭所提供给5＃变电所的两路电源失电后，经电力调度令或电力调度遥控将5＃变电所进线开关分闸。电力调度解除4＃变电所进线开关和联络开关K3、K4的联锁，依次手动遥控使联络开关合闸，两路中压电源由4＃变电所两段母线引至5＃变电所，使故障区段的5＃变电所恢复供电。开闭所供电分区进行重新划分，5＃变电所原进线开关为新的分界点开关。

（3）牵引变电所双电源故障应急运行方式

以附图2中3＃降压变电所和4＃变电所分别进行分析。

2＃开闭所提供给3＃变电所的两路电源线路故障，变电所的进线开关将由于电源失压而全部跳闸，母线分段开关也处于分闸位置，备自投装置处于退出状态。电力调度解除2＃变电所进线开关和联络开关K1、K2的联锁，依次手动遥控使联络开关合闸，两路中压电源由2＃变电所两段母线引至3＃变电所，使故障区段的3＃变电所恢复供电。开闭所供电分区进行重新划分，3＃变电所原进线开关为新的分界点开关。

2＃开闭所提供给4＃变电所的两路电源线路故障，变电所的进线开关将由于电源失压而全部跳闸，母线分段开关也处于分闸位置，备自投装置处于退出状态。由于进线开关已分闸同时也解除了进线开关对联络开关K3、K4的联锁。依次手动遥控使联络开关合闸，两路中压电源由5＃变电所两段母线引至4＃变电所，使故障区段的4＃变电所恢复供电。开闭所供电分区进行重新划分，4＃变电所原进线开关为新的分界点开关，并被联络开关联锁，不能合闸防止电源合环。

3．4．4故障、应急运行方式分析小结

单电源、电缆故障发生后，电源侧馈出开关跳闸，负荷侧进线开关失压跳闸或通过调度方式断开进线开关（降压变电所），将故障点从系统中切除。开闭所、牵引变电所的中压母线分段开关和降压变电所的低压母线分段开关通过自动投入，由单电源承担供电范围内的全部一二级负荷。

双电源、电缆故障发生后，负荷侧进线开关失压跳闸或通过调度方式断开进线开关（降压变电所），将故障点从系统中切除。电力调度解除供电区分界点变电所进线开关和联络开关的软联锁，使失电的变电所恢复供电，供电区进行了重新划分。

3．5联锁、联跳关系

为了保证供电系统可靠的运行和运营维护人员操作的安全，必须设置必要的联锁关系。

3．5．1成套开关设备每一个单元的联锁关系即“五防”要求。

（1） 防止带负荷分、合隔离开关（隔离插头）

（2） 防止接地开关处于闭合位置时关合断路器、负荷开关

（3） 防止带电时误合接地开关

（4） 防止误入带电隔室

（5） 防止误分、误合断路器、负荷开关

对于手车式开关设备还有其他相关要求，在此不再一一列出。

3．5．2成套开关设备相关单元的联锁关系

（1） 进线开关柜与相邻隔离手车柜、计量柜等的联锁。只有当进线开关处于分闸位置时，上述的隔离手车、计量柜手车才可以抽出或插入。

（2） 母线分段开关柜与母线分段提升柜之间须设联锁关系。只有当母线分段开关处于分闸位置时，母线分段提升柜隔离手车才可以抽出或插入。

3．5．3系统运行的联锁关系（见图2）

（1）电源开闭所进线开关与母线分段开关之间的联锁关系

电源开闭所设有母线分段开关和备自投装置，从运行方式的分析可知，当正常运行和单电源或线路故障时，两进线开关和母线分段开关的闭合关系，满足“3合2”的条件，即进线开关和母线分段开关不能同时合闸，避免电源合环或向故障点返送电源。

在应急运行方式时，两进线开关失压分闸时，也应同时闭锁母线分段开关合闸，造成联络电源合环。也就是说系统运行中，两台进线开关的位置状态一致时，母线分段开关不能操作合闸。

（2）牵引变电所进线开关与母线分段开关之间的联锁关系

牵引变电所也设有母线分段开关和备自投装置，从运行方式的分析可知，当正常运行和单电源或线路故障时，两进线开关和母线分段开关的闭合关系，满足“3合2”的条件，即进线开关和母线分段开关不能同时合闸，避免电源合环或向故障点返送电源。

在应急运行方式时，有三种情况，2＃开闭所、2＃变电所和3＃变电所分别发生进线双电源故障，这三种情况下3＃变电所进线开关分别为都闭合和都断开状态，而且母线分段开关都不能进行合闸操作，避免造成联络电源合环。也就是说系统运行中，两台进线开关的位置状态一致时，母线分段开关不能操作合闸。

（3）降压变电所进线开关与母线分段开关之间的联锁关系

由于降压变电所没有设置母线分段开关，没有相应的联锁关系。

（4）进线开关与联络开关之间的联锁关系

这种联锁关系只发生在供电分区分界点的变电所，见附图2中的2＃变电所、4＃变电所和6＃变电所。变电所的两进线开关和联络开关之间，在正常运行方式下设有联锁条件，任一进线开关处在合闸位置，联络开关不能合闸。单电源故障运行方式下，不会解除联锁关系条件。

在应急运行方式下，根据前面的分析，有三种情况将操作联络开关合闸。开闭所、本变电所和与本变电所相邻的另一供电分区的变电所发生进线双电源故障。对于附图2中的2＃变电所的K1、K2联络开关，当1＃和2＃开闭所；2＃变电所、3＃变电所发生进线双电源故障时，均需要联络开关合闸，使故障区段恢复供电。除本变电所发生上述故障，进线开关和联络开关为不同时合闸外，其他应急运行情况下，两者需要同时闭合。

通过电力监控系统软件功能，设置软联锁即“软压板”与联锁条件并联，正常运行、故障运行方式和本变电所双电源故障应急运行时“软压板”为断开，联锁条件起作用。在其他应急运行情况下，电力调度操作“软压板”闭合，解除联锁条件。

（5）进线开关与环网馈线开关的联跳及联锁

在正常运行和单电源故障运行情况下，进线开关和环网馈线开关不需要联锁条件。但在双电源故障应急运行方式下，由于供电分区重新划分，出现了新的供电分界开关，而误操作此分界开关，将造成联络电源合环或向故障点返送电源。按照前面运行方式的分析，在应急运行方式时，供电分区新的分界点设在双电源出现问题的变电所或开闭所。

对于降压变电所或牵引变电所，新的分界点开关为原进线开关，环网馈线开关成为应急运行方式下的进线开关，此时误合原进线开关将向故障点返送电源。如果考虑设置联锁条件，将涉及全线所有变电所，且将对正常运行操作产生较大影响。将故障率等情况综合考虑，建议不设置联锁关系，通过加强应急运行情况下的操作管理，制定严格的操作制度来限制此种误操作的发生。

如果一定要设置联锁条件，采用软联锁方式。在电力监控系统软件编制时，变电所综合自动化系统按照运行方式进行编制，在变电所处于不同的运行方式时，顺序发出相应联锁或解除联锁的命令。

对于开闭所，见附图2以2＃开闭所为例，因为开闭所双电源故障后，进线开关在应急运行方式的供电网络中没有作用，分界点开关为原环网馈线开关如K3’、K4’。但进线开关和K3’、K4’两者的状态有密切的关系，为同时闭合或同时断开，同时闭合出现在开闭所正常或单电源故障运行方式，为开闭所供电分区提供电源；同时断开出现在应急运行方式，进线开关断开切除与城市电网的联系，避免向故障点返送电源，K3’、K4’断开为了避免使联络电源合环。

因此在运行时当任一进线开关合闸时，K3’、K4’开关可进行操作或处于合闸状态，当两台进线开关均为分闸时，联跳K3’、K4’开关分闸，并将其合闸回路闭锁。

4．应用于城市轨道交通的双环网接线方案在系统的灵活性、稳定性方面有一定的优点，也存在联锁关系较为复杂、倒闸操作时间长等缺点。本文尚没有工程应用的支持，仅供同行参考。